Odabrani slučajevi mikroskopske analize likvora Željka Vogrinc Klinički zavod za laboratorijsku dijagnostiku KBC Zagreb
Odabrani slučajevi mikroskopske analize likvora
Željka VogrincKlinički zavod za laboratorijsku
dijagnostiku KBC Zagreb
Mikroskopske analize staničnih elemenata u likvoru
� Sastavni dio osnovnog pregleda likvora
� 1-2 ml svježeg likvora � Pretraga unutar 60 minuta od
punkcije� Važnost predanalitike!
OSNOVNE CITOLOŠKE PRETRAGE LIKVORA
� Ukupan broj stanica u likvoru
� Leukociti
� Ostale stanične vrste
� Eritrociti
� Diferencijalna slikaSvjetlosni mikroskop
Brojanje i nativno diferenciranje stanica likvora u Fuchs-Rosenthalovoj komorici
� Ukupan broj stanica� Broj stanica/3 u 1µL (x106/L)� Brojanje: nativno ili u razrjeđenju s fiziološkom otopinom
� Nativno diferenciranje (?)
� Broj eritrocita
Površina = 16 mm2
Dubina = 0,2 mmV = 3,2 mm3
Morfološka analiza stanica likvora
� Izrada preparata�Citocentrifuga
� Volumen uzorka : ~ 0.2 ml� Vrijeme izvedbe :
� Bojenje preparata� Metoda po
Papenheimu (MGG)� Reakcija berlinskog
modrila (RBM)� Različita citokemijska i
imunocitokemijska bojenja
Nalazi fagocita u preparatima obojenim MGG, (400X)
Nalaz fagocita u preparatu obojenom RBM, (400X)
Hematološki brojači: program za biološke tekućine
� Prednosti:
� izbjegava se utjecaj “ljudskog faktora” (subjektivnost) -konzistentnost nalaza
� brzina
� Nedostaci:
� potreban veći volumen uzorka� nedovoljna osjetljivost kod
malog broja stanica u uzorku� kvaliteta uzorka ima velik
utjecaj na rezultat
STANICE U LIKVORU
� Normalno u likvoru:� Mali broj stanica
(do 5 mononuklearnih stanica/µL)�Homogena slika:
� T limfociti� Monociti
NEMA ERITROCITA !
NALAZ STANICA JE OVISAN O DOBINALAZ STANICA JE OVISAN O DOBI
Stanice normalnog likvora
Poremećaj stanica u likvoru se može očitovati na više načina:
� Povećanjem ukupnog broja stanica (pleocitozom)
� Pojavom nove vrste stanica (tumorskih, tkivnog porijekla)
� Promjenom funkcionalnog stanja stanica (različiti fagociti,
plazma stanice)
U PLEOCITOZI VEĆINA STANICA U LIKVORU SU REAKTIVNESTANICE
MONONUKLEARNI LEUKOCITI
LIMFOCITI MONOCITNO/ MAKROFAGNI REDMali limfociti MonocitiLimfoidne stanice Monocitoidne stanice/ histiocitiPlazmacitoidne stanice Makrofagi (eritro-, leuko-, lipo-)Plazma stanice Multinuklearne (orijaške) stanice
POLIMORFONUKLEARNI LEUKOCITINeutrofilni granulociti Eozinofilni granulocitiBazofilni granulociti/mastociti
TUMORSKE STANICEPrimarni tumori SŽS-aMetastatski tumori ERITROCITI
STANICE TKIVNOG PODRIJETLA DODATNI ELEMENTI
Stanice pije i arahnoideje Stanice hrskaviceStanice koroidnog epitela Stanice kožeStanice ependima Stanice koštane srži
STANIČNE VRSTE KOJE MOGU BITI PRISUTNE U LIKVORUKOD RAZLIČITIH PATOLOGIJA
Odabrani slučajevi iz prakse
Slučaj 1� Uzorak likvora bolesnice iz Klinike za
hematologiju� Bolesnica ranije liječena zbog non-
Hodgkin limfoma, na kontroli od prije 6 tjedana nije nađeno znakova aktivne bolesti. Sada se javlja u ambulantu zbog glavobolje i febriliteta. Zatražena je obrada likvora zbog sumnje na prodor bolesti u SŽS
