Pamela L. Ruegg, DVM, MPVM University of … · Historia del Control de Mastitis Staph aureus y Strep ag ... • Factores que influencia la tasa de curación –Edad de la vaca –SCC

Calidad de Leche y Manejo de Mastitis

Pamela L. Ruegg, DVM, MPVM

University of Wisconsin, Madison

Leche de alta calidad• De apariencia blanca

• Sin olores desagradables

• Libre de sustancias

anormales

– Pesticidas

– Adicion de agua

– Residuos de antibióticos o

antisépticos

• Calidad definida por

– Conteo de celulas

somaticas

– Conteo bacteriano

Conteo Bacteriano• La leche es un excelente medio de crecimiento

para las bacterias

– Especialmente si no se refrigera o si el equipo no

se limpia en forma adecuada

• Conteo de bacteriano total (CBT)

– Incube 1 ml de leche en medio estándar durante 48

h a 32 C.

– Cuenta el número de colonias de bacterias

– Meta: < 5000 cfu/ml

– También se la conoce como “plate loop count”

• La causa mas común de altos CBT es la limpieza

inadecuada

Evaluando la calidad de leche

• Conteo de placa

standard

• Conteo Laboratorio

pasteurizado

• Conteo Coliform

• Conteo preliminar de

incubación

• Bactoscan

Conteo en standard placa (SPC)

• Metodo Oficial de referncia y regulatorio

• Regulaciones para la leche en U.S. – <100,000 cfu/ml –

Grado A

– <300,000 cfu/ml –Grado B

• Datos de WI SPC, ‟94-‟98– 804,575 resultados SPC

evaluados mensualmente

– Grado A (95% de leche)

• 90% <34,000 cfu/ml

– Grado B (5% de leche)

• 50% <25,000 cfu/ml

• 10% >170,000 cfu/ml

<5,000 cfu/ml es un objetivo razonable

>10,000 cfu/ml indican un problema

SPC Alto• Indica un problema con la

calidad de la leche– No util para diagnóstico

• Las tres C‟s– Cooling (enfriado)

– Cleaning problem (problema de limpieza)

– Contamination (contaminación)

• Preparación para el Pre-ordeño de la Vaca & Conteoos Bacterianos

• Pocas veces asociado con mastitis subclínica– Strep ag

– Strep uberis

Conteos bacterianos diagnosticos• Conteo pasteurizado en

laboratorio– Usado cuando CPS es

alto

– CPS hecho en leche pasteurizada ltlt

• 62.8C for 30 min.

– ID thermodurics

• Micrococcus, microbacterium, lactobacillus, clostridium, bacillus

• Causa desecho de la leche

• Causas de LPC alto– Equipamiento sucio

– Falta de higiene, depositos de piedras de leche (calcio)

• Objetivos del LPC– <100 to 200 cfu/ml

– <10 indica higiene excelente

• Datos de Penn (Jayarao et al., 2004)

– 10% < 30 cfu

– 50% <133 cfu

Conteo de coliformes

• Diluciones de cultivo

de leche cruda en

medios selectivos

– Violet red bile agar

– Inc. 32 C por 24 H

– Petrifilm™ tambien

• Fuentes de bacterias

coliformes

– Ubres de las vacas

– Falta de higiene

durante el ordeñe

Conteos de coliformes

• Objetivo– < 50 cfu/ml

– 100 – 1000 cfu/ml indica falta de higiene durante el ordeñe

– >1000 cfu/ml indica crecimiento de bacterias

• Muestra de tanque (NY)– 30% <10 cfu/ml

– 20% > 100 cfu/ml

• Muestras Penn– 10% < 10 cfu

– 50% < 60 cfu

Conteo de Bacterias por categoria de conteo de

coliformes

0

2,000

4,000

6,000

8,000

10,000

12,000

14,000

16,000

18,000

20,000

Low (<50) Med (50-100)High (>100)

Coliform Count (cfu/ml)

SP

C &

PIC

(cfu

/ml)

0

200

400

600

800

1,000

1,200

LP

C, C

NS

, E

S (

cfu

/ml)

LPC CNS ES

SPC PIC

Jayarao, et al., JDS 2004

Interpretacion de los conteos bacterianos de la leche del tanque

• Comparicion de los tests diagnosticos

• Tienen que usarse Tests multiples (por lo menos 3 muestras)

Mastitis Subclínica

Células somáticas en leche• CCS se componen de

células blancas de la sangre y ocasionales células de descamación

• Los macrófagos son la célula más común en la glándula no infectada– Proporcionan vigilancia e

inician la respuesta inflamatoria

– Atraen a los PMNs

• 90% del CCS en glándulas infectadas son neutrófilos

0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

90%

100%

Distribución de las células en la leche normal

Aumentan A más del

90%

How Somatic Cells Get into Milk

Blood Flow

Blood Vessel Wall

M

M

M

Mammary Tissue

Adapted from Burton & Erskine, Vet Clinics Food

Anim Pract, 2003

CCS en leche normal

• El modificador más grande de la CCS es la mastitis

• CCS de cuartos o vacas no infectados es usualmente <200.000

• Muchas vacas tienen CCS <100.000

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

SCC

(ce

lls/m

l x 1

00

0)

