Macroscopic and Microscopic Diagnosis of … 1061.pdf · Diagnóstico macro e microscópico de Aspergilose em frangos de corte Macroscopic and Microscopic Diagnosis of Aspergillosis

Acta Scientiae Veterinariae, 2012. 40(3): 1061.

CASE REPORT Pub. 1061

ISSN 1679-9216 (Online)

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Received: February 2012 www.ufrgs.br/actavet Accepted: May 2012

1Laboratório Central de Diagnóstico de Patologias Aviárias (LCDPA), Departamento de Medicina Veterinária Preventiva (DMVP), Centro de Ciências Rurais (CCR), Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), Santa Maria, RS, Brazil. 2Faculdade de Engenharia Agrícola (FEAGRI), Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP), Campinas, SP, Brazil. 3Laboratório de Patologia Veterinária (LPV), Departamento de Patologia, Centro de Ciências da Saúde (CCS), UFSM. 4Laboratório de Pesquisas Micológicas (LAPEMI), Departamento de Microbiologia e Parasitologia, CCS, UFSM. CORRESPONDENCE: L.V.CEOLIN [[email protected] - Tel.: + 55 (55) 3220 8072]. UFSM, Centro de Ciências Rurais, LCDPA, Prédio 44, Sala 5152, Bairro Camobi. CEP 97105-900 Santa Maria, RS, Brazil.

Diagnóstico macro e microscópico de Aspergilose em frangos de corte

Macroscopic and Microscopic Diagnosis of Aspergillosis in Poultry

Lilian Varini Ceolin1, Fernanda Flores2, Isadora Mainieri de Oliveira Corrêa1, Maristela Lovato1,

Glauco José Nogueira de Galiza3, Glaucia Denise Kommers3, Nathália Risso4 & Janio Morais Santurio4

ABSTRACT

Background: Aspergillus fumigatus is considered the major agent of mycotic diseases in birds, affecting mainly the respira-tory tract. It is a disease of economic importance in the poultry industry, however it is not a zoonotic or contagious disease. Aspergillus spp. are an environment residents. Infection usually occurs by inhalation of conidia released by molds, which come off the diet or specifi c ingredients, the nest and contamination of eggs during incubation. The objective of this study is to relate the macro and microscopic diagnosis of aspergillosis in poultry.Case: In an intensive farming of poultry (Gallus gallus), it was observed mortality rate exceeding 20%, hoarseness and diffi culty breathing in males of approximately two weeks of age. The batch was treated with Terramycin ® (oxytetracy-clinehydrochloride) in the fi rst week and Trissulfi n® (sulfamethoxazole, trimethoprim and bromhexine hydrochloride) in the second week. Birds were sent for analysis at the Laboratório Central de Diagnóstico de Patologias Aviárias (LCDPA) of the Universidade Federal de Santa Maria (UFSM). Necropsy was performed in three affected birds and pulmonary aspergillosis was suspected due to local pulmonary and disseminated injuries in the coelomic cavity, associated to the clinical signs. In birds assessed by necropsy examination, it was common the visualization of nodules in the internal cavity and lungs, caseous masses in the air sacs, little pigmentation on the feet and beaks and fragile bones. Portions of lung and granulomas were sent for isolation and identifi cation of fungi in the Laboratório de Pesquisas Micológicas (LAPEMI)-UFSM and histopathological analysis in the Laboratório de Patologia Veterinária (LPV)-UFSM, where the standard pro-tocols for each exam were used. The result of mycological examination showed Aspergillus fumigatus as the agent. The histopathological lesions observed in the lung were consistent with aspergillosis, characterized by multifocal granulomas associated with intra-lesional dichotomously branched fungal hyphae, morphologically compatible with Aspergillus sp.Discussion: The occurrence of aspergillosis depends on the dose of inhaled conidia of the fungus and the susceptibility of the host, which occurs in birds in the fi rst weeks of age, making it more resistant to infection in adults. The history of signs consisting of respiratory distress associated with stressful situations or the recent lack of response to antibiotics may provide support to the clinical diagnosis of aspergillosis. The isolation and identifi cation of the fungus comprises the best method to confi rm the disease agent. Histopathology provides an important contribution to the morphological diagnosis of the lesion and the fungus. The treatment of aspergillosis in poultry production is diffi cult and uneconomical, so that all attention is focused on prevention and control in poultry houses and hatcheries. Eggs for incubation must be cleaned and disinfected, dirty and cracked eggs should not be incubated. Care should be strict with hygiene in the hatchery. Once detected the source, it should be eliminated, and the implementation of antifungal agents according to the location of contamination and the substrate. The major diffi culty for the prevention and control of aspergillosis is because these fungi can be present at all stages of poultry production.

