Page 1
Praktična nastava Mikrobiologija 2015/2016
Bojana Vasilijević
[email protected]
dr Stoimir Kolarević [email protected]
dr Ivica Dimkić [email protected]
Karolina Sunjog
[email protected]
Tamara Janakiev
[email protected]
Ivan Nikolić
[email protected]
Jovana Kostić
[email protected]
Marina Rajić Jovanović
[email protected]
Stefana Cvetković
stefanacvetkovic21@
gmail.com
Olja Stanojević
[email protected]
Page 2
Informacije o bodovanju
Ukupno poena na vežbama→20:
• prisustvo→pravo na jedan izostanak
• overa praktikuma→15 (5 vežbi po 3 poena)
• mikroskop test→5
Kolokvijumi (dva po 15 poena)→30
• I kolokvijum (25.04.2016.god.)
• II kolokvijum (02.06.2016.god.)
Usmeni deo ispita→50
Page 3
Šta nositi na vežbe
• Praktikum (kupuje se u studentskoj službi)
• Mantil
• Upaljač
• Permanentni marker
• Rukavice za vežbu bojenja !!!
• Papirnate maramice
Page 4
Bakterije
• Prokariotska ćelija
• 0,2-50 µm u dijametru
(Escherichia coli 1 x 2µm)
• Tipična eukariotska ćelija
je 2-200µm u dijametru
Najveći do sada poznati
prokariot: Thiomargarita
namibiensis ( 400-750 µm)
Page 5
Podela bakterija po obliku
• Koke (monokoke, diplokoke,
tetrakoke, streptokoke,
stafilokoke)
• Štapići (pojedinačni ili u
lancima)
• Spirile
• Spirohete
• Bakterije koje formiraju drške
• Filamentozne bakterije
Page 6
Mikroskopiranje
Objekti bliži od 0,2μm mogu se videti
razdvojeno upotrebom imerzionog
objektiva (100x)
Svetlosni mikroskop – koristi fotone vidljive svetlosti
za formiranje lika
-Objektivi suvog sistema
-Sistem uljane imerzije
Razdvojna moć svetlosnog
mikroskopa je 0,2μm, što znači da se
objekti koji su na manjoj razdaljini od
0,2μm ne mogu videti kao odvojeni
entiteti
Razdvojna moć zavisi od:
- Sistema sočiva
- Refraktornog indeksa sredine
- Talasne dužine svetlosti (plava svetlost
povećava moć razdvajanja)
Indeks prelamanja imerzionog ulja
1,51 ~ 1,52 indeks prelamanja stakla
Page 7
Pripremanje trajnih preparata
• Nanošenje materijala na mikroskopsku pločicu
sterilnom ezom i kružno razmazivanje
• Sušenje razmaza na vazduhu ili fiksiranje na
plamenu
Page 8
Podela bakterija po Gramu
Na osnovu bojenja po Gramu bakterije se
mogu podeliti na:
• Gram pozitivne (G+) – boje se ljubičasto
• Gram negativne (G-) – boje se crveno
Page 11
G+ štapici
Bacillus subtilis
mogu da formiraju
lance
Page 12
G- štapici
Escherichia coli
ne formiraju lance
Page 14
Endospore
• Formiraju se u unutrašnjosti ćelije
procesom sporulacije U
NEPOVOLJNIM uslovima
• Otporne su na niske i visoke
temperature, UV i X-zračenja,
hemijske agense
• Teško primaju boju i često ostaju
neobojene
• Mogu se formirati centralno,
subterminalno i terminalno u ćeliji
• Javljaju se kod rodova Bacillus i
Clostridium
Page 15
Endospore obojene po Šefer-Fultonu
Spora
(zelenkasta)
Vegetativna
ćelija (crvena)
Page 16
Kapsule (glikokaliks, sluzavi
omotač) – ekstracelularni polimeri
• Polisaharidna, ređe proteinska struktura koja formira
omotač oko ćelijskog zida
• Visok procenat vode, bez fiksiranja na plamenu
• Sprečava isušivanje, zaštita, služi za kačenje
(Streptococcus mutans), jonska i osmotska barijera
• Kod nekih faktor patogenosti
• Formiranje biofilmova
Page 17
Kapsule bojene po Giemsa-i
Bacillus anthracis
Ćelije plave,
okolina crvena
Kapsula –
neobojena zona
oivičena
crvenom linijom
Page 18
Kapsule bojene po Oltu
Bacillus anthracis
Kapsula – neobojena zona
Ćelije – crvene
Page 19
Bojenje po Ziehl - Neelsen
• Koristi se za bojenje
acidorezistentnih bakterija
• Crveno obojene štapićaste
ćelije (Mycobacterium tuberculosis)
Mycobacterium tuberculosis