1. Introducción 1.1 Características y Usos del Producto Los polihidroxialcanoatos (PHA) son polésteres de varios hidroxialcanoatos sintetizados por lo enos de !" especies distintas de #acterias $ra%positivas y $ra%ne$ativas. PHA puede representar hasta un &'del peso seco de la #ioasa y se acuula cuando la #acteria se encuentra #ao condiciones de estrés* sirviendo coo reserva de car#ono. +1, -e pueden clasicar de la si$uiente anera +/,0 • Lon$itud de cadena corta0 tiene oneros desde C2 hasta C" • Lon$itud de cadena ediana0 oneros entre C3 hasta C14 • Lon$itud de cadena lar$a0 poseen 5s de C14 Los hoopolíeros de poly(2%hidroxi#utirato) (PH6) son los ie#ros principales a PHA se$uidos por poly(2%hidroxivalerato) (PH7). PH6 con una 8rula $enérica coo vista en la si$uiente ia$en +2,0 Las #acterias 9ue la producen re9uieren de :ltiples condiciones para poder producir PHA* sin e#ar$o; $eneralente se clasican en #ase a los re9ueriientos del cultivo* los cuales son +4,0 • Liitacin de nutriente esencial coo lo es nitr$eno* 8os8ato* a$nesio o sul8ato en un entorno con exceso de car#ono. <e pl os de ellos son Alcaligen es eutrophus (Ralstonia eutrophus) o Protomonas extorquens • =o liitacin de nutriente esencial en particular. 6acterias con estas características pueden acuular el políer o durante su creciiento; eeplos de ello son E. coli reco#inante oAlcaligen es latus Con relacin a las características particulares del pl5stico +",0 • -on teropl5sticos • 6iode$rada#les • Pueden ser 9ue#radizos (8r5$iles) o el5sticos • >ienen un peso olecular entre /'*''' hasta 2'*'''*''' daltones • -on hidro8#icos y son no%perea#les a $ases • Los oneros 9ue lo constituyen son 9uirales PH6 tiene el ayor potencial para poder ser aplicados en una variedad de productos* dado las caract erísticas prev iaent e encionados; puesto a 9ue se aseean ucho a los de los pl5sticos derivados de petrleo. =o o#stante* no se liita a la sustitucin de pl5sticos derivados de petrleos* ya 9ue el ori$en del polí ero les perite ser utilizado en otras cuestiones* coo lo puede ser +3,0 ? i$ura @. <structura $eneral de polihidroxialcanoatos.
Bioproceso para la produccion de polohidroxybutirato mediante R. eutropha.
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Los polihidroxialcanoatos (PHA) son polésteres de varios hidroxialcanoatos sintetizados porlo enos de !" especies distintas de #acterias $ra%positivas y $ra%ne$ativas. PHA puede
representar hasta un &' del peso seco de la #ioasa y se acuula cuando la #acteria seencuentra #ao condiciones de estrés* sirviendo coo reserva de car#ono. +1, -e puedenclasicar de la si$uiente anera +/,0
• Lon$itud de cadena corta0 tiene oneros desde C2 hasta C"• Lon$itud de cadena ediana0 oneros entre C3 hasta C14• Lon$itud de cadena lar$a0 poseen 5s de C14
Los hoopolíeros de poly(2%hidroxi#utirato) (PH6) son los ie#ros principales a PHAse$uidos por poly(2%hidroxivalerato) (PH7). PH6 con una 8rula $enérica coo vista en lasi$uiente ia$en +2,0
Las #acterias 9ue la producen re9uieren de :ltiples condiciones para poder producirPHA* sin e#ar$o; $eneralente se clasican en #ase a los re9ueriientos del cultivo* loscuales son +4,0
