PRESENTACION
Blg. Wilbetr Quispe Ziga. Docente de la asignatura Microbiologa
General a continuacin hago presente el siguiente informe de prctica
de laboratorio, identificacin de bacterias gran negativa y gran
positiva. De gran importancia en Microbiologa porque permite
diferenciar dos grandes grupos de bacterias (Gram+ y Gram-), segn
se comporten ante esta tincin. El fundamento radica en la diferente
estructura de la pared celular de ambos grupos: las bacterias Gram+
tienen una gruesa capa de peptidoglicano en su pared, mientras que
las bacterias Gram- tienen una capa de peptidoglicano ms fina y una
capa lipopolisacardica externa. Tras la tincin con el primer
colorante (Cristal violeta) se efecta un lavado conetanol que
arrastrar al coloranteslo en las Gram (-), mientras que en lasGram
(+) elcolorante queda retenidoy las clulas permanecern azules. Las
clulas Gram (-) se teirn despus con un colorante de contraste
(safranina) para que puedan observarse.
Hago presente este trabajo para su calificacin y revisin y haber
cumplido con sus expectativas el presente informe.
IDENTIFICACION DE BACTERIAS GRAN POSITIVAS Y GRAN NEGATIVAS
I. INTRODUCCINEl tamao de la mayora de las clulas bacterianas es
tal que resultan difciles de ver con el microscopio ptico. La
principal dificultad es la falta de contraste entre la clula y el
medio que la rodea. El modo ms simple de aumentar el contraste es
la utilizacin de colorantes.Si se desea simplemente aumentar el
contraste de las clulas para la microscopa, son suficientes los
procedimientos que usan un solo colorante llamado de tincin simple.
Sin embargo, a menudo se utilizan mtodos que no tien de igual modo
todas las clulas, es el proceso denominado tincin diferencial. Uno
muy usado en microbiologa es la tincin Gram. Basndose en su reaccin
a la tincin Gram, las bacteras pueden dividirse en dos grupos:
grampositivas y gramnegativas. Esta tincin tiene gran importancia
en taxonoma bacteriana ya que indica diferencias fundamentales de
la pared celular de las distintas bacterias.Mientras que las
bacterias gramnegativas son constantes en su reaccin, los
microorganismos grampositivos pueden presentar respuestas variables
en ciertas condiciones (son gramlbiles). Por ejemplo, los cultivos
viejos de algunas bacterias grampositivas pierden la propiedad de
retener el cristal violeta, y en consecuencia, se tien por la
safranina apareciendo como gramnegativas. Anlogo efecto se produce
en ocasiones por cambio en el medio del organismo, o por ligeras
modificaciones en la ejecucin de la tcnica. Por este motivo, es
preciso atenerse, en la prctica, al procedimiento establecido.Para
explicar el mecanismo de la tincin de gram se han propuesto varias
hiptesis fundadas en la naturaleza qumica de las paredes celulares
de los microorganismos.
OBJETIVOS:Reconocer los microorganismos Gram positivas y
negativas, al igual de las aplicaciones de los reactivos.Observar
la morfologa bacteriana y aprender a distinguir los distintos tipos
de agrupaciones que existen, y su clasificacin segn el tipo de
tincin Gram. Comprender los pasos necesarios para realizar la
tincin de Gram. Identificar las bacterias GRAM + y GRAM 1.
MATERIALES Y REACTIVOS
Materiales
Placas Petri Hisopos Portaobjeto Mechero Goteros Guantes
quirrgicos Aza de siembra
Muestras: Hgado de pollo pescado huevo naranja Reactivos:
Cristal de violeta Lugol Alcohol acido safranina Azul de Metileno
Agua destilada
Equipo: Microscopio2. PROCEDIMIENTO:
Codificar las muestras que se observa. Rotular sobre la lmina
portaobjeto el cdigo de la muestra. Colocar cada muestra en sus
respetivas placas Petri y adicionarle solucin fisiolgica.
