QUiMICA CLiNICA 1989; 8 (5): 337-340 Interferencias analiticas producidas por paracetamol MT. Casamaj6 Dalmau a , F. Anroja Rib6 a y R. Galimany Sole b Resumen 51! ha estudiado fa interferencia ana/fliea de paraceta· mol en fa l:aloracion de di"t!rsos conslituyt!ntes, utilizando espedmenes oble"idos de personas que dec1araron no to- mar medicacion. En fa primera fase de deteccio" de Ju ifllerjerencia Sf! procesarotl maestrus en las que se diso/ilio 10 cantidad de paracetamo! necesaria para que su cOllcelllraci6tl fi- nul juera fa equi!'ulente a fa dosis letal 50. No se encontro interferencia ana/flieD en los metodos ana1l'ticos de los s;guiemes cOllstituyemes: "emalies, he- moglobina y leucocilOS (H6000 Technicon), profrombi- nu (CoalTon Fl Boehringer MmmheimJ, hierro(JJ+/lJ) (tripiritJi/-rriazina), glucosa (hexoquinasa), urea (ureasa), creatininio (Jaffe cirterico), protefna (biuret), aspartato aminotransferasa (lFCC), alanilfa aminotransferasa (IFCC), y-glutamiltrans!erasa (3-carhoxi-4-nitroanilida), fosfatasa alcalil/a (4-nitrofeniifosfato. DEA). Se hall6 in- terferencia analitica estadfsticamente significativa en las (letermirllleiones de plclquetas (/-/6000 Technicon), coles- teral (CHOD-/;'O/)), IIra10 (llricasa), triglicerido (GPO- POD) Y lactato deshidrogenasa (SFBC). Las determina- eiones bioqufmicas se PNlctical'o1/ en el analizador Ultrolab-Aurora (ItJstitllto lJehring). Con los metodos que presental'OIl interferencia en 10 primera fase, se practico 10 clUJIltijicaciOn de la misma a cOllcentraeiones terapeutica y tuxica. Solamente se en- contru intel'fereneia signijicativa en los metodos analiti- cos de urato y colesterol, Los resultados obtenidos se re- preselltan graficamente (interferogramas), • d"Analisis OiniquC$. d'A.ssistencia Primitria .. Dr. RobeI1». la sin 08915 Badalona • d"Analisis CliniquC$. Hospilal ..Germans Trias i Pujol». de Can)"el, sin 08915 Badalona (Barcdona) 6/4/89 Acrplado lIn/89 Summary The analytical interferences produced by paracetamol on the assays of certain blood constitllents have been sw- died using specimens obtained from subjects who did not rake drugs before the blood collection. In a first part, in order to show the imerference. the samples were proces- sed with added paracetamol in a amoum of the equiva- lent of lethal dose. Analytical interference was not de- tected on the following analytical methods: red blood cells, haemoglobin and white blood cells (H6ooo Techni- COlt). prothrombin (Coatrun Fl Boehringer Mannheim), iron(lI + 11/) (tripirydil-triazine), glucose (hexokinase), urea (urease), creatinillium (Jaffe kinetic method), pro- tein (biurer), aspartate aminotranspherase (IFCC), ala- nine aminotranspherase (IFCC), y-glutamyltranspherase (3-carboxy-4-11itroanilide), alkaline phosphatase (4-nitro- phellylphosfate, DEA). A stmistical sigllljicative analy- tical imerference lVas fOlllul 011 the assays of platelets (/-/6000 Technicon), cholesterol (CHOD-POD), urate (uri- case), triglyceride (GPO-POD) and lactate dehydrogenase (SFBC), The biochemical assuys were run on the Ultrolab- Aurora (llIalyser (llistitllto Behring). In a second ptJrt, the qlUlIIlIjication of tlie interferen- ce was eSllldied on those methods with a positive inter- ference detected in tlie first part, llsing toxic and theru- pewical doses of paracetamol. Only the assay methods of /Irate and cholesterol showed significath:e interferen- ces. The obtained results are graphically expressed (in- terpherograms), Introduccion En ocasiones. se encuentran resultados de valoracio- nes analflicas cuya interprelacion es diffcil debido a di- versas causas; una de elias puede ser la existcncia de in- lerferencias produddas por la presencia en el especimen de medicamentos ingeridos por el paciente. No se trala de un fen6meno inusual sino ampliameme descrito: exis- ten bancos de datos que recogen abundanle y variada in- formaci6n sobre alteraciones de resultados debidas a la Quimica Clinica 1989; 8 (5) JJ7
4
Embed
Interferencias analiticas producidas por paracetamol
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
QUiMICA CLiNICA 1989; 8 (5): 337-340
Interferencias analiticas producidas por paracetamol
MT. Casamaj6 Dalmaua, F. Anroja Rib6a y R. Galimany Soleb
Resumen
51! ha estudiado fa interferencia ana/fliea de paraceta·mol en fa l:aloracion de di"t!rsos conslituyt!ntes, utilizandoespedmenes oble"idos de personas que dec1araron no tomar medicacion.
