Page 1
Nucleic Acid Chemistry & Structure N. Tirawanchai, Ph.D.
NÂ ; Introduction Structure Nucleosides (NS)
Nucleotides (NT) PolyNT (NÂ)
Classification DNA RNA
Digestion & absorption
Outline & Objective
Nucleic Acids
องค์�ประกอบของ genetic material เป น polynucleotide
29/9/57
Page 2
แบ�งเป น DNA (deoxyribonucleic acid) RNA (ribonucleic acid)
Composed of Pentose sugar Bases Phosphate 1-3 gr.
Nucleoside Nucleotid
eComposition of NS & NT
Nitrogenous base Major bases ; Purines (A, G), pyrimidines
(C,T,U) Minor bases (P.93 ; ชี�วเค์มี� 1) Pentose sugar
Phosphate group
Page 3
P.94 ชี�วเค์มี� 1
Are used as therapeutic agents
Allopurinol
ร�กษาโรค์ gout
AZT
Inhibit retroviral
replication e.g AIDS
Nomenclature of NS & NT
Base, nucleoside & nucleotide analogs
Page 4
Polymer of NTs ; Phosphodiester linkage
Sugar - P
Backbone
3’,5’-Phosphodiester
linkage
DNA strand
Polynucleotides
Page 5
DNA (Deoxyribonucleic Â) & RNA (Ribonucleic Â)
Genetic material ; chromosomal DNA/ nuclear DNA/genomic DNA
พบใน nucleus ของ eukaryotes & nucleoid ของ prokaryotes
ขนาด 3 x 106 basepairs (bp) prokaryotes 3 x 109 bp human
Consists of dATP, dCTP, dGTP, dTTP
1) DNA
Nucleic Acids
ประกอบด�วย polyNT 2 สาย (right-handed double helical structure)
จั�บก�นด�วย H-bond ของ complementary bases A = T, C G
Antiparallel
Page 6
Watson & Crick’s Model
5’
5’
3’
3’
Page 7
Eukaryotic DNA
Mitochondrial DNA Chromosomal DNA
Mitochondrial DNA
Human mtDNA มี�ขนาด 16,569 bp Closed-circular, double helix มี�ประมีาณ 6-10 copies/mitochondrion มี� gene ที่�"ใชี�ในการส�งเค์ราะห์�
tRNA 22 ชีน$ด , rRNA 2 ชีน$ด โปรตี�น 13 ชีน$ด
ถ่�ายที่อดจัากแมี� ลู(ก (maternal inheritance)
Prokaryotic DNA
Closed-circular DNA
Supercoil
Page 8
Structure of human mitochondrial DNA
16,569 bp
Page 9
Eukaryotic chromosomal DNA
+
Histone & nonhistone
Chromatin
Chromosome in metaphase
Chromosomal DNA
Telomere
Page 10
Packaging of eukaryotic DNA into chromosome
Page 11
Histone proteins
Basic proteins (+) ; Rich in Lys, Arg 5 Types ;
H1, H2A, H2B, H3, H4 Histone octamer
2 x (H2A, H2B, H3, H4) + DNA core particle
H4
Core particle
Nucleosome
มี�ขนาดให์ญ่�กว�า มี�ปร$มีาณน�อยกว�า
histone proteins
Nonhistone proteins
H1
Page 12
A-DNA ~ B-DNA ที่�"อย(�ในภาวะที่�"มี� ค์วามีเข�มีข�นเกลู+อ Right-handed helical structure แตี�ลูะรอบของเกลู�ยว (pitch) มี�ขนาด 2.46 nm
(11 bp/turn) ให์ญ่�กว�า B-DNA (ร(ป 3.43 P.99)
Common natural structure of DNA at physiological pH
Right-handed helical structure แตี�ลูะรอบของเกลู�ยว (pitch) มี�ขนาด 3.4 nm
(10 bp/turn)
B-DNA
Chromosomal DNA จัะมี�โค์รงสร�างแบบที่�"บ$ดเป นเกลู�ยว (supercoiling) อย(� 3 ร(ปแบบ ; A, B, Z (zigzag)
Page 13
In vivo ; พบบร$เวณ GC-rich sequence ของ DNA In vitro ; พบในสภาวะที่�"มี� high salt concentration Left-handed helical structure แตี�ลูะรอบของเกลู�ยว (pitch) มี�ขนาด 4.56 nm
(12 bp/turn) ร(ปร�างยาวแลูะบางกว�า B-DNA
Z-DNA
Page 14
Total genetic information carried by each human cell
Size 3 x 109 bp DNA Sequence of the human genome has now
been completed
~20,000-25,000 genes
The Human Genome
Page 15
Organisation of the human genomeHuman Genome ; 3000Mb
(~ 20,000-25,000 protein-coding gene)
~ 40%
Genes and gene-
Related sequence
~ 60%
Intergenic
DNA
~ 2%Protei
n-coding gene
~ 38%-Noncoding functional RNA genes-Gene-related sequences (pseudogenes, gene fragments, introns,UTRs)
~ 18%
Unique or low copy number
~ 42%
Moderately to highly repetitive
Page 16
Gene A DNA segment necessary for synthesising
