PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP PERTUMBUHAN SEL NEUROGLIA BABY HAMSTER YANG DIPAPAR DENGAN 7, 12-DIMETILBENZ (α) ANTRASEN (DMBA) DALAM KONDISI IN VITRO SKRIPSI oleh: RAHMA NAUMA HANUM NIM. 08620035 JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG 2013
18
Embed
PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK …etheses.uin-malang.ac.id/522/1/08620035 Pendahuluan.pdf · 2015-07-24 · pengaruh pemberian ekstrak etanol daun sirsak (annona muricata
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP PERTUMBUHAN SEL NEUROGLIA BABY
HAMSTER YANG DIPAPAR DENGAN 7, 12-DIMETILBENZ (α) ANTRASEN (DMBA) DALAM KONDISI IN VITRO
SKRIPSI
oleh:
RAHMA NAUMA HANUM
NIM. 08620035
JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI
MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG 2013
PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP PERTUMBUHAN SEL NEUROGLIA BABY
HAMSTER YANG DIPAPAR DENGAN 7, 12-DIMETILBENZ (α) ANTRASEN (DMBA) DALAM KONDISI IN VITRO
SKRIPSI
Diajukan kepada:
Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang
Untuk Memenuhi Salah Satu Persyaratan dalam Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S.Si)
Oleh:
RAHMA NAUMA HANUM NIM. 08620035/S-1
JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI
MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG 2013
SURAT PERNYATAAN
ORISINALITAS PENELITIAN
Saya yang bertanda tangan di bawah ini:
Nama : Rahma Nauma Hanum
NIM : 08620035
Fakultas / Jurusan : Sains dan Teknologi / Biologi
Judul Penelitian : Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona
muricata L.) terhadap Pertumbuhan Sel Neuroglia Baby
Hamster yang Dipapar dengan 7,12-Dimetilbenz (α)
Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro
Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa hasil penelitian saya ini
tidak terdapat unsur-unsur penjiplakan karya penelitian atau karya ilmiah yang
pernah dilakukan atau dibuat oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis dikutip
dalam naskah ini dan disebutkan dalam sumber kutipan dan daftar pustaka.
Apabila ternyata hasil penelitian ini terbukti terdapat unsur-unsur jiplakan,
maka saya bersedia untuk mempertanggung jawabkan, serta diproses sesuai
peraturan yang berlaku.
Malang, 29 Januari 2013
Yang Membuat Pernyataan,
Rahma Nauma Hanum
NIM. 08620035
PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP PERTUMBUHAN SEL NEUROGLIA BABY
HAMSTER YANG DIPAPAR DENGAN 7, 12-DIMETILBENZ (α) ANTRASEN (DMBA) DALAM KONDISI IN VITRO
1.6 Batasan Masalah .......................................................................................... 7
BAB II KAJIAN PUSTAKA ................. ............... ......... ................. 9 2.1 Deskripsi Tumbuhan Sirsak ......................................................................... 9
2.2 Sistematika Sirsak (Annona muricata L.) ..................................................... 10
2.3 Kandungan Bahan Aktif Daun Sirsak .......................................................... 11
2.4 Manfaat Ekstrak Daun Sirsak ....................................................................... 16
2.5 Sel Neuroglia ............................................................................................... 20
2.5.1 Deskripsi dan Karakteristik Sel Neuroglia Hasil Kultur ............................. 20
2.5.2 Proliferasi Sel Neuroglia ........................................................................... 22
2.5.3 Konfluen, Viabilitas dan Uji Sitotoksisitas Sel Neuroglia ......................... 24
2.7.3 Karsinogenesis dan Pertumbuhan Sel Kanker ............................................ 33
BAB III METODE PENELITIAN ..................................................................... 35
3.1 Rancangan Penelitian ................................................................................... 35
3.2 Variabel Penelitian ....................................................................................... 35
3.3 Waktu dan Tempat ....................................................................................... 36
3.4 Alat dan Bahan ............................................................................................ 36 3.3.1 Alat ........................................................................................................... 36
3.3.2 Bahan ........................................................................................................ 36
3.4 Preparasi .................................................................................................... 37 3.4.1 Preparasi Ruang ........................................................................................ 37
3.6.3 Perlakuan Pemberian Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dan ekstrak daun sirsak ............................................................................ 42
3.7 Pengamatan dan Perhitungan...................................................................... 43 3.7.1 Pengamatan Konfluen Sel Neuroglia Baby Hamster .................................. 43
3.7.2 Uji Viabilitas Sel Neuroglia Baby Hamster................................................ 44
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 46
4.1 Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Konfluen Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar dengan 7, 12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ............... 46
4.2 Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Viabilitas Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar dengan 7, 12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro .................................................................................................................... 54
4.3 Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Sitotoksisitas Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar dengan 7, 12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ................ 60
BAB V PENUTUP ............................................................................................ 64
Tabel 4.1 Ringkasan ANAVA tunggal tentang pengaruh pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap konfluen sel neuroglia baby hamster yang dipapar dengan 7, 12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) dalam kondisi in vitro ........................................................................ 47