Esterilizar la aza de siembra Con la aza de siembra realizar un
extendido fino de la muestra sobre la lmina portaobjetos. Secar el
extendi en condiciones naturales. Flamear el extendido hacindola
pasar 2 o 3 veces, de forma rpida de forma rpida, por encima de la
flama. Coloreara) Colorear el frotis previamente fijado con cristal
de violeta x un minutob) Lacar a chorro de agua destilada
moderadoc) Aplicar lugol sobre la muestra coloreada y esperar por 3
minutod) Volver a lavar con agua de chorro moderada.e) Decolorar
brevemente con alcohol por 3 minutos.f) Repetir el lavado.g)
Aplicar la fucsina como colorante de contraste por 3 minutos.h)
Lavar por ltima vez con agua destilada.i) Secar la lmina coloreada
al medio ambiente.j) Observar al microscopio a 100X, pero
previamente colocar una gota de aceite de inmersin sobre el frotis
coloreado. Identificar el tipo de bacteria observada por el
microscopio con sus respectivas codificaciones.
PROCEDIMIENTO GRAFICO.
Materiales de trabajo
Frotis de mestra
Observando por el microscopio la muestra
Identificacin de bacterias gran negativas y gran positivas
FUNDAMENTOS ENCONTRADOSEl imperceptible tamao de las bacterias y
otros microorganismos as como la dificultad para observarlas en
detalle con el microscopio ptico por causa de la falta de contraste
que existe entre estos, debido a que son usualmente transparente en
el medio que les rodea; hizo que se crearan mtodos para poder
apreciarlas, siendo los mtodos ms sencillos el de fijacin y tincin,
iniciados por Paul Ehrlich y Robert Koch, los que permitieron a los
microbilogos distinguir muchas caractersticas estructurales
normalmente vistas as el uso de colorantes, es el medio ms simple
de aumentar el contraste. Estos pueden utilizarse para distinguir
entre distintos tipos de clulas o para apreciar la presencia de
algunos elementos celulares, como flagelos, esporas, cpsulas,
paredes celulares, mitocondrias, ncleos, membranas celulares,
etc.Existen numerosos colorantes, y en su mayora son compuestos
orgnicos naturales que tienen alguna afinidad especfica por los
materiales celulares. Los colorantes que se utilizan usualmente son
molculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con
intensidad con los componentes celulares cargados negativamente,
tales como los cidos nucleicos y los polisacridos (azul de
metileno, el cristal violeta y la safranina); otros colorantes son
molculas cargadas negativamente (aniones) los que se combinan con
los elementos celulares cargados positivamente, como son las
protenas (Eosina, la fucsina cida y el rojo Congo). Existe otro
grupo de colorantes conformado por sustancias liposolubles.
TIPOS DE COLORACIONESCOLORACION SIMPLELas tinciones se basan en
la utilizacin de colorantes que pueden clasificarse como naturales
o sintticos. Los naturales se utilizan principalmente con fines
histolgicos.La mayor parte de los colorantes que se utilizan para
teir bacterias son sintticos, muchos de ellos son las anilinas y
los derivados del benceno.
TINCION GRAMLa tincin de Gram es uno de los mtodos de tincin ms
importantes. Su aplicacin prctica es innegable sobre todo en el
trabajo microscpico de rutina; las referencias a la morfologa
celular bacteriana (cocos, bacilos, espirilos, negativos y
positivos) se basan precisamente en la tincin de GRAM*
Esta tcnica de coloracin de contraste fue descubierta por Hans
Christian Gram en 1884, la reaccin de Gram puede variar con el
tiempo del cultivo y el pH del medio. La capacidad de las clulas
para captar la coloracin Gram solo es aplicable en bacterias, el
fundamento de la tcnica se hace con base en las diferencias entre
las paredes celulares de las bacterias Gram positivas y Gram
negativas. La pared celular de las bacterias Gram positivas, posee
una gruesa capa de peptidoglucano, adems de dos clases de cido
teicoico. Anclado en la cara interna de la pared celular y unido a
la membrana plasmtica, se encuentra el acodo lipteicoico y en la
superficie, el cido teicoico que est anclado solamente en el
peptidoglucano. Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las
Gram negativas es delgada, y se encuentra unida a una segunda
membrana plasmtica exterior (de composicin distinta a la interna)
por medio de lipoprotenas. Tiene una capa delgada de peptidoglucano
unida a una membrana exterior por lipoprotenas La membrana exterior
est hecha de protena, fosfolpido y lipopolisacrido (que se
encuentra en la cara externa de la membrana externa de este tipo de
bacterias).
