-
CClluujjuull MMeeddiiccaall
RReevviisstt ddee MMeeddiicciinn ii FFaarrmmaacciiee
Editat de Universitatea de Medicin i Farmacie
"Iuliu Haieganu" Cluj Napoca
11
Volumul LXXX 2007
ISSN 1222-2119
Redacia revistei Clujul Medical Str. Moilor, nr. 33
Cluj Napoca
-
Colegiul de redacie
Redactor ef: N. Olinic Redactori efi adjunci: A. Cocrl Al.
Rotaru H. Popescu Secretar tiinific: H.D. Boloiu Membri: M. Boji,
Elvira Cocrl, Gh. Funariu, Paula Grigorescu-Sido, M. Grigorescu,
tefania Kory-Calomfirescu, S. Leucua, N. Maier, Adriana Murean,
Luminia Pleca Manea. Redactor: Patricia Oprea Tehnoredactare
computerizat: Nicoleta Mian
Tiparul executat la Tipografia
U.M.F. "Iuliu Haieganu" Cluj Napoca
Manuscrisele i corespondena vor fi expediate pe adresa: Redacia
revistei Clujul Medical
str. Moilor nr. 33 400609 Cluj Napoca Tel/fax: 0264-596086
Email: [email protected]
-
Clujul Medical
Nr. 1/2007
CUPRINS
Articole de orientare ADRIANA BULBOAC, D. I. POP, A. BRCAN:
Rolul neurokininelor n medierea inflamaiei
......................................................... 11
VICTORIA CRE, MARIELA MILITARU, CRISTINA RUSU, MARIA PUIU, CRISTINA
SKRYPNYK, LIGIA BARBARII, KATALIN CSEP, E. TOMESCU: Detecia
rearanjamentelor subtelomerice prin mlpa (multiplex
ligation-dependent probe amplification) metod nou de diagnostic n
formele idiopatice de retard
mental.............................................. 17 FULGA
FLORESCU, N. COSTIN: Influena terapiei estrogenice asupra
creierului: implicaiile acesteia n bolile neurodegenerative
.....................................................................................
22 CLAUDIA GHERMAN, DIANA SCUI, LAURA PALCU: Actualiti n patogenia
bolii
varicoase...................................................................
29 RODICA MANASIA: Infecia urinar i nefropatia de reflux la copil
.................. 36 D. I. POP: Psihodiagnosticul clinic post
accident vascular cerebral prin intermediul bateriei de teste
psihologice de aptitudini cognitive..................... 42
Cercetare clinic IOANA CRCIUN, IOANA MICLUIA, RODICA MACREA, CODRUA
POPESCU: Early course of cognitive dysfunctions during alcohol
cessation in chronic alcoholic patients
............................................ 47 R. A. TRMBIA, N.
OLINIC: Reacia hipertensiv ortostatic la o populaie de pacienti
hipertensivi din
ambulator.............................................. 52 VALERIU
BUZA, NICOLAS GUEVARA, BENOIT LAFFONT, ARNAUD DEVEZE, JACQUES
MAGNAN: Acouphenes invalidants par conflit
neuro-vasculaire.....................................................................................
60 DANIELA MOOIU, L. PETROV: Grupul focus ca metod de cercetare
calitativ. Utilitatea metodei n explorarea atitudinilor medicilor
fa de comunicarea diagnosticului i prognosticului n oncologie,
hemato-oncologie i ingrijiri paliative
....................................................................
70 ANCA CIUREA, SORANA BOLBOACA, LILIANA ROGOJAN: Aportul biopsiei
histologice ecoghidate n diagnosticul leziunilor mamare
maligne......................................................................................................
79
-
BOGDANA NSUI, CARMEN IONU: Legumele i fructele factori de
protecie n cancerogeneza mamar
...................................................................
88 CAMELIA GEORGETA RCREANU, GABRIELA ROMAN, N. HNCU: Screeningul
sindromului metabolic la persoanele cu diabet zaharat tip 2 nou
depistat
........................................................................................
94 ELENI STERGIOPOULOU, D. DUMITRACU: Asocierea tulburrilor
digestive
funcionale...............................................................................................
103 DANIELA VOD, GH. POPA, N. MIU: Neutropenii asociate cu anemii
aplastice dobndite - aspecte
clinico-evolutive......................................................................
109 Cercetri experimentale i de laborator FR. GRIGORESCU SIDO, ANCA
ZIMMERMANN: Nervii frenici i diafragma (partea II-a). Pacing-ul
diafragmatic .................................................. 116
L. JNTSCHI, SORANA-DANIELA BOLBOAC: Antiallergic activity of
substituted benzamides: characterization, estimation and prediction
..................... 125 Cazuri clinice ALIZ HORK, R. BUIGA, OLGA
ORIU, TEFANIA NEAMU, M. CUCUIANU: Acute Megakaryocytic Leukemia and
Myelofibrosis. Considerations Based on a Case Report
.................................................................
133 D. RDULESCU, F. CIOVICESCU, S. PRIPON, C. DUNCEA, ELENA
BUZDUGAN, ANCA CRISTEA: Polyserositis and multisystemic dysfunction
in a case of unclassifiable connective tissue disease.
Undifferentiated versus overlapping (mixed) syndrome? A case report
and a literature review
...................................................................................................
137 Medicin dentar SORANA BACIU, T. ZAHARIE, ALEXANDRA ROMAN,
CAMELIA ALB, SORINA SAVA, M. MANOLE , ONDINE LUCACIU, VOICHIA SBDU:
Aspecte morfopatologice ale leziunilor inflamatorii ale
parodoniului marginal la un lot de subieci cu insuficien renal
cronic ...... 143 DANIELA CONDOR, SMARANDA BUDURU: Ameliorarea
esteticii zonei anterioare prin terapie complex
protetico-chirurgical................................ 152 LIANA
MARIA LASCU, ALINA ZAHARIA, OANA CRISTINA TCU, H. A. ALMAN:
Particulariti n conceperea protezelor scheletate destinate
tratamentului edentaiei totale ......... 157 C. D. OLTEANU,
ALEXANDRA CRCIUN, R. CMPEANU: Citokine proinflamatorii n boala
parodontal ........................................................
163
-
VOICHITA SBDU, D. BORZEA, DIANA DUDEA, MARIANA CONSTANTINIUC,
SORANA BACIU, SORINA SAVA: Contribuii la amprentele fonetice n
realizarea protezelor totale pe cmpuri protetice nefavorabile
...........................................................................
169 Farmacie VERONICA AVRIGEANU, SILVIA IMRE, ELEONORA MIRCIA:
Studii asupra structurii moleculare a unor noi tereftaldiamide cu
rest de amine secundare aciclice sau ciclice prin spectrometrie de
mas ........... 181 LORENA FILIP, L. VLASE, IOANA MNDRUU, DOINA
MIERE, DANIELA HANGANU: Determination of caffeine from instant
coffee and cappuccino by liquid chromatography mass
spectrometry............................ 190 C. MORGOVAN, C.
POLINICENCU, STELIANA GHIBU, DIANA TNASE: Studiu privind achiziia
medicamentelor n spitalele
publice.................................. 195 ANCA TOIU, ILIOARA
ONIGA, M. TMA: Cercetri preliminare asupra compuilor polifenolici
din Viola tricolor L. (Violaceae) ........................... 203
In memoriam G. PETRESCU: Profesorul Leon Daniello (1898 1970).
Evocare postum la 35 de
ani..................................................................................
208 Idei n medicin M. CUCUIANU: Cercetarea tiinific, politica i
economia ................................. 209
-
Clujul Medical
Nr. 1/2007
CONTENTS General articles ADRIANA BULBOAC, D. I. POP, A. BRCAN:
The importance of neurokinins in the inflammation mechanism
.......................................................... 11
VICTORIA CRE, MARIELA MILITARU, CRISTINA RUSU, MARIA PUIU, CRISTINA
SKRYPNYK, LIGIA BARBARII, KATALIN CSEP, E. TOMESCU: Detection of
subtelomeric rearrangements by MLPA (multiplex ligation-dependent
probe amplification) a new diagnostic method in idiopathic mental
retardation...................................................................................
17 FULGA FLORESCU, N. COSTIN: The influence of estrogen therapy on
the brain: its implications in the neurodegenerative
diseases.................................. 22 CLAUDIA GHERMAN,
DIANA SCUI, LAURA PALCU: New issues in varicose disease pathogeny
.....................................................................................
29
RODICA MANASIA: The urinary tract infection and the reflux
nephropathy in children
...............................................................................................................
36 D. I. POP: The clinical post-stroke psychodiagnosis by BTPAC
evaluation......... 42 Clinical Investigations IOANA CRCIUN, IOANA
MICLUIA, RODICA MACREA, CODRUA POPESCU: Early course of cognitive
dysfunctions during alcohol cessation in chronic alcoholic patients
............................................ 47 R. A. TRMBIA, N.
OLINIC: The orthostatic hypertensive reaction in a hypertensive
population from ambulatory
.............................................................. 52
VALERIU BUZA, NICOLAS GUEVARA, BENOIT LAFFONT, ARNAUD DEVEZE,
JACQUES MAGNAN: Acouphenes invalidants par conflit
neuro-vasculaire....................................................................................
60 DANIELA MOOIU, L. PETROV: The focus group as a qualitative
research method. The appropriateness of using the method in
exploring attitudes of the physician in communicating diagnoses and
prognoses in oncology, hemato-oncology and palliative care
...................................................................................................
70 ANCA CIUREA, SORANA BOLBOACA, LILIANA ROGOJAN: The value of
ultrasound guided tru-cut biopsy in the diagnosis of malignant
breast lesions ....... 79
BOGDANA NSUI, CARMEN IONU: Vegetables and fruits protective
factors against mammary cancerogenesis
...........................................................................
88
-
CAMELIA GEORGETA RCREANU, GABRIELA ROMAN,N. HNCU: Screening for
metabolic syndrome in persons with newly diagnoses type 2 diabetes
........................................................................................................
94 ELENI STERGIOPOULOU, D. DUMITRACU: The overlap of functional
digestive disorders
..................................................................................................
103 VOD DANIELA, POPA GHEORGHE, MIU NICOLAE: Neutropenia with
acquired aplastic anemia clinical aspects and evolution .........
109
Cercetri experimentale i de laborator FR. GRIGORESCU SIDO, ANCA
ZIMMERMANN: Phrenic nerves and diaphragm (second part). Diaphragm
pacing............................................................................
116 LORENTZ JNTSCHI, SORANA-DANIELA BOLBOAC: Antiallergic activity
of substituted benzamides: characterization, estimation and
prediction ................. 125
Clinical cases ALIZ HORK, R. BUIGA, OLGA ORIU, TEFANIA NEAMU, M.
CUCUIANU: Acute megakaryocytic leukemia and myelofibrosis.
considerations based on a case report
.....................................................................
133 D. RDULESCU, F. CIOVICESCU, S. PRIPON, C. DUNCEA, ELENA
BUZDUGAN, ANCA CRISTEA: Polyserositis and multisystemic dysfunction
in a case of unclassifiable connective tissue disease.
Undifferentiated versus overlapping (mixed) syndrome? A case report
and a literature review ....... 137 Dental medicine SORANA BACIU,
T. ZAHARIE, ALEXANDRA ROMAN, CAMELIA ALB, SORINA SAVA, M. MANOLE ,
ONDINE LUCACIU, VOICHIA SBDU: Morphopatological aspects of the
periodontium in patients with chronic renal
failure................................................................................................
143 DANIELA CONDOR, SMARANDA BUDURU: Achieving anterior dental
esthetics by complex surgical-prosthetic therapy
................................................... 152 LIANA MARIA
LASCU, ALINA ZAHARIA,OANA CRISTINA TCU, H. A. ALMAN: Peculiarities
in conceiving removable prosthodontics in treating the total
edentulous patient
....................................................................
157 C. D. OLTEANU, ALEXANDRA CRCIUN, R. CMPEANU: Proinflammatory
cytokines in periodontal disease
.............................................................................
