Le point sur les Lymphomes de la Zone Marginale (LZM) E. Callet-Bauchu GFCH 04/02/2015
Le point sur les Lymphomes de la Zone Marginale (LZM)
E. Callet-Bauchu
GFCH 04/02/2015
GENERALITES Épidémiologiques Cliniques Diagnostic positif biologique
DONNEES CYTOGENETIQUES ET MOLECULAIRES Résultats des techniques conventionnelles Résultats des techniques de profiling Résultats des techniques de NGS CONCLUSION
GENERALITES Épidémiologiques Cliniques Diagnostic positif biologique
DONNEES CYTOGENETIQUES ET MOLECULAIRES Résultats des techniques conventionnelles Résultats des techniques de profiling Résultats des techniques de NGS CONCLUSION
Les Lymphomes B de la zone marginale
LZMS
MALT
LZMN
Les Lymphomes B de la zone marginale
~10% des LNH B
LZM
70% = MALT
20% = LZMS
10% = LZMN
Maladies rares
Physiopathologie: association à une stimulation Ag chronique
A G E N T S M I C R O B I E N S
Helicobacter Pilori Helicobacter Heilmannii Borrelia Burgdorferi Chlamydia Psittaci Campilobacter Jejuni HCV
MALT gastrique MALT cutané MALT conjonctival IPSID / MALT du grêle LZMS
A U T O A N T I G E N E S
Syndrome de Gougerot Söjgren Thyroïdite d’Hashimoto Pneunopathie intersticielle lymphoïde
MALT glandes salivaires MALT thyroïde MALT poumon
Hétérogène: Estomac (50%), poumon, peau, œil, conjonctives, glandes salivaires, I. grêle, etc… Splénomégalie isolée +/- hypersplénisme, atteinte médullo-sanguine: LZMS
Syndrome tumoral avec atteintes GG sus et sous diaphragmatiques: LZMN LZMS + atteintes GG (hors hile) = LZMS disséminé
Malt de plusieurs organes = MALT disséminé (1/4 des cas)
Atteintes multi-sites (rate, MO, GG, Malt): LZM disséminé
En commun: Absence de symptômes B Absence de facteurs de mauvais pronostic au diagnostic Evolution clinique indolente
Présentation clinique
MORPHOLOGIE: • Histologie : MALT, LZMN, LZMS • Cytologie seule: LZMS (envahissement médullo sanguin)
DIAGNOSTIC POSITIF BIOLOGIQUE
Caractéristiques communes (≠ des autres LNH B) Cellules de taille petite à moyenne Aspect centrocyte-like et/ou monocytoïde, villosités mb Colonisation des follicules Différenciation plasmocytaire
DIAGNOSTIC POSITIF BIOLOGIQUE
IMMUNOPHENOTYPAGE CELLULAIRE • Sur pièce d’exérèse, sur suspension cellulaire, sur SP, MO, etc • Par CMF, par HIC, etc
Caractéristiques communes (≠ des autres LNH B) CD19+, CD20+, CD27+, Igs M (pfs D) CD5-, CD10-, CD23-, CD43-, CD103-, FMC7 +/-, Cyclin D1- Score RMH/Matutès < 3
MORPHOLOGIE IMMUNOPHENOTYPAGE CELLULAIRE
DIAGNOSTIC POSITIF BIOLOGIQUE
CYTOGENETIQUE, BIOLOGIE MOLECULAIRE
Cytogénétique /FISH optionnelle - formes atypiques: . CD5+ . RMH/Matutès >3 - dg ≠ des LNH Spléniques: HCL, HCLv, LPL/WM, SDRPL - formes cliniques disséminées (MALT vs LZM S/N)
DIAGNOSTIC POSITIF BIOLOGIQUE
Statut mutationnel optionnel utilisation préférentielle des segments VH et VL lors du réarrangement VDJ des Ig
Absence de mutations somatiques Présence de mutations somatiques
Pré-CG
Centre Germinatif
Post-CG
Malt (gastrique, gl. Salivaires) VH1-69 LZMN VH4-34 LZMS VH3-23 VH1-2 VH4-34
