PROSESING SEDIAAN PATOLOGIANATOMIPatologi Anatomi Adalah
spesialis medis yang melakukan diagnosis penyakit berdasarkan
pemeriksaan makroskopik, mikroskopik, molekul atas organ, jaringan,
dan sel. Yang melakukan diagnosis penyakit berdasarkan patologi
anatomi adalah Spesialis patologi anatomiSpesialis patologi anatomi
mendiagnosis penyakit seseorang berdasar pemeriksaan laboratorium.
Ada beberapa teknik pemeriksaan di laboratorium patologi anatomi
diantaranya pemeriksaan Histologi (morfologi jaringan) atau
Sitologi (Morfologi sel). Pada pemeriksaan lab analis
kesehatan(teknisi laboratorium) bertugas membuat sediaan/preparat
jaringan atau sel yang didapat dari si pasien. Sediaan harus dibuat
sebaik mungkin agar spesialis dapat melakukan diagnosis yang
akurat.Disini akan diuraikan secara singkat teknik pembuatan
sediaan pemeriksaan sitologi dan pemeriksaan histologi
dilaboratorium Patologi Anatomi.A. Sediaan untuk Pemeriksaan
SitologiPada pemeriksaan sitologi yang diperiksa morfologi sel-sel
cairan tubuh. Sediaan atau disebut duga preparat dibuat berupa
apusan pada objek glass yang diwarani dengan pewarnaan tertentu.1.
Sediaan/preparat dengan pewarnaan metode GiemzaTujuan : Terutama
yang diperiksa adalah detail dari morfologi untuk memeriksa
intisel, untuk melihat apakah sel tersebut sel normal, sel
noeplasma jinak atau ganas.Sampel : Aspirasi Jarum Halus (AJH),
Endapan cairan yang telah disentrifugeBahan :- Larutan pewarna
giemza- Larutan Phosfat buffer (ph 6,8)- MethanolProsedur kerja :1)
Sediaan apus telah benar-benar kering di udara2) Fiksasi dengan
methanol minimal 5 menit3) Cuci dengan aquadest, biarkan kering di
udara4) Tetesi dengan pewarna Giemsa dengan perbandingan (GZ :
Bufer phosfat = 1:4)5) Cuci dengan aquadest, kering diudara6) Tutup
EZ Mount2. Sediaan/preparat dengan pewarnaan metode
PapaniculoMetode ini umumya digunakan untuk pewarnaan Papsmear
(tapi terkadang ada juga selain papsmear diwarnai dengan metode
ini).Papsmear digunakan untuk mendignosis Kanker serviks. Melihat
ada tidaknya sel ganasSampel : apusan daerah peralihan
endoserviks.Bahan:-Haematoksilin mayer-EA (Eosin alkohol) 65/EA 36-
Alkohol 95% dan Alkohol absolutUntuk EA 65 isinya: Eosine Y,
Phospotung stic acid, light green, alk. AbsoluteProsedur Kerja :1)
Sedian apusan difiksasi dengan alcohol 95% 15 menit2) Air mengalir
sampai bebas alkohol 5 menit(rak preparat diletakan di wadah yang
di beri air mengalir)3) Mayer haematoksilin 3-5 menit4) Air
Mengalir 15 menit5) Alkohol 95% 10 kali celup-Alkohol 95% 10 kali
celup6) EA 3-5 menit7) Alkohol 95% 5 kali celup-Alkoho 95% 5 kali
celup- Alkohol absolute 5 kali celup8) Keringkan diudara9)
Xylol/clearing10) Tutup dengan EZ mount
Foto : peralatan pengecatanHal-hal yang harus diperhatikan untuk
pembuatan sediaan/preparat papsmear:- Pengambilan sampel harus
mendapat sel-sel endoserviks sel-sel metaplasia dan sel-sel
skuamosa (komponen daerah peralihan), harus harus sedikit mungkin
mengandung darah.- Sediaan harus segera difiksasi dengan alkohol
95%. Preparat yang kering belum difiksasi akan menyebabkan sel-sel
rusak. Apabila tempat pengecatan jauh,setelah difiksasi keringkan
dan masukkan kewadah yang dapat menjaga keamanan sediaan.- Jika
menggunakna hairspray tidak boleh terlalu dekat, karena akan
menghapus atau tidak terfiksasi dengan baik.*Kesalahan pada
kriteria yang diatas bisa menyebabkannegatifpalsu.*Kesalahan pada
pewarnaan dan screening dapat menyebabkanpositif palsu.Hal-hal yang
harus diperhatikan dalam pembuatan sediaan sitologi dan
fiksasinya:1. Objek glass harus benar-benar bersih, terus beri
nomor sesuai data biar tidak tertukar,2. luas kaca objek memanjang,
kita apus merata,tidak terlalu tebal dan terlalu tipis3. Segera
fiksasi sesuai dengan pewarnaan yang akan digunakan4. Untuk cairan,
disentrifuge dahulu dan kemudian diambil untuk diproses5. Untuk
bahan sputum diambil bagian berwarna dan kental untuk dibuat
pulasan. Bagian yang lain bisa gunakan sebagai sel blog.B. Sediaan
untuk Pemeriksaan Histologi1. Tahap periksaan dimulai dari
penerimaan sampel di tata usaha. Petugas penerima harus mengecek
kembali sampel tidak boleh asal terima.- Jaringan atau organ yang
diterima harus dalam keadaan terfiksasi dengan formalin buffer
10%(perbandingan jaringan dan cairan fiksasi, 1:9 ) dan ditutup
rapat.* Buffer formalin 10% :1. formaldehid 40% H.CHO = 100 ml2.
