UNIVERSIDAD ALAS PERUANASFACULTAD DE INGENIERA Y
ARQUITECTURAESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE INGENIERA
AMBIENTAL
PERFIL DE PROYECTO DE INVESTIGACIN
AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS A PARTIR DE LIXIVIADOS DEL
BOTADERO MUNICIPAL PARA LA FORMACION DE LODOS ACTIVOS CON FINES DE
MITIGACION AMBIENTAL TARAPOTO 2014
ALUMNOS:lvarez Rengifo Mark Eduardo, Caparachn Murrieta Carol
Yohana, Del Aguila Paredes Eduardo, Flores Lozano Ethel, Flores
Ramirez Jesica Mishel, Huamn Linarez Baressa, Medina Linares Bryan,
Robalino Garcia Ledinn, Sanchez Lazo Sandra Veronica,
CURSO:BIOTECNOLOGIA AMBIENTALCICLO:VIII PROFESOR:Blgo. Mblgo.
Henry Giovani Jave Concepcin
TARAPOTO PER2014
NDICECAPITULO I: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA41.1.Descripcin de la
realidad problemtica41.2.Delimitacin de la
investigacin41.2.1.Social41.2.2.Espacial51.2.3.Temporal71.3.Formulacin
del problema de investigacin71.3.1.Problema general71.3.2.Problemas
especficos71.4.Objetivos71.4.1.Objetivo general71.4.2.Objetivo
especifico71.5.Justificacin de la investigacin81.6.Limitaciones de
la investigacin8CAPITULO II: MARCO TERICO92.1.Antecedentes del
estudio de investigacin92.2.Bases tericas112.3.Bases
legales152.4.Definicin de trminos bsicos15CAPITULO III: HIPTESIS Y
VARIABLES183.1.Hiptesis general183.2.Hiptesis
especficas183.3.Variables183.3.1.Operacionalizacin de las
variables19CAPITULO IV: METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN204.1.Diseo de
investigacin204.2.Tipo y Nivel de investigacion204.3.Enfoque de la
investigacin204.4.Mtodo de la investigacin214.5.Poblacin y
muestra224.6.Tcnicas e instrumentos de recoleccin de
datos224.6.1.Tcnicas224.6.2.Instrumentos224.6.3.Criterios de
validez y confiabilidad de los instrumentos22
CAPITULO V:ANALISIS E INTERPRETACION DE RESULTADOS235.1.Anlisis
de datos235.2.Prueba de la hiptesis235.3.Discusin de
resultados25
CAPITULO VI: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES..5.4.
Conclusiones..5.5. Recomendaciones.
FUENTES DE INFORMACIN26ANEXOS27
CAPITULO I: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA1.1. Descripcin de la
realidad problemticaEl aumento de la poblacin trae consigo ciertos
problemas ambientales como la inadecuada disposicin de las aguas
residuales, stas son vertidas en los ros sin previo tratamiento, y
representa un grave problema existente en los pases en vas de
desarrollo; generando la contaminacin directa de nuestros ros. Las
aguas residuales cada ao se encuentran en aumento producto de este
problema, y la incorrecta gestin de nuestras autoridades para la
disposicin final de estas implica un alto ndice de problemas
ambientales, puesto que son vertidos directamente y de manera
irracional hacia nuestros principales ecosistemas.
A nivel mundial existen muchos tratamientos para las aguas
residuales, en especial los de uso comn son los tratamiento
qumicos, pero trae consigo muchos inconvenientes debido a las
propiedades agresivas de los productos qumicos que son utilizados,
donde los procedimientos de seguridad son ms estrictos para su
aplicacin, sumado a esto est la generacin de efluentes
contaminantes.
Nuestra ciudad no es ajena a este problema, siendo una ciudad
que se encuentra en vas de desarrollo por lo cual existe el
deterioro de los ecosistemas, debido a que las aguas residuales son
vertidas en conjunto con las aguas residuales urbanas, quienes
poseen altas concentraciones de protenas, lpidos, carbohidratos y
metales pesados, y que al pretender ser tratados de manera conjunta
presentan una mayor dificultad; generando un mayor impacto
ambiental negativo en el rea de influencia directa e indirecta.
1.2. Delimitacin de la investigacin1.2.1. SocialEl presente
proyecto de investigacin involucra a toda la poblacin con acceso al
servicio bsico de desage adems de la poblacin asentada en las
riveras, al sector agrcola e industrial quienes reutilizarn estas
aguas mediante el abastecimiento de sistemas de captacin, siendo
los principales beneficiados tras la aplicacin del tratamiento de
las aguas residuales mediante la accin de los lodos activos.
1.2.2. EspacialPara el presente proyecto de investigacin se
pretende extraer la muestra del botadero Municipal Yacucatina cuya
ubicacin geogrfica correspondiente es UTM 355542 mE; 9264179 mN; a
una altitud de 326 m.s.n.m. sector Yacucatina.
34 MAPA 01. Ubicacin geogrfica del laboratorio del ICT
FUENTE: Elaboracin propia 2014
1.2.3. TemporalEl presente proyecto se desarrollar en un periodo
estimado de dos (02) meses. Que comprenden Noviembre a Diciembre
del 2014, de los cuales en el primer mes se desarrollar la etapa de
laboratorio y el mes siguiente la etapa de gabinete hasta la
presentacin del informe final.
1.3. Formulacin del problema de investigacin1.3.1. Problema
general Sera factible aislar microorganismos a partir del lixiviado
del botadero municipal para la formacin de lodos activos con fines
de mitigacin ambiental?
1.3.2. Problemas especficos Facilitarn los inductores el
aislamiento de microorganismos a partir del lixiviado del botadero
municipal? Cmo probar el funcionamiento del lodo activo conformado
por microorganismos a partir del lixiviado del botadero
municipal?
1.4. Objetivos 1.4.1. Objetivo general Aislar microorganismos a
partir del lixiviado del botadero municipal para la formacin de
lodos activos.
1.4.2. Objetivo especifico Evaluar los inductores para el
aislamiento de microorganismos a partir del lixiviado del botadero
municipal. Probar el funcionamiento del lodo activo en la mitigacin
ambiental.
