LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR
LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAREAP Gentica y biotecnologa.
UNMSMPERMEABILIDAD CELULAR Y ORGANELAS PERMEABILIDAD CELULARLa
permeabilidad de las membranas es fundamental para el
funcionamiento de la clula viva y para el mantenimiento de
condiciones fisiolgicas intracelulares adecuadas. Esta funcin
determina qu sustancias pueden ingresar a la clula, muchas de las
cuales son necesarias para mantener los procesos vitales y la
sntesis de diversas sustancias. Tambin regula el pasaje de agua y
salida de productos de desecho que deben ser eliminados de la
clula. La permeabilidad de una membrana celular, depende de un
conjunto de factores que afectan el movimiento de solutos a travs
de los lpidos, como el tamao molecular del soluto. Las membranas
celulares a menudo se definen como selectivamente permeables debido
a que permiten que ciertos solutos la atraviesen por difusin con
mayor facilidad que otros. Una de las causas de permeabilidad
selectiva es la representacin relativa de los diferentes tipos de
canales inicos de una membrana. Por ejemplo si una membrana
contiene una alta densidad de canales de Na+ y una densidad
reducida de canales del Ca2+ ser ms permeable al Na+ que al
Ca2+.
ORGANELAS LISOSOMASLos lisosomas actan como organelos digestivos
de la clula. Dentro de un lisosoma tpico se encuentra confinado un
grupo de casi 50 enzimas hidrolticas diferentes, sintetizadas en el
RE rugoso y enviadas a esos organelos. En conjunto, las enzimas
lisosmicas son capaces de hidrolizar prcticamente cualquier tipo de
macromolcula biolgica para convertirla en productos de bajo peso
molecular que puedan ser transportados a travs de la membrana
lisosmica al interior del citoplasma. Las enzimas de un lisosoma
comparten una propiedad importante: todas tienen actividad ptima a
pH cido: son hidrolasas acidas.
MITOCONDRIASSon organelas de doble membrana y contienen una gran
cantidad de enzimas y coenzimas que participan en los procesos de
transformacin de energa, tales como la respiracin celar, ciclo de
Krebs, etc.
PLASTIDIOSSon organelas presentes en clulas vegetales, las
cuales se hallan ausentes en clulas animales, pueden ser
leucoplastos, que son incoloros y participan en el almacenamiento
de almidn y cromoplastos como los cloroplastos que contiene un
pigmento verde llamado clorofila.
OBJETIVOS
Reconocer a la permeabilidad de membrana como un fenmeno
importante para la fisiologa celular. Reconocer lisosomas y
mitocondrias mediante colorantes vitales. Observacin e
identificacin de cloroplastos.
MATERIALES
DEL ALUMNO Lminas y laminillas Hoja de afeitar Goteros Lanceta
estril Pinzas Alcohol Hojas de Elodea Bulbo de cebolla Algodn
DEL LABORATORIO Papel filtro Agua destilada Solucin de Verde de
Janus (1/10000) Solucin rojo neutro (1/20000) Soluciones salinas al
0,2%, 0,9% y 5% Cultivo de Protozoarios
PROCEDIMIENTO1. PERMEABILIDAD CELULARa) Clulas vegetalesSe
prepar muestras de epidermis de cebolla en una solucin salina al
5%, en 0,2% y al 0.9% , luego se observa en el microscopio con un
aumento total de 100X.b) Clulas animales Limpiamos y desinfectamos
la lanceta para luego obtener con ella muestras de sangre.
Colocamos 3 gotas de sangre, cada una en una lmina, luego le
agregamos las soluciones antes mencionadas y analizamos en el
microscopio a 400X.
2. ORGANELAS CELULARES
a) Observacin de lisosomasColocamos una gota de cultivo de
protozoarios en una lmina, cubrimos con una laminilla y luego
observamos al microscopio tratando de identificar unos pequeos
grnulos de color rojo o roza que vendran a ser los lisosomas.b)
Observacin de Mitocondrias Con una muestra de epitelio bucal
mediante raspado se realiza el frotis, dejamos secar para luego
cubrir la muestra con verde Janus por 5min. Luego eliminamos el
resto del colorante y posteriormente dejamos secar y observamos.c)
Observacin de Cloroplastos Elegimos una hoja de elodea y la
colocamos sobre una lmina que contiene una gota de agua. Con ayuda
del estilete la extendemos y luego cubrimos con una laminilla.
Observar la muestra.
CUESTIONARIO1. Defina plasmlisis, turgencia y
crenacin.a)PlasmlisisSe da cuando las clulas vegetales colocadas en
un medio hipertnico sufren una reduccin del volumen en funcin de la
prdida de agua debida al fenmeno de smosis, es decir, la membrana
celular se separa de la pared celular.b)CrenacinEs un fenmeno en
donde la clula animal se somete a una solucin hipertnica. Al estar
en esta solucin con gran cantidad de soluto, tiende a liberar su
agua, lo que conlleva a la destruccin de la clula se produce por
deshidratacin.c)TurgenciaOcurre con la clula vegetal en solucin
hipotnica, ya que ingresa agua y esta es almacenada en la vacuola,
donde la presin por turgencia es generada por la elevada presin
osmtica de la vacuola, haciendo que la clula aumente su volumen. 2.
Defina citosol, estroma y matriz. CitosolEs la parte liquida del
citoplasma y constituye el verdadero medio interno celular, ya que
contiene las principales estructuras vinculadas con la forma y el
movimiento de la clula, en el tienen lugar a la sntesis proteica y
diversas actividades metablicas. EstromaEs la disolucin acuosa que
presentan los cloroplastos, donde estn contenidos los tilacoides,
enzimas, material gentico y donde se realizan diversas actividades
metablicas. MatrizConstituye el medio ambiente de los componentes
que hay en una clula, consta de una parte liquida, citosol, y otra
ms consistente que son estructuras como el sistema de
endomembranas, el complejo de Golgi, el citoesqueleto, etc.3. En qu
tipo de clulas vegetales encontraramos mayor cantidad de
cloroplastos y por qu?En las clulas del tejido del parnquima
clorofiliano o clornquima, ya que estos se encuentran en hojas y
tallos verdes de las plantas y es all donde se realiza la
fotosntesis.
CONCLUSIONES Reconocimos las clulas en soluciones hipotnicas e
hipertnicas y comparamos con las soluciones isotnicas. En
soluciones hipertnicas las membranas celulares se constrien debido
a que pierden agua. En las soluciones hipotnicas las clulas se
hinchan debido a que ingresa agua. Identificamos las mitocondrias
con un color verdoso debido a la tincin verde Janus. Reconocimos a
los lisosomas en los protozoos de un color rojo debido a la
coloracin. Los cloroplastos d la elodea se mueven gracias al
movimiento protoplsmico que presenta la clula.
BIBLIOGRAFA
Gerard J. Tortora, Berdell R. Funke, Christine L. Case.
Introduccin a la Microbiologa. 9 Edicin. Buenos Aires: Ed. Medica
Panamericana. Robertis, Hib, Ponzio. Biologa Celular y molecular.
Editorial El Ateneo. Argentina.
7