Paul Stamets - 1983 - The Mushroom Cultivator - A Practical Guide to Growing Mushrooms at Home

I
I C U L T I V A T O R
A P r a c t i c a l G u i d e t o
G r o w i n g
M u s h r o o m s a t H o m e
B y
P a u l S t a m e t s
J . S . C h i l t o n
A G A R I I K O N P R E S S
O L y I v I P I A , W A S H I N G T O N
P DF c o mpr e ssi o n , O CR , w e b-o pt i mi za t i o n w i t h CVIS IO N's P d fCo mpr e sso r
C py r i g h t © 1 9 8 3 P a u l S t a m e t s a n d J . S . Chi l t o n . A l l r i g ht s r e s e r v e d . N
pa r t o f t hi s bo o k ma y be r e pr o d u c e d o r t r a n smi t t e d i n a n y fo r m by a n y
me a n s w i t ho u t w r i t t e n pe r mi ss o n fr o m t he pu bl i she r , e x c e pt by a r e v i e w e r ,
w ho ma y q u o t e b r i e f pa ss g e s i n a r e v i e w .
P r o d u c e d by P a u l S t a m e t s a n d J . S . Chi l t o n
P u bl i she d by A g a r i k o n P r e s s
B o x 2 2 3 3 , O l y m pi a , W a shi n g t o n , 9 8 5 0 7
W e s e r n D s r i bu t i o n b y H o m e s e a d B o o k C .
6 1 0 1 2 2 n d A v e . N W . , S e a t t l e , W a . 9 8 1 0 7 , 2 0 6 - 7 8 2 - 4 5 3 2
IS B N 0 - 6 1 0 7 9 8 -0 -0
L i br a r y o f C n g r e s s C t a l o g C r d N mbe r : 8 3 -0 7 0 5 5 1
P r i n t e d i n H o n g K o n g
T y p e s t by E d i t i n g a n d D si g n S e r v i c e s, In c .
3 0 E a s 1 3 t h A v e . , E u g e n e , O r e g o n 9 7 4 0 1
D s g n e d by B e t s B o d i n e , E d i t i n g & D s g n
T hi s bo o k w a s w r i t t e n w i t h a w o r d p r o c e sso r a n d e l e c t r o n i c a l l y t r a n sf e r r e d
t o a t y p e s t t i n g c o mpu t e r .
T he a u t ho r s i n v i t e c o mme n t s o n T he M u shr o o m C l t i v a t o r a s w e l l a s
pe r so n a l e x pe r i e n c e s c o n c e r n i n g mu shr o o m c u l t i v a t i o n . A d d r e ss a l l ma i l t o
A g a r i k o n P r e s s.
S k y e ,
V
L i q u i d I n o c u l a t i o n T e c h n i q u e s
In c u ba t i o n o f S pa w n
IV
G R O W I N G
S t r u c t u r e
a n d G r o w i n g S y s e m s
S t r u c fu r e
S he l v e s
T r a y s
E n v i r o n me n t a l C n t r o l S y s t e ms
Fr e sh A i r
Fa n s
Fi l t e r s
E x h a u st V n t s
H e a t i n g
3
4
6
VII
T A B L E O F CO NT E NT S
FO R E W O R D by
D r .
A n d r e w W e i l x i
P R E FA C
I.
I N T R O D U C T I O N T O M U S H R O O M C U L T U R E
A n
.
M u shr o o ms a n d M u shr o o m C l t u r e
T he M u shr o o m L i fe C c l e
II.
S T E R I L E T E C H N I Q U E A N D A G A R C U L T U R E
D e s i g n
a n d C n st r u c t i o n o f a S t e r i l e L a bo r a t o r y
P r e p a r a t i o n o f A g a r M e d i a
S t a r t i n g A C l t u r e fr o m S po r e s
T a k i n g a S po r e P r i n t
T e c h n i q u e s fo r S po r e G e r mi n a t i o n
Cha r a c t e r i s i c s o f t he M u shr o o m M y c e l i u m
R a mi fi c a t i o n s o f M u l t i spo r e C l t u r e
S e c t o r i n g : S t r a i n S e l e c t i o n a n d D v e l o p me n t
S t o c k C l t u r e s : M e t ho d s Fo r P r e s r v i n g M u shr o o m S t r a i n s
III.
G R A I N C U L T U R E
T h e
D v e l o pme n t o f G r a i n S pa w n
P r e pa r a t i o n o f G r a i n S pa w n
S pa w n Fo r mu l a s
In o c u l a t i o n o f S t e r i l i ze d G r a i n fr o m A g a r M e d i a
In o c u l a t i o n o f S t e r i l i ze d G r a i n f r o m G r a i n M a st e r s
A l t e r n a t i v e S pa w n M e d i a
R O O M
C o l i n g 7 3
H u mi d i fi c a t i o n
7 4
T he r mo s a t s a n d H u mi d i s a t s
7 4
L i g ht i n g 7 4
E n v i r o n me n t a l M o n i t o r i n g E q u i pme n t
7 6
V C O M P O S T
P R E P A R A T I O N
7 7
7 8
B a s i c R a w M a t e r i a l s
7 8
7 9
A mmo n i a
8 2
C r bo n : N t r o g e n R a t i o
8 3
8 3
P r e -W e t t i n g 8 4
B u i l d i n g t he P i l e
8 5
8 7
T e mpe r a t u r e 8 8
L o n g C m po s i n g 8 9
S ho r t C r n po s i n g 9 0
S y n t he t i c C mpo st P r o c e d u r e 9 1
C mpo st i n g T o o l s 9 2
Cha r a c t e r i st i c s o f t he C mpo s a t Fi l l i n g 9 3
S u ppl e me n t a t i o n a t Fi l l i n g
9 5
P ha se I C mpo s i n g
9 6
B a si c A i r R e q u i r e m e n t s
9 7
P ha se II R o o m D s g n
9 8
Fi l l i n g P r o c e d u r e s
9 8
9 9
P ha s II P r o c e d u r e s T r a y s o r S he l v e s 1 0 0
P ha se II i n B u l k
1 0 1
B u l k R o o m D s g n F e a t u r e s 1 0 2
B u l k R o o m Fi l l i n g P r o c e d u r e s
1 0 4
B u l k R o o m P ha se II P r o g r a m
1 0 4
T e s i n g fo r A mmo n i a
1 0 4
A spe c t o f t he Fi n i she d C mpo s
1 0 5
A l t e r n a t i v e C mpo st s a n d C mpo s i n g P r o c e d u r e s 1 0 6
S u g a r C n e B a g a sse C mpo st
1 0 6
T he Fi v e D y E x pr e ss C mpo s i n g e t ho d
1 0 6
VI.
N O N - C O M P O S T E D S U B S T R A T E S 1 0 9
N t u r a l C l t u r e
1 1 0
W o o d B a s e d S u b st r a t e s
1 1 4
M o i st u r e C n t e n t
S u bs r a t e T e mpe r a t u r e
D y W e i g ht o f S u bs r a t e
D r a t i o n o f S pa w n R u n
S pa w n i n g M e t ho d s
E n v i r o n me n t a l C n d i t i o n s
S u p e r S pa w n i n g
S u ppl e me n t a t i o n a t S pa w n i n g .
S u ppl e me n t a t i o n a t C si n g
VIII.
L A Y E R
Fu n c t i o n
P r o pe r t i e s
M a t e r i a l s
Fo r mu l a s a n d P r e pa r a t i o n
A ppl i c a t i o n
C si n g C l o n i za t i o n .
T e mpe r a t u r e
Fl u shi n g P a t t e r n
A i r M o v e me n t
W a t e r i n g
H a r v e s i n g
P r e s r v i n g M u shr o o ms .
X I.
G R O W I N G P A R A M E T E R S
A g a r i c u s
bi t o r q u i s
A g a r i c u s br u n n e s e n s
C pr i n u s c o ma t u s
Fl a mmu l i n a v e l u t i pe s
L e n t i n u se d o d e s
L e pi st a n u d a
P a n a e o l u s c y a n e sc e n s
P a n a e o l u s s bba l t e a t u s
S t r a w
VII. S P A W N ING A ND S P A W N R U NNI NG IN B U L K S U B S T R A T E S
i x
C si n g M o i s u r e a n d M y c e l i a l A ppe a r a n c e
1 2 1
1 2 2
1 2 2
1 2 2
1 2 4
1 2 4
1 2 5
1 2 6
1 2 6
1 2 6
1 2 7
1 2 8
1 2 9
1 3 0
1 3 2
1 3 3
1 3 5
1 3 7
1 3 9
1 4 1
1 4 6
1 4 7
1 5 9
1 6 1
1 6 4
1 6 8
1 7 2
1 7 6
1 8 0
1 8 3
I X . S T R A T E G IE S FO R M U S H R O O M FO R M A T I O N ( P I N E A D I NIT I A T I O N
B a si c P i n n i n g S t r a t e g y
P r i mo r d i a Fo r ma t i o n P r o c e d u r e s
T he R e l a t i o n shi p B e t w e e n P r i mo r d i a Fo r ma t i o n a n d Y i e l d
T he In fl u e c e o f L i g ht o n P i n he a d In i t i a t i o n
X . E NVIR O N M E N A L FA C O R S : S U S T A IN ING T H E M U S H R O O M C O P
FO R V R IO U S M U S H R O O M S P E C IE S
1 8 6
1 8 9
P l e u r o t u s o st r e a t u s ( Fl o r i d a V r i e t y )
1 9 3
P si l o c y be c u be n si s
1 9 6
P si l o c y be c y a n e sc e n s
2 0 0
P s l o c y be me x i c a n a
2 0 4
P si l o c y be t a mpa n e n si s
2 0 7
S t r o pha r i a r u g o s -a n r i u l a t a
2 1 0
V l v a r i e l l a v o l v a c e a
2 1 4
X II. C L T IV T I O N P R O B L E M S A ND T H E IR S O L U T I O N :
A T R O U B L E S H O O T I NG G U ID
2 1 7
S t e r i l e T e c h n i q u e
2 1 9
A g a r C l t u r e
2 1 9
G r a i n C l t u r e
2 2 0
C m o s P r e pa r a t i o n
2 2 3
2 2 4
S a w n R u n n i n g
2 2 6
2 2 7
M u shr o o m Fo r ma t i o n a n d D v e l o pme n t
2 2 9
P i n he a d In i t i a t i o n
2 2 9
2 3 1
X I II. T H E CO N A M IN N S O F M U S H R O O M C L T U R E :
2 3 3
A K e y t o t he C mmo n C n t a mi n a n t s o f M u shr o o m C l t u r e
2 3 8
V r u s ( D e - B a c k D s a s )
2 4 4
A c t i n o my c e s ( Fi r e fa n g )
2 4 6
B a c i l l u s ( W e t S po t )
2 4 8
P s u d o mo n a s ( B a c t e r i a l B l o t c h & P i t )
2 5 2
S t r e pt o m y c e s ( Fi r e fa n g )
2 5 5
A l t e r n a r i a ( B l a c k M o l d )
2 5 7
A spe r g i l l u s ( G r e e n M o l d )
2 5 9
B o t r y t i s ( B r o w n M o l d )
2 6 2
Cha e t o mi u m ( O l i v e G r e e n M o l d )
2 6 4
Chr y so sp r i u m ( Y e l l o w M o l d )
2 6 6
C a d o spo r i u m ( D r k G r e e n M o l d )
2 6 8
C pr i n u s ( In k y C p)
2 7 0
C y p t o c o c c u s ( C e a m C l o r e d Y e a s )
2 7 3
D c t y l i u m ( C bw e b M o l d )
2 7 5
D r a t o r my c e s ( B l a c k W hi s e r M o l d )
2 7 7
E pi c o c c u m ( Y e l l o w M o l d )
2 7 9
x i
Fu s r i u m ( P i n k M o l d )
2 8 1
G e o t r i c hu m ( L i pst i c k M o l d )
2 8 4
H u m i c o l a ( G r a y M o l d )
2 8 6
M o n i l i a ( W hi t e Fl o u r M o l d )
2 8 8
M u c o r ( B l a c k P i n M o l d )
2 9 0
. .
2 9 2
M y c o g o n e ( W e t B u bbl e )
2 9 4
N u r o spo r a ( P i n k M o l d
2 9 6
P a pu l o spo r a ( B r o w n P l a st e r M o l d )
2 9 8
P e n i c i l l i u m ( B l u i sh G r e e n M o l d )
3 0 0
R hi z pu s ( B l a c k P i n M o l d )
3 0 2
S c o pu l a r i o ps s ( W hi t e P l a s e r M o l d )
3 0 4
S e pe d o n i u m ( W hi t e o r Y e l l o w M o l d )
3 0 6
T o r u l a ( B l a c k Y e a s )
3 0 8
T r i c h o d e r ma ( F o r e s G r e e n M o l d )
3 1 0
T r i c h o t he c i u m ( P i n k M o l d )
3 1 3
V r t i c i l l i u m ( D y B u bbl e )
3 1 5
X I V T H E P E S T S O F M U S H R O O M C L T U R E
3 1 9
M u shr o o m Fl i e s
3 2 0
Fl y C n t r o l M e a s r e s
3 2 0
3 2 1
3 2 3
3 2 5
3 2 8
N ma t o d e s ( E e l w o r ms
3 3 1
X V M U S H R O O M G E N T IC
3 3 3
R e pr o d u c t i v e S t r a t e g i e s
3 3 6
Impl i c a t i o n s fo r C l t u r e W o r k
3 3 8
3 4 3
I.
