VIRUS Y VIROIDES FITOPATOGENOS
VIRUS Y VIROIDES FITOPATOGENOS2013
ContenidoI.INTRODUCCIN2II.CARACTERSTICAS DE LOS VIRUS FITOPATGENOS2III. NOMENCLATURA Y CLASIFICACIN DE LOS VIRUS3IV. IMPORTANCIA ECONMICA DE LOS VIRUS4V.MORFOLOGA DE LOS VIRUS5VI. COMPOSICIN Y ESTRUCTURA7VII. INFECCIN Y SNTESIS VIRALES8VIII. TRANSLOCACIN Y DISTRIBUCIN DE LOS VIRUS EN LAS PLANTAS11IX. SNTOMAS CAUSADOS POR VIRUS EN LAS PLANTAS14X. TRANSMISIN DE LOS VIRUS161.Transmisin de los virus mediante propagacin vegetativa172.Transmisin mecnica de los virus a travs de la savia173.Transmisin por semillas194.Transmisin por el polen195.Transmisin por insectos196.Transmisin por caros217.Transmisin por nematodos218.Transmisin por hongos229.Transmisin a travs de la cuscuta22XI. DETECCIN E IDENTIFICACIN DE LOS VIRUS FITOPATGENOS22XII. BIBLIOGRAFIA26
VIRUS Y VIROIDES FITOPATOGENOSI. INTRODUCCINLos virus son nucleoprotenas que son demasiado pequeas como para poder observarlos en el microscopio ptico, que se propagan slo en el interior de clulas vivas y que tienen la capacidad de producir enfermedad. Todos los virus son parsitos de las clulas y producen una multitud de enfermedades a todas las formas vivientes, desde las plantas y animales unicelulares hasta los grandes rboles y los mamferos. Algunos atacan al hombre, a los animales o a ambos y producen enfermedades como la gripe, poliomielitis, hidrofobia, viruela y pequeos tumores, otros ms atacan a las plantas y todava otros atacan a microorganismos como hongos, bacterias y micoplasmas. El nmero total de virus que se conocen hasta la fecha es de casi 3 700 y cada mes se identifican a otros nuevos. Cerca de una cuarta parte de todos los virus conocidos atacan y producen enfermedades en las plantas. Un solo virus puede infectar a una o varias docenas de diferentes especies de plantas y cada especie vegetal pueden ser atacadas por muchas clases distintas de virus. Con frecuencia, una planta puede tambin ser infectada por ms de un virus al mismo tiempo.Aunque los virus causan enfermedades y comparten con otros organismos vivos varias funciones genticas y la capacidad de reproducirse, se comportan tambin como molculas qumicas. En su forma ms simple, los virus constan de cido nucleico y protena, esta ltima forma una cubierta protectora llamada cpside en torno al primero. Aunque los virus pueden tener diferentes formas, tienen principalmente forma polidrica o de varilla, o variantes de estas dos estructuras bsicas. Hay siempre slo RNA o slo ADN en cada virus y, en la mayora de los virus de las plantas, un solo tipo de protenas. Sin embargo, algunos de los virus ms grandes pueden tener varias protenas distintas, cada una de las cuales quiz con una funcin distinta.Los virus no se dividen ni producen algn tipo de estructura reproductora especializada como las esporas, pero se propagan al inducir a las clulas hospedantes a que formen ms partculas virales. Los virus no producen enfermedad mediante el consumo de clulas o matndolas con toxinas, sino utilizando las sustancias celulares, ocupando los espacios libres en las clulas y alterando los componentes y procesos celulares, que a su vez alteran el metabolismo de las clulas y hacen que estas ltimas produzcan sustancias anormales y generen condiciones que influyen negativamente sobre las funciones y vida de la clula o del organismo.II. CARACTERSTICAS DE LOS VIRUS FITOPATGENOSLos virus de las plantas difieren ampliamente de todos los dems fitopatgenos no solo en tamao y forma, sino tambin en la sencillez de su constitucin qumica y estructura fsica, mtodo de infeccin, propagacin, translocacin dentro del hospedero, diseminacin y los sntomas que producen sobre el hospedero. Debido a su tamao pequeo y a la transparencia de su partcula, los virus no pueden observarse ni detectarse mediante los mtodos utilizados para otros patgenos. Los virus no son clulas ni constan de ellas.
DeteccinCuando la enfermedad de una planta es producida por un virus, las partculas virales individuales no pueden observarse con el microscopio ptico, aunque algunos virus que contienen inclusiones o cristales pueden observarse en clulas infectadas por ellos. El examen de cortes de clulas o de la savia bruta de plantas infectadas por virus en el microscopio electrnico puede o no revelar partculas semejantes a virus. Las partculas virales no siempre son fciles de encontrar con el microscopio electrnico y aunque dichas partculas se observan como sucede en casos raros, se demuestra que dichas partculas son virus y que sta es la causa de una determinada enfermedad, todava se requiere de mucho tiempo y trabajo complementario.Unos cuantos sntomas de las plantas, por ejemplo las manchas en forma de hoja de roble en las hojas y las manchas anulares necrticas o clorticas, pueden ser atribuidos a los virus con cierta certeza. La mayora de los dems sntomas producidos por virus se asemejan a los ocasionados por mutaciones, deficiencias o toxicidad de nutrientes, secreciones de insectos, otros patgenos y otros factores. Por lo tanto, la determinacin de que ciertos sntomas de las plantas son producidos por virus incluye la eliminacin de cualquier otra causa posible de la enfermedad y la transmisin del virus de plantas enfermas a plantas sanas, de tal forma que pueda excluir la transmisin de cualquiera de los dems agentes causales.Los mtodos que se utilizan actualmente para detectar a los virus de las plantas incluyen principalmente la transmisin del virus de una planta enferma a una sana ya sea por gemacin, injerto o friccin con savia de la planta. Algunos otros mtodos de transmisin utilizando insectos vectores o la cuscuta, se utilizan tambin para demostrar la presencia de un virus. Sin embargo, la mayora de estos mtodos no pueden determinar si el patgeno es un virus, un micoplasma o una bacteria fastidiosa vascular; en la actualidad slo la transmisin a travs de la savia de una planta se considera como una prueba de la naturaleza viral del patgeno. La prueba ms definitiva de la presencia de un virus en una planta la proporciona su purificacin, observacin en el microscopio electrnico y con ms frecuencia mediante