Isolasi dan identifikasiKobal Jaspis Sp.

Kerajaan: Animalia

Divisi: Parazoa

Filum: Porifera

Kelas: Demospongiae

Ordo: Astrophorida

Famili: Ancorinidae

Genus: jaspis

Spesies: Jaspis sp.

1. Kultur Bakteri yang berasosiasi dengan Jaspis sp.

Isolat bakteri yang digunakan dalam penelitian ini adalah SAB E-31, E-SAB 41, SAB E-57 yang diisolasi dari sponge Jaspis sp. Isolat bakteri dikultur dalam medium Sea Water Complete(SWC).

2. Ekstraksi Bakteri yang berasosiasi dengan Jaspis sp.

Isolat bakteri dikultur dalam 500 mL Erlenmeyer dengan media kaldu SWC. Kultur diinkubasi dalam shaker inkubator 100 rpm pada 30ºC selama 72 jam. Setelah inkubasi, kultur bakteri (500 mL masing-masing) dicampur dengan 500 mL etil asetat. Campuran disimpan pada suhu 30 ºC selama 12 jam dan diaduk dengan stirrer. Lapisan etil asetat dipisahkan dan etil asetat diuapkan. Ekstrak minyak mentah disimpan di bawah suhu 5 ºC sampai lanjut gunakan.

3. Uji toksisitas (Brine Shrimp Letality Test)

Telur Artemia Salina (0,1 g) diinokulasi dengan 100 ml air laut dan diinkubasi dalam Hatcher pada 30 ºC dengan aerasi yang kuat, di bawah Rezim cahaya kontinyu. sekitar 24 jam setelah menetas, 20 individu tengkuk dikumpulkan dengan mikropipet dari sisi terang dan ditempatkan dalam botol kecil. Konsentrasi ekstrak adalah 0 mg / ml sebagai kontrol, 10 mg / ml, 100 mg / ml, 250 mg / ml, 500 mg / ml, dan 750 ug / ml. Masing-masing konsentrasi sampel diuji dalam rangkap tiga. Jumlah individu yang mati dihitung setelah 24 jam paparan.

4. Aktivitas antikanker oleh MTT assay

Sel-sel kanker yang digunakan dalam studi serviks

sel kanker leher rahim adalah sel manusia yaitu sel HeLa ATCC CCL-2 dari Primate Pusat Studi Institut Pertanian Bogor di Indonesia. Sel-sel Hela 100 mL yang diinokulasi di Dubecco Modified Eagle Medium (DMEM) selama 24 jam

Brine shirmp Letality Test (BSLT) digunakan untuk penyaringan bioaktivitas ekstrak yang memiliki toksisitas dan ditentukan di LC nilai. LC50 Nilai adalah konsentrasi yang dapat membunuh 50% dari subyek tes. Uji bioaktivitas Bakteri laut ekstrak SAB E-31, E-SAB 41,dan SAB E-57 menunjukkan nilai LC50 sebesar 328,04 ug / mL, 251,40 mg / mL, dan 390,50 ug / mL. Nilai LC 50 terendah ditemukan di ekstrak bakteri laut SAB E-41, sementara lain memiliki nilai yang lebih tinggi

Hasil Ekstrak terhadap sel HeLa pada konsentrasi 5 mg / mL, 25 mg / mL, 125 mg / mL, dan 625 ug / mL menunjukkan semua ekstra kasar SAB E-31, E-SAB 41, dan SAB E-57 melawan HeLa sel berkisar dari 20,2% hingga 91,92%. Nilai IC ekstrak bakteri laut yang berasosiasi dengan spons yaitu SAB E-31, E-SAB 41, dan SAB E-57 adalah 267,03 ug / mL, 242,54 mg / mL, dan 245,47 mg / mL.

Kapasitas antioksidan dari ekstrak bakteri laut yang berasosiasi dengan spons SAB E-31, E-SAB 41, dan SAB E-57 adalah 156,94 umol trolox / g ekstrak, 233,86 umol trolox / g ekstrak, dan 641,38 umol trolox / g ekstrak. Aktivitas antioksidan tertinggi ekstrak bakteri adalah SAB E-57 dengan Kapasitas antioksidan 641,38 umol trolox / g ekstrak