PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI BILIRUBIN & PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI UROBILIN Juni 10, 2012 mitsukoraynzz Tinggalkan Komentar LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA KLINIK PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI BILIRUBIN & PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI UROBILIN DI SUSUN OLEH : Maulina (0801027) Kelompok II A (Ganjil) Tanggal praktikum: 18 April 2012 Dosen: Dra. Sylvia Hasti, M.Farm., Apt Asisten : 1. Mela Afryyanna 2. Yelvi Rahmi PROGRAM STUDI S1 FARMASI SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI RIAU YAYASAN UNIVERSITAS RIAU 2012 PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI BILIRUBIN Tujuan : Untuk menentukan adanya bilirubin dalam urine Tinjauan Pustaka Definisi Bilirubin : Bilirubin ( sebelumnya disebut sebagai hematoidin ) adalah produk rincian kuning normal hemekatabolisme. Heme ditemukan dalam hemoglobin, komponen utama dari sel darah merah . Bilirubin diekskresikan dalam empedu dan urin , dan
80
Embed
Laporan Praktikum Kimia Klinik 4 (Pemeriksaan Kadar Bilurubin)
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI BILIRUBIN & PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI UROBILINJuni 10, 2012 mitsukoraynzz Tinggalkan Komentar
LAPORAN PRAKTIKUMBIOKIMIA KLINIKPEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI BILIRUBIN&PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI UROBILIN
DI SUSUNOLEH :Maulina (0801027)Kelompok II A (Ganjil)
Tanggal praktikum: 18 April 2012Dosen: Dra. Sylvia Hasti, M.Farm., AptAsisten : 1. Mela Afryyanna2. Yelvi Rahmi
PROGRAM STUDI S1 FARMASISEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI RIAUYAYASAN UNIVERSITAS RIAU2012PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI BILIRUBIN
Tujuan :Untuk menentukan adanya bilirubin dalam urineTinjauan PustakaDefinisi Bilirubin :
Bilirubin ( sebelumnya disebut sebagai hematoidin ) adalah produk rincian kuning normal hemekatabolisme. Heme ditemukan dalam hemoglobin, komponen utama dari sel darah merah . Bilirubin diekskresikan dalam empedu dan urin , dan peningkatan kadar dapat mengindikasikan penyakit tertentu.Hal ini bertanggung jawab untuk warna kuning memar , warna kuning air seni (melalui produk pemecahan direduksi, urobilin ), warna coklat dari kotoran (melalui konversi kepada stercobilin ), dan perubahan warna kuning pada penyakit kuning .
Bilirubin Secara Kimia :Bilirubin terdiri dari sebuah rantai terbuka dari empat pirol -seperti cincin ( tetrapyrrole ). Dalam heme , sebaliknya, keempat cincin yang terhubung ke sebuah
cincin yang lebih besar, yang disebut porfirincincin.Bilirubin adalah sangat mirip dengan pigmen phycobilin digunakan oleh ganggang tertentu untuk menangkap energi cahaya, dan untuk pigmen fitokrom digunakan oleh tanaman untuk merasakan cahaya.Semua ini mengandung rantai terbuka empat cincin pyrrolic.Seperti ini pigmen lainnya, beberapa ganda obligasi di bilirubin isomerize ketika terkena cahaya. Ini digunakan dalam fototerapi dari bayi kuning:. E, Z-isomer bilirubin yang terbentuk setelah terpapar cahaya lebih larut daripada, Z unilluminated Z-isomer, sebagai kemungkinan ikatan hidrogen intramolekul akan dihapus Hal ini memungkinkan ekskresi bilirubin tak terkonjugasi dalam empedu.Beberapa buku teks dan artikel penelitian menunjukkan isomer geometris salah bilirubin. Para isomer alami adalah Z, Z-isomer.Fungsi bilirubin :Bilirubin dibuat oleh aktivitas reduktase biliverdin pada biliverdin , pigmen empedu hijau tetrapyrrolic yang juga merupakan produk katabolisme heme.Bilirubin, ketika teroksidasi, beralih menjadi biliverdin sekali lagi. Siklus ini, selain demonstrasi aktivitas antioksidan ampuh bilirubin, telah menyebabkan hipotesis bahwa peran utama fisiologis bilirubin adalah sebagai antioksidan seluler
Pemeriksaan bilirubin :Pemeriksaan bilirubin dalam urin berdasarkan reaksi antara garam diazonium dengan bilirubin dalam suasana asam, yang menimbulkan warna biru atau ungu tua. Garam diazonium terdiri dari p-nitrobenzene diazonium dan p-toluene sulfonate, sedangkan asam yang dipakai adalah asam sulfo salisilat.Adanya bilirubin 0,05-1 mg/dl urin akan memberikan basil positif dan keadaan ini menunjukkan kelainan hati atau saluran empedu. Hasil positif palsu dapat terjadi bila dalam urin terdapat mefenamic acid, chlorpromazine dengan kadar yang tinggi sedangkan negatif palsu dapat terjadi bila urin mengandung metabolit pyridium atau serenium.
