-
PENGARUH VARIASI METODE EKSTRAKSI SECARA
MASERASI DAN DENGAN ALAT SOXHLET TERHADAP
KANDUNGAN KURKUMINOID DAN MINYAK ATSIRI
DALAM EKSTRAK ETANOLIK RIMPANG TEMULAWAK
(Curcuma xanthorrhiza Roxb.)
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)
Program Studi Farmasi
Oleh :
Melia Sari Dewi
NIM : 068114085
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2010
-
ii
PENGARUH VARIASI METODE EKSTRAKSI SECARA
MASERASI DAN DENGAN ALAT SOXHLET TERHADAP
KANDUNGAN KURKUMINOID DAN MINYAK ATSIRI
DALAM EKSTRAK ETANOLIK RIMPANG TEMULAWAK
(Curcuma xanthorrhiza Roxb.)
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)
Program Studi Farmasi
Oleh :
Melia Sari Dewi
NIM : 068114085
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2010
-
iii
-
iv
-
v
HALAMAN PERSEMBAHAN
Semua ini ku persembahkan untuk :
Orang tua
Saudara-saudara
Sahabat-sahabat
Fakultas dan Almamaterku
-
vi
-
vii
PRAKATA
Puji dan syukur kepada Allah Yang Maha Pengasih atas berkat dan
kasihNya
sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul
“Pengaruh Variasi
Metode Ekstrasi Secara Maserasi dan Dengan alat Soxhlet Terhadap
Kandungan
Kurkuminoid Dan Minyak Atsiri Dalam Ekstrak Etanolik Rimpang
Temulawak
(Curcuma Xanthorrhiza Roxb.)”. Skripsi ini ditulis sebagai salah
satu syarat untuk
memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S. Farm) program studi Farmasi
Universitas
Sanata Dharma.
Tersusunnya skripsi ini dapat terwujud berkat bimbingan dan
pengarahan
serta bantuan dari banyak pihak, maka pada kesempatan ini
penulis mengucapkan
banyak terimakasih kepada :
1. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dekan Fakultas
Farmasi
Univarsitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
2. Ibu Erna Tri Wulandari, M.Si., Apt. selaku Dosen Pembimbing
yang telah
memberikan bimbingan dan arahan selama penelitian maupun
penyusunan
skripsi.
3. Dr. C. J Soegihardjo, Apt. selaku Dosen Penguji yang telah
memberikan kritik
dan saran untuk lebih menyempurnakan penelitian ini.
4. Lucia Wiwid Wijayanti, M. Si selaku Dosen Penguji yang telah
memberikan
kritik dan saran untuk lebih menyempurnakan penelitian ini.
5. Prof. Dr. Sudibyo Martono, M. Si., Apt. yang telah berkenan
memberikan
standar kurkumin untuk penelitian ini dan berkenan berdiskusi
mengenai
kurkumin.
6. Para laboran di laboratorium Kimia Organik dan Laboratorium
Kimia
Instrumental, Laboratorium Farmakognosi Fitokimia, dan Kebun
Obat
-
viii
7.
-
ix
INTISARI
Sejak tahun 2003 Temulawak (Curcuma xanthorrhiza Roxb.)
merupakansatu dari Sembilan tanaman obat unggulan Indonesia. Pada
tanggal 14 Juli 2005 diKeraton Yogyakarta telah dilakukan
pencanangan “Gerakan Nasional MinumTemulawak” yang sudah diresmikan
oleh Menteri Pertanian Republik Indonesiabersama dengan kepala
Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia.
Kurkuminoid dan minyak atsiri merupakan kandungan kimia utama di
dalamrimpang temulawak. Pada penelitian ini bertujuan untuk melihat
bagaimanapengaruh dari variasi metode ekstraksi yang digunakan
untuk memperolehkandungan kurkuminoid dan minyak atsiri.
Penelitan ini termasuk penelitian quasi eksperimental dengan
variasi metodeekstraksi secara maserasi dan dengan alat Soxhlet
sebagai perlakuan. Dalampenelitian ini pelarut untuk ekstraksi
menggunakan etanol 70%. Ekstrak yangdiperoleh kemudian diukur
menggunakan spektrofotometer visibel untuk mengukurkurkuminoid dan
menggunakan destilasi Stahl untuk mengisolasi minyak atsiri
sertadiukur dengan menggunakan labu berskala.
Hasil yang diperoleh kadar rata-rata minyak atsiri secara
maerasi yaitu18,1% v/b dan hasil dengan alat Soxhlet 19,3566% v/b.
Sedangkan untuk kadar rata-rata kurkuminoid secara maserasi yaitu
26,6349 mg% b/b dan hasil dengan alatSoxhlet 53,4051 mg% b/b. Hasil
penetapan kadar kurkuminoid dan minyak atsiridianalisis dengan uji
statistik t-test diperoleh bahwa metode dengan alat Soxhletlebih
baik dibandingkan maserasi untuk memperoleh kurkuminoid. Dan
metodedengan alat Soxhlet dan maserasi sama baiknya untuk
memperoleh minyak atsiri.
Kata kunci (keywords) : maserasi, alat Soxhlet, kurkuminoid,
minyak atsiri,Temulawak
-
x
ABSTRACT
Since 2003, Javanese turmeric (Curcuma xanthorrhiza Roxb.) Is
one of nineeminent Indonesian medicinal plants. On July 14, 2005 in
Yogyakarta Palace hadmade the declaration of "National Movement
Drinking Temulawak" which wasinaugurated by the Minister of
Agriculture of the Republic of Indonesia, togetherwith the head of
the Food and Drug Control Agency of the Republic of Indonesia.
Curcuminoids and volatile oil is the main chemical constituents
in rhizomeof ginger. In this study aims to see how the influence of
variation of the extractionmethods used to obtain curcuminoids and
volatile oil content.This study includes quasi experimental studies
with various methods of extractionby maceration and by Soxhlet tool
as treatment. In this study, solvent extractionusing 70% ethanol.
Extracts obtained then measured using a visiblespectrophotometer to
measure the curcuminoids and by scaled pipe to measure thevolume of
volatile oil in the extracts that obtained from the extraction of
bothmethods.
Results obtained an average concentration of volatile oils in
maceration18.1% v/w and the results by Soxhlet tool 19.3566% v/w.
While to the average levelof curcuminoids by maceration 26,6349 mg%
w/w and the result by Soxhletinstrument 53,4051 mg% w/w. Assay
results of curcuminoids and volatile oil wereanalyzed using
statistical t-test showed that the method is better than
macerationdengan alat Soxhlet to obtain curcuminoids. And by
Soxhlet instrument andmaceration methods equally well to obtain the
essential oil.
Key words (keywords): maceration, Soxhlet instrument,
curcuminoids, essentialoils, Javanese turmeric
-
xi
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN SAMPUL……………………………………………………… i
HALAMAN JUDUL ……………………………………………………...... ii
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ………………………….... iii
HALAMAN PENGESAHAN …………………………………………….... iv
HALAMAN PERSEMBAHAN ……………………………………....……. v
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ……………………………………. vi
PRAKATA ……………………………………………………….................. vii
INTISARI………………………………………………………………......... ix
ABSTRACT …………………………….....……………………….................. x
DAFTAR ISI ………………………….....…………………………............... xi
DAFTAR TABEL ………………………………………………………....... xv
DAFTAR GAMBAR ……………………………………………………….. xvi
DAFTAR LAMPIRAN……………………………………………………… xvii
BAB I. PENGANTAR ……………………………………………………… 1
A. Latar Belakang …………………......………………………………... 1
1. Perumusan masalah …………………………………………… 3
2. Keaslian penelitian ……………………………………………. 3
3. Manfaat penelitian ……………………………………………. 4
B. Tujuan Penelitian …………………………………………………... 4
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ……………………………………… 5
A. Uraian Tanaman Temulawak …………………………......…………. 5
-
xii
1. Klasifikasi tanaman temulawak ……………………….……… 5
2. Nama daerah…….…………………………………………….. 5
3. Rimpang temulawak..…………………………………………. 6
B. Uraian Kurkuminoid ……………………………………………….. 7
C. Uraian Minyak Atsiri ……………………………………………..... 8
D. Uraian Peyulingan Minyak Atsiri…………………………………... 9
E. Uraian Ekstraksi ……………………………………………………. 10
F. Uraian Maserasi…………………………………………………….. 12
G. Uraian Dengan alat Soxhlet………………………………………….. 13
H. Uraian Ekstrak ……………………………………………………... 14
1. Definisi ekstrak ………………………………………………… 14
2. Pengelompokan ekstrak ………………………………………… 14
3. Ekstrak temulawak…………………………………………… 15
I. Uraian Spektrofotometri …………………………………………… 15
J. Keterangan Empiris ..……………………………………..…………. 19
BAB III. METODE PENELITIAN ……………………………..………....... 20
A. Jenis dan Rancangan Penelitian .....………………………………… 20
1. Jenis penelitian.. ……………………………………………… 20
2. Tahapan penelitian …..…………………………………….…… 20
3. Variabel ……………………………………………………….. 21
B. Definisi Operasional ...……………………………………………..... 21
C. Bahan dan Alat
Penelitian.....................................................................
22
1. Alat
..........................................................................................….
22
-
xiii
2. Bahan
……………….…..…………............................................ 22
D. Jalannya Penelitian ……….…..…………………………………........ 22
1. Identifikasi rimpang temulawak.…………..……………………. 22
2. Pembuatan simplisia ……….…..………………………….......... 23
3. Pembuatan ekstrak rimpang temulawak …..……………………. 25
4. Pengentalan ekstrak rimpang temulawak
…................................. 25
5. Penetapan kandungan minyak atsiri ……….…..…...……...........
26
6. Penetapan kandungan kurkuminoid ………...………………… 26
E. Analisa Data
.........................................................................................
29
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ……….…..…………....................
30
A. Identifikasi Rimpang Temuawak...………………………………....... 30
1. Organoleptik……….…..………………………………………... 30
2. Makroskopis……….…..………………………………………... 31
3. Mikroskopis……….…..………………………………………… 32
B. Pembuatan Simplisia ……….…..…………………………………… 34
1. Pengumpulan rimpang temulawak ……….…..………………... 34
2. Sortasi basah ……….…..……………………………………… 34
3. Pencucian rimpang temulawak ……….…..…………………… 35
4. Perajangan rimpang temulawak ……….…..…………………... 35
5. Pengeringan rimpang temulawak ……….…..………………..... 36
6. Sortasi kering ……….…..…………………………………….... 37
7. Pembuatan serbuk ……….…..………………………………… 37
C. Cara Maserasi ……….…..…………………………………………… 38
-
xiv
D. Cara Dengan alat Soxhlet ……….…..……………………………… 39
E. Pengentalan ekstrak rimpang temulawak ……….…..……………… 40
F. Penetapan kandungan minyak atsiri ……….…..…………………… 41
G. Penetapan kandungan kurkuminoid dengan Spektofotometri
Visibel.. 44
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ……….…..……………………….. 53
A. Kesimpulan ……….…..……………………………………………... 53
B. Saran ……….…..……………………………………………………. 53
DAFTAR PUSTAKA ……….…..……………………………………........... 54
LAMPIRAN ……….…..…………………………………………………….. 57
BIOGRAFI PENULIS ……….…..………………………………………….. 81
-
xv
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel I. Pengamatan organoleptik rimpang temulawak….....………..
30
Tabel II. Pengamatan makroskopis rimpang temulawak………….......
31
Tabel III. Kadar (%v/b) minyak atsiri ERTM…………………….........
42
Tabel IV. Kadar (%v/b) minyak atsiri ERTS………………………...... 43
Tabel V. Recovery baku
kurkumin…....................................................
46
Tabel VI. Coefisien Variasi (CV) baku kurkumin…………………......
47
Tabel VII. Pengukuran absorbansi kurva baku kurkumin…………........
