24/02/2012 1 Unidade II: Síntese de Proteínas Disciplina: Biologia Molecular Centro de Ciências da Saúde Docente: Profa. Dra. Marilanda Ferreira Bellini Pró-Reitoria de Pesquisa e de Pós-graduação – Bloco L E-mail: [email protected]Valor C • Valor C = quantidade de DNA no núcleo – Haplóides: n = C – Diplóides: 2n = 2C • Células somáticas: 2n = 2C • Gametas: n = C • Célula em mitose (Intérfase S – Anáfase) = 2n = 4C • Célula em mitose (final de Telófase) = 2n = 2C • Células em meiose (Intérfase S – Anáfase I) = 2n = 4C • Células em meiose (final de Telófase I – Anáfase II) n = 2C • Células em meiose (final de Telófase II) = n = C Ciclo Celular • Processos que ocorrem desde a formação de uma célula até sua própria divisão em células filhas; M Mitose ou Meiose Ciclo Celular Etapas • Prófase • Metáfase • Anáfase • Telófase Meiose • Prófase I • Metáfase I • Anáfase I • Telófase I Mitose • Prófase II • Metáfase II • Anáfase II • Telófase II Intérfase G0 G1 S G2 M Mitose ou Meiose Intérfase Cromossomos distendidos e metabolicamente ativos = Cromatina Intérfase Células totalmente diferenciadas • G0: (2n = 2C) • Fase estacionária; • Não proliferativa; Indefinidamente em intérfase.
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Mitose ou Meiose UnidadeII: Síntesede Proteínas · Mitose ou Meiose. 24/02/2012 7 Quiz: Mafalda, a eterna questionadora das tirinhas de quadrinhos, surpreende os leitores com a
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Unidade II:Síntese de Proteínas
Disciplina: Biologia MolecularCentro de Ciências da SaúdeDocente: Profa. Dra. Marilanda Ferreira Bellini
Pró-Reitoria de Pesquisa e de Pós-graduação – Bloco LE-mail: [email protected]
Valor C
• Valor C = quantidade de DNA no núcleo
– Haplóides: n = C
– Diplóides: 2n = 2C
• Células somáticas: 2n = 2C
• Gametas: n = C
• Célula em mitose (Intérfase S – Anáfase) = 2n = 4C
• Célula em mitose (final de Telófase) = 2n = 2C
• Células em meiose (Intérfase S – Anáfase I) = 2n = 4C
• Células em meiose (final de Telófase I – Anáfase II) n = 2C
• Células em meiose (final de Telófase II) = n = C
Ciclo Celular
• Processos que ocorrem desde a formação de uma célula até sua própria divisão em células filhas;
M
Mitose
ou
Meiose
Ciclo Celular
Etapas
• Prófase
• Metáfase
• Anáfase
• Telófase
Meiose
• Prófase I
• Metáfase I
• Anáfase I
• Telófase I
Mitose
• Prófase II
• Metáfase II
• Anáfase II
• Telófase II
IntérfaseG0G1SG2
M
Mitose ou Meiose
IntérfaseCromossomos distendidos e metabolicamente ativos
= Cromatina
Intérfase
Células totalmente
diferenciadas
• G0: (2n = 2C)
• Faseestacionária;
• Nãoproliferativa;
Indefinidamenteem intérfase.
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Intérfase
• G1: (2n = 2C)
– G (Gap) = Intervalo
S (Síntese DNA) e M
Intérfase
• G1:
– G (Gap) = Intervalo
S (Síntese DNA) e M
• Síntese de proteínasque atuam na fase S;
– Ex: DNA polimerases, primase, helicase, topoisomerase
Intérfase
• G1: (2n=2C)
– G (Gap) = Intervalo
– S (Síntese DNA) e M
• Síntese de proteínasque atuam na fase S;• Ex: DNA polimerases,
primase, helicase, topoisomerase
• Síntese de RNA;
RNA (Ribonucleic Acid)Polímero de nucleotídeos, em
extremamente variável, para atender às suasnecessidades.