163 VOICHITA SBDU, D. BORZEA, DIANA DUDEA, MARIANA CONSTANTINIUC,
SORANA BACIU, SORINA SAVA: Contributions to phonetic impressions,
as a stage in realizing total dentures on inauspicious dental
fields
....................................................................
169
-
Pharmacy VERONICA AVRIGEANU, SILVIA IMRE, ELEONORA MIRCIA: Mass
spectrometry study of some terephtaldiamides with acyclic and
cyclic aminic rests
............................................................................................
181 LORENA FILIP, L. VLASE, IOANA MNDRUU, DOINA MIERE, DANIELA
HANGANU: Determination of caffeine from instant coffee and
cappuccino by liquid chromatography mass
spectrometry............................ 190 C. MORGOVAN, C.
POLINICENCU, STELIANA GHIBU, DIANA TNASE: Public acquisitions
modalities used in drug procurement in budgetary hospitals
.............................................................................................
195 ANCA TOIU, ILIOARA ONIGA, M. TMA: Preliminary research of
polyphenolic compounds from Viola Tricolor L.
(violaceae).......................................................
203 In memoriam G. PETRESCU: Professor Leon Daniello (1898 1970)
....................................... 208 Ideas in medicine M.
CUCUIANU: Scientific research, politics and economy
................................. 209
-
11
Articole de orientare
ROLUL NEUROKININELOR N MEDIEREA INFLAMAIEI ADRIANA BULBOAC, D.
I. POP, A. BRCAN Universitatea de Medicin i Farmacie
,,Iuliu-Haieganu, Cluj-Napoca
Rezumat Lucrarea este axat pe mecanismele prin care
neuropetidele interacioneaz
cu receptorii celulari pentru stimularea evenimentelor
fiziopatologice n inflamaie. Una dintre peptidele care este i la
ora actual investigat este substana P (SP), membr a familiei
tahikininelor. SP a fost intens studiat din cauza multiplelor sale
implicaii n fenomene fiziologice i fiziopatologice cum sunt:
contracia muchilor netezi, inflamaia, neurotransmisia,
vasodilataia, eliberarea de histamin, activarea sistemului imun. SP
se gsete n fibrele aferente primare de tip C i joac un rol
important n durerea neuropatic din inflamaie. Efectul principal al
SP n cadrul inflamaiei este creterea permeabilitii vasculare, cu
formarea edemului inflamator i extravazarea leucocitelor, dou
componente cheie ale rspunsului inflamator. Adiional, SP determin
stimularea macrofagelor, activarea complementului pe cale clasic i
producia de intermediari reactivi ai oxigenului. SP este o
component cheie n inflamaie i poate avea un impact semnificativ
pentru strategiile terapeutice ale multor afeciuni.
Cuvinte cheie: inflamaie, neuropeptide, substan P. Introducere
Cu mai bine de un secol n urm, a fost observat faptul c stimularea
periferic
a rdcinilor nervoase duce la vasodilataie i creterea
temperaturii cutanate. Astfel, aceast observaie a fost punctul de
plecare pentru studiile care au urmrit rolul sistemului nervos n
inflamaie. Iniial, s-a constatat c acest tip de vasodilataie este
produs de impulsuri care sunt conduse de-a lungul fibrelor
aferente, n direcie eferent. Consecutiv, se introduce termenul de
,,antidromic pentru acest tip de conducere nervoas. Ulterior, s-a
observat c acest fenomen este dependent de integritatea fibrelor
nervoase din regiunea afectat de inflamaie, deoarece anestezia
local sau degenerarea nervoas inhib vasodilataia. Aceast observaie
a dus la apariia termenului de ,,reflex de axon, termen care face
referin la reflexul de la nivelul fibrelor simpatice
preganglionare, reflex generat n ntregime de un singur neuron.
Rolul vasodilataiei antidromice a nceput s fie intens studiat,
sugerndu-se c anumite structuri nervoase sunt implicate n
vasodilataia antidromic, fenomen care contribuie la creterea
permeabilitii capilare, component activ a fenomenului inflamator
(1).
Implicaiile acestui fenomen au devenit deosebit de importante,
mai ales la nivelul organelor separate de fluxul sanguin, n cursul
ontogenezei, prin bariere extrem de specializate (alctuite, n
principal, din endotelii). La nivelul acestor organe, creterea
permeabiliii capilare poate deveni un fenomen extrem de nociv
asupra
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
12
funcionalitii lor ulterioare. Cteva dintre cele mai studiate
bariere de acest tip sunt bariera hemato-encefalic, bariera
hemoato-retinian i bariera snge-umoare apoas.
Vasodilataia antidromic constituie doar unul din mecanismele
prin care este demonstrat implicarea sistemului nervos n inflamaie.
Studiile moderne acord importan deosebit implicrii unor
neurotransmitori n inflamaie, implicare care demonstreaz existena
medierii neurogene a inflamaiei. Mecanismele medierii neurogene ale
inflamaiei sunt incomplet cunoscute.
Structura i funcia tahikininelor Mediatorii eliberai din
aferenele nervoase sensitive au fost izolai ncepnd cu
substana P (SP). Treptat, au nceput s apar noi candidai care
genereaz rspunsuri SP-like. Aceste substane, generatoare de
rspunsuri SP-like, au primit denumirea generic de tahikinine. Cel
mai intens studiate tahikinine sunt subtana P (SP), neurokinina A
(NKA) i neurokinina B (NKB), toate trei fiind prezente la nivelul
sistemului nervos (2).
Prezena celor trei tahikinine a fost semnalat att la nivelul
sitemului nervos central, ct i la nivelul sistemului nervos
periferic. Activarea repetitiv a receptorilor specifici substanei
P, de la nivelul mduvei spinrii (n cazul durerii cronice), determin
creterea densitii receptorilor pentru aceast tahikinin (3,4). Acest
mecanism face parte din fenomenul complex al neuroplasticitii
(5,6). Pe de alt parte, excesul de SP produce alodinie, cu
activarea mecanismelor durerii nociceptive (7).
Din punct de vedere structural, tahikininele se caracterizeaz
printr-o secven terminal de aminoacizi de tip
Phe-X-Gli-Leu-Met-NH2, unde X poate fi un rest alifatic (valin,
izoleucin) sau aromatic (fenilalanin, tirozin) (8). Att NKA, ct i
NKB au acelai fragment C terminal, n secvena polipeptidic, ca i o
tahikinin prezent la amfibii, kasinina. Aceste tipuri de tahikinine
sunt localizate la nivelul terminaiilor nervoase senzitive.
Capsaicina are un rol de depletiv, determinnd eliberarea lor.
Stimularea receptorilor N-metil-D-aspartat (NMDA) de ctre glutamat
(aminoacid excitator major) intensific aciunea de eliberare a SP
din terminaiile nervoase senzitive indus de capsaicin. Dimpotriv,
blocarea selectiv a receptorilor NMDA inhib eliberarea de SP. Acest
fenomen indic faptul c SP poate contribui la excitotoxicitatea
indus de glutamat, excitotoxicitate care induce apoptoza neuronilor
(9).
Ordinea eficienei lor n aciunea de a induce extravazarea
plasmatic este NKB> SP> NKA. Deoarece NKB se gsete n cantiti
mici la nivelul neuronilor senzoriali, iar potena asupra
extravazrii plasmatice a NKA este mic, atenia cercettorilor a fost
ndreptat preponderent asupra SP (10).
Substana P a fost descoperit de Euler i Goddum n 1931 n extract
de esut nervos i intestin de iepure. Ulterior, au fost fcute cteva
ncercri de izolare, dar fr succes, pn n anul 1970. n 1970, Chany i
Leeman reuesc s izoleze acest peptid din hipotalamusul bovin.
Sinteza sa ncepe din acelai an. Izolarea i sinteza SP duc la
disponibilitatea preparatului pentru cercetri i la deschiderea unei
noi ere n studiul inflamaiei. Datorit faptului c administrarea
exogen de SP determin formarea de anticorpi specifici, anti-SP,
este posibil studierea sa prin tehnici imunohistochimice (11).
Aceste tehnici au permis alctuirea unei hri cu topografia
distribuiei SP la nivelul tuturor esuturilor organismului, hart
care nc nu este complet. A fost demonstrat implicarea acestor
neurotransmitori n funcionalitatea sistemelor cardiovascular,
respirator, cutanat, digestiv i sistem nervos central. Majoritatea
receptorilor activai de aceste neuropeptide sunt acum clonai,
cunoscndu-se agonitii i antagonitii selectivi pentru multe
subtipuri de receptori din aceste clase (12). Totodat, izolarea,
purificarea i sinteza SP au dus la o studiere mai atent a
mecanismului antidromic al vasodilataiei.
Receptorii tahikininelor Receptorii tahikininelor corespund
celor trei tipuri de tahikinine i sunt
reprezentai de (11): NK-1 pentru SP,
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
13
NK-2 pentru NKA, NK-3 pentru NKB. ncercrile de a determina
subtipurile de receptori implicai specific n
vasodilataia antidromic s-au dovedit a fi complicate. De fapt,
aciunile induse de SP n cursul inflamaiei sunt simultane cu cele
induse de ali mediatori proinflamatori, procesul de identificare a
receptorilor specifici ai SP pentru vasodilataia antidromic fiind,
din acest motiv, deosebit de complex. La nivelul celulelor care
particip activ la inflamaie, au fost identificai receptori pentru
SP la nivelul macrofagelor, mastocitelor i la nivelul
polimorfonuclearelor neutrofile (13).Receptorii NK-1 se gsesc i la
nivelul celulelor endoteliale ale arterei bazilare, carotide i
pulmonare. Vasodilataia mediat de aceti receptori este dependent de
formarea de cGMP i necesit prezena unui endoteliu intact (14).
Identificarea receptorilor tahikininici a dus la descoperirea i
sinteza subtipurilor de antagoniti selectivi.
Antagonitii substanei P Credibilitatea contribuiei
neurotransmitorilor de tipul tahikininelor la
vasodilataia neurogen din cursul inflamaiei este demonstrat de
studiiile care au evideniat rolul antagonitilor specifici pentru
acest fenomen. n acest sens s-a demonstrat eficiena Baclofenului
(derivat de GABA) n antagonizarea aciunii depolarizante a SP la
nivelul motoneuronilor spinali. Acelai preparat este capabil de a
antagoniza vasodilataia neurogen i extravazarea plasmatic induse de
SP. Studiile cu privire la efectele antagonitilor SP asupra
extravazrii plasmatice au artat c aceste substane sunt capabile de
a neutraliza nu numai aciunea SP, dar i aciunea altor substane cum
sunt serotonina i histamina. Mai mult, aciunea antagonitilor
specifici sintetici este mai intens dect cea a capsaicinei (15).
Descoperirea faptului c antagonitii specifici ai SP au eficien i
asupra serotoninei i histaminei, demonstreaz c extravazarea
plasmatic indus de aceti compui (histamina i serotonina) este parte
component a mecanismului neurogen al inflamaiei.
n ciuda problemelor date de potena sczut, agonism parial i
activitate eliberatoare de histamin, a antagonitilor SP, rolul lor
n studiul vasodilataiei antidromice i a mecanismelor neurogene ale
inflamaiei este esenial. La ora actual se studiaz existena unor
receptori de natur non-petidic pentru SP (16).
Mecanismul proinflamator al substanei P Dup stimularea
antidromic nociceptiv, polinodal, a unei singure fibre
amielinice de tip C, apar efecte la nivelul celulelor
endoteliale ale venulelor postcapilare. Aceste efecte constau n
creterea spaiilor interendoteliale i penetrarea unor molecule cu
greutate molecular mare n spaiul extravascular. Mecanismul acestui
fenomen nu este cunoscut nc n ntregime. S-a sugerat c extravazarea
plasmatic, care nsoete inflamaia neurogen, poate fi indus de
neurotransmitori cum este SP, prin intermediul activrii
receptorului NK-1 (17).
