UJI SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOLIK DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum Ruiz & Pav) TERHADAP KULTUR SEL HeLa SKRIPSI Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Ilmu Farmasi Diajukan oleh Francisca Romana Atmaningsih NIM :048114035 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA 2008 i PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
73
Embed
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI - core.ac.uk · Biarlah roh mu menyala –nyala . Dan layanilah Tuhan ... etanolik daun sirih merah adalah sebesar 1.143,1 μg/ml. Dari hasil
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
UJI SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOLIK DAUN SIRIH MERAH
(Piper crocatum Ruiz & Pav) TERHADAP KULTUR SEL HeLa
SKRIPSI
Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Ilmu Farmasi
Diajukan oleh
Francisca Romana Atmaningsih
NIM :048114035
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
2008
i
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
UJI SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOLIK DAUN SIRIH MERAH
(Piper crocatum Ruiz & Pav ) TERHADAP KULTUR SEL HeLa
SKRIPSI
Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Ilmu Farmasi
Diajukan oleh
Francisca Romana Atmaningsih
NIM :048114035
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
2008
ii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
HALAMAN PERSEMBAHAN
PRAKATA
Janganlah kerajinan mu kendor
Biarlah roh mu menyala –nyala
Dan layanilah Tuhan
( Roma 12 : 11 )
Kupersembahkan karya sederhana ini untuk :
Bapak.....
Ibu........
Mbak Antik.......
Dan.....
Aloysius Alfa Scifo Resa Habel...........
Kalian adalah bintang – bintangku
v
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS
Yang bertanda tangan di bawah ini, saya mahasiswa Universitas Sanata Dharma :
Nama : Francisca Romana Atmaningsih Nomor Mahasiswa : 048114035
Demi pengembangan ilmu pengetahuan, saya memberikan kepada Perpustakaan Universitas Sanata Dharma karya ilmiah saya yang berjudul : “Uji Sitotoksisitas Ekstrak Etanolik Daun Sirih Merah (Piper crocatum Ruiz & Pav) Terhadap Kultur Sel HeLa” beserta perangkat yang diperlukan (bila ada). Dengan demikian saya memberikan kepada Perpustakaan Universitas Sanata Dharma hak untuk menyimpan, me-ngalihkan dalam bentuk media lain, mengelolanya dalam bentuk pangkalan data, mendistribusikan secara terbatas, dan mempublikasikannya di Internet atau media lain untuk kepentingan akademis tanpa perlu meminta ijin dari saya maupun memberikan royalti kepada saya selama tetap mencantumkan nama saya sebagai penulis. Demikian pernyataan ini yang saya buat dengan sebenarnya. Dibuat di Yogyakarta Pada tanggal : 18 Juli 2008 Yang menyatakan
( Francisca Romana Atmaningsih )
vi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PRAKATA
Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala anugerah-Nya
sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Sitotoksisitas
Ekstrak Etanolik Daun Sirih Merah ( Piper crocatum Ruiz & Pav ) Terhadap
Kultur Sel HeLa”. Skripsi ini dibuat untuk memenuhi salah satu syarat
memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) pada Program Studi Farmasi di
Universitas Sanata Dharma.
Penulisan skripsi ini tidak mungkin terwujud tanpa adanya bimbingan,
bantuan dan dukungan dari berbagai pihak, maka pada kesempatan ini, penulis
mengucapkan terima kasih kepada:
1. Ibu Rita Suhadi, M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma.
2. Drs. A. Yuswanto S.U., Ph.D., Apt., sebagai dosen pembimbing yang
telah banyak meluangkan waktu, tenaga dan atas segala masukan,
bimbingan serta sarannya dalam penyusunan skripsi ini.
3. Drs. Mulyono, Apt selaku dosen penguji yang telah berkenan menguji
dan memberikan masukan dan saran, serta memberikan bimbingan dalam
hal statistika dan olah data.
4. Yohanes Dwiatmaka, M.Si. selaku dosen penguji yang telah berkenan
menguji dan memberikan banyak masukan dan saran, terutama dalam
determinasi tanaman.
vii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5. Drs. P. Sunu Hardiyanta, S.J., M.Sc. yang telah meluangkan banyak
waktu dan tenaga untuk memberikan bimbingan dalam pengolahan data.