EL PEPTIDOGLUCANO es el material que confiere su rigidez a la
pared celular bacteriana, y las Gram positivas lo poseen en mucha
mayor proporcin que las Gram negativas. Por lo tanto, ambos tipos
de bacterias se tien de manera distinta debido a estas diferencias
de su pared.
La diferencia en la resistencia a la decoloracin, es debido a
que la membrana externa de las Gram negativas es soluble en
solventes orgnicos, como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona.
La capa de peptidoglucano que posee es demasiado delgada como para
poder retener el complejo de cristal violeta/yodo que se form
previamente, y por lo tanto este complejo se escapa, perdindose la
coloracin azul-violcea. Pero, las Gram positivas, al poseer una
pared celular ms resistente y con mayor proporcin de
peptidoglucano, no son susceptibles a la accin del solvente
orgnico, sino que este acta deshidratando los poros cerrndolos, lo
que impide que pueda escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y
manteniendo la coloracin azul-violcea.
En este mtodo de tincin, la extensin bacteriana se cubre con
solucin de uno de los colorantes de violeta de metilo, que se deja
actuar durante un lapso determinado. Se escurre luego el exceso de
violeta de metilo y se aade luego una solucin de yodo, que se deja
durante el mismo tiempo que la anterior; despus se lava el
portaobjetos con alcohol hasta que ste no arrastre ms colorante.
Sigue a tal tratamiento una coloracin de contraste, como safranina,
fucsina fenicada diluida, pardo Bismarck, pironin B o hasta
inclusive verde de malaquita
Un microorganismo grampositivo debe presentar una pared celular
sana, si sufre dao de la pared por una u otra causa, se vuelve
gramnegativo. Esto indica la importancia de la pared para la
retencin o el escape del colorante.Varias son las teoras para
explicar el mecanismo de la tincin de Gram:
EARN Y STEARN (1923) establecen que es una combinacin qumica
entre el colorante y las protenas de las bacterias, ambos
investigadores comprobaron que la reaccin de tincin de las
bacterias obedece en gran parte a su contenido protenico; estos
microorganismos se conducen como cuerpos anfteros, al combinarse
con colorantes cidos en soluciones cidas y los bsicos en medio
alcalinos. La combinacin con ambos tipos de colorante no se produce
en el punto isoelctrico. Como los microbios contienen ms de una
protena, ese punto no tiene un valor preciso y definido, sino que
constituye ms bien una gama o escala que comprende dos o tres
unidades de pH. Segn estos investigadores, los grmenes
grampositivos tienen una escala isoelctrica de pH inferior a la de
los grmenes gramnegativos; y, a base de sus experimentos deducen
las siguientes conclusiones:1. Los microorganismos grampositivos
pueden hacerse gramnegativos al aumentar la acidez.2. Los
microorganismos gramnegativos pueden hacerse grampositivos al
aumentar la alcalinidad.3. Los microbios de reaccin positiva a los
colorantes cidos pueden hacerse gramnegativos por aumentar la
alcalinidad.4. Los microbios de reaccin positiva a los colorantes
bsicos pueden hacerse gramnegativos por aumentar la acidez.5. En la
zona isoelctrica caracterstica de cada especie es muy escasa la
tendencia a retener cualquier colorante.6. Parece estar bien
demostrado que las protenas de las bacterias no son simples, sino
una dbil combinacin de sustancias protenicas con otras lipoideas o
grasas.7. La materia grasa extrada de los microorganismos
grampositivos difiere de la obtenida de los microbios
gramnegativos, en que la primera contiene una proporcin mucho mayor
de cidos no saturados que muestren gran afinidad por los agentes
oxidantes. Todos los mordientes (como el yodo) empleados en la
coloracin Gram son oxidantes; su efecto, consiste en dar a la
sustancia oxidada un carcter ms cido. Esto aumenta la afinidad de
un microorganismo por los colorantes bsicos.8. El cambio de
respuesta a la coloracin de Gram con el tiempo es propio, sobre
todo, de los microorganismos dbilmente grampositivos cultivados en
los medios que contengan sustancias capaces de fermentar, y cuya
reaccin se vuelve cida en el curso del desarrollo.
GIANNI (1952) comprob que los microorganismos grampositivos
Bacillus subtilis y B. anthracis tomaban negativamente el Gram
cuando los cultivos correspondan a periodos de dos a tres horas.
