1 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis Unidad Acadèmica Ciencias Químicas y de la Salud Carrera de Bioquímica y Farmacia Laboratorio de toxicología Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc. Alumna: Tania Carolina Barba Toro Curso: Quinto Paralelo: A Grupo N° 7 Fecha de Elaboración de la Práctica: lunes 15 de junio del 2015 Fecha de Presentación de la Práctica: lunes 22 de junio del 2015 PRÁCTICA N° 3 Título de la Práctica: Intoxicación por Alcohol Metílico Animal de Experimentación: Rata Wistar. Vía de Administración: Vía Parenteral (Intraperitoneal) Volumen administrado: 10 ml de Formaldehìdo Tiempos: Inicio de la práctica: 07: 50 am Hora de administración del toxico al cobayo: 07:52 am Deceso del animal: 08:05 am( 13 minuto) Síntomas: Convulsiones, vomito, Nistagmos y causar ceguera. 10
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1 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis
Unidad Acadèmica Ciencias Químicas y de la Salud
Carrera de Bioquímica y Farmacia
Laboratorio de toxicología
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc. Alumna: Tania Carolina Barba Toro Curso: Quinto Paralelo: A Grupo N° 7 Fecha de Elaboración de la Práctica: lunes 15 de junio del 2015 Fecha de Presentación de la Práctica: lunes 22 de junio del 2015
PRÁCTICA N° 3 Título de la Práctica: Intoxicación por Alcohol Metílico
Animal de Experimentación: Rata Wistar.
Vía de Administración: Vía Parenteral (Intraperitoneal)
Volumen administrado: 10 ml de Formaldehìdo
Tiempos:
Inicio de la práctica: 07: 50 am
Hora de administración del toxico al cobayo: 07:52 am
Deceso del animal: 08:05 am( 13 minuto)
Síntomas: Convulsiones, vomito, Nistagmos y causar ceguera.
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2 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Observar la reacción que presenta la rata wistar ante la
Intoxicación por Metanol.
2. Establecer la sintomatología y controlar el tiempo en que actúa el Metanol.
3. Conocer mediante reacciones de identificación la presencia de
Metanol.
MATERIALES
Guantes
Mascarilla
Zapatones
Bata de laboratorio
Jeringa de 10 cc
Cronómetro
Equipo de disección
Bisturí
Portatubo
Probeta
Vaso de precipitación
Erlenmeyer
Equipo de destilación.
Tubos de ensayo
Pipetas
SUSTANCIAS
Metanol Puro
Hidróxido de Sodio 0.1 N
3 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis
Agua destilada
Ácido tartárico
Ácido Sulfúrico puro
Permanganato de potasio al 1%
Soluciòn Saturada de Ácido Oxálico
Fushinabisufatada (Reactivo de Schiff)
Cloruro de Fenil Hidracina al 4%
Nitroprusiato de Sodio al 2.5%
Hidróxido de Sodio 0.1 N
Ácido clorhídrico (HCl)
Ferricianuro de potasio al 5-10%
Hidróxido de Potasio al 12%
Ácido cromotrópico
Leche
Cloruro Férrico (FeCl3)
PROCEDIMIENTO
1. Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo.
2. Tener todos los materiales listos en la mesòn de trabajo
3. Administramos a la rata wistar, 8 ml de Metanol por vía
intraperitoneal, anotamos el tiempo.
4. Colocar la rata wistar en la panema.
5. Observamos las manifestaciones que la rata wistar hasta su muerte.
6. De ahí procedemos a la disección de la rata wistar.
7. Colocando las vísceras (picadas o trituradas lo más finas posibles) en
el recipiente adecuado (balón del equipo de destilación).
4 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis
8. Preparar 2gr de ácido tartárico en 50ml de agua destilada, luego se
añade la solución de ácido tartárico a las vísceras en el balón.
9. Añadir cierta cantidad de Ácido tartárico, se deja en contacto por 30
minutos para acidular la muestra.
10. Luego de este tiempo se filtra, previamente se arma el equipo de
destilación, en un Erlenmeyer recogeremos el destilado.
11. El destilado se recoge con 20 ml NaOH 0.1 N,
12. Con el filtrado luego procedimos a realizar las reacciones de
identificación de Metanol en medios biológicos.