Keywords: aviculture, Aspergillus fumigatus, fungal pneumonia, mycology.Descritores: avicultura, Aspergillus fumigatus, pneumonia fúngica, micologia.

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INTRODUÇÃO

A principal enfermidade fúngica das aves é a aspergilose e, apesar das diversas formas clínicas de apresentação da doença, a forma respiratória, afetando especialmente os pulmões e sacos aéreos, é a de maior ocorrência. Aspergillus spp. são habitantes normais do meio ambiente. As infecções por estes agentes geral-mente ocorrem pela inalação dos conídios presentes na ração e na cama do ninho ou do aviário e pela con-taminação dos ovos durante a incubação [2].

As duas principais espécies envolvidas nos surtos de aspergilose são Aspergillus fumigatus e A. fl avus [1]. Aspergilose é uma doença de importância econômica na indústria avícola, entretanto não é uma doença zoonótica ou contagiosa [9].

Duas formas principais de aspergilose ocorrem em frangos de corte. A aspergilose aguda, caracterizada por surtos severos em aves jovens, com alta mortali-dade e morbidade, e a crônica, que ocorre em aves adultas, sendo sua incidência baixa, mas causadora de perdas econômicas quando as aves sucumbem à doença [9]. A pneumonia de incubadora em frangos jovens é uma doença que afeta aves recém-chocadas expostas a grande número de conídios de A. fumigatus [13]. É provável que o fungo penetre pela casca do ovo e infecte o embrião ou a ave recém-nascida [4].

O objetivo deste trabalho é relatar diagnóstico macro e microscópico de aspergilose em frangos de corte. Medidas de prevenção e controle são discutidas.

RELATO DO CASO

Em um sistema de criação intensiva de frangos de corte (Gallus gallus), machos de aproximadamente duas semanas de idade, observou-se difi culdade res-piratória e estertores nas aves. A taxa de mortalidade neste lote foi superior a 20%. Segundo o responsável técnico da granja de origem das aves, o lote foi tratado com Terramicina® (cloridrato de oxitetraciclina) na primeira semana e Trissulfi n® (sulfametoxazol, trime-tropin e cloridrato de bromexina) na segunda semana. Foram encaminhadas três aves doentes para análise no Laboratório Central de Diagnóstico de Patologias Aviárias (LCDPA) da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), Santa Maria, RS, Brasil.

Na necropsia das três aves observaram-se múltiplos nódulos amarelo-esbranquiçados, fi rmes, aderidos na cavidade celomática e nos pulmões e massas caseosas nos sacos aéreos e mesentério (Figura

1 A e B). Observaram-se também pouca pigmentação nas patas e nos bicos e ossos frágeis.

Microscopicamente as lesões observadas no pulmão e nódulos cavitários foram compatíveis com aspergilose, sendo observados granulomas multifocais associados a imagens negativas de hifas fúngicas intra-lesionais. Na impregnação pela prata de Grocott as hifas apresentaram ramifi cação dicotômica, morfologia compatível com Aspergillus spp. (Figura 2 A e B).

O diagnóstico foi confi rmado com base no isolamento de A. fumigatus das amostras de pulmão e nódulos cavitários.

Após a confi rmação do diagnóstico foram su-geridas medidas de prevenção, como a não incubação de ovos de cama, desinfecção com produtos antifún-gicos de todos equipamentos do incubatório, além da realização do controle regular das instalações com o método de exposição de placas visando identifi car possíveis contaminações fúngicas, para assim evitar a ocorrência de novos surtos.

Figura 1. A) Aspergilose. Gallus Gallus. Granulomas multifocais distribuídos pela cavidade interna . B) Granulomas nos sacos aéreos abdominais aderidos a porção intestinal.

Figura 2. A) Aspergilose. Gallus Gallus. Pulmão. Granunloma contendo numerosas hifas compatíveis com Aspergillus sp. Metanamina-nitrato de prata de Grocott [Obj. 20x]. B) Nódulo cavitário. Contendo numerosas hifas, frequentemente septadas, com paredes paralelas e ramifi cações em ângulo agudo (dicotômicas) compatíveis com Aspergillus sp. Metanamina-nitrato de prata de Grocott [Obj. 40x].