M e d i c i n a l P r o pe r t e s o f M u shr o o ms
3 4 5
I .
L a mi n a r Fl o w S y s e ms
3 4 7
Il l . T he E ffe c t o f B a c t e r i a a n d O t he r M i c r o o r g a n i sms o n
Fr u i t i n g
2 5 3
IV T he U se o f M u shr o o m E x t r a c t s t o In d u c e Fr u i t i n g
3 5 7
V D t a C l l e c t i o n a n d E n v i r o n me n t a l M o n i t o r i n g
R e c o r d s
3 5 9
VI. A n a l y s s o f B a s c M a t e r i a l s U se d i n S u bs r a t e P r e p a r a t i o n
3 6 9
V II. R e s u r c e s Fo r M u shr o o m G r o w i n g E q u i pme n t a n d
S u ppl i e s
3 8 4
VIII.
E n g l i sh t o M e t r i c C n v e r s o n T a bl e s
3 8 6
3 8 9
B IB L IO G R A P H Y
INDE X . 4 0 9
H O T O G R A P H Y A ND IL L U S T R A T I O N C E DIT S
4 1 4
A C NO W L E D G E M E N S
4 1 5
x i v
U n l i k e e x pe r t s o f t he pa sf ( a n d s me o f t he pr e se n t ) , t he y a r e w i l l i n g a n d r e a d y t o sha r e t he i r k n o w -
l e d g e a n d pr a c t i c a l i n fo r ma t i o n w i t h a l l l o v e r s o f mu shr o o ms, w he t he r t he y a r e a ma t e u r s o r pr o fe s-
s o n a l s, d e v o t e e s o f P s / o c y b e o r o f P / e u r o fu s
T H E M U S H R O O M C L T V T O R i s i n d e e d " A P r a c t i c a l G u i d e t o G r o w i n g M u s hr o o m s a t
H o me ," a s i t s su bt i t l e i n d i c a t e s It c o v e r s e v e r y a spe c t o f t he su bj e c t i n
a r e a d a bl e st y l e a n d i n s ffi -
c i e n t d e t a i l t o e n a bl e bo t h r a n k a ma t e u r s a n d se r i o u s my c o l o g i st s t o su c c e e d a t g r o w i n g t he mu sh-
r o o ms t he y l i k e . B y i n c l u d i n g a w e a l t h o f e x c e l l e n t i l l u st r a t i o n s, i n fo r ma t i o n o n o bt a i n i n g e q u i pme n t
a n d su ppl i e s, a n d st e p-by -s e p d i r e c t i o n s fo r e v e r y pr o c e d u r e , fr o m st a r t i n g
spo r e c u l t u r e s t o ha r -
v e st i n g fr u i t i n g bo d i e s t o d e a l i n g w i t h c o n t a mi n a n t s a n d pe st s, t he a u t ho r s d e my s i f y t he a r t o f
mu shr o o m c u l t i v a t i o n a n d pu t ma st e r y o f i t w i t hi n e v e r y o n e 's r e a c h. It i s
a pl e a su r e t o i n t r o d u c e t hi s
fi n e bo o k . If y o u ha v e be e n se a r c hi n g fo r i n fo r ma t i o n
o n t h s t o pi c , y o u w i l l fi n d i t t o be a l l t ha t y o u
ha v e be e n l o o k i n g fo r a n d mo r e .
A n d r e w W e i l , M . D , F. L . S .
x v i
t r i a l s by mu shr o o ms g r o w e r s a n d r e s a r c he r s It i s t he si n c e r e ho pe o f t he a u t ho r s t ha t t hi s
w o r k w i l l r e -o pe n t he d o o r t o t he fa sc i n a t i n g w o r l d o f mu shr o o m c u l t u r e . T he M u shr o o m
C l t i v a t o r i s d e d i c a t e d t o t hi s g o a l a s w e pu r su e t he A r t a n d S c i e n c e o f mu shr o o m c u l t i v a t i o n .
CH A P T E R
1
I N T R O D U C T I O N T O
M U S H R O O M C U L T U R E
Fi g u r e 0 W a Il o f P / e u r o t u s o s r e a t u s fr u i t bo d i e s.
/
C L T U R E
Fi g u r e 1
D a g r a m i l l u st r a t i n g o v e r v i e w o f g e n e r a l t e c n i q u e s fo r t he c u l t i v a t i o n o f
mu shr o o ms
P R O P A G A T I O N O F P U R E C L T U R E S
S T E R IL I Z A T I O N
O F G R A IN M E DIA
G E R M IN T IO N O F S P O R E S
A N D IS O L A T IO N O F M U S H R O O M
M Y C L IU M FR O M C N A M IN N S
IN C L A T I O N O F G R A IN
P L U G G IN L O G S
A Y I N O U T O F S P A W N
C S I N W IT H S O IL -L I K E M IX T U R E
)
B A G
R A C
M O U N D
( B E D C L T U R E
I n t r o d u c t i o n t o M u shr o o m C l t u r e / 3
A N O VE R VIE W O F T E CH NIQ U E S
FO R M U S H R O O M CU L T IVA T IO N
T
e c hn i q u e s fo r c u l t i v a t i n g mu s hr o o ms, w ha t e v e r t he s pe c i e s , fo l l o w t he s me ba si c p a t t e r n .
W he r e a s t w o spe c i e s ma y d i ffe r i n t e mpe r a t u r e r e q u i r e me n t s, pH pr e fe r e n c e s o r t he su bst r a t e
o n w hi c h t he y g r o w , t he s e ps l e a d i n g t o fr u i t i n g a r e e sse n t i a l l y t he sa me . T he y c a n be s mma r i ze d
a s fo l l o w s:
1 .
P r e pa r a t i o n a n d po u r i n g o f a g a r me d i a i n t o pe fr i d i she s.
2 . G e r mi n a t i o n o f spo r e s a n d i so l a t i o n o f pu r e mu shr o o m my c e l i u m.
3 .
E x pa n si o n o f my c e l i a l ma ss o n a g a r me d i a .
4 .
P r e p a r a t i o n o f g r a i n m e d i a .
5 .
In o c u l a t i o n o f g r a i n m e d i a w i t h pu r e m y c e l i u m g r o w n o n a g a r me d i a .
6 .
In c u ba t i o n o f i n o c u l a t e d g r a i n me d i a ( spa w n ) .
7 . A . L a y i n g o u t g r a i n spa w n o n t o t r a y s.
o r
B . In o c u l a t i o n o f g r a i n spa w n i n t o bu l k su bs r a t e s.
8 . C si n g — c o v e r i n g o f su bs r a t e w i t h a mo i st mi x t u r e o f pe a t a n d o t he r ma t e r i a l s.
9 .
In i t i a t i o n — l o w e r i n g t e mpe r a t u r e , i n c r e a s i n g hu mi d i t y t o 9 5 % , i n c r e a s n g a i r c i r c u l a t i o n ,
d e c r e a s n g c a r bo n d i o x i d e a n d / o r i n t r o d u c i n g l i g ht .
1 0 . C o p pi n g — ma i n t a i n i n g t e mpe r a t u r e , l o w e r i n g hu mi d i t y t o 8 5 -9 2 % , ma i n t a i n i n g a i r c i r -
c u l a t i o n , c a r bo n d i o x i d e a n d / o r l i g ht l e v e l s.
W i t h ma n y s pe c i e s mo d e r a t e c r o p s c a n be pr o d u c e d o n c a s d g r a i n c u l t u r e s O r , t he c u l t i v a t o r
c a n g o o n e st e p fu r t he r a n d i n o c u l a t e c o mpo s , st r a w o r w o o d . In e i t he r c a e , t he fr u i t i n g o f mu sh-
r o o ms r e q u i r e s a hi g h hu mi d i t y e n v i r o n me n t t ha t c a n be r e a d i l y c o n t r o l l e d . W i t ho u t pr o pe r mo i s -
t u r e , mu shr o o ms d o n 't g r o w .
In t he s bs q u e n t c h a pt e r s s a n d a r d me t ho d s fo r g e r mi n a t i n g spo r e s a r e d i sc u sse d , fo l l o w e d by
t e c h n i q u e s fo r g r o w i n g my c e l i u m o n a g a r , pr o d u c i n g g r a i n a n d / o r br a n " spa w n " , pr e p a r i n g c o r n -
po s e d a n d n o n -c o mpo st e d s bst r a t e s, spa w n r u n n i n g , c a si n g a n d pi n he a d fo r ma t i o n . W i t h t hi s l a st
s e p t he me t ho d s fo r fr u i t i n g v a r i o u s spe c i e s d i v e r g e a n d t e c hn i q u e s spe c i fi c t o e a c h mu shr o o m a r e
i n d i v i d u a l l y o u t l i n e d . A t r o u bl e -sho o t i n g g u i d e he l ps c u l t i v a t o r s i d e n t i fy a n d s l v e pr o bl e ms t ha t a r e
c o mmo n l y e n c o u n t e r e d . T hi s i s fo l l o w e d by a t ho r o u g h a n a l y s s o f t he c o n t a mi n n t s a n d pe st s o f
mu shr o o m c u l t u r e a n d a c ha pt e r e x pl a i n i n g t he n a t u r e o f mu shr o o m g e n e t i c s. In a l l , t he bo o k i s a
s st e m o f k n o w l e d g e t ha t i n t e g r a t e s t he v a r i o u s t e c hn i q u e s d e v e l o pe d by c o mme r c i a l g r o w e r s
w o r l d w i d e a n d ma k e s t he c u l t i v a t i o n o f mu shr o o ms a t ho me a pr a c t i c a l e n d e a v o r .
F i g u r e 2
T h e M u s h r o o m L i f e C y c l e .
r i t r o d u c t i o n t o M u shr o o m C l t u r e / 5
P I N E A D
S P O R E
C M P A T A B L E H Y P H A E
S P O R U L A T IO N
H Y P H A L K N T
FR U I T B O D
P R IM O R DIU M
6 / T he M u shr o o m C l t i v a t o r
T he c a p i s s ppo r t e d by a pi l l a r -l i k e s e m t ha t e l e v a t e s t he i l l s a bo v e g r o u n d w he r e t he spo r e s c a n
be c a r r i e d o ff by t he s l i g ht e s w i n d c u r r e n t s C e a r l y , e v e r y pa r t o f t he mu s hr o o m fr u i t bo d y i s d e -
s g n e d t o g i v e t he spo r e s t he be s o p po r t u n i t y t o ma t u r e a n d spr e a d i n a n e x t e r n a l e n v i r o n me n t t ha t
i s o ft e n ha r sh a n d d r a st i c a l l y fl u c t u a t i n g .
A s t he mu s hr o o m ma t u r e s, spo r e pr o d u c t i o n s l o w s a n d e v e n t u a l l y st o ps. A t t hi s t i me mu s h-
r o o ms a r e i n t he i r l a st ho u r s o f l i fe . S o o n d e c a y fr o m ba c t e r i a a n d o t he r fu n g i se t s i n , r e d u c i n g t he
o n c e ma j e st i c mu shr o o m i n t o a so g g y ma ss o f fe t i d t i ss e t ha t me l t s i n t o t he g r o u n d fr o m w hi c h i t
spr u n g .
T H E
U S H R O O M L I F E C Y C L E
C u l t i v a t i n g
m u s h r o o m s i s o n e o f t h e b e s t w a y s t o o b s e r v e t h e e n t i r e t y o f t h e M u s h r o o m L i f e
C c l e . T he l i fe c y c l e fi r st st a r t s w i t h a spo r e w hi c h pr o d u c s a pr i ma r y
m y c e l i u m . W he n t he my c e -
hu m o r i g i n a t i n g fr o m Iw o spo r e s ma t e s , a s c o n d a r y m y c e l i u m i s pr o d u c e d . T hi s my c e l i u m c o n -
t i n u e s t o g r o w v e g e t a t i v e l y . W he n v e g e t a t i v e my c e l i u m ha s ma t u r e d , i t s c e l l s a r e c a pa bl e o f a
phe n o me n a l r a t e o f r e pr o d u c t i o n w hi c h c u l mi n a t e s i n t he e r e c t i o n o f mu shr o o m fr u i t bo d y . T hi s
r e pr e s n t s t he l a s fu n c t i o n a l c h a n g e a n d i t ha s be c o me , i n e ffe c t , t e r t i a r y my c e hi u m. T he s t y p e s o f
my c e hi a r e pr e se n t t he t hr e e ma j o r p ha se s i n t he pr o g r e ss o n o f t he mu shr o o m l i fe c y c l e .