1.5. Justificacin de la investigacin Motivado por la vocacin
profesional y de servicio, siendo consciente de la importancia del
desarrollo del proyecto de investigacin formacin de lodos activos
en condiciones de laboratorio para tratamiento de aguas residuales
industriales con fines de mitigacin ambiental como parte de la
solucin a un problema ambiental que aqueja a nuestra ciudad. Los
aportes de este proyecto de investigacin es para mejorar la
eficacia en la degradacin y transformacin de ciertos contaminantes
presentes en las aguas residuales generados por la poblacin con el
fin de reducir su impacto hacia el medio ambiente.
1.6. Limitaciones de la investigacinEntre las limitaciones de la
investigacin podemos encontrar a las siguientes: Falta de
laboratorio implementados con equipos apropiados. Costo elevado del
proyecto. Escases de materiales a utilizar. Espacio de los
laboratorios. Tiempo de ejecucin.
CAPITULO II: MARCO TERICO
2.1. Antecedentes del estudio de investigacin Segn la
investigacin realizado por ALCARAZ JUAREZ A. (2008). Aislamiento E
Identificacin De Microorganismos En Lodos Activados. Que tuvo como
objetivo general aislar e identificar bacterias con capacidad de
degradacin de derivados del petrleo.
Y dicha investigacin concluyo con: se pudo asilar bacterias
(Microbacterium) y hongos capaces de degradar el petrleo.
Segn la investigacin realizada por LOAIZA NAVIA J. (2010).
Modelacin el proceso de lodos activados en la Planta de tratamiento
de Aguas Residuales Noreste, Apodaca, N.L. El objetivo principal
fue modelar el proceso de lodos activos de la planta Noreste con el
ASM 1, para reproducir su comportamiento en cuanto a remocin de
materia orgnica, nitrgeno y produccin de lodo, con el fin de que el
modelo sirva como herramienta de toma de decisiones. Al finalizar
su investigacin concluyo que el modelo calibrado fue capaz de
describir de forma adecuada la calidad del efluente (carbono y
nitrgeno) y la produccin del lodo, en especial en estado
estacionario. Porque que considero exitosa la secuencia de
calibracin desarrollada y puesta en prctica.
Segn la publicacin realizada por LPEZ TORRES M., VELIZ E.,
FERNNDEZ GARCA LA et al. Tratamiento de lodos. Una etapa necesaria
dentro del proceso tecnolgico. Revista CENIC. 2010; vol. 41: pp.
1-6.El objetivo general fue la caracterizacin de la digestin
anaerbia puede ser una opcin atractiva, como una va de evacuacin y
como fuente de energa alternativa.
Al trmino de su poblacin concluy, que los resultados demuestran
que la digestin anaerobia de los lodos es una opcin tecnolgica
adecuada y ms an para cerrar el ciclo del proceso de tratamiento
para el reuso de las aguas residuales municipales, con la
potencialidad de la obtencin de biogs y la posible valorizacin del
lodo para reus en la agricultura.
Segn la investigacin realizada por SALAZAR L., CRESPI M.,
SALAZAR R. (2009) Tratamiento de aguas residuales textiles mediante
un biorreactor de membrana. El objetivo de la investigacin fue
obtener mejores rendimientos de depuracin, reduccin de costos de
operacin y mantenimiento en la generacin de procesos que posean una
elevada flexibilidad para soportar las variaciones en el afluente,
que generen una mnima produccin de lodos y que sean diseados en
condiciones mnimas de rea.
Llegaron a la conclusin de que el tratamiento de aguas
residuales textiles mediante un BRM resulta atractivo, ya que
durante el desarrollo de la parte experimental presenta una mayor
estabilidad del proceso, una remocin de la materia orgnica promedio
de 89%, de slidos suspendidos totales de 95% y de color del
69%.
Segn la investigacin realizada por PABN S.; SUREZ J. Arranque y
operacin a escala real de un sistema de tratamiento de lodos
activos para aguas residuales de matadero revista ingeniera e
investigacin vol. 29 no. 2, agosto de 2009; pg. (53-58) El estudio
tuvo como objetivo realizar el seguimiento al arranque y operacin
de un sistema de tratamiento de lodos activos, mediante la
aplicacin de una tcnica de arranque utilizando contenido rumial y
el monitoreo peridico de parmetros fsicos qumicos y microbiolgicos
a las variedades corrientes del proceso y anlisis de los parmetros
de control de lodo reactivo.
El resultado fue que es viable utilizar como inoculo contenido
ruminal, adaptndolo con variaciones de carga con variadas
proporciones de sustrato (agua ruminaza- aguasangre).
2.2. Bases tericasAISLAMIENTO DE MICROORGANISMOSEl aislamiento
de bacterias a partir de muestras naturales de realiza, en la
mayora de los casos, mediante la produccin de colonias aisladas en
cultivos slido. El crecimiento explosivo de las bacterias permite
producir un gran nmero de ellas a partir de una nica clula inicial
de forma, tras un periodo de incubacin en las condiciones
ambientales adecuadas, se produce una colonia observable a simple
vista y formada por individuas iguales.
Sin embargo, no todos los microorganismos presentes en las
muestras ambientales so cultivables. Esta es debido a dificultades
intrnsecas en el cultivo, al desconocimiento de los requerimientos
especficos de cultivo, y a laa existencia de grupos de
microorganismos que deben mantenerse en equilibrio para poder
sobrevivir. BIBLIOGRAFIA RECOMENDADA: Cap. 1 de la octava edicin de
Brock: Biologia de los microorganismos.
Existen procedimientos de enriquecimientos del nmero de
bacterias de ambientes naturales para facilitar su aislamiento. Uno
de ellas es la columna de Winogradski que crea un microcosmos para
enriquecer el nmero de ciertos tipos de microorganismos presentes
en ambientes naturales con objeto de facilitar su aislamiento.
CARACTERSTICAS FSICAS, QUMICAS y BIOLGICAS DEL AGUA RESIDUAL.A
continuacin se describen brevemente los constituyentes fsicos y
qumicos de las aguas residuales, los contaminantes importantes de
cara al tratamiento de las aguas, los mtodos de anlisis, y las
unidades que se emplean para caracterizar la presencia de cada uno
de los contaminantes en el agua residual.
Las aguas residuales se caracterizan por su composicin fsica y
qumica. Las principales propiedades fsicas de agua residual as como
sus principales constituyentes qumicos.
Es conveniente observar que muchos de los parmetros que aparecen
en la tabla estn relacionados entre ellos. Por ejemplo, una
propiedad fsica como la temperatura afecta tanto a la actividad
biolgica como a la cantidad de gases disueltos en el agua
residual.
