Prak. Tumbuh Kembang

8/16/2019 Prak. Tumbuh Kembang

1/31

Praktikum 5 :

A. Treponema

B. Cytomegalovirus

C. Rubella virus, Herpes virus


2/31

MEDICAL MICROBIOLOGY third edition (2004)

Cedric Mims


3/31

Diagnosa Laboratorium

Deteksi langsung

- ikroskop lapang gelap (dark field examination)

!pesimen "iambil se#ara aspirasi, kemu"ian teteskan pa"a

gelas alas, tutup, segera "ili$at "engan mikroskop lapang gelap,

"engan perbesaran %&& ', amati gerakan.

Treponema :

( berbentuk spiral

( ukuran pan)ang * + & um( ter"iri "ari * ( % lekukan


4/31

Pemeriksaan "engan mikroskop lapang gelap


5/31

Pe-arnaan mpregnasi Perak


6/31

(Pemeriksaan "engan #ara immuno/luoresens

!pesimen "apat "iambil "ari lesi kulit, rekatkan pa"a gelas alas.

Tamba$kan antibo"i Treponema yang "ilabel "engan /luores#ein.

0TC (Fluorescein Isothiocyanate)

Antigen Treponema

Antibo"i Treponema10TC

(Mouse IgG/FITC)

Li$at "engan mikroskop 0luoresens

Hasil positi/: Ber/luoresensi $i)au


7/31

Pe-arnaan mmuno/luoresens


8/31


9/31

Reaksi serologi ter$a"ap penyakit si/ilis

(2on spesi/ik :

(3DRL (Venereal eseases !eference "a#oratory)(RPR (!a$id %lasma !eagin)

(!pesi/ik :

(TPHA (Tre$onema %allidum &aemagglutination Test)(0TA(AB! (Fluorescent Tre$onemal 'nti#ody '#sor$tion)


10/31

Reaksi Flokulasi

Partikel antigen (berupa lipid) dicampur dengan antibodi

(Reagin) Flokulasi.

Digunakan pada STS (Serology Test for Syphilis).

Tes non-spesifik pada sifilis.

1. Tes DR! (enereal Disease Research !aboratory)

AntigenSerum pasien NaCl

P K P K


11/31

2. Tes RPR (Rapid Plasma Reagin).

"ntigen diikatkan dengan charcoal # serum$plasma pasien

charcoal menggumpal (%arna hitam).

AntigenSerum pasien NaCl

P K P K


12/31


13/31

Pengen#eran serum :

: 4 : % : * :

6 7 6 (

Titer antibo"i : 888

RPR se#ara k-antitati/


14/31

s"m

s"m

s"m

s"m

Ag Treponema

!el "ara$ mera$ "ilapisi

antigen Treponema

Antibo"i Treponema

7

Hemaglutinasi


15/31

!el kontrol 9sel "ara$ mera$

tanpa antigen Treponema!el test 9sel "ara$ mera$

"engan antigen Treponema

!erum kontrol positi/

9a"a antibo"i Treponema!erum kontrol negati/

9tanpa antibo"i Treponema

(

6T T;RDR DAR :

%

4

<


16/31

DiluentBufer 100 ul

Serum 25 ul

25 ul 25ul 25 ul 25 ul25 ul 25 ul 25 ul

Buang25 ul

ControlCell 75 ul

Test cell75 ul

1 2 3 4 5 6 7 8

1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 1/1280 1/2560

25 ul25 ul 25 ul 25 ul 25 ul25 ul 25 ul

!erum kontrol negati/ !erum kontrol positi/

25 ul 25 ul 25 ul 25 ul

Control

Cell =5 ulControl

Cell =5 ul

Test

#ell =5 ul

Test

#ell =5 ul


17/31

4 < % 5 = * > & 4

6ontrol serum 9 (

6ontrol serum 9 7

, 1 % &

, 1 * &

, 1 , &

, 1 < 4 &

, 1 % &

, 1 , 4 * &

, 1 4 5 &

Penipisan serum

Titer antibo"i : 888..


18/31

6uman

Treponema

pa"a sli"e

Tamba$kan

!erum pasien

93DRL ? RPR

Positi/

Permukaan kumanTreponema

Teknik 0TA(AB! (fluorescent tre$onemal anti#ody a#sor$tion)

Tamba$kan anti $uman

antibo"y 9anti $uman g@

yang "ilabel "@2 /luoresein


19/31

Virus

* u!ella* "aricella #oster* $a%illoma*C&tomegalo'irus* (enital )er%essim%le* )e%atitis* )+"*


20/31

1- .elalui %lasenta

u!ella an C&tomegalo'irus

C."-2- $eram!atan eatas ,scening maternal

inection

3- $erinatal inesi &ang i%erole selamaelairan melalui alur ematogen ataualat elamin-

)uman immunoecienc& 'irus

)+" 'irus er%es #oster )" 'irus

ROUTE

INFEKSI


21/31


22/31

Pemeriksaan in/eksi C3 9Cytomegalovirus

eto"a:

. mmuno/luores#ene, untuk men"eteksi antigenemia

4. Biakan virus "an imunoperoksi"asa, untuk men"eteksi

viremia.


23/31

. Deteksi antigenemia "engan mmuno/luoresens

Caranya :

( Ambil "ara$ "engan ;DTA 9antikoagulan( Pisa$kan sel leukosit( Buat preparat "engan )umla$ sel 4&&.&&&( 6eringkan "an rekatkan( Lakukan pe-arnaan immuno/luoresens:

( Tamba$kan antibo"i monoklonal 9anti C3( nkubasi


24/31

20LR;!C;2!

FITC (Fluorescein Isothiocyanate)

Antigen C3

onoklonal antibo"i C3

Anti mouse g@10TC

Li$at "engan mikroskop 0luoresens

Hasil positi/: 0uoresens $i)au kekuningan.


25/31

mmuno/luores#en "ari biakan C3 pa"a sel(sel /ibroblast


26/31

muno/luoresen #mv "ari "ara$ pen"erita


27/31

muno/luoresen "ari "ara$ pen"erita


28/31

Biakan virus "engan immunoperoksi"ase

Caranya :

( !e"iakan biakan sel H;L 9Human ;mbryoni# Lung( Dara$ yang $en"ak "iperiksa, "iola$ seperti pa"a #ara

antigenemia 9lakukan se#ara aseptis.

( Lakukan inkulasi pa"a biakan sel H;L

( nkubasi


29/31

2P;RFDA!;

PD

!ubstrat

9DAB 7 H447

Hasil Positi/ : -arna #oklat

Antigen C3

onoklonal antibo"i C3

Anti mouse g@1PD


30/31

Pe-arnaan mmunoperoksi"ase


31/31

Prak. Tumbuh Kembang

Documents