Metabolisme bilirubinEritrosit secara fisiologis dapat bertahan/ berumur sekitar 120 hari, eritrosit mengalami lisis 1-2×108 setiap jamnya pada seorang dewasa dengan berat badan 70 kg, dimana diperhitungkan hemoglobin yang turut lisis sekitar 6 gr per hari. Sel-sel eritrosit tua dikeluarkan dari sirkulasi dan dihancurkan oleh limpa. Apoprotein dari hemoglobin dihidrolisis menjadi komponen asam-asam aminonya.Katabolisme heme dari semua hemeprotein terjadi dalam fraksi mikrosom sel retikuloendotel oleh sistem enzym yang kompleks yaitu heme oksigenase yang merupakan enzym dari keluarga besar sitokrom P450. Langkah awal pemecahan gugus heme ialah pemutusan jembatan α metena membentuk biliverdin, suatu tetrapirol linier.Besi mengalami beberapa kali reaksi reduksi dan oksidasi, reaksi-reaksi ini memerlukan oksigen dan NADPH. Pada akhir reaksi dibebaskan Fe3+ yang dapat digunakan kembali, karbon monoksida yang berasal dari atom karbon jembatan metena dan biliverdin. Biliverdin, suatu pigmen berwarna hijau akan direduksi oleh biliverdin reduktase yang menggunakan NADPH sehingga rantai metenil menjadi rantai metilen antara cincin pirol III – IV dan membentuk pigmen berwarna kuning yaitu bilirubin. Perubahan warna pada memar merupakan petunjuk reaksi degradasi ini.
Dalam setiap 1 gr hemoglobin yang lisis akan membentuk 35 mg bilirubin. Pada orang dewasa dibentuk sekitar 250–350 mg bilirubin per hari, yang dapat berasal dari pemecahan hemoglobin, proses erytropoetik yang tidak efekif dan pemecahan hemprotein lainnya. Bilirubin dari jaringan retikuloendotel adalah bentuk yang sedikit larut dalam plasma dan air. Bilirubin ini akan diikat nonkovalen dan diangkut oleh albumin ke hepar. Dalam 100 ml plasma hanya lebih kurang 25 mg bilirubin yang dapat diikat kuat pada albumin. Bilirubin yang melebihi jumlah ini hanya terikat longgar hingga mudah lepas dan berdiffusi ke jaringan.Bilirubin I (indirek) bersifat lebih sukar larut dalam air dibandingkan dengan biliverdin. Pada reptil, amfibi dan unggas hasil akhir metabolisme heme ialah biliverdin dan bukan bilirubin seperti pada mamalia. Keuntungannya adalah ternyata bilirubin merupakan suatu anti oksidan yang sangat efektif, sedangkan biliverdin tidak. Efektivitas bilirubin yang terikat pada albumin kira-kira 1/10 kali dibandingkan asam askorbat dalam perlindungan terhadap peroksida yang larut dalam air. Lebih bermakna lagi, bilirubin merupakan anti oksidan yang kuat dalam membran, bersaing dengan vitamin E.Di hati, bilirubin I (indirek) yang terikat pada albumin diambil pada permukaan sinusoid hepatosit oleh suatu protein pembawa yaitu ligandin. Sistem transport difasilitasi ini mempunyai kapasitas yang sangat besar tetapi penggambilan bilirubin akan tergantung pada kelancaran proses yang akan dilewati bilirubin berikutnya. Bilirubin nonpolar (I / indirek) akan menetap dalam sel jika tidak diubah menjadi bentuk larut (II / direk). Hepatosit akan mengubah bilirubin menjadi bentuk larut (II / direk) yang dapat diekskresikan dengan mudah ke dalam kandung empedu. Proses perubahan tersebut melibatkan asam glukoronat yang dikonjugasikan dengan bilirubin, dikatalisis oleh enzym bilirubin glukoronosiltransferase. Hati mengandung sedikitnya dua isoform enzym glukoronosiltransferase yang terdapat terutama pada retikulum endoplasma. Reaksi konjugasi ini berlangsung dua tahap, memerlukan UDP asam glukoronat sebagai donor glukoronat. Tahap pertama akan membentuk bilirubin monoglukoronida sebagai senyawa antara yang kemudian dikonversi menjadi bilirubin diglukoronida yang larut pada tahap kedua.
Eksresi bilirubin larut ke dalam saluran dan kandung empedu berlangsung dengan mekanisme transport aktif yang melawan gradien konsentrasi. Dalam keadaan fisiologis, seluruh bilirubin yang diekskresikan ke kandung empedu berada dalam bentuk terkonjugasi (bilirubin II).
