Jurnal Reading 1 - Emergency

8/19/2019 Jurnal Reading 1 - Emergency

1/20

Berbeda Mu, Delta, dan Kappa Opioid Receptor Mekanisme mendasari Low

Sosialisasi dan Depressive-suka Perilaku Selama Heroin Pantan

Abstract

Ketergantungan adalah gangguan kronis yang melibatkan berulang episode

intoksikasi, penarikan, dan keinginan. Melarikan diri lingkaran setan inimembutuhkan pemeliharaan pantang untuk waktu yang lama dan merupakan

tantangan yang benar bagi individu kecanduan. Munculnya gejala depresi, termasuk

penarikan sosial, dianggap sebagai penyebab utama untuk kambuh, namun

mekanisme yang mendasari kurang dipahami. Di sini kita membangun model tikus

pantang berlarut-larut untuk heroin, candu disalahgunakan utama, di mana kedua

defsit memori emosional dan bekerja terungkap. Kami menunjukkan bahwa

reseptor delta dan kappa opioid D!" dan K!", masing-masing# K! tikus

mengembangkan gangguan emosional baik kuat atau berkurang selama heroin

pantang, membangun kegiatan D!" dan K!" sebagai pelindung dan kerentanan

$aktor, masing-masing, yang mengatur tingkat keparahan pantang. %elanjutnya,kami menemukan bahwa pengobatan kronis dengan &uo'etine obat antidepresan

mencegah munculnya sosialisasi yang rendah, dengan tidak berdampak pada

defsit memori kerja, yang melibatkan mekanisme serotonergik terutama dalam

aspek emosional dari gejala pantang. Akhirnya, menargetkan struktur otak utama

serotonergik, kami menunjukkan bahwa K! gen mu reseptor opioid Mors# di dorsal

raphe nucleus D"(# sebelum paparan heroin menghapuskan pengembangan

penarikan sosial. )ni adalah hasil pertama yang menunjukkan bahwa aktivasi M!"

kronis intermiten pada tingkat D"( merupakan mekanisme penting yang

berkontribusi terhadap sosialisasi rendah selama berlarut-larut heroin pantang.

%ecara keseluruhan, temuan kami menunjukkan peran penting dan berbeda untuk

ketiga reseptor opioid dalam pengembangan perubahan emosional yang mengikuti

sejarah paparan heroin dan membuka jalan menuju pemahaman opioid sistem-

dimediasi serotonin homeostasis dalam penyalahgunaan heroin.

*engantar

*enyalahgunaan obat adalah gangguan otak kronis dengan konsekuensi yang

menghancurkan bagi individu dan lingkungan sosial mereka. sejarah alam dari

penyakit biasanya terdiri dalam lingkaran setan. +$ek subjekti$ positi$

berpengalaman selama keracunan obat, yang diikuti oleh tanda-tanda emosional

dan fsik dari penarikan ketika obat ini tidak lagi tersedia. )ni pada gilirannya

memberi makan ke tahap keasyikan, di mana keinginan obat menginduksi perilaku

mencari obat dan endapan kambuh. Melarikan diri lingkaran setan ini

mengharuskan pantang berkepanjangan dipertahankan, mungkin sepanjang hidup.

*ada manusia, hal ini juga diketahui bahwa keinginan obat semakin meningkat

selama beberapa minggu pertama pantang dan tetap tinggi untuk waktu yang lama

Koob dan olkow, /0/#.


2/20

1eberapa penyebab berkontribusi untuk mengganggu pantang obat. $aktor

eksternal, seperti peristiwa stres kehidupan dan konteks obat-terkait Koob dan

olkow, /0/#, merupakan penentu dipelajari dengan baik untuk kambuh. 2aktor

kunci, yang kurang dipahami, adalah perubahan homeostasis emosional selama

perjalanan penyakit. *antang, terutama dari kecanduan opiat, ditandai dengan

gejala mengingatkan kecemasan dan depresi, termasuk suasana hati menurunkandan anhedonia 3rella et al, //4#. %elanjutnya, pada individu kecanduan,

perkembangan gejala depresi dikaitkan dengan program klinis yang lebih parah dan

kompetensi sosial yang lebih rendah 1akken et al, //5#. terapi antidepresi telah

digunakan dalam konteks ini, meskipun dengan keberhasilan yang terbatas (unes

et al, //6#. !leh karena itu, memahami konsekuensi emosional jangka panjang

penyalahgunaan narkoba memiliki implikasi besar untuk pengelolaan pecandu

opiat.

1eberapa penelitian pada hewan telah dimodelkan penarikan berkepanjangan dari

opiat. Data menunjukkan motivasi menurun untuk rein$orcers alami 7hang et al,

//5#, pre$erensi gigih untuk isyarat obat-terkait Aston-8ones dan 9arris, //6:%hakoori dan Murphy, //;#, dan kecenderungan kambuh hingga 0 tahun # atau tikus 9odgson

et al, //4: 8ia et al, /0=#. Kami baru-baru mengembangkan model morfn pantang

3oeldner et al, /00: ?ut@ et al, /00: ?ut@ et al, /0=b#. Dalam model ini, 0

minggu intermiten rejimen morfn kronis, diikuti oleh periode pantang 6 minggu

tanpa perlakuan#, menyebabkan munculnya bertahap penghindaran sosial danperilaku putus asa seperti, serta adaptasi dinamis dalam serotonergik ;- 9#

sirkuit, termasuk perubahan ;-9 bio-sintesis dan ;-9 reseptor-dependent

masukan reseptor ;-90A#.