• Liitacin de nutriente esencial coo lo es nitr$eno* 8os8ato* a$nesio o sul8ato en
un entorno con exceso de car#ono. <eplos de ellos son Alcaligenes eutrophus(Ralstonia eutrophus) o Protomonas extorquens
• =o liitacin de nutriente esencial en particular. 6acterias con estas característicaspueden acuular el políero durante su creciiento; eeplos de ello son E. coli
reco#inante o Alcaligenes latus
Con relacin a las características particulares del pl5stico +",0
• -on teropl5sticos• 6iode$rada#les• Pueden ser 9ue#radizos (8r5$iles) o el5sticos• >ienen un peso olecular entre /'*''' hasta 2'*'''*''' daltones• -on hidro8#icos y son no%perea#les a $ases• Los oneros 9ue lo constituyen son 9uirales
PH6 tiene el ayor potencial para poder ser aplicados en una variedad de productos*dado las características previaente encionados; puesto a 9ue se aseean ucho a losde los pl5sticos derivados de petrleo. =o o#stante* no se liita a la sustitucin de pl5sticosderivados de petrleos* ya 9ue el ori$en del políero les perite ser utilizado en otrascuestiones* coo lo puede ser +3,0
• aterial para epa9ues0 5s 9ue nada* se utiliza en cuestiones coo #olsas decopras* contenedores* en productos desecha#les coo lo pueden ser rasuradoras*utensilios entre otros. Asiiso* #ras de PH6 con una alta 8uerza de tensin se$eneraron tras un proceso de cristalizacin isotérica cerca de la teperatura parala transicin de vidrio; con aplicaciones proetedoras
• aterial para @plantes 6ioédicos0 se han utilizado para $enerar utensilios coosuturas y sus suetadores* tornillos* placas para huesos* alla 9uir:r$ica* #arreras deadhesin entre oros. -e ha o#servado 9ue estos pl5sticos periten 9ue se ten$a una8avora#le repuesta ec5nica y haya #iocopati#ilidad
• Coo portadores de edicaentos para su transporteBli#eracin0 $eneralente seusan políeros de lactato y $licolato; sin e#ar$o* son de$radados por hidrolisis porlo 9ue no se puede controlar de todo la li#eracin del 85raco. Con PH6* sine#ar$o* se ha o#servado se pueden usar atrices copriidas 9ue siplica elprocesaiento ientras 9ue el increentar la asa olecular del políero causa unincreento so#re la velocidad de li#eracin de sul8aetotixol
• 6ioco#usti#le0 2H6< (2%hidroxi#utirato etil ester) y 2HA< (cl 2%hidroxialcanoato etil ester) son $enerados a partir de la estericacin de PH6 y cl
PHA. <l calor de co#ustin de las ezclas de estas sustancias con diésel o $asolinason enores 9ue las de diésel o $asolina puras; no o#stante* si se ezcla con etanollos calores auentan hasta tener entre 2'%2" DB$ respectivaente
1./ E#etivo y Dusticacin del Producto de @nterés
<l uso de PH6 perite atacar tres pro#leas principales actuales0 reducir dependenciaso#re el petrleo para la produccin de ateriales pl5sticos* reduccin de eisiones de CE/
al i$ual 9ue prote$er el edio a#iente. Asiiso* su potencial aplicacin coo#ioco#usti#le puede evitar pro#leas de usar alientos para la $eneracin del iso osino recursos para poder crecerlos (suelo* 8ertilizantes* entre otros). +!,
<ntre las raas de aplicacin* se encuentran industria de0 ateriales* co#usti#les yédicas coo las 5s iportantes.