Masalah Klinis :Bilirubin Total, Direk• Peningkatan Kadar : ikterik obstruktif karena batu atau neoplasma,hepatitis , sirosis hati, mononucleosis infeksiosa, metastasis (kanker) hati, penyakit Wilson. Pengaruh obat : antibiotic (amfoterisin B, klindamisin, eritromisin, gentamisin, linkomisin, oksasilin, tetrasiklin), sulfonamide, obat antituberkulosis ( asam para-aminosalisilat, isoniazid), alopurinol, diuretic (asetazolamid, asam etakrinat), mitramisin, dekstran, diazepam (valium), barbiturate, narkotik (kodein, morfin, meperidin), flurazepam, indometasin, metotreksat, metildopa, papaverin, prokainamid, steroid, kontrasepsi oral, tolbutamid, vitamin A, C, K.• Penurunan Kadar : anemia defisiensi besi. Pengaruh obat : barbiturate, salisilat (aspirin), penisilin, kafein dalam dosis tinggi.
Bilirubin indirek• Peningkatan Kadar : eritroblastosis fetalis, anemia sel sabit, reaksi transfuse, malaria, anemia pernisiosa, septicemia, anemia hemolitik, talasemia, CHF, sirosis terdekompensasi, hepatitis. Pengaruh obat : aspirin, rifampin, fenotiazin (lihat biliribin total, direk)• Penurunan Kadar : pengaruh obat (lihat bilirubin total, direk)
Metoda :I. Percobaan Hariison1. Prinsip :BaCl2 bereaksi dengan sulfat dalam urine membentuk endapan BaSO4 dan bilirubin menempel pada molekul ini. FeCl3 mengoksidasi bilirubin menjadi :Bilivardin warna hijauBilicyanin warna biruCholatelen warna kuning2. Pembuatan reagen• Reagen fauchet0.9 g FeCl3 di larutkan dalam trikhloracetat 25% sampai 100 ml.• Larutan BaCl2 10%
3. Cara pemeriksaan 5 ml urine di masukkan dalam tabung reaksi Tambahkan 5 ml BaCl2 10%, campur, kemudian saring dengan kertas saring. Presipitat pada kertas saring di biarkan sampai kering. Tambahkan 1 tetes reagen fouchet pada presipitat4. Pengamatan hasilPositif bila timbul warna hijau atau biru kehijauan5. Sensitifitas0.05 – 0.1 mg billirubin dalam urine.
II. Percobaan HawkinsonCara ini menggunakan kertas saring yang tebal (shlesinger atau schull nomor 470) yang direndam dalam BaCl2 jenuh, kemudian kertas saring di keringkan. Potong kertas saring berukuran 4 x ½ inci
1. Cara periksaana. Pada potongan kertas saring yang mengandung BaCl2 di teteskan urine beberapa tetes.b. Biarkan selama 3 detik sampai 2 menit.c. Teteskan 2-3 tetes reagen fouchet.2. Pengamatan hasilPositif bila terbentuk warna hijau3. Keterangan• Pemeriksaan billirubinuria harus menggunakan urine segar, <4 jam, karena billirubin akan teroksidasi, sehingga menghasilkan falsa negatif, terutama bila terkena cahaya.• Percobaan howkinson lebih cepat dan sederhana dibandingkan percobaan harrison.
Hasil
Pada percobaan harrison dan hawkinson tidak ditemukan adanya bilirubin karena hasil yang didapat tidak menunjukkan warna kehijauan
PembahasanPada praktikum pemeriksaan urine atas indikasi bilirubin ini harus menggunakan urine sampel segar yang kurang dari 4 jam, hal ini dikarenakan bilirubin akan teroksidasi jika terlalu lama dan apalagi terpapar oleh cahaya. Sehingga akan menghasilkan nilai yang falsa negatif.Pada percobaan Harrison ini mula-mula sampel urine coba (yang mengandung sulfat didalamnya) diberikan dahulu BaCl2, hingga BaCl2 bereaksi dengan sulfat dalam urine hingga membentuk endapan BaSO4. Kemudian disaring dengan kertas saring untuk memperoleh presipitat. Setelah itu presipitat di atas kertas saring dibiarkan mengering dan bilirubin menempel pada molekul ini. Baru diberikan reagen fauchet yang terkandung FeCl3 didalam larutannya. Hingga FeCl3 mengoksidasi bilirubin menjadi :Bilivardin warna hijauBilicyanin warna biruCholatelen warna kuningPada pemeriksaan bilirubin dengan menggunakan metode Hawkinson ini kita menggunakan kertas saring yang tebal yaitu kertas saring shlesinger atau schull nomor 470 yang telah direndam dalam BaCl2 jenuh, kemudian kertas saring di keringkan. Potong kertas saring berukuran 4 x ½ inci. Lalu pada potongan kertas saring yang mengandung BaCl2 ini di teteskan urine beberapa tetes. Biarkan selama 3 detik sampai 2 menit. Baru diteteskan 2-3 tetes reagen fouchet. Dan didapati hasil berupa warna kuning. Hal ini menandakan negatif bilirubin karena tidak terbentuk hasil berwarna hijau.Untuk mengamati warna positif bilirubin kita dapat membandingkan dengan hasil punya teman yang positif. Hal ini akan mendapatkan perbedaan warna yang signifikan.Pemeriksaan Harrison sangatlah lama dikarenakan menunggu presipitat nya mengering barulah ditetesi oleh reagen fauchet. Tapi tidak pada Hawkinson karena kertas saring ini sudah didapat kertas saring yang jenuh dengan BaCl2.Kenaikan ringan pada bilirubin dapat disebabkan oleh:• Hemolisis atau pemecahan peningkatan sel darah merah• Sindrom Gilbert – kelainan genetik metabolisme bilirubin yang dapat mengakibatkan penyakit kuning yang ringan, ditemukan pada sekitar 5% dari populasi
