IAPORAN HASIL FENELlTlAN FUNDAMENTAL I1 PERUBAHAN STRUKTUR SITOSKELETON BERBASIS MIKROTUBULUS DAN ULTRASTRUKTUR OOSlT PASCA KRIOPRESERVASI DENGAN METODE VITRIFtKASI Ole h Dr. Ir. Sri Wahj~n~ingsih, MSf. Dr.lr. M.Sasrnko Djati,MS Dibiayai sleh Direktmt Penelitian dan Pengabdian Kepada Wf&syaraW Dengan Swat Perjanjian Pelaksanaan Hibah Penugasan Penelitisrn Desentralisasi Momor 0 1 ?!SP2fllPPID.~Mfi1112007 Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi 'Departemen Pendidikan Nasi~nal UNIVERSITAS BRAWlJAYA PESEMBER 2007
27
Embed
I.repository.ub.ac.id/11974/1/020800495.pdfI. Judul Penelitian : Pmubahan Stwldur Sitoskeleton Bwbasis MikrotubuCus dan UKraetruktur Oosit Pas= Kri~raservasi Dewan Metode ViWfiks t
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
IAPORAN HASIL FENELlTlAN FUNDAMENTAL I1
PERUBAHAN STRUKTUR SITOSKELETON BERBASIS MIKROTUBULUS DAN ULTRASTRUKTUR OOSlT
PASCA KRIOPRESERVASI DENGAN METODE VITRIFtKASI
Ole h Dr. Ir. Sri Wahj~n~ingsih, MSf.
Dr.lr. M.Sasrnko Djati,MS
Dibiayai sleh Direktmt Penelitian dan Pengabdian Kepada Wf&syaraW Dengan Swat Perjanjian Pelaksanaan Hibah Penugasan Penelitisrn
Desentralisasi Momor 0 1 ?!SP2fllPPID.~Mfi1112007 Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi
'Departemen Pendidikan Nasi~nal
UNIVERSITAS BRAWlJAYA PESEMBER 2007
I. Judul Penelitian : Pmubahan Stwldur Sitoskeleton Bwbasis MikrotubuCus dan UKraetruktur Oosit Pas= Kri~raservasi Dewan Metode ViWfiks t 2. Ketua PenelitF a.Nma : Dr. Ir. Srf Wahjuningsik,MGi b. Jenis kelarnin : P m p u a f l c.NIP : 131 759 598 d .ParrgkatlGabngan : PernMna /lV-A e.Jaba2an hngslnnal : Lelstor; Kepalal f.Juntsadf akultas : Praduksi TernaWPetemakah g .Perguruam Ting~i : Urriversitas Brawijaya 3. Jurn1.a Tim Peneliti : 2 orang 4. Lokasf hneliiian : Laborahdurn Reproduksi T-mak Fapet W-rikbpaw
dan Biolagi MslekirIer Eijlrmtm 5. K e r j a m dmgarr Institusi lain a. Warn Instans1 - 6. Masa P d i t i a n : 8 bukn 7. Bhya yen9 diwukan : Rp 24.0W.000 (duapduh empat juta rupim)
PERUBAHAN STRUKTUR SITOSKELETON BERBAStS MIKROTUEULUS DAM ULTRASTRUKTUR OOSIT PASCA KR1OPRESERVASI DENGAN
METODE VlTRIFiKkI
Sri WahjunCngsih dan Sasrnlto Djati
Tujuan perreMan dalah mengkaji uitrastnrhr olosit pas= vitrifikasi rnenggunakan konsmtmsi EG 30 Oh dqn lama papawn 8 medt menggunakanl TE.M (Transmisi EtMron Mikmkop). AnaJisa dat4 smra dwkriptlf. Hasil penelitian menunjukkan -sit hasil 4tMkasi rnempunyai =ria pdusida yang abnormal (fraktur), rnernbran plasma lapis gartdb mengalami ILis, bebermpa Wir korteks mengalami degenemsi dengan demjat rang yang leterlihal dan perpindahan butir kmteks di ruang psrivielin. Kesimpulan dari penelitian Ini adaleh terdapat penlbahan ultrasttwktur pada i t h v;mkasi mnggunakan EG 30 74 ctengan lama pqparan 3 menit. Keywords: V ~ k a s ~ , u ~ ~ r I ~ i t hmbing