Di sini kita membangun studi-studi awal dan menyelidiki pantang berlarut-larut dari

heroin, morfn derivati$ diacetylated. Karena $armakokinetik tertentu dan si$at

$armakodinamik, heroin mencapai situs otak lebih cepat daripada morfn dan

dimetabolisme menjadi B-monoacetylmorphine dan morfn Andersen et al, //4#,

yang keduanya mengakti$kan reseptor opioid mu Mors# sebagai target utama

mereka. !leh karena itu heroin menunjukkan e$ek kuat eu$oria dan kecanduan

kewajiban daripada morfn dan merupakan candu yang paling disalahgunakan diseluruh dunia. Kami pertama kali mencirikan saja saat defsit memori kerja

emosional dan spasial yang berkembang sepanjang 5 minggu heroin pantang pada

tikus. Kami kemudian menunjukkan bahwa delta dan kappa reseptor opioid Dors

dan Kors, masing-masing#, yang adalah pemain yang berbeda dalam kecanduan

dan suasana hati control 1ruchas et al, /0/: 9yman et al, //B: Knoll dan

Carle@on, /0/: ?ut@ dan Kieer, /0=a #, bi-terarah mempengaruhi perkembangan


3/20

defsit emosional dalam heroin pantang. Kami lebih lanjut menunjukkan bahwa

&uo'etine kronis ;-9 reuptake inhibitor# pengobatan mencegah munculnya

sosialisasi rendah pada hewan heroin-berpuasa, langsung melibatkan sistem ;-9.

Kami akhirnya $okus pada inti dorsal raphe D"(#, yang utama serotonergik nukleus

otak, dan menunjukkan bahwa knockout gen D"( bertarget K!# dari M!"

mencegah perkembangan penarikan sosial pada hewan heroin-berpuasa. )ni adalahdemonstrasi pertama peran penting dari Mors D"( konsekuensi jangka panjang dari

paparan heroin pada perilaku sosial.

1A9A( DA( M+!D+

hewan

tikus jantan dewasa /-=; g# yang digunakan dalam semua percobaan. C;51? E

B8Crl tikus diperoleh dari Charles "ivers ?aboratories. tikus yang dimodifkasi secara

genetik dibiakkan pada ;/-;/F C;51? E B8-04%v*as latar belakang seperti yangdijelaskan sebelumnyaG D!" K!, K!" K! tikus, dan tipe liar mereka


4/20

interaksi sosial %)%#, suspensi ekor, berenang paksa 2%#, J-labirin JM#, dan

pre$erensi sukrosa.

%) *asangan tikus asing, dari kandang rumah yang berbeda tetapi kondisi perlakuan

yang sama dan berat, ditempatkan secara bersamaan selama 0/ menit di arena

terbuka lapangan, secara tidak langsung menyala di ;/ lu'. pekerjaan kamisebelumnya menunjukkan bahwa kedua pembiasaan sebelumnya ke arena dan

mendukung pencahayaan redup %)% dalam kondisi an'iogenic buruk 3oeldner et al,

/00#. Menggunakan keyboard etologis, kami mengukur jumlah kejadian dan durasi

total perilaku %) mengendus, mengikuti, dan mengais-ngais kontak#, serta perilaku

perawatan individu.

2% Mencit ditempatkan untuk B menit ke sebuah silinder kaca tinggi, 5 cm:

diameter, 0> cm# diisi dengan =,; liter air = 0 L C#, dan waktu imobilitas tercatat

selama terakhir 6 min 3oeldner et al /0/# dengan pengamatan langsung

menggunakan keyboard etologis. ?atency ke imobilisasi pertama juga mencatat.

J-labirin JM# Mencit individual ditempatkan dalam alat J berbentuk terdiri dari tiga

lengan ditempatkan pada 0/ L satu sama lain, 6/ 4 0B cm# dan dibiarkan

bergerak bebas prosedur terus menerus# selama ; menit di bawah moderat kondisi

pencahayaan 0// lu' di tengah-paling wilayah#. moti$ tertentu ditempatkan di

dinding setiap lengan, sehingga memungkinkan diskriminasi visual, dan isyarat

ekstra-labirin ruang yang juga terlihat dari labirin. +ntri lengan dihitung ketika

mouse memiliki semua empat cakar di dalam lengan. Hrutan entri berturut-turut ke

dalam tiga lengan dicetak untuk setiap mouse, dan kinerja JM, yaitu, persentase

kinerja pergantian spontan, didefnisikan sebagai rasio pergantian sebenarnya

untuk memungkinkan pergantian otal entri- lengan# 0// , lihat Mandillo et al,

//>: dinding et al, //=##.

%esi pre$erensi sukrosa dilakukan semalam 0>//-/>// jam#. *ada hari pertama

percobaan, tikus terbiasa untuk perumahan tunggal dalam kandang kecil dengan

akses konstan untuk dua botol minum, baik air yang mengandung. *ada hari-hari

berikutnya, satu %chlosburg et al, /0=# dari botol minum secara acak ditukar

dengan botol yang berisi larutan sukrosa. 1erdasarkan percobaan awal kami dan

mengingat bahwa latar belakang genetik sangat mempengaruhi tindakan pre$erensi

sukrosa *othion et al, //6#, kami menggunakan konsentrasi sukrosa berikutG /,>F

untuk 0//F C;51? E B8Crl tikus: dan ,; dan =,;F untuk ;/-;/F C;51lB8-04%v*as

tikus. 9ewan disajikan dengan masing-masing larutan sukrosa selama hari. 1otol

yang diimbangi di sebelah kiri dan sisi kanan kompartemen makan dan berganti-

ganti posisi dari hari ke hari. Mencit dikelompokkan kembali kandang rumah mereka

antara sesi setiap hari semalam. %emua botol ditimbang sebelum dan setelah

setiap sesi untuk mengukur air dan sukrosa konsumsi untuk setiap tikus individu.

pre$erensi sukrosa dihitung sebagaiG pre$erensi N asupan larutan sukrosa ml# E

total asupan cairan ml## 0//.