50
Tabel VIII. Kadar (%b/v) kurkuminoid ERTM ………………………… 51
Tabel IX. Kadar (%b/v) kurkuminoid ERTS……………....………….. 51
Tabel X. Penimbangan bobot konstan ERTM dan volume minyak
atsiri ERTM………………………………………………..... 57
Tabel XI. Penimbangan bobot konstan ERTS dan volume minyak
atsiri ERTS………………………………………………….. 58
Tabel XII. Pengukuran absorbansi kurva baku kurkumin………………
66
Tabel XIII. Pengukuran akurasi dan presisi baku
kurkumin…................. 66
Tabel XIV. Perhitungan LOD dan LOQ baku
kurkumin........................... 68
Tabel XV. Penetapan Kandungan Kurkuminoid pada ERTM………….. 77
Tabel XVI. Penetapan Kandungan Kurkuminoid pada ERTS…………..
77
Tabel XVII. Analisis t-test minyak atsiri ERTM dan ERTS……………...
78
Tabel XVIII. Analisis t-test kadar kurkuminoid ERTM dan
ERTS……….. 79
-
xvi
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Struktur Molekul Kurkuminoid ……………...…………...... 7
Gambar 2. Penampang temulawak dan irisannya ………..…………….. 32
Gambar 3. Penampang Melintang Rimpang Temulawak……………..... 32
Gambar 4. Penampang Melintang Rimpang Temulawak MMI………... 33
Gambar 5. Gugus kromofor dan auksokrom pada kurkuminoid………..
44
Gambar 6. Grafik kurva baku
kurkuminoid….......................................... 50
Gambar 7. Panjang gelombang baku kurkumin replikasi 1 kadar
1,632
x
10-4%b/v…...........................................................................
61
Gambar 8. Panjang gelombang baku kurkumin replikasi 1 kadar
2,856
x
10-4%b/v…..........................................................................62
Gambar 9. Panjang gelombang baku kurkumin replikasi 1 kadar
4,080
x 10-4%b/v…………………………………………………... 62
Gambar 10. Panjang gelombang baku kurkumin replikasi 2 kadar
1,632
x 10-4%b/v…………………………………………………... 63
Gambar 11. Panjang gelombang baku kurkumin replikasi 2 kadar
2,856
x 10-4%b/v…………………………………………………... 63
Gambar 12. Panjang gelombang baku kurkumin replikasi 2 kadar
4,080
x 10-4%b/v…………………………………………………... 64
Gambar 13. Panjang gelombang baku kurkumin replikasi 3 kadar
1,632
x 10-4%b/v…………………………………………………... 64
Gambar 14. Panjang gelombang baku kurkumin replikasi 3 kadar
2,856
x 10-4%b/v…………………………………………………...65
Gambar 15. Panjang gelombang baku kurkumin replikasi 3 kadar
4,080
x 10-4%b/v…………………………………………………...65
Gambar 16. Vacuum Rotary Evaporator…….....………………………... 80
Gambar 17. Destilasi Stahl……………….……………………………… 79
Gambar 18. Ekstrak etanolik rimpang Temulawak dengan alat
soxhlet… 79
Gambar 19. Ekstrak etanolik rimpang Temulawak maserasi………..…...
79
-
xvii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran I. Pengentalan Ekstrak Rimpang
Temulawak……............... 57
Lampiran II. Penetapan Kadar Minyak Atsiri Ekstrak Rimpang
Temulawak……………………………………………… 57
Lampiran III. Surat Jaminan Keaslian Baku Kurkumin………………...
59
Lampiran IV. Pembuatan Larutan Baku Kurkumin ………...……….....
60
Lampiran V. Penetapan Panjang Gelombang Maksimum Baku
Kurkumin………………………………………………... 61
Lamapiran VI. Pembuatan Kurva Baku Kurkumin………………............
66
Lampiran VII. Validasi Metode Baku Kurkumin……………………….. 66
Lampiran VIII. Perhitungan Orientasi Penimbangan Sampel
Ekstrak
Temulawak……………………………………………… 68
lampiran VIX. Perhitungan Kadar Kurkuminoid Dalam Sampel
Ektras
Temulawak……………………………………………… 70
Lampiran X. t-test Minyak Atsiri dan Kurkuminoid Ekstrak
Rimpang
Temulawak……………………………………………… 77
Lampiran XI. Gambar Alat-alat dan ekstrak rimpang Temulawak……..
80
-
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Indonesia merupakan salah satu negara agraris yang sebagian
besar
penduduknya bertumpu pada bidang pertanian. Salah satu produk
pertanian yang
cukup banyak adalah Temulawak. Tanaman ini merupakan tanaman
pekarangan
yang termasuk dalam salah satu tanaman apotek hidup yang mudah
ditanam pada
berbagai tempat. Rimpang temulawak pada umumnya hanya digunakan
untuk
keperluan dapur obat-obatan dan bahan pewarna. Rimpang ini
banyak beredar di
pasar-pasar tradisional maka penelitian ini menggunakan rimpang
yang diperoleh
dari pasar.
Sejak tahun 2003 Temulawak merupakan satu dari sembilan
tanaman
obat unggulan Indonesia yang sudah mulai diteliti dan dalam
proses penyelesaian
uji klinik oleh Badan Pengawas Obat dan Makanan. Pada tanggal 14
Juli 2005 di
Keraton Yogyakarta telah dilakukan pencanangan “Gerakan Nasional
Minum
Temulawak” yang sudah diresmikan oleh Menteri Pertanian Republik
Indonesia
bersama dengan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik
Indonesia
(Anonim, 2005).
Kandungan kimia rimpang Temulawak yang dapat dimanfaatkan
dalam bidang industri makanan, minuman maupun farmasi adalah
pati,
kurkuminoid dan minyak atsiri. Selain pati dan kurkuminoid,
temulawak juga
mengandung minyak atsiri yang dapat digunakan untuk pengobatan,
bumbu,
kosmetik, dan pewangi.
-
2
Kurkuminoid merupakan komponen yang dapat memberi warna kuning
dan zat
ini digunakan sebagai zat warna dalam industri pangan dan
kosmetik. Fraksi
kurkuminoid yang terdapat pada Temulawak terdiri dari dua
komponen, yaitu
kurkumin dan desmetoksikurkumin. Menurut Sidik, dkk (1993)
kandungan
kurkuminoid dalam rimpang Temulawak kering berkisar 3,16 %,
sedangkan kadar
kurkumin dalam kurkuminoid rimpang Temulawak sekitar 58–71%
dan
desmetoksikurkumin berkisar 29–42 %.
Salah satu cara pengambilan kurkumin dari rimpangnya adalah
dengan
cara ekstraksi. Ekstraksi merupakan salah satu metode pemisahan
berdasarkan
perbedaan kelarutan. Secara umum ekstraksi dapat didefinisikan
sebagai proses
pemisahan dan isolasi zat dari suatu zat dengan penambahan
pelarut tertentu
untuk mengeluarkan komponen campuran dari zat padat atau zat
cair. Dalam hal
ini fraksi padat yang diinginkan bersifat larut dalam pelarut
(solvent), sedangkan
fraksi padat lainnya tidak dapat larut.
Metode ekstraksi ada beberapa macam, diantaranya yaitu maserasi
dan
dengan alat Soxhlet. Metode maserasi digunakan untuk simplisia
lunak, jumlah
zat aktif banyak, dan harganya murah. Sedangkan metode dengan
alat Soxhlet
digunakan untuk simplisia yang keras, jumlah zat aktif rendah,
dan harganya
mahal. Rimpang Temulawak termasuk simplisia yang lunak dan
memiliki jumlah
zat aktif rendah, sehingga kedua metode di atas dapat digunakan
untuk
memperoleh kurkuminoid dari rimpang tersebut.
-
3
Kurkuminoid tidak larut sempurna dalam air tetapi larut pada
pelarut
organik. Salah satu pelarut organik adalah etanol, maka dalam
penelitian ini
digunakan pelarut etanol karena kurkuminoid dapat terlarut
dengan baik.
1. Rumusan Masalah
Dari latar belakang yang sudah ada maka masalah yang muncul
dalam penelitian ini yaitu:
a. Apakah ada pengaruh variasi metode ekstraksi secara maserasi
dan dengan
alat Soxhlet terhadap kandungan kurkuminoid dalam ekstrak
etanolik
rimpang Temulawak?
b. Apakah ada pengaruh variasi metode ekstraksi secara maserasi
dan dengan
alat Soxhlet terhadap kandungan minyak atsiri dalam ekstrak
etanolik
rimpang Temulawak?
2. Keaslian Penelitian
Untuk pengaruh suhu ekstraksi terhadap kandungan kurkuminoid
dan
air serbuk Temulawak (Nugroho dkk, 2008) Pengaruh waktu, suhu
dan
perbandingan bahan baku-pelarut pada ekstraksi kurkumin dari
Temulawak
(Curcuma xanthorriza Roxb.) dengan pelarut aseton (Srijanto dkk,
2004); dan
optimalisasi ekstraksi kurkuminoid Temulawak (Curcuma
xanthorrhiza
Roxb.) yang melihat pengaruh suhu, waktu, dan nisbah bahan
baku-pelarut
terhadap kadar kurkuminoid (Dede., S., 2008).
-
4
Tetapi sejauh yang diketahui penulis, penelitian mengenai
pengaruh
variasi metode ekstraksi secara maserasi dan dengan alat Soxhlet
terhadap
kandungan kurkuminoid dan minyak atsiri belum dilakukan.
3. Manfaat Penelitian
Manfaat yang diharapkan dari penelitian ini adalah :
a. Manfaat teoritis :
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan sumbangan ilmiah
dan menambah wawasan di bidang kesehatan khususnya mengenai
variasi metode
ekstraksi untuk memperoleh kandungan kurkuminoid dan minyak
atsiri dalam
rimpang Temulawak.
b. Manfaat praktis :
Penelitian ini untuk mengetahui metode ekstraksi yang baik
untuk
memperoleh kandungan kurkuminoid dan minyak atsiri dari rimpang
Temulawak.
B. Tujuan
Penelitian ini bertujuan untuk melihat pengaruh dari variasi
metode
ekstraksi secara maserasi dan dengan alat Soxhlet untuk
memperoleh kandungan
kurkuminoid dan minyak atsiri dalam ekstrak etanolik rimpang
Temulawak.
-
5
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Tanaman Temulawak
1. Klasifikasi Tanaman Temulawak
Kedudukan tanaman Temulawak dalam tata nama (sistematika)
tumbuhan termasuk ke dalam klasifikasi sebagai berikut.
Divisi : Spermatophyta
Sub divisi : Angiospermae
Kelas : Monocotyledonae
Ordo : Zingiberales
Familia : Zingiberaceae
Genus : Curcuma
Spesies : Curcuma xanthorrhiza Roxb. (Rukmana, 1995)
2. Nama Daerah
Tanaman temulawak merupakan herba yang termasuk dalam
familia
Zingiberaceae. Temulawak dikenal dengan beberapa nama ;
a. Nama Indonesia : Temulawak (Anonim, 1979)
b. Sumatera : Temu lawak (Melayu)
c. Jawa : Temu lawak
d. Sunda : Koneng gede
e. Madura : Temo labak (Anonim, 1979)
-
6
3. Rimpang Temulawak
Rimpang Temulawak adalah rimpang Curcuma xanthorriza Robx.
Kadar minyak atsiri tidak kurang dari 6% v/b. Bau aromatik, rasa
tajam dan pahit.
Makroskopik keping tipis, bentuk bundar atau jorong, ringan,
keras,
rapuh, garis tengah sampai 6 cm, tebal 2 mm sampai 5 mm,
permukaan luar
berkerut, warna coklat kuning sampai coklat. Bidang irisan
berwarna coklat
kuning buram, melengkung tidak beraturan tidak rata, sering
dengan tonjolan
melingkar pada batas antar silinder pusat dengan korteks;
korteks sempit, tebal 3
mm sampai 4 mm. Bekas patahan berdebu, warna kuning jingga
sampai coklat
terang.