Propiedades fsicas: Color Aguas residuales domsticas e
industriales. Olor Agua residual en descomposicin, residuos
industriales
Constituyentes qumicos: Orgnicos carbohidratos Aguas residuales
domsticas, industriales y comerciales. Grasas animales, aceites
Aguas residuales domsticas, industriales y comerciales y grasa.
Pesticidas Residuos agrcolas. Fenoles Vertidos industriales.
Protenas Aguas residuales domsticas, industriales y comerciales.
Contaminantes prioritarios Aguas residuales domsticas, Industriales
y comerciales. Agentes tenso activos Aguas residuales domsticas,
industriales y comerciales. Compuestos orgnicos voltiles Aguas
residuales domsticas, industriales y comerciales.
Otros Degradacin natural de materia orgnica Inorgnicos:
Alcalinidad Aguas residuales domsticas, agua de suministro,
infiltracin de agua subterrnea. Cloruros Aguas residuales
domsticas, agua de suministro, infiltracin de agua subterrnea.
Metales pesados Vertidos industriales. Nitrgeno Residuos agrcolas y
aguas residuales domsticas. PH Aguas residuales domsticas,
industriales y comerciales. Fsforo Aguas residuales domsticas,
industriales y comerciales; aguas de Escorrenta. Contaminantes
prioritarios Aguas residuales domsticas, industriales y
comerciales. Azufre Agua de suministro; aguas residuales domsticas,
comerciales e industriales.
Gases: Sulfuro de hidrgeno Descomposicin de residuos domsticos.
Metano Descomposicin de residuos domsticos. Oxgeno Agua de
suministro; infiltracin de agua superficial. Disponible en:
http://cidta.usal.es/cursos/ETAP/modulos/libros/Caracteristicas.PDF
Funcionamiento de los lodos activos.El tratamiento de las aguas
residuales implica una serie de procesos y operaciones unitarias,
comunes en la Ingeniera Qumica, y que son empleadas frecuentemente
en el tratamiento y acondicionamiento de aguas naturales. Estas
operaciones unitarias son la sedimentacin, filtracin, cribado, etc.
Adicionalmente a estos procesos es necesario un tratamiento
biolgico, a travs del cual el material orgnico.
Presente en el agua residual es convertido parcialmente a
material celular o biomasa, y el resto se oxida a metano y
productos inorgnicos como: agua, carbonatos, bixido de carbono,
amoniaco, nitratos, etc. Quienes llevan a cabo este proceso, son
una gran masa de microorganismos de especies muy variadas, y que
cumplen funciones especficas en el proceso de depuracin de material
orgnico en las aguas residuales. Estos microorganismos pueden ser:
aerobios, anaerobios o facultativos.
En presencia de oxgeno, los aerobios y facultativos son los que
crecen y se desarrollan, mientras que en ausencia de oxgeno los
anaerobios y facultativos predominan. Los procesos aerobios son los
ms convenientes para la conversin del material orgnico en las aguas
residuales, y el proceso anaerobio es el ms adecuado para la
conversin del material orgnico que se tiene en los lodos biolgicos
producidos en el proceso de tratamiento de las aguas
residuales.
Durante el proceso de digestin del material orgnico por procesos
aerobios, se forman productos intermedios que no son de carcter
agresivo o repulsivo, lo cual si ocurre en un proceso anaerobio,
por lo tanto la digestin aerobia se lleva a efecto en espacios
abiertos, con grandes suministros de oxgeno y buena ventilacin. Por
el contrario, la digestin anaerobia se realiza en un recipiente
cerrado, y solo es abierto una vez que el material orgnico se ha
convertido a productos terminales, que ya no son objetables y
pueden manejarse los residuos adecuadamente.
Por estas razones, los procesos de tratamiento de aguas
residuales en digestores o reactores biolgicos aireados (reactor
aerobio), son los ms convenientes y los ms frecuentemente
empleados. Uno de los procesos aerobios ms empleados es el proceso
de lodos activados.
No hay un solo proceso de lodos activados, y existen muchas
variaciones de dicho proceso para darle tratamiento a diferentes
tipos y calidades de agua, o para obtener un agua tratada con
ciertos parmetros de calidad. Disponible
en:http://filtrosyequipos.com/GUEST/residuales/lodosactivados5.pdf
CARACTERSTICAS DE LOS LIXIVIADOS QUE AFECTAN SU
TRATAMIENTOExisten numerosas caracterizaciones de los lixiviados en
donde se hace nfasis en su alto poder contaminante. Se dice que los
lixiviados usualmente tienen un alto contenido de nitrgeno y
fosforo, presencia abundante de patgenos e igualmente de sustancias
toxicas como metales pesados y constituyentes orgnicos. (GIRALDO E.
2010).
2.3. Bases legales Segn la ley de recursos hdricos, Ley N 29338;
en el artculo 79.- Vertimiento de agua residual: hace mencin que la
autoridad nacional del Agua autoriza el vertimiento del agua
residual tratada a un cuerpo natural. Segn la ley de recursos
hdricos, Ley N 29338; Artculo 82.- Reutilizacin de agua residual:
menciona que la Autoridad Nacional, a travs del Consejo de Cuenca,
autoriza el reso del agua residual tratada, segn el fin para el que
se destine la misma. D.S. N 003-2010-MINAM (Aprueba Lmites Mximos
Permisibles para los efluentes de Plantas de Tratamiento de Aguas
Residuales Domsticas o Municipales): establece los Lmites mximos
permisibles en plantas de tratamiento de las aguas residuales. Segn
la Ley General Del Ambiente - Ley N 28611, Artculo 121.- Del
vertimiento de aguas residuales: El Estado emite en base a la
capacidad de carga de los cuerpos receptores, una autorizacin
previa para el vertimiento de aguas residuales domsticas,
industriales.2.4. Definicin de trminos bsicos Lodos activos:
Residuo semislido que contiene microorganismos y sus productos, de
cualquier sistema de tratamiento de aguas, Un proceso de lodos
activados, no es otra cosa que un tratamiento biolgico. (GONZALES
CRUZ, M 2010).
Aerobio: proceso que ocurre en presencia de oxigeno molecular.
(GONZALES CRUZ, M 2010).
Aguas residuales: agua deseca por una casa, una comunidad, una
granja o una industria que contiene materia orgnica disuelta o
suspendida. . (GONZALES CRUZ, M 2010).
Agua residual domestica: agua proveniente de los desechos de una
comunidad. . (GONZALES CRUZ, M 2010).
