“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc. Alumno: Yasmani Carlos Pardo Leiva Curso: Quinto Año Paralelo: “B” Grupo N° 5 Fecha de Elaboración de la Práctica: martes, 10 de Junio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: martes, 17 de Junio del 2014 PRÁCTICA N° 2 Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR FORMALDEHIDO Animal de Experimentación: Cobayo Vía de Administración: Vía Intraperitonial. OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante una Intoxicación por formaldehido. 2. Observar la sintomatología que se presenta en el animal de experimentación. 3. Determinar el tiempo en que actúa el toxico en el organismo del cobayo para causarle la muerte. 4. Conocer mediante diversas pruebas de identificación la presencia de formaldehido en el cobayo MATERIALES Jeringuilla de 10cc Probeta Cronómetro Equipo de disección Bisturí Vaso de precipitación Erlenmeyer Equipo de destilación. Tubos de ensayo Pipetas Bata de Laboratorio Guantes de látex Mascarilla 10 SUSTANCIAS Formol al 40% Alcohol Ácido Tartárico Permanganato de Potasio al 1% Acido Oxalico Fushinabisufatada (Reactivo de Schiff) Cloruro de Fenil Hidracina al 4% Nitroprusiato de Sodio al 2.5% Ferricianuro de potasio al 5-10% Cloruro Férrico. Leche
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“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Alumno: Yasmani Carlos Pardo Leiva
Curso: Quinto Año Paralelo: “B” Grupo N° 5
Fecha de Elaboración de la Práctica: martes, 10 de Junio del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: martes, 17 de Junio del 2014
PRÁCTICA N° 2
Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR FORMALDEHIDO
Animal de Experimentación: Cobayo
Vía de Administración: Vía Intraperitonial.
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante una Intoxicación por formaldehido.
2. Observar la sintomatología que se presenta en el animal de experimentación.
3. Determinar el tiempo en que actúa el toxico en el organismo del cobayo para causarle la muerte.
4. Conocer mediante diversas pruebas de identificación la presencia de formaldehido en el cobayo
MATERIALES
Jeringuilla de 10cc
Probeta
Cronómetro
Equipo de disección Bisturí
Vaso de precipitación
Erlenmeyer
Equipo de destilación.
Tubos de ensayo
Pipetas
Bata de Laboratorio
Guantes de látex
Mascarilla
10
SUSTANCIAS
Formol al 40%
Alcohol
Ácido Tartárico
Permanganato de Potasio al 1%
Acido Oxalico
Fushinabisufatada (Reactivo de Schiff)
Cloruro de Fenil Hidracina al 4%
Nitroprusiato de Sodio al 2.5%
Ferricianuro de potasio al 5-10%
Cloruro Férrico.
Leche
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 2
PROCEDIMIENTO
Para la realización de ésta práctica se efectúan los siguientes pasos:
1.- Primeramente BIOSEGURIDAD: Es decir colocarse la mascarilla, bata de
laboratorio, gorro, zapatones y los guantes de látex
2.- A continuación se deben tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo
3.- Se pesa el sujeto de experimentación (cobayo), seguidamente se le administra
por vía peritoneal 10ml de formaldehido
4.-Posterior a esto, se coloca el cobayo en la campana, y se observa la
sintomatología que presenta y cuál es el tiempo de latencia.
5.- Seguidamente se lo colca en la tabla de disección y proseguimos a rasurar al
cobayo en la zona que se le va a realizar la disección con la ayuda de un bisturí.
6.- Luego abrimos cuidadosamente la piel del cobayo y recogemos la sangre con la
ayuda de una jeringa, así mismo sacamos las vísceras y se procede a picarlas
vísceras (lo más finas posibles), luego las colocamos en el balón volumétrico
7.- Se añade acido tartárico y las perlas de vidrio, a continuación se preparar 20 ml
de hidróxido de sodio al 20% y colocarlo en un Erlenmeyer.
8.- Se arma el equipo de destilación y se colocar el balón y el Erlenmeyer en su
respectivo lugar.
9.- Posterior a esto se abre la llave y se comienza a destilar, Con la ayuda del
mechero se flamea con ligeros movimientos por 30 minutos hasta obtener el
destilado.
10.-Finalmente una vez obtenido el destilado se realizan las reacciones de
identificación:
Reacción de SCHIFF
Reacción de RIMINI
Reacción con la fenilhidracina
Reacción con el Ac.Cromotropico
Reacción de HEHNER
.
Reacciones:
1. Reacción de Schiff.- 1ml de muestra añadimos 1ml de permanganato de potasio
al 1%, mezclamos y adicionamos 3 gotas de ácido sulfúrico, dejar reposar por 3
minutos, agregar unas gotas de solución saturada de ácido oxálico(hasta que
decolore la muestra), agregarle nuevamente 3 gotas de ácido sulfúrico puro,
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Pesamos Administración- vía peritoneal Observamos sintomatología Deceso Colocamos al cobayo en la Realizamos una incisión Sacamos las vísceras - sangre Picamos finamente tabla de disección Colocamos en una balón preparamos el NaOH al 20% Destilamos Obtenemos destilado y realizamos las reacciones de identificación.
añadir 1ml de Fushina bisulfatada(Reactivo de Schiff). Produce un color violeta
intenso si es positivo.
2. Reaccion de Rimini.- 5ml del destilado agregar 10 gotas de cloruro de
fenilhidracina al 4% + 1ml de solución de hidróxido de sodio. Produce una
coloración azul intensa si es positivo.
3. Con lla fenil hidracina.- Acidificar 1medio fuertemente con ácido clorhídrico y
agregamos 1 ml de muestra, a esto le agregamos un pedacito de cloruro de fenil
hidracina, 3 gotas de solución de ferrocianuro de potasio al 5%, posterior a esto
añadir unas gotas de hidróxido de potasio al 12%. Produce una coloración de
rojo grosella en caso de ser positivo.
4. Con el ácido Cromotrópico.- 1 ml de muestra + ácido cromotrópico+ 3 gotas de
ácido sulfúrico, llevarlo a la llama. Produce una coloración roja después de
calentarla a la llama si es positivo.
5. Reacción de Hehner.-1 gota del destilado+4 ml de leche+ 3 gotas de ácido
sulfúrico concentrado con cloruro férrico). Produce coloración violeta o un azul
violeta si es positivo.
GRÁFICOS
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
Muestra inicial
ó destilado
MUESTRA 1 ( VISCERAS)
Reacción de Schiff
Reacción Positivo no característico coloración violeta en la capa superficial
Reacción de Rimini
Reacción Negativo no hubo coloración azul intensa
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Reacción con Fenilhidracina
Reacción positivo no característico coloración rojiza
Reacción con el Ácido cromotropico
Reacción Positivo característico coloración roja
Reacción de Hehner
Reacción Negativo coloración pálida
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