Top Banner
Kromozomlara dayalı toksisite testleri
33

Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Nov 18, 2014

Download

Documents

zuhal
Welcome message from author
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
Page 1: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Kromozomlara dayalı toksisite testleri

Page 2: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

• = Mutagenik aktivite

• = Genotoksisite (genotoksik aktivite)

• Mutagenik (genotoksik) bileşik

• Mutagenler potansiyel karsinogenlerdir.

Page 3: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Mutagenlerin metabolik aktivasyonu

PROMUTAGENAKTİF

MUTAGEN

DNA da değişim

MUTASYON

enzimler

akti

vasy

on

TUMOR

karaciğer

Page 4: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Genotoksisite testleri

• Moleküler

• Gen

• Kromozom düzeyinde olabilir.

Page 5: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Comet assay

• Elektroforezle nukleustan çıkan DNA parçalarını gözleme• İsole nukleuslar gele konur • DNA fragmenti varsa “comet tail” görülür.

– +

Page 6: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Comet assay

Page 7: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

comet assay

Normal

DNA fragmentli nukleus

Page 8: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Comet assay değerlendirmesi

Page 9: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Comet assay – computer analizi

Page 10: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Ames test (Gen düzeyinde)

Bruce Ames (born 1928)

Page 11: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Ames test

His–

bacteri

Normal besiyerinde

ölürler

Histidinİçeren

besiyeri

Normalbesiyeri

His+

bacteriReverse mutasyon

Mutagen

Page 12: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Ames test

COMPOUND

CONFIRMED

MUTAGENIC

COMPOUND

0 Negative kontrol

Positive kontrol

TEST BİLEŞİĞİ

GENOTOKSİSİTE

TAYİNİ

SPONTAN

REVERTANTS

TEST CONTROLU

Page 13: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Ames test sonucu

Page 14: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Ames test – otomatik değerlendirme

Page 15: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Kromozomal testler• Mikronukleus testi

– Mikronukleus – asentrik ve delesyon parçaları

• Kromozom anormallik frekansı– Lab. Hayvanları, lökosit kültürü, soğan kökü vb.

• SCE – sister kromatid değişimi

Page 16: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Mikronukleus testi

Page 17: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri
Page 18: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri
Page 19: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Kromozom analizi

Kromozom anormalikleri Sonuç

% 2’den az Normal

% 2 – 4 Sınır değerler

% 4’den fazla Mutagenik

Page 20: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri
Page 21: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri
Page 22: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri
Page 23: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Sister Kromatid Değişimi

Normal kromozom SCE

Yüksek SCE frekansı – yüksek mutagenik activite.

Page 24: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri
Page 25: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

TUNEL

Page 26: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Apoptotik hücrelerde TUNEL

Page 27: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri
Page 28: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

TUNEL

Page 29: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Kanser

mutagen mutagen

apoptosis

tamir

İlk mutasyon

İkinci mutasyon

Bölünen tümör

hücresi

normal hücre

normal hücre

sınır

Page 30: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

Karsinogenite testleri

• Laboratuar testleri

– Hayvanlarda

– Kültür hücrelerinde in vitro transformasyon

– Epidemiyolojik çalışmalar

Page 31: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

IARC database • International Agency

for Research of Cancer

• Direct connection to „Monographs“:

http://monographs.iarc.fr/index.php

Page 32: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri

IARC sınıflaması

• Grup 1: Karsinogenik

• Grup 2A: Olası karsinogenik

• Grup 2B: Olası karsinogenik

• Grup 3: Karsinogenite kesinleşmemiş

• Grup 4:Olası karsinogenik değil

Page 33: Kromozom Biyolojisi 11toksisite Testleri