Tabel 4.2 Ringkasan BNT 0.05 tentang pengaruh pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap konfluen sel neuroglia baby hamster yang dipapar dengan 7, 12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) dalam kondisi in vitro ........................................................................ 48
Tabel 4.3 Ringkasan ANAVA tunggal tentang pengaruh pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap viabilitas sel neuroglia baby hamster yang dipapar dengan 7, 12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) dalam kondisi in vitro ........................................................................ 55
Tabel 4.4 Ringkasan BNJ 0.01 tentang pengaruh pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap viabilitas sel neuroglia baby hamster yang dipapar dengan 7, 12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) dalam kondisi in vitro ........................................................................ 56
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Daun Sirsak dengan Tangkai Daun ................................................. 11
Gambar 2.2 Struktur umum Acetogenin ............................................................. 13
Gambar 2.3 Kultur primer sel astrosit ................................................................ 22
Gambar 2.4. Siklus sel pada eukariot ................................................................. 23
Gambar 2.5. Struktur 7, 12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) ........................... 28
Gambar 2.6 Mekanisme karsinogenesis oleh DMBA ......................................... 29
Gambar 4.1 Perbedaan Tingkat Konfluen Kultur Primer Sel Neuroglia Fetus Hamster dengan Berbagai Konsentrasi ......................................... 51
Gambar 4.2 Sel Neuroglia Fetus Hamster pada Saat perhitungan viabilitas dengan Pewarnaan Tripan Blue ................................................................ 57
Gambar 4.3 Grafik Hubungan Antar-Perlakuan dengan Kematian Sel Kanker ... 63
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Kerangka Konsep Penelitian .......................................................... 72
Lampiran 5. Pembuatan Stok Ekstrak Etanol Daun Sirsak dengan konsentrasi 100 µg/mL dalam 50 ml ....................................................................... 76
Lampiran 6. Gambar Bahan-bahan yang Digunakan dalam Penelitian ................ 77 Lampiran 7. Gambar Alat-alat yang Digunakan dalam Penelitian ....................... 78
Lampiran 8. Foto Kegiatan Penelitian ................................................................ 79 Lampiran 9. Data Hasil Perhitungan Langsung Pengaruh Pemberian Ekstrak
Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Pertumbuhan Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ................................... 80
Lampiran 10. Perhitungan Statistik Manual Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Konfluen Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ................................................ 84
Lampiran 11. Perhitungan Statistik Manual Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Viabilitas Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ................................................ 86
Lampiran 12. Data Hasil Uji Sitotoksisitas Mengunakan Analisis Probit tentang Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Pertumbuhan Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ........................................................................................... 88
Lampiran 13. Hasil Uji Statistik ANAVA Tunggal menggunakan program SPSS Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Konfluen Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro ........................................................................................... 89
Lampiran 14. Hasil Uji Statistik ANAVA Tunggal menggunakan program SPSS Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Viabilitas Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi In Vitro.......... 93
ABSTRAK Hanum, Rahma Nauma. 2013. Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Pertumbuhan Sel Neuroglia Baby Hamster yang Dipapar dengan 7, 12-Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA) dalam Kondisi in vitro. Pembimbing: Kiptiyah, M.Si dan M. Imamuddin, M.A Kata Kunci: Kanker Otak, Dimetilbenz (α) Antrasen (DMBA), Ekstrak Daun Sirsak
(Annona muricata L.), Sel Neuroglia Baby Hamster In Vitro
Kanker otak merupakan salah satu penyebab kematian. Sel penyusun otak yang berpotensi untuk mengalami kanker adalah sel neuroglia. Salah satu senyawa karsinogen penyebab kanker adalah 7,12 dimetilbenz (α) antrasen (DMBA). Beberapa penelitian telah dilakukan untuk pengobatan penyakit kanker dengan cara mengisolasi senyawa antikanker dari bahan alam seperti tumbuh-tumbuhan. Salah satu tumbuhan yang berpotensi sebagai obat kanker adalah Sirsak (Annona muricata L.). Sirsak memiliki senyawa aktif yang berpotensi sebagai antikanker yaitu Annonaceous Acetogenin. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh dan nilai LC50 pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap pertumbuhan sel neuroglia baby hamster yang dipapar dengan 7,12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) dalam kondisi in vitro.
Penelitian ini menggunakan sel neuroglia yang diambil dari baby hamster umur dua hari yang ditumbuhkan dalam medium dasar DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium) dengan dan tanpa dimetilbenz (α) antrasen (DMBA). Konsentrasi ekstrak etanol daun sirsak yang digunakan adalah 0 µg/ml, 10 µg/ml, 20 µg/ml, 40 µg/ml, 80 µg/ml dan 160 µg/ml. Parameter dalam penelitian ini adalah konfluen, viabilitas dan uji sitotoksisitas dengan menggunakan analisis probit sehingga didapatkan LC50.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa, pemberian ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) berpengaruh terhadap pertumbuhan sel neuroglia baby hamster yang dipapar dengan 7,12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) dalam kondisi in vitro. Pemberian ekstrak daun sirsak mampu menurunkan persentase konfluen, meningkatkan persentase kematian dan bersifat sangat toksik terhadap sel kanker berdasarkan hasil analisis probit dengan nilai LC50 sebesar 27,64 µg/mL.
