MEMO CGC MAR-001
FACULTAD DE INGENIERA MARTIMA, CIENCIAS BIOLGICAS, OCENICAS Y
RECURSOS NATURALES
CDIGO
MATERIAMicrobiologa General
LABORATORIO
NOMBREOscar Cotto Ypez
PARALELO1
TEMA DE LA PRCTICAAPI
OBJETIVOS GENERALES: Realizar una identificacin bioqumica por
medio del uso de bateras API Establecer las diferentes reacciones
para la correcta identificacin de microorganismos.
INTRODUCCIN:Qu es una batera API?Un sistema miniaturizado API es
un mtodo de identificacin bioqumica de microorganismos el cual
consiste en un dispositivo de plstico con varios microtubos los
cuales contienen sustratos de enzimas o medios de cultivo
deshidratados de acuerdo a la prueba que quiera hacerse. Un ejemplo
de las pruebas a realizarse son: fermentacin de carbohidratos,
determinacin de la produccin de H2S.Debido a la variedad de
microorganismos que se requieran identificar existen un sinnmero de
bateras pero estas son diferentes en nmero y tambin segn la
actividad metablica del gnero del microorganismo que se quiere
identifica.Los microtubos se inoculan con una suspensin de
microorganismos, en agua o solucin salina, que rehidrata los
medios. Las tiras o galeras se incuban a 37C y por efecto del
metabolismo bacteriano se producen cambios de color espontneos o
bien por la adiccin de reactivos.API 20E: Son pruebas de 20
microtubos que se utilizan para identificacin de bacterias de gram
negativas y entero bacterias, las cartas de colores para resultados
positivos y negativos en esta prueba son los siguientes:
Procedimiento de inoculacin de bacterias en sistemas API:Cada
micro tubo del sistema debe inocularse con una suspensin en solucin
salina al 0.85% de un cultivo de microorganismo a ser identificado,
en algunos casos los microtubos deben llenarse completamente con la
suspensin y en aquellos que se requiere una condicin anaerobia se
les debe agregar parafina lquida estril.Interpretacin de
resultados:La presencia de enzimas y productos metablicos que se
generan en el periodo de incubacin reaccionan con los sustratos que
se encuentran en los microtubos y desarrollan una coloracin la cual
debe ser comparada con la carta de colores, en algunos casos se
debe agregar algn reactivo para su revelado. De acuerdo con esto se
puede establecer un resultado positivo o negativo.
EQUIPOS Y MATERIALES: Cajas Petri Mechero Bunsen Asa Micropipeta
Puntas para micropipeta Tubos de ensayo Batera API Agitador
Bacteria aislada Agar sangre
PROCEDIMIENTO:1. Tomar una colonia de cada placa y suspenderla
en 5ml de solucin salina o de agua esteril2. Llenar los tubos de
todos los pocillos con la suspensin de bacterias.3. Llenar la cpula
de los pocillos CIT, VP, GEL con la suspensin bacteriana.4. Llenar
con parafina las cpulas ADH, LDC, ODC, URE, H2S para que se
mantengan en anaerobiosis.5. Poner la tira en su propia cmara hmeda
de incubacin. Previamente poner agua en los alvolos de la cmara
para proporcionar una atmsfera hmeda durante la incubacin.6.
Incubar a 37 C durante 18-24 h.7. Los resultados debe ser
comparando los colores de los pocillos con los de la tabla.
RESULTADOS:
Resultados en los pocillos y agar sangre
Conclusin: El anlisis por medio de colores mostro un resultado
concreto para la identificacin bacteriana. El procedimiento segn la
reaccin obtenida permiti tambin complementar el anlisis para una
correcta identificacin.
REFERENCIAS:
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_anexo2.pdf
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