Sodium Phospat monobasic NaH2PO4.H2O = 4 gram3. Sodium Phopat
dibasic Na2HPO4 = 6.5 gram4. Aquadest = 900 ml- Identitas pasien
harus dilengkapi seperti, nama, umur, jenis kelamin, alamat,
pekerjaan,riwayat penyakit, Dibagian yang ingin diperiksa.- Jenis
sampel sampel harus di Cross check, apa sama jenis sampel yang
ditulis dengan yang diterima- Dan harus di tanya bagai mana
menyampaian hasil pemeriksaan, Jika pasien ingin mengambil sampel
sendiri harus ada surat pengantar.- Nama dan alamat dokter pengirim
sampel harus ada,Dokter pengirim harus diingatkan jika ada yang
tidak sesuai kriteria.2. 2 Pemeriksaan MakroskopisPemeriksaan
makaroskopis dilakukan oleh dokter tugas analis kesehatan/teknisi
laboratorium mendampingi dokter, melakukan pencatatan hasil
pemeriksaan dokter. Pada tahap ini dokter juga akan memotong
jaringan yang dicurigai
3. Foto : Jaringan yang sudah dipotongProcessing JaringanUntuk
prosessing jaringan memakai alat tissueprosessor automaticyang
bekerja 18,5 jam(bisa diubah sesuai kebutuhan). Tahapan prosessing
jaringan yaitu, Fiksasi, Dehidrasi, clearing, dan infiltrasi
paraffin.
Foto : Tissue Automatics ProsessorTahapan kerja pada Tissue
Automatics Prosessor1) FiksasiBotol 1. Buffer Formalin 10% 2 jam2)
DehidrasiBotol 2. Alkohol 70% 1,5 jamBotol 3. Alkohol 80% 1,5
jamBotol 4. Alkohol 95% 1,5 jamBotol 5. Alkoho absolute I 1,5
jamBotol 6. Alkoho absolute II 1,5 jamBotol 7. Alkoho absolute III
1,5 jam3) ClearingBotol 8. Xylol I 1 JamBotol 9. Xylol II 1,5
JamBotol 10. Xylol III 1,5 Jam4) Infiltrasi paraffinBotol 11.
Paraffin cair I 1,5 jamBotol 12. Paraffin cair II 2 jamJumlah 18,5
jamFiksasiTujuan : Untuk mempertahankan struktur sel sehingga
menjadi stabil secara fisik dan kimiawi dan mencegah terjadi
dialysis atau pembengkakan pada rupture.Rumus yang digunakan untuk
memonitor fiksasi baik atau buruk diuji dengan rumus:d = k td =
ketebalan jaringan (mm)t = waktu yang dibutuhkan/tersediak =
ketetapan daya fiksir dari atas dan bawah (2 X ketetapan
masing-masing fiksasi)Ketetapan fiksasi formalin 10% =
0.78DehidrasiTujuan : untuk menghilangkan/menarik air dalam
jaringan dengan cara mulai konsentrasi terendah sampai konsentrasi
tinggi.ClearingTujuan : Menarik keluar kadar alcohol yang berada
dalam jaringan, memberi warna yang bening pada jaringan dan juga
sebagai perantara mesuknya kedalam paraffin.Zat yang sering dipakai
Xylol, tapi bisa juga dipakai : benzol, benzene, toluol,dll.Untuk
jaringan otak dan limfonoid lebih baik menggunakan
koloform.Infiltrasi paraffinTujuan : Mengisi rongga atau pori-pori
yang ada pada jaringan setelah setelah ditinggal cairan
sebelumnya(xylol).Jumlah waktu : 18,5 Jam4. . PengeblokkanTujuan :
Agar mudah dipotong menggunakan mikrotom untuk mendapatkan irisan
jaringan yang sangat tipis (sesuai yang diharapkan).
Foto : CetakanCara Kerja :1) Hangatkan paraffin cair, pinset,
dan penutup cetakan2) Parafin cair dituangkan kedalam cetakan3)
Jaringan dari prosessing dimasukan kedalam cetakan yang telah disi
paraffin cair, tekan jaringan agar semakin menempel di dasar
cetakan.4) Tutup cetakan diambil, letakkan diatas cetakan dan di
tekan.Pasang etiket di pinggir.5) Biarkan sampai membeku6) Setelah
beku, keluarkan dari cetakan. Rapikan sisi-sisi blog. Ganti etiket
dengan yang permanen
Foto : cetakan yang telah diisi jaringan dan paraffi
Foto : Blok jaringan5. Pemotongan dengan Mikrotom
Foto : Mikrotom
1) Sebelum pemotongan Masukan kedalam plastik yang diisi air dan
letakkan di freezer 15 menit atau diberi batu es.2) Blok dijepit
pada mikrotom kemudian dipotong dengan pisau mikroto.Kemiringan :
300, Tebal blok paraffin 2-5mikron.3) Hasil pemotongan (berupa
pita/irisan tipis yang saling bersambung) dimasukkan kedalam
waterbath yang diisi air yang sudah dihangatkan 500C, kemudian
diambil dengan kaca objek (Meletakkan potongan di waterbath tidak
boleh terbalik).