Mikroskopik. Epidermis bergabus, terdapat sedikit rambut
yang
berbentuk kerucut, bersel satu. Hipedermis agak menggambus, di
bawahnya
terdapat periderm yang kurang berkembang. Korteks dan silinder
pusat
parenkimatik, terdiri dari sel parenkim berdinding tipis berisi
butir pati; dalam
parenkim tersebar banyak sel minyak yang berisi minyak berwarna
kuning dan zat
berwarna jingga, dan juga terdapat pati berbentuk pipih, bulat
panjang sampai
bulat telur memanjang, panjang butir 20 µm sampai 70 µm, lebar 5
µm sampai 30
µm, tebal 3 µm sampai 10 µm, lamela jelas, hilus di tepi. Bekas
pembuluh tepi
kolatera, tersebar, tidak beraturan pada parenkim korteks dan
pada silinder pusat;
berkas pembuluh di sebelah dalam endodermis tersusun dalam
lingkaran dan
letaknya lebih jauh berdekatan satu dengan yang lainnya;
pembuluh didampingi
oleh sel sekresi, panjang sampai 200 µm, berisi zat berbutir
berwarna coklat
dengan besi (III) klorida LP menjadi lebih tua.
-
7
Serbuk warna kuning kecoklatan, Fragmen pengenal adalah butir
pati;
fragmen parenkim dengan sel minyak, fragmen berkas pembuluh,
warna kuning
intensif (Anonim, 1979).
B. Kurkuminoid
Kurkumin selain di dalam kunyit terdapat juga di dalam Temulawak
(C.
xanthorrhiza Roxb.) dan temugiring (C. heyneana Val.) (Donatus,
1994).
Kurkumin merupakan komponen terbesar dari kurkuminoid sehingga
sering
disebut kadar total kurkuminoid dihitung sabagai % kurkumin.
Karena alasan
tersebut beberapa peneliti baik fitokimia maupun farmakologi
lebih ditekankan
pada kurkumin (Sumiati, 2006).
O O
H
R2R1
OHHO
Gambar 1. Struktur Molekul Kurkuminoid (Roughly et al, 1973)
Kurkumin merupakan pigmen yang larut dalam larutan yang
bersifat
lipofil seperti etanol, metanol, eseton, serta larutan asam
asetat glasial, tetapi
praktis tidak larut dalam air dan eter (Windholz, 1981;
Stancovic, 2004). Dalam
-
8
suasana pH basa atau netral, kurkumin dapat terdegradasi menjadi
asam firulat
(asam 4-hidroksi-3-metoksinamat) dan dalam ferolilmentana
(4-hidroksi-3-
metoksinamoil-metana). Pada range pH 1-7, larutan berwarna
kuning sedangkan
pada pH >7,5 terjadi perubahan warna menjadi warna merah
(Stancovic, 2004).
C. Minyak Atsiri
Minyak atsiri atau minyak menguap adalah massa yang berbau
khas,
yang berasal dari tanaman, mudah menguap pada suhu kamar tanpa
mengalami
penguraian. Minyak atsiri sering dikenal dengan nama volatile
oil, ethereal oil,
atau essential oil dalam farmakope Indonesia dikenal dengan nama
Olea volatilia.
Pada umumnya minyak atsiri dalam keadaan segar tidak berwarna
atau
berwarna pucat, bila dibiarkan akan berwarna lebih gelap; berbau
sesuai dengan
bau tanaman penghasilnya. Umumnya larut dalam pelarut organik
dan sukar larut
dalam air.
Minyak atsiri merupakan suatu hasil proses metabolisme dalam
tanaman.
Minyak atsiri terbentuk karena reaksi antara berbagai
persenyawaan kimia dengan
air. Minyak tersebut disintesis dalam sel kelenjar, dan ada juga
yang terbentuk
dalam pembuluh resin misalnya minyak terpentin dari tanaman
pinus. Minyak
atsiri umumya terdiri dari berbagai campuran persenyawaan kimia
yang terbentuk
dari unsur karbon (C), hidrogen (H), dan oksigen (O), serta
beberapa
persenyawaan kimia yang mengandung unsur nitrogen (N), dan
belerang (S)
(Anonim, 1985).
-
9
Minyak atsiri terdapat pada bagian khusus tanaman, tergantung
pada
tanaman tersebut. Pada tanaman Zingiberaceae minyak atsiri
terdapat dalam sel-
sel rimpang (Tyler et al., 1988). Salah satu komponen penyusun
minyak atsiri
adalah sineol dan borneol yang berkhasiat sebagai counter
irritant. Kelompok
Zingiberaceae mengandung banyak minyak atsiri dengan komponennya
termasuk
golongan monoterpen dan seskuiterpen seperti sineol dan borneol
yang
merupakan monoterpen alkohol (Hansel, 1985).
D. Penyulingan Minyak Atsiri
Minyak atsiri diperoleh antara lain melalui proses penyulingan.
Penyulingan
didefinisikan sebagai pemisahan komponen suatu campuran dari dua
jenis cairan
atau lebih berdasarkan perbedaan tekanan uap dan masing-masing
zat. Minyak
atsiri bersifat mudah menguap terdiri dari campuran zat yang
mudah menguap
dengan komposisi dan titik didih yang berbeda-beda. Setiap
substansi yang dapat
menguap memiliki titik didih sangat tinggi (Anonim, 1985).
Minyak atsiri dapat diperoleh melalui tiga metode penyulingan,
yaitu
1. Penyulingan dengan air
Metode penyulingan ini, terjadi kontak langsung antara bahan
yang
disuling dengan air mendidih. Penyulingan cara ini sesuai untuk
simplisia kering
yang tidak rusak dengan pendidihan. Penyulingan ini dapat
menyebabkan
banyaknya rendemen minyak yang hilang (tidak tersuling) dan
terjadi pula
penurunan minyak yang diperoleh, bisa menyebabkan terjadinya
oksidasi serta
hasil yang tidak terdeteksi (Anonim, 1985).
-
10
2. Penyulingan dengan uap
Penyulingan ini tidak memerlukan air, uap air panas yang
biasanya
bertekanan lebih dari 1 atmosfir dialirkan melalui pipa uap.
Peralatan yang
digunakan tidak berbeda dengan penyulingan dengan air dan uap,
hanya
diperlukan alat tambahan untuk memeriksa suhu dan tekanan
(Anonim, 1985).
Penyulingan ini baik digunakan untuk membuat minyak atsiri dari
biji,
akar, kayu yang umumnya mengandung komponen minyak yang bertitik
didih
tinggi (Anonim, 1985).
3. Peyulingan dengan uap dan air
Penyulingan ini dilakukan pada simplisia basah atau kering yang
dapat
rusak oleh pendidihan. Pada metode ini, bahan yang akan disuling
diletakkan pada
rak-rak atau saringn berlubang. Ketel suling diisi air sampai
permukaan air sedikit
di bawah saringan atau rak terbawah, kemudian air dipanaskan
sampai mendidih.
Ciri khas dari metode ini adalah : (1) uap selalu dalam keadaan
basah, januh, dan
tidak terlalu panas, (2) bahan yang akan disuling hanya
berhubungan dengan uap
dan tidak dengan air mendidih (Guenther, 1987).
E. Ekstraksi
Penyarian (ekstraksi) adalah kegiatan penarikan zat yang dapat
larut dari
bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair. Pemilihan
cairan penyari dan
cara penyarian didasarkan pada zat aktif yang terkandung pada
bahan tersebut.
Secara umum, penyarian dapat dibedakan menjadi: (a) maserasi,
yaitu cara
penyarian untuk simplisia yang mengandung zat aktif yang mudah
larut dalam
-
11
cairan penyari. Dilakukan dengan merendam serbuk simplisia atau
bahan dalam
cairan penyari; (b) infundasi, yaitu proses penyarian yang
umumnya digunakan
untuk menyari zat kandungan aktif yang larut dalam air dari
bahan-bahan nabati.
Penyarian dengan cara ini menghasilkan sari yang tidak stabil
dan mudah
tercemar oleh kuman dan kapang. Oleh sebab itu sari yang
diperoleh dengan cara
ini tidak boleh disimpan lebih dari 24 jam; (c) perkolasi, cara
penyarian yang
dilakukan dengan mengalirkan cairan penyari melalui serbuk
simplisia yang telah
dibasahi. Serbuk simplisia ditempatkan dalam suatu bejana
silinder, yang bagian
bawahnya diberi sekat berpori. Cairan penyari dialirkan dari
atas ke bawah
melalui serbuk tersebut, cairan penyari akan melarutkan zat
aktif sel-sel yang
dilalui sampai keadaan jenuh. Gerak ke bawah disebabkan oleh
kekuatan gaya
beratnya sendiri dan cairan di atasnya, dikurangi dengan daya
kapiler yang
cenderung untuk menahan; (d) penyarian berkesinambungan, Dandang
dipisahkan
menjadi 2 bagian, dibawah tempat cairan penyari di atas tempat
serbuk simplisia
antara 2 ruangan tersebut dihubungkan dengan pipa sehingga
larutan sari dapat
turun melalui pipa tersebut. Cairan penyari dipanaskan dengan
pipa pemanas atau
cara lain yang cocok. Cairan penyari menguap dan oleh pendingin
didinginkan
dan mengembun. Embunan disemprotkan oleh alat penyemprot ke
serbuk
simplisia. (Anonim,1986).
Menurut Voigt (1994), ekstrak cair yang memiliki konsistensi
cair dan
kandungan pelarutnya yang masih tinggi dapat diubah menjadi
bentuk ekstrak
kental. Proses pengentalan ini dapat dilakukan melalui penguapan
dengan
menggunakan alat Vacuum Rotary Evaporator. Cara kerjanya yaitu
perputaran
-
12
labu dalam sebuah pemanas pada temperatur dan kecepatan putar
tertentu, akan
menguapkan cairan yang terkandung dalam ekstrak. Pengaturan
dalamnya
pencelupan ke dalam penangas air, suhu penangas, hampa udara dan
suhu
pendingin membuat kondisi optimal dapat terpenuhi sehingga
proses pengentalan
ekstrak dapat berlangsung cepat (Voigt, 1994).
F. Maserasi
Maserasi merupakan cara penyarian yang sederhana. Maserasi
dilakukan
dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari.
Cairan penyari
akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang
mengandung zat
aktif, zat aktif akan larut dan karena adanya perbedaan
konsentrasi antara larutan
zat aktif di dalam sel dengan yang di luar sel, maka larutan
yang terpekat didesak
keluar. Peristiwa tersebut berulang sehingga terjadi
keseimbangan konsentrasi
antara larutan di luar sel dan di dalam sel.
Maserasi digunakan untuk penyarian simplisia yang mengandung zat
aktif
yang mudah larut dalam cairan penyari, tidak mengandung zat yang
mudah
mengembang dalam cairan penyari, tidak mengandung benzoin,
stirak dan lain-
lain.
Keuntungan cara penyarian dengan maserasi adalah cara pengerjaan
dan
peralatan yang digunakan sederhana dan mudah diusahakan.
Kerugian cara
maserasi adalah pengerjaannya lama dan penyariannya kurang
sempurna
(Anonim,1986).
-
13
G. Dengan alat Soxhlet
Cairan penyari diisikan pada labu, serbuk simplisia diisikan
pada tabung
dari kertas saring atau tabung yang berlubang-lubang dari gelas
baja tahan karat
atau bahan lain yang cocok. Cairan penyari dipanaskan hingga
mendidih. Uap
penyari akan naik ke atas melalui serbuk simplisia. Uap penyari
mengembun
karena didinginkan oleh pendingin balik. Embun turun melalui
serbuk simplisia
sambil melarutkan zat aktifnya dan kembali ke labu. Cairan akan
menguap
kembali berualng proses seperti diatas sampai serbuk simplisia
tersari sempurna.
Keuntungan
1) Cairan penyari yang diperlukan lebih sedikit, dan secara
langsung diperoleh
hasil yagn lebih pekat.
2) Serbuk simplisia disari oleh cairan penyari yang murni,
sehingga dapat
menyari zat aktif lebih banyak.