CCs de curatos infectado y normal en una vaca

Timms, NMC 2001

Mastitis Clínica

• La leche no es normal o

las vacas muestran

signos clínicos de

enfermedad

• Los signos más comunes

– Grumos en la leche

– Cuarto hinchado

– Temperatura Corporal

Elevada

– Anorexia

– Agalactia

Mastitis Clínica

Historia del Control de Mastitis Staph aureus y Strep ag

• Desinfección post-ordeña de la teta

• Terapia de Secado Universal

• Tratamiento apropiado de casos clínicos

• Desecho de vacas cronicamente infectadas

• Maantenimiento regular de la máquina de ordeña

Plan de 5 Puntos

Aislamiento bacteriano en >77.000 muestras de leche, WI, 1994-2001

0%

5%

10%

15%

20%

25%

1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001

Año

Pro

po

rc

ión

de

ais

lam

ien

to

s

Staph aureus

Strep agalactiae

Makovec & Ruegg, 2002

Aislamiento bacteriano en muestras

de leche

Menores 16% Contag.

13%

Ambient.

17%Sin

crecimiento

31%

Tipos de Mastitis

usually subclinical

Staph aureus

usually subclinical

Strep agalactia

clinical and subclinical

Mycoplasma

Contagious

SCC Measures

clinical

Coliforms

clinical and subclinical

Environmental Streps

Environmental

not measured by SCC

Mastitis

Control IncrementadoProblema en

aumento

Contagious Mastitis Environmental Mastitis

Mastitis Contagiosa versus Mastitis Ambiental

• El Reservorio es el ambiente

• Frecuentemente diseminada entre ordeñas

• No puede ser erradicada

• El Reservorio es la ubre de

las vacas

• Frecuentemente diseminada

durante la ordeña

• Puede ser Erradicada

E. coli

Env. strepsS.aureus

Env. streps

Str. ag

El Pezón

• El esfinter del pezón es la barrera más importante para mantener a las bacterias fuera de la ubre

• El daño al extremo del pezón casi siempre causa mastitis Esfinter del Pezón

Exposición a patógenos

• Existe una constante exposición del esfinter a las bacterias

• Las bacterias deberán entrar a la ubre a través dell conducto del pezón para causar mastitis Diagram Credit: Purdue Univerisity:

http://www.milkquality.org/

Tratamiento de Mastitis

• Vacas enfermas requieren

cuidado inmediato

• La mayoría de las

decisiones de tratamiento

son voluntarias

• La Mastitis es usualmente

un síndrome

– Alterna entre estados clínicos

y subclínicos

SCC para vacas con mastitis

clinica recurrente

0250500750

10001250150017502000225025002750300032503500

enero

marz

mayo

julio

Sept.

Nov

SCC (x1000)

Principios para el Tratamiento Eficaz de Mastitis Clínica

• Identificación temprana de la mastitis

• Diagnóstico presuntivo del patógeno causal

• Conocer la probabilidad de la efectividad del tratamiento

Identificacion de Mastitis Clínica

• Los dueños de tambos son usualmente encargados y no ordeñan

• Porque los ordeñadores deben detectar y reportar casos de mastitis?

• Como sabe el dueño cuanta mastitis hay?– Despunte= no

– Retención de leche anormal=no

– Tratamiento=no El tratamiento no es efectivo Si la detección no es efectiva

Diagnóstico temprano de Infecciones con Gram + Afectan el Resultado del

Tratamiento• La probabilidad de cura

depende de la duración de la infección

• Evaluación de la duración del tratamiento basado en las SCC– Registros de 225 casos de

mastitis clínica en 1 tambo

– Días de descarte de leche comparados basados en SCC

– Infección crónica definida como 2 meses con tests >400,000 cel/ml

Dias de leche descartada

por caso

0

2

4

6

8

10

Cronica No cronica

Estado de la Infeccion antes del

Tratamiento

Dia

s d

e l

ech

e d

esc

arta

da

P< .006

Ruegg, NMC 2004

Sitio de la Infección

• Infecciones con bacterias

que invaden el tejido son

mas difíciles de curar

– Infección crónica por

S aureus

• Infecciones con bacterias

que infectan la superficie

de las células son mas

fáciles de curar

Alveolos SecretoriosConductos

Cisterna de la Glándula

Características de PatógenosContagiosos

S aureus Larga SCC aumentadas Celula <35% >70%

S agalactia Larga SCC aumentadas Sup. Celular >90%

M bovis Larga SCC, aumentadas Sup. Celular <5%

Clínicas, reducción & sangre

de prod leche

Patógeno Duración Detección Sitio Tasa de cura

Características de Patógenos Ambientales

Strep Variable SCC Sup. Celular >75%

dysgalactia Clínicas

Strep Variable SCC Sup. Celular >70%

uberis Clínicas Algunas invasivas

Coliforms Cortas Leve o severa Sup. Celular >85%

clínicas Sangre

CNS Variable SCC o leve Sup. Celular >70%

clínicas

Patógeno Duración Detección Sitio Tasa de cura

Streptococcus agalactiae• Patógeno Contagioso

• Muy controlable

• 80-90% sensible a

medicamentos a base de

penicilina.