Foto : WaterbathCttn : Pisau dan waterbath bisa diberi alcohol
50% untuk menurunkan tegangan permukaan yang membantu merentangkan
pita.Objek glass jangan diolesi albumin gliserin karena biasanya
albumin bila diinkubasi akan mengeras.menjaga agat jangan lepas
saat pengecatan6. InkubasiTujuan : Menguapkan air yang terbawa oleh
hasil potongan hingga jaringan menempel lebih kuat.Cara kerja :
inkubasi preparat di atas hot plate dengan suhu500C(dibawah titik
cair paraffin) selama 15 menit Sebaiknya dialasi dengan kertas
merang. Untuk pengecatan imunnohistokima inkubasi 390C selama 1
malam7. PengecatanUmumnya dalam pengecatan histopatologi digunakan
cat Hetatoxylin-Eosin (HE) disamping cat khusus (PAS, gomori, ZN,
Malory, dll) dan cat yang lebih khusus yaitu immunohistokimia (ER,
PR, CD20, LMP, dll)
Foto : Peralatan pengecatanProses pengecatan :1)
DeparafinisasiPreparat masuk ke Xylol I, II, dan III masing-masing
3 menitSetelah itu dilap pinggir jaringan dengan kain kasa.2)
RehidrasiPreparat masuk ke alcohol 100%, 95%, 80%, 70%
masing-masing 2 menit3) Preparat masuk ke air mengalir 3 menit(air
mengali ditampung dalam wadah )Sebelumnya celup kedalam dua mangkok
air 3 celup4) Pengecatan Inti 7 menitPreparat masuk ke dalam Meyer
hematoksilin5) Preparat masuk ke air mengalir 3 menit(air mengali
ditampung dalam wadah )Sebelumnya celup kedalam dua mangkok air 3
celup6) Counter StainPreparat masuk ke larutan eosin 7 celup7)
Preparat Masuk ke air wadah I, II, dan III 3 celup8)
DehidrasiPreparat masuk ke dalam alcohol 70 %, 80%, 95%,100% 3
celupSetelah itu Dilap dengan kain kasa sekitar jaringandan tunggu
sampai kering9) ClearingPreparat masuk Ke Xylol I, dan II
masing-masing 2 menit10) Mounting11) Preparat diberi 1 tetes
entelan dan ditutup objek glass
Foto : Preparat/sediaan histologiKet :DeparafinisasiTujuanya :
Berfungsi melarutkan/melepaskan paraffin yang melekat pada
preparat.RehidrasiBerfungsi menghilangkan xylol yang terbawa oleh
preparat dan memasukan air kedalam jaringanAir mengalirMelepaskan
sisa cat atau cairan yang terbawa sebelumnyaMeyer
HematoksilinMemberikan warna biru pada inti selEosinMemberi warna
merah pada sitoplasma, jaringan ikat,dllDehidrasiMelepaskan aira
yang terbawa preparatClearingMelepastan alcohol yang terbawa oleh
preparat dan memberi warna bening pada preparatMountingMemberi
warna cerah dan sebagai pelindung dan pengawet jaringan dari
mikroba dan bakteri.(DARIhttp://n1nt1.blogspot.com/)Leave a
commentFiled underUncategorizedMAY 6, 2012 4:56 AMFROZEN SECTION
TECHNIQUEA method for preparation of frozen sectionsThe basicsStart
with a sharp bladeI find that I always get my best quality section
with a new sharp blade. I think some of the places we try to save
money in medicine are a bit pound foolish. Your patients surgery is
costing thousands of dollars. Hundreds of dollars are spent on
disposables including lap pads, gloves, sponges, drapes, cautery,
needles, needle magnets, BP cuff, IV tubing, ..We are conserving
pennies on what may be the most important decision impacting on the
procedure. Yet some will risk quality by trying to get 20 shaves
out of adisposableblade.In my practice I treat every patient to a
new section of blade. I will change it as soon as my section
quality begins to fall. Some tissues such as tough collagenous
tissues or calcified tissues will quickly dull the blade. If Im
having trouble getting a good section with a new blade on occasion
I have changed to a second new blade and easily prepared a quality
section.Safety Tip If you cut yourself on a blade used on only one
patient, you will have minimized your risk of transmittable
disease. If you cut yourself on a blade that has been used for
days, it is like sleeping with numerous partnerswithout the fun! In
this day and age of doing FNAs with ridiculously flexible long
safety needles and using annoying safety scalpels, we can justify
using a sharp blade for safety reasonsand get the benefit of
awesome frozens every time!Sitting or standingI always sit on a
stool when I cut. I am hoping you learn to use the brush as an
articulate fine instrument, capable of the delicately maneuvering
of a microscopically thin snowflake of tissuewhile in flight!Why
would you want to do this hunched over with you neck hyper
extended? This position is fine if you are bending over to look in
a hole in fear of an animal jumping out at you! But for cutting a
frozen section you want to be relaxed and comfortable so that you
will have maximum control in your left hand.The Brush
Im a brush user. I believe everyone must first learn to be good
with a brush. I consider starting a student on the anti-roll devise
like putting a child on crutches before they learn to walk. The
purpose of the brush is to grab and maneuver the section across the
stage. The unless you have perfect temperature, a cold section will
by nature trying to curl up and pull away from the brush. For this
reason I use a brush with stiff bristles and a fairly wide gripping
surface. I have found Chinese boar bristles to be the stiffest and
work the best for me. You can buy and 1/4 inch #2 flat or bright
brushes from an art supply store for about $3 and cut them at an
angle. With this angled tip, the brush meets the tissue flat like a
broom because the brush is held at an angle. I never understood why
anyone would want to use the flimsy camel hair brushes. The section
can easily pull away from these flexible hairs.I am now making
these brushes availablefor anyone who would like to try them. See
apparatus
Holding the brushHold the brush like a pen in the left hand and
stabilize the hand by gently resting the side of the fifth finger
on the stage (or where ever you can find a place depending on your
hand size and cryostat). This gives the operator great dexterity
and allows for conservation of movement. Focus on developing your
dexterity so you can control the brush like a fine instrument.
