-
PPrriimmeerr CCuurrssoo AArrggeennttiinnoo ddee
PPrreevveenncciinn yy CCoonnttrrooll ddee IInnffeecccciioonneess
HHoossppiittaallaarriiaass
PPoorr IInntteerrnneett
AUTORES
DDrr.. GGuuiilllleerrmmoo RR LLoossssaa Mdico Especialista
Jerarquizado en Infectologa Master en Microbiologa Clnica y
Sanitaria Director del Instituto Nacional de Epidemiologa Jefe del
Programa de Prevencin y Control de Infecciones Hospitalarias
DDrraa.. DDiiaannaa GGmmeezz
Bacteriloga Jefa de la Seccin Bacteriologa del INE.
DDrraa.. JJuuaannaa VVaaiirreettttii Mdica Especialista en
Neonatologa Programa de Prevencin y Control de IH del INE
LLiicc.. NNoorrmmaa PPeerraallttaa Lic. en Enfermera Docente
Universitaria Programa de Prevencin y Control de IH del INE
EEnnff.. IIllddaa TTeelloo Enfermera del INE. Programa de
Prevencin y Control de IH del INE COLABORADORES MMaabbeell
CClleemmeennttee MMaarrcceelloo CCrrddoobbaa
P R O G R A M A N A C IO N A L D E
P R E V E N C I O N Y C O N T R O L D E
IN F E C C IO N E S H O S P IT A L A R IA S
I. N . E .
[email protected]
Ministerio de Salud Secretara de Polticas, Regulacin y
Relaciones Sanitarias
ADMINISTRACION NACIONAL DE LABORATORIOS E INSTITUTOS DE
SALUD
"Dr. CARLOS G. MALBRAN"
INSTITUTO NACIONAL DE EPIDEMILOGA Dr. Juan H. Jara
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Rol del Laboratorio de Microbiologa en Infecciones
Hospitalarias:
Algunos Conceptos Bsicos
Indice
La microbiologa
.............................................................................................
3 - Flora microbiana
............................................................................................
3 - Importancia de la biota
..................................................................................
4 - Flora habitual
...........................................................................................
5 - Flora de las vas respiratorias
..................................................................
6 - Flora habitual de la boca
..........................................................................
7 - Encas, alvolos dentarios y criptas amigdalinas
..................................... 7
- Flora normal del tracto gastrointestinal
................................................... 8 - Flora
normal del ojo
.................................................................................
9 - Flora normas del odo
...............................................................................
9 - Flora normal del aparato urinario
............................................................. 9 -
Flora normal de la vagina
.........................................................................
10 Laboratorio de microbiologa -
Introduccin.................................................... 11
- Toma de muestra
.......................................................................................
11 - Seleccin de muestra
................................................................................
12 - Conservacin de muestras
..........................................................................
14 Muestras clnicas para investigacin de infecciones a travs del
cultivo ......... 15 Ejemplos de tomas de muestras ms importantes
en I.H. 17 Diagnstico micolgico
....................................................................................
23 Obtencin de muestras para estudio virolgico
................................................. 25 Normatizacin
de toma, envo y traslado de muestras de sangre
...................... 26 Normas de bioseguridad
....................................................................................
28 Vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos . 30
Bibliografa ... 31 Anexo I Datos que deben consignarse con el envo
de cepas o especmenes ... 32 Anexo II - Formulario para solicitud
de toma de muestra .................................. 33
- Postulados de Koch
.....................................................................................
34
- Postulados de Falkow
..................................................................................
34
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a Microbiologa La microbiologa es una ciencia nueva, la
existencia de microorganismos vivos fue avizorada tericamente por
muy pocos en el pasado y fue imposible su desarrollo sin un
correlato cientfico experimental. En realidad su fundacin como
ciencia real no proviene de ninguna abstraccin terica sino de la
necesidad de resolver problemas prcticos, en la mayora de los casos
generados por la presin de la revolucin industrial y/o problemas
poltico-econmicos de salud (humana, animal y vegetal) que deban
resolver los gobiernos. Estos fueron fundamentalmente presionados
por la incipiente industrializacin de las fermentaciones (cervezas,
vinos, panificacin, lcteos) y la necesidad de control de las
grandes plagas de plantas, animales y humanos. La poca de oro de la
fundacin de la microbiologa como ciencia se inicia en los albores
de 1850. Si bien como ya dijimos el estudio de los procesos
fermentativos y el rol etiolgico de los microorganismos en la
patologa fueron los motores del desarrollo, tambin hubo
investigadores que comenzaron estudios bsicos para definir qu eran
los microorganismos. Desde principios del siglo XX, se realizaron
estudios sobre los aspectos energticos y fisiolgicos de las
bacterias. Fueron muchos menos los cientficos ocupados por los
aspectos bsicos de los microorganismos, que aquellos que se
volcaron al descubrimiento de nuevos patgenos de humanos, animales
y de plantas. A partir de 1940 un grupo de investigadores, con una
fuerte formacin en el rea de la fsica, tomaron los modelos
microbiolgicos para investigar los problemas abstractos de la
gentica y los mecanismos bsicos de la vida misma. Este movimiento
se gener sin otra presin aparente que la del conocimiento
cientfico, fundando un nuevo mbito de la ciencia: la Biologa
Molecular. La evolucin de la biologa molecular, con una fuerte raz
microbiolgica, ha desembocado en la aplicacin de tcnicas de
recombinacin gentica que han conmovido los lmites biolgicos de las
especies (bacterias, plantas y animales transgnicos) generando una
nueva revolucin industrial.
FLORA MICROBIANA El medio donde vivimos es un ambiente poblado
de microorganismos. El hombre sano y normal, desde el momento de su
nacimiento y a lo largo de toda su vida alojar miles de especies de
bacterias y, en menor nmero, a otros seres vivos (hongos, virus
protozoos) en diferentes sitios de su organismo. De este modo la
interaccin hombre-microorganismo es permanente, y dicha interaccin
puede resultar indiferente, beneficiosa o perjudicial.
LL
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No existe ninguna regla establecida para dividir a los
microorganismos del hombre en categoras definidas, pero los
microbilogos los han enmarcado en dos grandes grupos, uno
perteneciente a los microorganismos que son capaces de convivir con
el hombre y que habitualmente no causan perjuicio y otro que
comprende a los microorganismos responsables de desencadenar
enfermedad, denominados patgenos primarios o estrictos. El trmino
flora microbiana normal se utiliza para designar a aquellos
microorganismos que habitan normalmente en los individuos sanos,
sin provocar invasin. Tambin se denomina flora indgena, autctona o
nativa del hombre. La microflora nativa, indgena o autctona no es
estable a lo largo de la vida como consecuencia del desarrollo
anatmico y fisiolgico. La edad del husped, el requerimiento
alimenticio, la temperatura corporal, la acidez, la disponibilidad
de oxgeno, el pH de la zona, la influencia ejercida por otros
microorganismos, la disponibilidad de elementos nutritivos, el
estado inmunolgico del husped, el ambiente, son algunos de los
factores que determinan el nmero y tipo de flora presente en
diferentes sitios del organismo. Los microorganismos de la flora
normal pueden dividirse de acuerdo con su permanencia en dos
grandes grupos: a) Flora invariable o residente que est compuesta
por tipos relativamente fijos de
microorganismos en sitios determinados y que por si alguna razn
desaparece (empleo de antimicrobianos, por ejemplo) se restituye
con bastante rapidez.
b) Flora transitoria constituida por grmenes no patgenos o
potencialmente
patgenos que permanecen sobre la superficie corporal o mucosas
durante horas, das o meses. Provienen del ambiente y slo cobran
significacin cuando la flora permanente desaparece aprovechando la
situacin para proliferar y, en algunas circunstancias, invadir y
ser responsables de producir enfermedad.