Rspunsul vasodilatator indus de SP este dependent de un
endoteliu intact. Exist studii care demonstreaz c acest rspuns este
similar cu cel indus de acetilcolin. n anumite vase a fost
demonstrat chiar un efect de eliberare a acetilcolinei sub aciunea
SP. n condiii de leziuni tisulare determinate de un traumatism sau
de ischemie, substane vasodilatatoare cum sunt SP, acetilcolina,
histamina sau bradikinina sunt incapabile s induc vasodilataia
arteriolelor din esuturile lezate. Acest fenomen demonstreaz c
rspunsul vascular indus de vasodilatatoarele endogene este
dependent de integritatea endoteliului vascular (11).
Mecanismul intracelular implicat n aciunea vasodilatatoare indus
de SP depinde de activarea receptorilor specifici ai SP, via cGMP.
S-a mai demonstrat c SP determin diminuarea ieirilor ionilor de
potasiu din interiorul celulei. Pe de alt parte, SP are capacitatea
de a influena i fagocitoza. Similaritatea de structur dintre SP i
tufstin (molecul capabil de a iniia i amplifica fagocitoza), la
nivelul poriunii N terminale, a dus la investigarea proprietilor SP
de a influena fagocitoza la nivelul neutrofilelor i macrofagelor. n
acest sens, a fost demonstrat faptul c SP poate iniia i
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
14
amplifica fagocitoza, ntr-un mod similar cu tufstinul. Aceast
observaie confer noi dimensiuni abilitilor SP de a influena
mecanismele inflamaiei. Caracteristica SP de a activa i amplifica
aciunea fagocitar a macrofagelor deschide perspective asupra
studiului unor noi mecanisme mediate de activarea receptorilor
specifici pentru SP. Studiile experimentale au demonstrat c la
nivelul macrofagelor, receptorii SP difer de cei ai altor celule,
prin imposibilitatea antagonitilor specifici ai SP de a se lega la
nivelul lor (13).
Aciunea SP duce la stimularea sintezei i eliberrii de metabolii
proinflamatori ai acidului arahidonic, de tipul tromboxanului i a
leucotrienelor (18). S-a demonstrat c SP poate induce eliberarea de
prostaciclin (PGI2) din culturi de celule endoteliale umane, prin
intermediul activrii receptorilor NK-1 (19). Pe de alt parte,
activarea receptorilor pentru PGI2 determin eliberarea concomitent
de SP. PGI2, care se elibereaz n cantiti crescute n inflamaie,
poate fi considerat ca i un intermediar al creterii sintezei SP
(20).
Exist evidene, din studii anterioare, c SP este implicat n
medierea neurogen a extravazrii plasmatice i, o parte a acestui
rspuns, este intermediat de eliberarea de histamin i serotonin din
mastocite (sub aciunea SP) (21). Deoarece NKA este localizat la
nivelul aferenelor senzitive primare mpreun cu SP, poate lua i ea
parte la acest mecanism. Dei NKB nu este localizat mpreun cu SP i
NKA la nivelul aferenelor sensitive primare, unii autori i atribuie
un rol important n creterea permeabilitii vasculare i extravazarea
plasmatic (22).
Este descris i intensificarea sintezei de TNF-alfa, IL-1, IL-6 i
IFN-gama de ctre monocite i astrocite, sub aciunea SP. De asemenea,
s-a constatat c SP poate iniia i interaciunea unor molecule de
adeziune de tipul LFA-1/ICAM-1, prin acest fenomen contribuind la
mecanismele caracteristice extravazrii leucocitelor (23). n cazul
durerii neuropate, creterea numrului de leucocite, a proteinei C
reactive i a interleukinei-6 se nsoete de cresterea concentratiei
SP (24).
Pe de alt parte, SP amplific producia anionului superoxid i a
peroxidului de hidrogen, n cursul procesului inflamator,
contribuind, n acest fel, la amplificarea stresului oxidativ.
Influena SP asupra mecanismelor eliberatoare de substane
proinflamatoare de tipul celor descrise demonstreaz capacitatea SP
de a amplifica inflamaia. Pe de alt parte, producia crescut de oxid
nitric (NO), n cursul procesului inflamator, stimuleaz eliberarea
de SP la nivelul fibrelor amileinice de tip C, fibre implicate n
transmiterea durerii. Acest fenomen sugereaz c NO poate avea un rol
important n medierea durerii asociat fenomenului inflamator
(25).
Influena SP se extinde i asupra sistemului imun. SP se leag de
receptori specifici de la nivelul limfocitelor T, stimulnd
proliferarea acestora. Legarea de receptorii limfocitelor B este
instabil. Anumite studii semnaleaz c SP poate regla sinteza de
imunoglobuline in vitro. S-a sugerat c neuropeptidele pot induce
rspunsul imun, parial, prin efecte asupra funciei macrofagelor,
contribuind la prezentarea antigenic. Descoperirea acestui fenomen
demonstreaz unul din mecanismele prin care sistemul nervos, prin
intermediul neurotransmitorilor, poate contribui la rspunsul
inflamator-imun al organismului. Totodat, s-a demonstrat c SP poate
determina alterarea privilegiului imunologic, la nivelul sistemului
nervos central, facilitnd fenomenele inflamatorii (15).
Bibliografie
1. WILLIS W.D.: Role of neurotransmitters in sensitization of
pain responses, Ann NY
Acad Sci, 2001, 933,142-56. 2. KIMURA S., OKADA M., SUGITA Y. I
COL.: Novel neuropeptides, neurokinin
alpha and beta isolated from porcine spinal cord, Proc Jpn Acad,
1989, 59, 101- 104.
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
15
3. MCCARSON K.E.: Central and peripheral expression of
neurokinin-1 and neurokinin-3 receptor and substance P-encoding
messenger RNAs: peripheral regulation during formalin-induced
inflammation and lack of neurokinin receptor expression in primary
afferent sensory neurons, Neuroscience, 1999, 93, 361-70.
4. LINTHORST A.C., REUL J.M.: Brain neurotransmission during
peripheral inflammation, Ann NY Acad Sci, 1998, 840, 139-152.
5. HAINS B.C., WILLIS W.D., HULSEBACH C.E.: Temporal plasticity
of dorsal horn somato-sensory neurons after acute and chronic
spinal cord hemisection in rats, Brain Res, 2003, 970 ,110-118.
6. BULBOAC ADRIANA: Teorii fiziopatologice afeciuni ale
sistemului nervos, Ed. Echinox, Cluj, 2004, p.88 -89.
7. AMBALAVANAR R., MORITANI M., MOUTANNI A. I COL.: Deep tissue
inflammation upregulates neuropeptides and evokes nociceptive
behaviors which are modulated by a neuropeptide antagonist, Pain,
2006, 120, 53-68.
8. ERSPARMER V., The tachykinin peptide family, Trends
Neuroscience, 1981, 4, 267-269.
9. CUESTA M.C., ARCAYA J.L., CANO G. I COL.: Opposite modulation
of capsaicin-evoked substance P release by glutamate receptors,
Neurochem Int, 1999, 35, 471-478.
10. GAMSE R., HOLZER P., LEMBEK F.: Decrease of SP in primary
afferent neurons and impairment of neurogenic plasma extravasation
by capsaicin, Br J Pharmacol, 1985, 68, 207-213.
11. DE SWERT K.O., JOOS G.F.: Extending the understanding of
sensory neuropeptides, Eur J Pharmacol, 2006, 533, 171-81.
12. BRAIN S.D., COX H.M.: Neuropeptides and their receptors:
innovative science providing novel therapeutic targets, Br J
Pharmacol, 2006, 147 Suppl 1, S202-11.
13. HARTUNG H.P.: SP-binding properties and studies on cellular
responses in guinea pig macrophages, J Immunol, 1986, 136,
3856-3863.
14. MIONE M.C., RALEVIC V., BURNSTOK G.: Peptides and vasomotor
mechanisms, Pharmacol Therap, 1990, 46, 429-468.
15. REINKE E., FABRY Z.: Breaking or making immunological
privilege in the central nervous system: The regulation of immunity
by neuropeptides, Immunol Lett, 2006, 104, 102-9.
16. FREIDINGER R.M.: Nonpeptidic ligands for peptide and protein
receptos, Curr Opin Chem Biol, 1999, 3, 395-406.
17. GONZALEZ H.L., CARMICHAEL N., DOSTROVSKY J.O. I COL.,
Evaluation of the time course of plasma extravasation in the skin
by digital image analysis, J Pain, 2005, 6, 681-8.
18. AFRAH A.W., FISKA A., GJERSTAD J. I COL.: Spinal substance P
release in vivo during the induction of long-term potentiation in
dorsal horn neurons, Pain, 2002, 96, 49-55.
19. MARCEAU F., FEMBLAY B., COUTURE R. I COL.: Prostacyclin
release induced by neurokinins in cultured human endothelial cells,
Can J Physiol and Pharmacol, 1989, 67, 159-162.
20. NAKAE K., SAITO K., IINO T. I COL.: Prostacyclin receptor
antagonist inhibits the sensitized release of substance P from rat
sensory neurons, Pharmacol Ther, 2005, 31, 1136-42.
21. COUTURE R., CUELLO A.C.: Studies on the trigeminal
antidromic vasodilatation and plasma extravasation in the rat, J
Physiology, 1984, 346, 273-285.
22. OGAWA T., KANAZAWA I., KIMURA F.: Regional distribution of
SP, neurokinin alpha and neurokinin beta in rat spinal cord, nerve
roots and dorsal root ganglia, and the effects of dorsal root
section or pinal transsection, Brain Res, 1985, 359, 152-157.
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
16
23. SABAN M.R.: Involvement of leukotrienes, TNF-alpha, and
LFA-1/ICAM-1 interaction in substance P induced granulocyte
infiltration, J Leukoc Biol, 1997, 61, 45-451.
24. SCHINKEL C., GAERTNER A., ZASPEL J. I COL., Inflammatory
mediators are altered in the acute phase of posttraumatic complex
regional pain syndrome, Clin J Pain, 2006, 22, 235-9.
25. YONEHARA H., YOSHIMURA M.: Effect of nitric oxide on
substance P release from the periphereal endings of primary
afferent neurons, Neurosci Lett, 1999, 271, 199-201.
The importance of neurokinins in the inflammation mechanism
ADRIANA BULBOAC, D. I. POP, A. BRCAN
Summary This paper focuses on the mechanisms by which
neuropeptides interact with
cellular receptors to stimulate pathophysiological events in
inflammation. One peptide currently under investigation is
substance P (SP), member of the tachykinin family. SP has been
extensively studied because of its many general physiological and
pathophysiological effects (smooth muscle contraction,
inflammation, neurotransmission, blood vessel dilatation, histamine
release, and activation of immune system). SP is present in the
primary afferent C-fibers, and plays important roles in neuropathic
pain and inflammation. The main effects of SP in inflammation are
the increase of vascular permeability leading to edema, and
leucocytes extravasation, two key components of the inflammatory
response. In addition, there is stimulation of macrophages,
activation of complement via the classical pathway, and production
of reactive oxygen intermediates. SP is a key player in
inflammation, and may have a significant impact on the therapeutic
strategies against many diseases.
Key words: inflammation, neuropeptides, substance P.
-
17
DETECIA REARANJAMENTELOR SUBTELOMERICE PRIN MLPA (MULTIPLEX
LIGATION-DEPENDENT PROBE AMPLIFICATION) METOD NOU DE DIAGNOSTIC N
FORMELE IDIOPATICE DE RETARD MENTAL
VICTORIA CRE1, MARIELA MILITARU2, CRISTINA RUSU3, MARIA PUIU4,
CRISTINA SKRYPNYK5, LIGIA BARBARII6, K. CSEP7, E. TOMESCU8
1Clinica Pediatrie I Axente Iancu Compartimentul Genetic
Medical, Spitalul Clinic de Urgen pentru Copii Cluj; 2Catedra de
Genetic Medical UMF Cluj, 3Disciplina de Genetic Medical, UMF Iai;
4Genetic Medical UMF Timioara, Departamentul de Genetic Spitalul
Clinic de Urgen pentru Copii Louis urcanu; 5Universitatea Oradea -
Facultatea de Medicin, Departamentul de Genetic Oradea;
6Laboratorul ADN-Institutul Naional de Medicina Legal Mina Minovici
Bucureti; 7Genetic Medical UMF Trgu Mure, 8I.O.M.C. Alfred Rusescu
Bucureti Rezumat
Retardul mental reprezint o perturbare semnificativ a abilitilor
cognitive i adaptative, cu debut sub vrsta de 18 ani i evoluie
cronic, afectnd 2 3% din populaia general. Etiologia retardului
mental este foarte variat, incomplet precizat implicnd factori
genetici i de mediu, proporia formelor idiopatice depind ns 50% din
cazuri. Rearanjamentele subtelomerice sunt responsabile de
aproximativ 5% din cazurile de retard mental idiopatic. Dintre
tehnicile propuse, n timp, pentru detectarea acestor rearanjamente,
Multiplex Ligation - dependent Probe Amplification MLPA, s-a detaat
ca fiind metoda de elecie, relativ uor de utilizat i cu un raport
cost/eficien avantajos. Introducerea acestei metode n Romnia ar
crete ansa unui diagnostic specific la pacienii cu retard mental,
permind o abordare profilactic adecvat, cu consecine att asupra
familiei pacientului ct i asupra societii.
