mantenimiento de microscopios

5/10/2018 mantenimiento de microscopios - slidepdf.com

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MANUAL DE FUNCIONAMIENTO Y

MANTENIMIENTO DEL MICROSCOPIO

UNIDAD DE LABORATORIOS

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INDICE

1. Objetivo2. Responsabilidad de aplicación y alcance3. Introducción4. Descripción

4.1 Descripción técnica4.2 Ubicación4.3 Partes del equipo

4.4 Funcionamiento4.5 Método de limpieza4.6 Mantenimiento4.7 Calibración4.8 Precauciones y otros datos de interés

5. Definiciones6. Registros






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1. OBJETIVO

Describir el funcionamiento y el mantenimiento del microscopio óptico.

2. RESPONSABILIDAD DE APLICACIÓN Y ALCANCE

La responsabilidad de aplicación y alcance de este procedimiento recae sobretodo el personal (estudiante y/o auxiliar) que proceda a observar cualquier muestra o elemento.

3. INTRODUCCIÓN

El microscopio es un equipo que consta de un juego de lentes que permiten laobservación de detalles que a simple vista no se pueden ver con el ojohumano. El microscopio es un instrumento de precisión conformado por subsistemas ópticos –lentes, filtros, prismas, condensadores-; mecánicos –elementos para controlar la posición de la muestra en el espacio tridimensionalX, Y, Z-; eléctricos –transformadores y sistemas de iluminación-, y electrónicos –cámaras, sistemas de televisión, etc.-, que interactúan entre sí para amplificar y controlar la formación de imágenes de objetos de tamaño reducido.

4. DESCRIPCIÓN (Grafica del equipo)

Figura No 1. Partes del microscopio (Imagen copiada del Manual de Mantenimiento de equipos de laboratorio OPS)






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Figura No 2 Esquema lateral del microscopio y sus componentes (Imagen copiada del Manual de Mantenimiento deequipos de laboratorio OPS)

4.1 Descripción técnica (ver figura 3)

Marca comercial (nombre, dirección y teléfonos): ____________ Proveedor: ____________ Nº Inventario: ____________ Fecha de entrada: ____________

4.2 Ubicación

4.2.1 Condiciones del Ambiente

1. Asegurarse que el ambiente o área en que se instale el microscopio estéprotegido de polvo y humedad. El ambiente ideal debe disponer de unsistema de aire acondicionado que garantice aire libre de polvo opartículas, control de humedad y control de temperatura de manerapermanente.

2. Verificar que el ambiente disponga de seguridad, y se encuentre alejadode lugares como pocetas de agua o donde se trabajen sustancias






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químicas que puedan salpicar y afectar el equipo. También se debenevitar sitios que tengan luz solar directa.

3. Verificar que el sitio de instalación cuente con una toma eléctrica en

buen estado, cuyo voltaje esté ajustado en magnitud y frecuencia conlos códigos y normas eléctricas y que resulte compatible con el delsistema de iluminación del microscopio.

4. Instalar el microscopio sobre una superficie nivelada de estructura rígida,bajo la cual exista espacio suficiente para que el usuario coloque suspiernas y como consecuencia pueda acercar el cuerpo hacia elmicroscopio y la cabeza hacia los oculares, sin forzar la columnavertebral.

5. Para facilitar la manipulación del microscopio, se debe contar con unasilla de altura variable, que le brinde un buen soporte lumbar; también sepuede proveer un apoyo para los pies al frente del sitio del trabajo, perono en la silla. El propósito es lograr que la columna vertebral esté lo mas

recta posible y se reduzca la flexión de los hombros y el cuello.6. Evitar que en sitios cercanos al lugar de instalación del microscopio haya

equipos que produzcan vibraciones como centrífugas o refrigeradores.7. Procurar no mover el microscopio de su sitio de instalación y con mayor

razón si el mismo se utiliza intensamente cada día.8. Cubrir el microscopio con un protector de polvo si no se usa por largos

períodos de tiempo. El protector puede ser de plástico o de tela que nosuelte pelusa.