5/20

*roduksi iral ektor

%eperti yang dijelaskan sebelumnya Del 1oca et al, /0#, rekombinan adeno-

associated virus serotipe AA# diproduksi dengan menggunakan helper bebas

sistem AA Agilent# dan plasmid encoding reporter ditingkatkan protein &uorescent

hijau +32*# atau rekombinase Cre -e32* $usi protein Cre#, didorong oleh promotorCM. AA titer ditentukan oleh *C" kuantitati$ O*C"# dan disesuaikan dengan =

0/0 viral genome E ml.

D"( %tereota'y

M!"& E tikus & menerima in$us stereotactic di D"( 0,; ml E 0; menit# A*, -/.= mm

dari lambda: M?, /,/ mm: D, =,;;# dari AA mengungkapkan baik i# Cre $usi

protein AA- C"+# atau ii# +32* hanya sebagai kontrol AA-+32*#.

Agonis-Merangsang P=;%Q -3*R% 1inding

M!" kopling untuk 3-protein diukur untuk setiap tikus secara individual

menggunakan P=;%Q -3*R% mengikat assay pada homogenat otak pada stimulasi

dengan meningkatnya konsentrasi agonis spesifk DAM3!, seperti yang dijelaskan

sebelumnya


6/20

ingkat keparahan ketergantungan fsik, yang diukur dengan penarikan nalokson-

diendapkan akut, adalah ukuran klasik e$ek opiat kronis. !leh karena itu, untuk

menerjemahkan model yang pantang morfn untuk heroin, kami pertama kali

didirikan protokol administrasi heroin intermiten kronis yang akan mendorong

ketergantungan fsik mirip dengan protokol morfn sebelumnya kami 3oeldner et

al, /00#. 1erdasarkan laporan sebelumnya Kest et al, //: Klein et al, //>#,kami memilih dosis heroin dibagi dengan $aktor dua 0/-;/ mg E kg# dibandingkan

dengan dosis morfn dalam penelitian kami sebelumnya /-0// mg E kg#. Meskipun

tanda-tanda penarikan secara kualitati$ berbeda abel ambahan %0#, nilai global

untuk penarikan nalokson-diendapkan akut adalah sebanding di dua rejimen

ambahan 3ambar %0#. !leh karena itu kami menerapkan administrasi intermiten

meningkat 0/-;/ mg E dosis heroin kg selama penelitian.

Dalam semua seri eksperimental berikutnya, kami menggunakan kohort hewan

terpisah untuk i# ukuran nalokson-diendapkan penarikan pada akhir paparanheroin, untuk memverifkasi dan mengukur sejauh mana ketergantungan fsik, dan

ii# menganalisis respon emosional-seperti dan memori kerja spasial selama

pantang berlarut-larut pada hewan yang mengalami penarikan spontan dari

pengobatan heroin kronis yaitu, dengan tidak adanya injeksi nalokson#.

Kami kemudian menyelidiki kinetika modifkasi perilaku-emosional yang terkait pada

0, 6, atau 5 minggu penarikan spontan lihat garis waktu pada 3ambar 0a#. )ni

termasuk menilai perilaku kecemasan-seperti dan depresi seperti, serta %)%.

*ertama, kami menemukan bahwa heroin pree'posure tidak berpengaruh padaperilaku kecemasan-seperti dalam tes terbuka lapangan dan hanya menyebabkan

sedikit peningkatan aktivitas lokomotor ambahan 3ambar %#. *ada uji %), dua-

way A(!A menunjukkan bahwa total waktu eksplorasi sosial 3ambar 0b#

mengalami penurunan sebesar heroin pree'posure 2 0,B6# N 66,0: p S/,//0#,

tetapi tidak dengan durasi pantang 2 , B6# N 0,5: p N /,/#, dengan interaksi

yang signifkan antara kedua $aktor 2 ,B6# N B,6: p N /,//=#. analisis post-hoc

mengungkapkan bahwa pasangan heroin-pra-perawatan tikus berinteraksi secara

signifkan kurang dari kontrol saline-pra-perawatan setelah 6 minggu p S/,//0#

dan 5 minggu p S/,//0#, tetapi tidak setelah 0 minggu p N 0,/#, pantang . %elain

itu, dalam kelompok heroin-perlakuan awal, waktu %) menurun pada 6 minggu

heroin-berpuasa tikus dibandingkan dengan 0 minggu titik waktu p N /,/B#.


7/20

Sosial, defsit memori kerja depresi seperti, dan spasial berkembang selama 7

minggu heroin pantang. (A) Prosedur percobaan. kohort hewan independen

digunakan untuk menilai setiap titik waktu selama heroin pantang. Berikut suntikan

opiat diulang, tikus dipertahankan obat gratis selama , !, atau 7 minggu.

"emudian, respons emosional seperti die#aluasi menggunakan paradigma klasik

dilakukan setiap hari, seperti $ang dijelaskan sebelumn$a (%oeldner et al, &'

ut* et al, &'+b). ikus bobot tubuh $ang diukur sebagai indeks dari e-ek opiat

global $ang selama suntikan kronis dan pantang (ambahan %ambar S!). Pada uji

interaksi sosial (S n / & pasang tikus 0 kelompok perlakuan 0 durasi pantang),


8/20

selama heroin pantang, penghindaran sosial progresi- muncul, dengan penurunan

durasi perilaku sosial (b) dan peningkatan perawatan (c). tikus stimulus untuk tes

interaksi sosial $ang digunakan han$a sekali. Peningkatan perilaku putus asa

seperti juga terdeteksi mengikuti periode pantang 71minggu di tes berenang paksa

(2S n / &! tikus 0 kelompok perlakuan 0 durasi pantang), dengan kedua meningkat

imobilitas (d) dan penurunan latenc$ untuk imobilisasi pertama (e ). Pada ujisukrosa1pre-erensi (n / &! tikus 0 kelompok perlakuan 0 durasi pantang), tidak ada

e-ek heroin pantang pada nada hedonis (-). Akhirn$a, tikus berpuasa menunjukkan

penurunan bekerja kinerja memori di 31labirin (34 n / &! tikus 0 kelompok

perlakuan 0 durasi pantang) tugas (g). 5ilai mean 6 S4 8 p 9',':, A5;