Cuvinte cheie: retard mental, scor clinic, rearanjamente
subtelomerice, tehnici de hibridizare, amplificare multiplex - MLPA
Retardul mental (RM) reprezint o perturbare semnificativ a
abilitilor cognitive i adaptative cu debut sub vrsta de 18 ani i
evoluie cronic, ce afecteaz 2 3% din populaia general, cu consecine
majore att pentru individ i familia acestuia ct i pentru societate,
constituind astfel o problem important de sntate public (1). Din
punct de vedere etiologic, n RM sunt implicai att factori genetici
(cel mai important fiind Sindromul X fragil, urmat de alte anomalii
cromozomiale numerice sau structurale, boli monogenice,
mitocondriale) ct i factori de mediu. n funcie de gradul de
severitate al RM, s-a constat o frecven mai mare a
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
18
cauzelor genetice la pacienii cu RM moderat i sever, n timp ce
factorii de mediu (n special cei sociali) au fost mai frecvent
implicai n RM uor. n toate formele clinice de RM ns, ponderea
cazurilor cu etiologie neprecizat (formele idiopatice) este nc
foarte ridicat (1; 2). Peste 50% dintre persoanele
instituionalizate sau din colile speciale nu au un diagnostic
specific (3), motiv pentru care majoritatea cercetrilor actuale
referitoare la RM se concentreaz asupra studierii RM de cauz
neprecizat cu scopul identificrii unor noi cauze. Dintre acestea,
studiul rearanjamentelor subtelomerice a constitutit o preocupare a
multor cercettori n ultimii ani, fiind consemnate prevalene ntre 5
i 10% (4; 5). ntruct se cunoate faptul c majoritatea translocaiilor
implic telomerele iar regiunile adiacente telomerelor sunt foarte
bogate n gene (rearanjamentele care implic AND-ul adiacent
telomerelor avnd, foarte probabil, consecine fenotipice), o
investigaie a capetelor cromozomului va detecta toate anomaliile,
indiferent de mrime (6). O selectare riguroas a cazurilor crete
mult eficiena investigaiilor de laborator, numeroase studii clinice
avnd ca scop identificarea semnelor clinice asociate RM care ar
putea s sugereze existena unui rearanjament subtelomeric i s
stabileasc scoruri clinice de diagnostic (3) lu scorul Sandig (7),
mai frecvent utilizat fiind scorul de Vries (tabelul I): Tabel I.
Criterii clinice pentru pacienii cu rearanjamente subtelomerice
submicroscopice (de Vries, 2000)
Criteriu Scor Istoric familial de RM :
compatibil cu transmiterea monogenic incompatibil cu
transmiterea monogenic
1 2
Retard de cretere cu debut prenatal 2 Anomalii de cretere
postnatal (pentru fiecare din urmtoarele : 1 punct, maxim 2 puncte)
: microcefalia macrocefalia hipostatur hiperstatura
1 1 1 1
2 / > trssturi dismorfe faciale (n special hipertelorism,
anomalii nazale, auriculare)
2
Anomalii extrafaciale (pentru fiecare anomalie 1 punct, maxim 2
puncte) ; mai ales : anomalii ale minii defecte cardiace
hipospadias / criptorhidie
1 1 1
Pentru includerea n studiu se recomand ca pacientul s
ndeplineasc un scor de >/ 3 puncte. Pn de curnd, screeningul
rearanjamentelor subtelomerice a fost mpiedicat de complexitatea
structurii secvenelor telomerice i de preul crescut al
investigaiilor. Studiile de laborator au inclus diferite metode: de
la tehnici citogenetice obinuite (cariograma bandat) sau de nalt
rezoluie (studierea cromozomilor n prometafaz) la diverse variante
de hibridizare fluorescent in situ Fluorescece in situ
Hybridization (FISH) (6; 8; 9). Mai recent au fost propuse tehnici
de hibridizare a probei cu amplificare multiplex: Multiplex
Amplifiable Probe Hybridization (MAPH); Quantitative Multiplex PCR
of Short fluorescent Fragments (QMPSF) (10) i Multiplex Ligation -
dependent Probe Amplification (MLPA) (11; 12).
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
19
MLPA a devenit metoda cea mai folosit pentru dozrile genomice,
fiind considerat metoda de elecie n detectarea rearanjamentelor
subtelomerice, avnd avantajul analizei concomitente a 40 de
loccusuri (5;13;14), relativ uor de efectuat i cu un raport cost /
eficien avantajos. Laboratoare din ntreaga lume au preluat tehnica,
att pentru aprecierea frecvenei reale a rearanjamentelor
subtelomerice (15), ct i pentru tentativa de a contura tabloul
clinic al fiecrui rearanjament subtelomeric n parte (16). Tehnica
MLPA are urmtoarele caracteristici (5;13;14):
- const n detecia numrului anormal de baze azotate, concomitent
n 40 de secvene de ADN genomic, printr-o reacie de tip protein
chain reaction (PCR);
- necesit minim 20 ng ADN uman; - poate face diferena ntre
secvene ce difer printr-o singur baz azotat; - necesit un
termocycler i un sistem de electroforez de tip secveniere; -
protocolul este identic pentru diferite aplicaii (detecia
rearanjamentelor
subtelomerice, detecia aneuploidiilor cromozomilor 13, 18, 21, X
i Y; detecia deleiilor sau duplicaiilor cromozomiale mari; detecia
deleiilor sau duplicaiilor genice n cancer; detecia
deleiei/duplicaiei unui singur exon BRCA, NF; cuantificarea
metilrii insulelor CpG n promotorii genelor supresoare n
tumori);
- datorit secvenei scurte de recunoatere a sondei, metoda poate
fi folosit i pe ADN parial degradat (extras din esuturi fixate,
blocuri de parafin);
- sunt amplificate prin PCR sondele fixate la prob, nu acizii
nucleici din proba de examinat;
- dou sonde sunt hibridizate pe secvenele int, apoi se face
legarea sondelor i amplificarea secvenei int ;
- reacia PCR necesit numai o pereche de primeri pentru
amplificarea tuturor fragmentelor ;
- produii amplificai variaz ca marime de la 130 la 490 pb i sunt
analizai prin electroforeza de tip secveniere.
Koolen, ntr-un studiu pe cel mai mare lot de pacieni cu RM (210
pacieni cu RM idiopatic) a consemnat o prevalena de 6,7% a
rearanjamentelor subtelomerice. Autorul a constatat, n plus, c
utilizarea unui scor clinic de > 3 crete de dou ori ansa
diagnosticului (la 12,4%), screeningul rearanjamentelor
subtelomerice fiind necesar chiar i n formele uoare de RM, dac se
asociaz anomalii clinice relevante (15). Studiul condus de Rooms, n
2004, pe un lot de 75 pacieni cu RM mediu i sever, a consemnat o
prevalen de 5,3% a rearanjamentelor subtelomerice prin metoda MLPA
(confirmate i prin metoda FISH) (5). Eficiena metodei MLPA a fost
confirmat i de ali autori, la cazurile diagnosticate iniial prin
FISH (17), unele studii susinnd superioritatea MLPA n detecia
rearanjamentelor subtelomerice criptice fa de FISH (18). ntruct
studiul rearanjamentelor subtelomerice n RM nu s-a efectuat pn n
prezent n Romnia, introducerea tehnicii MLPA ar crete ansa unui
diagnostic specific n cazurile de RM idiopatic i, implicit, a unei
abordri profilactice mai adecvate n familiile cu risc, cu impact
major (medical, social i economic) asupra familiei i societii.
Bibliografie
1. COVIC M., STEFANESCU D., SANDOVICI I.: Genetica Medicala,
Retardul mental, p 457-472; Editura Polirom, 2004;
2. RIMOIN L. DAVID, CONNOR J. MICHAEL, PYERITZ E. REED EMERY AND
RIMOINS: Principles and Practice of Medical Genetics, 3rd
Edition,
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
20
Churchill Livingstone 1997, Abnormal mental development p
725-736; 3. DE VRIES B.B.A., WHITE S.M., KNIGHT S.J.L., REGAN R.,
HOMFRAY
T., YOUNG I.D., SUPER M., MCKEOWN C., SPLITT M., QUARRELL
O.W.J., TRAINER A.H., NIERMEIJER M.F., MALCOM S., FLINT J., HURST
J.A., WINTER R.M.: Clinical studies on submicroscopic subtelomeric
rearrangements: a checklist, J. Med. Genet 2001; 38: 145-150;
4. FLINT J., WILKIE AOM, BUCKLE VJ, WINTER RB, HOLLAND AJ,
MCDERMID HE.: The detection of subtelomeric chromosomal
rearrangenments in idiopathic mental retardation. Nat Genet 1995;
9: 132-139;
5. ROOMS LIESBETH, REYNIERS E., VAN LUIJK ROB, SCHEERS S.,
WAUTERS JAN, CEULEMANS BERTEN, VAN DEN ENDE JENNEKE, VAN BEVER
YOLANDE, KOOY R. FRANK: Subtelomeric Deletions Detected in Patients
With Idiopathic Mental Retardation Using Multiplex Ligation-
Dependent Probe Amplification (MLPA), Human Mutation 23: 17-21
(2004);
6. KNIGHT J.L. SAMANTHA, LESE M. CHRISTA, PRECHT S. KATHRIN, KUC
JULIE, NING YI, LUCAS SARAH, REGAN REGINA, BRENAN MARY, NICOD
ALISON, LAWRIE MARTIN N., CARDY L.N. DONALD, NGUYEN HUY, HUDSON J.
THOMAS, RIETHMAN C. HAROLD, LEDBETTER H. DAVID, FLINT JONATHAN: An
Optimized Set of Human Telomere Clones for Studying Telomere
Integrity and Architecture, Am. J. Hum. Genet. 67: 320-332,
2000;
7. SANDIG K.S. WALTER, HINKEL G.K., MITULLA B., OUNAP K., SIMS
G., SITSKA M., UTERMANN B., VIERTEL P., KALSCGEUER V., BARTSCH O.:
Subtelomere FISH in 50 children with mental retardation and minor
anomalies, identified by a checklist, detects 10 rearrangements
including a de novo balanced translocation of chromosomes 17p13.3
and 20q13.33, Am J Med Genet A. 2004 Aug 1;128 (4): 364-73;
8. KNIGHT J.L. SAMANTHA, HORSLEY W. SHARON, REGAN REGINA, LAWRIE
N. MARTIN, MAHER E.J., CARDY L.N. DONALD, FLINT JONATHAN, KEARNEY
LYNDAL: Development of Clinical Application of an Innovative
Fluorescence in situ Hybridization Technique Which Detects
Submicroscopic Rearrangements Involving Telomeres, Eur. J. Hum.
