REALIZACION DE FROTIS SANGUINEO
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REALIZACION DEFROTIS SANGUINEO
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INTRODUCCIÓN
Se define como frote, frotis o extendido, a la preparación microscópica delgada ytransparente, extendida entre dos cristales (porta o cubreobjetos), obtenida de un líquido
orgánico espeso o tejido semilíquido o pastoso (sangre, aspirados, secreciones,
exudados, etc.)
El frote perifrico se utili!a para el estudio de las características citológicas de las clulas
de la sangre, lo cual permite "alorar el funcionamiento general de la mdula ósea a tra"s
de sus componentes celulares, lo cual implica la e"aluación de las líneas eritrocíticas,
leucocitaria y megacariocítica, determinando anormalidades en forma, tama#o, color e
inclusiones citoplasmáticas, dando una medida cuantitati"a y cualitati"a de los elementos
que lo conforman.
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OBJETIVOS
Realizar frotis san!"neos
Realizar las tin#iones $e%atol&i#as #orrientesFa%iliarizarse #on el %aterial 'e la(oratorio ) a*ren'er s! %ani*!la#i&n *aral!eo *o'er realizar #orre#ta%ente los 'iferentes *asos *ara !n frotissan!"neo+E,al!ar las #ara#ter"sti#as %orfol&i#a 'e las #-l!las san!ineas
.ARCO TEÓRICO
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$rotis sanguíneo% es la extensión de sangre reali!ada sobre un portaobjeto y a partir de la
cual se obser"arán, al microscopio, las características de las clulas sanguíneas.
&sos% Es un análisis rutinario que acompa#a a todo 'emograma, ya sea en forma manualo automati!ado. En este ltimo caso, cuando 'ay normalidad en todos los elementos
sanguíneos, se obtienen los datos gráficamente y es opcional "erificarlo, esto dependerá
de cada laboratorio.
Este preparado entrega "aliosa información en casos como las leucemias, deficiencias de
'ierro, trastornos genticos de la forma de los eritrocitos, posibles deficiencias de "itamina
*+.
Realiza#i&n Frotis san!"neo
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abitualmente ste se reali!a al momento de tomar el 'emograma al paciente. En
algunos laboratorios prefieren que ste sea 'ec'o por personal capacitado y lo reali!an al
recibir la muestra. Esto estará relacionado con el tiempo de traslado del 'emograma al
laboratorio- ya que si es menor a dos 'oras la calidad de un frotis se conser"a, pero si es
mayor puede empe!ar a adulterarse el estado de las clulas. En laboratorios de países
desarrollados y sólo en algunos laboratorios de 'ile existen equipos automati!ados quereali!an los frotis y esto implica disminuir el riesgo de la manipulación y aumentar las
medidas de bioseguridad.
INSU.OS / E0UI1OS RE0UERIDOS
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1izetas #on a!a 'estila'a• Toalla 'e *a*el
T!(os #on %!estras 'e sanre #on EDTADos *ortao(2etos+Un #!(reo(2etos+G!antes ) (ata+
• /.i#ros#o*io 'e la(oratorio+ .
• /Tin#i&n #on #olorante Gie%sa 3for%a'o *or !na %ez#la 'e eosina4 az!l%etileno ) az!res en sol!#i&n a#!osa5+
• /A!a 'estila'a
1ROCEDI.IENTO DE 1RE1ARACIÓN DE FROTIS DE SANGRE
1RINCI1IO
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Se e6tien'e !na ota 'e sanre so(re !n *ortao(2etos ) se 'e2a se#ar al aire+ A#ontin!a#i&n4 este frotis se *!e'e te7ir 'e la for%a a'e#!a'a *ara s! e,al!a#i&n%i#ros#&*i#a
1ROCEDI.IENTO
0l terminar, un portaobjetos será el frotis, y el otro se 'abrá usado como medio de
extensión.
*. oloque un portaobjetos sobre una superficie plana. 1ediante un tubo capilar
coloque una gota de sangre de +/2 mm sobre el portaobjetos, aproximadamente a
* cm de uno de los extremos.+. &se los dedos pulgar e índice para sujetar este porta objeto sobre la superficie
planaon la otra mano, oloque un extremo del segundo portaobjetos justo delante de la
gota de sangre.