M o s mu shr o o ms pr o d u c e spo r e s t ha t a r e u n i n u c l e a t e a n d g e n e i c a l l y h a pl o i d ( 1 N . T hi s
me a n s e a c h spo r e c o n t a i n s o n e n u c l e u s a n d ha s ha l f t he c o mpl e me n t o f c hr o mo so me s fo r t he
spe c i e s. T hu s spo r e s ha v e a " s e x " i n t ha t e a c h ha s t o ma t e w i t h my c e hi a fr o m a n o t he r spo r e t y pe t o
be fe r t i l e fo r pr o d u c i n g o ffspr i n g . W he n spo r e s a r e fi r st r e l e a s d t he y a r e fu l l y i n fl a t e d " mo i st " c e l l s
t ha t c a n e a s l y g e r mi n a t e . S o o n t he y d e hy d r a t e , c o l l a psi n g a t t he i r c e n t e r s a n d i n t hi s pha se t he y c a n
si t d o r ma n t t hr o u g h l o n g pe r i o d s o f d r y w e a t he r o r s v e r e d r o g ht . W he n w e a t he r c o n d i t i o n s pr o -
F i g u r e 3
S c a n n i n g e l e c t r o n m i c r o g r a p h F i g u r e 4
S c a n n i n g e l e c t r o n m i c r o g r a p h
o f R u s s u l a
spo r e s.
o f E n t o l o ma spo r e s.
In t r o d u c t i o n t o M u shr o o m C l t u r e / 7
v i d e a s ff i c i e n t l y mo i st e n v i r o n me n t , t he spo r e s r e hy d r a t e a n d
fu l l y i n fl a t e . O n l y t h n i s g e r mi n a t i o n
po s s b l e .
S po r e s w i t hi n a n i n d i v i d u a l spe c i e s a r e f a i r l y c o n st a n t i n t he i r sha pe a n d s r u c t u r e . H o w e v e r ,
ma n y . mu shr o o m spe c i e s
d i ff e r r e ma r k a bl y i n t he i r spo r e t y pe s . S o me a r e smo o t h a n d l e mo n
sha pe d ( i n t he g e n u s C pe l a n d i a , fo r i n st a n c e ) ; ma n y a r e e l l i ps i d ( a s i n t he g e n u s P si l o c y be ) ;
w hi l e o t he r s a r e hi g hl y o r n a me n t e d a n d i r r e g u l a r l y sha pe d ( s c h a s t ho se i n L a c t a r i u s o r E n t o l o ma ) .
A fe a t u r e c o mmo n t o t he spo r e s o f ma n y mu shr o o ms, pa r t i c u l a r l y
t h e psi l o c y bi a n spe c i e s, i s t h e
fo r ma t i o n o f a n a p i a l g e r m po r e .
T he g e r m po r e , a c i r c u l a r d e pr e s s o n a t o n e e n d o f t he spo r e , i s t he s t e o f g e r mi n a t i o n fr o m
w hi c h a ha pl o i d st r a n d o f my c e l i u m c a l l e d a hy pha e ma n a t e s T hi s hy pha c o n t i n u e s t o g r o w ,
br a n c he s a n d be c o me s a my c e l i a l n e t w o r k . W he n t w o s x u a l l y c o mpl e me n t a r y h y p ha l n e t w o r k s
i n t e r c e pt o n e a n o t he r a n d ma k e c o n t a c t , c e l l w a l l s se pa r a t i n g t he t w o hy pha l sy st e m s
d i sso l v e a n d
c y t o pl a smi c a n d g e n e t i c m a t e r i a l s a r e e x c ha n g e d . E r o t i c o r n o t , t hi s i s " mu shr o o m s e x " . H e n c e -
fo r t h, a l l r e s l t i n g my c e l i u m i s bi n u c l e a t e a n d d i k a r y o t i c . T hi s me a n s e a c h c e l l ha s t w o n u c l e i
a n d a fu l l c o mpl e me n t o f c hr o mo s me s W i t h fe w e x c e pt i o n s, o n l y m a t e d ( d i k a r y o fi c )
my c e l i a i s
fe r t i l e a n d c a pa bl e o f pr o d u c i n g fr u i t bo d i e s. T y pi c a l l y , d i k a r y o t i c my c e l i a i s fa st e r r u n n i n g
a n d mo r e
Fi g u r e 5
H i g h r e s l u t i o n s a n n i n g e l e c t r o n mi c r o g r a ph sho w i n g g e r m po r e s
o f
P s l o y be pe l l c u l o sa s p r e s.
v i g o r o u s t ha n u n ma t e d , mo n o k a r y o t i c my c e l i a . O n c e a my c e l i u m ha s e n t e r e d i n t o t he d i k a r y o -
pha s , fr u i t i n g c a n o c c u r sho r t l y t he r e a ft e r . In P si / o c y be c u be n si s, t he t i me be t w e e n spo r e g e r mi n a -
t i o n a n d fr u i t bo d y i n i t i a l s c a n b e a s br i e f a s t w o w e e k s i n s me P a n a e o l u s spe c i e s o n l y a w e e k
t r a n spi r e s be fo r e mu shr o o ms a ppe a r . M o s mu shr o o m spe c i e s, ho w e v e r , t a k e se v e r a l w e e k s o r
mo n t hs be fo r e mu shr o o ms c a n be g e n e r a t e d fr o m t he t i me o f spo r e g e r mi n a t i o n .
C l t i v a t o r s i n t e r e s e d i n d e v e l pi n g n e w st r a i n s by c r o ssi n g si n g l e spo r e i so l a t e s t a k e a d v a n t a g e
o f t he o c c u r r e n c e o f c l a mp c o n n e c t i o n s t o t e l l w he t he r o r n o t ma t i n g ha s t a k e n pl a c e . C a mp
c o n n e c t i o n s a r e m i c r o sc o pi c b r i d g e s t ha t pr o t r u d e fr o m o n e a d j o i n i n g c e l l t o a n o t he r a n d a r e o n l y
fo u n d i n d i k a r y o t i c my c e l i a . C a mps c a n be r e a d i l y se e n w i t h a l i g ht mi c r o sc o pe a t
1 0 0 4 0 0 X
ma g n i fi c a t i o n . N t a l l spe c i e s fo r m c l a mp c o n n e c t i o n s. ( A g a r i c u s br u n n e sc e n s d o e s n o t ; mo st a l l
P si l o c y be a n d P a n a e o l u s spe c i e s d o ) . In c o n t r a st , my c e l i a r e s l t i n g fr o m ha pl o i d spo r e s l a c k
ma t i o n o n br e e d i n g s r a t e g i e s, s e Cha p e r X V )
T w o d i k a r y o t i c m y c e l i a l n e t w o r k s c a n a l s g r o w t o g e t he r , e x c ha n g e g e n e t i c m a t e r i a l a n d fo r m
a n e w s r a i n . S u c h a n e n c o u n t e r , w he r e t w o hy pha l s st e m s fu se , i s k n o w n a s a n a st o m o si s. W he n
t w o i n c o mpa t i bl e c o l o n i e s o f my c e l i a me e t , a z n e o f i n hi bi t e d g r o w t h fr e q u e n t l y f o r ms. O n a g a r
me d i a , t hi s z o n e o f i n c o mpa t i bi l i t y i s v i s bl e t o t he u n a i d e d y e .
Fi g u r e 6 S c a n n i n g e l e c t r o n m i c r o g r a ph o f a P s l o c y be ba e o c y s i s spo r e e r mi n a t i n g .
In t r o d u c t i o n t o M u shr o o m C l t u r e 9
W he n a my c e l i u m pr o d u c e s mu shr o o ms, s v e r a l r a d i c a l c h a n g e s i n i t s me t a bo l i sm o c c u r s. U p
t o t hi s po i n t , t he my c e l i u m ha s be e n g r o w i n g v e g e t a t i v e l y . In t he v e g e t a t i v e st a t e
hy pha l c l l s a r e
a ma ssi n g n u t r i e n t s. C r i o u s y , fhe r e i s a g r a d u a l i n c r e a se i n t he n u mbe r o f n u c l e i pe r
c e l l , s me -
t i me s t o s ma n y a s t e n j u st pr i o r t o t he fo r m a t i o n o f mu shr o o ms. Imme d i a t e l y
be fo r e fr u i t bo d i e s
fo r m, n e w c e l l w a l l s d i v i d e t he n u c l e i , r e d u c i n g t he i r n u mbe r pe r c e l l t o a n a v e r a g e o f t w o . T he
hi g h
mu shr o o m spe c i e s.
A s t he g i l l s ma t u r e , ba si d i a c e l l s e me r g e i n e v e r i n c r e a s n g n u mbe r s, fi r s a ppe a r i n g a s
sm a l l
bu bbl e -l i k e c e l l s a n d r e e mbl i n g c o bbl e s o n e s o n a s r e e t . T he ba s d i a a r e t he fo c a l po i n t i n
t he r e -
pr o d u c t i v e pha se o f t he mu shr o o m l i fe c y c l e . T he ba si d i a , ho w e v e r , d o n o t ma t u r e a l l a t o n c e .
In
t he g e n u s P a n a e o l u s fo r i n st a n c e , t he ba si d i a c e l l s ma t u r e r e g i o n a l l y , g i v i n g t he
g i l l su r fa c e a
spo t t e d l o o k . T he c e l l s g i v i n g r i s t o t he ba s d i a a r e t y pi c a l l y bi n u c l e a t e , e a c h n u c l e u s i s
ha pl o i d
( 1 N a n d t he c e l l i s s i d t o be d i k a r y o t i c . T he c o mpo s t i o n o f t he y o u n g ba si d i a c e l l s a r e
si mi l a r . A t a
spe c i fi c po i n t i n t i me , t he t w o n u c l e i i n t he ba si d i u m mi g r a t e t o w a r d s o n e a n o t he r a n d me r g e i n t o a
s n g l e d i pl o i d ( 2 N n u c l e u s T hi s e v e n t i s k n o w n a s k a r y o g a my . S o o n t he r e a ft e r , t he d i pl o i d n u -
c l e u s u n d e r g o e s me i o si s a n d t y pi c a l l y pr o d u c e s fo u r ha pl o i d d a u g ht e r c e l l s.
Fi g u r e 7
S c a n n i n g e l e c t r o n mi c r o g r a ph o f hy pha e e ma n a t i n g f r o m a be d o f g e r mi n a t -
i n g P si l o c y b e c u be n s s spo r e s
-"
.
-
-
c u be n si s. N t e hy pha l c r o ssi n g s a n d c l a mp c o n n e c t i o n s.
Fi g u r e 8 , 9 , & 1 0
S c a n n i n g e l e c t r o n mi c r o g r a phs o f t h e my c e l i a l n e t w o r k o f P si l o c y be
In t r o d u c t i o n t o M u shr o o m C l t u r e / i l
O n t he su r fa c e o f t he ba si d i a , a r m-l i k e pr o j e c t i o n s c a l l e d s e r i g ma t a e a r i s t hr o u g h w hi c h
t he s n u c l e i t he n mi g r a t e . In mo st spe c i e s fo u r spo r e s fo r m a t t he t i ps
o f t he s pr o j e c t i o n s T he
spo r e s c o n t i n u e t o d e v e l o p u n t i l
t he y a r e f o r c e fu l l y l i be r a t e d fr o m t he ba si d i a a n d pr o pe l l e d i n t o fr e e
spa c e . T he me c ha n i sm fo r spo r e
r e l e a s ha s n o t y e t be e n pr o v e n . B u t , t he mo d e l mo st w i d e l y a c -
c e pt e d w i t hi n t he my c o l o g i c a l c o mmu n i t y i s o n e w he r e a " g a s bu bbl e "
fo r ms a t t he j u n c t i o n o f t he
spo r e a n d t he st e r i g ma fa . T hi s g a s
bu bbl e i n fl a t e s, v i o l e n t l y e x pl o d e s a n d j e t t i so n s t he spo r e i n t o t he
c a v i t y b e t w e e n t he g i l l s w he r e i t i s t a k e n a w a y b y a i r c u r r e n t s
M o s t c o mmo n l y , s t s o f o ppo si n g
spo r e s a r e r e l e a s d i n t hi s ma n n e r .
W i t h spo r e r e l e a se , t he l i fe c y c l e i s c o pl e t e d .