Genet 1997; 5: 1-8;
9. KNIGHT J.L. SAMANTHA, FLINT JONATHAN: Perfect endings: a
review of subtelomeric probes and their use in clinical diagnosis,
J. Med. Genet 2000; 37: 401-409;
10. PASCALE SAUGIER-VEBER, ALICE GOLDENBERG, VALERIE
DROUIN-GARRAUD, CELINE DE LA ROCHEBROCHARD, VALERIE LAYET, NATHALIE
DROUOT, NATHALIE LE MEUR, BRIGITTE GILBERT-DU-SSARDIER, GERALDINE
JOLY-HELAS, HELENE MOIROT, ANNICK ROSSI, MARIO TOSI AND TIERRY
FREBOURG: Simple detection of genomic microdeletions and
microduplications using QMPSF in patients with idioathic mental
retardation, Eur J Hum Genet. 2006 (14):1009-1017.
11. ARMOUR J.A.L., BARTON D.E., COCKBURN D.J., TAYLOR G.R.: The
Detection of Large Deletions or Duplications in Genomic DNA, Human
Mutation 20: 325-337 (2002);
12. SELLNER N. LORYN, TAYLOR R. GRAHAM MLPA and MAPH: New
Techniques for Detection of Gene Deletions, Human Mutation 23:
413-419 (2004);
13. JORIS A VELTMAN: Diagnostics: Genomic copy number analysis
in mental retardation: finding the needles in the haystack, Eur J
Hum Genet. (2007) 15, 1-2. doi : 10.1038/sj.eshg.5201728 ; online
Oct 18 2006
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
21
14. MLPA, MRC-Holland, Amsterdam (www.mlpa.com); 15. KOOLEN
D.A., NILLESEN W.M., VERSTEEG M.H.A., MERKS G.F.M.,
KNOERS N.V.A., KETS M., VERMEER S., VAN RAVENSWAAIJ C.M.A., DE
KOVEL C.G., BRUNNER H.G., SMEETS D., DE VRIES B.B.A., SISTERMANS
E.A.: Screening for subtelomeric rearrangements in 210 patients
with unexplained mental retardation using multiplex ligation
dependent probe amplification (MLPA), J. Med. Genet. 2004; 41:
892-899;
16. ROSSI ELENA, PICCINI FLAVIA, ZOLLINO MARCELLA, NERI
GIOVANNI, CASELLI DESIREE, TENCONI ROMANO, CASTELLAN CLAUDIO,
CARROZZO ROMEO, DANESINO CESARE, ZUFFARDI ORSETTA, RAGUSA ANGELA,
CASTIGLIA LUCIA, GALESI ORNELLA, GRECO DONATELLA, ROMANO CORRADO,
PIERLUIGI MAURO, PERFUMO CHIARA, DI ROCCO MAIA, FARAVELLI
FRANCESCA, BRICARELLI FRANCA DAGNA, BONAGLIA MARIA CLARA, BEDESCHI
MARIA FRANCESCA, BORGATTI RENATO: Cryptic telomeric rearrangements
in subjects with mental retardation associated with dysmorphism and
congenital malformations, J. Med. Genet 2001; 38: 417-420;
17. PALOMARES M, DELICADO A, LAPUZINA P, ARJONA D, AMINOSO C,
ARCAS J, MARTINEZ BERMEJO A, FERNANDEZ L, LOPEZ PAJARES I: MLPA vs
multiprobe FISH: comparison of two methods for the screening of
subtelomeric rearrangements in 50 patients with idiopathic mental
retardation, Clin Genet. 2006 Mar; 69 (3):228-33;
18. MONFORT S, ORELLANA C, OLTRA S, ROSELLO M, GUITART M,
MARTINEZ F: Evaluation of MLPA for the detection of cryptic
subtelomeric rearrangements, J Lab Clin Med. 2006 Jun; 147(6):
295-300.
The detection of subtelometric rearrangements using MLPA
(Multiplex Ligation-Dependent Probe Amplification): A new method
for the diagnosis of idiopatic mental retardation
VICTORIA CRE, MARIELA MILITARU, CRISTINA RUSU, MARIA PUIU,
CRISTINA SKRYPNYK, LIGIA BARBARII, K. CSEP, E. TOMESCU
Summary Mental retardation is a significant disturbance of
cognitive and adaptative abilities, with onset under the 18 years
of age and chronic evolution, 2 3% of general population being
affected. Mental retardation etiology involved genetic and
enviromental factors but unknown forms exceed 50%.. Subtelomeric
rearrangements are responsable for 5% of idiopathic forms of mental
retardation. For detection of this rearrajements, Multiplex
Ligation - dependent Probe Amplification MLPA, is a fast and
reliable method potentially suitable for use in routine
diagnostics. Using this method in Romania would rise the chance of
specific diagnosis for patients with mental retardation, a better
profilactic approach.
Key words: mental retardation, clinical score, subtelomeric
rearrangements, hibridization technics, multiplex amplification -
MLPA
-
22
INFLUENA TERAPIEI ESTROGENICE ASUPRA CREIERULUI: IMPLICAIILE
ACESTEIA N BOLILE NEURODEGENERATIVE
FULGA FLORESCU, N. COSTIN Catedra Obstetric-Ginecologie II, UMF
Cluj Napoca
Rezumat Pe termen lung, scderea nivelului estrogenic
postmenopauzal accentueaz
depresia i anxietatea, crete riscul maladiei Alzheimer i al
bolii Parkinson, influeneaz rata accidentelor vasculare
ischemice.
Studiile asupra tratamentului de substituie estrogenic sugereaz
efectele benefice asupra funciilor de cunoatere (i in special
asupra memoriei), dar i asupra motilitii i strii psihice.
Estrogenii protejeaz creierul de neurodegenerescen, inducnd
formarea de novo a sinapselor, favoriznd transmiterea colinergic,
promovnd supravieuirea neuronal.
Tratamentul estrogenic n menopauz determin ntrzierea
modificrilor cognitive legate de vrst, influennd sistemele
neurotransmitorilor estrogenosensibili, reglnd vascularizaia
creierului i protejnd creierul mpotriva stressului oxidativ.
Depistarea efectului neuroprotector al estrogenilor dezvolt noi
oportuniti farmaceutice n redefinirea terapiei estrogenice
substitutive.
Cuvinte cheie: neurotransmiatori, neurodegenerescen, terapie
estrogenic substitutiv, funcia de cunoatere, coordonarea
motorie.
Estrogenii nu sunt numai hormoni reproductivi feminini, ci, n
cadrul
multiplelor influene sistemice, exercit efecte la diferite
nivele ale sistemului nervos central, intervenind n controlul
motilitii fine i al senzaiei dureroase, al strii psihice i emotive,
al memoriei i cogniiei.
ntr-adevr, astzi se tie c estrogenii pot proveni din androgeni n
esutul grsos, dar i n creier (att la femeie, ct i la brbat) i deci
nu provin numai din esutul ovarian. Astfel, rolul lor n controlarea
i stabilirea diferenelor sexuale neuroanatomice n timpul dezvoltrii
somatice este actualmente recunoscut, considerndu-se a fi major i n
timpul perioadei de adult. Steroizii ovarieni afecteaz creierul n
dezvoltarea sa n numeroase moduri i influena lor dureaz toata viaa;
de exemplu, estrogenii sunt implicai n programarea structural i
funcional a diferenelor sexuale la nivel cerebral, ncepnd din viaa
embrionar i neonatal. Aceste procese presupun exprimarea
receptorilor estrogenici intracelulari din creier, nc din
dezvoltarea embrionar (1).
Chiar dac barbaii i femeile au att receptori estrogenici, ct i
androgenici, diferenele sexuale n nivelurile circulante de
estrogeni i androgeni rezult din diversele rate de ocupare a
receptorilor la nivelul creierului i n alte organe. Rspunsul la
hormonii gonadali depinde de sex. Diferenele sexuale n programul
genomic sunt instituite n creier n timpul perioadei de difereniere
sexual.
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
23
Estrogenii pot, de asemenea, influena creierul la pubertate.
Influena lor asupra hipotalamusului induce ciclismul ovarian la
pubertate i neuronii care produc GnRH sunt elementele cheie n acest
proces (1).
La nivelul ovarelor, estrogenii sunt produi din colesterol, via
testosteron. La nivelul esutului grsos i n creier, ei deriv din
testosteronul gonadic i din ali androgeni adrenalieni. Cum att
femeile, ct i brbaii sintetizeaz estrogeni, nu este surprinztor c
ambele sexe exprim la nivel celular receptori intracelulari
estrogenici, n multe pri ale corpului, incluznd creierul. Aceti
receptori sunt de natur proteic, care dup legarea de estrogeni intr
n nucleii celulelor int i regleaz expresia genelor (2). Forma
clasic a receptorilor estrogenici este (-ER), dar recent au fost
omologai receptori de tip (-ER). Estrogenii au diferite modaliti de
aciune la nivel central. Studiile asupra activitii celulei nervoase
au artat c efectele estrogenilor pot surveni la acest nivel att de
rapid, nct activarea sau reprimarea genetic nu pot fi implicate
(3). De exemplu, la nivelul cerebelului, hipocampului, corpilor
striai, cortexului cerebral activitatea electric celular poate fi
stimultat n decursul secundelor. n multe cazuri, aceste mecanisme
non-genomice opereaz pe suprafaa celular sau n apropierea acesteia,
afectnd excitabilitatea nervoas sau a celulelor musculare netede
prin intermediul micrii ionilor de Na, K, Ca care genereaz un
impuls nervos (mecanismele nongenomice sunt nc puin cunoscute).
De peste 40 ani, experienele pe animale au artat c estrogenii
influeneaz puternic activitatea cerebral. Cele mai vechi studii
cercetau influena estrogenilor asupra hipotalamusului i rolul
acestuia n ovulaie i n comportamentul reproductiv. Astzi se tie c
estrogenii pot aciona asupra unor arii din creier importante pentru
memorie i nvare, pentru emotivitate i afectivitate, pentru
coordonarea motorie i sensibilitatea dureroas. De fapt,
interaciunea estrogenilor cu sistemele serotoninergic,
noradrenergic, dopaminergic i colinergic determin influena acestora
asupra strii psihice i emotivitii. De exemplu, n sindromul
premenstrual inhibiia ciclului ovarian estrogenic determin o stare
de depresie premenstrual. Mai mult, dozele mari de estrogeni
administrate n sindroamele depresive au clar efect antidepresiv
(1).
n ceea ce privete funcia de cunoatere, estrogenii influeneaz
memoria de scurt durat precum i performanele n coordonarea
motilitii fine i a orientrii n spaiu. Terapia estrogenic are astfel
un beneficiu net n mbuntirea funciei cognitive la vrstnicele
non-demente i poteneaz celelalte tratamente la femeile vrstnice cu
demen. n caracterizarea efectelor menopauzei asupra funciei de
cunoatere, este important diferenierea ntre efectul imediat i cel
tardiv (4). n general perimenopauza are efecte imediate reduse
asupra funciei de cunoatere. Pe de alt parte, anumite simptome
menopauzice pot contribui la apariia diferenelor individuale ale
funciei cognitive, tulburri ale strii psihice i ale somnului.
Efectele tardive sunt puin cunoscute, dar datele sugereaz c
utilizarea din timp a hormonoterapiei poate conferi protecie asupra
declinului n cunoatere, mai ales prin activarea funciei
hipocampului.
Estrogenii controleaz i comportamentul locomotor prin
influenarea activitii cerebelului i a sistemului dopaminergic.
Nivelurile crescute de estrogeni antagonizeaz sistemul dopaminergic
i pot exacerba simptomele Parkinsonului, n timp ce dozele sczute
poteneaz funcionalitatea dopaminergic. Tipul de epilepsie asociat
cu mentruaia (epilepsia catamenial) survine cnd fracia
progesteron\estrogeni este cea mai redus din timpul ciclului
menstrual; astfel, estrogenii au efect excitant asupra
hipocampusului, progesteronul scade excitabilitatea nervoas
(5).
Studiile recente sugereaz c att femeile ct i barbaii i folosesc
steroizii gonadali prin diverse mecanisme patogenetice, mai ales
estrogenii, n medierea senzaiilor dureroase, dei exist diferene
ntre sexe raportate la analgezie, mai ales c estrogenii au un efect
sex-dependent la formele de analgezie non-opioid.