TRANSCRIÇÃOCaracterísticas Gerais: Fita DNA Molde (3’ � 5’)
RNA
Complementar a Fita Molde de DNA
Semelhante a fita de DNA não-molde
A=U
•Antiparalelismo
•Síntese 5’� 3’
RNA polimerasesProteínas DNAmRNA. Ligam-se e Processam
Síntese
RNA polimerasesProteínas DNAmRNA. Ligam-se e Processam
Síntese
•RNA-polimerase (RNApol):•Não necessita de iniciador (primer)• Funções
�reconhecem sequências específicas de DNA e se ligam a elas�desnaturam DNA � expõem a seqüência de nucleotídeos a ser copiada�mantém estável a dupla fita aberta�mantém estável fita híbrida �DNA:RNA�terminam síntese�restauram DNA � imediatamente após à da síntese
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RNA POLIMERASERNA polimerase específica � síntese de RNAs específicos:
Tipo Localização Sintetiza
RNA pol I Nucléolo RNA Ribossômico (rRNA)
RNA pol II Nucleoplasma RNA mensageiro (mRNA)
RNA pol III Nucleoplasma RNA transportador (tRNA)
MOLÉCULAS DE RNA
• RNA mensageiro
•carrega a informação copiada do DNA sob a forma deinúmeros triplets (trincas) cada um especificando umaminoácido.
• RNA transportador
•decifra o código representado pelo mRNA.
• RNA ribossômico
•associa-se com uma série de proteínas para formar osribossomos.
RIBOSSOMOS
Complexo RNA-proteína
Direciona o crescimento da cadeia polipeptídica
Move-se ao longo da cadeia de mRNA
TranscriçãoEtapas:Etapas:Etapas:Etapas:1.1.1.1. Início:Início:Início:Início:2.2.2.2. Alongamento:Alongamento:Alongamento:Alongamento:3.3.3.3. Término: Término: Término: Término: TranscriçãoEtapas:Etapas:Etapas:Etapas:1.1.1.1. Início: Início: Início: Início: ligação do complexo de iniciação e da ligação do complexo de iniciação e da ligação do complexo de iniciação e da ligação do complexo de iniciação e da RNA polimerase à região promotoraRNA polimerase à região promotoraRNA polimerase à região promotoraRNA polimerase à região promotora2. Alongamento:2. Alongamento:2. Alongamento:2. Alongamento:3. Término: 3. Término: 3. Término: 3. Término:
-50 -30 -10 +10 +30
+1
•Seqüências PROMOTORAS � início da síntese
• elementos promotores: seqüências de 100 a 200 nucleotídeospróximos ao sítio de início da transcrição (-30) que possuemseqüências consenso TATAAAA denominadas “TATA box”.
• TF = fator de transcrição
TranscriçãoInício (mRNA)
5’ 3’
ATATTTTTATAAAA
3’ 5’Fita molde
Fita não-molde
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-50 -30 -10 +10 +30
+1
1 ) TFIID = Liga-se a TATA Box
TBP + proteinas associadas
TranscriçãoInício (mRNA)
TBP
5’ 3’
ATATTTTTATAAAA
3’ 5’Fita molde
Fita não-molde
-50 -30 -10 +10 +30
+1
1) TFIID = Liga-se a TATA Box
TBP + proteinas associadas
2 ) TFIIA
TranscriçãoInício (mRNA)
5’ 3’
TBP
ATATTTTTATAAAA
TFIIA
3’ 5’Fita molde
Fita não-molde
-50 -30 -10 +10 +30
+1
1) TFIID = Liga-se a TATA Box
TBP + proteinas associadas
2 ) TFIIA
3) TFIIB
TranscriçãoInício (mRNA)
5’ 3’
TBP
ATATTTTTATAAAA
TFIIA
TFIIB3’ 5’Fita molde
Fita não-molde
-50 -30 -10 +10 +30
+1
1) TFIID = Liga-se a TATA Box
TBP + proteinas associadas
2 ) TFIIA
3) TFIIB
4) TFIIF = desespirilização do DNA
TranscriçãoInício (mRNA)
5’ 3’
TBP
ATATTTTTATAAAA
TFIIA
TFIIB
TFIIF
3’ 5’Fita molde
Fita não-molde
-50 -30 -10 +10 +30
+1
1) TFIID = Liga-se a TATA Box
TBP + proteinas associadas
2 ) TFIIA
3) TFIIB
4) TFIIF = desespirilização do DNA
5) RNA pol
TranscriçãoInício (mRNA)
5’ 3’
TBP
ATATTTTTATAAAA