6. Jeffry Yulianus, M.Si. yang telah meluangkan waktu dan tenaga untuk
berdiskusi dan memberikan berbagai saran serta bimbingan dalam
penyusunan skripsi ini.
7. Ign. Y Kristyo B, M.Si., yang telah memberikan banyak masukan dalam
identifikasi dan determinasi tumbuhan.
8. Segenap dosen dan karyawan di Fakultas Farmasi Universitas Sanata
Dharma, terima kasih atas bantuannya selama ini.
9. Mbak Yuli dan segenap karyawan LPPT UGM yang telah banyak
membantu dan menemani dalam penelitian skripsi ini.
10. Bapak dan Ibu atas segala dukungan dalam segala hal yang tidak akan
pernah bisa aku bayar dan doa yang mengantarku sampai pada hari ini.
11. Mbak Antik yang telah memberikan doa dan dukungan dalam berbagai
bentuk. Dan juga Mas Ale yang sering memberi masukan dan saran yang
berhubungan dengan penggunaan komputer.
12. Aloysius Alfa Scifo Resa Habel atas segala pengorbanan, pengertian,
bantuan, doa, cinta, semangat, dan dukungan selama penyusunan skripsi
ini. Terima kasih telah menjadi semangat selama ini. Dan juga semua
keluarga atas segala dukungannya.
13. Bapak Gunawan, yang telah memberikan tanaman sirih merah sebagai
bahan penelitian skripsi ini.
viii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14. Ririt, Nur, Meri dan Eva atas semua kebersamaan, kerjasama, suka duka,
pengorbanan dan canda selama penelitian dan penyusunan skripsi ini.
semua teman – teman kelompok praktikum D angkatan 2004 atas semua
kebersamaan dan kenangan selama kuliah.
16. Semua pihak yang telah banyak membantu penyusunan skripsi ini.
Atas segala bantuan yang telah diberikan selama ini, penulis
mengucapkan banyak terima kasih. Penulis juga menyadari sepenuhnya
penulisan skripsi ini tidak terlepas dari keterbatasan dan kekurangan penulis.
Oleh karena itu, diharapkan kritik dan saran yang membangun demi
penyempurnaan skripsi ini. Besar harapan penulis bahwa skripsi ini dapat
bermanfaat bagi perbendaharaan dan perkembangan ilmu pengetahuan.
Penulis
ix
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
INTISARI
Berbagai teknik pengobatan kanker saat ini telah dikembangkan dan banyak dilakukan penelitian-penelitian yang bertujuan untuk mencari cara pengobatan alternatif khususnya pengobatan yang menggunakan bahan-bahan dari alam. Tanaman sirih merah (Piper crocatum Ruiz & Pav) secara empiris dikenal sebagai tanaman obat alami untuk mengobati berbagai penyakit, termasuk penyakit kanker, seperti kanker payudara dan kanker leher rahim. Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan sebelumnya, diketahui bahwa daun sirih merah mengandung flavanoid yang memiliki aktivitas sebagai antikanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah ekstrak etanolik daun sirih merah berpotensi dikembangkan sebagai antikanker.
Penelitian ini termasuk penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. Uji sitotoksisitas dilakukan dengan memberi perlakuan sel HeLa dengan ekstrak etanolik daun sirih merah. Metode uji sitotoksisitas yang digunakan adalah metode direct counting. Metode perhitungan statistik One way Anova dilakukan untuk menganalisis signifikansi antara perlakuan dan kontrol, sedangkan untuk mengetahui harga LC50 dilakukan perhitungan secara statistik menggunakan analisis probit.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanolik daun sirih merah bersifat sitotoksik terhadap sel HeLa. Harga LC50 yang diperoleh dari ekstrak etanolik daun sirih merah adalah sebesar 1.143,1 μg/ml. Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanolik daun sirih merah berefek sitotoksik serta diperkirakan memiliki aktivitas sebagai antikanker. Kata kunci: daun sirih merah, sel HeLa, sitotoksisitas, LC50.
xi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ABSTRACT
A lot of medical techniques are increased and many studies have been done to get medical alternative for cancer, especially medical treatment that used natural product. Piper crocatum Ruiz & Pav were used as a natural medicine for many diseases, including cancer, such as breast and cerviks cancer. Previous studies showed that Piper crocatum Ruiz & Pav leaves contains flavanoid which have anticancer activity. The purpose of research was to identify whether etanolic extract of Piper crocatum Ruiz & Pav has anticancer.