9. En zonas de alta humedad guardar el microscopio durante la noche, enuna cabina provista de un bombillo de máximo 40 W, verificando quehayan orificios que permitan la ventilación del interior.

4.3 Partes del equipo

Figura No 3 Microscopio marca Olympus con cámara (Fotografía del microscopio utilizado en labores de postgrado einvestigación Laboratorio de Limnología)






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Las partes del microscopio están referenciadas en la siguiente tabla (figura 4) ycuyos componentes están especificados en las primeras figuras (figuras 1 y 2)

Figura No 4. Tabla de las partes del microscopio (Imagen copiada del Manual de Mantenimiento de equipos delaboratorio OPS)

4.4 Funcionamiento

Una fuente luminosa envía rayos de luz a una primera lente, llamada

condensador, que concentra los rayos de luz sobre el objeto a observar. Estosrayos atraviesan el objeto y una lente denominada objetivo da una imagenaumentada de este. Un segundo lente, el ocular, vuelve a aumentar la imagendada por el objetivo. Esta última imagen es la que será recibida por elobservador.






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EL AUMENTO DEL MICROSCOPIO

Tanto el objetivo como el ocular llevan marcados unos números, cada objetivolleva un numero diferente. Para saber con qué aumento (A) se esta observandose deben multiplicar los dos números.

A= aumento del objetivo x aumento del ocular

Ejemplo: si se utiliza el objetivo de 45 aumentos y un ocular de 10, el aumentode observación será de:

A= 45 x 10 = 450Con este aumento una célula de 50 µm (50 micras = 50 milésimas demilímetro) tendrá un tamaño aparente de:

50 µm x 450 = 22500 µm = 22`5 mmSe debe tener en cuenta que 1000 µm = 1 mm

MANEJO DEL MICROSCOPIO

1. Se debe sacar el microscopio de su embalaje con cuidado y colocarsefrente al observador, sobre una superficie plana y firme.

2. realizar una revisión general para ver cualquier anormalidad e informarlaa la persona encargada de los equipos.

3. conectar el microscopio a través de un estabilizador de voltaje, si elvoltaje de alimentación no es estable.

4. girar el revolver hasta situar el objetivo de menor aumento (el mas corto)en línea con el ocular.

5. accionando el tornillo macrométrico, se subirá la platina hasta el tope.

No forzar nunca ninguno de los elementos mecánicos.6. colocar la preparación sobre la platina y sujetarla con las pinzas. Debe

procurarse que el objeto a observar quede centrado.7. encender la luz mediante el interruptor.8. mirando por el ocular, cerrar el diafragma lo mas posible, accionando su

palanca en sentido contrario a las agujas del reloj. Debe observarse elcampo iluminado con una luz ni muy brillante ni demasiado tenue.

9. mirando por el ocular, accionar el mando de enfoque lentamente en elsentido de las agujas del reloj para hacer bajar la platina, alejando lapreparación del objetivo, hasta que el objeto se observe. Ajustar elenfoque mediante el tornillo micrométrico.

10. moviendo la preparación, buscar una zona de observación adecuada.11. para observar con un objetivo de mayor aumento, girar el revolver alobjetivo. Para enfocar, normalmente, será necesario girar unas pocasvueltas el tornillo micrométrico en un sentido o en el otro. Si el campo semuestra muy oscuro, abrir un poco el diafragma.






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MICRÓMETRO: para medir objetos que se observan en el campo visual de unmicroscopio se utiliza un micrómetro ocular. Este consiste de una placa decristal con una escala grabada, que se inserta en un ocular microscópico,

quedando la escala enfocada por encontrarse en el plano de la imagen realintermedia.

Es preferible contar con un ocular micrométrico con la placa permanentementeinstalada el cual reemplaza al ocular visual para hacer mediciones. Para mayor precisión se puede utilizar un tipo de ocular micrométrico que tiene una escalaexterior adicional en un tornillo micrométrico que en cada vuelta completadesplaza un trazo perpendicular un intervalo de la escala grabada.

