“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA PROFESOR: BQF. Carlos García MSc. ALUMNO: Katerine Torres CURSO: 5to Paralelo: “A” GRUPO: N° 1 FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes 23 de Junio del 2014 FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes 30 de Junio del 2014 PRÁCTICA N° 5 TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN: Cobayo VOLUMEN ADMINISTRADO: 10 ml VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Vía Intraperitonial HORA DE ADMINISTRACIÓN: 8: 34 am TIEMPO DE MUERTE: 28 min SÍNTOMAS: Respiración agitada Depresión del SNC Convulsiones Hipoxia Perdida de actividad motora OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por Cloroformo 2. Observar atentamente las manifestaciones que presenta el cobayo ante la Intoxicación por Cloroformo 3. Controlar el tiempo en que actúa el cloroformo en el cobayo 4. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de cloroformo
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“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
PROFESOR: BQF. Carlos García MSc.
ALUMNO: Katerine Torres
CURSO: 5to Paralelo: “A”
GRUPO: N° 1
FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes 23 de Junio del 2014
FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes 30 de Junio del 2014
PRÁCTICA N° 5
TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO
ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN: Cobayo
VOLUMEN ADMINISTRADO: 10 ml
VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Vía Intraperitonial
HORA DE ADMINISTRACIÓN: 8: 34 am
TIEMPO DE MUERTE: 28 min
SÍNTOMAS: Respiración agitada
Depresión del SNC
Convulsiones
Hipoxia
Perdida de actividad motora
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por Cloroformo
2. Observar atentamente las manifestaciones que presenta el cobayo ante la
Intoxicación por Cloroformo
3. Controlar el tiempo en que actúa el cloroformo en el cobayo
4. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de cloroformo
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MATERIALES SUSTANCIAS
Jeringuilla de 10cc
Campana
Equipo de disección
Vaso de precipitación
Erlenmeyer
Equipo de destilación.
Tubos de ensayo
Pipetas
Agitador
Ácido tartárico
Cloruro de fenilhidrazina
Nitroprusiato de sodio
Ácido sulfúrico
Cloruro férrico
Hidróxido de Sodio
Acido Clorhídrico
Ferricianuro de potasio
Hidróxido de potasio al 12%
Ácido cromotròpico
Guantes de látex
Mascarilla
Mandil
Perlas de vidrio
Probeta
Espátula
Panema
EQUIPOS
Balanza Analítica
Tapón de vidrio y de caucho
Cinta
Pinzas para tubos
PROCEDIMIENTO
1. Desinfectar el área de trabajo y tener todos los materiales listos en la mesa de
trabajo
2. Aplicar todas las normas de bioseguridad antes de iniciar la práctica
3. Administrar 10ml de Cloroformo al cobayo por vía intraperitoneal
4. Colocar el cobayo en la panema
5. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo se dan hasta su
muerte.
6. Con la ayuda del bisturí procedemos a realizar la disección al cobayo
7. Colocar las vísceras una vez trituradas (picadas lo más finas posibles) en un
recipiente adecuado (balón volumétrico).
8. Pesar 2 gr de ácido tartárico y diluirlo en 50 ml de Agua destilada
9. Colocar la solución de acido tartárico sobre la muestra para acidularla
10. Recoger el destilado de las vísceras en un elermeyer
11. Realizar las reacciones de identificación
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
REACCIONES EN MEDIO BIOLÓGICO
El material de la investigación se somete a destilación con arrastre de vapor en medio
acido tartárico, y en el destilado se realiza las reacciones de identificación.
1. En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo
con otras tantas de alcohol de 95° que contiene un poco de nitrato de plata, se
inflama la mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y
que el ácido clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto
originando un precipitado de cloruro de plata.
2. Reacción de Dumas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene
cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan
formiatos y cloruro de potasio.
CHCl3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H 2 O
Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le
agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado
en caliente.
A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un
precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.
3. Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta
naftol y solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo
de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.
Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo más o menos oscuro;
con resorcinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.
4. Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2 ml de lejía de sosa 1:2
con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el
cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño de María y se deja en
reposo; se convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo,
soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de
cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-
20 g de agua clorofórmica.
5. Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución
muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el
cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a
amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.
6. Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el
reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del tóxico puede
producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo
ladrillo.
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GRÁFICOS
1.- Administrar la sustancia 2.- Colocar el cobayo en 3.- Colocar al cobayo en
tóxica por vía intraperitonial la panema y observar lugar de disección y pro-
sus manifestaciones ceder a rasurarlo
4.- Proceder a realizar la 5.- Recoger las vísceras 6.- Triturar las vísceras
disección del cobayo del cobayo y colocarlas en un balón
de Aforado
7.- Armar el equipo de destilación 8.- Una vez recogido el 9.- Precipitado de AgCl
destilado, realizar las rea-
cciones de identificación
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10.- Reacción de Dumas 11.- Reacción con Lustgarten 12.- Reacc. Roseboom
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
Precipitado de AgCl
Solución Problema
(Antes)
Positivo – Característico ( AgCl)
Reacción de Dumas
Solución Problema
(Antes)
Positivo – Característico
(Rojo en Frío y Caliente)
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Reacción de Lustgarten
Solución Problema
(Antes)
Positivo – Característico
(Rojo, Amarillo y Azul)
Reacción de Roseboom
Solución Problema
(Antes)
Positivo – Característico
(Amarillo Rojizo)
OBSERVACIONES
Se necesito solo los 10ml de cloroformo para producir el deceso del cobayo,
Al administrar el cloroformo por vía intraperitoneal el cobayo presentó
convulsiones, movimientos descoordinados, hipoxia.
El tiempo en que se produjo el deseo del cobayo fue de 28 min
CONCLUSIONES
La reacción que presento el cobayo ante la intoxicación de cloroformo fue
movimientos descoordinados, convulsiones, hipoxia y su muerte se produjo después de
un tiempo de 28 minutos, con lo que se concluye que el cloroformo es una sustancia
muy tóxica, y con la ayuda de las reacciones de reconocimiento se pudo comprobar la
presencia de cloroformo en estos medios biológicos teniendo en cuenta que las
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reacciones de reconocimiento de cloroformo son indispensables para la verificación de
una intoxicación y muerte por este tóxico.
RECOMENDACIONES
Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes,
mascarilla.
Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.
Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.
Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida
Para una mayor eficacia en los resultados de la práctica realizar
correctamente la administración del tóxico al animal a experimentar.
CUESTIONARIO
1. DESCRIBA LA COMPOSICIÓN QUÍMICA DEL CLOROFORMO
C: 10.05 %; H: 0.84 % y Cl: 89.10 %.
2. ¿QUÉ ES EL CLOROFORMO?
El cloroformo es un líquido incoloro de aroma agradable no irritante y de sabor
ligeramente dulce. Se enciende espontáneamente cuando alcanza temperaturas
muy altas
3. ¿QUÉ SINTOMAS SE PUEDEN DAR POR LA INHALACIÓN CON
CLOROFORMO?
Actúa como un anestésico relativamente potente. Irrita las vías respiratorias y
causa efectos en el sistema nervioso, incluyendo dolor de cabeza, somnolencia,
mareos. La exposición a altas concentraciones puede producir pérdida del
conocimiento e incluso la muerte. Puede causar daño hepático y desórdenes
sanguíneos. La exposición prolongada puede llevar a la muerte debido a una
frecuencia cardíaca irregular y desórdenes renales y hepáticos.
4. ¿CUÁL ES EL TIPO DE INFLAMABILIDAD DEL CLOROFORMO?
La inflamabilidad que presenta es leve peligro de incendio cuando se expone a
altas temperaturas, de lo contrario, prácticamente no es inflamable.
5. ¿HABITUALMENTE DONDE SE APLICA EL CLOROFORMO?
El cloroformo es empleado habitualmente
en tintorerías como disolvente de grasas en la limpieza a
seco, extintores de incendios, fabricación de colorantes, fumigantes, insecticidas