The study was pure experimental research with complete random and one way design. The cytotoxicity effect was determined using direct counting method. Data were analysed by One Way Anova. And probit analysis is used to determine LC50 value.
The result showed that etanolic extract of Piper crocatum Ruiz & Pav leaves had cytotoxic effect to HeLa cells. The LC50 value obtained from that etanolic exstract of Piper crocatum Ruiz & Pav leaves was 1.1.43,1μg/ml. Therefore, etanolic exstract of Piper crocatum Ruiz & Pav leaves have cytotoxicity effect and might have anticancer activity. Keyword : cytotoxicity,Piper crocatum Ruiz & Pav, HeLa cell, value of LC50
xii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .................................................................................. .. ii
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING............................................ iii
HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................... iv
HALAMAN PERSEMBAHAN.................................................................... v
HAK CIPTA...................................................................................................... vi
PRAKATA .................................................................................................... vii
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA........................................................ x
INTISARI ...................................................................................................... xi
ABSTRACT .................................................................................................... xii
DAFTAR ISI ................................................................................................. xiii
DAFTAR TABEL ......................................................................................... xvii
DAFTAR GAMBAR..................................................................................... xviii
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. xix
BAB I PENGANTAR .................................................................................. 1
A. Latar Belakang...................................................................................... 1
1. Rumusan masalah ........................................................................ 2
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Reaksi reduksi MTT oleh enzim suksinat dehidrogenase......... 28
Gambar 2. Grafik Log Konsentrasi vs Nilai Probit pada Replikasi I.......... 34
Gambar 3. Grafik Log Konsentrasi vs Nilai Probit pada Replikasi II.................. 34
Gambar 4. Grafik Log Konsentrasi vs Nilai Probit pada Replikasi III........ 35
Gambar 6. Gambar Tanaman Sirih Merah................................................... 42 Gambar 7. Gambar Perlakuan Ekstrak Sirih Merah pada Sel dalam
sumuran 96 well plate ............................................................. 43
Gambar 8. Foto Sel HeLa Tanpa Perlakuan................................................. 43
Gambar 9. Foto Sel HeLa dengan Perlakuan Ekstrak Etanolik
Sirih Merah Konsentrasi 1000 µg/ml........................................ 44
Gambar 10. . Foto Sel HeLa dengan Perlakuan Ekstrak Etanolik
Sirih Merah Konsentrasi 1500 µg/ml..................................... 44
Gambar 11. Foto Sel HeLa dengan Perlakuan Ekstrak Etanolik
Sirih Merah Konsentrasi 1750 µg/ml........................................ 45
xviii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
DAFTAR LAMPIRAN Halaman
Lampiran 1. Foto tanaman Sirih Merah ( Piper crocatum Ruiz & Pav )..... 42
Lampiran 2. Gambar Perlakuan Ekstrak Sirih Merah pada Sel dalam
sumuran 96 well plate ............................................................. 43
Lampiran 3. Foto Sel HeLa Tanpa Perlakuan.................................... ............ 43
Lampiran 4. Foto Sel HeLa dengan Perlakuan Ekstrak Etanolik Sirih