pruebas serolgicas.III. NOMENCLATURA Y CLASIFICACIN DE LOS VIRUSLa nomenclatura de los virus que infectan a las plantas comnmente se basa en los sntomas ms notorios que producen sobre el primer hospedante en el que han sido estudiados. As, por ejemplo, al virus que produce un mosaico en el tabaco se le denomina virus del mosaico del tabaco mientras que a la enfermedad en s se le denomina mosaico del tabaco; al virus que produce sntomas de la mancha anular en el tomate se le denomina virus de la mancha anular del tomate y a la enfermedad se le denomina mancha anular del tomate y as sucesivamente.Sin embargo, tomando en cuenta la variabilidad de los sntomas que produce un virus sobre una misma planta hospedante bajo condiciones ambientales distintas, por las distintas variantes de un virus en un mismo hospedante o por un mismo virus en hospedantes distintos, resulta evidente que este sistema de nomenclatura deja mucho que desear.Todos los virus pertenecen al reino VIRA. Dentro de este reino hay divisiones de virus, los virus de DNA y los virus de RNA, dependiendo de si el cido nucleico del virus es DNA o RNA. Los virus dentro de cada divisin son helicoidales o cbicos (polidricos). Dentro de cada subdivisin puede haber virus que tengan una o dos bandas de RNA o de DNA, que posean o carezcan de una membrana en torno a la cubierta protenica, que contengan o carezcan de ciertas sustancias, que tengan cierta simetra de hlice en el caso de los virus helicoidales o una cierta cantidad de subunidades en los virus cbicos (polidricos), que difieran en tamao y por ltimo, que posean cualquier otra propiedad fsica, qumica o biolgica.En la mayora de las enfermedades de las plantas que se supone que son producidas por virus, an no se ha podido observar a ste y es probable que ms adelante se demuestre que algunas de esas enfermedades sean ocasionadas por otros patgenos diferentes por virus hasta ahora no caracterizados. Sin embargo, con respecto a aquellas enfermedades de las plantas que se ha demostrado que son producidas por virus, se ha propuesto un sistema de nomenclatura y clasificacin en el que los virus se agrupan con base en los datos mencionados con anterioridad, al tamao y a otras particularidades que son nicas de los virus que infectan a las plantas. Los grupos se nombran segn el virus tpico del grupo.IV. IMPORTANCIA ECONMICA DE LOS VIRUSLos virus atacan a todas las formas de vida, desde micoplasmas, bacterias, hongos y algas hasta plantas herbceas y rboles.Las enfermedades de las plantas producidas por virus daan las hojas, tallos, races, frutos, semillas o flores y producen prdidas econmicas ya que disminuyen la productividad y calidad de los productos agrcolas. Las prdidas pueden ser catastrficas, moderadas o insignificantes.A los virus se debe un porcentaje considerable de las prdidas que sufren anualmente los distintos cultivos a nivel nacional, debido a enfermedades.La severidad de las enfermedades virales particulares vara con la localidad, la variedad de cultivo y de una estacin a otra. Algunas han destruido plantaciones enteras de ciertos cultivos en algunas reas, como sucedi con la viruela del ciruelo, la hoja blanca del arroz, los amarillamientos de la remolacha y la tristeza de los ctricos. Sin embargo, la mayora de las enfermedades virales de las plantas aparecen ao con ao en cultivos en los que producen prdidas que van de pequeas a moderadas pero generalmente poco importantes, en ocasiones sin inducir algn sntoma visible. Por ejemplo, el virus X de la papa, el cual apareca en todas las plantas de papa cultivadas en los Estados Unidos, causa disminuciones en la produccin hasta de casi 10% aun cuando no muestren sntomas visibles en el campo.
V. MORFOLOGA DE LOS VIRUSLos virus de las plantas tienen formas y tamaos diversos, pero a menudo se describen como (varillas rgidas o filamentos flexibles), rhabdovirus (en forma de bacilo) y esfricos (isomtricos o polidricos) (ver figuras).Algunos virus alargados, como el virus del mosaico del tabaco y el virus del mosaico estriado de la cebada, tienen forma de varillas rgidas con dimensiones aproximadas de 15 x 300 nm y 20 x 130 nm, respectivamente. La mayora de los virus alargados tienen la forma de filamentos Largos, delgados y flexibles que frecuentemente tienen de 10 a 13 nm de ancho y una longitud que va de 480 nm (en el caso del virus X de la papa), hasta 2000 nm (en el caso del virus de la tristeza de los ctricos). Parece ser que la mayora de estos virus tienen la forma de partculas de distintas longitudes, de ah que el nmero dado frecuentemente representa la longitud ms comn.Los rhabdovirus son varillas cortas, y en forma de bacilo, aproximadamente de 3 a 5 veces mas largos que anchos como sucede con el virus del enanismo amarillo de la papa, el cual mide 75 x 380 nm, el virus del mosaico estriado del trigo: 65 x 270 nm y el virus del amarillamiento necrtico de la lechuga, que mide 52 x 300 nm.La mayora de los virus esfricos (o quiz todos), son en realidad polidricos y tienen un dimetro que va desde casi 17 nm (en el caso del virus satlite de la necrosis del tabaco) hasta 60 nm (como el virus del tumor de las heridas). Parece ser que el virus de la marchitez manchada del tomate tiene forma esfrica, es flexible y tiene un dimetro de 70 a 80 nm.* La mayora de los virus que infectan a las plantas son virus de genoma dividido, pues tienen dos o ms bandas distintas de cido nucleico encapsuladas en partculas de diferente tamao formadas por las mismas subunidades proteicas. As, el virus cascabel del tabaco consta de dos varillas, una larga que mide 195 x 25 nm y una ms corta que tiene una longitud que va de 43 a 110 x 25 nm; el virus de mosaico de la alfalfa consta de cuatro componentes que miden 56 x 18, 43 x 18, 35 x 18 y 30 x 18 nm (ver figura) Asimismo, muchos virus isomtricos tienen dos o tres componentes distintos que en general tienen el mismo tamao pero diferente peso ya que contienen cantidades distintas de cido nucleico. En todos los casos mencionados ms de uno de los componentes debe aparecer en la planta para que el virus se propague y funcione en su manera usual.