Could you catch a snowflake as it is falling? I cut the brush at an
angle which approximates the angle I hold the brush in my hand.
This results in the brush meeting the tissue flat over its 1/4
length.
Turning the wheelTurn the wheel in a continuous uniform motion
without hesitation. I have seen many frozen sectionists using a
brush stop at the beginning of the section, slowly grab the tissue
and then start to turn the wheel. In my experience this practice
adds to potential artifacts at the beginning of the section,
potential variations in thickness, and leads to difficulties when
approaching tissues containing fat. With practice, by holding the
brush as I described, the operator is capable of grabbing the
tissue in a continuous motion, which began before the tissue meets
the knife and continues through the complete section. .Movement of
the brush
As the block begins to move toward the knife the brush moves
downward in pace with the block. The brush cangentlyrest on the
bottom 2mm of the block and ride the block pulling away just as the
block meets the knife. It is the downward movement of the brush
that allows you to keep a continuous motion as you grab the
section.It is like handing off a baton in a relay race. The second
runner must run along side the first runner for the handoff. The
baton never slows down. If the second runner was stopped the first
runner would have to slow to a stop and the second runner would
have to accelerate with the baton again.As the first few
millimeters of the section passes the knife there will be some
degree of curling of the section. As the curl begins, the brush in
motion will catch the edge of the tissue and change to a horizontal
motion toward you . The path of the brush is an elbow shape down
and then toward you in a continuous motion. It is important to pull
the tissue toward you rather than to press it to the cryostat
stage. Pressing tissue to the cryostat stage sometimes result in
adhesion of the tissue to the stage, especially if the tissue is
fatty. This will result in a smeared section and a need to clean
the stage. This motion of grabbing and guiding the tissue is like
pulling a blanket over you in bed. As the brush returns to grab the
next section it completes a continuous elliptical motion.The
continuous repeated sectioning of a block becomes like turning the
pedals of a bicycle.Both hands are circling in synchrony.Having
blocks prepared with a handle of embedding medium makes this job
easier without having to engage the tissue with the brush.
1) As the block descends toward the brush the brush keeps pace
with the block by gently resting on the bottom 2-3 mm of the block
andRiding the block2) As the block meets the blade and the sections
begins its curl the brush leaves the block while catching the
curling edge of the section.Catching the curl3) The brush jumps off
the block with the curl.The brush jumps over the blade3) The brush
holding the curl pulls the section horizontally over the stage like
a pulling the covers over you in bed without pressing the tissue to
the stage.Pull over the blanket
RetrievingthesectionTissue can be picked up from the cryostat
stage or from the block. I routinely pick sections up from the
stage. When the section is complete the tissue can be picked up by
holding the slide just above the section and angle the slide down
to touch a portion of the tissue. Static attraction will draw the
section to adhere to and quickly melt on to the warm slide Having a
few millimeters handle of embedding medium surrounding the tissue
is an advantage. This extra medium allows a margin of error for
curling or flipping at either end before it involves the tissue. If
I am having particular difficulties with the section I can stop the
section before the last 2 mm. of embedding medium leaving the
section attached to the block This allows a fixed edge of the
section against which to stretch the section with the brush.
Occasionally when faced with a difficult situation I may have more
luck retrieving the section from the block. This can sometimes
offer a solution to problems arising from curling or fat sticking
to the stage. Some operators prefer this technique for the majority
of their sections. To retrieve from the block the tissue is cut
through and stopped when the handle of medium on the far side of
the tissue is reached. At this point the crank is moved backward
and the block is reversed away from the knife. The section is
uncurled downward with the brush over the face of the block and the
section is picked up off the block face rather than the stage
.Retrieving from stageSlide levers down to gently touch the section
which will float onto the slide with static or cohesive attraction.
Try avoid stretching or folding the section during this process by
keeping the a steady hand and the transverse axis of the slide
parallel to the section.
Retrieving from the block1) A section is cut leaving an
attachment of medium at the top2) The wheel is turned in opposite
direction bring the section back to the face of the block.3)
Section is retrieved by placing the slide over the tissue on the
face of the block.
Rapid fixationAs I mentioned earlier I hold the slide in my
right hand as I turn the wheel. The moment the section is complete,
I immediately pick up the tissue on the slide and in a moment it is
placed into fixative.Have your fixative opened in an immediately
reachable location. Start with the slide in your hand. If am using
a staining rack I keep it outside the fixative jar so it does not
impede my swift motion. I first fix the slide in 95% ETOH then put
it in the rackIf there is delay in fixing the tissue there will be
significant drying artifact. In my experience when the frozen
section is sitting cold on the stage the effect of drying is
minimal. From the time the tissue touches a warm slide it starts to
under go significant drying artifact with loss of nuclear detail
and leakage of fluids from the cytoplasm. The examples below show
the same tissue after 15 seconds delay of fixation on a warm slide
and sections fixed immediately . The differences are striking. It
also demonstrates the quality of cytology possible by frozen
section using this system.
1) Bronchiolo-alveolar Carcinoma 15 seconds drying2) Same tissue
immediately fixed 95% ETOH1) Kidney tubules -15 seconds drying2)
Same tissue immediately fixed in 95% ETOH
Thickness of the sectionFor general surgical pathology I
recommend cutting at six microns. This thickness will give arich
stain which is easier to interpret at scanning powers of 2x and 4x
where pathologists gather much of their information. Very thin
sections will often look pale at these powers and fine details are
easy to miss. A six micron section will afford a moment more time
to avoid drying artifact. There will also be less nuclear holes
visible from ice crystal artifact.Specialized situations may call
for thinner or thicker sections.