IMPORTANCIA DE LA BIOTA NORMAL
La flora indgena desempea un importante papel pues puede
prevenir, por medio de un conjunto de acciones, ciertas
enfermedades bacterianas. Este conjunto de acciones se conoce con
el nombre de Antagonismo Bacteriano suprime el crecimiento de otras
bacterias y hasta de hongos potencialmente patgenos al competir por
los nutrientes esenciales y al producir ciertas sustancias
inhibidoras, las cuales son bien especficas, denominadas
genricamente bacteriocinas. Ejemplos de ellas son: colicinas,
elaboradas por E.coli; klebosanas, sintetizada por el gnero
Klebsiella; marscecinas producida por Serratia marscesens;
pesticina, sintetizada por Y. pestis, etc.
Queda demostrado luego del tratamiento con antimicrobianos de
amplio espectro; que la flora normal del tubo digestivo puede ser
reemplazada por ciertos
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hongos (gnero Cndida) o estafilococos que habitualmente estn
inhibidos en su crecimiento dando lugar a la aparicin de
disbacteriosis. El sinergismo bacteriano posibilita el desarrollo
de algunas bacterias patgenas en ciertas zonas del organismo en las
que no podran, por s solas, crecer. La ayuda que pueden prestarse
las bacterias se vincula con hechos como compartir sustancias
metablicamente indispensables, enzimas, etc. Ciertas bacterias
nativas, sobre todo las residentes en el tubo digestivo, pueden
producir endotoxinas responsables de provocar ciertos grados de
toxemia en huspedes susceptibles (hipersensibilidad). En ciertas
circunstancias, la microflora normal puede por s sola producir
patologa, debido a que los microorganismos pueden ser introducidos
en los tejidos o al torrente sanguneo o bien pasar de su
localizacin habitual, donde se comportan inofensivamente, a otro
sitio del organismo donde pueden ocasionar diferentes tipos y
grados de enfermedad, de acuerdo con el lugar de localizacin y
estado inmunitario del husped. Cuando por alguna razn la inmunidad
del husped se ve alterada y sobreviene una infeccin seguida de
enfermedad, se denomina, en general, infeccin oportunista, que
puede acaecer tambin como resultado de distintos factores
iatrognicos y nosocomiales. Si bien stas pueden resultar del
ingreso de microorganismos del medio ambiente, dadas las
circunstancias antes mencionadas, lo habitual es que el individuo
presente enfermedad a partir de su propia flora normal y en este
caso reciben el nombre genrico de infecciones endgenas. Flora
normal de la piel (103 a 104 microorganismos por cm2, en zonas
hmedas puede llegar hasta 10 6 microorganismos por cm2)
Bacterias grampositivas Bacterias gramnegativas Cocos: Bacilos:
Hongos - Stapylococcus epidermidis - Coliformes -Cndida albicans -
Stapylococcus aureus - Proteus - Cryptococcus - Sarcinas -
Acinetobacter - Pityrosporum orbiculare - Micrococcus Bacterias
Acido Alcohol - Streptococcus hemolticos Resistentes -
Streptococcus hemolticos Micobacterias (conducto auditivo -
Enterococos externo, regin axilar y genital) -
Peptostreptococcus
Flora habitual
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Bacilos: - Difteroides - Bacillus subtilis - Propionobacterium
En el recin nacido: (flora transitoria adquirida por el pasaje a
travs del canal del parto) - Lactobacillus acidophilus -
Streptococcus sp. - Micrococcus
- Coliformes
a) Conductos nasales b) Nasofaringe
Bacterias grampositivas Bacterias grampositivas Cocos: Cocos: -
Staphylococcus epidermidis - Streptococcus viridans - Streptococcus
hemolticos - Streptococcus hemolticos - Stapylococcus aureus -
Staphylococcus sp. - Streptococcus hemolticos - Streptococcus
pneumoniae. - Streptococcus viridans - Streptococcus hemolticos
Bacilos: Bacilos: - Difteroides - Difteroides Bacterias
gramnegativas Bacterias gramnegativas Cocos: Cocos: - Neisseria
meningitidis (10% de la poblacin) - Neisseria sp. - Neisseria
sp.(10-15% de la poblacin) - Neisseria meningitidis (15% pobl.)
Bacilos: Bacilos: - Haemophilus influenzae (5-10% de la po- -
Haemophilus influenzae blacin) - Haemophilus parainfluenzae -
Klebsiella sp. - Pseudomonas aeruginosa - Enterobacter sp. -
Proteus sp. - Acinetobacter - Bacteroides Otros
- Mycoplasma pneumoniae c) Trquea, bronquios y senos:
normalmente son estriles.
Flora normal de las vas respiratorias
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Bacterias grampositivas Bacterias gramnegativas Cocos: Cocos: -
Streptococcus hemolticos - Branhamella catarrhalis - Staphylococcus
epidermidis - Neisseria mucosa - Streptococcus penumoniae -
Veillonella - Streptococcus hemolticos Bacilos: - Streptococcus
hemolticos (no grupo A) - Haemophilus hemolyticus - Streptococcus
salivarius - Coliformes - Streptococcus sanguis - Fusobacterium -
Streptococcus mutans - Eikenella corrodens - Micrococcus -
Bacteroides - Peptostreptococcus - Leptotrichia bucalis Bacilos:
Otros - Difteroides - Treponemas sp. - Actinomyces israelii Hongos
- Candida albicans - Geotrichum Bacterias grampositivas Bacterias
gramnegativas Cocos: Bacilos: - Micrococcus (anaerobios) - Vibrio
sp. - Peptostreptococcus - Fusobacterias Otros - Treponema
microdentium En el recin nacido - Micrococcus - Streptococcus sp. -
Staphylococcus sp. - Coliformes - Lactobacillus acidophilus
Difteroides Hongos - Levaduras
Flora habitual de la boca
Encas, alvelos dentarios y criptas amigdalinas
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a) Esfago b) Estmago Bacterias deglutidas por la saliva y
alimentos Habitualmente libre de grmenes Estos ingresan con los
alimentos - Sarcinas c) Duodeno - Lactobacillus acidophillus -
Lactobacillus Hongos - Streptococcus sp. - Levaduras - Levaduras
Intestino grueso (2 a 4x10 11 bacterias/g de d) Ileon inferior
materia fecal seca) Bacterias grampositivas Bacterias grampositivas
Cocos: Cocos: - Streptococcus viridans - Enterococcus - Veillonella
- Staphylococcus sp. - Streptococcus faecalis Bacilos: -
Staphylococcus sp. - Difteroides Bacilos: - Lactobacillus sp. -
Lactobacillus sp. - Clostridium perfringens - Clostridium tetani -
Actynomices Bacterias gramnegativas - Costridium sp. Bacilos: -
Bacillus subtilis - Escherichia coli (ocasionalmente) - Eubacterium
- Bifidobacterium Bacterias gramnegativas Bacilos: - Coliformes -
Proteus - Pseudomonas - Bacteroides
- fusobacterias Hgado, vescula biliar y peritoneo Otros Zonas
estriles - Borrelia - Espiroquetas - Hongos - Candida - Geotrichum
- Cryptococcus - Penicillium - Aspergillus Flora normal de
lactantes alimentados Flora normal de lactantes alimentados a pecho
a mamadera - Bifidobacterium - Lactobacillus acidophilus -
Enterococcus (escasos) - Coliformes
Flora normal del tracto gastrointestinal
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- Coliformes (escasos) - Enterococcus - Staphylococcus (escasos)
- Bacillus sp. - Clostridium sp.