• Rotor sindrom : non-gatal sakit kuning, dengan kenaikan bilirubin dalam serum pasien, terutama dari jenis yang terkonjugasi.Kenaikan bilirubin sedang dapat disebabkan oleh:• Farmasi obat (terutama antipsikotik , beberapa hormon seks , dan berbagai obat lain)• Sulfonamid adalah kontraindikasi pada bayi kurang dari 2 bulan (kecuali bila digunakan dengan pirimetamin dalam mengobati toksoplasmosis ) karena mereka meningkatkan bilirubin tak terkonjugasi menyebabkan kernikterus .• Hepatitis (tingkat mungkin sedang atau tinggi)• Kemoterapi• Bilier striktur (jinak atau ganas)
Sangat tinggi kadar bilirubin dapat disebabkan oleh:• Neonatal hiperbilirubinemia , dimana hati bayi baru lahir tidak mampu untuk memproses bilirubin menyebabkan penyakit kuning• Obstruksi saluran empedu yang luar biasa besar, batu misalnya di saluran empedu, tumor menghalangi saluran empedu dll• Hati yang berat kegagalan dengan sirosis (misalnya sirosis bilier primer )• Crigler-Najjar sindrom• Dubin-Johnson syndrome• Choledocholithiasis (kronis atau akut).
KesimpulanPada percobaan harrison dan hawkinson tidak ditemukan adanya bilirubin karena hasil yang didapat tidak menunjukkan warna kehijauan. Negatif bilirubin
PEMERIKSAAN URINE ATAS INDIKASI UROBILIN(PERCOBAAN SCHLESINGER)TujuanUntuk menentukan adanya urobilin dalam urinePrinsipUrobilin dengan reagen schlesinger membentuk suatu kompleks dengan memberikan flouresensi hijau.Tinjauan PustakaDefinisi urobilin :Urobilin adalah pigmen alami dalam urin yang menghasilkan warna kuning. Ketika urin kental, urobilin dapat membuat tampilan warna oranye-kemerahan yang intensitasnya bervariasi dengan derajat oksidasi, dan kadang-kadang menyebabkan kencing terlihat merah atau berdarah.Banyak tes urin (urinalisis) yang memantau jumlah urobilin dalam urin karena merupakan zat penting dalam metabolisme/ produksi urin. Tingkat urobilin dapat memberikan wawasan tentang efektivitas fungsi saluran kemih.Urobilinogen adalah larut dalam air dan transparan produk yang merupakan produk dengan pengurangan bilirubin dilakukan oleh interstinal bakteri . Hal ini dibentuk oleh pemecahan hemoglobin. Sementara setengah dari Urobilinogen beredar kembali ke hati, setengah lainnya diekskresikan melalui feses sebagai urobilin. Ketika pernah ada kerusakan hati, kelebihan itu akan dibuang keluar melalui ginjal. Ini siklus ini dikenal sebagai Urobilinogen enterohepatik siklus . Ada dapat berbagai faktor yang dapat menghambat ini siklus . Salah satu alasan menjadi gangguan lebih dari hemoglobin
(hemolisis) karena malfungsi hati berbagai seperti hepatitis, sirosis. Ketika ini terjadi, Urobilinogen lebih diproduksi dan diekskresikan dalam urin. Pada saat seseorang menderita penyakit kuning, itu didiagnosa oleh warna kulit yang sedikit kuning dan warna kuning dari urin.Namun bila ada obstruksi pada saluran empedu, hal itu akan menyebabkan penurunan jumlah Urobilinogen dan ada lebih sedikit urobilin dalam urin. Lebih rendah jumlah urobilin Sof dapat disebabkan oleh hilangnya flora bakteri usus yang berperan dalam sintesa produk HTI.Untuk mendeteksi jenis kerusakan di hati, tes Urobilinogen dilakukan dengan mengukur kadar uribilinogendalam urin. Reaksi Aldehid Ehrlich adalah tes umum yang digunakan untuk menguji tingkat Urobilinogen.Sebuah benzaldehida dengan keberadaan asam berubah warna jika Urobilinogen hadir untuk warna merah merah muda. Diubah atau tidak adanya lengkap tingkat Urobilinogen biasanya menunjukkan disfungsi hati. Dan peningkatan tingkat petunjuk Urobilinogen urin ke warna merah darah Hemolisis sel. Tujuan utama dari tes ini adalah untuk membantu mengetahui penghalang hati tambahan seperti penyumbatan saluran empedu umum dan juga untuk memungkinkan hati serta gangguan hematologi.