Merah Konsentrasi 1000 µg/ml................................................... 44
Lampiran 5. Foto Sel HeLa dengan Perlakuan Ekstrak Etanolik Sirih
Merah Konsentrasi 1500 µg/ml................................................. 44
Lampiran 6. Foto Sel HeLa dengan Perlakuan Ekstrak Etanolik Sirih
Merah Konsentrasi 1750 µg/ml.............................................. 45
Lampiran 7. Perhitungan nilai korelasi LC50 ekstrak etanolik daun sirih
merah terhadap sel HeLa pada taraf kepercayaan 95%........... 46
Lampiran 8. Uji distribusi data dengan Kolmogorov-Smirnov................... 47
Lampiran 9. Hasil uji signifikansi dengan analisis statistik....................... 47
Lampiran 10. Perhitungan LC50 dengan Analisis Probit........................... 48
Lampiran 11. Tabel Harga Probit.................................................................. 52
Lampiran 12. Hasil Determinasi Tanaman Daun Sirih Merah ..................... 53
xix
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Penyakit kanker masih menjadi penyakit yang mematikan di dunia dan
jumlahnya terus meningkat dari tahun ke tahun. Sampai sekarang, jumlah
penderita kanker di seluruh dunia mencapai 7 juta orang, bahkan UICC (Union
Internationale Contre le Cancer) memperkirakan jumlah penderita kanker di
negara berkembang pada tahun 2020 bisa mencapai 10 juta orang, dengan 16
kasus baru setiap tahunnya (Anonim, 2006). Apalagi penyakit kanker bisa
menyerang siapa saja, tidak mengenal kelas sosial ekonomi, jenis kelamin dan
usia penderita. Di Indonesia, penyakit kanker juga menjadi salah satu masalah
kesehatan yang cukup penting, karena angka kejadian dan jumlah kematian akibat
kanker terus meningkat setiap tahunnya (Anonim, 2006).
Kanker serviks atau karsinoma serviks uterus merupakan jenis kanker
kedua terbanyak pada perempuan di seluruh dunia setelah kanker payudara.
Namun di Indonesia, kanker serviks menduduki peringkat pertama. Kanker
serviks yang sudah masuk ke stadium lanjut sering mengakibatkan kematian
dalam jangka waktu yang relatif cepat (Andrijono, 2003).
Berbagai cara pengobatan telah dilakukan untuk mengobati penyakit
kanker, antara lain dengan menggunakan obat sintesis dan radiasi. Teknik-teknik
1
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
pengobatan tersebut dapat menimbulkan efek samping yang pada akhirnya
menyebabkan pasien menderita. Atas dasar pertimbangan tersebut maka saat ini
banyak dilakukan penelitian-penelitian yang tujuannya mencari cara pengobatan
alternatif khususnya pengobatan yang menggunakan bahan-bahan dari alam
(Ganiswara dan Nafrialdi, 2003).
Daun sirih merah banyak digunakan dalam masyarakat untuk mengobati
berbagai jenis penyakit. Secara empiris, ekstrak daun sirih merah dalam
pemakaian secara tunggal atau diformulasikan dengan tanaman obat lainnya
mampu menyembuhkan beberapa jenis kanker, seperti kanker payudara, kanker
rahim dan leukemia (Sudewo, 2005).
Oleh karena itu, untuk mengetahui apakah tanaman sirih merah
mempunyai khasiat sebagai antikanker, maka perlu dilakukan penelitian.
Penelitian ini menggunakan sel HeLa untuk mengetahui apakah ekstrak etanolik
daun sirih merah mempunyai efek sitotoksik terhadap sel kanker. Sitotoksistas
ekstrak etanolik daun sirih merah ini selanjutnya dapat digunakan sebagai dasar
untuk mengembangkan suatu senyawa antikanker terutama pada sel HeLa.
1. Rumusan masalah
Berdasarkan latar belakang yang telah dipaparkan, maka dapat
dirumuskan permasalahan sebagai berikut:
a. apakah ekstrak etanolik daun sirih merah memiliki efek sitotoksik
terhadap kultur sel HeLa?
b. berapa besar harga LC50 dari ekstrak etanolik daun sirih merah terhadap
kultur sel HeLa?
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
2. Keaslian penelitian
Belum pernah dilakukan penelitian mengenai sitotoksisitas ekstrak
etanolik daun sirih merah terhadap kultur sel HeLa.