1.2 Antecedentes
<n 1&/!* Leoi$ne extrao de Bacillus megaterium do coponentes* de los cuales asuía9ue era un producto de la hidrlisis de P(2H6); y copro# posteriorente 9ue a#oscopuestos eran polihidroxi#utirato* solo 9ue tenían di8erentes pesos oleculares. +F,
Para 1&"'* ha#ía sucientes estudios coo para poder su$erir 9ue la acuulacin deP(2H6) en Bacillus spp. sirve coo una reserva intracelular de car#ono; asiiso* estaparticularidad era co:n en #acterias $ra%ne$ativas. -in e#ar$o* se asuía 9ue 2%
hidroxi#utirato era el :nico hidroxialcanoato (HA) para esta nalidad; hasta 9ue en 1&!4Gallen y ohIedder identican los hidroxialcanoatos 2%hidroxivalerato (2H7) y 2%hiddroxihexanoato (2HHx). +&,
La identicacin de otros HA tiene un ipacto si$nicante so#re la investi$acin yaplicaciones del políero* ya 9ue se pueden odicar sus propiedades cuando se realizanezclas. @ndustrialente ha#lando* 2H6 y 2H7 8ueron de los prieros en ser producidos enla década de los F'; sin e#ar$o* P(2H6) tiene eores propiedades téricas. ?ue duranteeste periodo en el cual no solo se realiza#a una produccin a escala industrial* sino 9ue
ta#ién se realiza#a produccin en plantas trans$énicas al i$ual 9ue la identicacin de las:ltiples rutas eta#licas involucradas en sus síntesis. +1',
A principios del /'''* la in8oracin o#tenida de :ltiples or$anisos con la nalidadde poder cepas reco#inantes e8ectivas para la $eneracin del políero. Por lo $eneral*para poder realizar las investi$aciones se utilizan Azotobacter * Rhizobium*
Methylobacterium y Alcaligenes. +11,
2. Análisis de Oferta y Demanda
Je acuerdo con la Asociacin =acional de @ndustrias del Pl5stico (A=@PAC)* en el aKo /'11*éxico aport el / de la produccin undial de pl5stico con ".2 illones de toneladasanuales* exportando 1./ illones de toneladas de éstas* lo 9ue corresponde al 22 de laproduccin local* ayoritariaente a <stados Unidos* y Canad5* y en enor cantidad apaíses coo Colo#ia* Chile* uateala* 7enezuela* 6rasil* Costa ica y uateala. Porotra parte* se iport en el iso aKo /.&2 illones de toneladas; toando en cuenta la
ci8ra anterior* éxico tiene $randes oportunidades de ne$ocio para la produccin depl5sticos* ya 9ue estas oportunidades para los proveedores de pl5stico en éxico crece alsustituir el de las iportaciones. Los principales estados 9ue re$istran la ayor produccinde pl5stico son el <stado de éxico* Dalisco* =uevo Len* Pue#la y el Jistrito ?ederal. +1,+/,
<l consuo de los ".2 illones de toneladas de pl5stico* producidas en el /'11 enéxico* se dividi en di8erentes sectores. Por otra parte* los principales 8a#ricantes deartículos de pl5stico se encuentran u#icados en di8erentes partes de la ep:#lica con untotal de /*!'' acro y icro epresas* por lo 9ue la u#icacin ptia para esta#lecer unaepresa sería en un punto estraté$ico cerca de éstas entidades para así ahorrar $astos deenvío a distancias lar$as. +1,+2,
Para poder calcular el coeciente de la o8erta es necesario o#tener el consue histrico* por
lo 9ue se utilizaron los datos de la $ura 2 los cuales* des$losa la produccin del pl5stico enéxico del aKo /''3 al /'11* así coo el increento de produccin en porcentae de estesector en el ercado. <l coeciente de deanda tiene un valor de 1'/*142 toneladas. +2,
-e realizaron encuestas (7er $ura4.) en el @><- C< con el n de o#tener el an5lisis deercado de los #iopl5sticos. <l taaKo de la uestra 8ue de /' personas* toando encuenta los resultados o#tenidos se calcul el coeciente de conanza el cual es de 1'.'".
?i$ura /. Principales 8a#ricantes de pl5stico a nivel re$ional.
?i$ura 2. <volucin del ercado de pl5sticos en éxico /''3%
Porotra parte* con los datos o#tenidos de las encuestas y toando en cuenta los datos 5srecientes (/'11) toados del Centro <presarial del Pl5stico se pudo calcular 9ue elconsuo per capita es de /3"*''' il toneladas por persona al aKo* con una deanda esde 3F4./FF illones de toneladas por epresa y nalente se o#tiene una o8erta de"*2''*'''
%.