Luego se desarrollaba la sustancia grampositiva debajo de la pared
celular, para invertir la reaccin.
Otra explicacin de la reaccin de Gram puede ser la posible
existencia de una capa exterior alrededor de un ncleo
gramnegativo.
LIBENSON Y MCLLROY, han comunicado que si la reaccin
grampositiva depende de que se forme una combinacin compleja entre
los componentes de la coloracin de Gram y las protenas de la pared
celular, sera de esperar que las bacterias desintegradas por medios
fsicos retuviesen este tinte, ya que ese tratamiento no podra
cambiar el carcter qumico de los materiales de dicha pared. Por el
contrario, los grmenes grampositivos desintegrados pierden su
capacidad de retener el colorante primario y toman negativamente el
Gram.
La pared celular de las bacterias grampositivas y gramnegativas
es permeable al violeta cristal. Sin embargo, la de las primeras no
lo es al complejo de yodo y colorante formado en el interior de la
clula. Los resultados experimentales obtenidos con una difusin
celular exenta de protenas, y la escasa solubilidad del complejo de
yodo y violeta cristal en alcohol y acetona, parecen sustentar la
opinin de que la reaccin grampositiva consiste en la formacin,
dentro de la clula, de una cantidad apreciable de complejo de yodo
y colorante difcil de eliminar con el disolvente. La pared celular
de las bacterias grampositivas, a diferencia de la de las
gramnegativas, sera prcticamente impermeable al violeta cristal.
Los microorganismos aparecern teidos despus de tratarlos con
violeta cristal, por ser absorbido el colorante en la superficie
externa de la pared celular, y el disolvente eliminar sin
dificultad el complejo formado despus del tratamiento con yodo.
LIBENSON Y MCLLROY han sostenido que la permeabilidad de la
pared celular al violeta cristal, la escasa solubilidad del
complejo de yodo y colorante en alcohol y acetona, y el libre
acceso del disolvente al complejo constituido, son los principales
factores que intervienen en el mecanismo de esa coloracin.
Las bacterias resistentes a la tincin Gram son Mycobacterias,
Micoplasmas, formas L, Protoplasmas y esferoplastos
El primer paso en cualquier tincin debe ser siempre la fijacin
con calor. Posteriormente el cristal violeta penetra en todas las
clulas bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas).El
lugol est formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de
potasio), el cual est presente para solubilizar el yodo. El yodo
entra en las clulas y forma un complejo insoluble en solucin acuosa
con el cristal violeta.La mezcla de alcohol-acetona que se agrega,
sirve para realizar la decoloracin, ya que en la misma es soluble
el complejo yodo/cristal violeta. Los organismos Gram positivos no
se decoloran, mientras que los Gram negativos s lo hacen. La funcin
del alcohol-acetona es la quitar el colorante de las bacterias, as
si la bacteria conserva el tinte, es Gram positiva y si el tinte no
se mantiene es Gram negativa.
Para poner de manifiesto las clulas Gram negativas se utiliza
una coloracin de contraste. Habitualmente es un colorante de color
rojo, como la safranina o la fucsina bsica. Despus de la coloracin
de contraste las clulas Gram negativas son rojas, mientras que las
Gram positivas permanecen azules.La safranina no es crucial para la
tcnica por lo que puede o no utilizarse. Sirve para hacer una
tincin de contraste que pone de manifiesto las bacterias Gram
negativas.Al trmino de la tincin, las Gram positivas se vern
azl-violceas y las Gram negativas, se vern rosas (si no se hizo la
tincin de contraste) o rojas (si se us, por ejemplo, safranina)Los
colorantes de p-rosanilina son los que mejores resultados dan en la
coloracin Gram. Los representantes ms usados de este grupo son
violeta de metilo y violeta cristal o de genciana. En realidad,
violeta de metilo es el nombre atribuido al compuesto
tetrametil-p-rosanilina.El matiz de color de la p-rosanilina se
intensifica al aumentar el nmero de grupos metilo en la molcula;
por consiguiente, de los tres grupos, el tono ms oscuro es la
hexametil-p-rosanilina (violeta cristal), y el tinte ms ligero, la
tetrametil-p-rosanilina (violeta de metilo). Los nombres violeta de
metilo 3R, 2R, R, B, 2B, 3B, etc., se refieren al nmero de grupos
metilo contenido. La letra R indica matices rojos, y la letra B,
tonos azules. El violeta de cristal contiene seis grupos metilo, y
se considera como el colorante primario mejor para teir por el
mtodo de Gram.