Tingkat Urobilinogen dalam urin• Dalam urin: kisaran Urobilinogen normal adalah kurang dari 17 umol / L (<1mg/dl). Kisaran Urobilinogenukur adalah 0 – 8 mg / dl. Nilai Urobilinogen abnormal dapat menampilkan meningkat serta nilai-nilai rendah.• Peningkatan nilai adalah indikasi dari kerusakan RBC secara berlebihan, membebani hati, produksi Urobilinogen berlebih, hati yang berfungsi dalam batasan, hematoma, keracunan, sirosis hati, fungsi hati.• Nilai-nilai rendah adalah indikasi penyumbatan di bileducts dan kegagalan empedu produksi.
Pembentukan urobilin :Bilirubin terkonjugasi yang mencapai ileum terminal dan kolon dihidrolisa oleh enzym bakteri β glukoronidase dan pigmen yang bebas dari glukoronida direduksi oleh bakteri usus menjadi urobilinogen, suatu senyawa tetrapirol tak berwarna.Sejumlah urobilinogen diabsorbsi kembali dari usus ke perdarahan portal dan dibawa ke ginjal kemudian dioksidasi menjadi urobilin yang memberi warna kuning pada urine. Sebagian besar urobilinogen berada pada feces akan dioksidasi oleh bakteri usus membentuk sterkobilin yang berwarna kuning kecoklatan.
Pemeriksaan Urobilinogen :Pemeriksaan urobilinogen dengan reagens pita perlu urin segar. Dalam keadaan normal kadar urobilinogen berkisar antara 0,1 – 1,0 Ehrlich unit per dl urin.Peningkatan ekskresi urobilinogen urin mungkin disebabkan oleh kelainan hati, saluran empedu atau proses hemolisa yang berlebihan di dalam tubuh. Dalam keadaan normal tidak terdapat darah dalam urin, adanya darah dalam urin mungkin disebabkan oleh perdarahan saluran kemih atau pada wanita yang sedang haid. Dengan pemeriksaan ini dapat dideteksi adanya 150-450 ug hemoglobin per liter urin. Tes ini lebih peka terhadap hemoglobin daripada eritrosit yang utuh sehingga perlu dilakukan pula pemeriksaan mikroskopik urin. Hasil negatif palsu bila urin mengandung vitamin C lebih dari 10 mg/dl. Hasil positif palsu didapatkan bila urin mengandung oksidator seperti hipochlorid atau peroksidase dari bakteri yang berasal dari infeksi saluran kemih
atau akibat pertumbuhan kuman yang terkontaminasi.Dalam keadaan normal urin bersifat steril. Adanya bakteriura dapat ditentukan dengan tes nitrit. Dalam keadaan normal tidak terdapat nitrit dalam urin. Tes akan berhasil positif bila terdapat lebih dari 105 mikroorganisme per ml urin. Perlu diperhatikan bahwa urin yang diperiksa hendaklah urin yang telah berada dalam buli-buli minimal 4 jam, sehingga telah terjadi perubahan nitrat menjadi nitrit oleh bakteri. Urin yang terkumpul dalam buli-buli kurang dari 4 jam akan memberikan basil positif pada 40% kasus.Hasil positif akan mencapai 80% kasus bila urin terkumpul dalam buli-buli lebih dari 4 jam. Hasil yang negatif belum dapat menyingkirkan adanya bakteriurea, karena basil negatif mungkin disebabkan infeksi saluran kemih oleh kuman yang tidak mengandung reduktase, sehingga kuman tidak dapat merubah nitrat menjadi nitrit. Bila urin yang akan diperiksa berada dalam buli-buli kurang dari 4 jam atau tidak terdapat nitrat dalam urin, basil tes akan negatif.Kepekaan tes ini berkurang dengan peningkatan berat jenis urin. Hasil negatif palsu terjadi bila urin mengandung vitamin C melebihi 25 mg/dl dan konsentrasi ion nitrat dalam urin kurang dari 0,03 mg/dl.