La superficie, tanto de los virus alargados como de los esfricos consta de un nmero definido de subunidades protenicas que se encuentran dispuestas en espiral en los virus alargados y agrupadas a los costados de las partculas polidricas de los virus esfricos.Vistos en corte transversal, los virus alargados tienen forma de tubos huecos en los que las subunidades protenicas forman la cubierta externa, y el cido nucleico tambin dispuesto espiralmente, se encuentra embebido entre los extremos internos de dos espirales sucesivas de las subunidades protenicas. Los virus esfricos pueden o no ser huecos y su envoltura visible puede constar de las subunidades protenicas con el cido nucleico en su interior y dispuesto en una forma hasta ahora desconocida.Los rhabdovirus, los virus del enanismo amarillo de la papa, del amarillamiento necrtico de la lechuga y algunos otros, estn constituidos por una envoltura externa o membrana que presenta protuberancias sobre su superficie. Dentro de esta membrana se encuentra la nucleocpside, que consta de cido nucleico dispuesto helicoidalmente y subunidades protenicas asociadas a l.VI. COMPOSICIN Y ESTRUCTURATodos los virus que infectan a las plantas constan por lo menos de un cido nucleico y una protena. Algunos de ellos constan de molculas de cido nucleico de diferentes tamaos y protena y algunos de ellos contienen compuestos qumicos adicionales como poliaminas, lpidos o enzimas especficas.Las proporciones de cido nucleico y protena varan con cada virus, el cido nucleico constituye entre 5 y 40% y la protena del 60 al 95% restante. Los bajos y altos porcentajes de cido nucleico y de protena, respectivamente, se encuentran en los virus elongados, mientras que los esfricos contienen los ms altos porcentajes de cido nucleico y los ms bajos porcentajes de protena. El peso total de la nucleoprotena de las distintas partculas virales vara des-de 4.6 millones de unidades de peso molecular (para el virus del mosaico del bromo), 39 millones (en el caso del virus del mosaico del tabaco) hasta 73 millones (para el virus cascabel del tabaco). Sin embargo, el peso del cido nucleico flucta solamente entre 1 y 3 millones (1-3 x 106) de unidades de peso molecular por partcula viral (en el caso de la mayora de los virus), aunque algunos de ellos constan hasta de 6 x 106 unidades de peso molecular y el virus del tumor de las heridas de 12 componentes tiene un cido nucleico cuyo peso aproximado es de 16 x 106 de esas unidades. El tamao de todos los cidos nucleicos virales es bastante pequeo cuando se compara con los de 0.5 x 109 para los micoplasmas, 1 x 109 para los espiroplasmas y ms de 1.5 x 109 para las bacterias.Composicin y estructura de la protena viralLas protenas virales, al igual que todas las protenas, constan de aminocidos: La secuencia de estos ltimos dentro de una protena est determinada por el material gentico, que en los virus es cido desoxirribonucleico (DNA) o cido ribonucleico (RNA) y determina la naturaleza de la protena.Los componentes protenicos de los virus que atacan a las plantas estn constituidos por subunidades repetitivas. El contenido y secuencia de los aminocidos es constante para las subunidades protenicas idnticas de un virus, pero puede variar para los diferentes virus, las distintas cepas del mismo virus e incluso para las diferentes protenas de una misma partcula viral. Se sabe el contenido y la secuencia de aminocidos de las protenas de varios virus, pero slo se conoce la secuencia completa de los aminocidos de la protena del mosaico del tabaco (VMT) y del virus del mosaico amarillo del nabo (VMAN). As, la subunidad protenica del VMT consta de 158 aminocidos en una secuencia constante, mientras que la subunidad proteica del VMAN consta de 189 aminocidos.En el VMT las subunidades protenicas estn dispuestas en una hlice que contiene 16 1/3 subunidades por vuelta ( 49 subunidades cada 3 vueltas). La cavidad central de la partcula viral que se encuentra por debajo del eje tiene un dimetro de 4 nm, mientras que su dimetro mximo es de 18 nm. Cada partcula del VMT consta de aproximadamente 130 vueltas de hlice de subunidades protenicas. El cido nucleico se encuentra contenido firmemente entre las hlices de las subunidades protenicas. En los rhabdovirus las nucleoprotenas helicoidales se encuentran cubiertas por una membrana.En los virus polidricos que infectan a las plantas las subunidades protenicas se encuentran agrupadas firmemente en arreglos que forman 20 facetas (o mltiplos de 20) y forman una cubierta. Dentro de esta cubierta el cido nucleico se encuentra plegado o, en todo caso, organizado.El cido nucleico de la mayora de los virus que infectan a las plantas es RNA, pero se ha demostrado que existen cuando menos 25 virus cuyo cido nucleico es DNA. Tanto el DNA como el RNA son largas molculas en forma de cadena que constan de centenares o, con mayor frecuencia, de miles de unidades denominadas nucletidos. Cada nucletido consta de un compuesto en anillo denominado base, unido al carbn 5 de un azcar [ribosa (I) en el RNA y desoxirribosa (u) en el DNA], los cuales a su vez se encuentran unidos al cido fosfrico. El azcar de un nucletido reacciona con el fosfato de otro y esto se repite varias veces formando as la banda de RNA o DNA. En el RNA viral, slo una de las 4 bases puede unirse a cada molcula de ribosa. Estas bases son la adenina, guanina, citosina y el uracilo. Las dos primeras, la adenina y guanina, son purinas, mientras que la citosina y el uracilo son pirimidinas. Las frmulas qumicas de las bases y una de sus posibles posiciones relativas a la cadena de RNAVII. INFECCIN Y SNTESIS VIRALESLos virus que infectan a las plantas penetran en las clulas slo a travs de heridas producidas mecnicamente o por ciertos vectores, o bien cuando un grano de polen infectado se deposita en un vulo.El cido nucleico (RNA) del virus pierde en primer trmino su cubierta protenica. Induce entonces a la clula a sintetizar enzimas denominadas RNA polimerasas (RNA sintetasas o RNA replicasas). Estas enzimas, en presencia del RNA viral que sirve como modelo y de los nucletidos que la constituyen, sintetizan ms RNA. El primer nuevo RNA que se sintetiza no es el viral, sino una cadena que es una imagen en espejo del RNA y que, conforme se sintetiza, se une temporalmente a la cadena del RNA viral (ver figura). As, los dos forman un RNA de doble banda que en poco tiempo se separa y forma el RNA del virus original y la banda de imagen en espejo (-), de las cuales la ltima sirve como modelo de la sntesis de RNA (banda +) de ms virus.La replicacin de algunos virus de RNA de una sola banda que tienen partes de su RNA en dos o ms partculas virales, de algunos rhabdovirus y de algunos virus de RNA de doble banda, difiere considerablemente del proceso mencionado anteriormente. El virus en los que los distintos segmentos de RNA aparecen dentro de dos o ms partculas virales, todas las partculas o la mayora de ellas deben estar en la misma clula para que el virus se replique y se desarrolle la infeccin. En los rhabdovirus de RNA de una sola banda, el RNA rio es infeccioso debido a que es la banda (-). Este cido debe ser transcrito por la enzima portada por el virus, denominada transcriptasa en un RNA de banda (+) en el hospedante y este RNA debe replicarse como se mencion con anterioridad. En los virus isomtricos de doble banda, el RNA se encuentra segmentado dentro del mismo virus, no es infeccioso y depende para su replicacin en el hospedante de una enzima transcriptasa que tambin porta el virus.En un principio se consider que el mecanismo de duplicacin del DNA de doble cadena de los virus de DNA que infectan a las plantas era idntico a la duplicacin del DNA nuclear del hospedante. Sin embargo, hoy en da se sabe que la duplicacin de los virus de DNA de doble banda es un proceso mucho ms complejo. Brevemente, despus de que se ha producido la infeccin de la planta hospedante, el DNA viral entra al ncleo de la clula, donde parece superenrollarse y forma un minicromosoma. Este ltimo se duplica