OJO La tincin de Gram es uno de los mtodos de tincin ms
importantes. Su aplicacin prctica es innegable sobre todo en el
trabajo microscpico de rutina; las referencias a la morfologa
celular bacteriana (cocos, bacilos, espirilos, negativos y
positivos) se basan precisamente en la tincin de GRAM*ESTRUCTURA
DEL PECTIDOGLUCANO
DIFERENCIA DE CAPAS DE PEPTIDOGLUCANO EN GRAM+ Y GRAM-
SISTEMA DE COLORACIN EN LAS BACTERIAS
FUNCION DE LOS COLORANTESSEGN Clavell, L.; Pedrique de Aulacio,
M. 1992.Productos que se utilizanReaccin y coloracin de las
bacterias
GRAM + GRAM -
1) Cristal violetaClulas color violetaClulas color violeta
2) Lugol solucin iodadaSe forma el complejo CV-I. Las clulas
continan teidas de color violeta.Se forma el complejo CV-I. Las
clulas continan teidas de color violeta.
3) AlcoholSe deshidratan las paredes celulares. Se contraen los
poros. Disminuye la permeabilidad. El complejo CV-I no sale de las
clulas que continan teidas de color violeta.Eliminacin por
extraccin de grasas de las paredes celulares. Aumenta la porosidad.
El complejo CV-I se separa de la clula.
4) SafraninaClulas no decoloradas; quedan teidas de color
violeta.Clulas decoloradas; se tien de color rosado.
SEGN Seely. H; Van Demark, P.DESVENTAJAS DE LA TECNICA DE
TINCION Segn Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992.existen
varios factores que pueden influir en la tincin de manera equivoca
los cuales son:
Requieren de fijar la muestra con calor provocando que las
clulas puedan morir. Calor + qumicos pueden distorsionar la forma
original de las clulas. Se ha encontrado que el mal uso de alcohol
acetona. Solucin decolorante para GRAM en la fase de decoloracin
puede llegar a decolorar los grmenes gram positivos. No diferencia
a Micobacterias(que poseen una envoltura externa cerosa y se
distinguen mediante la tincin de acidorresistencia) y los
Micoplasmas(carecen de peptidoglucano). Es importante controlar la
fijacin por el calor por que puede dar coloraciones errneas. El
agua altamente clorada puede debilitar la coloracin de
contraste.
Tincin cido alcohol resistenciaEsta tincin sirve principalmente
para clasificar micobacterias y actinomicetos, que tienen un alto
contenido en lpidos y en cidos miclicos y que no pueden ser
calificadas por la tincin de Gram. Para empezar se hecha sobre el
portaobjetos una mezcla de fucsina fenol, en la que la fucsina hace
de colorante rosa y el fenol de mordiente. Las clulas se tien de
rosa, tanto las cido alcoholes sensibles como las resistentes.
Despus se usa un decolorante orgnico que hace que las bacterias
cido alcohol sensibles se decoloren mientras que las cido alcohol
resistentes se quedan rosa. Como en la tincin de Gram se utiliza un
colorante de contraste que en este caso es el azul de metileno que
tie las clulas cido alcohol sensibles de color azul quedando las
clulas cido alcohol resistentes de color rosa.Figura
Composicin de la pared de las bacterias cido alcohol Resistentes
(AAR):Nos referiremos como bacteria modelo de este grupo al gnero
Mycobacterium.Adems del peptidoglicano, la pared celular de las
micobacterias contiene una gran cantidad de glicolpidos como el
complejo lipdico arabinogalactano y los cidosmiclicos, stos ltimos
son slo encontrados en Mycobacterium y Corynebacterium Spp. Esta
gran cantidad de lpidos hace que las bacterias AAR no se coloreen o
se coloreen mal con la coloracin de Gram.Para colorearlas, se
somete a las bacterias a una coloracin con Fucsina (colorante rojo)
con ayuda de calentamiento y luego que son teidas as, resisten la
decoloracin con una mezcla de alcohol cido. Esta gran cantidad de
lpidos de la pared, 10% del total del peso de la clula de
micobacterias, protege a la bacteria de la accin deletrea de los
componentes del fagolisosoma y, probablemente, sea esta la razn por
la que las micobacterias pueden sobrevivir dentro de los macrfagos.
