Prakt Mikro Ddt

1. Gambaran koloni 2. Gram: Morfologi & sifat Gram 3. Mobility (pergerakan): medium semi-solid4. Reaksi Biokimia 5. Identifi kasi Makromoleul: - Deteksi Ag miroba - Deteksi Ab - Deteksi DNA/RNA

Koloni Bakteri Positif-Gram di atas Permukaan Lempeng Agar Nutrien (Nutrient Agar Plate)

Disediakan1.Lempeng agar nutrien2.Hasil biakan Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis pada lempeng agar nutrien

Sasaran PembelajaranSetelah selesai pembelajaran ini mahasiswa diharapkan sudah mampu:a.Menyebutkan ciri-ciri lempeng agar nutrienb.Menyebutkan ciri-ciri koloni Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis pada lempeng agar nutrien,c. Menggambarkan morfologi dari koloni Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis pada lempeng agar nutrient.

Nutrient Agar (NA) satu Basic Medium

Staphylococcus epidermidis diatas NA

Staphylococcus aureus pada NA

Bacillus subtilis di atas NA

Koloni Bakteri Negatif-Gram di atas Permukaan Bermacam-macam Lempeng Agar

Disediakan1.Lempeng agar MacConkey dan Salmonella Shigella (SS) agar2.Biakan Klebsiela spp, Escherechia spp, Aerogenes spp, Proteus spp, dan Pseudomonas spp di atas permukaan Lempeng Agar Mac Conkey, 3.Biakan Klebsiela spp, Escherechia spp, Aerogenes spp, Proteus spp, Pseudomonas spp , Salmonella spp dan Shigella spp di atas permukaan Lempeng Agar Nutrien, 4.Biakan Salmonella spp dan Shigella spp di atas permukaan Lempeng Agar Salmonella-Shigella (SS Agar)

MacConkey Agar

Salmonella shigella (SS) Agar

Escherechia coli pada MacConkey Agar

Escherechia coli pada NA

Klebsiella pada MacConkey Agar

Klebsiella pada NA

Koloni Aerogenes spp pada MacConkey Agar

Koloni Aerogenes spp pada NA

Koloni Aerogenes spp pada MacConkey Agar

Koloni Proteus spp pada NA

Koloni Pseudomonas spp pada NA

Koloni Pseudomonas spp pada MacConkey Agar

Koloni Salmonella pada SS Agar

Koloni Salmonella pada NA

Koloni Shigella pada SS Agar

Koloni Shigella pada NA

Disediakan1.Lempeng agar Sabouraud2.Hasil biakan jamur Species Candida dan Aspergillus pada lempeng agar Sabouraud.

Tujuan PembelajaranSetelah selesai pembelajaran ini mahasiswa diharapkan sudah mampu mengambarkan ciri-ciri medium serta ciri-ciri dan gambar koloni dua species jamur pada medium Sabouraud

Sasaran PembelajaranSetelah selesai pembelajaran ini mahasiswa diharapkan sudah mampu:1.Menyebutkan ciri-ciri lempeng agar Sabouraud.2.Menyebutkan ciri-ciri koloni species Candida dan Aspergillus pada lempeng agar Sabouraud,3.Menggambarkan morfologi dari koloni species Candida, dan Aspergillus pada lempeng agar Sabouraud.

Sabouroud Agar

Koloni Candida albicans pd Sabouroud Agar

Koloni Candida albicans pd Sabouroud Agar

Koloni As[ergillus spp pd Sabouroud Agar

Koloni As[ergillus spp pd Sabouroud Agar

Tujuan PembelajaranSetelah selesai pembelajaran ini mahasiswa diharapkan sudah mampu menjelaskan dan mengambarkan hasil beberap tes biokimia untuk bakteri positif dan negatif Gram.

Tujuan melakukan tes mannitolUntuk mengetaqhui apakah bakteri yang dites bisa meragikan mannitol atau tidak

Prinsip dari tes mannitolBila bakteri yang dites meragikan mannitol yang terdapat dalam medium, maka pH disekitar koloni akan berubah menjadi asam dan warna pH indikator dalam medium akan bwerubah menjadi kuning.