Estrogenii i creierul n vrst: Lista aciunilor estrogenilor
asupra creierului vrstnicelor este foarte lung,
fiind accentuate mai ales influenele asupra dezvoltrii
creierului, funcionrii i
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
24
mbuntirii acestuia. Achiziiile noi ale neurologiei indic
corelaia ntre fenomenele de cunoatere i estrogeni precum i
afeciunile neurologice i estrogeni, n special maladia
Alzheimer.
Termenul de cogniie include un spectru larg de abiliti care
presupun: atenia, nvarea, memoria, limbajul, judecata. Hipocampul
este structura creierului care coordoneaz aceste funcii. Prezena
ambelor tipuri de receptori si pentru estrogeni este demonstrat la
nivelul hipocampului.90% din celulele creierului sunt celule gliale
i numai 10% sunt neuroni. Estrogenii acioneaz asupra ambelor tipuri
de celule stem, influennd transcrierea genelor estrogen-senzitive.
Efectul estrogenilor asupra fiecrui tip de celul se va exprima n
acord cu rolul funcional al celulei respective (6).
Hipocampul adultului primete semnale de la sistemul nervos
senzitiv, inclusiv de la ariile corticale senzitive. El proceseaz
aceste date pentru a le distribui hipotalamusului, dar i ariilor
motorii corticale. Integritatea acestor sisteme determin
eficacitatea depozitrii i utilizrii informaiilor ( aspecte de
memorare i rememorare).
Estrogenii sunt importani n reglarea i ntreinerea mai multor
arii ale creierului. Ei sunt folosii i n schimbrile corticale
datorate aspectelor cognitive, reglnd structurarea i conectarea
hipocampusului la zonele asociate. Scderea nivelului estrogenic dup
menopauz coincide cu momentul deteriorrii multor activitii ale
sistemului nervos central, mai ales ale acelora asociate funcionrii
hipocampului (memoria, atenia, cogniia i controlul autonomic).
Leziunile hipocampului n postmenopauz sunt relativ comune. n
creier, leucocitele i celulele gliale lucreaz s izoleze aceste
injurii prin procese inflamatorii localizate. Acest sistem de
aprare este numit bariera imun a creierului i permite un raspuns
imun local conservnd integritatea celulelor creierului. Pentru a
reui acest lucru, bariera imun a creierului induce apoptoza
leucocitelor activate ca rspuns la injuriile creierului, fiind
influenat de estradiol care induce aprarea n faa generalizrii
injuriilor (7).
Creterea speranei de via conduce implicit la mrirea duratei
postmenopauzice, care este o perioad de deficit estrogenic.
Deficiena estrogenic cauzeaz att modificri reversibile ale funciei
de cunoatere, ct i modificrile ireversibile asociate cu demena. De
exemplu, scderea memoriei i a coordonrii motorii (ca urmare a
supresiei funciei ovariene dup administrare de GnRH agoniti sau
chirurgical i prin menopauza natural) sunt cunoscute a fi tratabile
prin terapie de substituie hormonal estrogenic. Starea psihic este,
de asemenea, sensibil la estrogeni, depresia perimenopauzal putnd
fi tratat cu estrogeni. Pe termen ndelungat, scderea nivelului
estrogenic poate accentua riscul bolii Alzheimer, care ar rspunde i
ea la terapia estrogenic. Oricum, studiile recente sugereaz c
beneficiile tratamentului nu sunt evidente odat ce boala s-a
stabilit deja.
Estrogenii protejeaz creierul de neurodegenerescen prin dou
modaliti: 1) menin funcionalitatea structurilor neuronale-cheie; 2)
impiedic aciunea agenilor neurotoxici. Tratamentul estrogenic
induce formarea de novo a sinapselor ntre neuronii
piramidali i regleaz transmiterea colinergic, precum i
receptorii factorilor de cretere neuronal care promoveaz
supravieuirea neuronal. Mai mult, estrogenii au efect protectiv
mpotriva ischemiei cerebrale (8).
Att in vivo, ct i in vitro, estrogenii influeneaz celulele
gliale ale creierului, care sunt implicate n metabolismul energetic
oxidativ, n plasticitatea cerebral i neuroprotecie. Celulele gliale
i epiteliul vascular sunt capabile s utilizeze glucoza ca surs de
energie primar. Pentru brbai, scderea funciei gonadale nu este aa
dramatic, deficitul de androgeni nefiind aa de catastrofic.
Existena diferenelor de dezvoltare neuronal pe sexe induce ideea
raspunsului neuronal diferit la estrogeni sau androgeni, Efectul
neuroprotectiv al estrogenilor pe creier ar fi evident la ambele
sexe, chiar i androgenii ar putea fi benefici.
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
25
Depresia la persoanele n postmenopauz: Depresia este definit
prin semnalarea simptomelor depresive: stare psihic
proast; ngrijorare; insomnie (30-40% din persoanele n vrst vor
admite ca au aceste simptome cnd sunt chestionate, dar sunt
tranzitorii i fac parte din experiena de via).
Sindrom depresiv simptomele sunt mai numeroase, severe i persist
suficient timp ct s mpieteze viaa de zi cu zi. La acest nivel
medicul trebuie s se gndeasc la o forma de intervenie, chiar dac
medicaia nu este strict necesar (12% din populaie este diagnosticat
cu acest sindrom).
Depresia major este conceptul psihiatric care mut depresia n
categoria de boal. Este relativ rar (1-2%), dar populaia n vrst se
pare c nu raporteaz toate simptomele care ar putea-o categorisi
astfel (subdiagnosticare).
Depresia este cea mai comun afeciune psihiatric a femeii n vrst
(10-12%), urmat de demen (5-6%) i anxietate (5%); poate fi detectat
n cadrul unui screening sau prin interogatoriul medical (anamneza
pentru alt afeciune). Rezultatele dup tratament nu sunt
mulumitoare: 60% din cazuri rmn n depresie la 1 an de la
diagnosticare.Asocierea depresiei cu diverse dizabiliti este
frecvent, riscul lor crescnd de 2-6 ori(9).
Factorii de risc pentru depresie: - limitarea activitii zilnice;
- lipsa familiei; - insomnia;
- perioade de amnezie. Datele clinice i paraclinice sugereaz c
scderea nivelului de estrogen
endogen poate juca un rol important n patogeneza depresiei de
postmenopauz, estrogenii avnd efect pozitiv asupra strii psihice,
cunoaterii, emoiilor i comportamentului. Dozele mari de estrogeni
conjugai sunt folosite n tratamentul depresiei recurente din
postmenopauz(10). Datele pe care se bazeaz rolul estrogenilor i a
serotoninei la nivel central sunt confirmate de prezena a dou
tulburri: sindromul premenstrual i depresia postmenopauzal
(estrogenii scznd starea de anxietate).
n postmenopauza imediat, utilizarea estrogenilor sau a SERM a
condus la mbuntirea scorului osteoporozei, depresiei i anxietii (n
comparaie cu grupul placebo). La femeile cu postmenopauz tardiv, la
care osteoporoza era instituit, nu a existat nicio mbuntire la
administrarea estrogenilor asupra simptomelor depresiei sau asupra
funciei cognitive; n schimb scade rata anxietii.
Aceste date sugereaz c estrogenii sau SERM au efect pozitiv
asupra sistemului nervos central mai ales dac sunt administrai din
timp (postmenopauza imediat), la femeile la care depresia
menopauzic nu este nc instalat, dar mbuntesc oricum starea de
anxietate (11).
Afeciunile neurodegenerative: Exist date clinice i experimentale
care susin efectele protective ale terapiei
estrogenice mpotriva afeciunilor neurodegenerative umane. Cele
mai importante efecte neuroprotective sunt recunoscute n atacurile
vaculare cerebrale, boala Parkinson i maladia Alzheimer.
Femeile n premenopauz sunt expuse unui risc sczut de accidente
vasculare cerebrale (AVC) n comparaie cu barbaii; aceasta diferen
nu mai este observat n postmenopauz, cnd riscurile se egalizeaz,
sugernd protecia estrogenic la AVC (11).
Mai multe studii observaionale raporteaz asocierea ntre terapia
estrogen substitutiv i riscul mai sczut la afeciuni
cardiovasculare. Totui, eficacitatea terapiei estrogenice
postmenopauzice n reducerea recurenei AVC rmne controversat, unii
susinnd c riscul afeciunilor coronariene nu a fost redus dup
terapie.
Una din probleme este momentul menopauzei la care tratamentul
hormonal este iniiat. Aceast ipotez sugereaz c iniierea
tratamentului n perimenopauz este
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
26
benefic pentru protecia cardiovascular, dar aceste efecte
benefice sunt pierdute dac tratamentul s-a nceput trziu n
postmenopauz (12).
Dei majoritatea femeilor din studiile observaionale sunt n
perimenopauz n momentul iniierii hormonoterapiei, recentele
trialuri clinice studiaz femeile mai n vrst n postmenopauz ce au
avut iniiat tratamentul substitutiv n diverse perioade (11).
Concluziile arat c utilizarea hormonoterapiei trebuie nceput ct mai
repede dup constatarea deficienei estrogenice pentru a se putea
inhiba progresiunea aterosclerozei coronariene, dar aceast protecie
se pierde dac tratamentul se ntrzie n iniiere cu aproximativ 2 6
ani.
Boala Parkinson rezult din degenerarea neuronilor care
sintetizeaz dopamina n substana nigra, conducnd la reducerea
dopaminei n corpii striai unde sunt localizte terminaiile lor
neuronale. Cauza morii celulare rmne necunoscut, dar boala
Parkinson este cu certitudine mai frecvent la barbai dect la femei.
Studiile experimentale sugereaz c estrogenii pot influena debutul i
severitate bolii Parkinson. Legtura clinic ntre estrogeni i boala
Parkinson rmne controversat, unele studii indic reducerea riscului
prin terapie estrogenic postmenopauzal (13). Estrogenii inhib
degenerarea dopaminergic printr-o varietate de mecanisme, incluznd
reducerea apoptozei, reglnd factorii de cretere neurotrofic, reduc
neuroinflamaia, regleaz vascularizaia creierului i protejeaz
mpotriva stressului oxidativ.
Maladia Alzheimer este cauza primar a demenei la vrst avansat i
se caracterizeaz prin pierderea memoriei i a altor abiliti
cognitive. Dei numeroasele studii indic reducerea riscului de
Alzheimer ale terapiei estrogenice, alte date indic lipsa eficienei
terapiei estrogenice la femeile postmenopauzale care au fost
diagnosticate deja cu maladia Alzheimer (14).
Maladia Alzheimer este o maladie distrofic care afecteaz primar
neuronii i conexiunile sinaptice. Diagnosticul clinic se pune prin
anamnez, lipsa semnelor neurologice de disfuncia sistemului nervos
central, absena semnelor de ischemie cerebral vascular i prin teste
de laborator. n Alzheimer demenierea are loc insidios (15). Dei
hormonoterapia pare s ntrzie declanarea clinic a bolii Alzheimer,
mecanismele care determin aceast protecie sunt necunoscute. Exist
totui probe asupra rolului imunitar n dezvoltarea bolii Alzheimer,
iar estrogenii par s regleze sistemul imunitar al creierului
(funcia imunocitelor cerebrale fiind implicat n distrofia
creierului) (16).
S-a sugerat c tratamentul estrogenic n menopauza imediat (mai
degrab dect n menopauza tardiv) ar putea conduce la ntrzierea
modificrilor cognitive legate de vrst sau s reduc riscul severitii
maladiei Alzheimer .Estrogenii pot reduce riscul i severitatea
maladiei Alzheimer prin reducerea stressului oxidativ, creterea
fluxului sangvin cerebral i creterea transportului de glucoz la
nivel cerebral (17). Estradiolul este un puternic antioxidant la
concentraii reduse i poate proteja creierul de stricciunile produse
de radicalii liberi la nivelul neurotransmitorilor sistemului
nervos central.