N t
a l l
mu shr o o m spe c i e s h a v e ba s d i a
t ha t pr o d u c e f o u r ha pl o i d spo r e s. A g a r i c u s
br u n n e s e n s ( = A g a r i c u s bi spo r u s , t he c o mmo n bu t t o n mu shr o o m, ha s
ba si d i a w i t h t w o d i pl o i d
( 2 N s po r e s T hi s me a n s e a c h spo r e c a n e v o l v e i n t o a my c e l i u m
t ha t i s fu l l y c a pa bl e o f pr o d u c i n g
mu shr o o ms A g a r i c u s br u n n e sc e n s i s o n e e x a mpl e o f a d i pl o i d bi po l a r spe c i e s.
S o me C pe l a n d i a n
P a n a e o l i ( t he st r o n g l y b l u i n g spe c i e s i n t he g e n u s P a n a e o l u s) a r e t w o
spo r e d a n d ha v e ma t i n g
pr o pe r t i e s si mi l a r t o A g a r i c u s br u n n e sc e n s. O t he r m u shr o o o m spe c i e s
ha v e e x c l u si v e l y t hr e e
spo r e d ba s d i a ; so me ha v e fi v e spo r e d ba s d i a ; a n d a fe w , l i k e t he c q mmo n
Cha n t a r e l l e , ha v e a s
ma n y a s e i g ht spo r e s pe r b a si d i u m
A n a w a r e n e ss o f t he l i fe c y c l e w i l l g r e a t l y a i d be g i n n i n g c u l t i v a t o r s i n t he i r
i n i t i a l a t t e mpt s t o
c u l t i v a t e mu shr o o ms O n c e a ba s c u n d e r s a n d i n g o f mu shr o o m c u l t u r e a n d t he
l i fe pr o c e sse s o f
t he s o r g a n i sms i s a c hi e v e d , c u l t i v a t o r s c a n pr o g r e ss o mo r e a d v a n c e d su bj e c t s
l i k e g e n e t i c s, st r a i n
s l e c t i o n a n d br e e d i n g . T hi s w ho l i s i c a ppr o a c h i n c r e a se s t he d e pt h o f o n e 's
u n d e r st a n d i n g a n d
fa c i l i t a t e s d e v e l o pme n t o f i n n o v a t i v e a ppr o a c he s t o m u shr o o m c u l t i v a t i o n .
Fi g u r e 1 1 , 1 2 & 1 3
S c a n n i n g e l e c t r o n mi c r o g r a phs sho w i n g t he d e v e l o pme n t o t t he
ba s d i u m a n d spo r e s i n R a ma r i a Io n g i spo r a , a c o r a l fu n g u s
S
Fi g u r e 1 5 a , L a S c a n n i n g e l e c t r o n mi c r o g r a phs sho w i n g ba si d i u m o f P si l o c y be
pe l l i c u l o sa . N t e spo r e / st e r i g ma t a j u n c t i o n .
Fi g u r e 1 6
S c a n n i n g e l e c t r o n mi c r o g r a ph o f t w o spo r e d ba s d i u m o f a n a s y e t u n pu b-
l i she d spe c i s c l o se l y r e l a t e d t o C pe l a n d i a c y a n e sc e n s. N t e " s ha d o w " n u c l e i v i si bl e
w i t hi n e a c h spo r e .
Fi g u r e 1 7
S c a n n i n g e l e c t r o n m i c r o g r a ph o f t he g i l l s r fa c e o f C n t ha r e l l u s c i ba r i u s.
N t e s x a n d e i g ht spo r e d ba s d i a .
CH A P T E R
I I
S T E R I L E T E C H N J Q U E
A N D
C U L T U R E
Fi q u r e 1 8
A ho me c u l t i v a t o r 's pa n t r y c o n v e r t e d i n t o a st e r i l e l a bo r a t o r y .
1 8 / T he M u sh r o m C l t i v a t o r
a n d i s so me t i me s e q u i ppe d w i t h r u bbe r g l o v e s i n t o w i c h t he c u l t i v a t o r i n e r t s hi s ha n d s.
O ft e n , i n pl a c e o f g l o v e s, t he fr o n t fa c e i s c o v e r e d w i t h a r e mo v a bl e c o t t o n c l o t h t ha t i s pe r i -
o d i c a l l y s e r i l i z d . T he ma i n a d v a n a g e o f a g l o v e bo x i s t ha t i t pr o v i d e s a n i n e x pe n si v e , e a s-
i l y c l e a n e d a r e a w he r e c l t u r e w o r k c a n t a k e pl a c e w i t h l i t t l e o r n o a i r mo v e me n t .
3 . M o d e r n l a bo r a t o r i e s so l v e t he pr o bl e m o f a i r bo r n e c o n t a m i n a t i o n by i n s a l l i n g H i g h E ffi -
c i e n c y P a r t i c u l a t e A i r ( H E P A ) fi l t e r s T he se fi l t e r s s r e e e n o u t a l l pa r t i c u l a t e s e x c e e d i n g
0 . 1 -0 . 3 mi c r o n s i n d i a me t e r , sma l l e r t ha n t he spo r e s o f a l l fu n g i a n d pr a c t i c a l l y a l l ba c t e r i a .
H E P A fi l t e r s a r e bu i l t i n t o w ha t i s c o mmo n l y k n o w n a s a l a mi n a r fl o w ho o d . S o me s e r i l e
l a bo r a t o r i e s ha v e a n e n t i r e w a l l o r c e i l i n g c o n st r u c t e d o f H E P A fi l t e r s t hr o u g h w hi c h pr e s-
su r i z d a i r i s fo r c e d fr o m t he o u t si d e . In e ffe c t ,
po si t i v e pr e ssu r e , st e r i l e e n v i r o n me n t i s
c r e a t e d . S pe c i fi c d a t a r e g a r d i n g t he bu i l d i n g a n d d e si g n o f l a mi n a r fl o w s st e ms i s d i s-
c u ss d i n g r e a t e r d e t a i l i n A ppe n d i x IV
o me c u l t i v a t o r s ha v e fe w pr o bl e ms w i t h c o n t a mi n a n t s w hi l e w o r k i n g i n w ha t se e ms l i k e t he
mo s pr i mi t i v e c o n d i t i o n s O t he r s e n c o u n t e r pr o n o u n c e d c o n t a mi n a t i o n l e v e l s a n d ha v e t o i n v e st i n
hi g h t e c hn o l o g y c o n t r o l s E a c h c i r c u ms a n c e d i c t a t e s a n a ppr o pr i a t e c o u r i t e r -me a su r e . W he t he r
o n e i s a ho me c u l t i v a t o r o r a spa w n ma k e r i n a c o mme r c i a l l a bo r a t o r y ,
t he pr o bl e ms e n c o u n t e r e d
a r e si mi l a r , d i ff e r i n g n o t i n k i n d , bu t i n d e g r e e .
Fi g u r e 1 9
A e r o -d i si n fe c t o r f o r r e d u c i n g
Fi g u r e 2 0
L a mi n a r fl o w ho o d .
c o n t a mi n a n t spo r e l o a d i n l a b r a t o r y .
O F A G A R M E D I A
O n c e
t he s e r i l e l a bo r a t o r y i s c o mpl e t e d , t he n e x t st e p i s t he pr e pa r a t i o n o f n u t r i fi e d a g a r me -
d i a . D r i v e d fr o m s a w e e d , a g a r i s a s l i d i fy i n g a g e n t
si mi l a r t o bu t mo r e e ffe c t i v e t ha n g e l a t i n .
T he r e a r e ma n y r e c i pe s fo r pr o d u c i n g e n r i c he d a g a r me d i a s i t a bl e
fo r m u shr o o m c u l t u r e . T he
st a n d a r d fo r mu l a s ha v e be e n P o t a t o e D x t r o se A g a r ( P D ) a n d M a l t E x t r a c t A g a r ( M E A ) t o w hi c h
y e a st i s o ft e n a d d e d a s a n u t r i t i o n a l su ppl e me n t . M a n y o f t he
my c o l o g i c a l j o u r n a l s l i st a g a r me d i a
c o n t a i n i n g pe pt o n e o r n e o pe pt o n e , t w o e a s i l y a c c e s s d so u r c e s o f pr o t e i n
fo r mu shr o o m my c e -
hu m. A n o t he r t y pe o f a g a r me d i a t ha t t he a u t ho r s r e c o mme n d i s a
br o t h ma d e fr o m bo i l i n g w he a t
o r r y e k e r n e l s w hi c h i s t he n
su ppl e me n t e d w i t h ma l t su g a r .
If a hi g h r a t e o f c o n t a mi n a t i o n fr o m ba c t e r i a i s e x pe r i e n c e d , t he d d i t i o n
o f a n t i bi o t i c s t o t he
c u l t u r e me d i a w i l l pr e v e n t t he i r g r o w t h. M o st a n t i bi o t i c s, l i k e st r e pt o my c i n , a r e n o t
a u t o c l a v a bl e a n d
mu st be a d d e d t o t he a g a r me d i a a ft e r s e r i l i z t i o n w hi l e i t i s
st i l l mo l t e n . O n e a n t i bi o t i c , g e n t a my c i n
su l f a t e , su r v i v e s a u t o c l a v i n g a n d i s e ffe c t i v e a g a i n st a br o a d r a n g e o f ba c t e r i a .
A n t i bi o t i c s sho u l d be
u s d spa r i n g l y a n d o n l y a s a t e mpo r a r y c o n t r o l u n t i l t he so u r c e s o f ba c t e r i a c a n
be e l i mi n a t e d . T he
my c e hi a o f s me mu shr o o m spe c i e s a r e a d v e r s l y a ffe c t e d by a n t i bi o t i c s
D z n s o f e n r i c he d a g a r me d i a ha v e be e n u s d su c c e ssfu l l y i n t he
c u l t i v a t i o n o f fu n g i a n d
e v e r y c u l t i v a t o r d e v e l o ps d i st i n c t
pr e fe r e n c e s ba s d o n e x pe r i e n c e . R e g a r d l e s s o f t he t y p e o f a g a r
me d i u m e mpl o y e d , a ma j o r c o n si d e r a t i o n i s i t s pH , a l o g a r i t hmi c s a e d e n o t i n g
t he l e v e l o f a c i d i t y
o r a l k a l i n i t y i n a r a n g e fr o m 0
( hi g hl y a c i d i c ) t o 1 4 ( hi g hl y ba s c ) w i t h 7 be i n g n e u t r a l . S pe c i e s o f
P si l o c y be t hr i v e i n me d i a ba l a n c e d be t w e e n 6 0 -7 . 0 w he r e a s A g a r i c u s br u n n e s c e n s
a n d a l l i e s
g r o w be t t e r i n n e a r n e u t r a l me d i a . M o st
my c e l i a a r e fa i r l y t o l e r a n t a n d g r o w w e l l i n t he 5 . 5 -7 . 5 pH
Fi g u r e 2 1
S t a n d a r d
g l o v e bo x .
2 2 / T he M u shr o o m C l t i v a t o r
ma n u fa c t u r e r ' s r e c o mme n d a t i o n s A n d so me e x t r a t i me mu st be a l l o w e d fo r a d e q u a t e pe n e t r a t i o n
o f s e a m, e spe c i a l l y i n d e n s l y pa c k e d , l a r g e a u t o c l a v e s.
O n c e st e r i l i ze d , pl c e t he c o o k e r i n t he l a bo r a t o r y o r i n a se mi st e r i l e r o o m a n d a l l o w t he pr e s-
su r e t o r e t u r n t o 1
psi be fo r e o pe n i n g . O n e l i t e r o f a g a r me d i a c a n g e n e r o u s y fi l l t hi r t y 1 0 0 x 1 5
mm. pe t r i d i she s T e c hn i q u e s fo r po u r i n g v a r y w i t h t he c u l t i v a t o r . If o n l y o n e o r t w o sl e e v s o f pe t r i
d i she s a r e be i n g pr e pa r e d , t he pl a t e s s ho u l d be l a i d o u t s d e by si d e o n t he w o r k i n g s r fa c e . If mo r e
t ha n t w o sl e e v e s a r e be i n g po u r e d o r t a bl e spa c e i s l i mi t e d , po u r i n g t he st e r i l e pe t r i d i she s i n a v e r t i -
c a l st a c k i s u s a l l y mo r e c o n v e n i e n t .
B e fo r e po u r i n g , v i g o r o u sl y sha k e t he mo l t e n me d i a t o e v e n l y d i st r i bu t e i t s i n g r e d i e n t s. E x pe r i -
e n c e d c u l t i v a t o r s fi l l t he pl t e s r hy t hmi c a l l y a n d w i t ho u t i n t e r r u pt i o n . A l l o w t he a g a r me d i a t o c o o l
a n d so l i d i fy be fo r e u si n g . C n d e n sa t i o n o ft e n fo r ms o n t he i n si d e su r fa c e o f t he u ppe r l i d o f a pe t r i
d i sh w he n t he a g a r me d i a be i n g po u r e d i s st i l l a t a hi g h t e m pe r a t u r e . T o r e d u c e c o n d e n sa t i o n , o n e
c a n w a i f a pe r i o d o f t i me be fo r e po u r i n g . If t he pr e ssu r e c o o k e r s i t s fo r 4 5 mi n u t e s a ft e r r e a c hi n g 1
ps , a l i t e r o f l i q u i d me d i a c a n be po u r e d w i t h l i t t l e d i s o mfo r t t o u n pr o t e c t e d ha n d s.