En fa primera fase de deteccio" de Ju ifllerjerencia Sf!
procesarotl maestrus en las que se diso/ilio 10 cantidadde paracetamo! necesaria para que su cOllcelllraci6tl finul juera fa equi!'ulente a fa dosis letal 50.
No se encontro interferencia ana/flieD en los metodosana1l'ticos de los s;guiemes cOllstituyemes: "emalies, hemoglobina y leucocilOS (H6000 Technicon), profrombinu (CoalTon Fl Boehringer MmmheimJ, hierro(JJ+/lJ)(tripiritJi/-rriazina), glucosa (hexoquinasa), urea (ureasa),creatininio (Jaffe cirterico), protefna (biuret), aspartatoaminotransferasa (lFCC), alanilfa aminotransferasa(IFCC), y-glutamiltrans!erasa (3-carhoxi-4-nitroanilida),fosfatasa alcalil/a (4-nitrofeniifosfato. DEA). Se hall6 interferencia analitica estadfsticamente significativa en las(letermirllleiones de plclquetas (/-/6000 Technicon), colesteral (CHOD-/;'O/)), IIra10 (llricasa), triglicerido (GPOPOD) Y lactato deshidrogenasa (SFBC). Las determinaeiones bioqufmicas se PNlctical'o1/ en el analizadorUltrolab-Aurora (ItJstitllto lJehring).
Con los metodos que presental'OIl interferencia en 10primera fase, se practico 10 clUJIltijicaciOn de la mismaa cOllcentraeiones terapeutica y tuxica. Solamente se encontru intel'fereneia signijicativa en los metodos analiticos de urato y colesterol, Los resultados obtenidos se represelltan graficamente (interferogramas),
• Se"'i~i d"Analisis CliniquC$. Hospilal ..Germans Trias i Pujol».Carrel~ de Can)"el, sin08915 Badalona (Barcdona)R~ibido 6/4/89Acrplado lIn/89
Summary
The analytical interferences produced by paracetamolon the assays ofcertain blood constitllents have been swdied using specimens obtained from subjects who did notrake drugs before the blood collection. In a first part, inorder to show the imerference. the samples were processed with added paracetamol in a amoum of the equivalent of lethal dose. Analytical interference was not detected on the following analytical methods: red bloodcells, haemoglobin and white blood cells (H6ooo TechniCOlt). prothrombin (Coatrun Fl Boehringer Mannheim),iron(lI+11/) (tripirydil-triazine), glucose (hexokinase),urea (urease), creatinillium (Jaffe kinetic method), protein (biurer), aspartate aminotranspherase (IFCC), alanine aminotranspherase (IFCC), y-glutamyltranspherase(3-carboxy-4-11itroanilide), alkaline phosphatase (4-nitrophellylphosfate, DEA). A stmistical sigllljicative analytical imerference lVas fOlllul 011 the assays of platelets(/-/6000 Technicon), cholesterol (CHOD-POD), urate (uricase), triglyceride (GPO-POD) and lactate dehydrogenase(SFBC), The biochemical assuys were run on the UltrolabAurora (llIalyser (llistitllto Behring).