Alat dan BahanAlat-alat : Pipet takar 5 ml/gelas ukur 10 ml. Pipet tetes Kertas saring Corong Tabung reaksi Rak tabungBahan: Zn (CH3COO)2 Alkohol 96% I2 KI Aquades Urine segar (urine sewaktu)
MetodaI. Pembuatan reagena. Reagen schlesinger10 g Zn (CH3COO)2 disespensikan dalam 100 ml alkohol 96%
b. Larutan lugol0.5 g I2 dan 1 g KI dilarutkan dalam air, setelah larut ditambahkan air sampai 150 ml.II. Cara pemeriksaana. 5 ml urine ditambah 2 tetes larutan lugolb. Tambahkan 7.5 ml reagen schlesinger, kemudian di kocok.
c. Saring sampai didapat filtrat yang jernihd. Filtrat diperiksa/dilihat dengan latar belakang hitam
III. Pengamatan hasilPositif bila didapat flourescensi hijau pada filtrat
Perbandingan filtrat negatif dengan filtrat positif.
PembahasanPada percobaan pemeriksaan urine atas indikasi urobilin ini, dimana sampel urine segar dimasukkan didalam tabung reaksi kemudian ditambahkan larutan lugol baru ditambah reagen schlesinger kemudian diaduk / dikocok homogen. Lalu disaring dengan kertas saring, jika hasil saringan keruh maka disaring kembali hingga didapatkan filtrat yang jernih.Kemudian setelah didapat filtrat yang jernih, lihatlah flouresensi filtrat dengan background yang gelap ( hitam ). Hasil positif jika terdapat flouresensi yang kehijauan, dan negatif jika tidak ada flouresensi hijau ( hasil praktikum negatif ). Dalam keadaan normal, selalu terdapat flourescensi hijau yang amat ringan. Bila hasil ragu-ragu harus dibandingkan dengan percobaan schlesinger pada urine normal.Daalam praktikum ini jika sampel urine yang akan diuji urobilinnya ini memiliki bilirubin dalam urine akan mengganggu pemeriksaan karena menyebabkan flourescensi merah muda. Oleh karena itu bila ada bilirubin maka harus dikeluarkan dengan CaCl2 dan Na2CO3.Filtrat yang diperoleh dan percobaan untuk billirubin menurut harrison tidak dapat dipakai untuk pemeriksaan urobilin. Menurut schlesinger karena urobilin akan diabsorbsi oleh endapan yang terjadi karena BaCl2 (dari reagen faucehet) oleh karena itu dalam reagen faucehet BaCL2 diganti dengan CaCl2 sehingga pemeriksaan billirubin menurut harrison dan pemeriksaan urobillin menurut schlesinger dapat dirangkap: filtrat untuk pemeriksaan schlesinger dan endapan untuk pemeriksaan bilirubin.Riboflavin (vitamin B2) yang terdapat dalam tablet atau injeksi B kompleks akan mempengaruhi fluoresensi hijau, tetapi fluoresensi telah tampak pada urine sebelum diberi reagen schlesinger.
Faktor yang Dapat Mempengaruhi Temuan Laboratorium1. Reaksi positif palsu• Pengaruh obat : fenazopiridin (Pyridium), sulfonamide, fenotiazin, asetazolamid (Diamox), kaskara, metenamin mandelat (Mandelamine), prokain, natrium bikarbonat, pemakaian pengawet formaldehid.• Makanan kaya karbohidrat dapat meninggikan kadar urobilinogen, oleh karena itu pemeriksaan urobilinogen dianjurkan dilakukan 4 jam setelah makan.• Urine yang bersifat basa kuat dapat meningkatkan kadar urobilinogen; urine yang dibiarkan setengah jam atau lebih lama akan menjadi basa.2. Reaksi negatif palsu• Pemberian antibiotika oral atau obat lain (ammonium klorida, vitamin C) yang mempengaruhi flora usus yang menyebabkan urobilinogen tidak atau kurang terbentuk dalam usus, sehingga ekskresi dalam urine juga berkurang.
• Paparan sinar matahari langsung dapat mengoksidasi urobilinogen menjadi urobilin.• Urine yang bersifat asam kuat.
KesimpulanTidak ditemukannya urobilin dalam sampel urine, hal ini ditunjukkan dengan hasil berwarna kuning bening. Dan dibandingkan dengan kelompok sebelah yang memberikan flouresensi hijau
DAFTAR PUSTAKA
Baron, D.N, 1990, Patologi Klinik, Ed IV, Terj. Andrianto P dan Gunakan J, Penerbit EGC, Jakarta.
Guyton, A.C, 1983, Buku Teks Fisiologi Kedokteran, edisi V, bagian 2, terjemahan Adji Dharma et al.,E.G.C., Jakarta.