Agua residual industrial: agua descargada resultante de un
proceso industrial y que no tiene ningn valor para est. (GONZALES
CRUZ, M 2010).
Digestion anaerobica: la digestion anaerobia es una de los
procesos mas antiguos empleados en la estabilizacion de lodos. Este
proceso se propicia de la degradacion de la materia organica
contenida en el en ausencia de oxigeno molecular. (GONZALES CRUZ,
M. 2010).
Digestion aerobia: la digestion aerobia se emplea generalmente
en plantas de tratamiento con capacidad minima sin embargo en
algunas ocasiones se ah empleado en plantas con mayor capacidad.
(GONZALES CRUZ, M. 2010).
Consorcios: Un ConsorcioMicrobianoes una asociacin natural de
dos o ms poblaciones microbianas, de diferentes especies, que actan
conjuntamente como una comunidad en un sistema complejo, donde
todos se benefician de las actividades de los dems. (LPEZ, DOMNGUEZ
& GARCA, 2007).
Inductores: sustancia, normalmente un sustrato molecular de una
enzima especfica, que se combina con el represor activo producido
por el gen regulador y lo desactiva.
Muestra: La muestra es un subconjunto de la Poblacin Blanco de
la Inferencia. Los objetivos de la extraccin de una muestra de la
poblacin. (Cristina Ludewig).
Muestreo por atributos: En lossistemas de muestreopara aceptacin
se emplean mucho los trminos defectivo y defecto. Unaunidad
defectuosaeslaque no cumple con las especificaciones en algn
aspecto, o sea tiene uno o ms defectos
CAPITULO III: HIPTESIS Y VARIABLES
3.1. Hiptesis generalMediante la utilizacin de inductores en
medios especficos se aislarn e identificarn microorganismos
degradadores y transformadores de compuestos contaminantes.
3.2. Hiptesis especficas En medios bsicos con la adicin de
compuestos lipdicos (lecitina), proteicos (lactosa), carbohidratos
(Almidn) y metales pesados (cloruro de mercurio o hidrocarburo)
como inductores se ensayar el aislamiento de microorganismos con
caractersticas de inters. Mediante el principio de la prueba del
granulo anaerbicos ser factible evaluar y probar la funcionalidad
del lodo activo conformado.
3.3. VariablesVariables independientes Inductores (Lecitina,
almidn, casena y cloruro de mercurio e hidrocarburo).
Variable dependiente Aislamiento de organismos degradadores y
transformadores de lpidos, carbohidratos, protenas y metales
pesados.
3.3.1. Operacionalizacin de las variables
Cuadro 01: Operacionalizacin de las variablesVARIABLE
DEFINICION CONCEPTUALDIFINICION
OPERACIONALDIMENSIONESINDICADORESESCALA DE MEDICION
INDEPENDIENTE:Inductores (Lecitina, almidn, casena y fluor).
DEPENDIENTE:Aislamiento de organismos degradadores y
transformadores de lpidos, carbohidratos, protenas y metales
pesados.
- Elinductorsuele ser el sustrato de una ruta catablica, o una
molcula muy semejante al sustrato natural.
-Son colonias bacterianas pertenecientes a una misma especie,
con capacidad degradadora y especficas. Produccin de enzimas.
Presencia de colonias.
Formacin de halos.
Degradacin y transformacin de inductores.
Capacidad para estimular la produccin de enzimas especficas.
Crecimiento en medios especficos.
Tolerancia a compuestos especficos.
Endo-enzimas.
Exo-enzimas.
-Dimetro del halo -Reduccin del sustrato.-Formacin mltiple de
colonias.
Ordinal/Nominal: Abundante o mnimo
Nominal: Grande, mediano y pequeo.
Fuente: Elaboracin propia 2014CAPITULO IV: METODOLOGA DE LA
INVESTIGACIN
4.1. Diseo de investigacinSegn el propsito del estudio y la
naturaleza de la investigacin, corresponde a un diseo de tipo
Investigacin de laboratorio o experimental.Segn ESS
FERRER.(2010).Operacionalizacin de variables, hace mencin que sta
investigacin se presenta mediante la manipulacin de una variable no
comprobada, en condiciones rigurosamente controladas, con el fin de
escribir de qu modo y por qu causa se produce una situacin o
acontecimiento particular.
4.2. Tipo y nivel de la investigacinLa presente investigacin es
de tipo correlacional, porque persigue medir el grado de relacin
existente entre variablesSegn ESS FERRER. (2010).Operacionalizacin
de variables, menciona que dicho nivel de investigacin Estudia las
relaciones entre variables dependientes e independientes, es decir,
la correlacin entre dos variables.
Nivel de investigacin:Segn lo establecido por SNCHEZ CARLESSI H.
y REYES MEZA C. (2006), nuestro nivel de investigacin cientfica es
del tipo explicativa o de comprobacin de hiptesis causales, porque
busca explicar fenmenos y el estudiar sus relaciones para conocer
su estructura y los aspectos que intervienen en la dinmica de
aqullos. Hay predominio de explicacin, descripcin y correlacin. Es
aquella que tiene relacin causal, no solo persigue describir o
acercarse a un problema, sino que intenta encontrar las causas del
mismo.
4.3. Enfoque de la investigacinSegn el enfoque de investigacin
es cuantitativo; HERNNDEZ SAMPIERI R. (2010). Metodologa de la
investigacin. Lo define como una investigacin que utiliza diseos
para analizar la certeza de las hiptesis formuladas en un contexto
en particular o para aportar evidencia respecto de los lineamientos
de la investigacin, se encuentra relacionada con el grado en que
apliquemos el diseo tal como fue preconcebido (particularmente en
el caso de los experimentos).
4.4. Mtodo de la investigacinPara el trabajo de investigacin se
desarrollara 11 etapas:
ETAPA 01: COORDINACION CON LOS LABORATORIOS Se coordin con los
laboratorios para la esterilizacin de los materiales e insumos,
mediante documentacin.
ETAPA 02: ADQUISICION DE INSUMOS E INSTRUMENTOS DE LABORATORIOSe
compr todos los instrumentos e insumos que se necesit para el
desarrollo del presente proyecto de investigacin.