T w o t y p e s o f c u l t u r e s c a n be o bt a i n e d fr o m a se l e c t e d mu shr o o m: o n e fr o m i t s spo r e s a n d t he
o t he r fr o m l i v i n g t i ss e o f a mu shr o o m. E i t he r t y p e c a n pr o d u c e a v i a bl e st r a i n o f my c e l i a . E a c h
ha s a d v a n t a g e s a n d d i s d v a n t a g e s.
Fi g u r e 2 2 & 2 3
P o u r i n g a g a r me d i a i n t o st e r i l e
pe t r i d i she s. A t l e ft , v e r t i c a l st a c k t e c hn i q u e .
S T A R T ING
A C U L T U R E F R O M S P O R E S
A
mu shr o o m c u l t u r e c a n be st a r t e d i n o n e o f t w o w a y s. M o s g r o w e r s st a r t a
c u l t u r e fr o m
spo r e s. T he a d v a n t a g e
o f u si n g spo r e s i s t ha t t he y a r e v i a bl e fo r w e e k s t o mo n t hs a ft e r t he mu sh-
r o o m ha s d e c o mpo s d .
T he o t he r w a y o f o bt a i n i n g a c u l t u r e i s t o c u t a pi e c e o f i n t e r i o r t i ssu e fr o m
a l i v e spe c i me n , i n
e ffe c t a c l o n e . T i ss e c u l t u r e s mu st be t a k e n w i t hi n a d a y o r t w o
fr o m t h e t i m e
t he mu shr o o m ha s be e n pi c k e d , a ft e r
w hi c h a he a l t hy c l o n e be c o me s i n c r e a s n g l y d i ffi c u l t t o e st a b-
l i s h .
T a k i n g a S p o r e P r i n t
T o c o l l e c t spo r e s, s v e r t he c a p fr o m t he st e m o f a
fr e sh, w e l l c l e a n e d mu shr o o m a n d pl a c e i t
g i l l s d o w n o n a pi e c e o f c l e a n w hi t e pa pe r o r a c l e a n
g l a ss su r f a c e su c h a s a mi c r o sc o pe sl i d e . If a
spe c i me n i s pa r t i a l l y d r i e d , a d d a d r o p o r t w
o f w a t e r t o t he c a p s r fa c e t o a i d i n t he r e l e a se o f
spo r e s T o l e sse n e v a po r a t i o n
a n d d i st u r b a n c e fr o m a i r c u r r e n t s, pl a c e a c u p o r g l a ss o v e r
t he
mu shr o o m c a p. A f t e r a fe w ho u r s , t he spo r e s w i l l ha v e fa l l e n
a c c o r d i n g t o t he r a d i a t i n g sy m me t r y o f
t he g i l l s. If t he spo r e pr i n t ha s be e n t a k e n o n pa pe r , c u t i t o u t ,
fo l d i t i n ha l f, se a l i n a n a i r t i g ht c o n -
t a i n e r a n d l a be l t he pr i n t w i t h t he d a t e , spe c i e s
a n d c o l l e c t i o n n u mbe r . W he n u si n g mi c r o s c o pe
sl i d e s, t he spo r e s c a n be sa n d w i c he d be t w e e n t w o pi e c e s
o f g l a ss a n d t a pe d a l o n g t he e d g e s t o
pr e v e n t t he e n t r y o f c o n t a mi n a n t spo r e s A spo r e pr i n t
c a r e l e ssl y t a k e n o r st o r e d c a n e a si l y be c o me
c o n t a mi n a t e d , d e c r e a si n g t he c h a n c e o f a c q u i r i n g a pu r e c u l t u r e .
Fi g u r e 2 4 a
T a k i n g a spo r e pr i n t o n t y p i n g pa pe r .
2 4 / T he M u sh r o o m C l t i v a t o r
A g a r i c u s br u n n e sc e n s, P si l o c y be c u be n si s a n d ma n y o t he r mu shr o o m spe c i e s ha v e a pa r t i a l
v e i l — a t hi n l a y e r o f t i ss e e x t e n d i n g fr o m t he c a p ma r g i n t o t he st e m. T hi s v e i l c a n be a n a i d i n t he
pr o c u r e me n t o f n e a r l y c o n t a m i n a n t -fr e e spo r e s. T he v e i l s a l s t he g i l l fr o m t he o u t s d e , c r e a t i g a
se mi -st e r i l e c ha mbe r fr o m w hi c h spo r e s c a n be r e mo v e d w i t h l i t t l e d a n g e r o f c o n t a mi n a t i o n . B y
c ho o s n g a he a l t hy , y o u n g pe c i me n w i t h t he v e i l i n t a c t , a n d t he n by c a r e fu l l y r e mo v i n g t he v e i l
t i ss e u n d e r a se pt i c c o n d i t i o n s, a n e a r l y pu r e spo r e pr i n t i s o bt a i n e d . T hi s i s t he i d e a l w a y t o st a r t a
mu l t i spo r e c u l t u r e .
T e c h n i q u e s
f o r S p o r e G e r m i n a t i o n
O n c e a sp o r e p r i n t i s o bt a i n e d , mu shr o o m c u l t u r e c a n be g i n . S t e r i l i z a n i n o c u l a t i n g l o o p o r
sc a l pe l by ho l d i n g i t o v e r t he fl a me o f a n a l c o ho l l a mp o r bu t a n e t o r c h fo r fi v e o r t e n se c o n d s u n t i l i t
i s r e d ho t . ( If a bu t a n e t o r c h i s u se d , t u r n i t d o w n t o t he l o w e s po ss bl e t t i n g t o mi n i mi ze a i r d i s-
t u r ba n c e ) . C o l t he t i p by i n s r t i n g i t i n t o t he st e r i l e me d i a i n a pe t r i d i sh a n d s r a pe s me spo r e s o ff
t he pr i n t . T r a n sfe r t he spo r e s by st r e a k i n g t he t i p o f t he t r a n sfe r t o o l a c r o ss t he a g a r s u r fa c e . A si mi -
l a r me t ho d c a l l s fo r s r a pi n g t he spo r e pr i n t a bo v e a n o pe n e d pe t r i d i sh a n d a l l o w i n g t he m t o f r e e -
fa l l o n t o t he me d i u m. W he n st a r t i n g a n e w c u l t u r e fr o m spo r e s, i t i s be st t o i n o c u l a t e a t l e a st t hr e e
me d i a d i she s t o i mpr o v e t he c ha n e s o f g e t t i n g a s c c e ssfu l g e r mi n a t i o n . M y c e l i u m st a r t e d i n t hi s
a n n e r i s c a l l e d a mu l t i spo r e c u l t u r e .
W he n i r st pr o d u c e d , spo r e s a r e mo i st , i n fl a t e d c e l l s w i t h a r e l a t i v e l y hi g h r a t e o f g e r mi n a t i o n .
A s t i me pa ss s, t he y d r y , c o l l a pse a t t he i r c e n t e r s a n d c a n n o t e a si l y g e r mi n a t e . T he pr o ba bi l i t y o f
g e r mi n a t i n g d e hy d r a t e d spo r e s i n c r e a se s by s a k i n g t he m i n s e r i l i z d w a t e r . Fo r 3 0 mi n u t e s a t 1 5
ps , st e r i l i ze a n e y e d r o ppe r o r si mi l a r d e v i c e ( sy r i n g e o r pi pe t t e ) a n d a w a t e r fi l l e d t e st t u be o r
Fi g u r e 2 4 b T a k i n g a spo r e pr i n t o n a st e r i l e pe t r i
d i sh a n d o n g l a ss mi c r o s o pe s i d e s
Fi g u r e 2 5
S t e r i l i zi n g t w o sc a l pe l s spe e d s u p
a g a r t r a n s fe r t e c hn i q u e .
Fi g u r e 2 6
S t r o pha r i a
spo r e s g e r mi n a t i n g .
Fi g u r e 2 7
P si l o c y be c u be n s s my c e l i u m g r o w i n g fr o m a g a r w e d g e , t r a n sfe r r e d fr o m a
mu l t i spo r e g e r mi n a t i o n . N t e t w o t y p e s o f m c e l i a l g r o w t h.
S t e r i l e T e c h n i q u e a n d A g a r C l t u r e / 2 7
c u l t u r e s fr o m w i l d spe c i me n s ma y fr u i t v e r y po o r l y i n a n a r t i fi c i a l e n v i r o n me n t . J u s a s w i t h w i l d
pl a n t s, st r a i n s o f w i l d mu shr o o ms mu st be e l e c t i v e l y d e v e l o pe d .
O f t he ma n y n e w l y c r e a t e d s r a i n s i n t r i n s c t o mu l t i spo r e g e r mi n a t i o n , so me ma y be o n l y c a pa -
bl e o f v e g e t a t i v e g r o w t h. S u c h my c e l i a c a n a ss mi l a t e n u t r i e n t s bu t c a n n o t fo r m a mu shr o o m fr u i t -
bo d y ( t he pr o d u c t o f g e n e r a t i v e g r o w t h) . A n e t w o r k o f c e l l s c o mi n g fr o m a s n g l e spo r e i s c a l l e d a
mo n o k a r y o n . A s a r u l e , mo n o k a r y o n s a r e n o t c a pa bl e o f pr o d u c i n g fe r t i l e spo r e - be a r i n g mu sh-
r o o ms. W he n t w o c o mpa t i bl e
mo n o k a r y o n s e n c o u n t e r o n e a n o t he r a n d ma t e , c y t o pl a smi c a n d g e -
n e t i c ma t e r i a l i s e x c ha n g e d . T he r e su l t a n t my c e l i u m i s a d i k a r y o n t ha t c a n pr o d u c e f e r t i l e o ff -
s pr i n g i n t he fo r m o f mu s hr o o ms B r a n c hi n g o r n e t w o r k i n g be t w e e n d i ffe r e n t d i k a r y o t i c st r a i n s i s
k n o w n a s a n a s o m o s s. T hi s pr o c e ss o f r e c o mbi n a t i o n c a n o c c u r a t a n y s a g e o f t h e c u l t i v a t i o n
pr o c e ss o n a g a r ; o n g r a i n ; o r o n bu l k s u bs r a t e s. T he c r o ssi n g o f d i ff e r e n t
mu shr o o m st r a i n s i s a n a -
l o g o u s t o t he c r e a t i o n o f hy br i d s i n ho r t i c u l t u r e .
A n o t he r me t ho d f o r s a r t i n g c u l t u r e s i s t e c r e a t i o n o f s n g l e spo r e i s l a t e s a n d i s a c c o mpl i she d
by d i l u t i n g spo r e s i n a v o l u me o f st e r i l e w a t e r . T hi s spo r e so l u t i o n i s fu r t he r d i l u t e d i n t o l a r g e r v o l -
u me s o f s e r i l e w a t e r w hi c h i s i n t u r n u se d t o i n o c u l a t e me d i a
d i she s. In t hi s w a y , c u l t i v a t o r s c a n o b-
Fi g u r e 2 8
Fo u r st r a i n s o f P si l o c y be c u b e n si s my c e l i u m: ( c l o c k w i se , u p pe r r i g h t ) M a t i s
R o me r o ; M i s a n t l a ; A ma z n i a n ; a n d P a l e n q u e .
se r v e i n d i v i d u a l mo n o k a r y o n s a n d i n a c o n t r o l l e d ma n n e r i n st i t u t e a ma t i n g s he d u l e fo r t he d e v e l -
o pme n t o f hi g h y i e l d i n g s r a i n s Fo r c u l t i v a t o r s i n t e r e s e d s l e l y i n o bt a i n i n g a v i a bl e c u l t u r e , t hi s
t e c hn i q u e i s u n n e c e ss r y a n d mu l t i spo r e g e r mi n a t i o n s g e n e r a l l y s ffi c e . B u t fo r t ho se i n t e r e st e d i n
c r o s s n g mo n o k a r y o t i c s r a i n s a n d s u d y i n g ma t i n g c ha r a c t e r i st i c s, t hi s me t ho d i s o f g r e a t v a l u e .