Caracter$sticas &enerales del 'istema (ioló#ico Em)leado *Ralstonia eutropha+
?i$ura 4. Pre$untas 9ue 8ueron incluidas en la encuesta realizada en el
Ralstonia eutropha (conocido previaente con Alcaligenes eutrophus) es una #acteria $ra%ne$ativa 9ue no $enera esporas y $eneralente se encuentra #ao la presencia de variosetales pesados (entre los cuales estas zinc* cadio* co#alto* ercurio* ploo y croo). +1, >iene un di5etro aproxiado de '.3 M y posee varios 8la$elos para 9ue pueda
ovilizarse. +/,
Puede utilizar varios sustratos coo 8uentes de car#ono* de lo contrario la #acteria esoxidante del hidr$eno; puesto a 9ue es 9uiiolittro8o. +2, Asiiso* puede crecer #aocondiciones anaero#ias #ao la presencia de nitr$eno. +4,
<ntre sus posi#les aplicaciones y usos* se encuentran las si$uientes +", +3,0
• Uso en #iorreediacin de#ido a 9ue puede de$radar :ltiples copuestoscloroaro5ticos
• Jesarrollo de pl5sticos #iode$rada#les• @nvesti$acin con relacin a puricacin de proteínas usando R. eutropha de#ido a
9ue tiene la ha#ilidad de $enerar su propia atriz de anidad• Capacidad de desarrollo a #ase de hidro$eno perite la posi#ilidad de 9ue $enere
eta#olitos y políeros a partir de ello
2./ pH Nptio
P. Chara#orty y cola#oradores realizaron un experiento en el cual se veía cual era ele8ecto de alientacin interitente o continua para la produccin de PHA por parte de R.
eutropha; de lo cual denotan 9ue el pH 9ue utilizaron para el creciiento en el edio yasiiso en el reactor; era de !.'. +!, -iilarente* Azhar* A#delhady y cola#oradoresinvesti$aron los di8erentes tipos de produccin so#re el rendiiento de la $eneracin dePH6; de lo cual especicaron 9ue el pH de los edios de#ía de ser de !.'. +F,
2.2 >eperatura Nptia
<n la investi$acin realizada por P. -in$h y =. Parar* o#servaron el e8ecto de teperaturaso#re el creciiento de cultivos; particularente so#re P. oleovorans* R. eutropha y B.
megaterium. -e crecieron tanto a 2'OC (A) y a 2!OC (6) en un edio de L6. -e o#tuvo losi$uiente +&,0
Ca#e encionar 9ue en este caso particular estos edios 8ueron utilizados en#iorreactores de entre /%2 litros. Asiiso* para poder 8oentar el creciiento de célulasprevio a la $eneracin del políero* se utiliz un edio enri9uecido el cual contenía extractode levadura (1'$Blitro)* polipeptona (1' $Blitro)* extracto de carne (" $Blitro) y sul8ato deaonio (" $Blitro); el cual 8ue usado para la operacin de lote alientado. +11,
2." 6alanceo del edio de Cultivo a <plear
Coo previaente encionado* se de#e de utilizar un edio des#alanceado para poder$enerar la produccin de PHA; no o#stante* no si$nica 9ue de#a de estar ausente en sutotalidad el otro nutriente.
<n #ase a los edios coentados en el inciso anterior* se puede o#servar una relacinCB= de 1F.F"! para el edio @@ ientras 9ue para el edio @@@ se o#tiene un valor de &.4/F.
-in e#ar$o* Ran$* 6ri$ha y cola#oradores han encionado otras relaciones CB= 9ue8oenta una ayor $eneracin de PH6; coo lo sería con un valor de 4' u F'. Sste :ltio
$enera el 5xio porcentae de PHA* sin e#ar$o* $enera uy #aas densidades celulares*por lo 9ue eor recoiendan un valor de CB= i$ual a 4'. +1/,
Aun9ue se pueden liitar otras sustancias* coo lo puede ser el 8s8oro y el azu8re;$eneralente se liita el nitr$eno.