Los micrómetros de platina son similares a una lámina portaobjetos y tienengrabadas escalas que representan medidas exactas y convencionales.Comúnmente se utiliza un micrómetro de platina cuya escala métrica es de un

milímetro (1000 micras), dividida en 10 unidades con 10 subunidades de 10micras cada una.

4.5 Método de limpieza

La limpieza del microscopio es una de las rutinas mas importantes y debeconsiderarse un procedimiento rutinario. Para realizar la rutina de limpiezase requiere lo siguiente:

Materiales:

1. Una pieza de tela limpia, de textura similar a la de los pañuelos.

2. Una botella de líquido para limpieza de lentes. Se consigue en lasópticas. Normalmente no afecta los recubrimientos de los lentes ytampoco afecta los pegantes o cementos utilizados para el montaje delos mismos. Entre los líquidos de limpieza más utilizados se encuentranel etil éter, el xileno y la gasolina blanca.

3. Papel para limpieza de lentes. Se consigue normalmente en las ópticas.Si no es posible conseguir este material, se puede sustituir con papelabsorbente suave o con algodón tipo medicinal. También puedeutilizarse un trozo de seda suave.

4. Una pieza de gamuza muy fina. Se puede conseguir en peletarias.5. Una pera de caucho para soplar aire. Se puede fabricar en el laboratorio

un dispositivo con este propósito, acoplando una pipeta tipo Pasteur, conla pera de caucho.6. Una cubierta plástica. Se utiliza para proteger el microscopio del

ambiente externo cuando no está en uso. También podría utilizarse unabolsa de tela de textura similar a la de los pañuelos.

7. Un pincel suave de pelo de camello o un pincel fino para pintura. Loimportante es que el pelo del pincel sea natural, de longitud uniforme,textura muy suave, esté seco y libre de grasa. En los almacenes que






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distribuyen artículos de fotografía, es posible conseguir este accesorio.También es posible encontrar un equivalente en tiendas especializadasen suministro de cosméticos.

8. Un paquete 250 g de material desecante (silica gel). Este material seutiliza para mantener controlada la humedad en la caja dealmacenamiento del microscopio, si la misma es hermética. Estematerial cambia de color cuando se encuentra saturado de humedad,aspecto que permite detectar si requiere ser sustituido o renovado.Cuando está en buen estado, por lo general es de color azul; cuando seencuentra saturado de humedad es de color rosado.

9. Bombillos y fusibles de repuesto. De la clase instalada por el fabricante oun equivalente de las mismas características del original.

4.6 Mantenimiento

Entre las rutinas más importantes para mantener un microscopio encondiciones adecuadas de operación, se encuentran las siguientes:

1. Verificar el ajuste de la plataforma mecánica. La misma debedesplazarse suavemente en todas las direcciones (X-Y) y debemantener la posición que selecciona o define el usuario.

2. Comprobar el ajuste del mecanismo de enfoque. El enfoque queselecciona el usuario debe mantenerse. No se debe variar la alturaasignada por el usuario.

3. Verificar el funcionamiento del diafragma.4. Limpiar todos los componentes mecánicos.5. Lubricar el microscopio de acuerdo a las recomendaciones del

fabricante.6. Confirmar el ajuste de la uña fijaláminas.7. Verificar el alineamiento óptico.

4.7 Calibración

Seguir las instrucciones del Manual del fabricante.

4.8 Precauciones y otros datos de interés

1. Los lentes no deben tocarse con los dedos y se debe procurar que el

objetivo no choque contra el objeto a observar, pues podría romperse oromper la preparación.

2. El diafragma debe estar lo mas cerrado posible, siempre y cuando lapreparación tenga la suficiente claridad, pues en caso contrario, elexceso de luz hará que los objetos a observar no se vean o estén pococontrastados.






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3. Evitar dejar el microscopio sin los oculares. Colocar los tapones sirequiere retirar los oculares para evitar el ingreso de polvo o partículas ala cabeza binocular.

4. No se debe enfocar subiendo la platina. Se enfoca con el macrométricoy cuando se observe la preparación se ajustará el enfoque con el tornillomicrométrico.