PEMERIKSAAN BILIRUBIN DIRECT DAN TOTAL BILIRUBIN
Tujuan Untuk mengetahui kadar blirubin direct dan bilirubin total pasien
Metode Jenddrask Groff
Prinsip Bilirubin akan bereakdi dengan diazotized sulfanilic acid (DSA) membentuk zat warna merah, absorban zat warna merah ini pada 530 nm adalah proporsional terhadap konsentrasi bilirubin dalam saple. Bilirubin glukoronida yang larut dalam air bereaksi langsung (direk) dengan DSA, sedangkan bilirubin yang terikat pada albumin bereaksi tidak langsung/indirek dengan DSA.
Dasar Teori Bilirubin adalahpigmenkuning yang berasaldariperombakanhemedari hemoglobin dalam proses pemecahaneritrositolehselretikuloendotel. Di sampingitusekitar 20% bilirubin berasaldariperombakanzat-zat lain. Selretikuloendotelmembuat bilirubin tidaklarutdalam air; bilirubin yang disekresikandalamdarahharusdiikatkankepada albumin untukdiangkutdalam plasma menujuhati. Di dalamhati, hepatositmelepaskanikatanitudanmengkonjugasinyadenganasamglukoronatsehinggabersifatlarut air. Proses konjugasiinimelibatkanenzimglukoroniltransferase (anonim,2010).Bilirubin terkonjugasi (bilirubin glukoronidaatauhepatobilirubin) masukkesaluranempedudandiekskresikankeusus. Selanjutnya flora ususakanmengubahnyamenjadiurobilinogendandibuangmelaluifesessertasebagiankecilmelaluiurin. Bilirubin terkonjugasibereaksicepatdenganasamsulfanilat yang terdiazotasimembentukazobilirubin (reaksi van den Bergh), karenaituseringdinamakan bilirubin direkatau bilirubin langsung (anonim,2010).Bilirubin takterkonjugasi (hematobilirubin) yang merupakan bilirubin bebas yang
terikat albumin haruslebihduludicampurdenganalkohol, kafeinataupelarut lain sebelumdapatbereaksi, karenaitudinamakan bilirubin indirekatau bilirubin tidaklangsung (anonim,2010).Peningkatankadar bilirubin direkmenunjukkanadanyagangguanpadahati (kerusakanselhati) atausaluranempedu (batuatau tumor). Bilirubin terkonjugasitidakdapatkeluardariempedumenujuusussehinggaakanmasukkembalidanterabsorbsikedalamalirandarah (anonim,2010).Peningkatankadar bilirubin indirekseringdikaitkandenganpeningkatandestruksieritrosit (hemolisis), sepertipadapenyakithemolitikolehautoimun, transfusi, ataueritroblastosisfatalis. Peningkatandestruksieritrosittidakdiimbangidengankecepatankunjugasidanekskresikesaluranempedusehinggaterjadipeningkatankadar bilirubin indirek (anonim,2010).Hatibayi yang barulahirbelumberkembangsempurnasehinggajikakadar bilirubin yang ditemukansangattinggi, bayiakanmengalamikerusakanneurologispermanen yang lazimdisebutkenikterus. Kadar bilirubin (total) padabayibarulahirbisamencapai 12 mg/dl; kadar yang menimbulkankepanikanadalah> 15 mg/dl. Ikterikkerapnampakjikakadar bilirubin mencapai> 3 mg/dl. Kenikterustimbulkarena bilirubin yang berkelebihanlarutdalam lipid ganglia basalis (anonim,2010).Dalamujilaboratorium, bilirubin diperiksasebagai bilirubin total dan bilirubin direk. Sedangkan bilirubin indirekdiperhitungkandariselisihantara bilirubin total dan bilirubin direk. Metodepengukuran yang digunakanadalahfotometriatauspektrofotometri yang mengukurintensitaswarnaazobilirubin (anonim,2010).NilaiRujukan(anonim,2010)DEWASA : total : 0.1 – 1.2 mg/dl, direk : 0.1 – 0.3 mg/dl, indirek : 0.1 – 1.0 mg/dlANAK : total : 0.2 – 0.8 mg/dl, indirek : samadengandewasa.BAYI BARU LAHIR : total : 1 – 12 mg/dl, indirek : samadengandewasa.MasalahKlinis(anonim,2010)Bilirubin Total, DirekPENINGKATAN KADAR : ikterikobstruktifkarenabatuatauneoplasma, hepatitis, sirosishati, mononucleosis infeksiosa, metastasis (kanker) hati, penyakit Wilson. Pengaruhobat : antibiotic (amfoterisin B, klindamisin, eritromisin, gentamisin, linkomisin, oksasilin, tetrasiklin), sulfonamide, obatantituberkulosis ( asampara-aminosalisilat, isoniazid), alopurinol, diuretic (asetazolamid, asametakrinat), mitramisin, dekstran, diazepam (valium), barbiturate, narkotik (kodein, morfin, meperidin), flurazepam, indometasin, metotreksat, metildopa, papaverin, prokainamid, steroid, kontrasepsi oral, tolbutamid, vitamin A, C, K.PENURUNAN KADAR : anemia defisiensibesi. Pengaruhobat : barbiturate, salisilat (aspirin), penisilin, kafeindalamdosistinggi.Bilirubin indirekPENINGKATAN KADAR : eritroblastosis fetalis, anemia sel sabit, reaksi transfuse, malaria, anemia pernisiosa, septicemia, anemia hemolitik, talasemia, CHF, sirosis terdekompensasi, hepatitis. Pengaruh obat : aspirin, rifampin, fenotiazin (lihat biliribin total, direk)PENURUNAN KADAR : pengaruh obat (lihat bilirubin total, direk)
Faktor yang dapat mempengaruhi temuan laboratorium :Makan malam yang mengandung tinggi lemak sebelum pemeriksaan dapat mempengaruhi kadar bilirubin.