parcialmente y tambin es transcrito en dos RNA de una sola banda: el RNA ms pequeo es transportado al citoplasma, donde se traduce en protenas codificadas por el virus; el RNA de mayor tamao tambin se transporta al mismo punto en el citoplasma, pero ah se utiliza como molde para que, por medio del proceso de transcripcin inversa, se transforme en un DNA completo del virin, que rpidamente se encapsula por subuniddes protenicas para formar viriones completos. Sin embargo, an no se ha determinado con certeza el mecanismo de duplicacin del DNA de una sola cadena (DNA) de los virus de DNA que infectan a las plantas. En los virus de DNA que infectan a animales y vegetales, el DNA se duplica formando un crculo rodante que produce una banda milimtrica (-) que sirve de molde para la sntesis de bandas milimtricas (+) que se fragmentan despus para formar bandas (+) de longitud unitaria.Tan pronto como el nuevo cido nucleico viral se sintetiza, parte de l se traduce, es decir, induce a la clula hospedante para que sintetice las molculas protenicas que sern sus subunidades de protena y que formarn la cubierta protenica del virus. Parece ser que slo una parte de la banda de DNA o RNA del virus se requiere para participar en la sntesis de la pro-tena viral. Dado que cada aminocido de la molcula de la subunidad protenica se codifica por tres nucletidos del RNA viral, para el caso del VMT, cuyo RNA consta de 6 400 nucletidos (ver figura) y su protena de 158 aminocidos, slo se requieren 474 nucletidos para codificar la secuencia de aminocidos en la subunidad protenica.La sntesis de protenas en las clulas sanas depende de la existencia de aminocidos y de la participacin de ribosomas, RNA mensajero y RNA de transferencia. Cada RNA de transferencia es especfico para un aminocido, al cual transporta a lo largo de la molcula de RNA mensajero. Esta ltima molcula, que se sintetiza en el ncleo y refleja parte del cdigo del DNA, determina el tipo de protena que ser producida mediante la codificacin de la secuencia en la cual los aminocidos estarn dispuestos. Los ribosomas parecen desplazarse a lo largo del RNA mensajero y proporcionan la energa necesaria para el enlace de los aminocidos preordenados para formar la protena (ver figura).Durante la sntesis de las protenas del virus, la porcin del RNA viral que codifica la protena del virus, funciona como el RNA mensajero. El virus utiliza los aminocidos, ribosomas y los RNA de transferencia del hospedante, pero en realidad sirve como su propio modelo (debido a la porcin de RNA que sirve como RNA mensajero), de ah que la protena sintetizada sea utilizada exclusivamente por el virus como una cubierta (figura 14-7) o para otras funciones.Durante la sntesis viral, ciertas porciones del cido nucleico del virus participan tambin en la sntesis de protenas, ms que en la cubierta protenica del virus (ver figura). Algunas de esas protenas son enzimas, como es el caso de las replicasas, que se requieren para la replicacin del cido nucleico viral, pero cabe sealar que an se desconoce la funcin que desempean la mayora de esas protenas.Cuando se han formado nuevas subunidades protenicas y nuevo cido nucleico del virus, parece ser que el cido nucleico organiza a las subunidades protenicas en tomo a l y que ambos componentes se unen para formar la partcula viral completa o vrin.El sitio o sitios de la clula en los que la protena y el cido nucleico del virus se sintetizan y en los que estos dos componentes se unen para formar los viriones de acuerdo con el grupo de virus de que se trate. En el caso de la mayora de los virus de RNA, este cido nucleico, despus de que se libera de su cubierta protenica, se autoduplca en el citoplasma, donde tambin funciona como RNA mensajero y, conjuntamente con los ribosomas y los RNA de transferencia, produce las subunidades protenicas del virus.El ensamblaje de los viriones contina tambin en el citoplasma. En otros virus, por ejemplo los virus del ADN de una sola banda, la sntesis del cido nucleico y de la protena del virus as como su ensamblaje en los viriones, parece realizarse en el ncleo, desde donde las partculas virales posteriormente son liberadas al citoplasma.Los primeros viriones intactos aparecen en las clulas vegetales aproximadamente 10 horas despus de haberse producido la inoculacin. Las partculas virales pueden existir individualmente o en grupos y formar cuerpos de inclusin amorfos o cristalinos dentro de los componentes de la clula (citoplasma y ncleo).
VIII. TRANSLOCACIN Y DISTRIBUCIN DE LOS VIRUS EN LAS PLANTASPara que un virus infecte a una planta, primero debe pasar de una clula a otra y propagarse por la mayora de las clulas (si no es que en todas) en las que se mueve. En su traslado de una clula a otra, los virus se desplazan a travs de los plasmodesmos que unen a las clulas adyacentes (ver figura). Sin embargo, parece ser que los virus no se mueven a travs de las clulas parenquimatosas a menos que las infecten y se propaguen en ellas, dando lugar a una invasin constante y directa de clula a clula. En las clulas parenquimatosas de la hoja, el virus se desplaza aproximadamente 1 mm o a un ritmo de 8 a 10 clulas por da.
Aunque algunos virus parecen restringirse ms o menos a un movimiento de clula a clula a travs del parnquima, se sabe que una gran cantidad de ellos son transportados con rapidez a grandes distancias a travs del floema. Al parecer, el transporte de esos virus por el floema se lleva a cabo con bastante rapidez en los tubos cribsos, por los que se mueven con una velocidad hasta de 15 cm en los primeros 6 minutos. Sin embargo, la mayora de los virus requieren de 2 a 5 o incluso ms das para salir de una hoja inoculada. Cuando el virus ha entrado al floema, se mueve con rapidez hacia las zonas en proceso de crecimiento (meristemos apicales) o hacia otras regiones de la planta donde se utilizan los aumentos, tales como los tubrculos y los rizomas (ver figura). Por ejemplo, cuando el virus de la papa se introduce en las hojas de la parte basal de las plantas jvenes de papa, se mueve rpidamente hacia el tallo, pero cuando dichas plantas que ya han formado tubrculos son inoculadas en forma similar, el virus no se mueve en sentido ascendente durante ms de 30 das pero se mueve en sentido descendente hacia los tubrculos. Una vez que se encuentra en el floema, el virus se propaga sistmicamente por toda la planta y vuelve a penetrar en las clulas parenquimatosas adyacentes al floema a travs de los plasmodesmos.La distribucin de los virus dentro de las plantas vara segn el virus y la planta. El desarrollo de los sntomas de las lesiones locales se ha considerado como una seal de la localizacin del virus dentro del rea de la lesin (ver figura); aunque eso es quiz cierto en algunos casos, en varias enfermedades las lesiones continan creciendo y, en ocasiones, el desarrollo de los sntomas sistmicos contina, lo que indica que el virus contina propagndose ms all de los lmites de las lesiones.En las infecciones virales sistmicas, parece ser que algunos virus translocados en el floema estn limitados a este tejido y a unas cuantas clulas parenquimatosas adyacentes. En este tipo de infeccin se incluyen enfermedades como el enrollamiento foliar de la papa y el enanismo amarillo de los cereales. En general, los virus que producen las enfermedades del tipo de los mosaicos no se limitan a un tipo de tejidos, pudiendo haber distintos modelos de localizacin. Se ha estimado que las clulas vegetales infectadas por el virus del mosaico contienen entre 1 000 000 y 10 000 000 de partculas virales por clula. La distribucin sistmica de algunos virus es bastante completa y puede abarcar todas las clulas vivas de una planta. Sin embargo, parece que algunos otros virus dejan segmentos o claros de tejidos que estn libres de virus. Algunos virus invaden casi inmediatamente a los tejidos meristemticos apicales recin formados, mientras que en otros casos las zonas de crecimiento de los tallos o de las races de las plantas afectadas aparentemente se encuentran libres de virus.