Meconio Generalmente estril Bacterias grampositivas -
Staphylococcus epidermidis Cocos: - Difteroides - Staphylococcus
epidermidis - Bacillus sp. - Micrococcus - Peptococcus y
Peptostreptococcus - Streptococcus hemolticos Otros Bacterias
gramnegativas - Hongos saprfitos Cocos: - Neisseria sp. - Moraxella
Otros - Hongos saprfitos
Por lo general es estril. Sin embargo, pueden recuperarse
de la orina normal contaminantes de uretra y zonas vecinas.
Bacterias grampositivas Bacterias gramnegativas Cocos: Bacilos:
- Sataphylococcis epidermidis - Coliformes - Enterococcus - Proteus
- Streptococcus y hemolticos Hongos Bacilos: - Levaduras -
Difteroides Otros - Lactobacillus sp. - Mycoplasmas sp. -
Bacillus
Flora normal del ojo Flora normal del odo
Flora normal del aparato urinario
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Recin nacida: Veinticuatro horas a tres das: Tres das a algunas
semanas: - Estril - Staphylococcus sp. - Lactobacillus acidophilus
- Enterococos
- Difteroides - Mycobacterium smegmatis
Prepber: - Micrococcus - Streptococcus y hemolticos - Coliformes
- Difteroides Adulta: Embarazo: - Lactobacillus acidophilus
Aumentan durante este perodo - Staphylococcus epidermidis
Lactobacillus, Levaduras, Staphylococcus - Streptococcus y
hemolticos epidermidis, Streptococcus agalactiae - Bacteroides (20%
de las mujeres). - E.coli - Difteroides - Levaduras -
Peptostreptococcus - Neisseria sp. - Listeria sp. - Clostridium sp.
- Mycobacterium tuberculomatis Flora normal del tero Flora normal
del esmegma - Habitualmente estril - Mycobacterium smegmatis Flora
normal de L.C.R., sangre y tejidos profundos - Estril
La significacin de un aislamiento de laboratorio estar
ntimamente relacionada con la bacteria aislada y el sitio de donde
se recuper. Es de vital importancia la toma de muestra
correctamente efectuada, su tratamiento y su transporte para poder
afirmar si los microorganismos all aislados forman parte o no de la
flora normal o, en caso de zonas estriles, descartar o no la
posible contaminacin. Recordar:
Es imprescindible el conocimiento de la flora habitual, para
evitar lacontaminacin de las muestras con esos microorganismos de
piel y mucosas, cuyocultivo induce a confusiones, dificultando el
diagnstico y tratamiento. Muestras no representativas, mal
recogidas o inapropiadamente transportadasy almacenados, y/o datos
incompletos o errneos, pueden alterar o confundir eldiagnstico
Flora normal de vagina
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aboratorio de Microbiologa
INTRODUCCION El propsito del laboratorio de Microbiologa es
aislar e identificar el agente etiolgico de la infeccin y
establecer un perfil antibitico que permita una terapia apropiada.
En los ltimos aos se han desarrollado tcnicas moleculares, que han
renovado la Microbiologa, su accesibilidad y aplicabilidad no es
uniforme. Para la mayora de las bacterias y hongos, el cultivo en
medios artificiales, la identificacin por pruebas bioqumicas y la
sensibilidad a antimicrobianos, sigue siendo el mtodo de eleccin
para el diagnstico microbiolgico. En tanto que para muchos virus y
bacterias intracelulares obligadas se cumplimenta, combinando los
cultivos celulares con tcnicas serolgicas. TOMA DE MUESTRA
Consideraciones generales El xito de un examen microbiolgico se
juega desde el momento de la recoleccin de la muestra. De nada vale
la mejor y ms actualizada tcnica frente a un material que no ha
sido tomado en el momento oportuno, del sitio ms representativo,
con los elementos adecuados y mal conservado. Es por ello que la
relacin entre el laboratorio y el personal mdico y de enfermera
debe ser muy estrecha. Es funcin del laboratorio la redaccin y
divulgacin de las Normas de seleccin y recoleccin de las muestras,
su almacenamiento y transporte. El mdico debe ofrecer todos los
datos y presunciones clnicas, ya que stos junto con las
caractersticas de la lesin, el aspecto microscpico del material, el
examen en fresco y por coloracin, facilitan la planificacin de
esquemas dirigidos, seleccionando y ampliando los medios de
cultivo, tiempo, temperatura y atmsfera de incubacin, lo cual
favorece una pronta identificacin del agente causal. La importancia
del personal de enfermera reside en ser quien muchas veces de las
instrucciones, prepara al paciente y/o recolecta la muestra. Para
manejar adecuadamente las muestras biolgicas, debe conocerse el
tratamiento especfico que requiere cada una.
LL
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Es muy importante concienciar al personal encargado de la
recogida de muestras de la importancia de dicha labor, e insistir
en que sigan rigurosamente los protocolos especficos, para cada
muestra. SELECCION DE LA MUESTRA Es indispensable que las muestras
biolgicas que van a ser analizadas en el laboratorio de
microbiologa sean seleccionadas cuidadosamente antes de proceder a
su extraccin. Consideraciones Generales Conceptos Bsicos de la
Muestra:
1. Preparar el sitio para evitar contaminantes de piel y
mucosas. 2. Obtener material del verdadero sitio de la lesin con un
mnimo de contaminacin. 3. Establecer el perodo ptimo. 4. Obtener la
suficiente cantidad de muestras. 5. Utilizar dispositivos de
recoleccin y medios de transporte adecuados. 6. Obtener la muestra,
en lo posible, antes de la administracin de antimicrobianos. 7.
Rotular correctamente. 8. Enviar lo antes posible. 9. Examinar
estado de la muestra al recibirla.