THE CHANGE OF CtTOSCELETON STRUCTURE BASED ON MICROTUBULUS AND OOCYtE ULTRASTRUCTURE AFTER
CRYOPRESERVATION USING VtTR1FICATION METHOD
The aim af this research far the second year was to nnaliiped wltm~dufal d cryop~nred czooyte using vitrification method by Twnsmissi~n Electlrone Miomscope UEM). The results of the research showed that cryapresenred mcyk using vitrification had ultrastructural change :mna frastUre, lysSs of membrane plasm, chamge d wr@aC granule position to per vit&in space and degeneration of mttical gmnub. The condusbm of ,this research was that vitrification use 30% EG and the time af exposum during 3 minutes caused ultrastructural &aflge in goat w@e Keywords: WWlcation, ~ISrastructural, goat mcyte
Pvji dan syukur .Icehadid Allah SVVT karma b e h t rahmat dan
k,ar~niaNYA, ,pbksanaan Ipemlitian dan plembwtan laporan penelithn
Fundamental h h u n prtama ini dapat did-ikan. Petaelitian ihi dibiayai dengan dana dari Direfdaraf .i endera1 Pendidikah
Tinggi, Departemen Pendidkan Nasionai, Kontrak: Nornor: Surat Perjanjian
Pelaksanaan Wibah Penugasan Penelitian Des~~ralisasi Nomor
01 ?1SP2HIPP;tDPZMIl'IlI2007
Pa& kesempatan ini kaml menyampalkan tex3ma kasih kepada yang
terhomnat: 9. Dimktorat Jenckmi Pendid;ikm f inmi, Departemen Pdidikan bfasidnd,
2. Rekot Uniuersltas Bmwijaya
3. Ketua lLmbaga PenefKbtr Unibraw
4. Dekan lFakulhs Peternaka Unibraw
5 Kepala dan gtaf Laboratorim TEM dan Hisiologi bboratarim Bjolpgi
Maiekufe~ Eiijkman, Jakarta
6. Smua pihak ymg klah mwnbsrikan rekomendasi, menyetyjui dan membantu
pelaksanaan serta penyusunan laporan peneiitiw mP. Sernoga basil penelaim ymg ditrsangkan ddam lapran ini bemanfaat
bagi pihak-pi hak yang mmerfukan.
Mabng, 3 DesmWr 2007
Tim Peml'hi
DAFTAR IS1
H A M A N PENGESAHW RFMGKASAN PRAKATA DAFTAR IS1 DAFTAR GAMBhR MI3 I. PENDAHULUAN BAB 11. TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Kriopmrvasi Ooslt ~Mesaggunakan M W s viiflbsf
butit but& krsusun m r a soliter rnaugun berkdampok, namun mengalami
degenerasi. Begftu pula dengan organel-organd la imp seperki mItrrlc~ndiia
dan badan golgi tampak mengolami degenemsi. Butir-Wr sisa organel yang
rnemgalarni thgenemsi 8hm&ar di &jam sitqtlagma. Kenrsakan otgeheIl
ternbut metryerupai kerusakan yang terjadi 1p;ldzi sosit sapi tahap Mt-ll akibat.