3. Manfaat penelitian
a. Manfaat teoritis
Penelitian ini dapat memberikan informasi tentang efek sitotoksisitas
ekstrak etanolik daun sirih merah terhadap sel HeLa yang dapat
menambah kemajuan ilmu pengetahuan terutama bidang ilmu farmasi.
b. Manfaat praktis
Penelitian ini diharapkan dapat membuktikan khasiat daun sirih merah
sebagai obat kanker.
B. Tujuan
1. Tujuan umum :
Untuk mengetahui apakah ekstrak etanolik daun sirih merah memiliki
efek sitotoksik.
2. Tujuan khusus :
a.Untuk mengetahui apakah ekstrak etanolik daun sirih merah memiliki efek
sitotoksik terhadap kultur sel HeLa.
b.untuk mengetahui besar harga LC50 ekstrak etanolik daun sirih merah
terhadap kultur sel HeLa.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Piper crocatum Ruiz & Pav
1. Sistematika
Famili : Piperaceae
Genus : Piper
Spesies : Piper crocatum Ruiz & Pav.
(Anonim,2007)
2. Sinonim
Piper ornatum N.E.Br
3. Deskripsi
Tanaman dengan batang bulat berwarna hijau keunguan dan tidak
berbunga. Batangnya beruas dengan jarak buku 5-10 cm. Di setiap buku tumbuh
bakal akar. Daun bertangkai membentuk jantung dengan bagian atas meruncing,
bertepi rata, dan permukaannya mengkilap atau tidak berbulu. Panjang daunnya
bisa mencapai 15-20 cm. Warna daun bagian atas hijau bercorak putih keabu-
abuan bagian bawah daun berwarna merah hati cerah. Daunnya berlendir, berasa
sangat pahit, dan beraroma wangi khas sirih.
Sirih merah bisa tumbuh dengan baik di tempat yang teduh dan tidak
terlalu banyak terkena sinar matahari. Jika terkena sinar matahari langsung pada
siang hari secara terus-menerus warna merah daunnya bisa menjadi pudar, buram
dan kurang menarik (Sudewo, 2005).
4
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
4. Kandungan Kimia
Berdasarkan penelitian, diketahui bahwa bahwa sirih merah mengandung
flavanoid, alkaloid, senyawa polifenolat, tanin dan minyak atsiri (Sudewo, 2005).
5. Khasiat dan penggunaan
Tumbuhan sirih merah digunakan sebagai obat di masyarakat, antara lain
sebagai anti diabetes, jantung koroner, radang prostat, TBC, asam urat dan
antikanker (Sudewo, 2005).
Secara empiris ekstrak daun sirih merah dalam pemakaian secara tunggal
atau diformulasikan dengan tanaman obat lainnya mampu membasmi aneka
penyakit. Efek zat aktif yang terkandung dalam daun sirih merah dapat
merangsang saraf pusat dan daya pikir. Di samping itu, juga memiliki efek
kematian-akibat-kanker-masih-tinggi-penderita-masih-punya-harapan-sembuh.htm,diakses pada bulan September 2007
Anonim, 2007, http:/www.ZipcodeZoo.com, diakses pada tanggal 9 Agustus 2007
Anonim, 2005, What is Cancer,American Cancer Society,Inc (cited in March,2005)Available fromhttp://www.cancer.org/docroot/CRI/content/CRI_2_4_1x_what_is_cancer.asp?sitearea=.,INTERNET
Barile, F.A., 1997, In Vitro Methods in Pharmaceutical Research, Academic
Press, New York. Backer, C. A., dan Backuizen van den Brink, R. C.,1965, Flora of Java, Volume
I dan II, N. V. Noordhoff, Groningen. Chapdelaine,J.M.,2006,MTT Reduction-A Tetrazolium-based Colorimetric Assay
For Cell Survival and Proliferation, Pharmacon Research International, Inc., Maxline Microplate Reader
Dash, P., 2001, Protocol for MTT Assay, Medical Research Council, St.George’s
Hospital Medical School, University of London. Doyle, A., and Griffiths, J.B., 2000, Cell and Tissue Culture for Medical
Research, John Willey and Sons Ltd, New York, 12 -16, 47-50,402 – 415.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Elly,W., 2002, Efek Fraksi Protein yang Diisolasi dari Daun Mirabilis jalapa L terhadap Proses Apoptosis pada sel HeLa, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.