2.3 A$itacin
Tiem)oTiem)o
?i$ura. Creciiento a 2'OC y a 2!OC. Ralstonia eutropha
-e estipula un valor de !"' rp* pero es de acuerdo al experiento realizado por Azhar ycola#oradores. +12, -iilar a ese valor; Chara#orty* uthuuarappan y i##onsutilizaron una a$itacin de "'' rp; por lo 9ue se podría esperar 9ue el valor de la a$itacinreside entre estos valores aproxiadaente. +14,
2.! Aireacin
<n varios reportes de investi$acin se ha reportado el uso del /' de saturacin conoxí$eno o sino entre 1"%/' litrosBin. +1", +13, -in e#ar$o* el icroor$aniso tra#aatanto de anera aero#ia coo anaero#ia* dependiendo de la disponi#ilidad en la cual seencuentra el nitr$eno en el entorno.
2.F Esotoleracia
2.& Concentracin de Exí$eno =o >olera#le
2.1' ?uentes de Car#ono y =itr$eno Alternativas 9ue se Pueden Utilizar
La 8uente de car#ono (en este caso) inVuye considera#leente so#re los constituyentes delPH6; de los cuales se pueden utilizar los si$uientes +,0
• olasa de caKa o #eta#el• Aceites de planta en conunto con 5cidos $rasos• Alcanos• Etros car#ohidratos sencillos
Jependiendo de su ori$en* es el tipo de ruta eta#lica 9ue inducen al icroor$aniso
,. -uta Metaólica
<n total hay ocho di8erentes rutas eta#licas para la síntesis de PHA; sin e#ar$o* para el
caso de R. eutropha; la ruta eta#lica característica del icroor$aniso es la ruta @. +1,(7er ?i$ura)
?i$ura . utas eta#licas para PHA. La ruta 5s sencilla y característica de R. eutropha es lapriera.
Las enzias involucradas con sus respectivas 8unciones en esta ruta particular son0
• W%Cetotiolasa (PhaA)0 dos unidades de acetil%CoA son condensados a acetoacetil%CoA• Acetoacetil%CoA reductasa dependiente de =AJPH (Pha6)0 reduce el previo producto*
$enerando un isero () de 2%hidroxi#utiril%CoA• PHA -intetasa (PhaC)0 realiza la síntesis del políero* utilizando oneros de 2%
hidroxi#utiril%CoA
La produccin del políero se de#e a 9ue la #acteria est5 reaccionando ante undes#alance en el creciiento* $enerado por una liitacin de nutrientes disponi#le con laexcepcin de la 8uente de car#ono* la cual se antiene en a#undancia. -e induce la síntesiscuando hay una deciencia de a$nesio* azu8re* nitr$eno 8os8ato y en ocasiones deoxí$eno. +/,
<l reactor* por otro lado* tiene la si$uiente estructura +/,0
<l proceso re9uiere de a$itacin para poderdisolver adecuadaente el oxí$eno presente en
el edio (/') ientras 9ue los controladoresde#en de antener en el ran$o las condicionesde teperatura y pH; ya 9ue son intervalosconsidera#leente pe9ueKos (\1OC y \'.! pH*respectivaente).
Por otro lado* la #ase cncava perite 9ue seextrai$a lo 5s posi#le de las sustancias y elproducto presente* evitando pérdidasinnecesarias al i$ual de 9ue es ucho 5s 85cil.+2,
!./ 7entaas y Jesventaas del eactor a Utilizar
Las ventaas 9ue presenta un reactor tipo lote es 9ue perite 9ue este hoo$éneo laezcla* tanto con respecto a las $radientes de teperatura al i$ual 9ue con lasconcentraciones de $ases y nutrientes. +4,
-in e#ar$o* ta#ién perite 9ue se vaya acuulando la $eneracin de desechos locual puede perudicar al icroor$aniso o por otro lado la concentracin de producto puedeser tal 9ue actué coo inhi#idor en al$unos casos. +",
Asiiso* la a$itacin; la cual perite 9ue haya hoo$enizacin de las sustancias;puede causar estrés a los icroor$anisos de#ido al es8uerzo cortante 9ue estos $eneran.