13. Culminada la práctica se limpió todo el material y el área utilizada.
REACCIONES
1. Reacción de Schiff.- A una pequeña porción de la muestra, se
añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar
se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por
tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de
ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere
un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle
nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se
le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo
cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.
2. Reacción de Rimini.- A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de
cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de
nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución
de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.
3. Con la Fenilhidracina.- En un medio fuertemente acidificado con
ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un
pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de
ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de
potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella.
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4. Reacción de Marquis.- Se toma 1ml de destilado y se agregan
5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una
solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en
10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o
después de algún tiempo un color violeta.
5. Con el Ácido Cromotrópico.- Con este ácido en un medio
fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido
produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.
6. Reacción de Hehner.- Se mezcla una gota de destilado con
algunos mililitros deleche, se estratifica con ácido sulfúrico
concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5
gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso
positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul
violeta.
GRÁFICOS:
1.- Animal de
experimentación Rata
Wistar.
3.- Colocamos en la rata
wistar en la panema y
observamos sus
manifestaciones.
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2.- Administramos
el Metanol a la rata
wistar por vìa
intraperitonial
6 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis
5.- Sacamos todas las
vísceras y las picamos
para colocarlas en un
beaker
7.- Añadir cierta
cantidad de Ácido
tartárico, se deja en
contacto por 30 minutos
para acidular la muestra.
8.- Se filtra, previamente se
arma el equipo de
destilación, y en un
Erlenmeyer recogeremos el
destilado.
4. Procedemos
a la disección de
la Rata Wistar.
6.- Colocamos todo
esto en el balón
colocando con 50 perlas
de vidrio
9.- Con el filtrado
procedemos a realizar las
reacciones de identificación
de formaldehido en medios
biológicos
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7 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS
BIOLÓGICOS:
1) Reacción de Schiff:
Reacción Positivo no característico Cambio de coloración
2) Reacción de Rimini: Positivo no característico
Reacción positivo no característico Cambio de coloración
ANTES DESPUES
ANTES DESPUES
8 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis
3) Reacción con la fenil hidracina: positivo no característico
4) Reacción de Marquis: Positivo no caracteristico
5) Con el ácido cromotrópico: Positivo no característico
ANTES DESPUES
ANTES DESPUES
ANTES DESPUÉS
9 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis
6) Reacción de Hehner: Positivo no característico
Reaccion Reacción positivo no caracteristico Coloración beis
OBSERVACIONES:
El uso de guantes y mascarilla es esencial al momento de
preparar la solución de cianuro ya que éste puede ser inhalado
causando efectos en nuestro organismo.
Encender la campana de ventilación para eliminar el olor del
cianuro y así mismo los malos olores que se producen al disectar
la rata wistar.
Pude observar que al administrar Metanol puro por vía
intraperitoneal al cobayo, éste presentó picazón, convulsiones, se
orinó, se observó además secreción ocular y por ultimo presentó
necropsia de la mayor parte de las vísceras al momento de abrirlo.
RECOMENDACIONES
Es de vital importancia asegurarse que el equipo esté
correctamente sellado, ya que de esta forma logramos impedir el
escape de los vapores en el proceso de la destilación, siendo estos
en pequeñas cantidades mortales.
Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.
Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.
ANTES DESPUES
10 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis
CONCLUSIONES
Al final de esta práctica la reacción que presenta la rata wistar
ante la intoxicación con metanol puro, aprendimos como el
metanol en una sustancia que puede provocar grandes daños en
los organismos vivos, observamos lo que provoca internamente el
metanol y los signos que presento el cobayo cuando a este se le
administro la sustancia, cabe mencionar que la dosis depende del
peso del ser vivo en este caso de la rata wistar.
CUESTONARIO
1. ¿Cuál es la Dosis Letal del Metanol?
Ingerir elevadas cantidades de metanol puede causar dolor de
cabeza, mareo, náusea, vómitos y muerte (de 20 a 25 g se tiene
una dosis mortal). Tomar más de medio litro o más puede causar
ceguera o pérdida de la visión, ya que puede dañar seriamente el
nervio óptico. Una exposición crónica puede ser causa de daños al
hígado o de cirrosis. La dosis letal de metanol para los humanos
varía entre 0,3 gramos y 1 gramo por kilogramo de masa
corpórea.
2. ¿Cuáles son los síntomas más comunes por intoxicación con