IX. SNTOMAS CAUSADOS POR VIRUS EN LAS PLANTASEl ms comn y en ocasiones el nico tipo de sntoma es una tasa de crecimiento menor de la planta, lo cual causa varios grados de enanismo o achaparramiento de toda la planta. Al parecer casi todas las enfermedades virales ocasionan cierto grado de disminucin en el rendimiento total y que el perodo de vida de las plantas infectadas se acorte. Estos efectos pueden ser severos y fciles de observar o pueden ser muy poco significativos y pasar inadvertidos con facilidad.Los sntomas ms evidentes de las plantas infectadas por virus son comnmente los que aparecen sobre el follaje, pero algunos virus producen sntomas visibles sobre el tallo, frutos y races con o sin el desarrollo de sntomas foliares (ver figura). En casi todas las enfermedades virales de las plantas que aparecen en el campo, el virus se encuentra distribuido por toda la planta (infeccin sistmica), de ah que los sntomas producidos se les denominen sntomas sistmicos. En la mayora de las plantas inoculadas artificialmente con ciertos virus y quiz en algunas infecciones naturales, el virus induce la formacin de pequeas lesiones, a menudo necrticas, slo a nivel de los puntos de entrada (infecciones locales), por lo que a los sntomas se les denomina lesiones locales. Muchos virus infectan a ciertos hospedantes sin provocar el desarrollo de sntomas visibles en ellos. A dichos virus en general se les denomina virus latentes y a los hospedantes se les denomina portadores asntomticos. Sin embargo, en otros casos, las plantas que por lo comn muestran sntomas una vez que han sido infectadas por un cierto virus pueden permanecer temporalmente asintomticas bajo ciertas condiciones ambientales (como en el caso de las altas o bajas temperaturas) y a dichos sntomas se les denomina sintonas enmascarados. Por ltimo, las plantas pueden mostrar sntomas severos o agudos poco despus de la inoculacin, los cuales propician su muerte; en caso de que el hospedante sobreviva a la fase de shock inicial, los sntomas (sntomas crnicos) tienden a ser ms moderados en los rganos de la planta de desarrollo posterior, conduciendo a una recuperacin parcial o incluso total. Por otra parte, los sntomas pueden aumentar progresivamente en severidad y conducir a un decaimiento gradual (lento) o rpido de la planta.Los tipos ms comunes de sntomas que producen las infecciones virales sistmicas son los mosaicos y las manchas anulares.Los mosaicos se caracterizan por la presencia de reas de color verde claro, amarillo o blanco entremezcladas con el color verde normal de las hojas o frutos o por reas blanquizcas entremezcladas con las reas de color normal de las flores o frutos. Dependiendo de la intensidad o modelo del manchado, los sntomas del tipo del mosaico se describen como moteado, raya, modelo anular, modelo linear, aclaramiento de las nervaduras, bandeado de las nervaduras o manchado clortico.Las manchas anulares se caracterizan por la presencia de anillos clorticos o necrticos sobre las hojas y en ocasiones tambin sobre el fruto y tallo. En la mayora de este tipo de enfermedades los sntomas, no el virus, tienden a desaparecer poco despus de su aparicin y a reaparecer bajo ciertas condiciones ambientales.Una gran cantidad de otros sntomas virales menos comunes han sido descritos e incluyen achaparramiento (como por ejemplo, el achaparramiento arbustivo del tomate), enanismo (en el caso del enanismo amarillo de la cebada), enrollamiento foliar (el enrollamiento foliar de la papa), amarillamientos (como en el amarillanento de la remolacha), roya (como por ejemplo, la roya del tabaco), sarna (como sucede en la sama del ciruelo), enacin (como por ejemplo, el mosaico de la enacin del chcharo), tumores (en el caso del tumor de las heridas), picadura del tallo (la picadura del tallo del manzano), picadura del fruto (como ocurre con la picadura ptrea del peral) y aplanamiento y deformacin del tallo (como en la enfermedad de la rama aplanada del manzano). Estos sntomas pueden manifestarse aunados a otros que aparecen en otras partes de la misma planta.