Disediakan1.Biakan bakteri yang meragikan mannitol dan yang tak meragikan mannitol pada mannitol salt agar2.Medium Mannitol salt agar

Mannitok Salt Agar

Reagen: H2O2

Oxidase Test Strip

Reagen: tetra-methyl-p-phenylene diamine oxalate 5 %

1. Reaksi pada TSI AgarTujuan Untuk melihat reaksi peragian gula-gula, pembentukan gas dari peragian glukosa, dan pembentukan H2S dari metabolisme protein

DisediakanBiakan pada TSI dengan reaksi : 1.Tabung 1: As/As G(+)H2S(-); Tabung 2: As/As G(-)H2S(+); Tabung 3: Alk/As G(-) H2S(+); Tabung 4: Alk/As G(+)H2S(-); Tabung 5: Alk/As G(-)H2S(-); Tabung 6: Alk/N.2.Medium TSI

TSI

Interpetasi

Slant

Butt Fermentatif

Oksuidatif Ketiga KH di

metaboisme secara oksidatif dan fermentatif

Glukose diragikan dgn menghskan gas

As/AsGas +H2S -

Interpetasi

Alk/AcidH2S positifGas negatif

2. Reaksi pada SIM agar

TujuanTes ini dilakukan untuk melihat hasil metabolisme protein (tryptophan) dan pergetrakan (motility) bakteri yang dites.

Hasil ahir dari protein (tryptophan) adalah H2S yang berbentuk gas dan indol.


SIM MEDIUM

Medium adalah agar semisolid Medium mengandung protein (tryptophan) , FeSO4 dan Na2S2O3,


+ -

a. Tes Indol

Prinsip tesBila tryptophan di metabolisme dan menghasilkan indol, kemudian ditetesi larutan Kovacs maka warna Kovacs akan berubah menjadi merah


+ -

Prinsip tesKarena H2S tak bisa dilihat maka ke dalam medium ditambahkan FeSO4 dan Na2S2O3, yang bila bereaksi dengan H2S akan menghasilkan Fe2S2O3 yang berwarna hitam.

b. Tes H2S


+ -

c. MotilityPrinsip tesMedium ini adalah medium yang semisolid (setengah padat) maka gerakan bakteripun bisa dilihat dengan memperhatikan pada pertumbuhan bakteri di tempat tusukan pada medium.

3. Tes Urease

Urea AgarMengandung: Agar Urea pH indikator

Tujuan melakukan tes ureaseAdalah untuk mengetahui apakah bakteri yang dites menghasilkan urease atau tidak.

3. Tes Urease

Prinsip dari tes ureaseBila bakteri yang dites menghasilkan urease, maka enzim mengkataliser urea dalam medium menjadi ureum yang bersifata alkalis, sehingga warna pH indikator berubah menjadi pink.

4. Methyl Red TestDisediakan1.Medium MR-VP2.Biakan pada MR-VP medium tes methyl rea positif dan negatif,3.Reagensia Methyl red

4. Methyl Red Test

Prinsip tesBila dihasilkan asam stabil maka bila ditetesi reagens methyl Red

Prinsip tesBila dihasilkan asam stabil maka bila ditetesi reagens Methyl Red warna berubah jadi merah; Bila tidak dihasdikan asam stabil, warna menjadi kuning.

Tujuan tesUntuk melihat dihasilkanya asam stabil metabolisme karbohidrat

5. Voges-Proskauer TestDisediakan1.Medium MR-VP2. Biakan Bakteri yang menghasilkan asam tak stabil dan yang menghasilkan asam stabil pada MR-VP medium 3.Reagensia α-naftol 5 % dan KOH 40%

5. Voges-Proskauer TestTujuan tesUntuk melihat dihasilkanya asam tidak stabil pada metabolisme karbohidrat

Prinsip tesBila dihasilkan asam tidak stabil maka bila maka asam tersebut akan diubah menjadi alkohol dan ahirnya menjadi acethyl methyl carbinol yang bila ditetesi α-naftol 5 %, kemudian dengan KOH 40% akan menimbulkan cincin berwarna merah lembayung.Jadi umumnya yang MR positif akan negatif pada VP test

6. Tes CitratTujuan tesUntuk melihat apakah bakteri yang dites mampu menggunakan citrat sebagai satu-satunya sumber karbon.