In a second ptJrt, the qlUlIIlIjication of tlie interference was eSllldied on those methods with a positive interference detected in tlie first part, llsing toxic and therupewical doses of paracetamol. Only the assay methodsof /Irate and cholesterol showed significath:e interferences. The obtained results are graphically expressed (interpherograms),
Introduccion
En ocasiones. se encuentran resultados de valoraciones analflicas cuya interprelacion es diffcil debido a diversas causas; una de elias puede ser la existcncia de inlerferencias produddas por la presencia en el especimende medicamentos ingeridos por el paciente. No se tralade un fen6meno inusual sino ampliameme descrito: existen bancos de datos que recogen abundanle y variada informaci6n sobre alteraciones de resultados debidas a la
Quimica Clinica 1989; 8 (5) JJ7
medicaci6nil,~I. La ingesti6n de farmacos es un factor devariaci6n fisiol6gica y, en la producci6n de valores de refereneia, los individuos bajo medicaei6n deben constituirun grupo aparte 0 ser excluidos(l,.
EI efecto de los medicametllos sobre las pruebas de laboratorio puede eonsiderarse desde dos aspectos distintos: el puramente analitico y el biol6gico. En el primercaso se trata de una interferencia que el propio farmacoo sus metabolitos ejercen en una etapa cualquiera de lavaloraci6n analitica, por reacei6n quimica competitiva 0interfereneia espectral. El efecto biol6gico se producecomo consecuencia de la aeci6n terapeutica 0 t6xica dela substancia yes, por tanto, un proceso fisiol6gico. Esevidente que para valorar el efecto biol6gico es necesarioconocer previamente las itllerferencias analiticas que sepueden cstudiar in viTro si se conoce bien c1 metabolismo del farmaco lUI .
En el presente trabajo se ha estudiado la interfercnciaanalitica que produce el paracetamol en las valoracionesde los constituyentes sanguineos mas habilUalmente solicitados. Este farmaco estapresente en un gran numerode especialidades farmaceuticas analgesicas y antipireticas que sc administran a pacientes de todas las edades.Su uso ha aumentado ultimamente de fonna muy considerable, 10 que se explica por su buena tolerancia y reconocida eficacia. Por ser un medica men to que se dispensa sin receta, puede producirse un consumo incontroladoen los pacientes ambulatorios, previo a la obtenci6n delespecimen.
Material y metodos
Especimcncs
Sangre, mezda de sueros y mezda de plasmas obtenidos de personas que dec1araron no to mar ningun tipo demedicaei6n en los tres dias anteriores a la extracciOn.
I. Deteccion de 10 inleljerencio.Se prepararon cinco mezclas de sueros, cuatro mezclas
de plasmas y cinco mueSlras de sangres distintas, todaselias con constituyellles a diferentes concentraciones. Lasmezclas de sueros se uti[izaron para las determinacionesbioquimicas, las mezclas de plasma cnlas determinaciones de coagu[acion y las muestras de sangre en [os recuelltos celulares. En una parte de cada una de elias se disolvi6 directamenle [a cantidad de paracetamol nccesariapara que su concentracion final fuera [a equivalente a ladosis letal 50, caku[ada para una masa corporal de 60 kgy un volumen total sangufneo de cinco litros. La concentraci6n utilizada rue de 26,8 mmol/L (4,06 g/L)161. Nose adicion6 medicamellto a [a otra parte, que se uliliz6como testigo.
Las muestras que contenian paracetamol y sus correspondientes lesligos se procesaron en las misrnas seriesanaliticas, en las que se tuvo en cuenta [a posible contaminaci6n debida al instrumento. Se cfecluaronlas determinaciones de los constituyentes mas habituales. La determinaci6n de trigliccrido se 11evo a cabo utilizandocuatro equipos de reactivos de composicion similar pemde diferente fabricante.
Para cada constituyente ana[izado se obtuvieron cinco resultados de la muestra con paraeetamol y otros cinco de la muestra sin paracetamol. Para ambos grupos deresultados se caleul6 la media, la desviaci6n cst an dar yla variancia, asi como el coeficiente de correlaci6n y larecta de regresion. Se verific6 la distribuci6n gaussianade los datos mediante [a prueba de Kolrnogorov-Smirnovy se efectu6 la comparaci6n de medias mediante la prueba I de StudentPl .