X. TRANSMISIN DE LOS VIRUSLos virus que infectan a las plantas nunca o casi nunca, abandonan espontneamente a las plantas. Por esta razn, los virus no son diseminados por el viento o el agua, e incluso cuando son transportados en la savia o en los restos de plantas, en general no producen infecciones a menos que entren en contacto con los contenidos de una clula viva daada. Sin embargo, son transmitidos de planta en planta mediante diversas formas como la propagacin vegetativa, mecnicamente a travs de la savia y por medio de semillas, polen, insectos, acaras, nematodos, la cuscuta y los hongos.Varios de los mtodos de transmisin de los virus (como la propagacin vegetativa y a travs de las semillas) revisten gran importancia, principalmente por el hecho de que permiten que el virus sea transmitido de una generacin de plantas a otra, pero carecen de importancia en la propagacin del virus de las plantas enfermas a las plantas sanas de una misma generacin. Por s mismos, los mecanismos de transmisin conducen slo a las infecciones primarias de las plantas y, por ende, slo a las enfermedades monocclicas. Por otra parte, los dems mecanismos de transmisin de los virus, en particular los que involucran vectores como los insectos, no slo introducen al virus en el cultivo (infeccin primaria), sino que tambin permiten que sea transmitido de las plantas infectadas a las plantas sanas de una misma generacin y durante la misma estacin de crecimiento (infecciones secundarias). La frecuencia con la que el virus produce infecciones secundarias vara con el vector en particular y aumenta conforme aumenta el tamao de la poblacin del vector y existan condiciones climticas favorables, ya que stas influyen sobre la propagacin del mismo. Las enfermedades que producen los virus transmitidos por vectores son policclicas y el nmero de ciclos patolgicos por estacin vara de unos cuantos (2 a 5 en el caso de los virus transmitidos por nematodos) a muchos de ellos (10 a 20 o ms como los virus transmitidos por fdos). En efecto, cuando los virus que son transmitidos mediante la propagacin vegetativa o semillas de las plantas, son transmitidos tambin por vectores, la presencia de ambos (una gran cantidad de inoculo primario en el cultivo y virus que se propagan por vectores y que producen infecciones secundarias) suele dar como resultado la infeccin primaria y total de las plantas de cultivo, ocasionando prdidas considerables.1. Transmisin de los virus mediante propagacin vegetativaSiempre que las plantas se propaguen vegetativamente mediante gemacin o injerto, mediante esquejes o por el uso de tubrculos, cormos, bulbos o rizomas, cualquier tipo de virus que haya en la planta madre, a partir de la cual dichos rganos de propagacin se obtienen casi siempre ser transmitido a la progenie, .Tomando en cuenta que casi todos los frutos y la mayora de los rboles de ornato y arbustos se propagan mediante gemacin, injerto o esquejes y que muchas plantas cultivadas como las papas y las flores se propagan mediante tubrculos, cormos o esquejes, este medio de transmisin de los virus es el ms importante para todos estos tipos de plantas. La transmisin de los virus mediante propagacin vegetativa no slo hace que las nuevas plantas se enfermen, sino que en los casos de propagacin mediante gemacin o injerto, la presencia de un virus en la yema o el injerto puede resultar en una disminucin apreciable en el xito de las uniones del injerto o yema con el patrn.La transmisin de virus se produce tambin a travs de los injertos naturales entre las races de plantas adyacentes, particularmente de rboles, las races de los cuales con frecuencia se encuentran entremezcladas y en contacto mutuo. Con respecto a varios virus que infectan a los rboles, los injertos naturales de la raz constituyen el nico medio conocido de propagacin del virus de rbol en los huertos ya establecidos.2. Transmisin mecnica de los virus a travs de la saviaLa transmisin mecnica de los virus que infectan a las plantas en la naturaleza mediante transferencia directa de la savia a travs del contacto de una planta con otra es un fenmeno poco frecuente y relativamente poco importante. Dicha transmisin puede efectuarse entre plantas bastante prximas una vez que ha soplado un viento fuerte que hace que las hojas de esas plantas se rocen y, en caso de que presenten heridas, que intercambien parte de su savia transmitiendo as algn virus presente en esta ltima. Al parecer, el virus X de la papa (VXP) es uno de los que se transmite con mayor facilidad por este medio. Cuando las plantas son daadas por el hombre durante las labores de cultivo en el campo o en el invernadero y parte de la savia infectiva por el virus, que se adhiere a las herramientas, manos o ropa se transfiere accidentalmente a plantas daadas posteriormente, la transmisin del virus a travs de la savia se extiende y se efecta con rapidez y, como ocurre en el caso del VMT en el tabaco y tomate, puede causar prdidas considerables. La savia proveniente de plantas infectadas por un virus que se transfiere de una planta a otra en las partes bucales o el cuerpo de los animales que se aumentan y mueven entre las plantas puede, en raras ocasiones, transmitir el virus.La mxima importancia de la transmisin mecnica de los virus que infectan a las plantas se deriva de la absoluta necesidad de estudiar casi cualquier faceta de esos patgenos que producen enfermedades en las plantas, debido a que todas las investigaciones que se hacen sobre el virus fuera de su hospedante dependen de la habilidad para demostrar y medir la infectividad del material.Respecto a la transmisin mecnica de un virus de una planta a otra, los tejidos de la planta infectada que se suponga que contienen una gran concentracin del virus, como en el caso de los ptalos de la flor y las hojas jvenes, se trituran en un mortero o con algn otro tipo de triturador. El rompimiento de las clulas libera al virus en la savia. En ocasiones, se aade una solucin amortiguadora, a menudo un amortiguador de fosfato, para estabilizar el virus. La savia extrada se filtra entonces a travs de una estopilla y se centrifuga a bajas velocidades para eliminar los fragmentos de tejido, o a velocidades bajas y altas alternadamente en caso de que se desee la concentracin o purificacin del virus. La savia cruda o parcialmente purificada se aplica despus sobre la superficie de las hojas de las plantas jvenes, las cuales se espolvorean previamente con un abrasivo como el carborundum de 600 mallas para lesionar alas clulas. La aplicacin de la savia comnmente se hace pasando suavemente sobre las hojas una estopilla o gasa humedecida de savia, con el dedo, una esprala de cristal, un pincel de pintor o con un rociador pequeo. En las inoculaciones bien realizadas, el virus penetra en las clulas de la hoja a travs de las heridas hechas por el abrasivo o por las estructuras pilosas daadas de la hoja e inicia nuevas infecciones. En los hospedantes de lesiones locales, los sntomas aparecen con frecuencia al cabo de 3 7 das, o ms y el nmero de las lesiones locales es proporcional a la concentracin del virus en la savia. En los hospedantes infectados sistmicamente, los sntomas comnmente tardan entre 10 y 14 o ms das para desarrollarse.En ocasiones, las mismas plantas pueden mostrar al principio lesiones locales y posteriormente sntomas sistmicos. En la transmisin mecnica de los virus, la relacin taxonmica de las plantas donadora y receptora (indicadora) no es importante, ya que el virus de un tipo de planta, ya sea que se trate de una planta herbcea o de un rbol, puede ser transmitido a docenas de plantas herbceas no relacionadas (como es el caso de hortalizas, ores o malezas).Aunque los virus casi siempre se transmiten mediante gemacin o injerto, varios de ellos, en particular los que infectan a las plantas leosas, an no han podido ser transmitidos mecnicamente.Las razones posibles para explicar esta falta parece ser que algunos virus no se hallan en una concentracin bastante alta en la planta donadora, que son inestables en la savia o son inactivados con rapidez por las sustancias inhibidoras que se liberan o forman despus de la trituracin de las clulas y tambin debido a que parece ser que algunos virus, como en el caso de los que producen enfermedades del tipo de los amarillamientos, requieren que sean introducidos en tejidos especficos (como por ejemplo, en el floema) para que puedan producir infeccin.3. Transmisin por semillasSe ha informado que casi un centenar de virus son