Los componentes de la pared de las micobacterias tambin tienen la
capacidad de estimular al sistema inmune, tanto es as que se
utiliza para aumentar la produccin de anticuerpos cuando se inyecta
antgenos proteicos, o sea, se utiliza como adyuvante. El adyuvante
de Freund tiene como componente bsico, la pared micobacteriana.
MORFOLOGIA
A partir de la tincin de Gram pueden distinguirse varias formas
distintas:- Los cocos de forma esfrica. Pueden presentarse aislados
despus de la divisin celular (Micrococos), por pares (Diplococos),
formar cadenas (Estreptococos), o agruparse de manera irregular
(Estafilococos).- Los bacilos poseen forma alargada. En general
suelen agruparse en forma de cadena (Estreptobacilos) o en
empalizada.- Tambin pueden distinguirse los espirales, que se
clasifican en espirilos si son de forma rgida o espiroquetas si son
blandas y onduladas, si poseen forma decoma, - curvados, entonces
se les llama vibriones.
AGRUPACIONES
}CLASIFICACIN DE LAS BACTERIAS*
1. ESPIROQUETAS.Bacilos flexuosos en forma de espiral con
movilidad debida a un filamento axial y semejante a un sacacorchos.
Son Gram negativos.OrdenFamiliaGneroEspecie
SPIROCHAETALESSPIROCHAETACEAETREPONEMAT. Pallidum
BORRELIA
LEPTOSPIRACEAELEPTOSPIRAB. RecurrentisL. Interrogans
2. BACTERIAS GRAM NEGATIVAS AEROBIAS O MICROAEROFILAS
(VIBRIOIDES):Gnero CAMPYLOBACTER: Bacilos espirales curvados y
mviles Parsitos del hombre y animales.Especies: C. fetus, C. jejuni
y C. coliGnero HELICOBACTER. Especie: H pylori, agente productor
del Ulcus pepticum.
3. BACILOS Y COCOS GRAM NEGATIVOS AEROBIOS:Familia
PSUDOMONADACEAE.G. PSEUDOMONAS. Especie Pseudomonas
auruginosa.Bacilos gram negativos con flagelos polares. Producen
citocromo oxidasa.Familia MORAXELACEAE.G MORAXELLA. Especies: M.
lacunate, M catharralis. G ACINETOBACTER. Especie: A
baunannii.Familia XANTHOMONADACEAEG STENOTROPHOMONAS. Especie: S.
maltophilia.Familia BURKHOLDERIAG BURKHOLDERIA. Especie B.
cepaceaFamilia LEGIONELLACEAE.G. LEGIONELLA. Bacilos mviles de vida
libre. Patgenos para el hombre. Especie: L. pneumophila.Familia
NEISSERIACEAE.G. NEISSERIA. Cocos agrupados en parejas con las
zonas adyacentes planas. Especies patgenas: N. meningitidis, N.
gonorrhoeae.G. KINGELLA. K. kingae.Familia BARTONELLACEAE G
BARTONELLAFamilia BRUCELLACEAEG. BRUCELLA. Cocobacilos gram
negativos. Parsitos del hombre y animales.B. melitensis, B.
abortus.Familia BRADYRHIZOBIACEAEG AFIPIA. Especie: A. felisOtros
gneros de inters:G. FLAVOBACTERIUM: F. meningosepticum.G.
ALCALIGENES. A. faecalis.G. BORDETELLA. B. pertussis.G.
FRANCISELLA. F. tularensis.
4. BACILOS GRAM NEGATIVOS ANAEROBIOS FACULTATIVOS:F.
ENTEROBACTERIACEAE: Bacilos gram negativos no esporulados.
Fermentan la glucosa con formacin de cido o cido y gas. Reducen los
nitratos a nitritos y no poseen citocromooxidasa.Principales gneros
y especies tipo:G. ESCHERICHIA. E. coliG. SHIGELLA. S. dysenteriae,
S. sonneyG. SALMONELLA. S. entericaG. CITROBACTER. C. freundiiG.
KLEBSIELLA. K. pneumoniaeG. ENTEROBACTER. E. cloacae, E.
aerogenesG. SERRATIA. S. marcescensG. PROTEUS. P. mirabilisG.