3) Penyarian dapat diteruskan sesuai dengan keperluan, tanpa
menambah volume
cairan penyari.
Kerugian
1) Larutan dipanaskan terus menerus, sehingga zat aktif yagn
tidak tahan
pemanasan kurang cocok. Ini dapat diperbaiki dengan menambah
peralatan untuk
mengurangi tekanan udara.
2) Cairan penyari dididihkan terus menerus, sehingga cairan
penyari yang baik
harus murni atau campuran azeotrop (Anonim, 1986).
-
14
H. Ekstrak
1. Definisi ekstrak
Ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan
mengekstraksi senyawa aktif dari simplisia nabati atau simplisia
hewani
menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir
semua
pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan
sedemikian
sehingga memenuhi standar baku yang telah ditetapkan (Anonim,
2000).
2. Pengelompokan ekstrak
Ekstrak berdasarkan sifatnya dapat dikelompokkan menjadi :
(a)
ekstrak encer (extractum tenue), (b) ekstrak kental (extractum
spissum), (c)
ekstrak kering (extractum siccum), (d) Ekstrak cair (extractum
fluidum),
memiliki konsistensi cair dan mudah dituang (Voigt, 1994).
Ekstrak cair adalah sediaan dari simplisia nabati yang
mengandung etanol sebagai pelarut atau sebagai pengawet. Jika
tidak
dinyatakan lain pada masing-masing monografi tiap ml ekstrak
mengandung
senyawa aktif dari 1 g simplisia yang memenuhi syarat.
Ekstrak kental adalah ekstrak cair dimana sebagian besar
pelarut
diuapkan sehingga kandungan pelarutnya tinggal 10%. Ekstrak
kering adalah
ekstrak dimana semua pelarutnya diuapkan sampai semua pelarut
menguap
semua (Sumaryono, 2004).
-
15
3. Ekstrak Temulawak
Ekstrak kental Temulawak adalah ekstrak yang dibuat dari
rimpang tumbuhan Curcuma xanthorrhiza Roxb., suku
Zingiberaceae,
mengandung minyak atsiri tidak kurang dari 4,6 % dan kurkuminoid
tidak
kurang dari 14,2%.
Pemerian. Bentuk kental, warna kuning kecoklatan, bau khas,
rasa
pahit. Kandungan kimia yaitu kurkumin, desmetoksikurkumin,
minyak atsiri
dengan komponen utama xantorizol, dan oleoresin (Anonim,
2004).
I. Spektrofotometri
Prinsip kerja spektrofotometri adalah berdasarkan atas interaksi
antara
radiasi elektromagnetik dengan materi. Materi dapat berupa atom,
ion, atau
moleku, sedang variasi elektromagnetik merupakan salah satu
jenis energi yang
ditransmisikan dalam ruang dengan kecepatan tinggi. Interaksi
antara molekul
yang mempunyai gugus kromofor dan radiasi elektromagnetik pada
daerah
ulntraviolet (200nm-400nm) dan sinar tampak (400nm-800nm)akan
menghasilkan
spektra serapan elektronik, spektra serapan ini dapat digunakan
untuk
menganalisis kuantitatif karena jumlah radiasi elektromagnetik
yang diserap ada
hubungannya dengan jumlah molekul penyerap (Skoog, 1985).
Penyimpangan hukum Beer mungkin disebabkan oleh perubahan
kimia
atau alat. Hukum Beer mungkin tidak cocok disebabkan oleh adanya
perubahan
kadar zat yang dilarutkan, karena adanya asosiasi antar molekul
zat atau antara
molekul zat dengan molekul pelarut. Penyimpangan lain mungkin
disebabkan
-
16
oleh sinar polikromatik, lebar cerah atau sinar menyimpang.
Larutan yang
mengandung 1 mg zat tiap 100 ml dalam 1 cm sering mempunyai
serapan 0,2
sampai 0,8. Pada pengukuran serapan suatu larutan selalu
diperlukan suatu larutan
blanko. Maksud dari larutan blanko adalah untuk mengatur
spektrofotometer
hingga pada panjang gelombang yang digunakan mempunyai serapan
nol
(Anonim, 1974).
Validasi metoda analisis adalah suatu tindakan penilaian
terhadap
parameter tertentu, berdasarkan percobaan laboratorium, untuk
membuktikan
bahwa parameter tersebut memenuhi persyaratan untuk
penggunaannya. Beberapa
parameter analisis yang harus dipertimbangkan dalam validasi
metode analisis
diuraikan dan didefinisikan sebagaimana cara penentuannya.
1. Kecermatan (accuracy)
Kecermatan adalah ukuran yang menunjukkan derajat kedekatan
hasil
analis dengan kadar analit yang sebenarnya. Kecermatan
dinyatakan sebagai
persen perolehan kembali (recovery) analit yang ditambahkan.
Kecermatan
ditentukan dengan dua cara yaitu metode simulasi (spiked-placebo
recovery) atau
metode penambahan baku (standard addition method).
2. Keseksamaan (precision)
Keseksamaan adalah ukuran yang menunjukkan derajat
kesesuaian
antara hasil uji individual, diukur melalui penyebaran hasil
individual dari rata-
rata jika prosedur diterapkan secara berulang pada sampel-sampel
yang diambil
dari campuran yang homogen.
-
17
Keseksamaan diukur sebagai simpangan baku atau simpangan
baku
relatif (koefisien variasi). Keseksamaan dapat dinyatakan
sebagai keterulangan
(repeatability) atau ketertiruan (reproducibility). Keterulangan
adalah
keseksamaan metode jika dilakukan berulang kali oleh analis yang
sama pada
kondisi sama dan dalam interval waktu yang pendek. Ketertiruan
adalah
keseksamaan metode jika dikerjakan pada kondisi yang berbeda.
Biasanya
analisis dilakukan dalam laboratorium-laboratorium yang
berbeda
menggunakan peralatan, pereaksi, pelarut, dan analis yang
berbeda pula.
3. Selektivitas (Spesifisitas)
Selektivitas atau spesifisitas suatu metode adalah kemampuannya
yang
hanya mengukur zat tertentu saja secara cermat dan seksama
dengan adanya
komponen lain yang mungkin ada dalam matriks sampel.
Selektivitas seringkali
dapat dinyatakan sebagai derajat penyimpangan (degree of bias)
metode yang
dilakukan terhadap sampel yang mengandung bahan yang ditambahkan
berupa
cemaran, hasil urai, senyawa sejenis, senyawa asing lainnya, dan
dibandingkan
terhadap hasil analisis sampel yang tidak mengandung bahan lain
yang
ditambahkan.
Selektivitas metode ditentukan dengan membandingkan hasil
analisis
sampel yang mengandung cemaran, hasil urai, senyawa sejenis,
senyawa asing
lainnya atau pembawa plasebo dengan hasil analisis sampel
4. Linearitas dan rentang
Linearitas adalah kemampuan metode analisis yang memberikan
respon
yang secara langsung atau dengan bantuan transformasi
matematematik yang
-
18
baik, proporsional terhadap konsentrasi analit dalam sampel.
Rentang metode
adalah pernyataan batas terendah dan tertinggi analit yang sudah
ditunjukkan
dapat ditetapkan dengan kecermatan, keseksamaan, dan linearitas
yang dapat
diterima.
Linearitas biasanya dinyatakan dalam istilah variansi sekitar
arah garis
regresi yang dihitung berdasarkan persamaan matematik data yang
diperoleh dari
hasil uji analit dalam sampel dengan berbagai konsentrasi
analit. Perlakuan
matematik dalam pengujian linearitas adalah melalui persamaan
garis lurus
dengan metode kuadrat terkecil antara hasil analisis terhadap
konsentrasi analit.
5. Batas deteksi dan batas kuantitasi
Batas deteksi adalah jumlah terkecil analit dalam sampel yang
dapat
dideteksi yang masih memberikan respon signifikan dibandingkan
dengan
blangko. Batas deteksi merupakan parameter uji batas. Batas
kuantitasi
merupakan parameter pada analisis renik dan diartikan sebagai
kuantitas terkecil
analit dalam sampel yang masih dapat memenuhi kriteria cermat
dan seksama.
Penentuan batas deteksi suatu metode berbeda-beda tergantung
pada metode
analisis itu menggunakan instrumen atau tidak (Harmita,
2004).
J. Keterangan Empiris
Rimpang Temulawak mempunyai kandungan kimia utama
kurkuminoid
yang dapat digunakan untuk pengobatan antiinflamasi. Kurkuminoid
larut dalam
alkohol dan asam asetat glasial, tetapi tidak larut dalam air
dan eter. Kurkuminoid
dapat diperoleh dengan penyarian secara maserasi dan dengan alat
Soxhlet. Hal
-
19
ini karena penyarian menggunakan cairan penyari etanol karena
memiliki
kepolaran yang mirip.
Pada rimpang Temulawak juga memiliki kandungan minyak atsiri
berupa
cairan berwarna kuning atau kuning jingga, mempunyai rasa yang
tajam, bau khas
aromatik, mempunyai indeks bias 1,5130 (240C), bobot jenis
0,9423 dan rotasi
optis –140 pada 240C. Rimpang Temulawak merupakan salah satu
tumbuhan yang
rimpangnya mengandung minyak atsiri dalam kadar yang cukup
besar, yaitu
tidak kurang dari 3,2% (Anonim, 2004).
Keterangan empiris yang diharapkan dari penelitian ini adalah
dapat
mengetahui perbedaan kandungan kurkuminoid dan minyak atsiri
dalam ekstrak
Temulawak dengan variasi metode, yaitu ekstraksi maseasi dan
dengan alat
Soxhlet.
-
20
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
1. Jenis Penelitian
Penelitian ini termasuk penelitian quasi eksperimental yaitu
membandingkan perbedaan kandungan kurkuminoid dan minyak atsiri
dalam
Temulawak dengan variasi metode secara maserasi dan dengan alat
Soxhlet
sebagai perlakuan. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium
Farmakognosi
Fitokimia dan Laboratorium Analisis Instrumental Fakultas
Farmasi Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta.
2. Tahapan penelitian
Langkah-langkah penelitian, meliputi :
a. Pembuatan simplisia
b. Penyerbukan rimpang Temulawak
c. Identifikasi rimpang Temulawak secara organoleptik,
makroskopik, dan
mikroskopik
d. Pembuatan ekstrak rimpang Temulawak
e. Ekstraksi dengan metode maserasi
f. Ekstraksi dengan metode dengan alat Soxhlet
g. Pengentalan ekstrak rimpang Temulawak
h. Penetapan kandungan minyak atsiri
-
21
i. Penetapan kandungan kurkuminoid dalam ekstrak rimpang
Temulawak
3. Variabel
a. Variabel Bebas metode ekstraksi maserasi dan dengan alat
Soxhlet
b. Variabel Tergantung kandungan kurkuminoid dan minyak
atsiri
c. Variabel Pengacau Tidak Terkendali umur rimpang Temulawak
d. Variabel Terkendali sumber pembelian rimpang Temulawak
B. Definisi Operasional
1. Ekstrak yang digunakan adalah ekstrak kental rimpang
Temulawak yang
diperoleh dari hasil ektraksi dengan metode maserasi dan dengan
alat Soxhlet
yang dikentalkan dengan Vacuum Rotary Evaporator pada suhu 500C
dan tekanan
72 mbar selama 1 jam 30 menit dan oven pada suhu 500C selama 20
jam 15 menit.
2. Kurkuminoid adalah senyawa polifenol berwarna kuning yang
terkandung
pada rimpang Temulawak.
3. Minyak atsiri rimpang Temulawak adalah minyak yang mudah
menguap dan
mengandung bau khas diperoleh dari rimpang Temulawak.
4. Isolasi minyak atsiri adalah volume minyak atsiri yang
dihasilkan dari setiap
bobot penimbangan ekstrak dengan menggunakan destilasi Stahl,
kemudian
minyak atsiri diukur volumenya dengan menggunakan labu
berskala.