ETAPA 03: FORRADO DE LOS MATERIALES PARA LA ESTIRILIZACION El
forrado se realiz con el papel kraft, la forma de forrado vari de
acuerdo a la forma de los materiales. En el caso del almidn se
necesit pesar 1.56 gr y fue forrado con papel aluminio para su
posterior esterilizacin en el horno. En el caso de los matraces,
primero se prepar el agar nutritivo para hidratar a una
concentracin de 1.84 de agar / 80ml de agua destilada. En este
proceso con el papel kraft se cubri los materiales de vidrio como
los Matraces, vasos de precipitacin, pipetas, varillas de agitacin,
probetas y cajas Petri. Los tubos de ensayos fueron llenados con
18.8 ml de solucin salina y luego se procedi a la
esterilizacin.
ETAPA 04: ESTERILIZACIO DE LOS MATERIALES Las placas Petri y el
almidn fueron esterilizados en horno a 160 C por 2 horas. Los dems
insumos e instrumentos fueron esterilizado en autoclave a 121 C por
20 minutos.
ETAPA 05: OBTENCION DE LA MUESTRA DE LIXIVIADO
Para poder obtener la muestra se construy un muestreador
artesanal, mediante el uso de un cucharon de aluminio, un listn de
madera, jebes de llanta, lata y alambre. La tcnica de muestreo
seleccionado fue al azar y por atributo, debido a la ubicacin
geogrfica y a la inaccesibilidad del lixiviado. Se ubic los puntos
de muestreo. Luego con el muestreador artesanal, se procedi a sacar
las muestra de la parte superficial, media y baja de cada punto de
muestreo del lixiviado, el cual cada extraccin de muestras fueron
colocadas en un recipiente y mezcladas, para ir obteniendo una
mezcla homognea de las muestras. Una vez obtenida la muestra se
procedi a colocarlo en una bolsa ziploc y se transport para su
refrigeracin.
ETAPA 06: PRACTICA EN LABORATORIO Preparacin del alcohol
yodadoSe prepar 240 ml de alcohol yodado, con proporcin de 3 a 1
(alcohol y agua destilada), y se desinfecto la mesa.
Licuacin del agar nutritivo para hidratarSe calent al agar hasta
su punto de ebullicin, evitando su solidificacin.
Incorporacin de los inductores a los medios de cultivo. Inductor
lecitina
Se desinfect el huevo con alcohol yodado y se rompi una pequea
capa del huevo dejando libre la membrana que cubre la clula. Luego
con el asa bacteriolgica se perfor la membrana y se vaco la clara
en un vaso de precipitacin, luego se procedi a vaciar la yema en un
vaso de precipitacin esterilizado. Y se agreg 1 ml de solucin
salina, para su extraccin.
Se extrajo 2.1 ml de yema para incorporarlo en el matraz con el
agar que debe encontrarse aproximadamente a 37C.
Inductor almidnEn ste proceso se extrajo 0.96 gr de almidn
esterilizado y se agreg al medio de cultivo el cual luego fue
agitado para la homogenizacin.
Inductor casenaSe esteriliz el tarro de leche con alcohol
yodado, luego con un cuchillo tambin esterilizado se procedi a
perforar el tarro de leche.Se vaci la leche en un vaso de
precipitacin esterilizado y con una pipeta se procedi a extraer 1.8
ml de leche, el cual fue agregado al matraz con el medio de
cultivo.
Inductor cloruro de mercurioSe pes 1.76 gr de cloruro de
mercurio (Hg Cl2) y se procedi a colocarlo en un papel aluminio el
cual posteriormente se agreg al agar, con el uso de EPP.
Los medios de cultivos fueron agitados hasta su hominizacin.
Incorporacin de las muestras con el mtodo de MacFarland.Se agreg
2 ml de lixiviado en un tubo de ensayo con solucin salina de 18,8
ml esterilizado obteniendo como muestra 10-1.
Luego para realizar la muestra 10-2 se extrajo 2ml de la muestra
10-1 y se agreg al siguiente tubo de ensayo, y as sucesivamente
hasta obtener las muestras de 10-3, 10-4, 10-5, 10-6.
Sembrado de la muestra en el medio de cultivo.Para este proceso
se realiz primero la separacin de las pipetas por nmero de muestra,
en este caso tomamos las muestras 10-3, 10-4, 10-5, 10-6.El
siguiente procedimiento se agreg el agar con inductor en las cajas
petri observando que se cubra toda la superficie de sta, logrando
una concentracin aproximadamente de 12.5 a 13.5 ml, luego se deja
que este se solidifique. Con el agar sobrante se coloc en tubos de
ensayo inclinados a 45. El siguiente procedimiento fue realizar el
sembrado de cada una de las muestra, siendo duplicados las muestras
10-4, 10-5.
El sembrado const del uso del asa de drigalski esterilizado, con
la pipeta se extrajo 0.5 ml de muestra de cada uno de los tubos de
ensayos y se coloc en las cajas petri con los inductores, y se
procedi al extendido con el asa de drigalski.
Incubacin de los medios de cultivo a temperatura ambiente.Se
incubo las cajas Petri a temperatura ambiente, por 5 das.
ETAPA 07: EJECUCION DEL PROYECTOEn la ejecucin del presente
proyecto de investigacin, se sigui los mismos pasos descritos en la
ETAPA 06, con la variacin en las disoluciones, la variacin del
inductor de metal pesado y no se aisl del inductor de
carbohidratos.
1. Se prepar el alcohol yodado.2. Se licu el agar nutritivo para
hidratar (156 ml), para los 3 inductores que se realiz.3. Se
extrajo los inductores:4. Para cada inductor se agreg las
siguientes concentraciones:Leche: 1.8 ml en 52 ml de agar. Huevo:
2.1 ml en 52 ml de agar.Hidrocarburo: 0.52 ml en 52 ml de agar.5.
Se vaci los inductores con el agar en cuatro (04) placas Petri para
cada inductor (a excepcin del hidrocarburo).6. Se realiz el mtodo
de MacFarland, y se sembr con las disoluciones de 10-5 y 10-6, cada
una con su duplicado y todo por superficie.7. Para la mezcla del
inductor de hidrocarburo, las placas Petri tenan que estar heladas;
se calent el agar con el inductor del hidrocarburo y rpidamente se
lo vaci sobre la placa helada; y se sembr en superficie con la
disolucin de 10-6 (para una sola placa). 8. Todas las placas
sembradas fueron envueltas con su papel kraft estril e incubados a
temperatura ambiente por 5 das, los monitoreos se realizaron cada
24 horas.