De asemenea, estrogenii influeneaz sistemele
neurotransmitorilor. Alta modificare histologic n boala Alzheimer
este pierderea sinapselor i a ramificaiilor dendritice, estrogenii
avnd influen asupra acestor structuri.. Alterrile sinaptice din
boala Alzheimer se refera la scderea densitii terminaiilor
presinaptice) (18). Prezena unor plci senile la acest nivel ar
putea fi responsabil de disfuncia neurotransmitorilor n anumite
arii, mai ales ca principalele sisteme de neurotransmitere
(acetilcolina, glutamatul, acidul gamaaminobutiric) sunt
estrogen-sensibile.
Concluzii
~Rolul deficienei estrogenilor n afeciunile creierului nu este
pe deplin
cunoscut.
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
27
~Noua perspectiv asupra reglrii i efectului substanelor
neuroactive, asupra proteinelor cerebrale i mecanismelor de aprare
a gazdei arunc o lumin asupra posibilitilor informative.
~Efectele terapiei estrogenice includ rolurile n funcionalitatea
normal a creierului, ale mecanismelor de reparaie i reglarea
vascularizaiei cerebrale, precum i controlul aspectelor
inflamatorii de ctre sistemul imun.
~Cum oricare din aceti factori sunt implicai n rspunsurile
creierului att la mbtrnire ct i la depleia hormonal, va fi necesar
s se separe rolurile specifice ale mbtrnirii i schimbrilor
hormonale ale tulburrilor creierului la femeie i la brbat.
~Este clar c terapia estrogenic are impact asupra multor aspecte
ale funcionalitii creierului, incluznd starea psihic, controlul
motilitii, al durerii i al procesului cognitiv superior, oferind un
anumit grad de neuroprotecie.
~Recenta identificare a diverselor tipuri de receptori
estrogenici i ale mecanismelor lor intracelulare de aciune a fcut
posibil investigarea efectelor estrogenilor asupra creierului, nct
se vor dezvolta noi oportuniti farmaceutice pentru a reduce
impactul distructiv al radicalilor liberi asupra creierului,
redefinind terapia substitutiv estrogenic.
Bibliografie
1. FISCHL F.: Menopause- Andropause. Hormone replacement therapy
through the
ages. New cognition and therapy concepts, 2001, 115-131. 2.
BURGER HG.: The endocrinology of the menopause. Maturitas 1996;
23:129-136. 3. TORAN- ALLERAND CD, SINGH M, SETALO G.: Novel
mechanisms of
estrogen action in the brain: New players in an old story. Front
Neuroendocrinol 1999; 20: 97-121.
4. GARCIA- SEGURA LM, AZCOITIA I, DONCARLOS LL.: Neuroprotection
by estradiol. Progr Neurobiol 2001;63: 29-60.
5. KUIPER GG, SHUGHRUE PJ, MERCHENTHALER I, GUSTAFSSON JA.: The
estrogen receptor beta subtype: a novel mediator of estrogen action
in neuroendocrine systems. Front Neuroendocrinol 1998;19:
253-286.
6. GAUTHIER S. (ed): Clinical diagnosis and management of
Alzheimers disease, 2nd ed. Martin Dunitz Ltd., London, 1999;
457-489
7. BEHL C.: Alzheimers disease and oxidative stress;
implications for novel therapeutic approaches. Prog Neurobiol 1999;
57: 301-323.
8. OSTERLUND MK, HARD YL.: Estrogen receptors in the human
forebrain and the relation to neoropsychiatric disorders (Review).
Prog Neurobiol 2001; 64: 251-267.
9. MARKESBERRY WR, CARNEY JM.: Oxidative alterations in
Alzheimers disease (Review), Brain Pathol 1999; 9; 133-146.
10. MCEWEN BS.: Clinical review 108: the molecular and
neuroanatomical basis for estrogen effects in the central nervous
system. J Clin Endocrinol Metab 1999; 84: 1790-1797.
11. ISHUNINA TA, SWAAB DF.: Increased expression of estrogen
receptor alpha and beta in the nucleus basalis of Meynert in
Alzheimers disease. Neurobiol Aging 2001; 22: 417-426.
12. HENDERSON VW.: Estrogen replacement therapy for the
prevention and treatment of Azheimers disease. CNS Drugs 1997; 8:
343-351.
13. YAFFE K, SAWAYA G, LIEBERBURG I, GRADY D.: Estrogen therapy
in postmenopausal women:effects on cognitive function and dementia.
JAMA 1998; 279: 688-695.
14. BEHL C, HOLSBOER F.: The female sex hormone oestrogene as a
neuroprotectant. Trends Pharm Sci 1999; 20: 441-444.
15. BEHL C, MANTHEY D.: Neuroprotective activities of estrogen.
An update. J Neurocytol 2001; 29: 351-358.
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
28
16. JAFFE AB, TORAN- ALLERAND CD, GREENGARD P, GANDY SE.:
Estrogen regulates metabolism of Alzheimer amyloid precursor
protein. J Biol Chem 1994; 269: 13065-13068.
17. PETANCESCA SS, NAGY V, FRAIL D, GANDY S.: Ovariectomy and 17
beta-estradiol modulate the levels of Alzheimers amyloid beta
peptides in brain. Exp Gerontol 2000; 35: 1317-1325
18. PAGANINI- HILL A., HENDERSON VW.: Estrogen deficiency and
risk ok Alzheimers disease in women. Am J Epidemiol 1994; 140:
256-261 .
The influence of estrogen therapy on the brain: its implications
in the neurodegenerative diseases
FULGA FLORESCU, N.COSTIN Summary In the long term, the decrease
of post-menopausal estrogen level increases depression and anxiety,
the risk of Alzheimers disease and Parkinson, influences the rate
of ischemic strokes. The studies of estrogen substitution treatment
show benefic effects on the cognitive functions (especially on the
memory), but also on motility and psychical state. The estrogen
protects the brain from neuro-degenerescence, inducing the
formation of novo-synapses, favoring the cholinergic transmission,
and promoting neural survival. The estrogen treatment at menopause
delays the age related cognitive alterations, influences the
estrogen sensitive neuro-transmitters, regulates brain
vascularization, and protects the brain from oxidating stress. The
detection of the neuroprotective effect of estrogen offers new
pharmaceutical opportunities when it comes to redefine the estrogen
substitution therapy. Key words: neurotransmitters,
neurodegenerescence, estrogen substitution therapy, cognitive
function, motility.
-
29
ACTUALITI N PATOGENIA BOLII VARICOASE
CLAUDIA GHERMAN, DIANA SCUI, LAURA PALCU Clinica Chirurgie II,
Universitatea de Medicin i Farmacie "Iuliu Haieganu"
Cluj-Napoca
Rezumat Boala varicoas, capitol de patologie n permanent
actualitate, reprezint o entitate nozologic evolutiv. Alterarea
peretelui vascular, incompetena valvular sau trombozele venoase
profunde n antecedente cauzeaz refluxul venos, care la rndul su
genereaz hiperpresiune venoas, staz i hipoxie tisular.
Dezorganizarea celulelor musculare netede i a componentelor
matricei extracelulare a peretelui venei varicoase sunt prezente.
Sinteza de colagen este modificat, alturi de expresia
metaloproteazelor matriceale. Ali parametri biologici, factori de
cretere, mecanisme ale apoptozei par s fie implicai n patogeneza
bolii varicoase. Fenomenele inflamatorii joac rol primordial n
geneza ulcerului varicos.
Studiul concluzioneaz faptul c mecanismul patogenic al bolii
varicoase, cea mai comun manifestare a insuficienei venoase
cronice, este nc n curs de dezbatere. Un loc aparte l ocup studiul
factorilor genetici implicai n apariia bolii varicoase, intenia
find de a stabili un adevrat profil genic al bolnavului cu varice.
Cuvinte cheie: vene varicoase, remodelare parietal, colagen,
predispoziie genetic.
Introducere Evoluia istoric a cunotinelor despre varice
Boala varicoas este o boal "veche de cnd lumea", cunoaterea sa
istoric asociindu-se cel mai adesea evoluiei cunoaterii medicale. n
lucrrile lui Hipocrate (V IV .e.n.) se regsesc date despre
cunoaterea venelor i varicelor, puncii, flebotomii. Celsus (120-201
.e.n.) descrie operaia de varice n enciclopedia sa. Galen din
Pergam (164 .e.n.) a cercetat experimental circulaia sngelui i
funciile inimii i a descris tratamentul varicelor prin "discizia
subcutanat cu crlige". Opera lui a dominat gndirea n medicin peste
1500 de ani. Plutarh din Cheronea (46-120 .e.n.) descrie operaia de
varice efectut lui Caius Marcus.
Andreas Vesalius (1514-1564) elaboreaz prima antomie complex De
corporis humani fabrica n 1546, dar n care descrie venele fr valve.
Lui Fabricii DAquapendente (1603) i aparine primatul descoperirii
valvulelor venoase. Circulaia sngelui i funcia cardiac sunt puse pe
baze tiinifice de ctre William Harvey (1578-1657) (1).
Din vremurile preistorice i pn n zilele noastre numeroase studii
i lucrri elaborate de autori care i-au nscris numele n istoria
medicinii au completat arsenalul de cunotine n domeniul patologiei
varicoase, fr ca s l epuizeze.
Notiuni de ordin general. Boala varicoas reprezint o entitate
nozologic evolutiv. Varicele sunt un capitol de patologie n
permanent actualitate, datorit morbiditii ridicate pe care o
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
30
nregistreaz i complicaiilor care sunt urmate de grade diferite
de invaliditate. Diagrama elementelor importante n diagnosticul i
tratamentul afeciunilor venoase este o ntreptrundere n proporii
variabile ntre 4 elemente: etiologie, anatomie, fiziopatologie i
clinic (2). Patologia varicoas este cauzat de un fenomen de
inversare a circulaiei de ntoarcere, respectiv de refluxul venos.
Acest reflux este consecina: alterrii peretelui vascular (varicele
primare), insuficienei valvulare (variabilitate n poziie i
distribuie) sau unei tromboze venoase profunde n antecedente.
Refluxul venos genereaz hiperpresiune venoas ortostatic, cu staz
i hipoxie la periferie. Hiperpresiunea venoas cu staza se transmit
la nivel venulo-capilar, unde sub influena fluxului ncetinit are
loc un fenomen de agregare leucocitar, cu eliberare de enzime
proteolitice, radicali liberi de oxigen i leziuni ale membranei
bazale capilare. Proteine, cum ar fi: fibrinogenul, traverseaz
membrana lezat, ajung n esuturile din jur, se transform n fibrin,
apare edemul, cu scderea concentraiei de oxigen i apariia, ntr-un
final, a tulburrilor trofice. Hipoxia duce la: afectarea
microcirculaiei, modificarea permeabilitii cu edem, modificri ale
esutului conjunctiv i, n cele din urm, apariia tulburrilor trofice
(3,4).
Natura factorilor patogenici, la care se adaug capacitatea
natural de compensare a microcirculaiei, caracterizeaz aspectele
clinice i morfopatologice ale bolii varicoase. Mecanismul patogenic
al bolii varicoase, cea mai comun manifestare a insuficienei
venoase cronice, este nc n curs de dezbatere. Cunoaterea aprofundat
a mecanismelor intime de funcionare a endoteliului venos, a mediei,
a reglrii vegetative din adventice, ne ofer o imagine nou asupra
ductului venos, ne ajut s gsim explicaie i, eventual, remediu
manifestrilor clinice legate de insuficiena venoas cronic (1).
Modificri eseniale ale peretelui varicos Dei afeciunea varicoas
constituie un capitol de patologie comun, factorii etiologici care
predispun la dilataii, elongaii i tortuozitatea peretelui venos
sunt deocamdat incomplet cunoscui. Distensibilitatea peretelui
vascular este controlat de: colagen, elastin i celule musculare
netede. Studii de morfologie a peretelui venei varicoase au fost
efectuate, ocazie cu care s-a constatat numeroase modificri
structurale. Endoteliul venei varicoase este lezat sau chiar
absent. Hipertrofia intimal este datorat infiltraiei cu esut
fibros. Se constat o reducere neuniform a stratului muscular, cu
diminuarea pn la absena celulelor musculare netede. La nivelul
mediei sau adventiiei celulele musculare netede sunt distruse sau
cu morfologia alterat. Cantitatea de esut conjunctiv, la acest
nivel, este crescut, cu organizare neregulat a fibrelor de colagen
i disrupia reelei elastice din jurul benzilor de celule musculare
netede. Fibrele elastice sunt deficitare, dispuse la ntmplare, cu
pierderea reelei normale (n form de zbrele) de elastin-colagen.