73, IRL Press, Washington DC. Freshney, R.I., 2000, Culture of Animal Cells,Amanual of Basic Technique, 4th
Edition, 71-73, A John Wiley & Sons,inc, New York. Samuelsson, Gunnar., 1999, Drugs of Natural Origin,A Textbook of
Pharmacognosy,4th revised edition, Apotekarsocieten, Stockholm. Hagman, D.E., 2005, Sterilization, th, Beringer, Paul., Remington The Science and
Practice of Pharmacy, 21th edition, 776 – 781, Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia.
Hanahan, D., and Weinberg, R.A., 2000, The Hallmark of CancerCell, 100 : 57-
70 Hanif, R., Qiao,L., Shiff,S.J., and Rigas,B.,1997,Curcumin,a Natural Plant
Phenolic Food Addictive, Inhibits Cell Proliferation and Induce Cell Cycle Changes in Colon Adenocarcinoma Cell Lines by a Prostaglandin Independent Pathway,J.Lab.Clin.Med., 577,579
Harborne, J.B., 1987, Metode Fitokimia : Penentuan Cara Modern Menganalisa
Tumbuhan, Ed.2, hal 47 – 109, diterjemahkan oleh Padmawinata, K., dan Sudiro, I., ITB, Bandung.
Jacoby, W.B., and Pastan, I.H., 1979, Methods in Enzymology Cell Culture,
Volume VIII, Academia Press Inc, New York. King, R.J.B., 2000, Cancer Biology, 2nd
edition, School of Biological Sciences, University of Surrey, England.
Kusumaningtyas, E. D. Sitotoksisitas Ekstrak Etanolik Daun Sirih Merah (Piper
crocatum Ruiz & Pav) Terhadap Kultur Sel Raji, Skripsi, Universitas Sanata Dharma,Yogyakarta.
Markham, K.R., 1988, Cara Mengidentifikasi Flavonoid, 1-103, diterjemahkan
oleh Padmawinata, K., Penerbit ITB, Bandung. Meyer, B.N., Ferrigni, N.R., Putnam, J.E., Jacobsen, L.B., Nochols, D.E., Mc
Laughlin, J.L., 1982, Brine Shrimp: A Convenient General Bioassay for Active Plant Concenient, Planta Medica, Volume 45, 32-34
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
Meri., 2008, Sitotoksisitas Ekstrak Etanolik Daun Sirih Merah (Piper crocatum Ruiz & Pav) Terhadap Kultur Sel Myeloma, Skripsi, Universitas Sanata Dharma,Yogyakarta.
Mursyidi, Ahmad., 1985, Statistika Farmasi Dan Biologi,157,Ghalia Indonesia,
Jakarta. Nafrialdi, Sulistiya, G., 1995, Antikanker: Farmakologi dan Terapi, edisi IV,
686-702, Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta. Neritika, Kartina., 2008, Sitotoksisitas Ekstrak Etanolik Daun Sirih Merah (Piper
crocatum Ruiz & Pav) Terhadap Kultur Sel T47D, Skripsi, Universitas Sanata Dharma,Yogyakarta.
Nur’aniyah, 2008, Sitotoksisitas Ekstrak Etanolik Daun Sirih Merah (Piper
crocatum Ruiz & Pav) Terhadap Kultur Sel Siha, Skripsi, Universitas Sanata Dharma,Yogyakarta.
Robinson, T., 1995, Kandungan Organik Tumbuhan Tingkat Tinggi, hal 191-213,
terjemahan oleh Padmawinata, K., Penerbit ITB Bandung. Sudewo, B., 2005, Basmi Penyakit Dengan Sirih Merah, Cet I, 33-36, 40, 45, P.T.
Agromedia Pustaka, Jakarta. Suffness, M., dan Pezzuto, J.M., 1991, Assay Related to Cancer Drug Discovery,
Methods in Plant Biochemistry: Assay for Bioactivity, Volume VI, 71-133, Academic Press, London.
Sambrook, Fritsch, E.F., Maniatis, T., 1989, Molecular Cloning, A Laboratory