LA VALUTAZIONE DELL’Hb F NEL PERCORSO DIAGNOSTICO … · LA VALUTAZIONE DELL’Hb F NEL PERCORSO DIAGNOSTICO DELLE EMOGLOBINOPATIE Giannone Valentina Laboratorio di Genetica Medica

LA VALUTAZIONE DELL’Hb F NEL

PERCORSO DIAGNOSTICO DELLE

EMOGLOBINOPATIE

Giannone Valentina

Laboratorio di Genetica Medica

Emoglobina Fetale

Emoglobina Fetale

Emoglobina Fetale

1. Per l’inquadramento di disordini a carico dei geni globinici

2. Monitoraggio in soggetti affetti trattati con farmaci per l’induzione dell’Hb F

Perché si misura l’Hb F?

1. DENATURAZIONE ALCALINA

2. HPLC

3. SPETTROMETRIA DI MASSA

4. METODI CELLULARI (anticorpi

monoclonali e citometria a flusso)

Screening di I livello: Metodi analitici

L’unità di misura di Hb F è % sulla Hb totale

Presso la nostra Struttura si ritiene normale un valore di Hb F ≤1%

Esame/Analisi: EMOGLOBINA

FETALE

Sigla e sinonimi: HbF

Valori normali donna:

oltre 2 anni: 0 - 0.5

Valori normali uomo:

oltre 2 anni: 0 - 0.5

Unità di misura:% Hb tot

Metodo: HPLC

UNITA’ DI MISURA E VALORI

DI RIFERIMENTO

Unità di misura: %

Valori di riferimento: Hb fetale

dopo 2 anni 0.0-1.0

PRINCIPIO DEL METODO

Principio analitico: elettroforesi

capillare

Screening I livello: Intervallo di riferimento

Scheda esame:

ID: HBF

Nome: Emoglobina fetale

Unità di misura: %

VALORI DI RIFERIMENTO< 2.0

Metodica: HPLC

• DISORDINI ACQUISITI

• DISORDINI EREDITARI

Cause di aumento di Hb F

• MALATTIE DEL SANGUE (NON

NEOPLASTICHE)

• NEOPLASIE (leucemia mieloide

cronica/acuta… )

• CONDIZIONI ASSOCIATE A SPECIFICI

TRATTAMENTI TERAPEUTICI

• ALTRE CONDIZIONI (gravidanza,

insufficienza renale cronica,

ipertiroidismo..)

• SINDROMI TALASSEMICHE

• γ-TALASSEMIA

• ALTRE EMOGLOBINOPATIE (ANEMIA

FALCIFORME, HB C, HB LEPORE…)

Cause di aumento di Hb F nei disordini ereditari: geni γ globinici

Cause di aumento di Hb F: geni γ globinici

BCL11A binding site

VARIANTI BENIGNE HBG1

c.-548 T>A(rs57966301) c.*259 A>T(rs1143541)

c.*344G>A(rs147256314) c.-637G>A(rs2855039)

c.-29 G>A(rs368698783) c.*55delA(rs3841756)

c.93-58C>T(rs202216517) c.*246A>T(rs916111)

c.-275_-274insAGCA(rs561507744) c.*124 T>A(rs2402330)

c.-320C>T(rs12290216) c.-366A>G(rs2860456)

c.-418 G>C(rs2855040) c.-447G>A(rs35993903)

c.-69C>G(rs558015287)

VARIANTI BENIGNE HBG2

c.-437-121C>G (rs73402643)c.-437-13_-437-8delCTTTAA(rs112075505)c.-437-13C>T(rs531285196)c-422C>G(rs112215533)c.-362A>G(rs112479156)c-324T>C(rs113622787)c.-321G>C(rs904054277)c.-309A>G(rs1045222350)c.-69C>G(rs551623060)