TFIIA
TFIIB
RNA pol II
TFIIF
3’ 5’Fita molde
Fita não-molde
TranscriçãoInício (mRNA)
-50 -30 -10 +10 +30
+1
1) TFIID = Liga-se a TATA Box
TBP + proteinas associadas
2 )TFIIA
3) TFIIB
4) TFIIF = desespirilização do DNA
5) RNA polimerase II
6) TFIIE = se liga ao complexo de iniciação e ao DNA, após oponto de início da transcrição
5’ 3’
TBP
ATATTTTTATAAAA
TFIIA
TFIIB
RNA pol II
TFIIF
3’ 5’TFIIE
Fita molde
Fita não-molde
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TranscriçãoInício (mRNA)
-50 -30 -10 +10 +30
+1
1) TFIID = Liga-se a TATA Box
TBP + proteinas associadas
2 )TFIIA
3) TFIIB
4) TFIIF = desespirilização do DNA
5) RNA polimerase II
6) TFIIE = se liga ao complexo de iniciação e ao DNA, após oponto de início da transcrição
5’ 3’
TBP
ATATTTTTATAAAA
TFIIA
TFIIB
RNA pol II
TFIIF
3’ 5’TFIIE
Fita molde
Fita não-molde
TranscriçãoInício
-50 -30 -10 +10 +30
+1
Complexos de transcrição
Fator – Promotor
~
RNA polimerases (I, II e III)
+
Fatores específicos de cada enzima
� Ínicio da transcrição
5’ 3’
ATATTTTTATAAAA
RNA polimerase
3’ 5’Fita molde
Fita não-molde
TranscriçãoEtapas:Etapas:Etapas:Etapas:1.1.1.1. Início:Início:Início:Início:2.2.2.2. Alongamento:Alongamento:Alongamento:Alongamento:Adição de nucleotídeos à cadeia Adição de nucleotídeos à cadeia Adição de nucleotídeos à cadeia Adição de nucleotídeos à cadeia polipeptídica, complementando a fita polipeptídica, complementando a fita polipeptídica, complementando a fita polipeptídica, complementando a fita molde de DNA.molde de DNA.molde de DNA.molde de DNA.3. Término: 3. Término: 3. Término: 3. Término:
TranscriçãoAlongamento
-50 -30 -10 +10 +30
+1
5’ 3’
TBP
ATATTTTTATAAAA
TFIIA
TFIIB
RNA pol II
TFIIF
3’5’
TFIIE
Fita molde
Fita não-molde
Bolha de transcrição
ACGCTGTA
TGCGACAT
TTATTTAATAAA
TranscriçãoAlongamento
-50 -30 -10 +10 +30
+1
5’ 3’
TBP
ATATTTTTATAAAA
TFIIA
TFIIB
RNA pol II
TFIIF
3’5’
TFIIE
Fita molde
Fita não-molde
Bolha de transcrição
ACGCTGTA
TGCGACAT
UGCGA
5’ 3’
TTATTTAATAAA
TranscriçãoAlongamento
-50 -30 -10 +10 +30
+1
5’ 3’
TBP
ATATTTTTATAAAA
TFIIA
TFIIB
RNA pol II
TFIIF
3’5’
TFIIE
Fita molde
Fita não-molde
Bolha de transcrição
ACGCTGTA
TGCGACAT
UGCGACAU
5’ 3’
TTATTTAATAAA
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TranscriçãoAlongamento
-50 -30 -10 +10 +30
+1
Fita não-molde5’ 3’
TBP
ATATTTTTATAAAA
TFIIA
TFIIB
RNA pol II
TFIIF
3’5’
TFIIE
Fita molde
Bolha de transcrição
ACGCTGTA
TGCGACAT
TTATTTAATAAA
UGCGACAU
5’ 3’
CTTATTGAAUAAGAATAA
TranscriçãoAlongamento
-50 -30 -10 +10 +30
+1
5’
3’
TBP
ATATTTTTATAAAA
TFIIA
TFIIB
TFIIF
3’
5’
TFIIE
Fita molde
Fita não-molde
Bolha de transcrição
TTATTTAAUAAA
AATAAA
GTACGCTGCATGCGAC
Molécula de RNA precursor5’ 3’
TranscriçãoAlongamento
7 MG
-50 -30 -10 +10 +30
+1
5’
3’
TBP
ATATTTTTATAAAA
TFIIA
TFIIB
TFIIF
3’
5’
TFIIE
Fita molde
Fita não-molde
Bolha de transcrição
TTATTTAAUAAA
AATAAA
GTACGCTGCATGCGAC
Molécula de RNA precursor
7-metil-guanosinaInício da traduçãoProtege contra nucleases
5’ 3’
TranscriçãoEtapas:Etapas:Etapas:Etapas:1.1.1.1. Início:Início:Início:Início:2.2.2.2. Alongamento:Alongamento:Alongamento:Alongamento:3.3.3.3. Término:Término:Término:Término:Reconhecimento da sequência de término;Complexo de iniciação é desligado do DNA; RNApol é desligada do DNA;.As fitas do DNA são totalmente renaturadas;Adição de cauda de poli-A no RNA nascente. Transcrição