5. Evitar limpiar los componentes ópticos con etanol, debido a que esteliquido afecta los elementos ópticos. La platina y la base debenmantenerse lo mas limpia posible, pero no se debe utilizar xileno oacetona en esta actividad.

6. Utilizar las dos manos para levantar el microscopio. Con una manosostenerlo por el brazo y con la otra sostener su base.

7. Evitar tocar con los dedos la superficie de la bombilla cuando se cambia.Las huellas digitales disminuyen la intensidad lumínica.

8. No se debe fumar cerca del microscopio ya que los lentes puedencubrirse con una capa de material no combustible, mezclado conresiduos de carbón, lo que produce decoloración y un campo borroso.

9. Cuando se utilice aceite de inmersión con el objetivo de 100x no debenser cantidades exageradas, ya que si este no se retira cuando setermina el trabajo, se secará sobre los lentes y producirá problemas enla observación. En la mayoría de casos es suficiente usar una gota de 5

mm de diámetro.

10. Algunos fabricantes recomiendan no utilizar alcoholes o acetonas,debido a que pueden afectar –disolver- los cementos o pegantesutilizados para fijar los lentes.

11. Todos los materiales requeridos para efectuar la limpieza debenmantenerse limpios y guardados en recipientes que los protejan delentorno externo.

Cuidados especiales para climas húmedos.

En climas húmedos, por lo general calurosos, los microscopios suelen ser afectados por hongos, que se forman principalmente sobre la superficie de loslentes, en las ranuras de los tornillos y bajo la pintura protectora. En caso de noprotegerse el equipo de forma adecuada, podría quedar inservible en muy cortoplazo. Los cuidados que se detallan a continuación ayudan a prevenir laformación de hongos:






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1. Almacenar el microscopio durante la noche en una caja dotada de unbombillo eléctrico que no exceda los 40 W de potencia. El bombillo debeestar instalado en la parte superior de la caja, cerca de la cabeza

binocular y debe disponer de orificios para permitir la circulación del aire.Se debe evitar que la temperatura del interior de la caja no exceda los50 °C, para que no se afecten las propiedades de los lubricantes delmicroscopio.

2. Si no es posible utilizar la caja con el bombillo eléctrico, como alternativase puede utilizar un material desecante como la silica gel o arroz.Cuando use el agente desecante verificar que el microscopio estéguardado en una caja o protegido con una cubierta protectora que puedeser fabricada en tela de características similares a la de los pañuelos.Verificar que el agente desecante esté en buenas condiciones; casocontrario, sustituirlo o regenerarlo.

3. Limpiar el microscopio estereoscopio de forma periódica. Usar guantes

de látex si tiene que tocar los lentes. Esto evita que las huellas digitalesse adhieran a la superficie y disminuye los riesgos o probabilidad decrecimiento de hongos donde quedaron impresas las huellas digitales.

4. Si ninguna de las alternativas mencionadas es factible, ubicar elmicroscopio en un lugar que tenga buena circulación de aire. Cuando elmicroscopio estereoscopio no esté en uso, podría colocarse bajo la luzsolar de forma directa, por periodos cortos de tiempo. Esto reduce lahumedad y el riesgo de que crezcan hongos en las superficies delequipo.

5. El aire acondicionado evita significativamente el crecimiento de loshongos en los microscopios. Sin embargo, esta no es una opción quedisponga una gran cantidad de laboratorios. Si el servicio de aire

acondicionado no es continuo en el área donde se encuentra instalado elmicroscopio estereoscopio, se deben tomar precauciones para controlar la humedad.

Remoción de la película de hongos

1. Revisar y limpiar con frecuencia el microscopio estereoscopio, utilizandolos procedimientos mencionados en el presente capítulo. Controlar lascondiciones de humedad donde se usa y almacena el microscopio. Si semantiene una ventilación adecuada, disminuye la posibilidad de que seinicie la formación de hongos en el equipo.