Thickness must be confirmed visually.In FS technique III I will
show sections of various thicknesses. In my experience cryostats
will not repeatedly cut perfect six micron sections unless all
conditions are correct and the sections are being cut repeatedly in
uniform motion. The change of surface temperature of the block
resting between sections will result in warming and expansion and a
thicker section will be cut. This is often followed by a very thin
section. When warmed with the hand the first section will often be
thicker. When cutting I always let the first two sections pass then
continue on to take to the next section if it appears to be the
correct thickness. This is another reason why we want to become
skilled with the brush so that we can continuously cut the sections
until we are satisfied that we have a section of the correct
thickness without other artifacts.
Staining the sectionsIndividual staining recipes are a matter of
pathologist preference. My only advice is not to rush any step of
the staining process and to keep all stains and solutions fresh and
well maintained. Gentle agitation is helpful in speeding the
process and keeping the staining uniform, but the type of tissue
and its adhesive nature should be considered (see below).When
staining I find that looking at the slide after it leaves the
bluing agent is a good way to access the adequacy of the stain.Get
to know the color and shade of a well stained slide as compared to
a lightly stained slide. In our hematoxolin I look for a specific
navy blue tone to tell me it is stained well. Keep in mind the
thickness of the tissue and the amount of nuclear material will
make the slide appear lighter or darker. However the is a
particular tone of blue that tells me the slide is well stained.
Make your own observations. The idea is to check the slide before
continuing on with the staining.I like many pathologists make the
large part of my observations at scanning powers i.e. 2x or 4x
magnification. At these powers looking at an under stained slide is
like driving in a snowstorm, you really dont see much. When looking
at lymph nodes for metastatic disease I give particular attention
to deep rich staining, especially the eosin. If the eosin stain is
rich, the the pale pink cytoplasm of a sinus histiocyte can be more
easily distinguished from the tumor cell cytoplasm which may be
more eosinophilic or clear more clear.Why did my tissue fall off?Im
not sure what the scientific explanation for the adhesion of tissue
to the glass slide but I would guess it has something to do with
weak bonding at a molecular level conveyed by the fluids in the
fresh tissue to the glass. Anyone who knows the explanation please
let me know. I arrived at this explanation because in my experience
the dryer the tissue tissue the less tendency it has to adhere and
if it has been in formalin it seems to have had any tendency to
adhere washed away; the juicier tissues adhere better. I like to
think of them as having more glue In my experience I can list
several situations where I have experienced sections coming off the
slide in the staining process. Obviously over agitating loosely
held tissues will shake then off.1) Very dry tissues either by
nature or desiccation.Less glue2) Large ratio of perimeter to
area.Thin strips that have a large perimeter to catch the
turbulence of the motion in the stain jars can easily fall off the
slide. This is especially true if thin fibrous walled cysts which
are not very juicy tissues to begin with. Also includes in this are
amorphous necrotic tissues which have no integrity holding them
together. This also applies to very thick sections which have a
thicker wall to grab the turbulence.3) Ammonia bluing reagent is
too concentrated.-If you use ammonia for bluing my rule is if I can
smell it without putting my nose up too it its too strong.4) 100 %
Etoh instead of 95%. I have on occasion had someone place 100% Etoh
in my fixing jar instead of 95%. In my experience tissue will not
stay on the slide.5) A section is placed over embedding mediumwhich
is already on the slide. When placing multiple sections on a slide
be careful to not overlap the tissue onto the embedding medium of
the neighboring section.Leave a commentFiled underUncategorizedMAY
6, 2012 3:24 AMKANKER LEHER RAHIM DAN PAPSMEARSalah satu cara untuk
melakukan deteksi dini terhadap kanker serviks (leher rahim) adalah
dengan melakukan pemeriksaan pap smear. Meski kini sudah ada alat
tes untuk mendeteksi kumanhuman papillomavirus(HPV) penyebab kanker
serviks, namun tes pap smear masih sebagai cara terbaik untuk
deteksi kanker serviks.Penelitian terbaru menyebutkan tes
untukhuman papillomavirus(HPV) tidak mungkin untuk menggantikan tes
pap smear konvensional sebagai alat skrining kanker leher rahim
(kanker serviks).Skrining dengan pap smear biasanya dilakukan pada
wanita dengan usia lebih dari 30 tahun. Perempuan usia di bawah 21
tahun tidak disarankan olehAmerican College of Obstetricians and
Gynecologist(ACOG) melakukan pap smear karena kekebalan tubuhnya
masih bagus.Pap smear di usia terlalu muda malah akan memberikan
tekanan mental karena kekhawatiran yang berlebihan tentang kanker.
Kekebalan tubuh perempuan di bawah 21 tahun juga bagus sehingga
jarang terkena kanker leher rahim.Skrining (pap smear) kanker
serviks merupakan cerita sukses kesehatan masyarakat. Jumlah
perempuan meninggal akibat kanker serviks telah berkurang
setengahnya karena skrining secara rutin, kata Dr. Evelyn Whitlock
P., seorang spesialis kedokteran preventif dari Kaiser Permanente
Center for Health Research in Portland, Oregon seperti dikutip
dariMSNHealth, Selasa (18/10/2011).Preventive Services Task
ForceAmerika Serikat telah menerbitkan pedoman untuk skrining
kanker serviks pada tahun 2003 yang telah diperbaiki dan
diterbitkanAnnals of Internal Medicinepada 18 Oktober 2011.Untuk
membandingkan dua jenis pengujian, para peneliti menganalisis 4
penelitian yang meliputi hampir 142.000 perempuan. HPV telah
menyebabkan banyak kasus kanker serviks. Sehingga menggabungkan tes
HPV ke dalam program skrining kanker serviks akan dapat lebih
efektif.Namun para peneliti menemukan bahwa sebagian besar tes HPV
memiliki hasil positif palsu. Hasil positif palsu dapat menyebabkan
biaya perawatan yang tidak diperlukan dan kecemasan bagi banyak
wanita.Menurut laporan baru, tes HPV lebih sensitif tetapi kurang
spesifik dibandingkan tes pap smear. Hal tersebut menyebabkan lebih
banyak perempuan yang sebenarnya tidak ada kondisi yang salah
dengan kesehatannya namun memliki hasil tes HPV positif, dan hal
tersebut dapat menyebabkan kerusakan potensial, kata Dr.