2. CU0l11ijicaci6n de la inle/ferenda.A partir de una unica mezc1a de sueros se prepararon
cinco alfcuotas en las que se diso[vio paracelamo[ en coneentraciones decrecientes, procurando que dos de elias seeneontraran dentro de la concentraci6n terapcutica. [ngerido por via oral, cl paraectamo[ se absorbe rapidamente, sobre todo a nivcl del intestino grueso. A [os 45 minutos despucs de [a absorci6n de 6,6 mmol (1,0 g) deparacetamol, se encuentra probablemente la concentraci6n sanguinea maxima, cuya media es 105 /ltl101/L(16 mg/L)181, por 10 que el intervalo terapcutico se establece entre 66 y 132 /!mol (10 y 20 mg/L). En lodas [asaHeuotas se efcctu61a determinaci6n de [os eonstituyentes euyo metodo habia presemado intcrfercncia en [a primera fase. Se obtuvicron cinco resultados cuyas mediasse compararon con [os de [a aUcuma testigo, mediantela prueba I de Student, previa verificacion de la distribuci6n gaussiana de los datos mediante la prucba dcKo[mogorov-Smi rnov.
Tabla IDelccci6n de la inlcrfert'ncia l)roducida pur paraeclamol a la cUllccnlracion de 26,8 mmol/L (4.06 gil)
CI1 hIs delerminaciones de dislinlos cOllsliluyenles
Tabla III)clcccioll de la intcrfcrcncia producida Ilor parnel'lamol a la conccnlracion de 26,8 mm(lI/L (4.06 giL)
en la determinacion trigliccrido por cualro equilJOS distinlos de reactivos
y=bx+o
COllstiluyel11e
Triglicerido
ReaClivo
(I) l. Gehring(2) Coulter(3) Boehringer /1.'1.(4) Spinrcaci
Grado designificllcion
p < 0,001P < 0,001P < 0,005P < 0,005
0': con paracelamo[)(x: sin paracelal11ol)
b "
0,980,820,890,94
Resultados
Detecci6n de la inlerferencia
sieian similar pero de diferelHes fabricantcs, hallandoseinterferencia en lodos elias. Los resultados plteden vcrseen la labIa II.
En la tabla I se presentan los resullados hallados enla primera fase, en la que Se utilizo una concemracionde 26,8 mmol/L (4,06 giL) de paracetamol. Se ha encomrado interferencia analilica produdda por paracetamol en las siguicllIes determinacioncs: plaqllelas (Technicon H6000), urato (llricasa ell Ullrolab-Aurora),colesterol (C1-IOD-POD ell Ultrolab-Aurora), trigliccrido (GPO-POD en Ultrolab-Aurora) y lactato deshidrogenasa (SFBC en Uhrolab-Aurora).
Para el metodo analilko del trigliccrido, el estudio sercpilio ulilizando cuatro equipos de rcactivos de compo-
Cuantificaci6n
En la cuantificacion de las interfcrcndas dctecladas enla primera fase solamente se ha cncolllrado interferenciaestadislicamente significativa, a concenlraciolles terapeutica y toxica, en los mClOdos analiticos de urato y colestcro1. Se han calcu[ado [os cocicntcs entre las concentraciones halladas de cotlstituyelltc con y sin suslanciaitHerferente para cada concentracion de In misma. Con[os datos obtenidos Se han trazado los rcsl>CClivos interferogramast91, que Se prcsentan en las figuras I y 2.
Quimka C1inka t989; 8 (5) 339
':.-(';,~. 100''''
,oo
"
"
"
"
.. ,I> "'". " ""."
,~
," --- -,"'
"",.
" ~" OJ, • '"" • " "
,~
,"-,-' '''',.
Fil-\lIr.l l. Illlrrrcrograma dd paraeelamol para d Illt'lodo mmlilkode lIralO
Discusibll
Para varios aUlOrcsllO.ll.l:l el paracctarnol, a una concelllracion de 0,66 a 9,90 rnmol/L (0,1 a 1,5 giL), no produce ningllna inlerferencia en la valoracion de trigliccrido, cuando se emplea un mClOdo enzinuitico con1ccturaen la zona llitravioleta del espectro. NOSOlOS, al utilizarmelOdos colorimetricos que usan peroxidasa (EC 1.11.1.7)acoplada, la hemos detectado para una concemraci6n de26,8 mmollL (4,06 giL), muy superior al intervalo teTapeutico de cstc farmaco.