prosles pembekuan yang diduga kerllsakan tersebut didkibatkanl oleh kristai es
flng W m t u k (Sun, 1996). FaMor lain yang dapat menpbabhnl tefladnya
kewsakan adalah terjadinya deWm5 baik daci swspensi media intra $an
ebkawluhr seflingm oosit mengalami pengkerutan mau pun pmbengkakan
(swelling). Strakgi yang dgunabn ,~rltuk utltuk menghindari tokeisitas larutan
vitrifhsi adaldh memperpeek waldu pemaparan dengan ta~ubn. Marnunjib
waMu perriaparan iellalu pmdslr, m&a wk#rap~h kdoprotemn tidak akup.
sehingpa es intrabeitiier tnasih dapdt be&enikrk. Olah karma & W u
gsJnapar.mn opumal bntuk kebrhmilan ~tblflkasi~ diperluirran sebagai batran
pdimhngan untuk men~umngi bkisitas ddh mbrtjaga agar fidak t8rb0ntUk
kdstai BS intmwluler.
. - - - A , ' - % * _ - - .
- - ,4( - p - - - 1 , 3 : .L = & I 1
I .. .. 11: s7- .-3-53-- .- ;5<-# : . .*&- I- t ,*, - . I*: .$;=v ,.& 1,
VI. KESllHPLlLAW DAN SARAN
6 Kesim pulan
Terdapat perubahan ultrastfulrtur pacia omit Mt-ll setelah vitrifikasi
rnenggtlnakan EG 38 % dengan lama paparan 3 menit. Fembahan ulfrastfuktur
yang terjadi ;addah ahormerlitirs mna lpeiusida,membmn8 piasma, perpindahan
wisi wta degenerasi dari butir-butit korteks
6.2. Saran
Untuk mndapatkan analisa yang akurat tentang u!iTasbuktur omit hasit
vitrifikasi dieerankan mena&& jwmlah mpel
r P&u dikaji IaiR lanjd mkmbme dugaan tetjdinya~ aibnomslMs m a
,p#lusida pada oosit basil vitrifikasi
Acker,J.P. and Lmksley, E.M. 2003. Pr&Wve effect of inlmceliular ice during f~:8e&ld ?. Cryobidogy 46 : 197-202
Djati, M-S,, 1999. Plengaruh suplmentasl PMSG dm hCG pada proses fertilisasi in vitro dan kultur klon embrio sapi dertgan IQF-I . Diseriasi hal 25. Program Paswsarjaina lnstitut Pertanian Bogor, Bogor
Burkin,H.R. and D.J. Miller. 2000. Zana pelltmida protein binding abillity of porcine sperm during epididyrnal maturation and the acrosomal reaefEbn, Dev.Biol. 222(1) : 99-1 OQ.
Fukui, E.J., Xh, L. and Downey, B.R., 1995, Ultrastructural changes in bovine oocyte cryopressrved by vitrification. Ctycrbhlcgy 32(2): 1 3Bt 56.
Evan,J.P. 2000. Getting spem and eggs togefYEer : Things cansenred and Wing diverged. 8iol.Reprd 63 (25: 355-300.
Fwku,E.,Liu and B.R. Downey. 1995. In vitro viability and uttrastrucrtural &awes in bovine oocytes beated with a vitrification solution. Mal.Reptob.Dev. 40 :I 77-1 85
Han, B and Bischof,J.C. 2004. birect -11 injury associated with euktic crystaIlization during fmzibg. CryobioEogy 48 : 8-21
Hochi, S., Kimura, K., lto, K, ~ i ~ b a p a ~ h l , M. 1996. Effect of nuclear stages during in vitro maturatidn on th& su,~val of bovine oocytes failawing vitdca#un. Thwiogendog), 4 8 : ~ ~ .
H a i , S., ~tljimoto,~., and Oguri, N. ?fW. Yibility of immature horse oocJrtes cryttpksen/ed by vitrification. Theiogenofogy 42236
Hotdmkligil, S., Toner, M, and power, R.D. 19W. Changes in membrane integw, cytaskekl stmdum, and dewlopmenhI poterrt.iat of mudne awytes after vitrSffcatlon in ethylene gfycol. Biatogy lRepro$udon. 55:IBl-168.