Coo tal* se trata de un tan9ue a$itado
!.2 -istea de Eperacin
<n los estudios realizados por Azhar* A#delhady y cola#oradores; se o#servaron lascondiciones de produccin en lote* lote de dos 8ases y lote alientado. Las condiciones decada uno 8ueron las si$uientes +3,0
• Lote0 pH de !.'* a teperatura de 2'OC con /' de E/ disuelto a una a$itacin de!"' rp
• Lote de dos 8ases0 inocular atraz con 1'' l de edio nutritivo incu#ados a 2'OCpor /4 h a 1"' rp. Posteriorente* se o#tienen las #acterias y se tra#aa en un#iorreactor de / litros #ao un a#iente liitado en nitr$eno
• Lote alientado0 uso de un #iorreactor de 2 litros; con voluen inicial de 1./ litros deedio con 3%! $raos de R. eutropha A>CC 1!3&!. <l pH se aust a !.'* con unavelocidad de a$itacin de !"' rp con /' de oxí$eno disuelto
<ntre los tres étodos epleados* se deterin 9ue el ayor rendiiento o#tenido parala produccin de PHA 8ue con el de lote alientado* usando una alientacin de pulso de'."! litrosBh y '.F litrosBh respectivaente; con concentraciones de '.'"& $Bh y '.'!/ $Bh de
$lucosa y sacarosa respectivaente. +!, La concentracin 5xia de PH6 o#tenida 8ue de1'."2 $Blitro; representando el 34."/ del voluen total epleado y tras un periodo de 23horas. <sto contrasta si$nicativaente con los si$uientes datos +F,0
• Lote0 después de F' horas* se o#tuvo una concentracin de PH6 de '.F' $Blitro* elcual representa el F.43 del contenido total
• Lote de dos 8ases0 después de 23 horas* se o#serva#a una concentracin delpolíero de F.11 $Blitro* siendo el 3'.2 del contenido
<n #ase a estos datos* lo eor es utilizar el reactor #ao lote alientado.
!.4 Condiciones de Eperacin
<n #ase a la operacin del punto previo* se utilizan las si$uientes condiciones para uncreciiento ptio del icroor$aniso y $eneracin del eta#olito en cuestin +&,0
• >eperatura0 se antiene a 2'OC* con una variacin de \1OC• pH0 auste inicial a ! con variacin \'.1•
A$itacin0 !"' rp• Exí$eno disuelto0 se antenía a /' por encia de la saturacin del aire
!." Coposicin del edio de Cultivo a <plear
5. Escalamiento
Para poder realizar un escalaiento exitoso* en este tipo de procediiento se tienen 9ueconsiderar varios par5etros coo son los dos Vuos de pulso de $lucosa y sacarosa para unreactor ?ed%6atch a$itad. -in e#ar$o* el pro#lea recae en las nuevas concentraciones enel reactor. -e realizaron los c5lculos considerando la deanda* la cual es la iportacin9ue éxico o#tuvo en el aKo /'11 de /* &/4*"'' toneladas lo 9ue e9uivale a /.&/4"<]1/$raos por aKo* por lo 9ue si se 9uiere satis8acer esta deanda se necesita1*2!1*/"3.21F litros por car$a. >oando en cuenta estos resultados* podeosconcluir 9ue los c5lculos no son los adecuados ya 9ue no existe un reactor con esacapacidad.
6. &rá7cas de modelado
Para realizar el odelado se utiliz el pro$raa 6ereley adonna* los cuales se o#tuvieronlas si$uientes $r5cas0
+F* 11, 7olova* >. (/''4.) T. Polyhy#roxyal$anoates% Plastic Material o& the '(st Century .