ETAPA 08: MEDICION DE LOS HALOSPara la medicin de los halos de
degradacin se us de un escalmetro se aplic la siguiente formula:HN
= HT - HCDnde:HN: Halo netoHT: Halo totalHC: Halo de colonia
Para la medicin de los halos de compuestos carbohidratados, se
agreg una gota de solucin de yodo para poder diferenciar el halo
formado.
ETAPA 09: AISLAMIENTO DE LOS ORGANISMOSSe determin mediante la
observacin las colonias con mayor dimetro de halo neto, luego se
esteriliz al asa bacteriolgica con el mechero, posteriormente con
el asa en punta se procedi a extraer una pequea cantidad de la
colonia de inters para luego ser aislado en los tubos de ensayo con
el agar sin inductor, todo este proceso se realiz con el debido
cuidado.
ETAPA 10: POSIBLE IDENTIFICACION DE LOS ORGANISMOS MEDIANTE
TINCION GRAM Para la identificacin, se extrajo con el asa
bacteriolgica una pequea muestra de las colonias presentes en los
tubos y se los extendi en presencia de mechero, posterior a eso se
procedi a la tincin:1. Se agreg cristal violeta sobre la muestra,
por un periodo de 1 minuto y 30 segundos. Y luego se lav.2.
Seguido, se agreg lugol por un periodo de 30 segundos; y luego se
lav. 3. Posteriormente se agreg alcohol (96) por un periodo de 1
minuto y 30 segundos, y se lo lav. 4. Luego se agreg safranina por
un periodo de 4 minutos, luego se lav y se lo seco al mechero.
Para su posible identificacin se observ en el microscopio a
100x, mediante la aplicacin del aceite de inmersin.
ETAPA 11: SISTEMATIZACIN DE LOS RESULTADOS EN EL INFORME
FINALDespus de concluir con el proyecto de investigacin, se procedi
con la sistematizacin de los datos en el informe final que ser
expuesto y presentado al docente del curso.
4.5. Poblacin y muestra PoblacinTodos los microorganismos
presentes en los lixiviados.
Muestra Todos los microorganismos factibles hacer aislados.
4.6. Tcnicas e instrumentos de recoleccin de datos4.6.1. Tcnicas
Anlisis cualitativo de los lixiviados. Anlisis de libros virtuales
referente al tema de investigacin Observacin directa de la zona de
estudio. Uso de los software ArcGIS y Google Earth Uso del internet
como herramienta para bsqueda de informacin referente al tema de
investigacin.
4.6.2. InstrumentosSe utilizaran los siguientes instrumentos
para la obtencin de los datos: Balanza analtica Libreta de campo
Cmara fotogrfica Microscopio Escalmetro
4.6.3. Criterios de validez y confiabilidad de los instrumentos
Validez de los Instrumentos: sern evaluados mediante la revisin de
sus mrgenes de error (ajuste tcnico y calibracin), tambin se har
una observacin minuciosa de la parte externa e interna de los
instrumentos. Confiabilidad de los instrumentos: en caso de los
instrumentos de laboratorio que sern usados, se solicitar el
certificado de verificacin para la obtencin de datos confiables y
seguros.
CAPITULO V: ANALISIS E INTERPRETACION DE RESULTADOS5.1.Anlisis
de datos
PARA LA PRACTICA EN LABORATORIO
COMPUESTOS LIPDICOS Tabla 01: Medicin de los halos de la placa
con disolucin 10-3PLACA CON DISOLUCIN 10-3
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
011,9 1,2 0.7
021,9 0,3 1.6
031,90,21.7
041,9 0,91
052,9 2,70.2
060,80,4 0.4
070,5 0,3 0.2
080,7 0,4 0.3
090,7 0,30.4
101,1 0,2 0.9
111,1 0,8 0.3
120,7 0,3 0.4
Fuente: elaboracin Propia 2014Tabla 02: Medicin de los halos de
la placa con disolucin 10-4
PLACA DE DISOLUCION 10 -4
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
000.60.20.4
012.80.931.87
02-0.20.2
03Fue absorbido0.830.83
3.12.90.352.55
043.22.161.04
05-Moho-
060.830.350.48
07-Moho-
08-Moho-
092.41.730.67
100.80.30.5
Fuente: Elaboracin Propia 2014
Tabla 03: Medicin de los halos de la placa con Disolucin 10-4
duplicado
PLACA DE DISOLUCION 10 -4 DUPLICADO
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
01-0.320.32
02-0.40.4
03-0.40.4
041.20.051.15
053.12.11
061.61.030.57
Fuente: Elaboracin Propia 2014
Tabla 04: Medicin de los halos de la placa de disolucin 10
-5PLACA DE DISOLUCION 10-5
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
012.3 0.7 1.6
021.30.9 0.4
032.6 2.3 0.3
041.4 1.30.1
052.61.61
Fuente: elaboracin propia 2014
Tabla 05: Medicin de los halos de la placa de Disolucin 10-5
duplicado
PLACA DE DISOLUCION 10-5 DUPLICADO
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
010.6 0.4 0.2
020.8 0.10.7
032.81.6 1.2
Fuente: elaboracin propia 2014
Tabla 06: Medicin de los halos de la placa de disolucin
10-6PLACA DE DISOLUCION 10-6
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
010.50.3 0.2
02-0.9 0.9
031.20.21
Fuente: elaboracin propia 2014
COMPUESTO CARBOHIDRATADOS
Tabla 07: Medicin de los halos de la placa con disolucin
10-3
PLACA CON DISOLUCIN 10-3
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
0110.620.38
020.90.680.22
030.50.340.16
Fuente: elaboracin propia 2014
Tabla 08: Medicin de los halos de la placa de disolucin 10 -3
duplicado
PLACA DE DISOLUCION 10-3
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
011266
0214113
031055
Fuente: elaboracin propia 2014
COMPUESTOS PROTEICOS
Tabla 09: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10
-4PLACA DE DISOLUCION 10 -4
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
000.70.30.4
010.650.440.21
021.51.360.14
Fuente: elaboracin propia 2014
Tabla 10: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10
-4
PLACA DE DISOLUCION 10 -4 DUPLICADO
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
0110.640.36
021.41.220.18
031.351.20.15
Fuente: elaboracin propia 2014
Tabla 11: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10
-5
PLACA DE DISOLUCION 10-5
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
012.291.30.99
020.930.70.23
031.71.50.20
Fuente: elaboracin propia 2014
Tabla 12: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10
-5
PLACA DE DISOLUCION 10-5 DUPLICADO
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
011.91.50.4
Fuente: elaboracin propia 2014
Tabla 13: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10
-6PLACA DE DISOLUCION 10-6
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
012.621.80.82
021.81.690.11
030.26
Fuente: elaboracin propia 2014
METAL PESADO
No se form ninguna colonia en los das de monitoreo.