K e e p i n mi n d t ha t fo r e v e r y o n e hu n d r e d s po r e s , o n l y a n a v e r a g e o f o n e t o fi v e g e r mi n a t e . Fo r a
mo r e d e t a i l e d e x pl a a t i o n o f st r a i n s n d st r a i n g e n e t i c s, s e Cha pt e r X V
T he g r e a t e s t d a n g e r o f d o i n g c o n c e n t r a t e d mu l t i spo r e g e r mi n a t i o n s i s t he i n c r e a s d po ssi bi l i t y
o f c o n t a mi n a t i o n , e spe c i a l l y fr o m ba c t e r i a . S o me ba c t e r i a pa r a s t i z t he c e l l w a l l s o f t he my c e l i u m,
w hi l e o t he r s s i mu l a t e spo r e g e r mi n t i o n o n l y t o be c a r r i e d u po n a n d t o s l o w l y d i g e s t he r e s l t i n g
my c e l i a . H e n c e , s me s r a i n s a r e i n he r e n t l y u n he a l t hy a n d t e n d t o be a sso c i a t e d w i t h a hi g h pe r c e n -
t a g e o f c o n t a mi n a t i o n . T he se i n f e c t e d spo r e s, i n c r e a s t he l i k e l i ho o d o f d se a s spr e a d i n g t o n e i g h-
bo r i n g s po r e s w he n g e r mi n a t i o n i s a t t e mpt e d i n s c h hi g h n u mbe r s.
M a n y f u n g i , ho w e v e r , ha v e d e v e l o pe d a u n i q u e sy mbi o t i c r e l a t i o n shi p w i t h o t he r mi c r o o r g a n -
i sms. S o me ba c t e r i a a n d y e a st s a c t u a l l y s t i mu l a t e spo r e g e r mi n a t i o n i n mu shr o o ms t ha t o t he r w i se
a r e d i ffi c u l t t o g r o w i n s e r i l e c u l t u r e . T he spo r e s o f C n t ha r e l l u s c i ba n u s, t he c o mmo n a n d hi g hl y
pr i ze d Cha n t r e l l e , d o n o t g e r mi n a t e u n d e r a r t i fi c i a l c o n d i t i o n s, r e s s i n g t he e ffo r t s o f w o r l d 's mo s
e x pe r i e n c e d my c o l o g i st s. R e c e n t l y , N l s Fr i e s ( 1 9 7 9 ) , a S w e d i sh my c o l o g i s , d i sc o v e r e d t ha t w e n
a c t i v a t e d c ha r c o a l a n d a r e d y e a st , R ho d o t o r u l a g l u fi n i s ( Fr e s . ) H a r r i so n , w e r e a d d e d t o t he me d i a ,
spo r e g e r mi n a t i o n s o n fo l l o w e d . ( A c t i v a t e d c ha r c o a l i s r e c o mme n d e d fo r a n y mu shr o o m w ho se
spo r e s d o n o t e a si l y g e r mi n a t e . )
Fi g u r e 2 9
P si o c y be c u be n si s spo r e s i n fe c t e d w i t h r o d sha pe d ba c t e r i a .
Fi g u r e 3 0
S pl i t t i n g
t h e mu shr o o m st e m
t o e x po se i n t e r i o r
t i ss e .
C t t i n g
i n t o m u shr o o m fl e sh
w i t h a c o o l e d , fl a me
st e r i l i z d sc a l pe l .
Fi g u r e 3 2
E x c i si n g
a pi e c e o f t i s su e
fo r
t r a n s fe r i n t o a pe t r i
d i s h.
Fi g u r e 3 3
B a c t e r i a g r o w i n g fr o m c o n -
Fi g u r e 3 4
R hi zo ' mo r phi c my c e l i u m.
t a mi n a t e d mu shr o o m my c e l i u m. N t e d i v e r g e n t r o p e y st r a n d s
Fi g u r e 3 5
I n t e r me d i a t e l i n e a r t y p e my c e -
Fi g u r e 3 6
R hi zo mo r p h i c my c e l i a w i t h t o -
hu m.
N t e
l o n g i t u d i n a l l y r a d i a l
fi n e
me n t o s ( c o t t o n y )
se c t o r ( o f
A g a r i c u s
s r a n d s ( P s / o c y be c y a n e s e n s my c e l i u m) .
br u n n e s e n s .
S t e r i l e T e c hn i q u e a n d A g a r C l t u r e / 3 3
s i d t o be s c t o r i n g . A se c t o r i s d e f i n e d
so l e l y i n c o n t r a s t o t he su r r o u n d i n g , pr e d o mi n a n t
my c e l i a . T he r e a r e t w o ma j o r c l a ss s o f my c e l i a l s c t o r s:
r hi zo mo r phi c ( st r a n d y ) a n d t o me n t o se
( c o t t o n y ) . A l so , a n i n t e r m e d i a t e t y p e o f my c e l i u m o c c u r s w hi c h g r o w s
l i n e a r l y ( l o n g i t u d i n a l l y r a d i a l )
bu t d o e s n o t ha v e t w st e d st r a n d s o f i n t e r w o v e n
hy pha e t ha t c ha r a c t e r i ze t he r hi z mo r p hi c k i n d .
R hi zo mo r phi c my c e i u m i s mo r e a pt t o pr o d u c e p r i mo r d i a . L i n e a r m y c e l i u m a n
a l so pr o d u c e
a bu n d a n t pr i mo r d i a bu t t hi s u s a l l y o c c u r s so o n a ft e r i t fo r ms r hi z mo r phs. K e e p i n
mi n d , ho w e v e r ,
t ha t c h a r a c t e r i st i c s o f fr u i t i n g my c e l i u m a r e o ft e n spe c i e s spe c i fi c a n d ma y n o t
o n f o r m pr e c i s l y t o
t he c a t e g o r i e s o u t l i n e d he r e .
In a d i sh t ha t i s l a r g e l y c o v e r e d w i t h a c o t t o n y my c e l i a , a fa n o f s r a n d y
my c e l i a w o u l d be c a l l e d
a r h i zo mo r p hi c se c t o r ,
a n d v i c e v e r sa . S e c t o r s a r e c o mmo n i n mu shr o o m c u l t u r e a n d a l t ho u g h l i t t l e
i s k n o w n a s t o t he i r c a u s o r fu n c t i o n , i t i s
c l e a r t ha t g e n e t i c s, n u t r i t i o n a n d a g e o f t he my c e l i u m pl a y
i mpo r t a n t r o l e s
A c c o r d i n g t o S t o l l e r ( 1 9 6 2 ) t he g r o w t h o f fl u ffy s c t o r s i s e n c o u r a g e d by r o k e n
a n d e x pl o d e d
k e r n e l s w hi c h i n c r e a s t he a v a i l a bi l i t y o f s t a r c h i n t he spa w n me d i a . W o r k i n g
w i t h A g a r i c u s
br u n n e s c e n s , S t o l l e r n o t e d t ha t a l t ho u g h my c e l i a l g r o w t h i s fa st e r a t hi g h
pH l e v e l s ( 7 . 5 ) t ha n a t
sl i ht l y a c i d pH l e v e l s ( 6 . 5 ) , se c t o r i n g i s mo r e fr e q u e n t . H e fo u n d t ha t se c t o r s o n g r a i n
c o u l d be r e -
. 4
P si o c y be
c u b e n s i s m y c e l i a
w i t h c o t t o n y a n d r hi zo mo r phi c se c t o r s. N t e
t ha t pr i mo r d i a fo r m a bu n d a n t l y o n r hi z mo r phi c my c e l i u m bu t n o t o n t he c o t t o n y
t y pe .
Fi g u r e 3 9
P r i mo r d i a o f P si o c y be c u be n si s fo r mi n g o n ma l t a g a r me d i a .
Fi g u r e 3 8
H y p ha l a g g r e g a t e s o f A g a r i c u s b i t o r q u i s fo r mi n g o n ma l t a g a r me d i a .
6 / T he M u shr o o m C l t i v a t o r
H o me c u l t i v a t o r s c a n s l e c t i v e l y d e v e l o p mu shr o o m s r a i n s by r a t i n g my c e l i a a c c o r d i n g t o se v -
e r a l c ha r a c t e r i s i c s T he s c ha r a c t e r i s i c s a r e :
1 .
R hi zo mo r phi sm— fa st g r o w i n g v e g e t a t i v e my c e l i u m.
2 .
P u r i t y o f t he st r a i n — l a c k o f c o t t o n y se c t o r s.
3 .
C e a n l i n e ss o f t he my c e l i a — l a c k o f a ss c i a t e d c o mpe t i t o r o r g a n i sms ( ba c t e r i a , mo l d s a n d
mi t e s .
4 . R e spo n se t i me t o pr i mo d i a fo r ma t i o n c o n d i t i o n s.
5 . N mbe r o f pr i mo r d i a fo r m e d .
6 .
P r o po r t i o n o f pr i mo r d i a fo r me d t ha t g r o w t o m a t u r i t y .
7 .
S i ze , sha pe a n d / o r c o l o r o f fr u i t bo d i e s.
8 . T o t a l y i e l d .
9 .
D s e a se r e s st a n c e .
1 0 . C 2 t o l e r a n c e / se n si t i v i t y .
1 1 . T e mpe r a t u r e l i mi t s.
1 2 .
E a se o f ha r v e s i n g .
U si n g t he se c ha r a c t e r i s i c s, mu shr o o m br e e d e r s c a n q u a l i t a t i v e l y j u d g e s r a i n s a n d se l e c t o n e s
o v e r a pe r i o d o f t i me a c c o r d i n g t o ho w w e l l t he y c o n f o r m t o a g r o w e r 's pr e f e r e n c e s.
Fi g u r e 4 0
M a t u r e
st a n d o f P si o c y be
c u be n s s o n ma l t
a g a r me d i a
Fi g u r e 4 2
In o c u l a t i n g a t e st t u be sl a n t w i t h a pi e c e o f my c e l i u m.
c o o k e r
Fi g u r e 4 1
Fi l l i n g t e st t u be s w i t h l i q u i d a g a r me d i a pr i o r t o st e r i l i za t i o n i n a pr e ssu r e
S t e r i l e T e c hn i q u e a n d A g a r C l t u r e / 3 9
A l t ho u g h a st r a i n ma y be pr e se r v e d o v e r t he l o n g t e r m u si n g
t hi s me t ho d , w i l l i t be a s pr o d u c -
t i v e a s w he n i t w a s fi r s
st o r e ? O t he r st u d i e s ha v e c o n c l u d e d t ha t st r a i n s s v e d fo r mo r e t ha n 5
y e a r s u n d e r mi n e r a l
o i l sho w e d d i s i n c t s g n s o f d e g e n e r a t i o n w hi l e t he s sa me s t r a i n s w e r e j u st a s
pr o d u c t i v e a t 2 ½ y e a r s a s t he d a y t he y w e r e
pr e se r v e d . N v e r t he l e ss, i t
i s n o t u n r e a so n a bl e t o
pr e s me , ba se d o n t he se
st u d i e s, t ha t c u l t u r e s c a n be s o r e d u p t o t w o y e a r s w i t ho u t se r i o u s
i mpa i r me n t t o t he i r v i t a l i t y .
Fo u r o t he r m e t ho d s o f pr e se r v a t i o n i n c l u d e : t he i mme r si o n
o f sl a n s i n t o l i q u i d n i t r o g e n ( a n e x -
pe n si v e r o c e d u r e ) ; t he i n o c u l a t i o n
o f w a she d st e r i l i ze d h r se ma n u r e / s r a w c o mpo st t ha t i s t he n
k e pt a t 3 6 -3 8
F. ( S e e Cha pt e r V o n c o mpo s pr e pa r a t i o n ) ; t he
i n o c u l a t i o n o f s w d u st / br a n me d i a
fo r w o o d d e c o mpo s r s ( s e s c t i o n i n Cha pt e r
III o n a l t e r n a t i v e spa w n me d i a ) ; o r s a v i n g spo r e s
a c e pt i c a l l y u n d e r r e fr i g e r a t e d c o n d i t i o n s— pe r ha ps t he
si mpl e st m e t ho d fo r ho me c u l t i v a t o r s .
W ha t e v e r m e t ho d i s u se d , r e me mbe r t h a t t he mu shr o o m's n a t u r e
i s t o fr u i t , spo r u l a t e a n d
e v o l v e . C l t i v a t i o n t e c hn i q u e s sho u l d e v o l v e w i t h t he
mu shr o o m a n d t he c u l t i v a t o r mu st se l e c t i v e l y
i so l a t e a n d ma i t a i n pr o mi si n g st r a i n s a s t he y d e v e l o p.
S o d o n 't be t o o s r pr i s d i f fi v e y e a r s d o w n
t he l i n e a s o r e d st r a i n po o r l y r e se mbl e s t he
o r i g i n a l i n i t s f r u i t i n g po t e n t i a l o r f o r m.
Fi g u r e 4 3
C l t u r e sl a n t o f e a l t hy my c e l i u m
r e a d y f o r c o o l s o r a g e .
C H A P T E R I I I
G R A I N C U L T U R E
G r a i n C l t u r e / 4 1
Fi g u r e 4 4
H a f g a l l o n sp a w n j a r s a t 3 a n d 8 d a y s a ft e r i n o c u l a t i o n .
W H E A T :
W o r k s
e q u a l l y w e l l a s r y e fo r spa w n ma k i n g a n d fr u i t bo d y p r o d u c t i o n .