(pp.) =ova0 United -tates o8 Aerica. E#tenido el 3 de ayo de /'12 de0http0BB#oos.$oo$le.co.xB#oos^idYEzRdue?2Cbp$YPA/blp$YPA/bd9Yhistorical]aspects]o8]polyhydroxyalanoatesbsourceY#lbotsYLA32!`@d/bsi$Y_v<1d-&"GHrd8J?1?/zGF7'J@bhlYenbsaYbeiYDH/@UcG1=@''$D$RH@6Ibs9iY/bredirescYyvYonepa$eb9Yhistorical/'aspects/'o8 /'polyhydroxyalanoatesb8Y8alse
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/. An5lisis de E8erta y Jeanda
+1,Eportunidades de ne$ocio para proveedores de pl5stico en éxico.(/'1/). E#tenido el 3de ayo del /'1/ de0 http0BBIII.proexico.$o#.xBproveedoresBoportunidades%de%ne$ocio%para%proveedores%de%plastico%en%exico.htl
+/,Cantera* -. (/'1/). -u#e exportacin sector del pl5stico. E#tenido el 3 de ayo del /'12de0 http0BBIII.sie.$o#.xBsieBportalBnotieventosBasnoticias.asp^idY3/3!
+2, Conde* . (/'1/). Presente 8utro de la industria del pl5stico en éxico. E#tenido el 3 deayo del /'12 de0
2. Características enerales del -istea 6iol$ico <pleado (Ralstonia eutropha)
+1* 4* ", Ralstonia eutropha. (/'12.) T6acteria enoes. EMB)EB*. E#tenido el 2 de ayode /'12 de0 http0BBIII.e#i.ac.uB/canB$enoesB#acteriaBalstoniaeutropha.htl
+/* 2, adi$an* .>.* artino* D. et al. (/''&.) TCapitulo 2. La Jiversidad icro#iana0Joinio Bacteria* las Proteo#acterias. Broc$% Biologia #e los Microorganismos. Joceava<dicin. (pp.4"1%4"/.) Peason%Addison Gesley0 <spaKa.
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+!, Chara#orty* P.; uthuuarappan* . et al. (/'1/.) TPHA Productivity and Rield o8Ralstonia eutropha Ghen @nterittently or Continuously ?ed a ixture o8 -hort Chain ?attyAcids. -ournal o& Biome#icine an# Biotechnology . E#tenido el 4 de a#ril de /'12 de0http0BBIII.hindaIi.coBournalsB#riB/'1/B"'31"2B
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+/, -udesh* .; A#e* H. y Joi* R. (/'''). T-ynthesis* -tructure and Properties o8Polyhydroxyalanoates0 6iolo$ical Polyesters. Elsevier Progress in Polymer Science.E#tenido el 3 de a#ril de /'12 de0 http0BB43.2F.32.1&/BailBl$.php^doiY1'.1'13B-''!&%3!''('')'''2"%3burlYaH'cJovL/xpRdl#i"vccvc/=p#G?nyFxC4xJ</L1IJc"L>R2JAlUyEJAID>@1IJAz=-'/Ln6_$2J2J
". 6alanceo de la eaccin Principal
+1, =o#es* .A..; Durase* L. et al. (1&&&.) TroIth and inetics o8 in vitro poly(+,%(%)%2%hydroxy#utyrate) $ranules interpreted as particulate polyerization Iith coalescence.Macromolecular Rapi# Communications.