PARA LA EJECUCION DEL PROYECTO
PARA COMPUESTOS LIPDICOS Tabla 14: Medicin de los halos de la
placa con disolucin 10 -5PLACA DE DISOLUCION 10-5
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
011.831.160.67
020.60.2730.327
Fuente: elaboracin propia 2014
Tabla 15: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10
-6PLACA DE DISOLUCION 10-6
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
011.1560.340.816
021.240.30.94
031.20.470.73
Fuente: elaboracin propia 2014
PARA COMPUESTOS PROTEICOSTabla 16: Medicin de los halos de la
placa con disolucin 10 -5PLACA DE DISOLUCION 10-5
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
01817
Fuente: elaboracin propia 2014
Tabla 17: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10
-6PLACA DE DISOLUCION 10-6
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
01MohoMohoMoho
Fuente: elaboracin propia 2014
PARA METALES PESADOS
Tabla 18: Medicin de los halos de la placa con disolucin 10
-6
PLACA DE DISOLUCION 10-6
N de ColoniasHalo total (cm)Halo de colonia (cm)Halo neto
(cm)
010.40.20.2
020.50.20.3
Fuente: elaboracin propia 2014
INDUCTORCOLONIAS FORMADASHALOS FORMADOSPOSIBLE ORGANISMO
Huevo (lpido)AbundanteGrandePseudomona
Leche (protena)MnimaMedianoBacillus
Almidn (carbohidrato)MnimaMedianoBacillus
Hidrocarburo (Metal pesado)MnimaMedianoPseudomona
Cuadro 02: Cuadro resumen
Fuente: elaboracin propia 2014
5.2.Prueba de la hiptesis5.2.1. Hiptesis general
Mediante la utilizacion de inductores en medios especificos se
logro aislar e indentificar microorganismos capaces de degradar y
transformar compuestos contaminantes.
5.2.2. Hiptesis especifica
En medios bsicos con la adicin de compuestos lipdicos
(lecitina), proteicos (casena), carbohidratos (Almidn) y metales
pesados (cloruro de mercurio o hidrocarburo) como inductores se
logr ensayar el aislamiento de microorganismos con caractersticas
de inters. Por factores de tiempo y falta de equipos de laboratorio
no se logr evaluar y probar la funcionalidad del lodo activo
conformado.
5.3.Discusin de resultados
Para compuestos lipdicosPara la identificacin de los organismos
presentes en el huevo, se encontr una cierta dificultad, pero segn
los descrito por VANDEVENNE C y ESCOLA M, menciona que el Bacillus
cereus produce lecitinasa, de manera que degrada lecitina de la
yema de huevo formando un halo de precipitado alrededor de sus
colonias, siendo los microorganismo mas comunes en la degradacin de
compuestos lopidicos y el manitol como medio nos permite la
diferenciacin de bacillus cereus, que es un microorganismo manitol
negativo, frente a la flora acompaante manitol positiva, que hace
que el rojo fenol del medio vire de rojo a amarillo.Asimismo, el
crecimiento de la flora acompaante se ve inhibido por la
polimixina, que no afecta al crecimiento bacillus cereus.
Para compuestos carbohidratosPara la medicin de los halos
formados por la degradacin de compuestos carbohidratos se aplic el
revelador lugol, se observ los diferentes tonos de colores; FLORES
CH; hace mencin que el almidn en contacto con el reactivo de Lugol
(disolucin de yodo y yoduro potsico) toma un color azul-violeta
caracterstico. Esa coloracin producida por el Lugol se debe a que
el yodo se introduce entre las espiras de la molcula de almidn. Por
lo tanto, no es una verdadera reaccin qumica, sino que se forma un
compuesto de inclusin que modifica las propiedades fsicas de esta
molcula, apareciendo la coloracin azul violeta.
BOLAOS N tambin hace mencin que ste proceso es usado para
determinar la presencia o alteracin de almidn u otros polisacridos.
La amilosa, el componente del almidn de cadena lineal, forma hlices
donde se juntan las molculas de yodo, formando un color azul oscuro
a negro. La amilopectina, el componente del almidn de cadena
ramificada, forma hlices mucho ms cortas, y las molculas de yodo
son incapaces de juntarse, obtenindose un color entre naranja y
amarillo.
Para compuestos proteicosDurante el primer da de monitoreo, en
la placa que contena inductor de leche (10-6) se encontr una
colonia de microorganismos, que problablemente sea un moho, segn la
investigacin realizada en la Universidad Nacional Abierta y a
Distancia, cuyo tema fue acerca de los mohos y levaduras, hace
mencin que los mohos realmente no se presentan en la leche cruda y
en algunos productos lcteos solo atacan la parte superficial que
est en contacto con el aire. Siendo esto una de las principales
causas de la existencia de dicho microorganismos en la placa.
Para metales pesados Despus de los cuatro das de muestreo, no se
observ la formacin de ningn halo, imposibilitando su medicin,
Snchez L, Senz E, hace mencin en su trabajo de investigacin
titulado Antispticos y Desinfectantes, al cloruro de mercurio, era
usado como desinfectante potente, siendo muy txico, y no se puede
usar en reas extensas de la piel, debido a su accin esencialmente
bacteriosttica y fungisttica.
Mediante el uso del hidrocarburo como inductor, se logr la
formacin de colonias de microrganismo capaces de transformar
metales pesados, segn la investigacin realizada por la Universidad
de Antofagasta. 2005. Contaminacin por hidrocarburo en la zona
costera de la ciudad de Antofagasta, hace mencin que los productos
derivados del Petrleo, en general son mezclas complejas de
hidrocarburos (HBC) tipo n-alcanos, alcanos ramificados, ciclo
alcanos e hidrocarburos aromticos (mono y polibencnicos), y pueden
contener metales pesados como Pb, V, Ni, Co, Fe.