Consideraciones Especficas De la orden: - Paciente: nombre,
sexo, edad, sala y cama, direccin, historia clnica - Mdico: nombre,
domicilio y telfono - Material: tipo, fecha y hora de extraccin -
Informacin clnica: diagnstico y tratamiento Del medio: -
Ambulatorio u hospitalizado - Reinternaciones o derivaciones de
otros centros De la tcnica: - Momento de la toma (antibiticos,
anestsicos tpicos, etc.) - Toma del material
La frecuencia con la cual son aislados contaminantes mide la
calidad de la recoleccin de la muestra"
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- Almacenamiento y transporte de la muestra - Demoras en el
procesamiento - Seleccin de medios de cultivo - Errores de
interpretacin De la recepcin: Muestras que deben recibirse durante
las 24 hs:
- Lquidos de puncin - Vlvulas de derivacin de hidrocefalia -
Vlvulas cardacas - Lesiones abiertas o cerradas de piel y partes
blandas - Coprocultivos e investigacin de Vibrio cholerae -
Farngeos e Investigacin de C. diphteriae - Bsqueda de Clostridium
de gangrena gaseosa, etc. Muestras en las cuales puedan
establecerse horarios de recepcin: - Lquidos de drenaje - Biopsias
- Urocultivo - Esputo y aspiraciones bronquiales Muestras que deben
entregarse en forma inmediata a su extraccin:
- Cepillado bronquial con catter protegido - Lavado
broncoalveolar - Sangre para lisis-centrifugacin - Lquido
cefalorraqudeo - Biopsia para investigacin de Helicobacter pylori -
Investigacin de Clostridium difficile - Investigacin de
Corynebacterium diphteriae - Ulceras de crnea - Muestras para
investigacin de gangrena gaseosa - Primer chorro miccional - Lavado
gstrico para Bsqueda de Mycobacterias
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CONSERVACION DE MUESTRAS a) Bacteriologa General
Estufa y/o Bao 35C 9 Hemocultivo Temperatura ambiente 9 Lquidos
de puncin 9 Materiales para investigacin anaerobios (TAB) 9 Primer
chorro miccional 9 Muestras en medios de transporte:
lesiones abiertas 9 Hisopados y/o punciones de lesiones cerradas
9 Exudados vaginales y uretrales 9 Oticos 9 Coprocultivos
Heladera 9 Punta de catter 9 Orina (chorro medio-Suprapbica-de
Sonda) 9 Esputo 9 Aspirado bronquial 9 Materia fecal sin medio de
transporte
9 Biopsia (excepto investigacin H. pylori) 9 Costras y
quemaduras sin medio de transporte b) Mycobacterias
Temperatura ambiente 9 Frotis para M. leprae
Heladera 9 Todas las muestras 9 Agregar 1 cc. de Agua destilada
(no Solucin Fisiolgica) a: Hisopado larngeo Biopsias Piezas de
ciruga 9 Neutralizar Lavado gstrico c) Micologa
Estufa y/o bao 35C 9 Hemocultivo
Temperatura ambiente 9 Muestras de piel y faneras
Heladera 9 Esputo 9 Lquidos de puncin 9 Materia fecal 9 Orina 9
Biopsias 9 Hisopados 9 Sangre para serologa
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uestras Clnicas para Investigacin de
Infecciones a travs del cultivo
A) Vas areas superiores:
Exudado faringeo Secreciones nasofarngeas Hisopado tico Puncin
timpnica
B) Vas areas inferiores:
1) Con tcnicas no invasivas: Esputo Aspirado traqueal
2) Con tcnicas invasiva:
a) A travs de la va area Puncin transtraqueal (PTT)
Broncoaspirado (BAS) Cepillado bronquial con catter protegido
(CP) Lavado broncoalveolar (BAL)
Biopsia transbronquial
b) Por va percutnea: Puncin transtorcica Biopsia pulmonar
3) Otras tcnicas:
Hemocultivo Puncin pleural Suero Orina
Hemocultivo Retrocultivo o hemocultivo central Catteres Vlvulas
cardacas Puncin Pericrdica
Material de abscesos Coprocultivo Hisopado rectal Lquido
duodenal Bsqueda de Microoroganismos especiales (Clostridium
difficile)
MM DD
EE LL AA
PP AARRAA T
T OO
RREE SS
PP IIRRAA T
T OORR I
I OO
CCAA R
RDD
II OO--
VV A
A SSCC
UULL AA
RRAA P
P AARR
AA TT OO
DD
II GGEE S
S TTII VV
OO
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Urocultivo por chorro medio Puncin de sonda vesical Puncin
suprapblica
Exudado uretral Exudado vaginal Primer chorro miccional Hisopado
de lesiones Aspirado de lesiones
Exudado conjuntival Ulcera de crnea Material de infecciones
intraoculares
Lesiones cerradas de piel y partes blandas Lesiones abiertas
Costras y quemaduras Biopsias Lquidos de drenaje Bsqueda de
microorganismos especiales
Lquido cefalorraqudeo Material de abscesos cerebrales Vlvulas
derivacin ventrculo atrial y ventrculo peritoneal
Pacientes: la muestra necesaria segn la zona afectada Ambiente
Personal
DDEE L
L TT RR
AA CC
TT OO
UURR
II NNAA R
R II OO
GG
EE NN
II TTAA L
L EESS
OO
CCUU
LL AARR
EE SS
MMUU
SS CC U
ULL OO
EE SS --
QQ
UUEE L
L EETT II
CCAA S
S SS I
I SSTT EE
MMAA
NNEE R
R VV II
OOSS O
O
CCEE N
N TT RR
AA LL
HHOO
SS PP II
TT AA--
LL AARR
II AASS
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EJEMPLOS DE TOMAS DE MUESTRAS MS IMPORTANTES EN INFECCIONES
HOSPITALARIAS
HEMOCULTIVO - CATETERES Y OTROS
HEMOCULTIVOS (SANGRE) Elementos necesarios: - Delantal o
camisoln, barbijo y guantes descartables - Jeringas y agujas
estriles, descartables - Gasa estril - Iodo podivona al 10% u otro
desinfectante efectivo - Alcohol 70o - Frascos para la recoleccin
de la muestra - Agua, jabn y lavandina - Bolsita para transporte -
Descartador de agujas y bolsa de residuos Instrucciones:
Actividades previas: - Preparar todos los elementos necesarios y
revisar la orden - Lavarse las manos con agua y jabn y secarse con
gasa estril o toalla descartable - Quitar la tapa protectora del
frasco y desinfectar con iodo povidona - Lavar la piel del paciente
con agua y jabn y secar con gasa estril (variante: desinfectar con
alcohol 70o) - Colocar el lazo, palpar la vena a punzar -
Desinfectar la piel con iodo povidona, con movimientos circulares
del centro hacia afuera NO VOLVER A PALPAR LA VENA Toma de muestra:
El operador antes de comenzar la tarea deber colocarse camisoln,
barbijo y guantes Punzar la vena seleccionada y extraer sangre, la
cantidad depender del tipo de frasco
a utilizar, en general se usa en dilucin al 10%. SI SE PIERDE LA
VENA DEBE DESINFECTARSE NUEVAMENTE LA PIEL. UNA VEZ SELECCIONADA LA
NUEVA VENA USAR JERINGA Y AGUJAS NUEVAS Inclinar el frasco antes de
colocar la sangre para evitar reflujo Inocular la sangre y
homogeneizar por rotacin para evitar la coagulacin Descartar el
material utilizado, desinfectar sector con lavandina, quitarse
guantes y
barbijo y colocar todo en la bolsa de residuos Rotular la
muestra y colocarla en la bolsa de transporte Remitir al
laboratorio
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OPTIMIZAR LA MUESTRA: Al ingreso:
Se toman dos o tres muestras, con intervalos segn el cuadro
clnico, por ej.: cuando la bacteriemia es continua el intervalo ser
de una hora, cuando es transitoria recoger preferentemente antes
del pico febril. En casos agudos y antes de medicar tomar dos o
tres muestras con intervalos de 15 minutos. Si ha recibido
antibiticos tomar la muestra en el valle (previo a siguiente dosis)
o antes de rotar la medicacin. Durante la internacin: Dos o tres
muestras cuando: empeoramiento del cuadro clnico - sospecha de
infeccin intrahospitalarias - antes de rotar el tratamiento emprico
- 48-72 hs. despus de terminado el esquema y con germen aislado 3)
Pacientes con catter: - Control del catter: una muestra a travs del
mismo - Sospecha de Infeccin: una muestra a travs del catter y una
perifrica En pediatra se extraen 5 cc. La primera muestra
inmediatamente antes de administrar el antibitico (valle). La
segunda muestra despus de administrar el antibitico, el momento
depende de la va de administracin, si es EV o IM a los 15 minutos y
oral a los 90 minutos. Rotular ambas muestras, indicando la
secuencia. NOTA: en caso de recibir ms de un antibitico, debern
coincidir en un momento del da y all se efectuar la toma.