Diminueaz proporiile celule musculare netede-colagen i
elastin-colagen (5).
Laminina, molecula de adeziune intercelular 1 (ICAM-1) i
molecula de adeziune a celulelor vasculare 1 (VCAM-1) sunt crescute
la nivelul peretelui venei varicoase (6). Dezorganizarea celulelor
musculare netede i a componentelor matricei extracelulare a
peretelui venei varicoase au fost demonstrate (7). Dac alterarea
matricei extracelulare s-a stabilit c este implicat n apariia
venelor varicoase, s-au aprofundat studiile legate de acest
capitol.
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
31
Rolul remodelrii parietale n apariia dilataiilor varicoase
Studii numeroase au artat c remodelarea parietal anormal apare la
nivelul venei varicoase(7) i c aceste alterri ale peretelui venos
pot fi privite ca i cauz primar a varicelor (8).
Aproximativ din proteinele corpului sunt reprezentate de
colagen. Protein structural majoritar, colagenul formeaz cabluri
moleculare de for la nivelul: tegumentului, tendoanelor, pereilor
vasculari, structurilor de rezisten care susin organele interne,
care conecteaz esuturile moi la schelet. Colagenul are o structur
de triplu helix stabil, constituit din secvene de aminoacizi.
Fiecare al 3-lea aminoacid este glicina, iar din restul majoritatea
sunt prolina i hidroxiprolina. Pn la ora actual au fost izolate 19
tipuri de colagen la om, primele 5 tipuri fiind mai frecvent
ntlnite.
Colagenul III, protein majoritar a vaselor sanguine i
tegumentului, care asigur mpreun cu elastina proprietile elastice
ale acestor structuri, prezint un nivel sczut la nivelul pereilor
venelor varicoase. Sinteza de colagen de tip I, III i V a fost
cuantificat n culturi de celule musculare netede venoase. Proporia
de colagen de tip III n heterofibrilele compuse din colagen de tip
I, III i V a fost calculat. Cuantificarea sintezei de colagen n
culturile celulare denot o proporie semnificativ sczut a
colagenului de tip III. Scderea produciei colagenului III, dar nu i
expresia sa mARN, care rmne nemodificat, la nivelul celulelor
musculare netede ale venelor varicoase, induce o supraproducie de
colagen I prin expresia mARN i sinteza proteinelor de strutur a
colagenului de tip I crescute la nivelul mediei venei varicoase.
Nivelul de hidroxiprolin a fost gsit crescut n vena varicoas, ceea
ce sugereaz o cretere a coninutului de colagen. Aceast cretere a
colagenului n esuturi este asociat cu o cretere a expresiei mARN a
colagenului de tip I, n timp ce expresia, stabilitatea i
funcionalitatea mARN-ului colagenului de tip III nu este modificat
(9,10,11).
Colagenul III nu este degradat n interiorul celulei prin
mecanisme implicnd proteaze i, de asemenea, el este normal maturat
i secretat nafara celulei. Colagenul III este degradat n spaiul
extracelular prin mecanisme implicnd metaloproteaze matriceale
secretante (sMMP). Colagenaza i gelatinazele par a nu fi implicate
n degradarea colagenului III, pe cnd stromelizina (MMP3) ar fi
implicat cel puin parial. Degradarea colagenului III prin mecanisme
implicnd metaloproteazele sMMP, cu posibila implicare a MMP3,
explic scderea acumulrii de colagen III fr modificri de mARN, cu
consecine funcionale la nivelul venei varicoase legate de reducerea
elasticitii (12,13,14).
Alte studii arat coninut semnificativ crescut al MMP1
(colagenaza), MMP2 (gelatinaza A), MMP9 (gelatinaza B) doar n
peretele venelor varicoase complicate cu tromboflebit, pe cnd
coninut crescut al MMP3 (stromelizina) este ntlnit n mod obinuit n
peretele venelor varicoase (15,16).
Factorii de cretere sunt cei care induc producia de MMP3 n
celulele varicoase. Factorul de cretere vascular endotelial (VEGF)
este descris a fi inductorul expresiei de pro-MMP3 i un activator
al expresiei activatorului de plasminogen tip urokinaz (u-PA) i
activatorului tisular de plasminogen (t-PA). Producia majoritii
factorilor de cretere nu este modificat, cu excepia creterii
sintezei de VEGF (17,18,19).
Inhibitorul activatorului de plasminogen 1 (PAI-1) joac rol n
limitare migrrii celuleor musculare netede induse de flux i astfel
poate constitui un mecanism important n controlarea procesului de
remodelare vascular. Producia total de (PAI-1) este crescut, la fel
i producia i activitatea t-PA (20,21).
Cantitatea de fibronectin este sczut n compartimentele peri- i
extracelulare. Fibronectina este substratul cu afinitatea cea mai
mare pentru MMP3. Fibronectina i colagenul sunt degradate prin
acelai mecanism dependent de MMP. Interaciunea ntre colagenul I,
III i fibronectin suntb importante pentru polimerizarea
heterofibrilelor colagenului, cu repercursiuni asupra
ultrastructurii i elasticitii tisulare (19,22).
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
32
Factorul de cretere transformare beta 1 (TGF-beta1), factor
cunoscut a menine balana ntre apoptoz i disfuncionalitatea celular,
s-a demonstrat a avea un rol pivot n remodelarea vaselor pe
parcursul patogenezei dezordinilor vasculare, n infiltrarea de
monocite/macrofage i pierderea celulelor musculare netede.
Sintetaza inductibil a oxidului nitric (iNOS) pare, de asemenea, a
juca un rol n patofiziologia molecular a afeciunilor venoase
cronice (18).
Expresia enzimelor citocromului P450 i a cicloxigenazei (COX),
investigate prin tehnici de RT-PCR, atunci cnd este crescut este
implicat n perturbri ale tonusului vascular, contribuind la
dezvoltarea patologiei varicoase. Modulatorii lor pot fi potenial
activi n tratamentul insuficienei venoase cronice (23).
Catepsina D, proteaz lizozomal care degradeaz intracelular
materialele nconjurate de membran, joac rol esenial n iniierea
procesului de: distrucie efectiv a peretelui venei varicoase,
eliminarea trombilor din varicoflebit, distrucia cutanat i apariia
ulcerului varicos (24). Integritatea tisular normal este mediat
prin apoptoza intrinsec (moartea celular programat). Toi anticorpii
antiapoptoici testai au detectat o semnificativ diminuare a
celulelor imunoreactive n seciunile efectuate din media venelor
varicoase comparativ cu venele sntoase. Acest fapt dovedete o
dereglare a mecanismelor celulare ale apoptozei n varice (19).
Dilataiile apar datorit subierii i slbirii peretelui venos,
incompetena valvular prnd s fie mai degrab secundar dect primar.
ntruct colagenul de tip III este implicat n elasticitatea tisular,
aceasta ar fi o explicaie a distensibilitii anormale a venei
varicoase. Acest defect n sinteza de colagen III este generalizat n
esuturile care l conin, argument care este n favoarea ipotezei
alterrii genetice a proceselor de remodelare la aceti pacieni
(11,25).
Modulri fenotipice ale celulelor musculare netede la nivelul
venelor varicoase exist, acestea fiind reproductibile i n
vitroculturi. Prin reacii de polimerizare n lan (RT-PCR reverse
transcription-polymerase chain reaction) s-au obinut diferite
profile ale expresiei mARN cu scopul de a stabili cauza
numeroaselor schimbri n expresia proteinelor decelate n peretele
venelor varicoase primare. Clonele de ADN complementar (cDNA)
izolate se constituie n markeri utili ai diagnosticului genetic al
venelor varicoase primare, aceste gene fiind implicate n codarea
proteinelor structurale.(Kim DI) S-au izolat astfel 3,063 clone de
cDNA, 82 de gene care codeaz proteine structurale ale matricei
extracelulare, citoscheletului sau miofibroblastelor precum:
colagen, elastin, tropomiozin, factorul de cretere i transformare
indus de gena 3 (BIGH3), actin, actinin, tubulin, lumican, versican
(24,26).
Aspecte eseniale ale ulcerului varicos Fenomenele care trebuiesc
luate n considerare atunci cnd se elaboreaz noi teorii ale
patogenezei, eseniale n tratamentul ulcerului varicos, au ca
element de baz inflamaia, ca reacie biologic general (27). n
insuficiena venoas cronic permeabilitatea vascular este modificat.
Spaiul extravascular este invadat de hematii ce vor secreta
hemosiderin, molecule protidice i complexe lipidice. Toi aceti
produi vor fi degradai. n concordan cu legile biologiei resorbia
produilor degradai poate fi efectuat pe calea reaciei inflamator
celular de faz acut (leucocitar) i cronic (macrofagic). Este de
presupus c principalul semnal al activrii leucocitare este
acumularea produilor de descompunere sus menionai, mai degrab dect
hiperpresiunea care, n formele nonocluzive ale insuficienei venoase
cronice nu poate fi cuantificat numeric. Cauza primar a tulburrilor
trofice const n permanentizarea fazei acute celulare a reaciei
inflamatorii de aprare, datorat prezenei nontranzitorii a
factorilor lezionali. Triada inflamatorie: vascular, celular, faz
reparatorie, n corelaii diferite se succede ciclic, n permanen,
formnd la nivelul ulceraiei un sistem neobinuit care interfereaz cu
procesele de vindecare, perturbndu-le (27,28).
-
Clujul Medical 2006 vol. LXXX - nr. 1
33
Contaminarea bacterian i colonizarea leziunilor trofice apar
negreit, dar aceste procese prezint un caracter secundar dup
alterarea funciei barierei tegumentare, cu apariia soluiilor de
continuitate la nivelul pielii. n acelai timp diferite procese au
loc la nivelul ulceraiei, cum ar fi: exsudaia seroas sau
sero-purulent, formarea de depozite fibrino-necrotice, a esutului
de granulaie, precum i apariia insulelor de epitelizare. Din punct
de vedere conceptual acest stadiu poate fi privit ca i un sistem
nchis marcat de o activitate pseudohaotic. Pentru a obine
vindecarea, acest sistem care se autoreproduce trebuie ntrerupt,
transformnd astfel ulcerele trofice ntr-o plag care urmeaz liniar
fazele succesive ale vindecrii (28).
Concluzii
1. Boala varicoas reprezint un capitol de patologie frecvent
ntlnit. Etiologia exact i fiziopatologia afeciunilor varicoase rmne
neclar.
2. Venele varicoase reprezint o arhitectur mai dezorganizat dect
venele sntoase, avnd un numr crescur de fibre de colagen i o scdere
a densitii i dimensiunii fibrelor elastice.
3. Remodelarea anormal la nivelul venelor varicoase duce la
alterri parietale venoase, care pot fi privite ca i cauz primar a
varicelor.
4. Distensibilitatea anormal a venei varicoase pare a fi
consecina deficienei de colagen de tip III. Scderea colagenului III
este cel care determin creterea nivelului colagenului I la nivel
parietal venos.
5. Alterarea extensiv a coninutului i activitii unor
metaloproteaze matriceale, care intervin n remodelarea matricei
extracelulare, influeneaz proprietile mecanice ale peretelui venos
i predispune la progresia ulterioar a afeciunii.
6. Mecanismele celulare ale apoptozei sunt dereglate n varice,
aceasta putnd fi o eventual cauz a varicelor primare.
7. Predispoziia genetic la boal varicoas este susinut de prezena
n numr crescut a cazurilor cu varice n familiile majoritii
pacienilor. n acest context, este impetuos necesar a identifica
anomaliile genetice responsabile de apariia acestei afeciuni, cu
stabilirea unui profil genic. Bibliografie
1. IVAN V, IVAN C: Varicele membrelor inferioare. Terapie
chirurgical, Ed. Brumar, Timioara, 2004.
2. KISTNER RL, EKLOF B: