Métodos de estudo bioquímicos Werner Bessa Vieira.

Métodos de estudo bioquímicos

Werner Bessa Vieira

Quantitativo x Qualitativo

• A análise quantitativa estabelece padrões de comportamento que podem ser medidos por números.

• A análise qualitativa estabelece padrões que podem ser observáveis.

Colorimetria

• Processo utilizado para medir e analisar a composição da cor.

• Colorimetria é a ciência que estuda a medida das cores, e que desenvolve métodos para a quantificação da cor, ou seja para o desenvolvimento de valores numéricos da cor.

Cromatografia

• A cromatografia envolve uma série de processos de separação de misturas. A cromatografia acontece pela passagem de uma mistura através de duas fases: uma estacionária (fixa) e outra móvel. A grande variabilidade de combinações entre a fase móvel e estacionária faz com que a cromatografia tenha uma série de técnicas diferenciadas.

Espectrofotometria

• Os métodos espectroscópicos baseiam-se na absorção e/ou emissão de radiação

• electromagnética por muitas moléculas, quando os seus electrões se movimentam entre

• níveis energéticos. A espectrofotometria baseia-se na absorção da radiação nos

• comprimentos de onda entre o ultravioleta e o infravermelho.

● Espectros de absorção de diferentes substâncias (1: bacterioclorofila; 2: clorofila a; 3:clorofila b; 4: ficoeritrobilina; 5: beta-caroteno). A substância 1, por exemplo, absorve pouco na região do visível, logo deve ser praticamente incolor para os nossos olhos.

Eletroforese• Eletroforese –para separar e às vezes purificar

macromoléculas –proteínas e ácidos nucléicos –diferentes tamanhos, carga ou conformação.

• Quando moléculas são colocadas em um campo elétrico, migram para o pólo positivo ou negativo.Proteínas (carga líquida negativa oupositiva) e DNA sempre negativa (fosfato).

• Eletroforese ocorre dentro de uma matriz ou gelO gel ésubmerso em um tampão que possui íons para a corrente passar e também para manter o pH mais ou menos constante.