CATETERES Elementos necesarios: - Delantal o camisoln, guantes y
barbijo descartable - Tubos estriles con tapa a rosca - Pinza y
tijeras estriles - Gasa estril - Iodo povidona 10% u otro
desinfectante efectivo - Alcohol 70 - Bolsa de transporte
Instrucciones: Desinfectar la piel con iodo povidona durante un
minuto. Retirar las conexiones del catter Con pinza estril retirar
el catter y cortar el extremo distal aproximadamente 3 cm.
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Colocarlo en el tubo, rotularlo, colocarlo en la bolsa de
transporte para ser enviado al laboratorio
Descartar los elementos y desinfectar el sector NOTA: cuando se
retire ms de un catter colocarlos en tubos diferentes e indicar su
ubicacin.
RETROCULTIVO
Se toman 5 ml. de sangre a travs del catter (retrocultivo) y 5
ml. de sangre de una vena perifrica para cultivo cuantitativo.
Colocarlos en tubos estriles heparinizados por separados. Enviar de
inmediato para su procesamiento conservndolo a temperatura ambiente
hasta su cultivo. CONEXION DE CATETER Y SISTEMA DE INFUSION
Realizar el hisopado del interior del dispositivo que conecta el
catter con el sistema de perfusin. Enviar en tubo seco y procesar
de inmediato.
VALVULAS CARDIACAS Colocarlas en forma asptica en un frasco de
boca ancha y colocar unas gotas de SF estril, para que no se seque.
Remitir inmediatamente al laboratorio. INVESTIGACION DE ANAEROBIOS:
Las mejores muestras son las obtenidas de cavidades cerradas a
travs de tejidos no
contaminados. La puncin debe realizarse con las precauciones de
asepsia de todas las punciones.
Una vez cargada la jeringa, se extraen las burbujas de aire y
muy cuidadosamente se introduce parte del material, aproximadamente
2 cc. en el recipiente de transporte tipo TAB y se remite al
laboratorio inmediatamente.
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MUESTRAS ANAEROBICAS
MUESTRAS
APTAS INADECUADAS
OCULARES P. HUMORES HISOPADO CONJUNTIVAL
VIAS AEREAS SUPERIORES
P. SENOS P. OIDO MEDIO P. PARAFARINGEA
HISOPADO SECRECION NASAL HISOPADO OTICO HISOPADO FAUCIAL
VIAS AEREAS INFERIORES
CEPILLO ENVAINADO PROTEGIDO P. PULMONAR P. PLEURAL
ESPUTO SECRECION TRAQUEAL SEC. BRONQUIAL L.B.A.
VIAS URINARIAS P. SUPRAPUBICA ORINA CHORRO MEDIO P. SONDA
VESICAL
PIEL Y PARTES BLANDAS
P. ABSCESOS P. CELULITIS BIOPSIAS
HISOPADO PIEL HISOPADO FISTULA DRENAJES
TUBO DIGESTIVO
(MAT. FECAL: C.DIFFICILE CULTIVO Y TOXINA)
CONT. GASTRICO HISOP. RECTAL/ANAL MAT. FECAL
TOCO-
GINECOLOGICAS
RESTOS FETALES R.PLACENTARIOS
HISOPADO VAGINAL
LIQUIDOS
NORMALMENTE ESTERILES
TODOS
P.: PUNCION L.B.A.: LAVADO BRONCO-ALVEOLAR P.T.T.: PUNCION
TRANSTRAQUEAL
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DE PUNCIONES- BIOPSIAS- PARTES BLANDAS
BIOPSIAS Si la lesin es grande o hay mltiples lesiones, obtener
distintos especmenes, colocados en recipientes estriles,
perfectamente rotulados. Debe remitirse una porcin de la pared del
absceso adems del pus. Enviar inmediatamente e indicar en la orden
las investigaciones que se solicitan y las prioridades si la
muestra es escasa. NO AGREGAR FIJADORES NI CONSERVADORES
LIQUIDOS DE PUNCION La toma de muestra la realiza el mdico con
tcnica asptica. Efectuada la puncin, el material es colocado en
tubos estriles con tres gotas de heparina para evitar su
coagulacin. Remitir inmediatamente al laboratorio. NO COLOCAR EN
HELADERA. En el caso de LCR si es posible no usar heparina.
INFECCIONES PURULENTAS Elementos necesarios:
- Hisopos estriles - Solucin fisiolgica estril - Jeringas y
agujas estriles - Tubos limpios y estriles 1) Lesiones cerradas de
piel y partes blandas (Erisipela, celulitis) Recoger la muestra por
PUNCION previa asepsia. Si se trata de flictenas o ampollas lavar
la piel con SF estril y punzar, si fluye material tomarlo, si no
fluye inyectar 0,2-0,5 ml. de SF estril y aspirar. Colocar en tubo
estril y remitirlo al laboratorio. En caso de bsqueda de anaerobios
o demoras en envo o procesamiento debe colocarse en un medio de
transporte y dejar a temperatura ambiente. 2) Lesiones abiertas
(Heridas, traumatismos) Lavar con SF estril para arrastrar la flora
transitoria y tomar la muestra con hisopo y/o jeringa. Enviar de
inmediato o colocar en medio de transporte.
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COSTRAS Y QUEMADURAS
Siendo el examen histolgico por biopsia de la herida el mtodo ms
seguro y confiable tanto para diferenciar la simple colonizacin
microbiana de tejidos no viables de la infeccin invasora de tejido
viable, como para establecer el diagnstico de infeccin invasora de
la quemadura. La biopsia debera tomarse del rea que muestre
hallazgos ms marcados de la infeccin de la quemadura y debe incluir
adems reas de tejido sano adyacente a la escara, tomando una
muestra de lenticular de 500 mg. (incluir tejido subcutneo viable
bajo la quemadura) usando bistur. Si para este procedimiento se va
a usar anestesia local, el agente anestsico se inyecta en la
periferia del sitio de biopsia para evitar la distorsin de la
morfologa del tejido. La mitad de la muestra debe ser cultivada
buscando identificar el agente y su sensibilidad a los antibiticos.
La otra mitad es procesada para estudio histopatolgico utilizando
una tcnica por congelamiento en menos de 30 minutos entre 3 o 4
horas por otros mtodos. Tcnicas para cultivo:
- Limpiar superficie con alcohol 70% isoproplico. - Obtencin
biopsia con bistur. - Transporte en tubo estril. - Sumergir en
alcohol, secar y flamear el espcimen - Colocar en agar tioglicato
en dilucin 1:10. - El espcimen se homogeiniza y se hacen diluciones
progresiva en el
tioglicolato. - Cada dilucin es colocada en un medio nutriente
(agar sangre). - Incubacin - Tipificacin del germen por las tcnicas
habituales.
VALVULAS DE DERIVACION DE HIDROCEFALIA
Colocar en frasco estril y remitir de inmediato al
laboratorio.
PROTESIS OSTEOARTICULARES Realizar cultivo de lquido sinovial o
material seo. Remitir rpidamente al
laboratorio. PUNCION ARTICULAR, PERICARDICA, PERITONEAL
Desinfectar con alcohol y una solucin de iodopovidona al 10%.
Realizar aspiracin percutnea con jeringa. Expulsar el aire de la
jeringa e inocular la muestra dentro de un sistema de transporte
anaerbico. Tambin se colocar una parte la muestra en un tubo estril
con tapa a rosca.
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iagnstico Micolgico El diagnstico de una micosis profunda se
puede establecer generalmente por el anlisis del esputo u otros
materiales, aunque a veces este tipo de investigaciones (examen
directo, cultivo, etc.) permanece negativo y la enfermedad es
revelada por una sintomatologa ms o menos caracterstica, acompaada
o no de signos radiolgicos y pruebas inmunolgicas positivas
(serologas, intradermorreacciones, etc.). ESPUTO:
La toma de muestra se hace de la misma manera que para grmenes
comunes. Se recogern como mnimo dos expectoraciones, por la
contaminacin ambiental.
BRONCOASPIRACION:
Cuando el paciente no puede emitir la muestra en forma
espontnea, puede utilizarse esta tcnica usando broncoscopio o
fibroscopio estril. Colocando el material aspirado en frasco
estril.
PUNCION TRANSTRAQUEAL:
De emplearse esta tcnica debe informarse al laboratorista, ya
que la muestra obtenida por este mtodo requiere ciertas variantes
en su procesamiento.
EN TODOS LOS CASOS DE LAS MUESTRAS QUE SE DETALLAN A
CONTINUACION SEGUIR LAS INSTRUCCIONES DETALLADAS EN GERMENES
COMUNES Y MICOBACTERIAS.
LIQUIDOS DE PUNCION:
Sangre para Lisis-centrifugacin, Lquido cefalorraqudeo, Lquido
de puncin pleural y otros.
5) ORINAS: Chorro medio, suprapbica, etc. 6) EXUDADO VAGINAL 7)
MATERIAL DE EXERESIS Y BIOPSIAS EN GENERAL 8) INFECCIONES
PURULENTAS:
El material purulento se toma con hisopos, jeringas o pipetas
estriles, si las lesiones son ulcerosas de piel o mucosas, se
limpia con SF estril y con bistur se recoge el material, raspando
los bordes de la lesin.
9) MATERIA FECAL:
Para conteo de Cndida o Mucormicosis, se recolecta en frasco
estril una cucharada de materia fecal seleccionando las zonas
purulentas o sanguinolentas. Cerrar perfectamente el recipiente y
remitir al laboratorio o conservar en heladera.
DD
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10) PIEL Y FANERAS: Se higieniza localmente con agua y jabn y en
caso necesario se desengrasa con alcohol isoproplico con la ayuda
de gasa o algodn. Se toma la muestra con bistur, lanceta o pinza,
especialmente de los bordes de la lesin, los pelos rotos y las uas.
Se envan al laboratorio en pequeos frascos de vidrio estril, entre
porta y cubreobjetos o en sobre hechos con papel limpio
(preferentemente blanco).
11) SANGRE PARA ESTUDIOS INMUNOSEROLOGICOS:
Extraer 8-10 cc. de sangre sin anticoagulante. Quitar la aguja y
descargar la sangre en tubo estril, deslizando suavemente el mbolo
de la jeringa para evitar hemlisis.
Remitir al laboratorio, donde se separa el suero y puede
conservarse refrigerado. Se pueden agregar conservadores. Momento
de solicitud examen micolgico: Cuando se informan dos baciloscopas
negativas, antes o despus del tratamiento especfico. Cuando se
informan dos esputos con flora bacteriana normal o grmenes que no
son responsables, segn criterio mdico. Cuando al paciente le fue
diagnosticada una micosis y se realizan pruebas de control. En
casos graves se pueden exceptuar las recomendaciones anteriores e
informar al microbilogo la importancia de tal circunstancia.
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DIAGNOSTICO VIROLOGICO MUESTRAS BIOLOGICAS (*) PARA ESTUDIO
SEGUN SINDROME CLINICO
O SISTEMA AFECTADO Y AGENTES ETIOLOGICOS MAS COMUNES (*) En
negrita las muestras ms tiles para cada estudio
SINDROME CLINICO y/o
SISTEMA AFECTADO
AGENTES
MAS COMUNES
MUESTRAS
BIOLOGICAS
ADENOVIRUS ANF, SUERO ENTEROVIRUS MF, HF, SUERO EPSTEIN-BARR
HERPES HUMANO 6 PARVOVIRUS B19
SUERO
RUBEOLA SUERO
EXANTEMATICO MORBILIFORME
SARAMPION SUERO, ANF, ORINA HERPES HV, SUERO
EXANTEMATICO VESICULAR VARICELA-ZOSTER SUERO, HV
CITOMEGALOVIRUS SANGRE, ORINA, SUERO
DE MADRE E HIJO HIV SUERO, SANGRE
HERPES SIMPLEX
SUERO DE MADRE E HIJO, HISOPADO
CERVICOVAGINAL DE MADRE, LCR DEL HIJO
VARICELA-ZOSTER SUERO, HV HEPATITIS B
PARVOVIRUS B19 RUBEOLA
SUERO
CONGENITAS Y PERINATALES
CITOMEGALOVIRUS ORINA, H DE LESIONES
PAPILOMA VIRUS H CERVICOVAGINAL
TEJIDOS CEPILLADO URETRAL TRACTO GENITAL HERPES SIMPLEX
HV, TEJIDO
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ormatizacin de Toma, Envo y Traslado de la Muestra de Sangre
Toma de muestra - Enfermo en ayunas durante un mnimo de 8 horas
- Extraccin de sangre con material descartable - Separar el suero
sobrenadante. Debe excluirse suero lipmico o con hemlisis intensa -
Envasar en recipiente de cierre hermtico con rtulo identificatorio
y fecha de extraccin escrito con lpiz. Conservacin: Si el suero es
procesado in situ y dentro de las 48 hs. se conserva en heladera a
temperatura entre 2 y 8 C; pero si es derivado, congelar y
transportar en recipientes trmicos apropiados con material
refrigerante. La cantidad de suero enviado no debe ser menor de 2
ml., guardar una alicuota en freezer. Se debe completar la Ficha
para el Laboratorio como requisito previo, que justifique el
estudio, de lo contrario no se dar curso al pedido. Dicha ficha
debe insertarse entre el recipiente externo y el recipiente trmico.