transmitidos por semillas. Sin embargo, como regla general, slo una pequea cantidad (del 1 al 30%) de las semillas que provienen de plantas infectadas por un virus lo transmite, de ah que la frecuencia de transmisin vare segn la relacin que se establezca entre el virus y su hospedero. En unos cuantos casos, como por ejemplo en la soya, el virus puede ser transmitido por casi el 100% de las semillas de las plantas infectadas, mientras que en otros, la transmisin del virus a travs de semillas puede ser bastante alta, entre 28 y 94% en el virus del mosaico de la calabaza en el meln y del 50 al 100% en el virus del mosaico estriado de la cebada en esta misma planta. Sin embargo, incluso dentro de una misma especie, las variedades diferentes o plantas inoculadas en distintas etapas de su desarrollo pueden variar en los porcentajes de sus semillas que transmiten el virus.En la mayora de los virus transmitidos a travs de las semillas de las plantas parece ser que el virus proviene principalmente del vulo de las plantas infectadas, pero se conocen varios casos en los que el virus que se encuentra en la semilla parece provenir, con la misma frecuencia, del polen que fertiliz a la flor.4. Transmisin por el polenLos virus transmitidos por el polen pueden infectar no slo a las semillas y plntulas que se desarrollan a partir de l, sino lo que es ms importante, pueden propagarse a travs de la flor fecundada y descender hasta la planta madre, a la que infectan. Se sabe que este medio de transmisin del virus de planta en planta a travs del polen ocurre por ejemplo, en el virus de la mancha anular de los frutos de hueso en el cerezo cido.Aunque la polinizacin de las flores con polen infectado por un virus puede redundar en una menor produccin de frutos que la que se obtiene con el polen libre de virus, la transmisin de este patgeno de planta en planta a travs del polen es, al parecer, bastante rara o se produce no slo en unos cuantos virus.5. Transmisin por insectosSin duda alguna, el mtodo de transmisin de los virus ms comn y econmicamente ms importante en el campo es a travs de insectos vectores. Sin embargo, los miembros de unos pocos grupos de insectos, pueden transmitir los virus que infectan a las plantas. El orden Homoptera, que incluye tanto a los fidos (Aphidae) como a las chicharritas (Cicadellidae o Jassidae), contiene, por mucho, la mayor cantidad y los insectos vectores ms importantes de losvirus que infectan a las plantas. Algunas especies de varias otras familias de ese mismo orden transmiten tambin virus de las plantas, pero ni su cantidad ni su importancia se compara a las de las familias ya mencionadas. Entre dichas familias se encuentran las moscas blancas (Aleuroididae), los piojos harinosos y las escamas (Coccoidae) y los periquitos (Membracidae). Unos cuantos de los insectos vectores de los virus que infectan a las plantas pertenecen a otros rdenes, tales como las chinches verdaderas (Hemiptera), los trips (Thysanoptera), los escarabajos (Coleptera) y los saltamontes (Orthoptera). Los insectos vectores ms importantes de los virus: los fidos, las chicharritas y los otros grupos del orden Homoptera, as como tambin las chinches verdaderas, tienen partes bucales perforadoras y succionadoras; todos los dems grupos tienen partes bucales masticadoras y la transmisin de los virus por ellos es mucho menos comn.Los insectos con partes bucales succionadoras llevan los virus, que infectan a las plantas, dentro de sus estiletes (virus no persistentes o portados por el estilete) o los acumulan dentro de su soma y, una vez que el virus ha pasado a travs de los tejidos del insecto, introducen nuevamente al virus en las plantas a travs de sus partes bucales (virus persistentes o circulativos). Algunos virus circulativos se propagan en sus vectores correspondientes y se les denomina virus propagativos. Los virus transmitidos por insectos con partes bucales masticadoras pueden tambin ser circulativos o viajar en las partes bucales del insecto.Los fidos son los vectores ms importantes de los virus que infectan a las plantas y transmiten a la gran mayora (alrededor de 170) de todos los virus portados en estilete. Como regla general, varias especies de fidos transmiten al mismo virus portado en el estilete, de ah que esas mismas especies transmitan a varios virus, pero en muchos casos la relacin que se establece entre el virus y su vector es bastante especfica. En general, los fidos adquieren al virus portado en el estilete una vez que se alimentan de una planta enferma durante slo unos cuantos segundos (30 o menos) y los transmiten cuando se desplazan hacia una planta sana y se alimentan de ella en un lapso de tiempo similar. El perodo en que los fidos son virulferos despus de haber adquirido un virus portado en el estilete vara desde unos cuantos minutos hasta varias horas, despus de lo cual ya no pueden transmitir al virus. Se dice que los virus portados en el estilete son transmitidos en forma no persistente. En unos cuantos casos de transmisin de los virus circulativos por fidos, stos no pueden transmitir al virus inmediatamente, por lo que deben esperar varias horas a partir del momento en que lo adquirieron por alimentacin, pero una vez que comienzan a transmitir el virus, continan hacindolo durante muchos das despus del traslado de los insectos desde la fuente del virus (transmisin persistente). En el caso de los fidos que transmiten al virus portado en el estilete, parece ser que el virus se localiza sobre la punta de los estiletes, de ah que el insecto lo pierda cuando fricciona sus partes bucales en las clulas hospedantes; conviene mencionar que el virus no persiste a travs de la muda o los huevecillos del insecto vector.Por lo menos 40 virus que infectan a las plantas son transmitidos por chicharritas, incluyendo virus con RNA de doble banda, virus baciliformes y pequeos virus isomtricos.Los virus transmitidos por chicharritas producen alteraciones en las plantas principalmente en la regin del floema. Todos los virus transmitidos por chicharrillas son circulativos, se sabe que varios de ellos se propagan en el vector (como en el caso de los virus propagativos) y que algunos persisten a travs de la muda y son transmitidos en grado variable a travs de la etapa de huevecillo del vector. La mayora de las chicharritas vectoras requieren de un perodo de alimentacin de uno o varios das antes de que sean virulferas pero una vez que han adquirido al virus continan siendo virulferas durante el resto de su vida. A menudo hay un perodo de incubacin de una a dos semanas entre el momento en que una chicharrita adquiere al virus y el momento en que puede transmitirlo por primera vez.6. Transmisin por carosSe ha demostrado que los caros de la familia Eriophyidae transmiten nueve virus, incluyendo mosaico rayado del trigo, mosaico del durazno y a los virus del mosaico del higo. Estos caros tienen partes bucales perforadoras y succionadoras. La transmisin de los virus mediante caros de dicha familia parece ser bastante especfica, debido a que cada uno de esos acaras tiene un rango de hospederos limitado y a que es el nico vector conocido del o los virus que transmiten. Algunos de los virus transmitidos por caros van en el estilete de estos ltimos, mientras que oros son circulativos y, de estos ltimos, por lo menos uno persiste a travs de las mudas.7. Transmisin por nematodosAproximadamente veinte de los virus que infectan a las plantas son transmitidos por una o ms especies de cuatro gneros de nematodos ectoparsitos que habitan en el suelo.Los nematodos de los gneros Longidorus y Xiphinema son los vectores de virus de forma polidrica como los que producen las enfermedades de la mancha anular del tabaco, mancha anular del tomate, mancha anular de la frambuesa, anillo negro del tomate, enrollamiento foliar del cerezo, mosaico del bromo, hoja en abanico de la vid y otros, mientras que los nematodos del gnero Trichodorus y Paratrichodorus transmiten dos virus en forma de varilla, los virus sonajero del tabaco y del empardecimiento temprano del chcharo. Los nematodos vectores transmiten los virus cuando alimentan de las races de plantas infectadas y ms tarde se desplazan hacia las races de plantas sanas. Tanto las larvas como los nematodos adultos pueden adquirir y transmitir los virus, pero stos no pasan a travs de las mudas de las larvas o los huevecillos y despus de la muda, las larvas o los adultos resultantes deben alimentarse de una fuente del virus antes de que puedan transmitirlo.