Whitlock.Selama tes pap smear, goresan sel dari leher rahim wanita
dan diperiksa di laboratorium. Suatu jenis tes pap smear disebut
sebagai tes sitologi berbasis cairan, dan pengujian untuk HPV dapat
dilakukan pada waktu yang sama.Bagaimana jalannya pemeriksaan pap
smear?Pasien perempuan nantinya diminta duduk di kursi ginekolog
(duduk mengangkang), lalu dokter akan mengambil sampel lendir dari
mulut rahim mengguna spatula. Sampel ini akan diperiksa di bawah
mikroskop. Pengambilan lendir ini bisa berjalan cepat dan tidak
sakit jika si pasien rileks.Ada beberapa cara yang bisa dilakukan
untuk mencegah kanker serviks:1. Terapkan pola hidup sehat agar
sistem kekebalan tubuh terjaga.2. Jauhi merokok.3. Hindari seks
sebelum menikah atau di usia belasan tahun.4. Hindari berhubungan
seks selama masa haid5. Hindari berhubungan seks dengan banyak
partner.6. Rutin menjalani tes pap smear.7. Melakukan vaksinasi1
CommentFiled underUncategorizedMAY 6, 2012 1:59 AMPAP SMEAR
PROCEDURE
Conventional cytologyIn the conventional Pap smear, the
physician collecting the cells smears them on a microscope slide
and applies a fixative. In general, the slide is sent to a
laboratory for evaluation.Studies of the accuracy of conventional
cytology report: Proper sample acquisition is crucial to the
accuracy of the test; therefore, a cell that is not in the sample
cannot be evaluated.Studies of the accuracy of liquid based
monolayer cytology report:sensitivity 61% to 66% (e.g. types
16,18,31,45) that are more likely to develop Cervical
Intraepithelial Neoplasia due to the effects that HPV has on
DNA.Studies of the accuracy of HPV testing report:sensitivity 88%
to 91% (for detecting CIN 3 or higher)specificity 73% to 79% (for
detecting CIN 3 or higher) If the specificity does decline, the
result is increased numbers of false positive tests and, for many
women that did not have disease, an increased risk for colposcopy
and treatment. A worthwhile screening test requires a balance
between the sensitivity and specificity to ensure that those having
a disease are correctly identified as having it and those without
the disease are not identified as having it. Due to the liquid
based pap smears having a false negative rate of 15-35%, the
American College of Obstetricians and Gynecologists and American
Society for Colposcopy and Cervical Pathology have recommended the
use of HPV testing in addition to the pap smear in all women over
the age of 30.Regarding the role of HPV testing, randomized
controlled trials have compared HPV to colposcopy.HPV testing
appears as sensitive as immediate colposcopy while reducing the
number of colposcopies needed. Randomized controlled trial have
suggested that HPV testing could follow abnormal cytologyAutomated
analysisIn the last decade, there have been successful attempts to
develop automated, computer image analysis systems for
screening.Although, on the available evidence automated cervical
screening could not be recommended for implementation into a
national screening program, a recent NHS Health technology
appraisal concluded that the general case for automated image
analysis had probably been made .Automation may improve sensitivity
and reduce unsatisfactory specimens. Two of these has been FDA
approved and functions in high volume reference laboratories, with
human oversight.1 CommentFiled underUncategorizedMAY 5, 2012 12:36
PMDEPARTEMEN PATOLOGI ANATOMI FKUSUSEJARAH SINGKATBagian Patologi
Anatomi didirikan pada tahun 1954, dibawah pimpinan dr. Darwis Dt.