CAPITULO VI: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.4. Conclusiones
Se concluye que si fue factible aislar microorganismos a aprtir
del lixiviado del botadero, capaces de degradar los diferentes
compuestos de interes como lipidos, proteinas, carbhidratos y
metales pesados, obteniendo como posibles identificaciones de
microorganismos mediante la coloracion gram los siguientes:- Para
lipidos: Pseudomona- Para proteinas: Bacillus- Para metal pesado:
Pseudomona- Carbohidrato: Bacillus
Repecto a los inductores estos fueron muy efectivos
permitiendonos obtener buenos resultados de acuerdo a la formacion
de colonias y la capacidad degradadora de estas, siendo el
hidrocarburo un buen inductor para el aislamiento de
microorganismos capaces de transformar metales pesados.
Ya una vez lograda el aislamiento, no se pudo probar la accion
de los microorganismos, ya que nos falto el tiempo y la
accesibilidad de ciertos insumos y materiales, no cumpliendo asi
con uno de los objetivos especificos.
5.5. Recomendaciones
Se recomienda la utilizacin de hidrocarburo como inductor de
metales pesados y no el cloruro de mercurio. Para la mejor obtencin
de resultados se implementara equipos modernos e insumos presentes
en el laboratorio. Para el aislamiento de microorganismos se debe
trabajar con materiales esterilizados, evitando as el desarrollo de
microrganismos ajenos a los de inters. Para la identificacin de
microorganismos se debera usar un microscan.
FUENTES DE INFORMACIN
LOAIZA NAVIA J. (2010). Modelacin el proceso de lodos activados
en la Planta de tratamiento de Aguas Residuales Noreste, Apodaca,
N.L.
LPEZ TORRES M, VELIZ E, FERNNDEZ GARCA LA et al. Tratamiento de
lodos. Una etapa necesaria dentro del proceso tecnolgico. Revista
CENIC. 2010; vol. 41: pp. 1-6.
SALAZAR L., CRESPI M., SALAZAR R. (2009) Tratamiento de aguas
residuales textiles mediante un biorreactor de membrana.
PABN S.; SUREZ J. Arranque y operacin a escala real de un
sistema de tratamiento de lodos activos para aguas residuales de
matadero revista ingeniera e investigacin vol. 29 no. 2, agosto de
2009; pg. (53-58).
GONZALES CRUZ, M 2010. Definicin de trminos bsicos.
Ley de recursos hidricos, Ley N 29338.
D.S. N 003-2010-MINAM
Ley General Del Ambiente - Ley N 28611, Artculo 121.- Del
vertimiento de aguas residuales.
BARAY A.(2006). Introduccin a la metodologa de la investigacin.
Edicin electrnica.
VAN DALEN DB y MEYER WJ. (1944). Manual de tcnica de
investigacin.
SNCHEZ CARLESSI H. y REYES MEZA C. (2006)
ALCARAZ JUAREZ A. (2008). Aislamiento E Identificacin De
Microorganismos En Lodos Activados.
BROCK. (2010). Biologa de los microorganismos.
ANEXOSAnexo 01: Matriz de Consistencia.
TITULOAISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS A PARTIR DE LIXIVIADOS DEL
BOTADERO MUNICIPAL PARA LA FORMACION DE LODOS ACTIVOS CON FINES DE
MITIGACION AMBIENTAL TARAPOTO 2014
PROBLEMAGENERALSera factible aislar microorganismos a partir del
lixiviado del botadero municipal para la formacin de lodos activos
con fines de mitigacin ambiental?
ESPECFICOSFacilitarn los inductores el aislamiento de
microorganismos a partir del lixiviado del botadero municipal?
Cmo probar el funcionamiento del lodo activo conformado por
microorganismos a partir del lixiviado del botadero municipal?
OBJETIVOSGENERALMediante la utilizacin de inductores en medios
especficos se aislaran e identificara microorganismos degradadores
y transformadores de compuestos contaminantes.
ESPECFICOSEvaluar los inductores para el aislamiento de
microorganismos a partir del lixiviado del botadero
municipal.Probar el funcionamiento del lodo activo en la mitigacin
ambiental.
HIPTESISH. GENERAL:
-Mediante la utilizacin de inductores en medios especficos se
aislaran e identificara microorganismos degradadores y
transformadores de compuestos contaminantes.H. ESPECFICA: -En
medios bsicos con la adicin de compuestos lipdicos (lecitina),
proteicos (lactosa), carbohidratos (Almidn) y metales pesados
(flor) como inductores se ensayara el aislamiento de
microorganismos con caractersticas de inters.-Mediante el principio
de la prueba del granulo anaerbicos ser factible evaluar y probar
la funcionalidad del lodo activo conformado.
VARIABLESINDEPENDIENTEInductores (Lecitina, almidn, lactosa y
cloruro de mercurio e hidrocarburo).DEFINICIN
CONCEPTUALElinductorsuele ser el sustrato de una ruta catablica, o
una molcula muy semejante al sustrato natural.DIMENSIONESCapacidad
para estimular la produccin de enzimas especficas.
INDICADORESEndo-enzimas.
Exo-enzimas.
DEPENDIENTEAislamiento de organismos degradadores y
transformadores de lpidos, carbohidratos, protenas y metales
pesados.Son colonias bacterianas perteneciente a una misma especie,
con capacidad degradadora y especficas. Crecimiento en medios
especficos.
Tolerancia a compuestos especficos.
-Dimetro del halo -Reduccin del sustrato.-Formacin mltiple de
colonias.
METODOLOGAEtapa 01: coordinacin con los laboratorios Etapa 02:
adquisicin de insumos e instrumentos de laboratorioEtapa 03:
forrado de los materiales para la esterilizacinEtapa 04:
esterilizacin de los materialesEtapa 05: obtencin de la muestra de
lixiviadoEtapa 06: practica en laboratorioEtapa 07: ejecucin del
proyectoEtapa 08: medicin de los halosEtapa 09: aislamiento de los
organismosEtapa 10: posible identificacin de los organismos
mediante tincin Gram Etapa 11: sistematizacin de los resultados en
el informe final
Fuente: Elaboracin propia 2014.
Anexo 02: Adquisicin de materiales de laboratorio
Materiales comprados por el grupo para la realizacin del
presente proyecto de investigacin.
Anexo 03: Monitoreo del halo formado Colonias formadas en el
agar con inductor de huevo (lesitina)
Anexo 04: Microorganismos gram aislados
Microorganismos encontrados en el inductor de huevo.
Microorganismos encontrados en el inductor de leche
Microorganismo rugoso encontrado en el inductor de metal pesado
(Hidrocarburo)
Microorganismo liso encontrado en el inductor de metal pesado
(Hidrocarburo)