HPFH-2

GR (106 /ml) 4.01

Hb (g/dL) 12.3

MCV (fL) 88.5

Hb A2 (%) 2.8

Hb F (%) 5.0

Cause di aumento di Hb F nei disordini ereditari: geni γ globinici

Aγ-158 C>T omo

GR (106 /ml) 4.50

Hb (g/dL) 12.7

MCV (fL) 81

Hb A2 (%) 2.5

Hb F (%) 31

La presenza di polimorfismi/varianti nei geni γ globinici non dà

informazioni aggiuntive alla condizione clinica

• Portatore sano di β-talassemia

GR (106 /ml) 5.39

Hb (g/dL) 11.2

MCV (fL) 62.3

Hb A2 (%) 5.7

Hb F (%) 2.3

Cod39 etero + Hb F Sardinia etero

GR (106 /ml) 5.26

Hb (g/dL) 10.7

MCV (fL) 63.7

Hb A2 (%) 6.2

Hb F (%) 6.6

Cod39 etero + Xmn1-HBG2 omo

QUANDO IL VALORE DI Hb F DIVENTA IMPORTANTE IN DIAGNOSTICA?

GR (106/ml) 5.50

Hb (g/dL) 12.5

MCV (fL) 65

Hb A2 (%) 2.8

Hb F (%) 11.1

DELEZIONE SICILIANA

Aumento di fetale in presenza di microcitemia• Talassemia


DELEZIONE ASSOCIATA AD ALFA (3.7 ETERO)

CON HbF 2.8%

GR (106/ml) 6.23

Hb (g/dL) 12.4

MCV (fL) 61.2

Hb A2 (%) 2.9

Hb F (%) 2.8

DELEZIONE ASSOCIATA

AD ALFA (NCO OMO) CON

HbF 2.5%

GR (106/ml) 6.4

Hb (g/dL) 13

MCV (fL) 65

Hb A2 (%) 3.0

Hb F (%) 2.5

Il mancato aumento di fetale rispetto all’atteso avrebbe potuto

portare ad un errore diagnostico

• Talassemia


• Talassemia Intermedia

GR (106/ml) 3.85

Hb (g/dL) 9.2

MCV (fL) 62.2

Hb A2 (%) 7.1

Hb F (%) 5.7

IVS I-6 OMOZIGOTE

GR (106/ml) 5.85

Hb (g/dL) 9.5

MCV (fL) 52.2

Hb A2 (%) 9.1

Hb F (%) 4.4

-101/IVS I-1


• Genotipi complessi

GR (106 /ml) 5.19

Hb (g/dL) 9.6

MCV (fL) 59.3

Hb A2 (%) 4.5

Hb F (%) 3.5

Cod 39+ ααα

GR (106/ml) 5.22

Hb (g/dL) 12.3

MCV (fL) 71.8

Hb A2 (%) 2.3

Hb F (%) 5.2

Cod 6(-A) eterozigote+ Sindrome

di Gilbert (UGTA1:TA[7]/TA[7])

GR (106 /ml) 5.50

Hb (g/dL) 9.5

MCV (fL) 65

Hb A2 (%) 4.1

Hb F (%) 4.2

--MED+ Xmn1-HBG2


• DIFETTI DI MEMBRANA DEI GR

• DIFETTI ENZIMATICI DEI GR

• ANEMIE DISERITROPOIETICHE

Pannello NGS per Anemie Emolitiche Rare

Haematologica. 2018;103 doi:10.3324/haematol.2018.201160

Kruppel Like Factor 1 (KLF1)

Blood 2016 127:1856-1862; doi: https://doi.org/10.1182/blood-2016-01-694331



GR (106 /ml) 4.6

Hb (g/dL) 12

MCV (fL) 77.8

Hb A2 (%) 3.1

Hb F (%) 2.1

-α3.7 etero

KLF1:c.809C > A etero, p.Ser270Ter

La mutazione su KLF1 giustifica i valori borderline di HbA2 e Hb F

L’AUMENTO DI Hb F E’ UN PARAMETRO DI RIFERIMENTO

PER LA CORRETTA INTERPRETAZIONE DEL QUADRO

CLINICO

CONCLUSIONI

Un aumento di Hb F infatti può essere legato a condizioni benigne, ma anche

nascondere un quadro clinico più complesso

Una valutazione critica del livello di Hb F è fondamentale per la corretta valutazione

del rischio riproduttivo

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