5. Penetapan kandungan kurkuminoid adalah penetapan kandungan
kurkuminoid
total yang terukur oleh spektrofotometer visibel pada panjang
gelombang
-
22
maksimum 420 nm. Dengan kadar total kurkuminoid dihitung sebagai
%
kurkumin.
C. Bahan dan Alat Penelitian
1. Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah oven,
Vacuum
Rotary Evaporator, spektrofotometer visibel, neraca analitik,
destilasi Stahl, alat
vacuum, alat-alat gelas, labu alas bulat 1L, alat Soxhlet,
seperangkat maserat.
2. Bahan
a. Bahan utama yang digunakan adalah rimpang Temulawak yang
dibeli
dari pasar Bringharjo.
b. Bahan-bahan lain yang digunakan adalah aquadest, etanol,
aseton p.a.
(Merck), etanol teknis, baku kurkumin, Natrium Hidroksida.
D. Jalannya Penelitian
1. Identifikasi Rimpang Temulawak
Identifikasi dilakukan secara organoleptik, makroskopik,
mikroskopik dengan cara sebagai berikut :
a. Organoleptik : pengamatan warna, bau, dan rasa rimpang
Temulawak.
b. Makroskopik : pengamatan morfologi rimpang Temulawak.
-
23
c. Mikroskopik : rimpang Temulawak kering direndam dalam air
panas sekitar 30 menit, lalu dibuat irisan melintang dan diamati
dalam
larutan kloralhidrat. Serbuk simplisia diamati seperti pada
irisan.
2. Pembuatan Simplisia (Anonim 1985) meliputi :
a. Pengumpulan bahan
Rimpang Temulawak yang digunakan sebagai bahan utama
dibeli dari pasar Bringharjo, Yogyakarta. Rimpang dibeli dari
satu
pedagang sebanyak 10 kg. Rimpang yang dibeli merupakan
rimpang
yang masih baik dilihat dari bentuk fisiknya.
b. Sortasi basah
Rimpang yang sudah dikumpulkan kemudian dipisahkan
dengan pengotor yang terbawa saat penyimpanan di pasar dari
maupun
saat pembelian, misalnya tanah, batang, akar, serta pengotor
lainnya.
c. Pencucian
Setelah disortasi, dilakukan pencucian untuk menghilangkan
tanah dan pengotor lainnya yang melekat pada bahan
simplisia.
Pencucian dilakukan dengan selalu mengganti air di dalam ember
setiap
air sudah sangat keruh dan banyak tanah di dasar ember. Rimpang
yang
telah dicuci kemudian diangin-anginkan agar air sisa pencucian
hilang.
-
24
d. Perajangan
Rimpang yang telah hilang sisa air pencuciannya kemudian
dirajang dengan pisau stainless steel sehingga diperoleh irisan
tipis dan
dipotong dengan ukuran yang dikehendaki kira-kira 0,5 cm
agar
rimpang cepat kering saat dikeringkan (dijemur).
e. Pengeringan
Irisan rimpang Temulawak kemudian dijemur di bawah
sinar matahari tidak langsung dengan ditutupi kain hitam
untuk
menutupi rimpang agar tidak langsung terkena sinar matahari
agar
kandungan di dalam rimpang tidak rusak, sambil dibalik-balik
agar
pengeringannya merata.
f. Sortasi kering
Rimpang yang telah kering kemudian dipisahkan satu per
satu dengan tangan dari benda-benda asing seperti
bagian-bagian
tanaman yang tidak diinginkan dan pengotor-pengotor lain yang
masih
ada dan tertinggal.
g. Pembuatan serbuk simplisia
Simplisia Temulawak yang telah kering kemudian diserbuk
dan diayak dengan ayakan 8/14 sehingga mendapat serbuk yang
homogen.
-
25
3. Pembuatan ekstrak rimpang Temulawak
a. Metode maserasi
Ditimbang 100,0 g serbuk kering Temulawak dan
dimasukkan ke dalam maserator ditambah 1,0 L etanol 70 %.
Ekstraksi
dilakukan selama 3 hari, setiap 24 jam pelarut diganti dengan
yang baru.
Hasil ekstraksi ditampung dalam jirigen dengan disaring
menggunakan
kain katun agar serbuk tidak ikut masuk dalam ekstrak.
b. Metode dengan alat Soxhlet
Ditimbang 100,0 g serbuk kering Temulawak dan
dimasukkan ke dalam sifon. Digunakan alat dengan alat Soxhlet
25
sehingga dilakukan 4 kali untuk memperoleh bobot serbuk 100,0
g.
Larutan penyari menggunakan etanol 70 % sebanyak 2 sirkulasi
(±460
ml) untuk setiap penyarian. Ekstraksi dilakukan sampai semua
kandungan kimia simplisia terekstraksi ditandai dengan larutan
penyari
yang kembali jernih di dalam tabung sifon.
4. Pengentalan ekstrak rimpang Temulawak
Ekstrak cair yang diperoleh dari proses ekstraksi dengan
metode
maserasi dan dengan alat Soxhlet dikentalkan dengan
menggunakan
Vacuum Rotary Evaporator pada suhu 500C dan tekanan 72 mbar
dan
menggunakan oven pada suhu 500C. hasil yang diperoleh masih
berupa
ekstrak cair tetapi sudah agak kental. Kemudain ekstrak yang
sudah di
-
26
rotary dilanjutkan dikentalkan dengan menggunakan oven untuk
diperoleh
ekstrak kental dengan suhu 400C.
5. Penetapan kandungan minyak atsiri
Labu alas bulat 1,0 L dihubungkan dengan alat destilasi
Stahl.
Ditimbang 2,0 g ekstrak kental rimpang Temulawak dan dimasukkan
ke
dalam labu, kemudian ditambahkan aquadest 200,0 ml. Labu
dipanaskan
dengan penangas udara, sehingga penyulingan berlangsung dengan
lambat
tetapi teratur selama 6 jam. Setelah selesai, dibiarkan selama
tidak kurang
dari 15 menit, volume minyak atsiri pada buret dicatat. Kadar
minyak atsiri
dihitung dalam % v/b (Anonim, 2000).
6. Penetapan kandungan kurkuminoid
a. Pembuatan larutan stok
Kurang lebih 20,0 mg kurkumin baku yang ditimbang
seksama dilarutkan dalam aseton menggunakan labu ukur 100,0
ml.
b. Pembuatan larutan intermediet
Larutan stok dengan kadar 20 mg% b/v diambil sebanyak 25,0
ml dan dimasukkan ke dalam labu ukur 100,0 ml, kemudian
diencerkan
dengan aseton hingga tanda sehingga diperoleh larutan
intermediet
kurkumin dengan kadar 5 mg% b/v.
-
27
c. Penetapan panjang gelombang maksimum
Larutan intermediet dengan kadar 5 mg% b/v diambil 0,8 ml;
1,4 ml; 2,0 ml dan dimasukkan ke dalam labu 25,0 ml,
kemudian
diencerkan dengan aseton sampai tanda. Larutan kurkumin
dengan
0,1632 mg% b/v; 0,2856 mg% b/v; 0,4080 mg% b/v ini kemudian
dibaca serapannya pada panjang gelombang sinar tampak dari 400
nm
sampai 700 nm.
d. Penetapan recovery, kesalahan sistemik dan kesalahan acak
Larutan intermediet dengan kadar 5 mg% b/v diambil 0,8 ml;
1,4 ml; 2,0 ml dan dimasukkan ke dalam labu 25,0 ml,
kemudian
diencerkan dengan aseton sampai tanda. Larutan kurkumin
dengan
konsentrasi 0,1632 mg% b/v; 0,2856 mg% b/v; 0,4080 mg% b/v
ini
kemudian dibaca serapannya pada panjang gelombang maksimum,
kemudian dihitung kadarnya menggunakan persamaan kurva baku.
1) Penentuan recovery (perolehan kembali). Recovery dihitung
dari
kadar yang terukur pada kurva baku dibandingkan dengan kadar
yang
diketahui dikalikan 100%.
Perolehan kembali (P) = %100sebenarnyakadar
kurkadar terux
2) Perhitungan kesalahan sistemik.
Rumus kesalahan sistemik = 100 – P
3) Perhitungan kesalahan acak. Kesalahan acak diukur dengan
cv
(coefficient variancy)
-
28
Kesalahan acak (cv) = %100rata-rataharga
SD)(BakuSimpanganx
e. Pembuatan kurva baku
Larutan intermediet dengan kadar 5 mg% b/v diambil 0,8 ml;
1,0 ml; 1,4 ml; 1,6 ml; 2,0 ml dan dimasukkan ke dalam labu 25,0
ml,
kemudian diencerkan dengan aseton sampai tanda. Larutan
kurkumin
dengan konsentrasi 0,1632 mg% b/v; 0,2040 mg% b/v; 0,2856
mg%
b/v; 0,3264 mg% b/v; 0,4080 mg% b/v ini kemudian dibaca
serapannya
pada pada panjang gelombang maksimum. Kemudian gambar kurva
hubungan antara konsentrasi larutan dengan serapan.
f. Penetapan kadar kurkuminoid dalam sampel
Kadar kurkuminoid dengan cara spektrofotometri sinar
tampak pada panjang gelombang maksimum. Ekstrak yang
mengandung 50,0 mg kurkuminoid dimasukkan ke dalam beaker
glass
dan larutkan dengan menggunakan aseton. Kemudian dimasukkan
ke
dalam labu ukur 50,0 ml ditambahkan aseton melalui kertas
saring
hingga tanda batas. Diambil 2,0 ml dimasukkan ke dalam labu
ukur
10,0 ml ditambah aseton hingga tanda. Diambil 1,0 ml
dimasukkan
dalam labu ukur 25,0 ml dan ditambahkan aseton hingga tanda,
kemudian baca serapannya. Hitung dalam % b/b dengan
perbandingan
kurva baku (tidak kurang dari 33,9% b/b). Lakukan replikasi
hingga 3
kali (Anonim, 1993).
-
29
E. Analisa Data
Rencana statistik yang akan digunakan adalah metode analisis two
sample
T-test. Analisis two sample T-test merupakan suatu analisis
untuk menguji
perbedaan dari data dependent (sampel tergantung). Rumus dasar
two sample t-
test adalah sebagai berikut :
Dimana :
t = T-test
x1 = rata-rata kadar kurkumin metode ektraksi maserasi
x2 = rata-rata kadar kurkumin metode ektraksi dengan alat
Soxhlet
=
= (De Muth, 1999).
-
30
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Identifikasi Rimpang Temulawak
Identifikasi rimpang ini dilakukan untuk mengidentifikasi
rimpang
temulawak yang digunakan apakah rimpang temulawak yang digunakan
benar-
benar dari tanaman Curcuma xanthorrhiza Robx. Pada indentifikasi
dilakukan
perbandingan dengan literatur Materia Medika Indonesia (MMI).
Identifikasi
dilakukan dengan uji organoleptik, makroskopis, dan
mikroskopis.
Identifikasi rimpang temulawak dilakukan dengan :
1. Organoleptik
Tabel I. Pengamatan organoleptik rimpang Temulawak
Pengamatan
Organoleptik
Temulawak Pasar Bringharjo Materia Medika
Indonesia
(Anonim, 1979)
Bau Khas aromatik Aromatik
Rasa Agak pahit, tajam Tajam dan pahit
Warna Kuning orange Coklat kuning
Bentuk Umbi d = 3-10 cm Umbi d = 3-10 cm
Dari tabel I. setelah dibandingkan dengan Materia Medika
Indonesia
didapatkan hasil yang telah sesuai dengan Materia Medika
Indonesia yakni
pemerian temulawak bau khas aromatik, rasa tajam dan pahit,
warna kuning
kecoklatan.