9/20

kami mengukur respon hedonis pada tikus berpuasa, menggunakan uji pre$erensi

sukrosa 3ambar 0$#. Kami tidak menemukan e$ek pengobatan heroin 2 0.0=/# N

/,0B: p N /,B4# atau durasi pantang 2 .0=/# N 0,B: p N /,0# dan tidak ada

interaksi 2 .0=/# N /,=B: p N /,5/#.

Menimbang bahwa pasien kecanduan sering menunjukkan defsit kogniti$, bahkan

ketika berpuasa !rnstein et al, ///: "apeli et al, //B#, kami akhirnya diperiksa

tikus berpuasa dalam tugas JM 3ambar 0g#. A(!A mengungkapkan e$ek heroin

pantang untuk persentase pergantian spontan 2 0.0=;# N 04,: p N / S/,//0#,

indeks memori kerja spasial. Durasi pantang tidak berpengaruh 2 .0=;# N /,/5: p

N /,4=#, tapi ada interaksi antara kedua $aktor ini 2 .0=;# N 6,: p N /,/05#.

Adapun sosialisasi, analisis post-hoc menunjukkan bahwa defsit memori kerja tidak

terdeteksi setelah 0 minggu p N 0,/#, tetapi muncul setelah 6 minggu p N /,/0=#

dan berlangsung selama setidaknya = minggu p N /,//#. Dalam model heroin ini

oleh karena itu, kami mendeteksi defsit memori kerja spasial, yang mewakili aspeklain dari berlarut-larut pantang relevan dengan kondisi manusia bahwa kita tidak

mengeksplorasi dalam penelitian morfn kami sebelumnya. paradigma perilaku

tambahan akan diperlukan untuk sepenuhnya ciri spektrum defsit kogniti$ yang

terkait dengan kecanduan opiat !rnstein et al, ///# yang dapat diatasi dalam

model mouse kita.

Delta dan Kappa !pioid "eseptor bi-terarah Mengatur *erilaku %osial dan one

hedonik %elama berkepanjangan 9eroin *antang

%elanjutnya, kami menjelajahi kontribusi Dor dan K!" di heroin pantang. Kedua

reseptor tidak langsung target molekul untuk heroin tapi sangat mengatur fsiologi

opioid endogen dan berkontribusi, namun sangat berbeda, untuk perilaku adikti$

dan gangguan mood. Antidepresan seperti D!" dan kegiatan K!" prodepressant

seperti sekarang mapan ?ut@ dan Kieer, /0=a# tetapi belum diperiksa dalam

konteks heroin pantang.

(ai$ tikus D!" K! menunjukkan peningkatan kerentanan emosional ?ut@ dan

Kieer, /0=a#. !leh karena itu kami menguji hipotesis bahwa tikus mutan akan

menunjukkan defsit suasana hati ditingkatkan setelah lama heroin pantang. *ada

kelompok pertama tikus, kami mengukur penarikan diendapkan setelah pengobatanheroin kronis 3ambar a dan ambahan abel %#. 9eroin memiliki e$ek yang kuat

2 0,==# N 6,6: p S/,//0#, tetapi tidak ada pengaruh genotipe 2 0,==# N 0,>: p N

/,04# dan tidak ada interaksi 2 0,== # N 0,B: p N /,#, menunjukkan bahwa

ketergantungan fsik berkembang secara normal pada tikus D!" K!. Dalam

kelompok kedua hewan, kami mengukur perilaku sosial setelah periode pantang 6

minggu. )nteraksi sosial 3ambar b, panel kiri# sedang menurun heroin 2 0,;6# N

/,>: p S/,//0#, terlepas dari genotipe 2 0,;6# N ,/: p N /,05#, karena itu tidak


10/20

ada peningkatan defsit sosial dapat dideteksi pada tikus mutan, setidaknya di

bawah kondisi percobaan kami. Kami juga mengukur respon hedonis pada tikus

berpuasa, menggunakan uji pre$erensi sukrosa 3ambar b, panel kanan#.

Menariknya, kami mendeteksi interaksi antara genotipe dan pengobatan heroin 2

0,;;# N 6,B: p N /,/=B#, serta pengaruh genotipe 2 0,;;# N >,;: p N /,//;#, di

%elain e$ek yang diharapkan konsentrasi sukrosa 2 0,;;# N B,B: p N /,/0=##. *adakonsentrasi ,;F, dalam kelompok perbandingan menunjukkan e$ek signifkan dari

heroin di Dor K! p N /,/=B# tetapi tidak pada tikus ;? knockout

(";) tikus dan tipe liar mereka (@) littermates (a dan b), serta di ";? knockout

(";) tikus dan tipe liar mereka (@) littermates (c dan d). 5alokson1diendapkan


11/20

penarikan, sebagai ukuran ketergantungan fsik dicapai pada akhir paparan opiat,

dan analisis perilaku emosional seperti selama pantang berlarut1larut, setelah

heroin penarikan spontan telah terjadi (ada nalokson), dilakukan pada kohort

hewan $ang terpisah. Pada tikus >;? ";, (a) heroin penarikan akut (n / 1'

tikus 0 kelompok perlakuan 0 genotipe) dan (b, panel kiri) menghindari sosial berikut

periode pantang ! minggu (n / !1: tikus kelompok 0 perlakuan 0 genotipe)sebanding dengan tingkat di kontrol @. Sebalikn$a, (b, panel kanan) menurun

pre-erensi sukrosa khusus dikembangkan di >;? "; tapi tidak di @ tikus selama

heroin pantang (n / !1: tikus 0 kelompok perlakuan 0 genotipe). Pada tikus ";?