GENERALITES Épidémiologiques Cliniques Diagnostic positif biologique
DONNEES CYTOGENETIQUES ET MOLECULAIRES Résultats des techniques conventionnelles: Caryotype +/- FISH Résultats des techniques de profiling: a-CGH/a-SNP Résultats des techniques de séquençage (NGS):
• Etudes génomiques: WGS, WES • Etudes transcriptomiques, fonctionnelles: RNA-Seq
CONCLUSION
GENERALITES Épidémiologiques Cliniques Diagnostic positif biologique
DONNEES CYTOGENETIQUES Résultats des techniques conventionnelles: caryotype +/- FISH Résultats des techniques de profiling Résultats des techniques de NGS
CONCLUSION
LNH Malt
LZMS
LZMN
Anomalies de structure de type translocations réciproques
Anomalies de nombre de type gains/délétions
Profils cytogénétiques
différents
1 2
MALT
MALT: distribution des anomalies selon les sites anatomiques
t(3;14)(p14;q32) [2005]
FOXP1-IgH
orbite: 20%
thyroïde: 50%
peau: 10%
+3 (11-75%) +18 (4-25%)
t(11;18)(q21;q21) [1989]
API2-Malt1 [1999]
poumon: 40%
estomac: 25%
orbite: 10%
t(1;14)(p22;q32) [1999]
BCL10-IgH
poumon: 9% intestin: 4%
t(14;18)(q32;q21) [2003]
IgH-Malt1
gl. salivaires 16% poumon: 9%
orbite: 7%
1
Dierlamm 1996
Ott, 2000
Solé 2000
Cunéo 2001
Lyon 2005
31 25 33 14 103
+3/+3q 78,3% 20% 30% 21% 37%
del7q 9% 8% 36% 21% 31%
+18/+18q 39% 8% 0% 0% 28%
del6q 26% 8% 6% 14% 19%
+12/+12q 21% 66% 6% 28% 15%
2 LZM non MALT
Incidence d’associations
Type d’associations
+3/+18
+3/7q
+3/+12
7q/+12
7q /+18
+12/+18
Non-MALT (103)
32 (31%)
19 (18%)
10 (10%)
6 (6%)
4 (4%)
4 (4%)
4 (4%)
LLC/LL (462)
8 (2%) 1 (<1%) 0 4 (1%) 0 0 5 (1%)
LCM (94)
1 (1%) 0 0 0 0 0 1 (1%)
LF (166)
12 (7%) 3 (2%) 0 1 (1%) 1 (1%) 1 (1%) 6 (4%)
Profil cytogénétique des LZM non MALT
Conclusions des données cytogénétiques
ANOMALIES CHROMOSOMIQUES DES LZM ≠ des autres LNH B ≠ entre eux: MALT, LZMS, LZMN similarités: +3, +18
GENERALITES Épidémiologiques Cliniques Diagnostic positif biologique
DONNEES CYTOGENETIQUES Résultats des techniques conventionnelles: Caryotype +/- FISH Résultats des techniques de profiling: a-CGH/a-SNP Résultats des techniques de séquençage (NGS):
• Etudes génomiques: WGS, WES • Etudes transcriptomiques, fonctionnelles: RNA-Seq
CONCLUSION
BLOOD,2011, 117,5, 1595
MALT 57 LZMS 134 LZMN 25 NS 2 ______ _________ MZL 218
Gene Chip Human Mapping 250 K
24% 18% 17% 16%
LZM = entité distincte au sein des LNH B
Genome-wide DNA profiling of MZL identifies subtype-specific lesions with an impact on the clinical outcome. A. Rinaldi & Col. BLOOD,2011, 117,5,
1595
LZM = 3 entités distinctes Fréquence des anomalies communes Présentation des anomalies communes
30%
20%
21%
15%
24%
Genome-wide DNA profiling of MZL identifies subtype-specific lesions with an impact on the clinical outcome. A. Rinaldi & Col. BLOOD,2011, 117,5,
1595
LZM = 3 entités distinctes Présence d’anomalies « spécifiques »
30%
26%
gènes impliqués
FOXP1 NFKBIZ
BCL6 TNFAIP3*
BCL2 MALT1 NFATC1
POT1 MIR29A MIR29B
IRF5
LF BCL2
LDGC BCL6
LCM CCND1
LZM ???????