2. Sujete el segundo portaobjetos formando un ángulo de 23 a 4 536 y deslícelo
arrastrando la gota de sangre.
5. 7eje que la sangre se extienda, detenindose poco antes de los extremos del
portaobjetos.
3. 1ediante un mo"imiento preciso y bien calculado, desplace el segundo
portaobjetos 'acia el extremo del primero. El total del frotis de sangre debe cubrir
alrededor de 8 partes del portaobjetos.
9. :ras reali!ar la extensión, se obtienen tres partes de la muestra%/ abe!a (con demasiados eritrocitos)./ uerpo (!ona óptima para la obser"ación, existe un reparto equilibrado de
clulas). / ola (eritrocitos en escaso nmero).;. 7eje que el frotis se seque al aire por 3 min.<. :ras dejar secar el frotis durante un par de minutos, aplicaremos el metanol sobre
la muestra que actuará como fijador, lo dejamos reposar durante tres minutos.
=. :e#imos la muestra con el colorante >iemsa (diluido con ?S en proporción*>%=?S). @as partes ácidas de la muestra (como por ejemplo el 7A0 del ncleo)
se te#irán de un color a!ulado mientras que las básicas se te#irán de un color
rosado.
*B.@impiamos la muestra con agua destilada para sacar el colorante tras 'aberlo
dejado sobre la muestra unos die! minutos.
**. 0plicamos el cubreobjetos sobre el cuerpo del frotis, ya está listo para la
"isuali!ación en el microscopio.
Dis#!si&n
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El grosor del frotis depende de tres "ariedades- el ángulo de coloración del
portaobjetos usados para la extensión, la "elocidad de extensión y el tama#o de la
gota de sangre. En un buen frotis de sangre, la transición desde la !ona gruesa es
progresi"a. 7ebe 'aber una distribución uniforme de clulas sin !onas que
contengan crestas u agujeros. Esta es la !ona del frotis de sangre perifrica que
debe utili!arse para lle"ar acabo un recuento diferencial de leucocitos.
CAUSAS DE ERROR EN LA TINCIÓN DEL FROTIS SANGU8NEO9
• oloración excesi"amente a!ul% $rotis muy grueso, la"ado insuficiente, :inción muy
prolongada, colorante demasiado alcalino.
• oloración muy rosada% El agua del la"ado, el colorante o el tampón demasiado
ácidos.
• 0parición de artefactos debido a suciedad, deterioro o presencia de grasa en
portaobjetos.• idratación de los 'ematíes% $ijación inadecuada por uso de alco'ol metílico no
absoluto.
CONCLUSIÓN
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El frotis sanguíneo es una tcnica de laboratrio que nos permite "alorar la
morfología de las clulas sanguíneas para identificar alguna patología mediante la
obser"ación de las clulas sanguineas.En la práctica se obser"ó la morfología de eritrocito y leucocitos de canino
Eritrocitos caninos. @a mayoría de las clulas son de tama#o similar y tienen una palide! central
destacada. $rotis de sangre canina- objeti"o lCCx.
Aeutrofilo segmentado. @a clula con el ncleo segmentado y citoplasma rosado es un neutrofilo
maduro. $rotis de sangre canina- objeti"o lCCx.
. Eosinofilo. @a clula con un ncleo poco segmentado y mltiples gránulos redondos y roji!os en el
citoplasma es un eosinofilo. $rotis de sangre canina- objeti"o lCCx.
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. @infocito peque#o. @a clula peque#a con un ncleo redondo, en position central y con un borde de
citoplasma a!ul claro es un linfocito peque#o. $rotis de sangre canina- objeti"o lCCx.
asofilo. @a clula con el ncleo con poca segmentación y citoplasma de color purpura claro con una
peque#a cantidad de peque#os y discretos gránulos purpura es un basofilo. $rotis de sangre canina-
objeti"o lCCx.
0AEDCS
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