";, (c) ketergantungan fsik heroin sedikit menurun (n / 1' tikus 0 kelompok

perlakuan 0 genotipe), dan (d, panel kiri) menghindari sosial sepenuhn$a dicegah (n

/ 1 tikus 0 pengobatan kelompok 0 genotipe). idak ada modifkasi pre-erensi

sukrosa (d, panel kanan) diamati untuk tikus ";? "; di bawah kondisi percobaan

kami (n / 1 tikus 0 kelompok perlakuan 0 genotipe). 5ilai mean 6 S4 8 p

9','', A5;


12/20

meningkatkan penarikan akut dan diperlukan untuk pengembangan defsit %)

setelah berlarut-larut heroin pantang.

2luo'etine kronis Mencegah *engembangan %osial tetapi tidak Defsit ata "uang

Kerja Memori 9eroin *antang

Hntuk menguji apakah meningkatkan $ungsi ;-9 akan mencegah perkembangan

defsit memori sosial atau bekerja, kami menguji konsekuensi dari pengobatan

antidepresan kronis selama periode pantang 6 minggu. Kami menggunakan

&uo'etine, sebuah %%") prototypal, pada dosis rendah T0/ mg E kg E hari, per os#

yang tidak memiliki e$ek per se dalam garam-diobati, hewan kontrol 3ambar = dan

ambahan 3ambar %B#. *ada uji %), heroin 2 0,5# N B,: p N /,/#, tetapi tidak

&uo'etine 2 0,5# N ,;: p N /,0#, diubah secara signifkan perilaku sosial

3ambar =a#. Jang penting, ada interaksi antara perlakuan 2 0,5# N 6,4: p N

/,/=;#. Konsisten dengan percobaan kinetik kami, heroin-pra-perawatan pasangantikus yang diberi chow biasa heroin-kontrol makanan# menghabiskan waktu kurang

signifkan berinteraksi dari kontrol saline garam-kontrol makanan: p N /,/0>#.

administrasi &uo'etine kronis sepenuhnya dicegah defsit heroin diinduksi ini,

sebagai kali interaksi antara pasangan heroin-&uo'etine dan pasangan garam-

&uo'etine tidak berbeda nyata p N 0,/#. %elama pertemuan sosial, individu diri

dandan 3ambar =b# juga dimodifkasi oleh heroin 2 0,5# N 6,>: p N /,/=># dan

&uo'etine 2 0,5# N >,: p N /,//>#, dengan interaksi yang signifkan 2 0,5# N

6,;: p N /,/6#. perbandingan antar kelompok menunjukkan bahwa peningkatan

heroin-diinduksi dalam perawatan di kontrol tikus makanan p N /,/=6# tidak hadir

di &uo'etine-makan tikus p N 0,/, heroin-&uo'etine dibandingkan dengan pasangan

makanan saline-&uo'etine#. !leh karena itu, kedua menurun %)% dan peningkatanperawatan diamati pada tikus heroin-berpuasa dicegah dengan pengobatan

&uo'etine kronis.


13/20

pengobatan antidepresan kronis mencegah perkembangan penghindaran sosial pada tikus heroin1pantangan. Berikut saline atau heroin suntikan kronis, tikus diberi

makan pelet DuoEetine1dilengkapi (F' mg 0 kg 0 &! jam) selama ! minggu, atau

pelet alam sebagai kontrol, seperti $ang dijelaskan sebelumn$a (%oeldner et al,

&'). Pada uji interaksi sosial (S) (n / 71 pasang tikus 0 kelompok perlakuan 0

jenis makanan), pengobatan kronis dengan DuoEetine dicegah e-ek heroin berlarut1

larut pada (a) sosial dan (b) perilaku indi#idu. Sebalikn$a (c), DuoEetine tidak

mencegah e-ek pantang pada memori kerja (n / :1 tikus kelompok 0

pengobatan 0 jenis makanan). 5ilai mean 6 S4 8 p 9','', A5;


14/20

M!" Conditional Knockout M!" CK!# di D"( Mencegah *engembangan %osial

tetapi tidak Defsit ata "uang Kerja Memori 9eroin *antang

2luo'etine terutama menargetkan D"( ;-9 neuron. M!" adalah target molekul

utama untuk B-monoacetylmorphine dan morfn, dua utama metabolit heroin akti$pada hewan pengerat Andersen et al, //4#. Meskipun reseptor ini sebagian besar

didistribusikan ke seluruh sistem sara$, ada bukti bahwa Mors diekspresikan pada

tingkat tingkat pembakaran kontrol D"( neuron ;-9 ao dan Auerbach, //,

//;#. Karena itu kami menguji kontribusi penduduk M!" tertentu untuk

pengembangan defsit emosional dalam heroin pantang.

Hntuk tujuan ini, kami memproduksi hewan CK!, yang kurang Mors khusus di D"(

Angka 6 dan ;#, melalui injeksi AA-Cre pada tikus menyimpan gen M!" &o'ed

M!"& E . *ertama, kita dioptimalkan prosedur stereotactic sehingga untuk

menargetkan D"( sementara hemat daerah yang berdekatan 3ambar 6b#. Kamikemudian diresapi baik AA-+32* M!"& E &, kelompok kontrol# atau AA-Cre M!"

CK! kelompok# dan diukur M!" menandakan aktivitas 6 minggu setelah operasi.