En la valoracion de llrato, los rnelOdos que conjuganla urato oxidasa (EC 1.7.3.3) Y la peroxidasa utilizan eIper6xido de hidr6geno para oxidar un crom6geno bajola acci6n dc la pcroxidasa. Durante csta scgunda etapa,los compucstos rcdllctorcs interficren con cl urato conSllmiendo c1 per6xido de hidr6geno. L'l. interferencia quenosotros dctcctamos es por dcfecto. Resultados similareslos encontraron Fossati y col.\l3) can cste mismo farmaco.
Del mismo modo, cn la valoraci6n dc co1csterol pormetodo enzimatico, las sustancias reductoras son susccptibles de actuar en la ultima ctapa de la reacci6n, produeicndo una interfercncia por defccto, cllya amplitud varia scgun la naluralcza de los dcrivados fcnolcs utilizados.En la lilcratura consult ada no csta dcscrila la interfcrcncia del paracetamol sobre cstc mClOdo analitico, aunqucsi sc ha observado para componcntcs rcductorcs como elascorbald l(),14'.
llihliol-\r.lria
1. Tryding N, Lindblad CG. Drug inlerfl'rl'nee and cffcrls in ClinicalClielllisiry 3rd. Ed. ESlocollllo: Apoll'ksbolag<·l, 1984,
2. Siesl G. Galleau M1-·1. Schielle F. Benny J. Medieallleills l'l e.~allll'ns
de labonlloire. Clin Chclll Ne\\'s1cller 1984; 4: 159·164,
340 QlIimiea Clinica 1989; 8 (5)
Fillllr.l 2. 11l1l'rkrograma dd pamcl'lalllol para el 1llt'lOdo anaHticode coteslCrol
3. Socicdad Espai'lola dl' Quimica Clillica. Variaciones analilicas yextra-allalilicas en la producci611 de los valores de rererellcia. QuirnClin 1984: 3: 43_49.
4. II1Il'rnationai Fl'dl'ralion of Clinical Chemislry. Drug Illlerferellcesand Drug Errecls in Clinical ChemislTy. Pan I: The basic coneepls.J Clin Chem Clin 13ioelwm 1984; 22: 271-274.
5. Illiernalional Federalion of Clinical Chemistry. Drug Interferencesand Drug Eff<'CIS in Clinical ChemiSlry. Pan II: GlIidelines for EI'aIllation of Analyticallnlerrcrmees. J Clin Chem Clin Biochem 1984;22: 275·279.
Ii. AnOnimo. The !',lcrek Indl'x. 10 cd. Rahway: '\krck & Co. pub!.,1983.
7. Galiman)' R. Galli A. Analyticalllllerferences. Definition of a proIOCOl. En: KaiSl'r E, Gabl M, Muller M, Bayer M. dirs. XI Inlernalional Congress of Clinical Chemistry. Berlin. 1982: 795-802.
8. Lechal P. Revue Generaic: le Paracewmol. Tht'rapie 1978; 33: 551.9. Glick MR. Ryder KR, Hooker RP. ··Inlerferograms" designed 10
depicl lhe influence of illlerrcring subslances on many clinical chemistry instrumcllIs (Abslracl). Clin Chem 1983; 29: 1208.
10. Grossel J. ElUde des inl<'rrerences anal)'liques el des cffels pharmacologiques de medicalnenlS sur lcs e.~anlens de laboraloire. TheSl' 3cme del. Biochimic Pharmaeologique. Nancy, 1983.
II. Panek E. Young OS. BCllIe J. Anal)'lical illlerrerenees of drugs inClinical Chemislry, Am J Med Tcrhnol 1978; 44: 217.
12. VinCI B. Leldlier G. The in vilro effecl of drugs on biochemicalparamelers delerminaled by SMAC syslelll. Clin Biochem 1977; 10:47.
lJ. Fossati P, Prencipe l, Berti G. Usc of 3,5-dichloro·2·hydroxy·benzene sulfonic acid/4-amino-phenazone chromogenic syslem indircrt el1zil11;lli~ assay of uric acid in serum and urine. Clin Chem1980; 26: 227-
14. Delaurc J. Bastide P. Efrects of drugs on IOwl serum choicslcro!'En ··l)rug effc~'ls onlaboralory leSlS results'·. Siest G, dir. The Hague: Marlinus Nijhorf. 1980: 91.