-
31
2. Makroskopis
Tabel II. Pengamatan makroskopis rimpang TemulawakJenis
Temulawak Pasar
Bringharjo
Materia Medika Indonesia
(Anonim, 1979)
Bentuk Kepingan bulat, lonjong,
ringan, keras tapi rapuh,
diameter 4-6 cm, tebal 1-3
mm, pinggir berkerut
Keping tipis, bentuk bundar
atau jorong, ringan, keras,
rapuh, garis tengah sampai 6
cm, tebal 2 mm sampai 5 mm,
permukaan luar berkerut,
melengkung tidak beraturan
tidak rata
Warna Orange kecoklatan, bidang
irisan berwarna lebih buram
warna coklat kuning sampai
coklat. Bidang irisan berwarna
coklat kuning buram
Dari tabel II. identifikasi rimpang Temulawak secara
makroskopis
didapatkan bentuk kepingan hasil irisan Temulawak tersebut
bulat, ringan, keras
namun rapuh dengan diameter irisan 4–6 cm dan dengan tebal 1–3
mm. Warna
irisan orange kecokelatan dan bidang irisan berwarna buram. Hal
ini telah sesuai
dengan kriteria makroskopik Temulawak yang terdapat di dalam
Materia Medika
Indonesia yaitu bentuk kepingan : keping tipis, bentuk bundar
atau jorong, ringan,
keras, rapuh, garis tengah sampai 6 cm, tebal 2 mm sampai 5 mm,
permukaan luar
berkerut, warna coklat kuning sampai coklat, bidang irisan
berwarna coklat
kuning. Dibandingkan dengan Materia Medika Indonesia diperoleh
hasil yang
sama, maka secara makroskopis rimpang Temulawak yang dibeli di
pasar
Bringharjo merupakan rimpang Temulawak.
-
32
Gambar 2. Rimpang Temulawak dan irisannya
3. Mikroskopis
Gambar 3. Penampang Melintang Rimpang Temulawak
Gambar 3 merupakan gambar mikroskopik penampang melintang
rimpang
Temulawak. Epidermis bergabus, terdapat sedikit rambut yang
berbentuk kerucut,
bersel satu. Hipedermis agak menggambus, di bawahnya terdapat
periderm yang
kurang berkembang. Dalam parenkim tersebar banyak sel minyak
yang berisi
-
33
minyak dan juga terdapat pati berbentuk pipih, bulat panjang
sampai bulat telur
memanjang. Bekas pembuluh tepi kolateral dan pada silinder
pusat.
Gambar 4. Penampang Melintang Rimpang Temulawak MMI (Anonim,
1979)
Gambar 4 merupakan gambar mikroskopik penampang melintang
rimpang
Temulawak dari Materia Medika Indonesia. Epidermis bergabus,
terdapat sedikit
rambut yang berbentuk kerucut, bersel satu. Hipedermis agak
menggambus, di
bawahnya terdapat periderm yang kurang berkembang. Dalam
parenkim tersebar
banyak sel minyak yang berisi minyak dan juga terdapat pati
berbentuk pipih,
bulat panjang sampai bulat telur memanjang. Bekas pembuluh tepi
kolatera dan
pada silinder pusat.
Dari gambar 3 dibandingkan dengan gambar 4 literatur Materia
Medika
Indonesia maka dapat disimpulkan bahwa rimpang yang digunakan
secara
mikroskopis juga merupakan rimpang Temulawak dari tanaman
Curcuma
xanthorrhiza Robx.
-
34
B. Pembuatan Simplisia
1. Pengumpulan rimpang Temulawak
Rimpang Temulawak (10 kg) yang digunakan dalam penelitian ini
adalah
rimpang utuh yang dibeli di pasar Bringharjo (18 Mei 2009) yang
dibeli dari satu
pedagang sehingga perlakuannya menjadi sama. Rimpang yang
diperoleh banyak
bahan pengotor seperti tanah yang menempel pada rimpang dan
bagian akar yang
masih terbawa. Temulawak dibeli disatu tempat pedagang dan
dibeli rimpang
yang masih baik dilihat dari fisik rimpang yaitu tidak ada
bagian yang busuk.
Banyaknya kontaminan akan berpengaruh pada kualitas dari rimpang
itu sendiri,
contohnya kontaminan tanah yang menempel. Tanah merupakan media
yang baik
untuk pertumbuahan mikroba sehingga bila tidak dibersihkan
terlebih dahulu
dapat menyebabkan rimpang busuk sehingga mempengaruhi kualitas
rimpang.
2. Sortasi basah
Pada tahap sortasi basah ini rimpang yang telah dikumpulkan
selanjutnya
dipisahkan dari kotoran-kotoran yang melekat atau bahan-bahan
asing yang
dimaksud antara lain tanah, kerikil, batang, daun, akar. Seperti
yang telah
disebutkan di atas bahwa tanah merupakan salah satu pengotor
yang harus
dipisahkan dari rimpang karena tanah mengandung bermacam-macam
mikroba
dalam jumlah yang tinggi, oleh karena itu pembersihan rimpang
Temulawak dari
tanah yang dapat mengurangi jumlah mikroba awal. Mikroba yang
terbawa bila
digunakan untuk bahan obat sangat berbahaya karena dapat
bersifat patogen bagi
manusia yang mengkonsumsinya.
-
35
3. Pencucian rimpang Temulawak
Pencucian rimpang Temulawak dilakukan setelah sortasi basah
dengan
menampung di dalam ember yang dialiri dengan air mengalir
terus-menerus agar
kotoran yang sudah terlepas dari rimpang akan terbawa air yang
meluap dari
ember.. Pencucian dilakukan sebanyak dua kali agar rimpang
benar-benar bersih.
Pencucian ini bertujuan untuk melepaskan kotoran-kotoran yang
masih
menempel. Pencucian dilakukan dengan selalu mengganti air di
dalam ember
setiap air sudah sangat keruh dengan sambil terus menerus
mengalirkan air dari
kran dan banyak tanah di dasar ember. Setelah penyikatan rimpang
dibilas
menggunakan air mengalir di dalam ember yang berbeda sehingga
dapat
dipastikan rimpang benar-benar bersih dari pengotor yang terbawa
dan dengan
penyikatan rimpang akan membantu menghilangkan kotoran yang
menempel
hingga sela-sela antara tiap ruas-ruas rimpang. Rimpang yang
telah dicuci
kemudian diangin-anginkan agar air sisa pencucian hilang.
Kemudian rimpang Temulawak dikeringkan dahulu dengan cara
diangin-
anginkan sehingga dapat mengurangi kemungkinan jumlah pertikel
yang
menempel dibandingkan dengan bila rimpang Temulawak ini dalam
keaadaan
masih basah.
4. Perajangan rimpang Temulawak
Perajangan rimpang Temulawak bertujuan dilakukan untuk
mempermudah proses pengeringan, bila terlalu tebal maka proses
pengeringan
menjadi lebih lama dan pengeringannya tidak merata. Maka rimpang
Temulawak
-
36
dirajang 3-5 mm, apabila irisan semakin tipis maka semakin cepat
penguapan air,
sehingga waktu pengeringan semakin cepat. Akan tetapi irisan
yang terlalu tipis
juga dapat menyebabkan rimpang kering menjadi mudah hancur dan
dapat
menyebabkan berkurangnya atau hilangnya zat yang mudah menguap,
sehingga
dapat mempengaruhi kandungan minyak atsiri dalam rimpang.
5. Pengeringan rimpang Temulawak
Pengeringan dapat mengurangi kadar air dan menghambat reaksi
enzimatik sehingga akan mencegah penurunan mutu atau perusakan
simplisia
yang berakibat perusakan terhadap kandungan aktif rimpang
Temulawak yang
akan ditetapkan yaitu kurkuminoid dan minyak atsiri.
Faktor yang dapat mempengaruhi proses pengeringan antara lain
yaitu :
suhu pengeringan, kelembaban udara, aliran udara, waktu
pengeringan dan luas
permukaan bahan. Pengeringan rimpang dilakukan dengan
menggunakan sinar
matahari secara tidak langsung dengan cara menutup irisan
rimpang dengan kain
hitam, maka ada beberapa faktor di atas antara lain suhu,
kelembaban dan aliran
udara tidak terkontrol dalam penelitian ini.
Rimpang Temulawak yang telah dirajang tadi kemudian
dikeringkan
dengan menggunakan sinar matahari. Selama proses pengeringan
berlangsung
rimpang sering dibalik posisinya sehingga pemanasan dan
pengeringan merata.
Rimpang dijemur dialasi menggunakan karton dan ditutupi kain
hitam agar
rimpang tidak langsung terkena sinar matahari sehingga kandungan
senyawa-
senyawa di dalamnya tidak rusak, seperti kandungan kurkuminoid
yang
-
37
mempunyai sifat fotosensitif. Akhir dari pengeringan rimpang
ditandai dengan
rimpang kering dapat dipatahkan dan gemrisik jika diremas.
6. Sortasi kering
Sortasi kering bertujuan untuk memisahkan benda-benda asing
seperti
bagian-bagian tanaman yang tidak diinginkan dan
pengotor-pengotor lain yang
masih ada dan tertinggal pada simplisia kering. Benda asing yang
ditemukan
selama proses sortasi kering ini adalah daun saat penjemuran
rimpang terbawa
saat pengambilan rimpang, hal ini perlu dilakukan agar tidak
mengacau pada saat
proses ekstraksi dan pengukuran kandungan kurkuminoid dan minyak
atsiri.
7. Pembuatan serbuk
Rimpang Temulawak (5 kg) yang telah siap diserbuk
menggunakan
mesin penyerbuk. Selanjutnya serbuk diayak dengan ayakan 8/14
sehingga
menghasilkan serbuk (2 kg) dan siap digunakan. Pengayakan
dilakukan untuk
menyamakan derajat kehalusan serbuk karena penyarian dipengaruhi
salah
satunya oleh derajat kehalusan dari serbuk dan setiap rimpang
memiliki derajat
kehalusan serbuk yang berbeda-beda. Untuk rimpang Temulawak
digunakan
ayakan 8/14 karena dengan menggunakan ukuran tersebut maka
kandungan
senyawa-senyawa dapat diisolasi dan tidak terlalu halus sehingga
pada proses
ekstraksi serbuk dapat tersaring sehingga tidak ikut tercampur
dengan larutan
penyari dan apabila ukuran serbuk terlalu besar maka sudut
kontak antara serbuk
dengan penyari menjadi kecil sehingga penyariannya tidak
baik.
-
38
C. Cara Maserasi
Metode maserasi digunakan untuk penyarian simplisia Temulawak
karena
zat aktif (kurkuminoid) mudah larut dalam cairan penyari (etanol
70%), cara
pengerjaan dan peralatan yang digunakan sederhana dan merupakan
metode yang
sering digunakan dalam metode ekstraksi oleh industri obat
tradisional. Maserasi
ekstrak rimpang ini menggunakan serbuk simplisia dan penyari
etanol 70%.
Digunakan etanol 70% karena zat aktif kurkuminoid mudah larut di
dalam etanol
Pada penyarian sering dilakukan pengadukan karena akan
meratakan
cairan penyari membasahi seluruh serbuk sehingga konsentrasi
akan tetap terjaga.
Selama 3 hari dilakukan penggojokan dengan setiap 24 jam
mengganti pelarut
dengan yang baru sehingga larutan penyari yang sudah jenuh
kurkuminoid dapat
melarutkan sisa kurkuminoid yang tertinggal.
Tiap kali mengambil cairan ekstrak per 24 jam, dilakukan
penyaringan.
Diambil cairan hasil saringan karena di dalam cairan itulah
terdapat kurkuminoid
yang larut dalam etanol 70%. Penyaring yang digunakan adalah
kain katun,
digunakan kain katun karena dapat menyerap dengan cepat cairan
ekstrak dan
memiliki pori–pori kain kecil dibandingkan dengan ukuran butiran
serbuk
rimpang Temulawak yang diekstrak, sehingga butiran serbuk tidak
ikut tersaring.