Dalam homogenates D"( mikro-dibedah 3ambar 6c#, P=;%Q -3*R% mengikat

meningkat dengan konsentrasi agonis 2 ,;B# N 66,=: p S/,//0# pada tikus

kontrol. anggapan ini secara signifkan lebih rendah pada hewan AA-Cre-

diperlakukan 2 0,;B# N 04,6: p S/,//0#, sesuai dengan penurunan 6/F di +ma'

M!"& E & /4,6 ;,4F: M!"-CK! 0B;,; >,6F#. perbandingan pasca-hoc

menegaskan bahwa P=;%Q -3*R% mengikat menurun di semua tiga konsentrasi

agonis digunakan p S/,/0#. )naktivasi genetik dibatasi untuk D"(, seperti P=;%Q

-3*R% mengikat tidak berubah dalam struktur di dekatnya, termasuk

periaOueductal abu-abu 3ambar 6d: 2 0,;B# N /,//0: p N /,4>## dan medianraphe nucleus 3ambar 6e: 2 0,;B# N /,5: p N /,6/##. 1erbagai $aktor

eksperimental terutama ketepatan D"( stereota'y dan mikro-pembedahan#,

bagaimanapun, memberikan kontribusi terhadap variabilitas dalam ukuran M!"

CK! khasiat. Dalam percobaan berikutnya, oleh karena itu, pola ekspresi +32*

dianalisis untuk setiap individu hewan pada akhir pengujian perilaku, dan hewan

dengan salah sasaran atau ekspresi virus tidak efsien dikeluarkan dari analisis.


15/20

efsiensi rekombinasi #irall$ Gre1dimediasi downregulates mu reseptor opioid (4;?)

dalam inti dorsal raphe (>?5). (A) Prosedur percobaan. kohort hewan independen

(n / 7' total) digunakan untuk H+:SI 1%PJS mengikat, ketergantungan -isik

heroin, dan heroin pantang (lihat %ambar :). (B) Pola ekspresi %2P berikut in-us

stereotactic dari AA?5 tersebut. (G)

mpat minggu setelah operasi, akti#itas 4;? berkurang secara signifkan di >?5,

seperti $ang ditunjukkan oleh rendah >A4%; diinduksi H+:SI 1%PJS mengikat (n /

!1 0 kelompok). Sebalikn$a, 4;? sin$al dipertahankan di periaKueductal abu1

abu (d) atau median raphe nucleus (e). 5ilai mean 6 S4. Cp 9',', pasca1hoc

perbandingan antara 4oral 0 D dan kelompok 4;? G"; pada setiap konsentrasi

agonis (4, konsentrasi molar).

"; bers$arat dari mu opioid reseptor (4;? G";) dalam inti dorsal raphe (>?5)

mencegah munculn$a penghindaran sosial selama heroin pantang. penarikan

nalokson1endapan (a) menjabat sebagai ukuran ketergantungan fsik dicapai pada


16/20

akhir paparan opiat. Analisis perilaku emosional seperti selama pantang (b1d)

dilakukan dalam kohort hewan terpisah, setelah mereka mengalami penarikan

spontan dari pengobatan heroin kronis. 4;? G"; di >?5 tidak mengubah tingkat

keparahan ketergantungan fsik heroin (n / 17 tikus 0 kelompok perlakuan 0 #irus

tipe). Sebalikn$a, >?5 4;? G"; di kohort independen (n / L1+ kelompok 0

pengobatan 0 jenis #irus) mencegah munculn$a interaksi sosial menurun (b) danmenurun perawatan durasi (c), men$usul periode pantang ! minggu. Akhirn$a,

konsekuensi merusak heroin pantang pada memori kerja spasial masih diwujudkan

meskipun 4;? G"; (d). 5ilai mean 6 S4 8 p 9','', A5;# N =,;: p S/,//0#,

tetapi bukan dari genotipe 2 0,=># N /,4: p N /,;4#, dengan tidak ada interaksi 2

0,=># N /,5: p N /,6/#. !leh karena itu, D"( Mors tampaknya tidak berkontribusi

bekerja gangguan memori yang berhubungan dengan heroin pantang dalam

paradigma ini.


17/20

D)%KH%)

%tudi kami menetapkan model tikus perilaku dis$ungsi emosional dalam heroin

pantang. Model tikus ini akan berguna dalam konteks hubungan yang sangat la@im

antara kecanduan dan depresi Darke et al, //4#. Meskipun kedua gangguan ini jelas berbagi hubungan bi-directional, pertanyaan klinis tetap untuk membedakan

defsit suasana hati yang sudah ada pada individu kecanduan pengobatan sendiri#

dari defsit suasana hati yang mengembangkan pada siklus paparan obat dan

penarikan diulang. Dalam model hewan kami, kami pertama kali menunjukkan

munculnya si$at-terkait depresi mengikuti riwayat paparan heroin. Kami kemudian

memeriksa $enomena ini dalam model K! mewakili negara yang berbeda yang

sudah ada sebelumnya kerentanan emosional D!" K! tikus# atau ketahanan K!"

K! tikus#. Akhirnya, kami menunjukkan bahwa D"( Mors memediasi perkembangan

sosialisasi rendah pada hewan heroin-berpuasa, sama sekali mengungkapkan peran

namun berbeda penting dari semua tiga reseptor opioid dalam kontrol suasana hatidan $ungsi sosial selama pantang berkepanjangan.