RNA & protein
Composed of exon (coding sequence) & intron (intervening sequence ; noncoding sequence)
Mature
Page 17
Intergenic DNA
Interspersedrepeats
Tandemrepeats
Moderately to highly repetitive DNA
SatelliteDNA
Minisatellite DNA ;
VNTR
Microsatellite
DNA ; STR
SINEs ; AluLINEs
LTRelement
s
Transposons
Page 18
Tandem repeats
Interspersed repeats
Repetitive DNA
DNA sequence ที่�"มี�ค์วามีซ้ำ-.าซ้ำ�อน (repeat) อย�างมีากใน
genome
แบ�งเป น tandem repeats แลูะ interspersed
repeats
ATCGC ATCGCATCGC
ATCGC ATCGCATCGC
Page 19
Satellite DNA
มี�กอย(�บร$เวณ centromere
จั-านวน repeats ;
1000-10 million
repeat units
Page 20
ใชี�ที่-า DNA fingerprintingใน forensic application, pedigree determination
Page 21
Transposons
LTR (Long terminal repeat) elements
LINEs (Long interspersed nuclear elements)
SINEs (Short interspersed nuclear elements)
Ex. Alu elements เป น SINEs ที่�"มี�มีากที่�"ส/ด
เป น mobile genetic elementที่�"เค์ลู+"อนที่�"ได�บน genome
Interspersed repeats
Page 22
พบใน prokaryotes & eukaryotes
PolyNT consists of ATP, CTP, GTP, UTP
2) RNA
มี�โค์รงสร�างเป น single strand แตี�บางชีน$ด จัะมี�
secondary structure เป น double strand (loop)
Page 23
RNA strand
Secondary structure
แบ�งเป น messenger RNA (mRNA), ribosomal RNA
(rRNA), transfer RNA (tRNA), Small nuclear RNA
Page 24
มี�ประมีาณ 5% ของ
RNA ที่�.งห์มีด
น-าข�อมี(ลูที่าง
พ�นธุ/กรรมีจัาก DNA
ไปส�งเค์ราะห์�
โปรตี�นที่�" ribosome
hn = Heteronuclear RNA
hn
Mature
1) mRNA
Page 25
Prokaryotic mRNA
Eukaryotic mRNA
Cap structure
Poly (A) tail
7-methylguanosine
Page 26
Prokaryote
Eukaryote
Splicing
Mature mRNA
Page 27
เป น RNA ที่�"มี�อย(�
มีากที่�"ส/ด (80%)
อย(�รวมีก�บโปรตี�น
เป น ribosome
แห์ลู�งส�งเค์ราะห์�
โปรตี�น
2) rRNA
Page 28
มี�ประมีาณ 15% ของ RNA ที่�.งห์มีด มี�ขนาดเลู2กที่�"ส/ด พบ > 60 ชีน$ด แตี�จัะมี� tRNA อย�างน�อย 20 ชีน$ด ที่-า
ห์น�าที่�"น-าเอา AÂ เข�าไปสร�างโปรตี�นใน ribosome
Clover leaf
structure
3) tRNA
Page 29
Small nuclear RNA จั�บก�บโปรตี�นเป น complex
Small nuclear RNA ใน nucleus
[small ribonucleoproteins (SnRNPs)]
ที่-าห์น�าที่�"เก�"ยวก�บ RNA splicing เชี�น U1
Poly A synthesis เชี�น U6
Small nuclear RNA ใน cytoplasm [small
cytoplasmic ribonucleoprotein particles
(ScRNPs)]
ที่-าห์น�าที่�"เก�"ยวก�บการขนส�งโปรตี�นผ่�านเย+"อห์/�มีเซ้ำลูลู� ของ rough endoplasmic reticulum เชี�น 7S RNA
4 ) Small nuclear RNA
Page 30
RNA
mRNAProtein-coding RNA
ncRNA: non-coding RNAsTranscribed RNA with a structural,
functional or catalytic role
rRNARibosomal RNAParticipate in
protein synthesis
tRNATransfer RNA
Interface betweenmRNA &
amino acids
snRNASmall nuclear
RNA RNA that form
part of the spliceosome
snoRNASmall nucleolar
RNA Found in nucleolus,
involved in modification
of rRNA
RNAiRNA interferenceSmall non-coding
RNA involvedin regulation
of gene expression
OtherIncluding large RNA
with roles in chromotin structure
and imprinting
siRNASmall interfering RNAActive molecules in
RNA interference
miRNAMicroRNA
Small RNA involvedin regulation
of protein-coding gene
Modified from Dr Hua-Chien Chen’s slide
Page 32
Small non-coding RNA molecule (21-25 nucleotides)
Encoded by miRNA gene
Found in plants, animals, and some virusesssRNA with stem-loop structure
Page 34
Function of miRNA ; Inhibit protein synthesis
Page 35
NÂ OligonucleotidesDNase I
RNase
Mononucleotides
Nucleosides
Absorption by
intestinal mucosa
Bases, riboses
Nucleoside phosphorylases
& Nucleosidases
NA digestion and absorption