Besar yang berpengalaman sebagai asisten dibidang Patologi NIAS
Surabaya sekitar tahun 1930.Kuliah pada waktu itu hanya diberikan
sekali seminggu, oleh karena beliau bertempat tinggal di Tanjung
Balai, dan hal ini berlangsung sampai tahun 1955 pada saat beliau
akhirnya pindah ke Medan selaku Direktur RSU Medan.Kuliah Patologi
pada tahun 1953 1955 diberikan diruang kuliah Jl. Seram dan di
RSUPP Medan, pada tahun 1955 1958 digedung asrama mahasiswa Jalan
dr. T. Mansoer dan sejak tahun 1958 sampai sekarang di komplek
Jalan dr. T. Mansoer. Pada tahun 1957 1959 Dr. H. G. P Kern dari
Laboratorium Kesehatan Daerah di Medan diperbantukan pada bagian
ini dan pada saat itu mulai dilaksanakan praktikum yang bertempat
di Laboratorium Kesehatan Daerah.Kemudian dr. Med. H. G. P Kern
kembali bertugas dari tahun 1961 1966 sebagai tenaga tetap dan
sejak tahun 1962 praktikum mulai lagi bertempat di ruang Histologi
di komplek Fakultas Kedokteran USU Jl. Dr. T. Mansoer.Kegiatan
pemeriksaan histopatologi dalam pelayanan kesehatan masyarakat,
semula dipusatkan di Laboratorium Kesehatan Daerah dibawah pimpinan
Dr. Med. H. G. P. Kern. Setelah beliau meninggalkan Indonesia pada
tahun 1966, maka pelayanan ini tidak lancar. Barulah pada tahun
1968 pelayanan kesehatan masyrakat ini dibuka kembali yang dipimpin
oleh dr. Waldemar Tambunan bersama Staf Bagian Patologi Anatomi dan
dilaksanakan melalui kerjasama dengan Bagian Patologi Fakultas
Kedokteran Universitas Andalas yang dipimpin oleh Prof. Wijaya
Hakim dan berlangsung hingga tahun 1969.Sejak tahun 1970 Kepala
Bagian Patologi Anatomi dipegang oleh seorang ahli Patologi yang
semula bertugas di Fakultas Kedokteran Universitas Sriwijaya yaitu
Dr. Soegito Husodowijoyo,Sp.PAdan selanjutnya secara bergantian
dipimpin oleh ahli Patologi yang berasal dari Fakultas Kedokteran
USU.Bagian Patologi Anatomi yang semula bertempat di Kampus Pusat
Lt. I Fakultas Kedokteran USU sejak tahun 1999 pindah ke Jl.
Universitas No. 1 Lt. II sampai sekarang ini. Dan sekarang
Laboratorium Patologi Anatomi ada di Fakultas Kedokteran USU, RS
Haji Adam Malik dan RSU Dr. Pirngadi Medan yang bertugas disamping
melayani masyarakat tapi juga sebagai pusat pendidikan mahasiswa
kedokteran dan keahlian Patologi Anatomi sampai sekarang ini.DATA
STAF PENGAJAR SEKARANG1. dr. H. T. Ibnu Alferraly,Sp.PA(Ketua
Departemen)2. dr. Lidya Imelda Laksmi,Sp.PA(Sekretaris
Departemen)3. Prof. dr. Gani W. Tambunan,Sp.PA(K) (Koord. Ilmiah)4.
Prof. dr. H. M. Nadjib Dahlan Lubis,Sp.PA(K) (Koord. Riset)5. dr.
H. Delyuzar,Sp.PA(K) (Ketua Program Studi)6. dr.
Betty,Sp.PA(Sekretaris Program Studi)7. dr. T. Kemala Intan, M. Pd
(Kood. Pendidikan)8. dr. H. Soekimin,Sp.PA9. dr. H. Joko S.
Lukito,Sp.PA10. dr. Jessy Chrestella,Sp.PADATA PPDS 1 BAGIAN
PATOLOGI ANATOMI1. dr. Ainun Mardiah, M. Ked (PA)2. dr. Alya Amila
Fitrie , M. Kes3. dr. Lita Feriyawati, M. Kes4. dr. Megasari
Sitorus, M. Kes5. dr. Sufitni , M. Kes6. dr. Dwi Rita Anggraini, M.
Kes7. dr. Lokot Dona Lubis8. dr. Feby Yanti Hrp9. dr. Radita N. A.
Ginting10. dr. Rita Juliana Pohan11. dr. P. Poida B. Gurning12. dr.
Ina Farida Rangkuti13. dr. Dahliani Waruwu14. dr. Reza A.
Digambiro15. dr. Nancy S. Tambunan16. dr. Yessi D. A. Dewi17. dr.
Causa T. Mariedina18. dr. Fitri D. Ismida19. dr. NurlelaYANG PERNAH
MENJABAT SEBAGAI KETUA DEPARTEMEN1. dr. Med. H. G. P. Kern2. Prof.
dr. H. A. Darwis Datuk Batu Besar3. Dr. Soegito
Husodowijoyo,Sp.PA4. Prof. Gani W. Tambunan,Sp.PA(K)5. Prof. dr. H.
M. Nadjib Dahlan,Sp.PA(K)6. dr. H. Soekimin,Sp.PA7. dr. H. Joko S.
Lukito,Sp.PA8. dr. T. Ibnu Alferraly,Sp.PAYANG PERNAH MENJADI STAF
PENGAJAR1. Prof.dr.H. Darwis Datuk Batu Besar2. dr. Med. H. G. P.
Kern3. dr. Jules Hutagalung4. dr.Hophoptua Siahaan5. dr. Edward
Tampubolon6. dr. Advent Barus7. dr. A. H. Sutanto8. dr. Yustin
Simatupang9. dr. Aslin Sahur10. dr. Togi H. Panggabean11. dr. Emil
Taufik12. dr. Alex Tandean13. dr. Tan Gek Swan14. dr. Muchsin
Hasibuan15. dr. Fen Olof Manik16. dr. Emil Rizek Darwis17. dr.
Rosma Yenny Anwar18. dr. Lukman Hakim Zein19. dr. Gerhard S.
Panjaitan20. dr. Delfi Lutan
1 CommentFiled underUncategorizedMAY 5, 2012 8:05
AMHISTOPATOLOGI
Pembuatan sediaan dari suatu jaringan dimulai dengan operasi,
biopsi, atau autopsi. Jaringan yang diambil kemudian diproses
dengan fiksatif yang akan menjaga agar sediaan tidak akan rusak
(bergeser posisinya, membusuk, atau rusak). Fiksatif yang paling
umum digunakan adalah formalin (10% formaldehida yang dilarutkan
dalam air).