2. Si se detecta un crecimiento de hongos, utilizar una mota de algodónhumedecida en una solución limpiadora de hongos que normalmente eséter o xilol. Frotar suavemente siguiendo un movimiento circular, a lolargo de toda la superficie del lente. También puede realizar unmovimiento oscilatorio, hacia adelante y hacia atrás o izquierda-derecha-izquierda, ejerciendo sobre la superficie del lente una presión muymoderada. Si es necesario repetir el procedimiento con una nueva motade algodón.






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3. Cuando se termine la remoción de la película de hongos, limpiar con unamota de algodón limpio.

4. Los hongos solo pueden ser removidos cuando su crecimiento se limita

a la superficie de los lentes. Si dicho crecimiento no se atiende a tiempo,el hongo puede penetrar el cuerpo del lente. Si este es el caso, el lentese pierde, allí ya es imposible removerlo.

5. DEFINICIONES

Apertura numérica. Medida de la habilidad que tiene un objetivo paraconcentrar la luz y distinguir pequeños detalles de un objeto.Normalmente, el valor de la apertura numérica se encuentra grabado enel costado del cuerpo del objetivo. Mayores valores de aperturanumérica permiten que un mayor número de rayos oblicuos de luz pase

por los lentes frontales del objetivo, produciendo una resolución más altade la imagen.

Campo de visión. Diámetro del campo de visión en milímetros, medidoen el plano intermedio de la imagen. El diámetro del campo en unmicroscopio óptico se expresa por el número del campo de visión, osencillamente como número de campo.

Diafragma. Dispositivo que controla el flujo de luz a través delmicroscopio. Hay diafragmas de dos tipos: el diafragma de apertura queajusta el ángulo de apertura en el microscopio, y el diafragma de campoque regula el tamaño de la imagen del instrumento. El propósito de losdiafragmas en los microscopios ópticos es prevenir que lleguen, a losplanos de formación de imágenes, rayos de luz con aberracionesseveras y asegurar una adecuada distribución de luz, tanto en lamuestra como en el espacio de la imagen.

Foco. Lugar donde, como resultado de la refracción de la luz, seconcentran los rayos que atraviesan un lente. Si los rayos de luzconvergen en un punto, el lente es positivo y el foco real; si los rayos deluz divergen, el lente es negativo y el foco virtual.

Índice de refracción. Valor que se calcula comparando la velocidad dela luz en el vacío, con la velocidad de la luz en un segundo medio demayor densidad. Se representa normalmente por la letra [n] o [n´], en laliteratura técnica o en las ecuaciones matemáticas.

Ocular . Conjunto de lentes diseñado para proyectar una imagen real o

virtual, dependiendo de las relaciones que existan con otros conjuntosde lentes del microscopio. Como su nombre lo indica, a través delmismo, el microscopista observa la imagen.

Profundidad de campo. Grosor del espécimen o muestra que esrazonablemente claro a un determinado nivel de enfoque.

Profundidad de foco. Rango sobre el cual el plano de la imagen puedeser movido, manteniendo una claridad estable.






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Resolución. Habilidad para distinguir los detalles finos de una placa omuestra particular. Entre los factores que más influyen para lograr unabuena resolución, se encuentran la apertura numérica, la clase de

muestra, la iluminación, la corrección de aberraciones y el tipo decontraste utilizado. Es una de las características más importantes de unmicroscopio.

Revólver portaobjetivos. Dispositivo mecánico diseñado para montar los objetivos y permitir su intercambio rápido, a través de un movimientorotatorio. Su capacidad depende del tipo de microscopio. En generalvaría entre tres y cinco objetivos.

6. REGISTROS

6.1 Formatos de registro y cronograma de mantenimiento A-FT-10.002.0036.2 Formato uso de equipos fijos A-FT-10.001.001

ANEXO I

MANUAL DE INSTRUCCIONES DEL FABRICANTE

ELABORÓ Emerson Corredor REVISÓ Equipo TécnicoSIMEGE

APROBÓ Fernando Franco

CARGO Administrativo Unidadde Laboratorios

CARGO Contratistas /Analistas CARGO Director de Sede

FECHA 24 de Septiembre de2010

FECHA 24 de Septiembre de2010

FECHA 24 de Septiembrede 2010

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