YERSINIA. Y. enterocolitica, Y. pseudotuberculosis, Y. pestis
5. RICKETTSIAS Y CHLAMIDIAS:Microorganismos pleomrficos que
necesitan para su cultivo clulas vivas donde originan corpsculos de
inclusin.G. RICKETTSIA. R. prowazecki, R. connoriG. COXIELLA. C.
burnettiF. CHLAMYDIACEAE.G. CHLAMYDIA. C. trachomatis. C. psittaci,
C. pneumoniae
6. MYCOPLASMASCarecen de pared celular. Son los menores
microorganismos cultivables en medios sintticos.F.
MYCOPLASMATACEAE.G. MYCOPLASMA. M. pneumoniae, M. hominisG.
UREAPLASMA. U. urealyticum
7. COCOS GRAM POSITIVOS: Aerobios anaerobios facultativos.G.
MICROCOCCUS. M. luteus.G. STAPHILOCOCCUS. S. aureus, S.
epidermidis, S. saprophyticusG. STREPTOCOCCUS. S. pyogenes, S.
pneumoniaeG. ENTEROCOCCUS. E. faecalis. Otros
ESTREPTOCOCOS.Anaerobios estrictos:G. PEPTOCOCCUS. P. niger.G.
PEPTOSTREPTOCOCCUS. P. anaerobiusG. SARCINA
8. BACILOS GRAM POSITIVOS ESPORULADOS:G. BACILLUS. B.
anthracisG. CLOSTRIDIUM. C. tetani, C. boatulinum, C.
perfringens
9. OTROS BACILOS GRAM POSITIVOS:G. LISTERIA. L. monocytogenesG.
CORYNEBACTERIUM. Bacilos gram positivos. Tendencia a agruparse en
letras chinas. C. diphtheriaeG. ACTYNOMYCES. Forman hifas o
micelios rudimentarios. A. israeliiG. NOCARDIA. N. AsteroidesF.
MYCOBACTERIACEAE. Bacilos Acido-Alcohol-resistentes.G.
MYCOBACTERIUM. M. tuberculosis, M. leprae
CONCLUSIONES
Con los fundamentos encontrados podemos decir que en nuestra
practica se observaron bacterias gram positiva y gram negativas
teidas del color respectivo esto fue en la muestra de mucosa de
pollo no se pudo ver bien la morfologa pero se encontraron en forma
de cocos, estreptococos (en muestra de huevo), diplococos. Tambin
tuvimos muestra en la cual no se pudo ver ningn tipo de bacteria
entonces como dice nuestra bibliografa se pudo haber hecho mal el
frotis, se pudo lavar con mucha fuerza, entre otra causas de mala
practica de manejo.
BIBLIOGRAFA
http://es.slideshare.net/jujenio/la-tincin-de-gramhttp://es.slideshare.net/AlexandraSandovalVilches/tincin-de-gram-1?related=1http://es.slideshare.net/Mardj/prctica-2-tincin-de-gram?related=2http://es.slideshare.net/BenRivSil/proceso-tincin-de-gram-15572755?related=3http://es.slideshare.net/Mardj/prctica-2-tincin-de-gram?related=4http://es.wikipedia.org/wiki/Imagen:Mycobacterial_cell_wall_diagram.png
http://es.wikipedia.org/wiki/Peptidoglucano y Schlegel, 1997.
Microbiologa
generalhttp://www.nupedia.com/newsystem/upload_file/830/bilayer_micelle.png
UNIVERSIDAD NACIONALSAN ANTONIO ABAD DEL CUSCOFACULTAD DE
CIENCIAS AGRARIAS TROPICALESCARRERA PROFESIONAL:INGENIERA EN
INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
TEMA:INFORME DE PRCTICAS DE LABORATORIO IDENTIFICACION DE
TINCION GRAM (BACTERIAS GRAN POSITIVAS Y GRAN NEGATIVAS)
Asignatura: Microbiologa GeneralDocente: Blg. WILBERT QUISPE
ZUIGAintegrante: Alberto chicllasto choqqueQUILLABAMBA-2015