Sampel jaringan yang telah terfiksasi direndam dalam cairan
alkohol bertingkat untuk menghilangkan air dalam jaringan
(dehidrasi). Selanjutnya sampel dipindahkan ke dalam toluena untuk
menghilangkan alkohol (dealkoholisasi). Langkah terakhir yang
dilakukan adalah memasukkan sampel jaringan kedalam parafin lalu
dipotong tipis menggunakan mikrotom. Pemotongan dengan mikrotom ini
akan menghasilkan lapisan dengan ketebalan 5 mikrometer. Lapisan
ini kemudian diletakkan di atas kaca objek untuk diwarnai. panas
yang menginfiltrasi jaringan. Selama proses yang berlangsung selama
12-16 jam ini, jaringan yang awalnya lembek akan menjadi keras
sehingga lebih mudah dipotong menggunakan mikrotom. Pemotongan
dengan mikrotom ini akan menghasilkan lapisan dengan ketebalan 5
mikrometer. Lapisan ini kemudian diletakkan di atas kaca objek
untuk diwarnai.
Pewarnaan perlu dilakukan karena objek dengan ketebalan 5
mikrometer akan terlihat transparan meskipun di bawah mikroskop.
Pewarna yang biasa digunakan adalah hematoxylin dan eosin.
Hematoxylin akan memberi warna biru pada nukleus, sementaproses
pembuatan spesimen histologi, tergantung pada jaringan yang ingin
diamati. Ilmu yang mempelajari pewarnaan jaringan disebut
histokimia.
Leave a commentFiled underUncategorizedMAY 5, 2012 7:49
AMIMMUNOHISTOKIMIAImunohistokimia adalah metode untuk mendeteksi
protein di dalam sel suatu jaringan dengan menggunakan prinsip
pengikatan antara antibodi dan antigen pada jaringan hidup.
Pengecatan imunohistokimia banyak digunakan pada pemeriksaan sel
abnormal seperti sel kanker. Molekul spesifik akan mewarnai sel-sel
tertentu seperti sel yang membelah atau sel yang mati sehingga
dapat dibedakan dari sel normal.Pemeriksaan ini membutuhkan
jaringan dengan jumlah dan ketebalan yang bervariasi tergantung
dari tujuan pemeriksaan. Umumnya jaringan yang berasal dari tubuh
akan dipotong menjadi potongan yang sangat tipis dengan menggunakan
alat yang disebut vibrating microtome.Beberapa contoh
imunohistokimia yang banyak digunakan antara lain :Carcinoembryonic
Antigen (CEA) mengidentifikasi adenocarcinoma. Sifat kurang
spesifik.Cytokeratins mengidentifikasi carcinoma, namun dapat pula
member hasil positif pada kasus sarcoma.CD 15 dan CD 30 digunakan
untuk penyakit HodgkinAlpha Fetoprotein untuk tumor yolk sac dan
kanker sel hatiCD 117 (KIT) untuk tumor gastrointestinal
stromalProstate Spesific Antigen (PSA) untuk kanker prostatEstrogen
dan progesteron mendeteksi sel tumorCD 20 mengidentifikasi limfoma
sel BCD 3 mengidentifikasi limfoma sel TLeave a commentFiled
underUncategorizedMAY 5, 2012 7:42 AMSITOPATOLOGI
Sitopatologi adalah cabang ilmu patologi anatomi yang berurusan
dengan pemeriksaan mikroskopis atas sel seseorang secara
keseluruhan yang diperoleh dari usapan atau aspirasi jarum tajam.
Sitopatolog dilatih untuk melakukan aspirasi jarum tajam dari
organ, massa, ataupun kista yang terletak di permukaan, dan sering
bisa memuat diagnosis segera dalam kehadiran pasien dan dokter yang
mengajukan konsulSitologi, dari bahasa Yunani kytos, wadah) adalah
ilmu yang mempelajari sel. Hal yang dipelajari dalam biologi sel
mencakup sifat-sifat fisiologis sel seperti struktur dan organel
yang terdapat di dalam sel, lingkungan dan antaraksi sel, daur
hidup sel, pembelahan sel dan fungsi sel (fisiologi), hingga
kematian sel. Hal-hal tersebut dipelajari baik pada skala
mikroskopik maupun skala molekular, dan sel biologi meneliti baik
organisme bersel tunggal seperti bakteri maupun sel-sel
terspesialisasi di dalam organisme multisel seperti
manusia.Pemeriksaan Sitopatologi terdiri dari1. Sitologi Biopsi
Aspirasi Jarum Halus2. Sitologi Eksfoliatif cairan tubuh3. Sitologi
Pap smear4. Sitologi Imprint/Screping ketika operasiLeave a
commentFiled underUncategorizedMAY 5, 2012 7:40 AMAHLI PATOLOGI
ANATOMIPatologi anatomi ialah spesialisasi medis yang berurusan
dengan diagnosis penyakit berdasarkan pada pemeriksaan kasar,
mikroskopik, dan molekuler atas organ, jaringan, dan sel. Di banyak
negeri, dokter yang berpraktik patologi dilatih dalam patologi
anatomi dan patologi klinik, diagnosis penyakit melalui analisis
laboratorium pada cairan tubuh.Patolog anatomi mendiagnosis
penyakit dan memperoleh informasi yang berguna secara klinis
melalui pemeriksaan jaringan dan sel, yang umumnya melibatkan
pemeriksaan visual kasar dan mikroskopik pada jaringan, dengan
pengecatan khusus dan imunohistokimia yang dimanfaatkan untuk
memvisualisasikan protein khusus dan zat lain pada dan di
sekeliling sel. Kini, patolog anatomi mulai mempergunakan biologi
molekuler untuk memperoleh informasi klinis tambahan dari spesimen
yang sama.