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DISCUSSÃO

A susceptibilidade de aves a Aspergillus spp. pode ser atribuída a diferenças na imunidade inata con-tra este patógeno, quando comparado com mamíferos. Características anatômicas incluem a não existência de epiglote para prevenção de entrada de partículas no trato respiratório inferior, falta de diafragma, re-sultando na inabilidade de produzir refl exo de tosse, e distribuição limitada de células ciliadas no trato respiratório. A presença de sacos aéreos cavernosos e temperatura corporal alta em aves podem promover o desenvolvimento desses fungos [14].

Neste surto, apenas as aves jovens foram afeta-das sugerindo que a infecção tenha ocorrido no período de incubação ou logo após a eclosão. Em pintos, con-taminados no ovo ou durante a incubação, a doença é comumente conhecida como pneumonia de incubadora e é altamente fatal nos primeiros dez dias de vida [3]. A ocorrência de aspergilose depende da dose de conídios inalada e da susceptibilidade do hospedeiro [9]. As aves apresentam maior susceptibilidade nas primeiras sema-nas de idade, tornando-se mais resistentes à infecção na idade adulta. Aves imunossuprimidas são mais suscep-tíveis a infecção por fungos do gênero Aspergillus [5].

A observação de vários granulomas nos casos deste relato, afetando pulmões, cavidade celomática e mesentério das aves doentes, são compatíveis com a forma generalizada da aspergilose. A aspergilose pode ser classifi cada como localizada ou generalizada, de acordo com a distribuição das lesões na serosa e no parênquima de um ou mais órgãos [3,6]. Em infecções recentes, as lesões surgirão como pequenos nódulos caseosos esbranquiçados nos pulmões ou nos sacos aéreos, causando respiração ofegante, coração acele-rado, emagrecimento e alta mortalidade [7]. Além do sistema respiratório, a aspergilose também pode causar dermatite, osteomicose, oftalmite, encefalite, artrite e aneurisma aórtico [8,9,12].

Microscopicamente a lesão se caracterizou por múltiplos granulomas associados a hifas fúngicas intra-lesionais. A ausência de conidióforos nos fragmentos analisados pode ser associada à característica nodular

e bem encapsulada da lesão, que resulta em uma aérea com pouco contato com o ar, mesmo em órgãos bem arejados. O fungo pode formar conidióforos em órgãos bem arejados, como pulmão e sacos aéreos, na ausência de granulomas [6].

Aspergilose em lotes de aves jovens cursa com um quadro agudo com alta morbidade e mortalidade, enquanto nas aves mais velhas é uma doença crônica e esporádica geralmente associada a animais imuno-comprometidos [3,9,10,15].

O histórico de sinais compostos por difi culdade respiratória, associado a situações de estresse recente ou a ausência de resposta à terapia antimicrobiana podem servir de subsídios ao diagnóstico clínico de aspergilose. Entretanto, não há segurança nesta forma de diagnóstico, visto que há inúmeras enfermidades que poderiam se encaixar no perfi l descrito. A visua-lização de nódulos no exame de necropsia e o isola-mento e identifi cação do fungo em questão compõe o método mais indicado para diagnosticar os agentes da enfermidade [2].

O tratamento da aspergilose em aves de pro-dução é difícil e inviável economicamente, fazendo com que toda a atenção esteja voltada à prevenção e ao controle nos aviários e incubatórios [3]. Na coleta, os ovos devem ser limpos e desinfetados, ovos sujos e com rachaduras não devem ser incubados. Os cuidados com higiene devem ser rigorosos no incubatório [11]. Uma vez detectada a fonte de contaminação, esta deve ser eliminada, além da implementação de antifúngicos, conforme o local e o substrato de contaminação. A maior difi culdade à prevenção e ao controle da asper-gilose é que estes fungos podem estar presentes em todas as fases da produção avícola [2].

Através da apresentação clínica, das lesões macroscópicas e microscópicas associadas ao isola-mento fúngico, foi possível confi rmar o diagnóstico de aspergilose em frangos. A administração de fármacos antimicrobianos às aves doentes é uma medida pouco efi ciente no combate a aspergilose, sendo necessária a adoção de medidas preventivas para controlar surtos e o surgimento de novos casos.

REFERÊNCIAS

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www.ufrgs.br/actavetPub. 1061

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