Wortel dan ubi jalar dapat meningkatkan kadar bilirubin.Hemolisis pada sampel darah dapat mempengaruhi hasil pemeriksaan.Sampel darah yang terpapar sinar matahari atau terang lampu, kandungan pigmen empedunya akan menurun.Obat-obatan tertentu dapat meningkatkan atau menurunkan kadar bilirubin.
KIMI KLINIK I (bilirubin direk dan total)
LABORATORIUM KIMIA FARMASI
TEKNOLOGI LABORATORIUM KESEHATAN
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS HASANUDDIN
PEMERIKSAAN FUNGSI HATI BILIRUBIN TOTAL DAN DIRECT
OLEH
NAMA : YAYOK ZAIREN
MAKASSAR
2011
BAB I
PENDAHULUAN
I.1 Latar Belakang
Banyak faal metabolik yang dilakukan oleh jaringan hati, maka ada banyak pula,
lebih dari 100, jenis test yang mengukur reaksi faal hati.' Semuanya, disebut sebagai
"tes faal hati “Sebenarnya hanya beberapa yang- benar-benar mengukur faal hati.1-3
Diantara berbagai tes tersebut tidak ada tes tunggal yang efektif mengukur faal hati
secara keseluruhan. Beberapa tes terlalu peka sehingga tidak khas, sebagian lagi
dipengaruhi pula oleh faktor - faktor di luar hati, sebagian lagi sudah obsolete.
Beberapa kriteria yang dapat dipakai adalah, antara lain, dapatnya dikerjakan tes
tersebut secara baik dengan sarana yang memadai, segi kepraktisan, biaya, stress yang
dibebankan kepada penderita, kemampuan diagnostik dari tes tersebut, dan lain-lain.
Pada pengujian kerusakan hati, gangguan biokimia yang terlihat adalah peningkatan
permeabilitas dinding sel, berkurangnya kapasitas sintesa, terganggunya faal ekskresi,
berkurangnya kapasitas penyimpanan, terganggunya faal detoksifikasi peningkatan
reaksi mesenkimal dan imunologi yang abnormal. Pada praktikum kali ini, dilakukan tes
kimiawi meliputi pemeriksaan bilirubin total dan direk yang dapat menunjang suatu
diagnosa terhadap adanya kelainan fungsi hati.
I.2 Maksud dan tujuan Percobaan
I.2.1 Maksud percobaan
Untuk memahami dan mempelajari cara pemeriksaan bilirubin total dan
bilirubin direk.
I.2.2 Tujuan percobaan
Tujuan dari percobaan ini adalah untuk mengetahui dan mengidentifikasi
kelainan pada fungsi hati dengan melihat kadar bilirubin total dan bilirubin direk.
I.3 Prinsip Percobaan
a. Bilirubin total
Mengidentifikasi adanya kelainan fungsi hati dengan pemeriksaan bilirubin total
dengan penambahan reagen bilirubin total dimana asam sulphanilic direaksiakan dengan
natrium nitrit menjadi diazotised sulphanilic acid (DSA) yang akan bereaksi dengan
bilirubin dan accelator membentuk zat warna azo.
Bilirubin direct
Mengidentifikasi adanya kelainan fungsi hati dengan pemeriksaan bilirubin
direct dengan penambahan reagen bilirubin direct dimana asam sulphanilic direaksiakan
dengan natrium nitrit menjadi diazotised sulphanilic acid (DSA) yang akan berikatan
dengan bilirubin dan membentuk direct azobilirubin.
BAB IITINJAUAN PUSTAKA
II.1 Teori UmumA. Anatomi Hati
Hati merupakan organ yang sangat penting dalam pengaturan homeostasis tubuh
yang meliputi metabolisme, biotransformasi, sintesis, penyimpanan dan imunologi. Dari
sudut pandang anatomi dan fisiologi, hati adalah organ terbesar dari sistem intestinal
dengan berat antara 1,2-1,8 kg atau kurang lebih 25% berat badan orang dewasa yang