El envase transportador ser enviado por personal debidamente
acreditado y caratulado con el sello, smbolo y rtulo de sustancia
infecciosa, fecha, posicin del envase, telfono del destinatario y
remitente. Identificacin de la muestra (Ejemplo) Debern indicarse
con letras maysculas la inicial de/los apellido/s y nombre/s y a
continuacin la fecha de nacimiento colocando los dos dgitos
correspondientes al da, mes y ao.
ENVIO, CONSERVACION Y TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS DE LOS
RECIPIENTES:
El laboratorio deber disponer de recipientes apropiados para
colocar los diferentes materiales:
Tubos de vidrio o plstico limpios y estriles
NN
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Tubos de vidrio o plstico con hisopos estriles Recipientes de
boca ancha Frascos de hemocultivo Recipientes con medio de
transporte: Cary Blair Stuart Tipo TAB para anaerobios NOTA: no
remitir muestras en jeringas
Es preferible el procesamiento inmediato del material, an la
siembra al lado del paciente como en lceras de crnea. De no ser
posible, es necesaria la conservacin para lo cual existen una serie
de requisitos de medios y temperaturas para evitar la prdida de
microorganismos.
En el caso de lquidos de puncin, biopsias y otras muestras
importantes, se debe avisar al laboratorio para que haya alguien
disponible que lo procese de inmediato, sobre todo cuando la
cantidad es muy escasa.
Los recipientes deben mantenerse en posicin vertical con el tapn
hacia arriba, para evitar la contaminacin o derrame del material.
Ningn antimicrobiano, antisptico o conservador debe entrar en
contacto con la muestra.
Las muestras, correctamente rotuladas, se remitirn en
condiciones que eviten la contaminacin exterior de los envases y
evitando derrames. Es conveniente colocarlas en bolsas de
polietileno, cerradas.
Se adjuntar la solicitud con todos los datos requeridos en
letra
legible y por fuera de la bolsa de transporte. Con respecto a
los horarios cada Laboratorio lo establecer de acuerdo a sus
disponibilidades pero sin olvidar la urgencia de ciertas
muestras.
DDEE L
L TT
RRAA
NNSS P
P OO
RRTT E
E
DDEE
LLAA
CCOO
NNSS E
E RRVV
AACC
II OONN
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ormas de Bioseguridad
La manipulacin, el transporte y el envo de muestras
indebidamente embaladas entraan un riesgo de infeccin para todas
las personas que intervienen directamente o entran en contacto con
cualquier parte del proceso. La manipulacin incorrecta dentro del
laboratorio pone en peligro no solo a los trabajadores
inmediatamente afectados sino tambin al personal administrativo o
de secretaria y a otros auxiliares. El transporte de muestras entre
laboratorios e instituciones extiende el riesgo al pblico y al
personal de los servicios de transporte y de correos.
Transporte de muestras: Normas Generales
1. Los recipientes para las muestras deben ser de plstico o
vidrio irrompible y hermticos. Es preferible que estn provistos de
tapn de rosca.
2. Una vez cerrado y sellado el recipiente, debe limpiarse con
desinfectante - solucin de hipoclorito con 0,1% de cloro libre (1
g/litro, 1000 ppm)- y debe secarse.
3. Cuando se recibe una muestra, antes de abrir el recipiente es
preciso limpiarlo con desinfectante, como se acaba de sealar.
4. Dentro de la institucin sanitaria y del laboratorio, los
recipientes de muestras se colocarn en gradillas para mantenerlos
en posicin vertical. Las gradillas se transportarn a sus vez en
recipientes hermticos de plstico o metal que retengan las fugas o
derrames accidentales.
5. Los recipientes de muestras en gradillas que se transporten
desde los puntos de recogida sobre el terreno o de un laboratorio a
otro en vehculos controlados por los laboratorios, deben colocarse
en cajas estancas de plstico o metal con tapas seguras y que
cierren bien.
6. En las zonas que no dispongan de un suministro elctrico
fiable, puede ser necesario transportar y almacenar las muestras en
tanques de nitrgeno lquido con tiempos de conservacin largos.
Acarreo de muestras por los medios de transporte pblicos El
Comit de Expertos de las Naciones Unidas en Transporte de Mercancas
Peligrosas, la Asociacin de Transporte Areo Internacional (IATA),
la Unin Postal Universal (UPU), la Organizacin de Aviacin Civil
Internacional (OACI) y la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) han
formulado normas para el acarreo de muestras por correo, va area y
otros medios de transporte comunes, las cuales pueden resumirse
como sigue:
NN TT R
RAA
NNSS
PPOO
RRTT E
E DD
EE MM
UUEE S
S TTRR
AASS
-- NN
OORR
MMAA S
S GG
EE NNEE RR
AA LL EE
SS
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1. La muestra se colocar en un receptculo estanco de vidrio o
plstico de buena calidad, el cual se cerrar hermticamente para
impedir fugas. Los tapones de rosca o de presin, como los corchos,
se sujetarn con alambre, cinta adhesiva u otro material seguro.
2. El recipiente de la muestra (receptculo primario) se envolver
en material absorbente (por ej.: toallas de papel o de tela, algodn
hidrfilo, guata de celulosa) en cantidad suficiente para absorber
todo el lquido en caso de derrame.
3. El recipiente de la muestra bien envuelto se colocar en un
recipiente resistente y estanco (receptculo secundario) pueden
ponerse en este varias muestras envueltas. Hay que usar material
absorbente (adems del mencionado en el prrafo 2) en cantidad
suficiente para rellenar los huecos que queden entre los
recipientes de muestras.
4. El receptculo secundario se embalar con material bastante
slido para proteger el contenido de posibles daos durante el
traslado.
5. Antes de despachar las muestras, el remitente, el
transportista y el laboratorio destinatario, habrn hecho los
trmites necesarios para el envo, la recogida, etc.
6. Todos los formularios con datos sobre las muestras, cartas y
otra informacin impresa que sirva para identificarlas o
describirlas irn pegados por la parte exterior del receptculo
secundario.
7. Hay que observar todas las normas nacionales e
internacionales de envo y transporte.
RECUERDE
Cuando se enve una muestra fuera del laboratorio, debentomarse
precauciones especiales para mantenerla en ptimascondiciones
durante su transporte, as como para evitar la rotura desu envase,
con el consiguiente riesgo de contaminacin.
AACC
AARR
RREE O
O DD
EE MM
UUEE S
S TT RR
AASS
PPOO
RR LL
OOSS
MMEE D
DII OO
SS DD
EE
TT RR
AANN
SS PP O
ORR
TT EE
PP
BBLL II
CCOO
SS
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Vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos
Red WHONET Argentina: Perodo 1994-1998
Marcelo Galas, Alejandra Corso, Marta Tokumoto, Uiana Guelfand *
y Alicia Rossi La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) ha
desarrollado un programa de vigilancia de la resistencia a los
antimicrobianos denominado WHONET. Uno de los principales objetivos
es facilitar los estudios de prevalencia de la resistencia
bacteriana en cada unidad hospitalaria. La creacin de redes de
laboratorio permite vigilar la diseminacin de los distintos
perfiles de resistencia. Utilizando un programa informtico nico
para el tratamiento de datos es posible establecer tendencias
regionales, detectar resistencias inusuales y aportar bases
nacionales para el uso de antimicrobianos. En Argentina el
ServicioAntimicrobianos (ATB) perteneciente al Departamento de
Bacteriologa del Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas
(INEI) ANLIS "Dr. C. G. Malbrn" ha convocado a la formacin de una
red de laboratorios que originalmente estaba compuesta por centros
de la Capital Federal pero que a partir de 1994 se ha extendido a
la mayor parte del territorio nacional. Actualmente participan 33
centros hospitalarios representativos de las diferentes regiones
del pas (ver mapa). Esta red permite obtener datos a nivel nacional
y constituye un verdadero sistema de vigilancia de la resistencia a
los antimicrobianos.