W H E A T
G R A S S a n d
R Y E G R A S S S E E D : B o t h
ha v e ma n y mo r e k e r n e l s pe r g r a m t ha n
g r a i n . T he d i s d v a n t a g e o f se e d i s t he t e n d e n c y t o l o s i t s mo i s u r e a n d i t s i n a bi l i t y t o se pa -
r a t e i n t o i n d i v i d u a l k e r n e l s, ma k i n g i t d i ffi c u l t t o sha k e . ( R y e g r a ss a n d w he a t g r a ss se e d a r e
w i d e l y u se d t o p r o mo t e s c l e r o t i a fo r ma t i o n i n P si l o c y be fa mpa n e n s s, P si l o c y be me x i c a n a
a n d P s l o c y be a r ma n d i i . P e r e n n i a l o r a n n u a l c a n be u s e d a l t ho u g h a n n u a l i s fa r c h e a pe r .
S e e t he spe c i e s pa r a me t e r s fo r t he se sp c i e s i n Cha pt e r X l . )
R Y E : I t s a v a i l a bi l i t y , l o w c o s a n d a bi l i t y t o s pa r a t e i n t o i n d i v i d u a l k e r n e l s a r e a l l fe a t u r e s
r e c o mme n d i n g i t s u s a s a spa w n a n d fr u i t i n g me d i u m.
T H E
C E R E A L G R A I N S A N D T H E I R P H Y S I C A L P R O P E R T I E S
( t e s t s r u n by t he a u t ho r s
T Y P E
K E R N L S / G R A M
G R A M S / 1 0 0 M L
% M O IS T U R E
C M M E R CIA L
3 0
7 5
1 5 %
C M M E R CIA L
4 0
7 2
1 3 %
M U S H R O O M R Y E
O R G A N IC
5 5
7 6
1 1 %
O R G A NIC W H E A T
3 4 9 0
S H O R T G R A I N
3 9
L O N G R A I N
4 5
8 6
1 5 %
S O R G H U M ( M IL O )
3 3
9 3
1 5 %
P E R E NNIA L W H E A T
4 5 0 4 3
1 6 %
4 1 5
M IL L E T
1 6 6
8 3
1 3 %
In a s n g l e g r a m o f c o mme r c i a l r y e , S e c a l e c e r e a l e , t he r e i s a n e st i ma t e d c e l l c o u n t o f
5 0 ,0 0 0 -1 0 0 ,0 0 0 ba c t e r i a , m r e t ha n 2 0 0 ,0 0 0 a c t i n o my c e s, 1 2 ,0 0 0 fu n g i a n d a l a r g e n u mbe r o
y e a s s. T o s e r i l i z o n e g r a m o f g r a i n w o u l d r e q u i r e , i n e ffe c t , t he d e st r u c t i o n o f mo r e
t ha n 3 0 0 , 0 0 0
c o n t a mi n a n t s In a spa w n j a r c o n t a i n i n g i n e x c e ss o f a hu n d r e d g r a m s o f g r a i n , a n d w i t h t he a d d i t i o n
o f w a t e r , t he c e l l po pu l a t i o n s a r s t o a s r o n o mi c a l fi g u r e s.
O f a l l t he g r o u ps o f t he s o r g a n i sms, ba c t e r i a a r e t he mo st pe r n i c i o u s. B a c t e r i a c a n
d i v i d e
e v e r y t w e n t y o r so mi n u t e s a t r o o m t e mpe r a t u r e . A t t hi s r a t e , a s n g l e
ba c t e r i u m u l t i pl i e s i n t o
T he n r e w e i g h t he sa me g r a i n a ft e r i t ha s be e n d r i e d i n a n o v e n ( 2 5 0
O F. fo r 3 ho u r s) a n d su bt r a c t
t hi s n e w w e i g ht fr o m t he o r i g i n a l 1 0 0 g r a ms. T he r e su l t a n t fi g u r e i s t he pe r c e n t a g e o f mo i st u r e n a t -
u r a l l y bo u n d w i t hi n t he g r a i n .
O F G R A I N S P A W N
T h e
o pt i mu m mo i st u r e c o n t e n t fo r g r a i n i n t he pr o d u c t i o n o f spa w n i s be t w e e n 4 9 -5 4 % . T he
fo l l o w i n g fo r mu l a s a r e ba se d o n c e r e a l r y e g r a i n , e c a l e c e r e a l e , w hi c h u s a l l y ha s a mo i st u r e
g r a p hi c a l o r i g i n a n d t he w a y t he g r a i n h a s be e n s o r e d .
T h e s a n d a r d s pa w n c o n t a i n e r fo r t he h o me c u l t i v a t o r
i s t he q u a r t ma so n j a r w hi l e t he
c o mme r c i a l spa w n ma k e r pr e fe r s t he g a l l o n j a r . W i d e o u t h ma so n j a r s ha v e be e n e x t e n si v e l y
u se d by ho me c u l t i v a t o r s be c a u s o f se v e r a l bo o k s po pu l a r i zi n g fr u i t bo d y pr o d u c t i o n i n t he se j a r s
W i d e mo u t h j a r s ha v e be e n pr e fe r r e d be c a u s mu shr o o ms g r o w n i n t he m a r e e a s e r t o ha r v e st t ha n
t ho se i n n a r r o w mo u t h o n e s N t o n l y i s t hi s me t ho d o f g r o w i n g mu shr o o ms o u t d a t e d , bu t w i d e
mo u t h j a r s ha v e s v e r a l d i s d v a n t a g e s fo r spa w n pr o d u c t i o n a n d he n c e a r e n o t r e c o mme n d e d .
N r r o w mo u t he d c o n t a i n e r s ha v e l e ss c h a n c e o f c o n t a mi n a t i n g fr o m a i r bo r n e spo r e s be c a u se o f
t he i r sma l l e r o pe n i n g s a n d a r e mo r e s i t e d t o u s w i t h s n t he t i c fi l t e r d i s s T he pu r po se o f t he
spa w n c o n t a i n e r i s t o t e mpo r a r i l y ho u se t he i n c u ba t i n g
my c e l i u m be fo r e i t i s l a i d o u t i n t r a y s o r u se d
t o i n o c u l a t e bu l k su bst r a t e s. J a r s a r e n o t w e l l su i t e d a s a fr u i t i n g c o n t a i n e r .
M o st c o mme r c i a l spa w n ma k e r s c a p t h i r spa w n bo t t l e s w i t h sy n t he t i c fi l t e r d i sc s w hi c h a l l o w
a i r pe n e t r a t i o n a n d g a s o u s e x c ha n g e bu t n o t t he fr e e pa s sa g e o f c o n t a mi n a t i n g spo r e s .
H o me
c u l t i v a t o r s , o n t he o t he r ha n d , ha v e u s d i n v e r t e d ma s n l i d s w hi c h i mpe r fe c t l y se a l a n d a l l o w so me
Fi g u r e 4 5 T w o j a r s
o f g r a i n me d i a ,
b e fo r e a n d a f t e r
a u t o c l a v i n g u si n g t he
a bo v e fo r mu l a s
a i r e x c ha n g e . T hi s me t ho d w o r k s fi n e u n d e r st e r i l e c o n d i t i o n s a l t ho u g h t he d e g r e e o f fi l t r a t i o n i s n o t
g u a r a n t e e d . T he be s c o mbi n a t i o n u s s fi l t e r d i sc s i n c o n j u n c t i o n w i t h o n e pi e c e s r e w t o p l i d s
ha v i n g a % -½ i n c h d i a me t e r ho l e d r i l l e d i n t o i t s c e n t e r a n d fi t t i n g a n a r r o w mo u t he d a u t o c l a v a bl e
c o n t a i n e r . T he a u t ho r s pe r so n a l l y f i n d t he r e g u l a r mo u t he d ½ g a l l o n ma s n j a r t o be i d e a l . ( N t e :
T he se ½ g a l l o n j a r s a r e i n o c u l a t e d fr o m q u a r t ma st e r s, a t e c hn i q u e s o n t o be d i s u sse d ) . U si n g
o n l y fi l t e r d i s s o n w i d e mo u t h j a r s i s n o t r e c o mme n d e d d u e t o t he e x c e ssi v e e v a po r a t i o n fr o m t he
g r a i n me d i u m.
T o pr o d u c e g r a i n s pa w n o f 4 8 -5 2 % mo i st u r e u se t he fo r mu l a s o u t l i n e d be l o w a n d a u t o c l a v e i n
a pr e ssu r e c o o k e r fo r 1 h o u r a t 1 5 -1 8 psi . N t e t ha t c o n si d e r a bl e v a r i a t i o n e x i s s be t w e e n me a su r -
i n g c u ps, d i ffe r i n g a s mu c h a s 1 0 % i n t he i r v o l u me s Che k t he me a su r i n g c u p w i t h a g r a d u a t e d
c y l i n d e r . O n c e st a n d a r d i ze d , fa shi o n a " g r a i n sc o o p" a n d a " w a t e r s o o p" fr o m a pl a s i c c o n t a i n e r
t o t he pr o po r t i o n s spe c i fi e d be l o w .
S pa w n
Q U A R T J A R S
½ G A L L O N J A R S
1 c u p r y e g r a i n
2 / 3 ¾ c u p w a t e r
1 ¾ c u ps w a t e r
o r
( a ppr o x i ma t e l y )
2 4 0 ml . g r a i n
6 0 0 ml . r y e g r a i n
1 7 0 -2 0 0 ml .
w a t e r 4 0 0 -4 6 0 m l . w a t e r
F i g u r e 4 6
C o m m e r c i a l spa w n
ma k e r 's a u t o c l a v e .
T he a bo v e fo r mu l a s fi l l a q u a r t o r a ha l f g a l l o n j a r t o n e a r l y
2 / 3 o f i t s c a pa c i t y a ft e r a u t o c l a v i n g . In a l l
t he s fo r mu l a s, c ha l k ( C C 3 ) a n d g y p su m ( C S 0 4 ) c a n be a d d e d a t a r a t e
o f 1 - 3 pa r t s by w e i g ht
pe r 1 0 0 pa r t s o f g r a i n ( d r y
w e i g ht ) . T he r a t i o o f c ha l k t o g y ps m i s 1 : 4 . T he a d d i t i o n o f t he s e
e l e me n t s t o s pa w n i s o pt i o n a l fo r mo st spe c i e s bu t n e c e ss r y w he n g r o w i n g
A g a r i c u s br u n n e sc e n s.
W he n t he s e c a l c i u m bu ffe r s a r e u s d , a d d 1 0 % mo r e w a t e r t ha n
t ha t l i st e d a bo v e .
O n c e t he g r a i n fi l l e d j a r s ha v e be e n a u t o c l a v e d , t he y sho u d be
pl a c e d i n t he st e r i l e r o o m a n d
a l l o w e d t o c o o l . P r i o r t o t hi s po i n t , t he r o o m a n d i t s a i r sho u l d be
d i si n fe c t e d , e i t he r t hr o u g h t he u se
o f t r a d i t i o n a l c l e a n i n g me t ho d s, H E P A fi l t e r s o r bo t h.
U po n r e mo v i n g t he w a r m j a r s fr o m t he pr e ss r e c o o k e r o r a u t o c l a v e ,
sha k e t he m t o l o o se n t he
g r a i n a n d t o e v e n l y d i r i bu t e w e t a n d d r y k e r n e l s. S ha k i n g
a l s pr e v e n t s t he k e r n e l s a t t he bo t t o m
o f t he j a r f r o m c l u mpi n g .
A n e x c e l l e n t t o o l t o h e l p i n t hi s pr o c e d u r e i s a ba l d c a r t i r e o r
pa d d e d c h a i r . H a v i n g be e n c a r e -
fu l l y c l e a n e d a n d d i si n fe c t e d , t he t i r e sho u l d be mo u n t e d i n a n u pr i g ht
a n d st a bl e po si t i o n . T he t i r e
ha s a pe r f e c t s r f a c e a g a i n st w hi c h t o sha k e t he j a r s , mi n i mi z n g
d i sc o mfo r t t o t he ha n d s a n d r e d u c -
i n g t he r i s o f i n j u r y fr o m br e a k a g e . T he t i r e w i l l be
u se d a t a n o t he r st a g e i n g r a i n c u l t u r e , so i t
sho u l d be c l e a n e d r e g u l a r l y . P a i n t sha k e r s a r e e mpl o y e d by
c o mme r c i a l s pa w n ma k e r s fo r t hi s
s me pu r p o se bu t t he y a r e i n a ppr o pr i a t e
fo r t he ho me c u l t i v a t o r . C U T IO N A L W A Y S
IN P E C
T H E J A R S FO R C A C S B E FO R E S H A K IN .