%indrom heroin pantang ditandai dengan sosialisasi rendah setelah 6 minggu

pantang. Menariknya, tidak ada defsit diamati setelah 0 minggu di tes apapun,

mendukung gagasan bahwa adaptasi dinamis menetaskan dan mengembangkan

bersama penarikan berkepanjangan spontan. 9asil ini menunjukkan bahwa diulang

M!" intermiten over-stimulasi dengan meningkatkan dosis heroin memicu adaptasi

otak jangka panjang, yang semakin menyebabkan kekurangan %)%. ingkat

sosialisasi yang diketahui dipengaruhi oleh si$at mood- dan kecemasan terkait padahewan pengerat. Di sini, kami menggunakan kondisi pengujian cahaya rendah dan

konteks $amiliar# yang menghasilkan rendahnya tingkat perilaku kecemasan-seperti

dan dengan demikian mempromosikan penyelidikan sosial. *rosedur pengujian

tersebut telah diusulkan untuk menjadi lebih tepat untuk mendeteksi defsit sosial

yang terkait dengan keadaan depresi seperti misalnya, penarikan sosial# daripada

ketakutan E kecemasan-seperti negara 1erkas dan %eth, //=: 3ururajan et al,

/0/#. Memang, dalam tes terbuka lapangan, tikus heroin-berpuasa ditampilkan

respon emosional-seperti biasa, menunjukkan bahwa defsit %) diamati mungkin

tidak terkait dengan negara takut tinggi. %elanjutnya, sosialisasi rendah terdeteksi

pada saat titik 6 minggu dan kemudian disertai dengan peningkatan perilaku putus

asa seperti setelah 5 minggu, menunjukkan bahwa sosialisasi kekurangan

mendahului gangguan suasana hati selama berlangsung pantang heroin. Munculnya

sindrom emosional mencolok sejajar dengan pengamatan meningkatnya

kecenderungan kambuh pada hewan pengerat ditarik dari opiat diri administrasi

*ickens et al, /00# dan mendukung gagasan mengerami keinginan narkoba.

Mungkin, dis$ungsi emosional dapat berkontribusi untuk ini potensiasi tergantung

waktu probabilitas kambuh.


18/20

Kami menemukan bahwa heroin-berpuasa tikus menunjukkan penurunan kinerja

dalam tugas JM. Defsit ini mengungkapkan belum aspek lain dari sindrom pantang,

yang kita tidak dieksplorasi dalam penelitian morfn kami sebelumnya. 9asil ini

menunjukkan bahwa, berikut paparan obat diulang, memori kerja spasial tergangguatau alternati$ yang &eksibilitas perilaku menurun. Menurunnya kinerja dalam

tugas-tugas serupa dilaporkan sebelumnya baik segera setelah aktivasi candu yang

disebabkan dari M!" Hkai et al, ///# atau setelah periode penarikan = hari Ma et

al, //5#, sedangkan waktu kemudian poin tidak dieksplorasi, untuk pengetahuan

kita. 1erikut defsit terdeteksi setelah 6 dan 5 minggu, tapi tidak 0 minggu,

pantang, menunjukkan bahwa dis$ungsi perilaku berkembang dengan waktu, seperti

untuk penarikan sosial dan perilaku putus asa seperti. 1erbeda dengan perubahan

emosional meskipun, defsit JM menolak untuk pengobatan &uo'etine kronis dan

dikembangkan meskipun penghapusan bersyarat dari gen M!" di D"(. Kedua baris

bukti kuat menunjukkan bahwa bekerja gangguan memori selama heroin pantang

berasal dari M!" perekrutan luar D"(. modulasi M!" tergantung dari $ungsieksekuti$ dan memori telah ditunjukkan di daerah lain otak septum medial,

hippocampus, korteks pre$rontal#, dalam interaksi dengan sistem neuro-modulatory

lainnya misalnya transmisi kolinergik: "ago@@ino dan +mas, 044;#. studi tambahan

akan diperlukan untuk mengidentifkasi sirkuit opioidergic dan pemancar yang

terlibat dalam kerugian kogniti$ hewan heroin-berpuasa.

aktivasi kronis dari M!" telah disarankan untuk menginduksi dalam sistem

adaptasi, seperti diungkapkan oleh peningkatan ekspresi Dor 9ack et al, //;# dan

K!" %olecki et al, //4#. Menimbang bahwa kedua reseptor opioid tersebut,masing-masing, menunjukkan kegiatan antidepressant- dan prodepressant-seperti

dalam studi $armakologi dan genetik ?ut@ dan Kieer, /0=a#, kita mendalilkan

bahwa gejala heroin pantang mungkin diperburuk, dan dilemahkan, di D!" dan

tikus K!" K! , masing-masing. Memang, hasil kami menunjukkan bahwa D!" K!

tikus, garis mutan emosional rentan ambahan 3ambar %;a#, bereaksi lebih parah

heroin pantang dan mengembangkan $enotip anhedonia-seperti yang kuat,

dianggap sebagai ciri dari negara depresi seperti di berbagai paradigma hewan

pengerat . 1eberapa studi hewan pengerat mendukung penggunaan agonis Dor

sebagai antidepresan, dan uji klinis yang sedang berjalan Chu %in Chung dan

Kieer, /0=#. Data kami lebih lanjut menunjukkan bahwa obat ini bisa membantuuntuk pecandu yang menderita simtomatologi depresi.

Dalam kontras yang tajam, e$ek merusak dari heroin pada sosialisasi sepenuhnya

dibatalkan pada tikus K!" K!. 1eberapa studi telah menunjukkan bahwa K!"

kontribusi terhadap munculnya defsit emosional dalam model tikus alkohol 1erger


19/20

et al, /0=#, nikotin %mith et al, /0# dan kecanduan kokain Kallupi et al, /0=#.

Data kami memperluas ini bukti-bukti penyalahgunaan opiat dan melibatkan K!"

penghindaran sosial tahan lama. *enelitian kami juga memperkuat potensi

terapeutik antagonis K!" dan koheren dengan laporan klinis pada e$ek

menguntungkan dari buprenorphine, dual M!" agonis E K!" antagonis, pada

pecandu tertekan 3erra et al, //6#.