Sangat penting bahwa butiran serbuk diayak dengan ukuran 8/14
agar butiran
serbuk homogen, dan juga untuk mengantisipasi agar butiran tidak
ikut tersaring
ketika disaring dengan kain katun. Bila ukuran serbuk terlalu
besar, maka akan
sulit diekstraksi karena ukurannya yang besar sulit untuk
diekstrak secara
-
39
optimum oleh pelarutnya. Dilakukan 3 kali replikasi dan
diperoleh rata-rata bobot
ekstrak 14,1112 gram.
D. Dengan Alat Soxhlet
Soxhlet ekstrak rimpang Temulawak juga menggunakan serbuk
simplisia
yang dibungkus menggunakan kertas saring dan penyari etanol 70%.
Dipilih
kertas saring untuk membungkus serbuk rimpang Temulawak karena
kertas saring
dapat membungkus serbuk rimpang Temulawak dengan baik, hal ini
dikarenakan
pori–pori kertas saring lebih kecil dibandingkan dengan ukuran
butiran serbuk
rimpang Temulawak yang diekstraksi sehingga butiran serbuk tidak
keluar dari
pembungkusnya selama proses ekstraksi.
Kertas saring juga dapat menyerap pelarut dengan baik sehingga
pelarut
dapat bebas keluar masuk ke dalam pembungkus dan mengekstrak
butiran serbuk
Temulawak yang berada di dalamnya berdasarkan konsentrasi
kurkuminoid yang
terekstrak. Bila konsentrasi di zona kertas saring tinggi maka
akan dialirkan ke
konsentrasi yang rendah di dalam tabung sifon, setiap tetesan
yang jatuh
membasahi kertas saring akan beradaptasi untuk mendapatkan
konsentrasi yang
sama dengan pelarut yang lebih dulu jatuh membasahi kertas
saring. Larutan
tersebut kemudian akan memenuhi tabung kapiler yang berada di
sebelah tabung
sifon sampai ketinggian tertentu, kemudian larutan akan mengalir
dan jatuh ke
dalam labu alas bulat. Di dalam labu alas bulat inilah
kurkuminoid terakumulasi.
Cairan penyari akan dialirkan dari atas ke bawah sebanyak dua
sirkulasi
dan cairan penyari akan tertampung di dalam labu alas bulat.
Metode soxhlet
-
40
dapat dikatakan lebih hemat dalam hal jumlah pelarut, karena
sejumlah pelarut
yang telah menarik kurkuminoid akan tertampung di dalam labu
alas bulat dan
pelarut akan menguap kembali tanpa membawa kurkuminoid untuk
ikut teruap,
dan setelah pelarut menguap, pelarut akan didinginkan oleh
pendingin sehingga
mengalami kondensasi kemudian menetes kembali sebagai etanol 70%
yang baru
yang kemudian membasahi ulang kertas saring yang berisi serbuk
rimpang
Temulawak, begitu seterusnya hingga pelarut dalam tabung sifon
yang berisi
kertas saring berisi serbuk rimpang Temulawak bening secara
visual. Bila larutan
penyari telah berwarna bening maka seluruh komponen serbuk
rimpang
Temulawak yang terlarut etanol sudah habis terekstraksi. Ekstrak
cair yang
didapatkan kemudian ditampung dalam jerigen. Serbuk sebanyak
100,0 mg
membutuhkan penyari 460 ml dan diperoleh ekstrak kental sebanyak
13,2233
gram.
E. Pengentalan Ekstrak Rimpang Temulawak
Pengentalan ekstrak cair rimpang Temulawak sebanyak 1 L
dilakukan
dengan menggunakan Vacuum Rotary Evaporator pada suhu 500C dan
pada
tekanan 72 mbar. Prinsip kerja dari Vacuum Rotary Evaporator
adalah
memindahkan pelarut dari sampel dengan menggunakan system
evaporasi.
Penggunaan Vacuum Rotary Evaporator bertujuan untuk mempercepat
proses
pengentalan dan menurunkan tekanan dalam bulk cairan dan
menurunkan titik
didih komponen cairan yang dipindahkan sehingga proses
pemindahan komponen
cairan dapat terjadi tanpa pemanasan yang berlebih.
-
41
Pada penelitian ini, pelarut yang dipindahkan adalah etanol
yang
mempunyai titik didih 500C pada tekanan 1 atm atau 1013,25 mbar
dan dengan
adanya vakum evaporator diharapkan air dapat dipindahkan pada
suhu 500C dan
tekanan 72 mbar sehingga tidak perlu menggunakan pemanasan
berlebih yang
dapat menyebabkan banyak minyak atsiri yeng ikut menguap.
Pengentalan ekstrak
dilakukan dengan menggunakan Vacuum Rotary Evaporator
membutuhkan waktu
1 jam 30 menit. Hal ini disebabkan karena jika proses
pengentalan ekstrak dengan
menggunakan Vacuum Rotary Evaporator terlalu lama akan
menghasilkan ekstrak
kental yang banyak menempel di dinding labu alas bulat sehingga
sulit
dikeluarkan, maka proses pengentalan dilanjutkan dengan
menggunakan oven
pada suhu 400C. ekstrak kental yang diperoleh akan digunakan
untuk pengukuran
kadar kurkuminoid dan minyak atsiri.
Ekstrak kental yang dihasilkan dari masing-masing ekstraksi
kemudian
ditimbang, sehingga diperoleh bobot rata-rata ekstrak kental
rimpang Temulawak
metode maserasi (ERTM) 3 replikasi sebanyak 14,1112 gram dan
ekstrak kental
rimpang Temulawak dengan alat soxhlet (ERTS) didapatkan ekstrak
kental
sebanyak 13,223 gram untuk rata–rata bobot ekstrak 3 replikasi.
Kemudian
ekstrak inilah yang digunakan untuk menetapkan kandungan
kurkuminoid dan
minyak atsiri.
F. Penetapan Kandungan Minyak Atsiri
Penetapan kadar minyak atsiri dilakukan untuk mengetahui
jumlah
kandungan minyak atsiri yang terkandung dalam ERTM dan ERTS.
Dalam
-
42
penelitian ini untuk isolasi minyak atsiri dari rimpang
Temulawak digunakan
destilasi stahl. Pemilihan metode ini didasarkan pada beberapa
pertimbangan yaitu
lebih praktis untuk penyulingan minyak atsiri dalam jumlah yang
relative sedikit,
dan peralatannya sederhana. Minyak atsiri merupakan salah satu
komponen dari
ekstrak rimpang Temulawak yang mempunyai efek farmakologi
sehingga kadar
minyak atsiri dalam ekstrak rimpang Temulawak mempengaruhi mutu
dan khasiat
obat tradisional yang mengandung ekstrak rimpang Temulawak.
Kadar minyak
atsiri ini dihitung dalam % v/b yang dilakukan dengan cara
destilasi Stahl selama
6 jam. Dilakukan selama 6 jam karena merupakan waktu yang
optimum untuk
mengisolasi minyak atsiri (Anonim, 1995).
Tabel III. Kadar (%v/b) minyak atsiri ERTM
Replikasi
I
Replikasi
II
Replikasi
III
Replikasi
IV
Replikasi
V
Ekstrak
Temulwak2,0079 g 2,0039 g 2,0049 g 2,0082 g 2,0350 g
Volume
minyak atsiri0,40 ml 0,42 ml 0,33 ml 0,36 ml 0,31 ml
Kadar (b
v %) 19,9213 20,9591 16,4597 17,9265 15,2334
Rata-rata 18,1%
SD 2,3680
CV 13,0829%
-
43
Tebel IV. Kadar (%v/b) minyak atsiri ERTS
Replikasi
I
Replikasi
II
Replikasi
III
Replikasi
IV
Replikasi
V
Ekstrak
Temulwak2,1836 g 2,1441 g 2,1868 g 2,0406 g 2,0016 g
Volume
minyak atsiri0,48 ml 0,35 ml 0,48 ml 0,47 ml 0,38 ml
Kadar (b
v %) 21,9820 16,3239 16,4597 23,0324 18,9848
Rata-rata 19,36%
SD 3,0875
CV 15,9506%
Pada tabel III dan IV menunjukan kadar minyak atsiri dari
ERTM
dan ERTS. Diperoleh kadar rata-rata minyak atrsiri ERTM sebesar
18,1% dan
untuk kadar rata-rata minyak atsiri ERTS diperoleh 19,36%. Hasil
ini kadar
minyak atsiri dari ekstrak rimpang Temulawak ini sudah sesuai
yaitu
memenuhi standar Monografi Ekstrak Tumbuhan Obat Indonesia yaitu
tidak
kurang dari 3,2% (Anonim, 2004). Minyak atsiri ERTS lebih besar
kadarnya
bila dibandingkan dengan minyak atsiri ERTM. Hal ini dapat
disebabkan
karena pada metode ekstraksi menggunakan alat Soxhlet
mengalami
pemanasan yang berkesinambungan sehingga pelarut yang menguap
akan
terkondensasi dan serbuk selalu terbasahi kembali oleh pelarut
dari hasil
kondensasi yang digunakan untuk melarutkan minyak atsiri dari
serbuk di
dalam sifon, maka diperoleh kandungan minyak yang lebih
banyak
dibandingkan dengan menggunakan metode ekstrasi secara
maserasi.
-
44
Dengan menggunakan uji statistik t-test didapatkan hasil thitung
< ttabel → -
0,0536 < 1,859. Dengan demikian baik menggunakan metode
ekstraksi maserasi
maupun soxhlet tetap diperoleh kadar minyak atsiri yang tidak
berbeda.
G. Penetapan Kandungan Kurkuminoid Dengan Spektofotometri
Visibel
Kurkuminoid merupakan pigmen yang terkandung pada rimpang
Temulawak yang berwarna kuning. Adanya gugus kromofor,
menyebabkan
kurkuminoid memberi serapan pada sinar tampak. Selain adanya
gugus kromofor,
dalam kurkuminoid juga terdapat gugus auksokrom merupakan gugus
fungsional
yang memiliki elekron bebas yang terikat pada gugus kromofor
sehingga akan
mengakibatkan pergeseran panjang gelombang dan dan menjadi lebih
panjang
sehingga terjadi peningkatan intensitas warna.
Gambar 5. Gugus kromofor dan auksokrom pada kurkuminoid
Penetapan kandungan kurkuminoid digunakan pelarut aseton.
Pelarut yang
digunakan adalah pelaut yang dapat melarutkan kurkuminoid dan
memiliki
panjang gelombang di luar panjang gelombang maksimum kurkuminoid
agar
-
45
pelarut yang digunakan mempunyai absorbansi maksimum pada
panjang
gelombang 330 nm (Willard, 1988).
1. Penetapan panjang gelombang maksimum (λmax)
Penetapan panjang gelombang maksimum bertujuan untuk
mengetahui
panjang gelombang dari suatu senyawa yang mempunyai absorbansi
(serapan)
maksimum. Dalam penelitian ini pengukuran panjang gelombang
maksimum
dimulai pada panjang gelombang 400 nm-700nm karena larutan yang
akan
diukur memiliki panjang gelombang pada daerah visibel karena
senyawa yang
diukur kurkuminoid yang memiliki warna kuning.
Dari grafik panjang gelombang yang diukur pada ke tiga
konsentrasi
(0,1632 mg% b/v; 0,2856 mg% b/v; 0,4080 mg% b/v) terlihat bahwa
panjang
gelombang maksimum kurkuminoid adalah 420 nm. Hal ini
disebabkan
karena warna larutan kurkuminoid yang diukur berwarna kuning
kehijauan
yang panjang gelombangnya berada antara 400 nm-435 nm (Day, A.
JR. and
A. Lunderwood, 1958).
2. Validasi metode
Metode penetapan kadar yang baik harus memenuhi berbagai
kriteria
yang nilai perolehan kembali (recovery), kesalahan sistemik, dan
kesalahan
acak. Ketiga hal tersebut merupakan parameter validitas metode
untuk
menunjukkan apakah suatu metode sudah optimal untuk digunakan
dalam
penetapan kadar suatu zat dalam sampel.