W he n t he g r a i n j a r s ha v e r e t u r n e d t o r o o m t e mpe r a t u r e , a g a r t o g r a i n
i n o c u l a t i o n s c a n c o r n -
Fi g u r e 4 7
P r e ssu r e c o o k e r o f ho me c u l t i -
Fi g u r e 4 8
T he r u bbe r t i r e i s a he l pf u l
v a t o r .
t o o l fo r t he sp w n l a bo r a t o r y . It i s u se d
t o l o o se n g r a i n spa w n .
Fi g u r e 4 9
Fl a mi n g
t he sc a l pe l .
Fi g u r e 5 0
C t t i n g
t w o w e d g e s o f
my c e l i u m c o l o n i ze d
a g a r .
Fi g u r e 5 1
In o c u l a t i n g st e r i l i ze d
g r a i n .
t o t w o a n d a ha l f w e e k s t o c o l o n i ze g r a i n w hi l e P si / o c y be c u be n si s g r o w s t hr o u g h i n a w e e k t o t e n
d a y s. H e r e a g a i n , t he u se o f t he fi r e a s a s t r i k i n g s r fa c e c a n be a n a i d t o sha k i n g . Fo r sl o w e r g r o w -
i n g spe c i e s, a c o mmo n sha k i n g sc he d u l e i s o n t he 5 t h a n d 9 t h d a y s a ft e r i n o c u l a t i o n . T he c u l t u r e s
sho u l d be i n c u ba t e d i n a se mi -s e r i l e e n v i r o n me n t a t t he t e mpe r a t u r e mo s t a ppr o pr i a t e f o r t he
spe c i e s be i n g c u l t i v a t e d . ( S e e Cha pt e r X l ) .
A ft e r t r a n sfe r r i n g my c e l i u m fr o m a g a r t o g r a i n , fu r t he r t r a n sfe r s c a n be c o n d u c t e d fr o m t he se
g r a i n c u l t u r e s t o e v e n mo r e g r a i n fi l l e d j a r s. A sc he d u l e o f su c c e ss v e t r a n sfe r s fr o m t he fi r st i n o c u -
l a t e d g r a i n j a r , d e s g n a t e d C-i , t hr o u g h t w o mo r e " g e n e r a t i o n s" o f t r a n sfe r s ( C-2 , G - 3 r e spe c t i v e -
l y ) w i l l r e s l t i n a n e x po n e n t i a l e x pa n si o n o f my c e l i a l ma ss. If fo r i n st a n c e , 1 0 j a r s w e r e i n o c u l a t e d
fr o m a n a g a r g r o w n c u l t u r e ( C-i ) , t he y c o u l d fu r t he r i n o c u l a t e 1 0 0 j a r s ( C-2 ) w hi c h i n t u r n c o u l d
g o i n t o i 0 0 0 j a r s ( C-3 ) . A s o n e c a n se e , i t i s o f c r i t i c a l i mpo r t a n c e t ha t t he
fi r st se t o f spa w n ma st e r s
be a bso l u t e l y pu r e fo r i t ma y u l t i ma t e l y i n o c u l a t e a s ma n y a s 1 ,0 0 0 j a r s In o c u l a t i o n s be y o n d t he
t hi r d g e n e r a t i o n o f t r a n sfe r s a r e n o t r e c o mme n d e d . In d e e d , i f a c o n t a mi n a t i o n r a t e a bo v e 1 0 % i s e x -
pe r i e n c e d a t t he se c o n d g e n e r a t i o n o f t r a n sfe r s, t he n c o n si d e r C-2 a t e r mi n a l s a g e . T he se c u l t u r e s
c a n i n o c u l a t e bu l k su bst r a t e s o r be l a i d o u t i n t r a y s, c a s d a n d fr u i t e d .
G r a i n -t o -g r a i n t r a n sfe r s a r e o n e o f t he mo st e ffi c i e n t me t ho d s o f spa w n ma k i n g . T hi s me t ho d i s
pr e fe r r e d by mo st c o mme r c i a l spa w n l a bo r a t o r i e s spe c i a l i zi n g i n A g a r i c u s c u l t u r e . T he y i n t u r n se l l
g r a i n spa w n t ha t i s a se c o n d o r t hi r d t r a n sfe r t o A g a r i c u s fa r me r s w ho u s t hi s t o i mpr e g n a t e t he i r
c o mpo s . Fo r t he c r e a t i o n o f l a r g e q u a n t i t i e s o f spa w n , t he g r a i n -t o -g r a i n t e c hn i q u e i s fa r su pe r i o r t o
a g a r -t o -g r a i n fo r bo t h i t s e a se a n d spe e d . H o w e v e r , e v e r y c u l t i v a t o r mu s u l t i ma t e l y r e t u r n t o a g a r
c u l t u r e i n o r d e r t o ma i n t a i n t he pu r i t y o f t he s r a i n .
Fi g u r e 5 2 a
S pa w n ma st e r
Fi g u r e 5 2 b S pa w n ma s e r Fi g u r e
5 2 c
In o c u l a t i n g
r e a d y fo r t r a n sfe r .
a ft e r sh a k i n g .
st e r i l i ze d g r a i n f r o m s pa w n
ma s t e r .
5 2 / T he M u sh r o o m C l t i v a t o r
Fi g u r e 5 4 S pa w n j a r
w i t h H e a v y G r o w t h, a n
u n d e si r a bl e
c ha r a c t e r i s t i c a r i s i n g
fr o m c o ft o n y se c t o r s.
Fi g u r e 5 3 S pa w n j a r c o n t a mi n a t e d w i t h W e t S po t ba c t e r i a , g i v i n g t he g r a i n a g r e a sy
a ppe a r a n c e a n d e mi t t i n g a so u r o d o r .
Fi g u r e 5 5
D a g r a ma t i c e x pa n s o n o f my c e l i a l ma ss u s i n g g r a i n -t o -g r a i n t r a n sf e r t e c h -
n i q u e . O n e pe t r i d i sh c a n i n o c u l a t e 1 0 spa w n j a r s ( G -1 ) w hi c h i n t u r n c a n be u se d t o
i n o c u l a t e 1 0 0 mo r e j a r s ( G -2 ) a n d e v e n t u a l l y 1 0 0 0 j a r s o f spa w n ( G -3 ) pr o v i d e d t he c u l -
t u r e r e ma i n s pu r e .
S a w d u st / B r a n S pa w n
4 pa r t s sa w d u st ( ha r d w o o d )
1
pa r t br a n ( r i c e o r w he a t )
S o a k t he s w d u s i n w a t e r fo r a l e a st
t w e n t y fo u r ho u r s, a l l o w t o d r a i n a n d t he n
t ho r o u g hl y mi x i n t he br a n . If t he mi x t u r e ha s
t he pr o pe r m o i s u r e c o n t e n t , a fi r m sq u e e ze
r e su l t s i n a fe w d r o ps be t w e e n t he fi n g r s Fi l l
t he ma t e r i a l fi r ml y t o t he n e c k o f t he spa w n
c o n t a i n e r ( w i d e m o u t h) . J a pa n e s spa w n
ma k e r s bo r e a ½ i n c h d i a me t e r ho l e d o w n
t he c e n t e r o f t he me d i a i n t o w hi c h t he y l a t e r
i n s r t t he i r i n o c u l u m. S t e r i l i ze fo r 6 0 -9 0 mi n -
u t e s a t 1 5 ps . O n c e c o o l e d , i n o c u l a t e fr o m
a g a r me d i a , l i q u i d e mu l s o n , o r g r a i n . A
fu l l y
g r o w n bo t t l e o f sa w d u s br a n spa w n c a n a l s
be u se d fo r fu r t he r i n o c u l a t i o n s.
P e r l i t e S p a w n
1 2 0 m i l l i l i t e r s w t e r
4 0 g r a ms pe r l i t e
5 0 g r a ms w he a t br a n
6 g r a ms g y psu m ( c a l c i u m s l fa t e )
1 . 5 g r a ms c a l c i u m c a r bo n a t e
S c r e e n t h e pe r l i t e t o r e mo v e t he fi n e
po w d r a n d pa r t i c u l a t e s.
F i l l
t he c o n t a i n e r
( sma l l mo u t h) w i t h t he d r y i n g r e d i e n t s a n d
mi x w e l l . A d d t he w a t e r a n d c o n t i n u e mi x i n g
u n t i l t he i n g r e d i e n t s a r e t ho r o u g h l y mo i s-
t e n e d . S t e r i l i z fo r o n e ho u r a t 1 5 psi . In o c u -
l a t e fr o m a g a r me d i a o r l i q u i d e mu l s i o n .
Fi g u r e 5 6
M y c e l i u m r u n n i n g
t hr o u g h sa w d u st / br a n spa w n .
A L T E R N A T I E S P A W N M E D I A
S o m e
mu shr o o m spe c i e s d o n o t g r o w w e l l o n g r a i n a n d a r e b e t t e r su i t e d t o a l t e r n a t i v e spa w n
me d i a . O t he r mu shr o o ms a r e g r o w n o n s bs r a t e s i n c o mpa t i bl e w i t h g r a i n s pa w n .
Fo r e x a mpl e ,
sa w d u st a n d br a n a r e t he pr e fe r r e d spa w n ma t e r i a l s fo r t he c u l t i v a t i o n s o f w o o d
i n ha bi t o r s su c h a s
L e n t i n u s e d o d e s a n d Fl a mmu l i n a v e l u t i pe s A n o t he r spa w n me d i a ha s a
pe r l i t e b r a n b a se . P e r l i t e i s
v i t r e o u s r o c k , he a t e d t o 1 0 0 0 ° F. a n d e x p l o d e d l i k e po pc o r n . T he
t i n fl a k e s o f br a n a r e r e a d i l y
s e r i l i z d w hi l e t he pe r l i t e g i v e s t he me d i u m i t s s r u c t u r e . T he r e c i pe s a r e :
Fi g u r e 5 7
Fi g u r e 5 8
Fi g u r e 5 9
i n o c u l a t i o n
F i g u r e 6 0
D a w i n g u p my c e l i u m t r o m c u l t u r e d i sh w i t h s r i n g e .
S y r i n g e i n o c u l a t i o n o f st e r i l i ze d g r a i n .
E be r ba c h c o n t a i n e r ma n u fa c t u r e d fo r l i q u i d c u l t u r e . N t e bo l t c o v e r i n g
ho l e .
D a w i n g u p l i q u i d i n o c u l u m.
t i o n i s mo s l y c o mpo se d o f a l c o ho l s ( e t ha n o l a n d a c e t o n e ) , i n t i me a c i d s a r e pr o d u c e d t ha t c a u se
t he l o w e r i n g o f t he su bs r a t e 's pH . T he s w a s e pr o d u c t s a r e fa v o r a bl e t o t he pr o pa g a t i o n o f ba c t e r i a
t ha t t h r i v e i n a q u e o u s e n v i r o n me n t s. S ma l l a m o u n t s o f t hi s fl u i d d o n o t e n d a n g e r t he c u l t u r e ;
e x c e ss v e w a st e f l u i d s ( w he r e t he c u l t u r e t a k e s o n a y e l l o w i sh hu e ) a r e d e f n i t e l y d e t r i me n t a l . If t hi s
fl u i d c o l l e c t s i n q u a n t i t i e s, t he my c e l i u m s c k e n s a n d e v e n t u a l l y d i e s i n i fs o w n w a s e s . S u c h e x c e s-
si v e " sw e a t i n g " i s i n d i c a t i v e o f o n e o r a c o mbi n a t i o n o f t he fo l l o w i n g c o n d i t i o n s:
1 .
i n c u ba t i o n a t t o o hi g h a t e mpe r a t u r e f o r t he spe c i e s be i n g c u l t i v a t e d . N t e t ha t t he t e m pe r a -
t u r e w i t hi n a spa w n j a r i s se v e r a l d e g r e e s hi g he r t h n t he su r r o u n d i n g a i r t e mpe r a t u r e .
2 . O v e r -a g i n g o f t he c u l t u r e s ; t o o l e n g t hy a n i n c u ba t i o n pe r i o d .
3 . L a c k o f g a s e x c h a n g e , e n c o u r a g i n g a n a e r o bi c c o n t a mi n a t i o n .
C n t a mi n a t e d j a r s sho u l d be s e r i l i z d o n a w e e k l y b a s s D n o t d i g o u t mo l d y c u l t u r e s u n l e ss
t he y ha v e be e n a u t o c l a v e d o r i f t he i d e n t i t y o f t he c o n t a mi n a n t i n q u e s i o n i s k n o w n t o be be n i g n .
S e v e r a l c o n t a m i n a n t s i n mu shr o o m c u t u r e a r e pa t ho g e n i c t o hu ma n s, c a u s n g a v a r i e t y o f sk i n d i s-
e a se s a n d r e spi r a t o r y a i l me n t s ( S e e Cha pt e r X III o n t he c o n t ma n i n a n t s o f mu shr o o m c u l t u r e ) .
A u t o c l a v e c o n t a mi n a t e d j a r s f

Paul Stamets - 1983 - The Mushroom Cultivator - A Practical Guide to Growing Mushrooms at Home

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