La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 1 LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Alumno: Elington Antonio Vélez Párraga. Curso: Quinto bioq.farm Paralelo: B Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc Grupo N°4 Fecha de Elaboración de la Práctica: martes 01 de julio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: martes 08 de julio del 2014 PRÁCTICA N° 6 TÍTULO DE LA PRÁCTICA INTOXICACIÓN POR CETONA Animal de Experimentación: Cobayo. Vía de Administración: Vía Intraperitoneal. OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Determinar la presencia del toxico, en este caso la acetona en el animal de experimentación, con exámenes químicos colorimétricos. 2. Monitorear al animal de experimentación para estudiar los principales efectos que este sufre luego de la intoxicación.
INFORME DE LA PRÁCTICA EN EL LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición.
1
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Alumno: Elington Antonio Vélez Párraga.
Curso: Quinto bioq.farm Paralelo: B
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc
Grupo N°4
Fecha de Elaboración de la Práctica: martes 01 de julio del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: martes 08 de julio del 2014
PRÁCTICA N° 6
TÍTULO DE LA PRÁCTICA
INTOXICACIÓN POR CETONA
Animal de Experimentación: Cobayo.
Vía de Administración: Vía Intraperitoneal.
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Determinar la presencia del toxico, en este caso la acetona en el animal de
experimentación, con exámenes químicos colorimétricos.
2. Monitorear al animal de experimentación para estudiar los principales efectos que este
sufre luego de la intoxicación.
La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 2
MATERIALES
1. Jeringuilla de 10cc
2. Campana
3. Cronómetro
4. Equipo de disección
5. Bisturí
6. Vasos de precipitación
7. Erlenmeyer
8. Lámpara de alcohol
9. Equipo de destilación.
10. Tubos de ensayo
11. Guantes, gorros, mascarilla
12. Pipetas volumétricas
13. Bata de laboratorio
14. Pinzas para tubo.
SUSTANCIAS
1. cloroformo
2. Alcohol 95° con nitato de plata.
3. B-naftol
4. Potasa alcohólica
5. Percloruro de hierro
6. Sosa
7. Cristal de yodo
8. R. de benedict
9. Piridina
10. Cloruro de piperazina
11. Agua destilada
12. Ácido tartárico
PROCEDIMIENTO
1. Preparar el mesón de trabajo y con ello materiales y sustancias, además de
implementos de bioseguridad.
2. Administrar 10 ml de cetona por vía intraperitoneal
3. Monitorear síntomas que se presentan y en qué tiempo hasta la muerte del cobayo.
4. Atamos el cobayo a una tabla de disección.
5. Procedemos rasurarle toda la parte abdominal donde se hará el corte.
6. Con la ayuda del bisturí procedemos la disección del cobayo, y observamos los
cambios (coloración, dureza, etc.) que presentan sus órganos.
7. Procedemos a colocar los fluidos y las vísceras afectadas por el toxico (picadas lo
más finas posibles) en el recipiente adecuado (Vaso de precipitación).
8. A las vísceras ya picadas le añadimos 25ml de solución de ácido tartárico.
9. Esto lo llevamos a un balón.
10. Procedemos a destilar.
11. El residuo de la destilación (muestra) que obtuvimos por arrastre de vapor lo
recibimos en solución de Hidróxido de Sodio 0.1N.
12. Una vez realizado el paso anterior, se practican las diferentes reacciones
colorimétricas cualitativas.
La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 3
Reacciones:
1. A la llama.- En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo
con otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la
mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico
formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de
plata.
2. Reacción de Dumas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos
mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio.
CHCl3 + 4 KOH KCl + HCO2K + H 2 O
Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro
de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado en caliente.
A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de
cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.
3.- Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y
solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas
gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.
Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo más o menos oscuro; con resorcinol
la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.
4.- Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2 ml de lejía de sosa 1:2 con una
capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos
por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia
coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos
pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya
absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.
5.-Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y
se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está
presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el
alcaloide.
6.-Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de
Benedict, y de acuerdo a la concentración del tóxico puede producirse una gama de colores
que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.
La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 4
GRAFICOS
1. Preparamos los
10ml que vamos
a inyectar
2. Inyectamos al
cobayo vía
intraperitoneal
4. se separa las vísceras afectadas y
fluidos
8. Se monta el equipo de destilación
y se destila.
3. se realiza la
disección al
cobayo
5. se añaden 25ml de
solución de ácido
tartarico
6. se transvasa a un
balón para posterior
destilación.
7. Se añaden las 50
perlas de vidrio
La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 5
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN EL DESTILADO
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO.
9. Realizando las
reacciones de
reconocimiento en el
destilado.
Patrón: destilado incoloro
La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 6
Reconocimiento en Medios Biológicos
REACCION DE DUMAS
REACCION DE LUSTGARTES
- (FeCl3)
Resultado:
Reacción positiva
característica.
Coloración roja
REACCIÓN CON AgNO3
Resultado: Positivo no
característico
Formación de precipitado,
pero no de llama con borde
verde
- (AgNO3)
Resultado: Reacción
positiva característica.
Precipitado se
disuelve
se forma precipitado de cloruro de plata, al
agregar AgNO3
con amoniaco se disuelve el precipitado.
- B-naftol
Resultado:
Reacción positiva
no característica.
Coloración roja
- resorcinol
Resultado:
Reacción positiva
característica.
Coloración roja
violaceo
- timol
Resultado:
Reacción positiva
característica.
Coloración
amarilla
La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 7
OBSERVACIONES
Según mi punto de vista de la práctica, el cloroformo resulto ser uno de los tóxicos que
demoran más en causar la muerte del animal de experimentación, pero debemos señalar que
inmediatamente luego de administrar dicho toxico al cobayo este reacciono sedándose, es
decir se paralizo totalmente, sabiendo que el cloroformo es una sustancia que se usaba mucho
como sedante, pero que ahora por el conocimiento de su toxicidad, se restringe su uso.
CONCLUSIONES
Se concluye manifestando que se logró cumplir los objetivos de esta práctica, es decir, se
determinó que el cloroformo que estaba presente en las vísceras del animal, y que había
causado su muerte, además de diferentes efector letales como la cianosis de sus órganos,
hipoxia, micción abundante lagrimeo, etc. Todo esto mediante ensayos químicos
colorimétricos y monitoreo de respuestas del animal de estudio ante la intoxicación con el
alcohol en cuestión.
REACCIÓN ROSEBOOM.
resultado: Positivo no
característico
Coloración rojiza
REACCIÓN DE BENEDICT
Resultado: negativa
Coloración roja nula.
La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 8
RECOMENDACIONES
- El cloroformo es uno de los tóxicos de tipo volátil por lo que para esta práctica se
debe usar implementación que cubra las vías aéreas, y si es posibles los ojos, además
de siempre mantener la piel aislada de este toxico ya que se puede absorber vía tópica.
- Tener cuidado con las sustancias de uso restringido o peligroso, para evitar
accidentes.
- Desechar el material usado, y los restos del cobayo en un lugar seguro que no valla a