8. Transmisin por hongosEl hongo que infecta a las races, Olpidium, transmite por lo menos cuatro virus de las plantas, los de la necrosis del tabaco, necrosis del pepino, nervadura gigante de la lechuga y del achaparramiento del tabaco. Otro bongo, Polymyxa, transmite a los virus del mosaico del trigo y de las nervaduras necrticas amarillas de la remolacha, mientras que un tercer hongo Spongospora, transmite al virus del enanismo de los tallos de la papa. Parece ser que algunos de esos virus van internamente en las esporas de reposo y zoosporas y otros sobre ellas, las cuales despus de haberse producido la infeccin de las nuevas plantas hospedantes introducen al virus y producen sntomas caractersticos del virus que transmiten.9. Transmisin a travs de la cuscutaVarios virus que infectan a las plantas pueden ser transmitidos de una planta a otra a travs de la unin que se forma entre las dos plantas por los tallos enroscados de la planta parsita cuscuta (Cuscuta sp.). Una gran cantidad de virus se han transmitido en esta forma, con frecuencia entre plantas que pertenecen a familias bastante separadas desde el punto de vista taxonmico. El virus a menudo se transmite pasivamente en la corriente alimenticia de la cuscuta, siendo adquirido de los haces vasculares de la planta infectada por los haustorios de la cuscuta y despus de translocarse a travs del floema de esta planta, es introducido en la siguiente planta por los nuevos haustorios de la cuscuta que se forman al unirse a los haces vasculares de la planta inoculada.
XI. DETECCIN E IDENTIFICACIN DE LOS VIRUS FITOPATGENOSUna vez que se ha establecido que un virus es la causa de una enfermedad, se requiere de una serie de pruebas para determinar su identidad. La gama de hospedantes del virus, es decir, los hospedantes en los que el virus induce sntomas y los tipos de sntomas producidos, es til para diferenciar a un virus de otros. Los estudios de la transmisin de los virus deben indicar si el virus se transmite mecnicamente y a qu hospedantes o bien por insectos y qu tipo de insectos y as sucesivamente; cada nueva propiedad que se descubre es til para caracterizar al virus. En el caso de que el virus se transmita mecnicamente, algunas de sus propiedades como su punto de inactivacin trmica, es decir, la temperatura requerida para inactivarlo totalmente en el extracto crudo vegetal sin tratar durante una exposicin de 10 minutos, su longevidad in vitro, su punto final d dilucin, es decir, la dilucin mas alta del extracto a la que el virus an puede producir infeccin, pueden utilizarse para restringir las posibilidades hasta unos cuantos virus.En caso de que en esta etapa se sospeche de la identidad del virus, deben aplicarse pruebas serolgicas y en caso de que stas sean positivas, puede hacerse una identificacin tentativa del virus. La observacin del virus al microscopio electrnico y su inoculacin en ciertas especies vegetales, con frecuencia es suficiente para identificarlo de manera tentativa.En las enfermedades de tipo viral de plantas leosas y varias otras, en las que hasta ahora no han podido observar patgenos, la identificacin de stos, si se supone que son virus, se hace estrictamente mediante la transmisin por injerto. Este mtodo consiste en la inoculacin del virus mediante injerto y otros mtodos (ver figura) en ciertas especies o variedades de plantas denominadas indicadoras; estas plantas son sensibles a virus especficos y una vez que han sido inoculadas con ellos, muestran sntomas caractersticos y viceversa, es decir, el desarrollo de los sntomas caractersticos que muestra un indicador identifica al virus con el que dicha planta fue inoculada.Dado que los virus son demasiado pequeos para detectarlos a simple vista o con el microscopio, su presencia se ha detectado principalmente mediante los sntomas que exhiben sus hospedantes; por los sntomas que se inducen en una planta indicadora despus de que el virus se transmite por injerto, inoculacin mecnica o por alguno de sus vectores; mediante microscopa electrnica; y mediante pruebas serolgicas como la prueba de ELISA.Recientemente, se ha podido detectar (e incluso identificar) virus de RNA en plantas mediante el aislamiento y anlisis por electrofresis el RNA (RNA de doble banda) de los virus que se duplican en las plantas, ya que las plantas sanas no sintetizan dichos RNA. Aun cuando es laboriosa, esta tcnica tiene la ventaja de que puede utilizarse para detectar virus tanto conocidos como desconocidos, para los cuales no existe mucha informacin o se desconoce su antisuero, por lo que puede utilizarse para detectar incluso virus en plantas leosas.Adems, los RNA de una sola cadena o de doble banda que se han aislado pueden utilizarse para producir DNA complementario (DNA) al RNA. Este DNA, si se produce en presencia de molculas radiactivas de cuando menos uno de los cuatro nucletidos del DNA, puede utilizarse de inmediato para llevar a cabo experimentos de hibridacin utilizando RNA viral. Este RNA se purifica parcialmente a partir de plantas que se sospecha estn infectadas y se deja que reaccione con el DNAc en tubos de ensayo o en soportes para filtros de nitrocelulosa. Los hbridos de DNA y RNA se detectan y cuentan mediante autorradiografa o mediante conteo por centelleo en lquido. Aparte de utilizarse para detectar virus mediante la formacin de hbridos de DNA y RNA, el DNA complementario (DNA) al RNA del virus puede convertirse adems en DNA, el cual puede clonarse despus en vectores apropiados (como por ejemplo, la bacteria E. coli) y producir cantidades casi ilimitadas de este tipo de DNA y, a partir de l, cantidades ilimitadas de DNA para llevar a cabo otros experimentos de hibridacin dirigidos a la deteccin de virus.
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FITOPATOLOGA GENERAL2