Estos laboratorios estn integrados al programa nacional de
control de calidad externo en Bacteriologa organizado por el INEI y
el Ministerio de Salud y Accin Social de la Provincia de Buenos
Aires. La coordinacin es realizada por el Servicio ATB del
Departamento de Bacteriologa del I.NEI ANLIS "Dr. Carlos G. Malbrn"
con el apoyo de un Comit Colaborador formado por reconocidos
microbilogos. Este programa remite a los participantes dos
encuestas al ao, cada una con tres aislamientos bacterianos, que
deben ser caracterizados bioqumicamente y determinada su
sensibilidad a los antimicrobianos; luego cada participante recibe
un anlisis de los resultados de la encuesta, con las posibles
fuentes de error correspondientes, se remiten adems recomendaciones
internacionales actualizadas para la interpretacin de las pruebas
de sensibilidad a los antimicrobianos y boletines de actualizacin
bibliogrfica en espaol sobre temas de microbiologa clnica.
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Lectura Recomendada Diagnstico Microbiolgico Clnico: Mdulo 1 -
Federacin Bioqumica de la Provincia de Santa Fe Manual de
Procedimientos y Control de Calidad - Marcelo Galas - Paola Ceriana
Servicio Antimicrobianos - Departamento Bacteriologa - INEI - ANLIS
"Carlos G. Malbrn" Manual de Procedimientos de laboratorio para
recoleccin, conservacin y transporte de muestras para diagnstico
microbiolgico. Jorge Malaespina, Hayde Dominguez, Beatriz Guerrero,
Leonora Kozubsky, et al. 1997.
ibliografa
Basualdo J. A., Coto C:E:, De Torres A. - Microbiologa Biomdica
- Ed. Atlante Ao 1996
Balows A., Llausler Jr., et al (cols) 1991. Manual of clinical
microbiology 5Th ed. American Society for microbiology. Washington
D.C. Delgato Iribarren A., Menchero Pieto S., Ed. Interamericana -
Mc Graw - Hill - 1994 Dejawetz E., Melnick J, Adelberg E.-
Microbiologa Mdica 14 Edicin - Editorial Manuel Moturno - 1992
Diagnstico Microbiolgico Clnico: Mdulo 1 - Federacin Bioqumica de
la Provincia de Santa Fe Instructivo para el envo de muestras y
materiales infecciosos - Departamento de Bacteriologa - INEI -
ANLIS "Carlos G. Malbrn" - Buenos Aires, Ao 2000 Manual de
Procedimientos y Control de Calidad - Marcelo Galas - Paola Ceriana
Servicio Antimicrobianos - Departamento Bacteriologa - INEI - ANLIS
"Carlos G. Malbrn" Manual de Procedimientos de laboratorio para
recoleccin, conservacin y transporte de muestras para diagnstico
microbiolgico. Jorge Malaespina, Hayde Dominguez, Beatriz Guerrero,
Leonora Kozubsky, et al. 1997.
Vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos - Red WHONET
Argentina: Perodo 1994-1998 - Marcelo Galas, Alejandra Corso, Marta
Tokumoto, Uiana Guelfand * y Alicia Rossi Zinsser - Microbiologa -
Ed. Mdica Panamericana - 1994
BB
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32
ANEXO 1
DATOS QUE DEBEN CONSIGNARSE CON EL ENVIO DE CEPAS O
ESPECIMENES
Institucin que remite
....................................................................................................................................
Direccin........................................................................................................................................................
Tel
..............................................................................
Fax
...........................................................................
E-mail
............................................................................................................................................................
Nombre del responsable del envo
................................................................................................................
Profesional a quien debe enviarse el resultado
.............................................................................................
Origen: Humano Animal Alimento Otros Humano Nombre del paciente
/ N Muestra
...............................................................................................................
Edad
..................................................................
Fecha de inicio de los sntomas
............/............../..........
Breve resumen del cuadro clnico
................................................................................................................
.......................................................................................................................................................................
Tratamiento suministrado (antibitico y tiempo de duracin)
.......................................................................
.......................................................................................................................................................................
Tipo de muestra Aislamiento Especimen Cul
.....................................................................
Sospecha de brote Si No Intrahospitalario Comunidad Animal N
Muestra
...................................................................................................................................................
Especie
........................................................................................................................................................
Sano Enfermo Especificar
...............................................................
Tipo de muestra Aislamiento Especimen Cul
..................................................................
Sospecha de brote Si No Alimento N Muestra
....................................................................................................................................................
Tipo de muestra Aislamiento Especimen Cul
..................................................................
Sospecha de brote Si No
Otros (aclarar cules)
..................................................................................................................................
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Tipo de muestra Aislamiento Especimen Cul
..................................................................
ANEXO 2
FORMULARIO PARA SOLICITUD DE TOMA DE MUESTRA
Fecha:........................... Apellido y Nombres
...................................................................................................
Edad .............. Sexo: M..... F...... H. Cl. N
.................................... Ambulatorio ..................
Internado ................. Sala ................... Cama
.................... Material
....................................................................................................................
Estudios solicitados: Bacteriolgico ..................... Micolgico
........................ Virolgico ...........................
Serolgico ....................... Otros
..............................................................................
Mtodos: Directo ................ Cultivo ...................
Antibiograma .................................. Otros
........................................................................................................
Antecedentes:
Estudios anteriores: SI NO Tratamiento Antibitico: SI NO
Cul:............................
Otros:................................................................................................
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Postulados de Koch 1. La bacteria se encontrar en todos los
casos de la enfermedad.
2. La bacteria se aislar de las lesiones de la persona infectada
y se mantendr en cultivo puro. 3. El cultivo puro, inoculado en un
hombre voluntario o en un animal de experimentacin susceptible,
debe reproducir la enfermedad. 4. La misma bacteria se aislar en
cultivo puro del animal o humano voluntariamente infectado.
Postulados de Falkow 1. El gen estar en las bacterias causantes
de enfermedad y
no estar en las avirulentas. Si se encuentra, se podra mutar a
formas menos virulentas o no expresarse.
2. La eliminacin del gen de la cepa virulenta reduce su
virulencia. La introduccin del gen clonado en una cepa avirulenta
la volver virulenta. 3. Se podr demostrar que la bacteria expresa
el gen en animales o voluntarios humanos en algn punto del proceso
infeccioso. 4. Los anticuerpos contra el producto codificado por el
gen sern protectores, o en el caso de que la respuesta sea mediada
por clulas, el producto dar lugar a inmunidad protectora.
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