-
46
Berikut adalah hasil dari pengujian validasi metode analisis
:
a. Akurasi
Akurasi dimaksudkan untuk mengetahui seberapa dekat antara
hasil yang diukur menggunakan suatu metode analisis dengan hasil
yang
sebenarnya. Semakin sedikit selisih antara keduanya maka
akurasi
metode analisis semakin baik. Akurasi metode analisis dinyatakan
dalam
recovery. Menurut Harmita, akurasi yang baik dengan kadar 0,1
ppm–1
ppm dinyatakan dalam recovery antara 80–110 %. Dari hasil
percobaan
yang telah dilakukan didapatkan pengukuran akurasi :
Tabel V. Recovery baku kurkumin
Kadar teoritis(mg% b/v)
Kadar I(mg% b/v)
Kadar II(mg% b/v)
Kadar III(mg% b/v)
Recovery(% b/v)
0,1632 0,1638 0,1604 0,1627 99,44850,2856 0,2861 0,2793 0,2896
99,78990,4080 0,4067 0,3993 0,4130 99,9183
Rata-rata recovery 99,7189
Rentang recovery yang diperoleh adalah 99,79%-99,92%. Hasil
ini
masuk dalam range 80–110% (Harmita, 2004) sehingga dapat
dikatakan
bahwa metode analisis dalam penetapan kadar kurkuminoid pada
sampel
ekstrak rimpang Temulawak memenuhi persyaratan akurasi.
b. Presisi
Presisi menunjukkan keterulangan dan ketertiruan hasil yang
diperoleh. Presisi dinyatakan dalam Coefisien Variasi (CV).
Menurut
Harmita, Presisi suatu metode analisis untuk kadar 0,1 ppm–1
ppm
-
47
dikatakan baik jika 6,8%. Semakin kecil CV yang diperoleh
maka
semakin baik presisi metode yang digunakan. Berdasarkan
pengukuran
yang dilakukan diperoleh CV.
Tabel VI. Coefisien Variasi (CV) baku kurkumin
Kadar (mg% b/v ) CV (%)
0,1632 1,06890,2856 1,83770,4080 1,6821Rata – rata CV 1,5296
Hasil ini menunjukkan bahwa metode yang digunakan memiliki
presisi yang baik meskipun ada satu replikasi yang melebihi
syarat CV
yaitu pada konsentrasi 1, Namun secara keseluruhan sudah
memiliki
presisi yang baik untuk menetapkan kadar kurkuminoid pada
sampel
ekstrak rimpang Temulawak dengan metode kolorimetri. Hal ini
dapat
dilihat dari rata–rata CVnya, yaitu 1,5296% yang berada di bawah
5,8%.
c. Linearitas
Linearitas menyatakan hubungan korelasi antara kadar dan
absorbansi. Linearitas dinyatakan dari nilai r yang diperoleh
dari kurva
baku. Semakin baik nilai r maka linearitas semakin baik, dimana
dengan
adanya peningkatan kadar maka akan terjadi peningkatan
absorbansi
yang proporsional pula. Metode dikatakan memiliki linearitas
yang baik
jika r>0,99 atau r2 ≥ 0,997. Dari hasil yang diperoleh nilai
r = 0,9997,
jadi metode yang dipakai memiliki linearitas yang tinggi.
-
48
d. Spesifisitas
Spesifisitas menunjukkan kemampuan suatu metode untuk
mengukur senyawa tertentu saja secara akurat dan presisi dalam
sampel
yang terdiri dari banyak senyawa lain. Menurut Harmita
(2004),
spesifisitas dapat ditunjukkan dengan membandingkan hasil
yang
diperoleh dari sampel dengan hasil yang diperoleh dari baku.
Apabila
diperoleh hasil yang lebih kurang sama serta memiliki akurasi
dan presisi
yang baik maka metode yang digunakan tersebut dapat dikatakan
telah
memenuhi syarat, presisi dari metode tersebut baik.
Pada penelitian penetapan kandungan kurkuminoid pada ekstrak
Temulawak ini memiliki spesifisitas yang tinggi. Hal ini dapat
dilihat
dari hasil akurasi, recovery hasil penelitian 99,79%-99,92%.
Hasil ini
masuk dalam range 80–110% (Harmita, 2004) sehingga memiliki
akurasi
yang baik. Dan dari presisi, didapat CV penelitian sebesar
1,5296% yang
berada di bawah 5,8% sehingga metode ini memiliki presisi yang
baik
juga. Hal ini dapat membuktikan bahwa metode penetapan
kandungan
kurkuminoid dalam ekstrak rimpang Temulawak memiliki
spesifisitas
yang tinggi.
e. LOD dan LOQ
LOD menunjukkan batas kadar terkecil yang mampu dideteksi
oleh
metode analisis. Berdasarkan hasil pengukuran dan perhitungan,
LOD
yang diperoleh sebesar 6,4669 x 10-3 mg% b/v. Jadi kadar
kurkuminoid
-
49
agar masih dapat terdeteksi oleh metode harus ≥ 6,4669 x 10-3
mg% b/v.
LOQ menyatakan batas kadar terkecil yang mampu dikuantifikasi
oleh
metode analisis. Berdasarkan hasil pengukuran dan perhitungan
dan
perhitungan nilai LOQ yang diperoleh 2,1556 x 10-2 mg% b/v.
Bila dalam penelitian diperoleh angka-angka LOD dan LOQ
seperti di atas, maka metode ini dapat dikatakan baik karena
metode ini
masih dapat mengukur kadar yang ada di atas kadar LOD dan LOQ
yang
juga masih dapat terukur oleh metode. Maka bila kadar dapat
terukur,
dapat dikatakan metode ini valid, sehingga memperlengkapi
persyaratan–
persyaratan validitas dari suatu metode.
3. Kurva baku
Baku kurkumin yang digunakan berasal dari hasil sintesis
kurkumin.
Dalam pembuatan kurva baku diperlukan satu seri larutan kurkumin
murni
dengan kadar yang berbeda. Seri larutan kurkuminoid ini
selanjutnya diukur
absorbansinya pada panjang gelombang maksimum yaitu sebesar
420nm, dan
dibuat kurva baku hubungan antara konsentrasi dengan
absorbansi.
-
50
Tabel VII. Pengukuran absorbansi kurva baku kurkumin
Replikasi I Replikasi II Replikasi IIIC (mg% b/v) Absor
bansiC (mg% b/v) Absor
bansiC (mg% b/v) Absor
bansi0,1632 0,286 0,1632 0,285 0,1632 0,3220,2040 0,350 0,2040
0,352 0,2040 0,3500,2856 0,499 0,2856 0,543 0,2856 0,5460,3264
0,575 0,3264 0,582 0,3264 0,5930,4080 0,709 0,4080 0,700 0,4080
0,715
A = -0,0017B = 1,7498R = 0,9997
A = 0,0106B = 1,7365R = 0,9915
A = 0,034807B =1,69547R = 0,991247
Dari ketiga replikasi kurva baku kurkumin pada tabel VII
memiliki
nilai koefisien korelasi (r) yang lebih besar dari nilai r tabel
dengan taraf
kepercayaan 99% (0,959 dengan df 3) sehingga untuk persamaan
kurva baku
dipilih r yang paling mendekati 1, yaitu persamaan kurva baku
replikasi I
yaitu persamaan kurva baku replikasi I dengan persamaan Y =
1,7498x –
0,0017 dengan nilai r = 0,9997.
Gambar 6. Grafik kurva baku kurkumin
Kurva Baku
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.45
Konsentrasi (mg%)
Ab
so
rban
si
-
51
4. Penetapan kandungan kurkuminoid dalam sampel
Kadar kurkuminoid total dalam sampel ekstrak kental rimpang
Temulawak yang diukur dengan menggunakan spektrofotometer
visibel
dengan panjang gelombang 420 nm.
Tabel VIII. Kandungan kurkuminoid ERTM (%b/b)Replikasi
IReplikasi
IIReplikasi
IIIRepikasi
IVReplikas
i VBobot ekstrak
awal (mg)102,85 103,54 104,02 105,00 103,21
Bobotkurkuminoiddalam ekstrak
(mg)
24,0527 30,4106 29,1962 29,6248 24,9091
Kadarkurkuminoid
(%b/b)23,3862 29,3709 28,0679 28,2141 24,1352
Rata-rata kadarkurkuminoid
26,6349 %
SD 2,6849CV 10,0804 %
Tabel IX. Kandungan kurkuminoid ERTS (%b/b)
ReplikasiI
ReplikasiII
ReplikasiIII
RepikasiIV
ReplikasiV
Bobot ekstrakawal (g)
0,1017 0,1010 0,1003 0,1008 0,1008
Bobotkurkuminoiddalam ekstrak
(g)
0,0548 0,0561 0,0522 0,0543 0,0505
Kadarkurkuminoid
(%b/b)54,4553 55,5234 52,0983 53,8451 50,1036
Rata-rata kadarkurkuminoid
53,2051 %
SD 2,1326CV 4,0083 %
-
52
Dengan menggunakan uji statistik t-test didapatkan hasil thitung
> ttabel
→ -17,2908 > 1,859. Dengan demikian kandungan kurkuminoid
dipengaruhi
oleh metode ekstraksi yang digunakan, yaitu ekstraksi
menggunakan alat
soxhlet lebih baik untuk memperoleh kurkuminoid secara
maksimal
dibandingkan dengan metode maserasi. Hal ini dapat disebabkan
karena pada
metode ekstraksi menggunakan alat soxhlet mengalami pemanasan
yang
berkesinambungan sehingga pelarut yang menguap akan
terkondensasi dan
serbuk selalu terbasahi kembali oleh pelarut dari hasil
kondensasi yang
digunakan untuk melarutkan kurkuminoid dari serbuk di dalam
sifon, maka
diperoleh kandungan kurkuminoid yang lebih banyak dibandingkan
dengan
menggunakan metode ekstrasi secara maserasi.
-
53
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Dari hasil penelitian di atas dapat disimpulkan bahwa :
1. Ada pengaruh variasi metode ekstraksi secara maserasi dan
dengan alat
Soxhlet terhadap kandungan kurkuminoid pada ekstrak etanolik
rimpang
Temulawak, dimana dengan alat Soxhlet lebih baik dibandingkan
secara
maserasi.
2. Tidak ada pengaruh variasi metode ekstraksi secara maserasi
dan dengan alat
Soxhlet terhadap kandungan minyak atsiri pada ekstrak etanolik
rimpang
Temulawak, dimana baik dengan maserasi atau dengan alat Soxhlet
diperoleh
kandungan minyak atsiri yang sama.
B. Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui
pengaruh
metode ekstraksi terhadap kandungan minyak atsiri dalam
rimpang
Temulawak dengan menggunakan metode destilasi Stahl dan
dilakukan
validasi metodenya.
-
54
DAFTAR PUSTAKA
Anonim, 1974, Ekstra Farmakope Indonesia, C1092-1093,
Departemen
Kesehatan RI, Jakarta
Anonim, 1979, Materia Medika Indonesia Jilid III, 63, Departemen
Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta
Anonim, 1985, Cara Pembuatan Simplisia, 105-125, Departemen
Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta
Anonim, 1986, Sediaan Galenik, Departemen Kesehatan Republik
Indonesia,
Jakarta.
Anonim, 1993, Standard of ASEAN Herbal Medicine Vol 1, Aksara
Buana
Printing, Jakarta
Anonim, 2000, Parameter Strandar Umum Ekstrak Tanaman Obat,
cetakan
pertama, 16, Departemen Kesehatan RI, Jakarta
Anonim, 2005, Gerakan Nasional Minum Temulawak,
http://pancasetyawatiutami.blogspot.com/2005/14/GNMT.html,
diakses
pada tanggal 5 Juni 2010
Bombardelli, E., 1991, Technologies for Processing of Medicinal
Plants in the
Medicinal Plant industry, 85 – 89, CRC Press, Florida, USA
Day, A. JR. dan A. Lunderwood, 1958, Quantitative Analysis ,
Prentice Hall, New
Jersey
De Muth, J.E., 1999, Basic Statistics And Pharmaceutical
Statistical