+/, Acetyl%CoA. (/'12.) Metacyc. E#tenido el 1 de 8e#rero de /'12 de0http0BB#iocyc.or$B<>AB=<G%@A<^typeYCEPEU=Jbo#ectYAC<>RL%CEA
+2, 2%Acetoacetyl%CoA. (/'12.) Metacyc. E#tenido el 1 de 8e#rero de /'12 de0http0BB#iocyc.or$B<>ABneI%ia$e^o#ectYAC<>EAC<>RL%CEA
+4, co%A%-H. (/'12.) Metacyc. E#tenido el 1 de 8e#rero de /'12 de0http0BB#iocyc.or$B<>AB=<G%@A<^typeYCEPEU=Jbo#ectYCE%A
+", (R)%2%hydroxy#utanoyl%CoA. (/'12.) Metacyc. E#tenido el 1 de 8e#rero de /'12 de0http0BB#iocyc.or$B<>AB=<G%@A<^typeYCEPEU=Jbo#ectYCPJ%3"'
+3, =AJPH. (/'12.) Metacyc. E#tenido el 1 de 8e#rero de /'12 de0http0BB#iocyc.or$B<>AB=<G%@A<^typeYCEPEU=Jbo#ectY=AJPH
+!, =AJP]. (/'12.) Metacyc. E#tenido el 1 de 8e#rero de /'12 de0http0BB#iocyc.or$B<>AB=<G%@A<^typeYCEPEU=Jbo#ectY=AJP
+F, Poly+()%2%hydroxy#utyrate,. (/'12.) Polysciences/ *nc.. E#tenido el 3 de ayo de /'12de0 http0BBIII.polysciences.coBCatalo$BJepartentBProductB&FBcate$oryid%%/F3Bpa$eindex%%1Bproductid%%F'FB
3. XO de la eaccin Principal
+1, Acetyl%CoA. (/'12.) Metacyc. E#tenido el 1 de 8e#rero de /'12 de0http0BB#iocyc.or$B<>AB=<G%@A<^typeYCEPEU=Jbo#ectYAC<>RL%CEA
+/, 2%Acetoacetyl%CoA. (/'12.) Metacyc. E#tenido el 1 de 8e#rero de /'12 de0http0BB#iocyc.or$B<>ABneI%ia$e^o#ectYAC<>EAC<>RL%CEA
+2, co%A%-H. (/'12.) Metacyc. E#tenido el 1 de 8e#rero de /'12 de0http0BB#iocyc.or$B<>AB=<G%@A<^typeYCEPEU=Jbo#ectYCE%A
+4, (R)%2%hydroxy#utanoyl%CoA. (/'12.) Metacyc. E#tenido el 1 de 8e#rero de /'12 de0http0BB#iocyc.or$B<>AB=<G%@A<^typeYCEPEU=Jbo#ectYCPJ%3"'
+", =AJPH. (/'12.) Metacyc. E#tenido el 1 de 8e#rero de /'12 de0http0BB#iocyc.or$B<>AB=<G%@A<^typeYCEPEU=Jbo#ectY=AJPH
+3, =AJP]. (/'12.) Metacyc. E#tenido el 1 de 8e#rero de /'12 de0http0BB#iocyc.or$B<>AB=<G%@A<^typeYCEPEU=Jbo#ectY=AJP
+!, Poly+()%2%hydroxy#utyrate,. (/'12.) Polysciences/ *nc.. E#tenido el 3 de ayo de /'12de0 http0BBIII.polysciences.coBCatalo$BJepartentBProductB&FBcate$oryid%%/F3Bpa$eindex%%1Bproductid%%F'FB
!. >ipo de eactor
+1* 3* !* F* &, <l%-ayed* A.A.; A#delhady* H.. et al. (/''&.) T6atch Production o8Polyhydroxy#utyrate (PH6) #y Ralstonia and Alcaligenes latus Usin$ 6ioreactor JierentCulture -trate$ies. -ournal o& Applie# Sciences Research. E#tenido el 11 de arzo de /'12de0 http0BBIII.aensiIe#.coBasrBasrB/''&B""3%"34.pd8
+/* 2, Jish 6otto >ans. (/'12.) Bel#ing. E#tenido el ! de ayo de /'12 de0http0BBIII.#eldin$tan.coBproductsBdish%#otto%tansBde8ault.htl
+4* ", eactor Jesi$n. (/''!.) E#tenido el ! de ayo de /'12 de0https0BBIII.$oo$le.coBurl^