ABSTRACT Hanum, Rahma Nauma. 2013. Effect of Soursop (Annona muricata L.) Leaf Ethanol
Extract on the Growth of Neuroglia Cells Baby Hamster were Exposed with 7,12-Dimethylbenz (α) Antracene (DMBA) in vitro conditions. Advisor: Kiptiyah, M.Si and M. Imamuddin, M.A
Soursop (Annona muricata L.), Neuroglia Cells from Baby Hamster In Vitro
Brain cancer is one of the causes of death. Tues brain cell constituent that has the potential to develop cancer are neuroglia cells. One of the compounds carcinogen was 7.12 dimetilbenz (α) antrasen (DMBA). Several studies have been conducted for the treatment of cancer by means of anticancer compounds isolated from natural ingredients such as herbs. One of the plants that have the potential as a cancer drug is Soursop (Annona muricata L.). Soursop has a potentially active compounds as anticancer is Annonaceous acetogenin. This study aimed to investigate the effect and LC50 values of soursop (Annona muricata L.) leaf ethanol extract on the growth of neuroglia cells baby hamster were exposed to 7.12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) in vitro conditions.
This study uses neuroglia cells taken from baby hamster two days old grown in basic medium DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) with and without dimetilbenz (α) antrasen (DMBA). Concentration of Soursop leaf ethanol extract used is 10 µg/ml, 20 µg/ml, 40 µg/ml, 80 µg/ml and 160 µg/ml. The parameters in this study were confluent, viability and cytotoxicity assay using probit analysis to obtain the LC50.
The results showed that the ethanol extract of soursop leaf (Annona muricata L.) having an effect on the growth of neuroglia cells baby hamster were exposed with 7.12-dimetilbenz (α) antrasen (DMBA) in vitro conditions. Soursop leaf ethanol extract can lower percentage of confluent, increase the percentage of deaths and is highly toxic to the cancer cells by probit analysis with LC50 values of 27.64 µg/mL.
i
ملخص البحث
(.Annona muricata L)قشطة اإلیثانول أوراق مستخلصات .تأثیر2013رحمة نوما. ھانوم, Dimetilbenz (α) Antrasen-7,12ألتى تعرضت النمو دبق عصبي الھامستر الطفلخلیة ل
(DMBA) قبطیة الماجستیر و امام الدین الماجستیر المشرفون المختبر. في ظروف :
لدیھ القدرة الدماغ الذي المكونة ثالثاء أسباب الوفاة ھو واحد من سرطان الدماغ
-7,12 مسرطنة مركبات منكان واحدا .عصبي دبق خالیا إصابة بسرطان علىDimetilbenz (α) Antrasen لعالج العدید من الدراسات وقد أجریت .المادة المسرطنة
مثل المكونات الطبیعیة المعزولة من المضادة للسرطان المركبات عن طریق السرطان Annona), قشط السرطان ھو كدواء لدیھا القدرة النباتات التي واحدة من .األعشاب
muricata L.) یحتمل أن المضادة للسرطان المركبات النشطة لدیھ Annonaceous acetogeninقیم و لمعرفة مدى تأثیر ھذه الدراسة تھدف .أيLC50اإلیثانول استخراج أوراق
تتعرض الھامستر دبق عصبي الطفل نمو الخالیا على(.Annona muricata L) قشطة من .ظروف في المختبر المادة المسرطنةDimetilbenz (α) Antrasen -7.12ل
القدیمة یومین الطفل الھامستر دبق عصبي مأخوذة من خالیا تستخدم ھذه الدراسة DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium) متوسطة األساسیة المتوسط في نمت
0 ھو تركیز ورقة یستخدم استخراج االیثانولDimetilbenz (α) Antrasen-7,12نمع وبدو 80 ،مل/ میكروغرام40 ، مل/ میكروغرام 20 ،مل/میكروغرام 10 ، مل /میكروغرامقابلیة و، متموجة ھذه الدراسة المعلمات في وكانت .مل/میكروغرام 160و مل/میكروغرام
LC50. للحصول على االحتمالیة باستخدام تحلیل السمسة مقایسة
Annona muricata) تأثیر من قشطة استخراج ورقة االیثانول النتائج أن وأظھرتL.) 7,12 تتعرض ل الھامستر دبق عصبي الطفل الخالیا على نمو-Dimetilbenz (α)
Antrasen نسبة أقل من استخراج أوراق یمكن .المختبر في ظروف المادة المسرطنة تحلیل السرطان عن طریق على خالیاشدیدة السمیة الوفیات و نسبة، وزیادة متموجة