Conclusions des données de profiling par a-CGH/a-SNP
ANOMALIES CHROMOSOMIQUES DES LZM ≠ des autres LNH B ≠ entre eux: MALT, LZMS, LZMN similarités: +3, +18 gènes impliqués?
GENERALITES Épidémiologiques Cliniques Diagnostic positif biologique
DONNEES CYTOGENETIQUES Résultats des techniques conventionnelles: Caryotype +/- FISH Résultats des techniques de profiling: a-CGH/a-SNP Résultats des techniques de séquençage (NGS):
• Etudes génomiques: WGS, WES • Etudes transcriptomiques, fonctionnelles: RNA-Seq
CONCLUSION
JEM,2012, 209,9, 1537
PLOS ONE,2013, 8,12,1
Leukemia, 2014, 28,1334
NGS (WES) gènes mutés dans LZMS?
Gènes mutés dans LZM et surtout des LZMS :
Gènes impliqués dans développement normal de la ZM - NOTCH (NOTCH1, NOTCH2, SPEN, DTX1) - NF-KB (IKBKB, TNFAIP3,MYD88, BIRC3,TRAF3,MAP3K14) - BCR - TLR
Gènes impliqués dans le remodelage de la chromatine Gènes impliqués dans la régulation transcriptionnelle
« spécifiques » des LZM
« spécifiques » des LZMS
45,8% del7q
30%
34,1%
Gènes impliqués dans développement normal de la ZM
Patients avec mutations de NOTCH2: meilleur pronostic
NF-KB Inactive NF-KB active
KLF2
- mutation
Accumulation de cel B ds ZM
KLF2g: mutations MYD88 mutation TP53
Trois groupes de LZMS selon statut mutationnel de KFL2
KLF2 m: IgVH1-2 del7q NOTCH2m NF-KB
KLF2 +/-: NOTCH2 +/-m NF-KB +/- BCR +/-
Conclusions des données de NGS (1)
LZM ≠ des autres LNH : mutations de NOTCH2
LZM ≠ entre eux : NOTCH2 et LMZS ++
Blood,2013, 122,24, 3899
Apports des données chromosomiques et génomiques
dans le démembrement des lymphomes spléniques
D’après NG. Bailey, Arch Pathol Lab Med 2012, 139, 1295
Conclusions des données de NGS (2)
GENERALITES Épidémiologiques Cliniques Diagnostic positif biologique
DONNEES CYTOGENETIQUES Résultats des analyses conventionnelles Résultats des analyses de a-CGH/a-SNP Résultats des analyses en NGS
CONCLUSION
MALT + LZMS + LZMN = même entité = LZM - pour: AC communes, AC ≠ des autres LNH B - contre: profils CG ≠, statut mut ≠
?voie de signalisation commune
LLC del13q +12 del11q de17p
LF t(14;18) del6q +7 +18 del17p
LCM t(11;14) +3 del13q del1p del17p
MW +4 del6q del13q +18
+3 +18
MZLN
MALT
MZLS
NOTCH2
MYD88
CONCLUSION
t(11;18) t(14;18) t(3;14) t(1;14)
del7q del6q
VH4-34
VH1-2 VH3-23 VH4-34
VH1-69