DisediakanBiakan yang bisa menggunakan dan yang tak bisa menggunakan citrat sebagai satu-satunya sumber energi pada medium citrat Medium citrat

6. Tes Citrat Prinsip TesBila bakteri yang dites mampu menggunakan citrat sebagai satu-satunya sumber carbon, maka bakteri tersebut bisa tumbuh di atas medium citrat dan mengubah pH medium, sehingga warna indikator pH dalam medium yang hijau berubah menjadi biru.

Tujuan TesUntuk melihat apakah bakteri yang dites meragikan glukosa atau tidak, dan bila meragikan apakah menghasilkan gas atau tidak.

7. Peragian Glukosa

Prinsip TesBakteri ditanam pada air pepton yang mengandung glukosa dan phenolptahalin sebagai indikator pH. Bila bakteri meragikan glukosa maka pH akan berubah menjadi asam dan warna indikator pH menjadi kuning. Dan bila peragian itu menghasilkan gas maka gas akan ditempung pada tabung Durham yang ada pada dasar tabung. Bila tak meragikan maka tak terjadi asam sehingga warna pH indikator tetap merah muda/pink.

7. Peragian Glukosa

D. MACAM-MACAM MEDIUM

a. Kelompok Medium DasarNutrient Medium

Agar Plate Agar Slant Broth

a. Kelompok Medium Dasar

Brain Heart Infusion Medium

Agar Plate Broth & Agar Slant

b. Kelompok Medium Differensial

TSI = Triple Sugar Iron Agar

Mengandung:Tiga KH: glikosa, laktosa & sukrosa Tryptophan FeSO4 dan Na2S2O3, pH indikator : pp Agar

b. Kelompok Medium Differensial

SIM Agar Citrat Agar

MacConkey Agar

c. Kelompok Medium Selektif DifferensialSelektif: tumbuh Bakteri Gram negatif krn mengandung ekstrak empedu yg menghambat tumbuh bakteri Gram positifDifferensial: membedakan yg meragikan laktose dp yg tidak meragikan krn mengandung laktose dan methyl red sebagai indikator

Salmonella shigella (SS) Agar

c. Kelompok Medium Selektif Differensial

Selektif untuk Salmonella & Shigella spp


Selektif untuk Vibrio spp → penampilan koloni beda untuk setiap spp


Tellurite medium

Tellurite: menghambat pertumbuhan bakteri Gram negatif.Pada kadar tertentu menghambat pertumbuhan semua gram positif kecuali Corynebacterium diphtheriae

d. Kelompok Medium Enrichment

Selenite medium

Entichment untuk Salmonella spp


Bile Broth MediumEnrichment untuk Salmonella dlm darah


Rappaport medium: enrichment medium untuk Salmonella-Shigella dalam faeces

Air pepton alkalis

Air pepton alkalis: enrtichment medium untuk Vibrio spp dalam faeces



Thyoglucolate medium: enrichment untuk bakteri anaerobik

e. Kelompok Medium Enriched

Blood Agar Plate = Lempeng Agar Darah

Blood Agar Base + Erythrocyt domba

e. Kelompok Medium Enriched

Chocoate Agar Plate: Blood agar yang di hemolysisi dgn remansasan 50oC

f. Kelompok Medium Transport

Carry and Blair Medium: untuk transport basil negatif Gram pada faeces

f. Kelompok Medium Transport

Stuart Medium: untuk bakteri Gram positif dan negatif pada nanah, apusan kapas lidi dll, kecuali specimen cair

Banyak dipakai untuk N. gonorrhoae

g. Kelompok Medium Khusus

Lowenstein-Jensen Medium: medium khusus untuk Mycobacterium tuberculosa, dibuat dari telur

g. Kelompok Medium Khusus

Loffler Medium: medium khusus untuk Corynebacterium diphtheriae, dibuat dari plasma/serum

Prakt Mikro Ddt

Documents