• Causa un alto SCC en

tanques enfriadores

• Identifique las vacas

infectadas mediante

cultivo o SCC y

tratamiento durante con

el producto de la vaca en

lactancia

Erradicación Strep. ag

0%

5%

10%

15%

20%

25%

30%

35%

40%

45%

Pre-RX 30 d

PostR

12 M

PostRX

% I

nfe

cte

d

0

100

200

300

400

500

600

700

800

900

1000

SC

C (

x1000)

Vacas inf.

CCS

Erskine & Eberhart, 1990

Streptococcus agalactia

Se disemina con mucha facilidad

entre vacas en el ordeño

Staphylococcus aureus

• Vive en la piel humana y de las vacas y

en las ubres

• Se disemina con facilidad de vaca a

vaca en el ordeño

• Causa mastitis clínica y subclínica

– Puede causar aumentos en los conteos

somáticos celulares

• Difundido en hatos

– 50-95% de hatos infectados

Staphylococcus aureus

• Muy resistente al tratamiento durante la

lactancia especialmente si es crónico

• Forma pequeños bolsillos de infección en

la ubre que destruye el tejido que produce

la leche.

• Muy dificil para los antibióticos llegar a los

bolsillos de infección

• Forma cicatrices en la ubre

Tratamiento de mastitis clínica por Staph aureus

• Tasa de curas para Staph aureus durante la lactancia <20%

• Factores que influencia la tasa de curación– Edad de la vaca

– SCC de los cuartos afectados

– Número de cuartos afectados

– Etapa de la lactancia

– Duración de la Infección

• Tasas mas altas de curación para vacas nuevas, en lactancia temprana y con infecciones de corta duración

Tasa de CuraOwens et al, „97

Infección nueva con S aureus: 70%

Crónica con S aureus 35%

Sol et al., 1997

Tasa de Cura Bacteriologica

0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

90%

Wilson '99 Morin '98

No Antibiotics Antibiotics

Streptococci Ambientales

• Streptococci otro que Strep ag – Strep uberis

– Strep dysgalactia

• Tendencias estacionales en las infecciones

• Tasa alta de cura espontanea – Tambien la tasa de

recurrencia cuando el tratamiento es inadecuado

• Casos clínicos necesitan tratamiento intramamario agresivo

Tasa de Recurrencia

29% de las vacas que reciben antibiótico

46% de vacas sin antibiótico

Mastitis por Coliformes

Resultados de mastitis inducida por E. coli

(n = 4 per group)

0

50

100

150

200

250

300

350

400

Cura Bacteriol Cura Clinica de

Cuarto

Cura Clinica de

la Vaca

Hou

rs t

o Out

come

Sin Trat

OrdeneFrecuente

• Coliforms– E. coli

– Klebsiella

• Típicamente de corta duración

– 7-10% puede recurrir

• Signos clínicos causados por endotoxinas

• Numero de bacterias hace el pico 5-16 horas post infección

– Mas tarde aparecen signos clínicos

• La mayoría de las curas dependen de la asistencia del sistema inmune de la vaca

• Terapia de sostén es importante

Leininger & Roberson, 1997

Factores relacionados con la probabilidad de eficacia del tratamiento

• Selección de casos apropiados

para recibir tratamientos

• Conocer el tipo de patógeno

• Selección de la droga

adecuada

• Administración por la vía

apropiada

• Duración correcta del

tratamiento

Como se cura la mastitis?

• Los antibióticos funcionan mejor cuando

el sistema inmune de la vaca es efectivo

• Cualquier complicación en el sistema

inmune de la vaca reduce las

probabilidades de cura

– Sanidad de la punta del pezón

– Enfermedad metabólica concurrente

– Periodo de periparto

– Stress calórico

Conclusiones

• El tratamiento de la mastitis es importante para la calidad de leche

• El tratamiento efectivo esta basado en el diagnostico correcto

• Los Antibióticos deben ser utilizados en casos apropiados

• Tasa de curación aceptables para vacas con casos recurrentes de mastitis en cuartos múltiples no han sido reportadas

• Vacas con mastitis severas por coliformes deben recibir terapia sistémica

www.uwex.edu/milkquality