Meskipun ada perbedaan yang signifkan dalam ketergantungan fsik morphine- dan

heroin-diinduksi dan gangguan emosional, pantang dari kedua obat menyebabkan

penghindaran sosial. perilaku sosial yang sehat sangat penting untuk regulasi

emosional Meyer-?indenberg dan ost, /0#, dan penghindaran sosial telah

banyak digunakan dalam studi praklinis sebagai penanda emosi patologis 1erton et

al, /0#. Jang penting, $enotipe yang kuat ini dapat sepenuhnya diblokir dengan

pengobatan &uo'etine kronis, menunjukkan adaptasi dalam neuron ;-9. Karena

M!" stimulasi pada paparan heroin merupakan langkah awal menuju adaptasimolekuler yang pada akhirnya menyebabkan perubahan perilaku, kita diuji apakah

defsit pantang berasal dari aktivasi langsung Mors diekspresikan pada tingkat D"(.

Kami bersyarat genetik pendekatan menunjukkan bahwa penurunan M!" sinyal di

D"( tidak mengubah ketergantungan fsik heroin tetapi cukup untuk sepenuhnya

mencegah munculnya penghindaran sosial pada tikus heroin-berpuasa. !leh karena

itu kami menunjukkan bahwa D"( Mors penting untuk gangguan perilaku sosial

selama heroin pantang. Data sebelumnya menunjukkan bahwa Mors menyatakan

sepanjang jalur dopaminergik mesolimbic menengahi si$at berharga dari

rangsangan sosial re@@a et al, /0/#. Kami menemukan lebih lanjut menunjukkan

bahwa Mors di ;-9 sirkuit mengkodekan komponen emosional pertemuan sosial,

yang mungkin memiliki implikasi luar konteks kecanduan. Khususnya, laporan

terbaru menemukan bahwa kesulitan sosial selekti$ merekrut 3A1Aergic D"(

interneuron untuk menengahi ekspresi penghindaran sosial Challis et al, /0=#.

!leh karena itu, kami berhipotesis bahwa dominasi Mors D"( di neuron 3A1Aergic

tertentu ao dan Auerbach, //;# mungkin penting dalam pengendalian

pendekatan sosial. %ingkatnya, penelitian kami mengungkap untuk pertama kalinya

peran penting untuk Mors D"( dalam regulasi sosialisasi dan merupakan langkah

pertama menuju penjelasan $ungsi M!" pada interaksi si$at berman$aat dan

emosional rangsangan sosial.

Akhirnya, muncul pertanyaan apakah defsit emosional berkembang bersama heroin

pantang hanyalah akibat langsung dari penarikan fsik akut, dianggap sebagai

pengalaman tidak menyenangkan, atau timbul dari proses adapti$ lainnya di otak.

Mengingat hipotesis pertama, adalah mungkin bahwa sindrom penarikan fsik ringan

yang dialami oleh tikus K!" K! berikut paparan heroin kronis mungkin mendasari,

setidaknya sebagian, tidak adanya penghindaran sosial selama pantang di mutan.


20/20

1eberapa pengamatan dari penelitian kami, bagaimanapun, mendukung hipotesis

kedua. Dalam kedua D!" K! dan D"( M!" CK! percobaan, kami menunjukkan

pemisahan antara ketergantungan fsik heroin dan dis$ungsi emosional selama

pantang dari obat. Meskipun tanda-tanda akut penarikan fsik yang sebanding untuk

mengendalikan kelompok-kelompok di kedua model genetik, periode pantang

menyebabkan hasil yang lebih atau kurang parah di D!" K! dan D"( M!" CK!tikus, masing-masing. !leh karena itu, homeostasis emosional selama pantang

lama tidak sepenuhnya ditentukan oleh tingkat keparahan negara penarikan akut.

%elain itu, beberapa data terakhir kami pada tikus 04%v*as menunjukkan

perkembangan perilaku putus asa seperti meskipun kurangnya hampir lengkap dari

ketergantungan fsik, lanjut menyarankan pemisahan antara ketergantungan fsik

dan pantang diinduksi dis$ungsi emosional obat data tidak ditampilkan#. Dalam

perspekti$ yang lebih luas, temuan ini baik sesuai dengan langkah-langkah

epidemiologi dari tingkat yang sama dari komorbiditas antara kecanduan dan

depresi di semua penyalahgunaan obat, terlepas dari potensi mereka untuk

ketergantungan fsik klasik yang sangat rendah untuk nikotin atau kokain,

misalnya#.

Kesimpulannya, penelitian kami membongkar reseptor opioid sebagai pemain

penting dalam sindrom emosional heroin pantang. Kami menunjukkan bahwa,

selama berkepanjangan heroin pantang, Dors mengatur homeostasis hedonis,

sementara M!" sinyal di jalur serotonergik dan Kors bersama-sama mengontrol

perilaku sosial. emuan kami lebih memperdalam pengetahuan kita tentang

neurobiologi sosialisasi dan menekankan sistem opioid sebagai substrat penting

dari otak sosial di persimpangan kecanduan dan regulasi emosional

*+(DA(AA( DA( *+(3H(3KA*A(

Karya ini didukung oleh 2ondation pour la "echerche MUdicale untuk *-+?#,

2ondation 2yssen untuk *-+?#, 2ondation 1ettencourt-%chueller *-+?#, Canadian

)nstitutes o$ 9ealth "esearch ke *-+?#, *usat (ational de la "echerche %cientifOue,

)nstitut nasional de la %antU et de la "echerche MUdicale, dan Agence (ationale de

la "echerche A("-*antang#. *ara penulis menyatakan tidak ada kon&ik

kepentingan.

Jurnal Reading 1 - Emergency

Documents