� Mikroskopski nalaz likvora:Ukupan broj stanica:1401/3 x106/L- Polimorfonuklearne stanice: 879/3 x106/L- Mononuklearne stanice: 132/3 x106/L- Ostale stanice: 390/3 x106/L
Citomorfološki nalaz:→ infiltracija stanicama osnovne bolesti
A. Nalaz stanica u nativnom likvoru u F-R komorici. povećanje 400X. B. Nalaz neutrofilnih granulocita te brojnih atipičnih stanica. MGG, povećanje 400X
A
B
Slučaj 2� Uzorak likvora dvogodišnjeg dječaka iz
Klinike za pedijatriju � Dijete je zaprimljeno putem hitne službe
zbog febriliteta i naglo pogoršanog općeg stanja s gubitkom svijesti. Zatražena je obrada likvora zbog sumnje na upalni proces
� Likvor zamućen� Mikroskopski nalaz likvora: Ukupan broj stanica: 594/3 x106/L- Polimorfonuklearne stanice: 408/3x106/L- Mononuklearne stanice: 186/3x106/L Eritrociti: 516/3 x106/L
U preparatu (MGG):- neutrofilni granulociti 70% - monociti 21% - limfociti 9%
- Nakupine stanica i bakterija
Bakterijski meningitis
A.Nalaz stanica u nativnom likvoru u F-R komorici (400X). B. Nalaz stanica i mikroorganizama u obojenom preparatu (MGG, 400X)
A
B
Slučaj 3
� Uzorak likvora bolesnika iz Klinike za hematologiju
� Muškarac star 30 godina, zaprimljen putem hitnog prijema zbog glavobolje, mučnine i razvoja febriliteta. Bolesnik u anamnezi ima liječenu KLL, alogena transplantacija prije 5 godina. Zatražena obrada likvora zbog sumnje na relaps bolesti i prodor u SŽS.
� Mikroskopski nalaz likvora:Ukupan broj stanica: 3756/3 x106/L- Polimorfonuklearne stanice: 39/3 x106/L- Mononuklearne stanice: 3717/3 x106/L
U preparatu (MGG):- reaktivni oblici limfocita i monocita →
serozna upala Virusni encefalitis
A.Nalaz stanica u nativnom likvoru u F-R komorici (400X). B. Nalaz stanica u obojenom preparatu (MGG, 400X)
A
B
Slučaj 4� Uzorak likvora pacijentice iz Klinike za
psihijatriju� Gospođa stara 66 god, zaprimljena
putem hitne službe, dezorijentirana, agitirana, sa znakovima teške psihoze. Nalaz MSCT uredan čime je isključeno somatsko zbivanje. Zbog nereagiranja na th →lumbalna punkcija i analiza likvora
� Mikroskopski nalaz likvora (F-R)Ukupan broj stanica: 558/3 x106/L- Limfociti: 37/3 x106/L- Neutrofilni granulociti: 9/3 x106/L- Neklasificirane stanice: 512/3 x106/LEritrociti: 816/3 x106/L� U preparatu (MGG): Nalaz neklasificiranih stanica
� U anamnezi ima liječenu neoplazmu dojke - bez simptoma bolesti i bez terapije
Diseminacija bolesti
A
B
A. Nalaz stanica u nativnom likvoru u F-R komorici (400X). B. Nalaz stanica u obojenom preparatu (MGG, 400X)
Slučaj 5
� Uzorak likvora iz drenaže s Klinike za neurokirurgiju; pacijent u višednevnom praćenju
� Likvor zamućen → analiziran na hematološkom brojaču Sysmex XE-5000, na programu za specijalne tjelesne tekućine.
� Nalaz likvora s brojača: Ukupan broj stanica: 933/3 x106/L- Polimorfonuklearne stanice: 552/3x106/L- Mononuklearne stanice: 381/3x106/LEritrociti: 816/3x106/L� Nalaz je značajno odstupao od
prethodnog → likvor analiziran i „ručno“, brojanjem u F-R komorici.
� Nalaz likvora iz F-R komorice:Eritrociti:128/3 x106/LUkupan broj stanica: 24/3 x106/LMorfološkom analizom nađene su samo
raspadnute stanice.
FR komorica
BROJAČ
IZGLED LIKVORA
Onečišćenje