Hmurni, T. 2001. Reproductive Biology ahd %fotechnoiogy, Japan Int@matlanal Coopemtion Agency. fndanesia.22-27
HyW, P., Vajta, @. and Caliasen, H. 2041Q. Vitrification of bovine oooytes with the open pulled straw method : Ulfra-structural consequences. MoI. Reprod and Dev 56~80-88
Kasai, Mi 2802. Advances En the ~ryopresewatiorr of rnarnrnafian -8s and embryos: Development of ultrarapid vitrification. Reproductive Medleitle and Bidogy. I 1 9 . http:l/www. blaclwell-synergy .corn/ IinksldoillO.1 MWj.1445781.2002.~00OLP.
Kasai, M. 1996. Simple and effiier'tt methods for vitrification of rnamalian embryos. Anirn. Reprod. Sci 42:67-75.
KUbota, C., Yang, X., Dinnyes, A,. Todoroki, J, Yqrnakuchi, H, hlkushita, K, Inohae, S, Tabara, .I. 1998. In vitro and 'In vivo survival of frozen- thawed bovine aocytes after IVF. nuclear tran$&r and parthenogenetic aEtSvatiun. Mu1 Reprod. And Dev 51 :281-286.
Kuwayama, M. and Kata, 0. 1999. All-round v'hifmtian methods for human oocytes and embryos. Kata Ladies Clinic. Tokyo f fN-OQ23, Japan.
lane, M-B,, Bavister,B.D., Lyons and Forest, K.T. 1999. Containerkss viprificatiun of mammalians eocves and embrvas. htfp: t lw, biotech. nature.com,
Leuni, G., Boglioli,L., bedinguer, F., Rasati, I., Pintus, P.P., bdda, S., Naitana, S. 2002. Defined media for vitrifidon, wdttnlhg and rehydration : effects on pbst-thaw ,protein synthesis and vi&itIty of in vitro derived wine embryos. Cryobjelogy :2W212.
Men, H.. Mofibon, R.L., Parrih, J.J., and Rutl&@, J.J. 2003. degeneration of cryopmenred bovine oocytes via apoptdsb during subquenf culture. Cryobiol~y 47 : 73-81. -
Otui. T., Yarrlam~b, K., Kqarne,'N., TachikaW, S. and Suzuki, T . 1998. Cryopresenratian of mature ,bovine by Yitrifidtion in straws. Cryobiobgy 37 : 73 -85
Shaw, J,M!, QranWnachai. A. and Trounspn, A.O. 2Q00. Fundmental cryclhiblugy of rnarmalian oocykw and wadan tissue. Tkriqenoiogy 5%. 59-72.
Swn,Q.Y., Yang, Q.Z.,Liu, Q.Y., Feng, H.L. and Qin, P.C. 1996. Cryopresenratians df bovine oocytes matured in uitro, Thelriogsndogy 42:329.
TriwulanningsR, E. 15397. Pembekwn ernhrio derrgsn bwbagai IcrbpmWcfan dan met&e pambekuan. Prosiding Seminar IUasionaI Petemelcan Veteriner. Balai Pehelitian Temak. Bogor
Vajta. G. 2000. Vimcation of bovine mcybs and enatstyo. Embryo Technalogy CemMr, Danish Institute af Prgricultutql Sciences, Denmark
Wahjuningsih, S dan Qati, M.S. 2003. K ~ ~ ~ b aosit sapi Madura untuk pelmtahan plasma numb Indanesb, Makdl'ah ssmioar Indonwia Toray Science Foundartian, Jab& 4 Pebrusri 2003.
Wahjuniilgsih, S. 2002. tn vitm maturation of bovine cwyts derived from ~opmervat ion of dlmetyi sulfoxide (DMSO), Glycerol, and ethylen glycol (IEG). Journal of Reprotech; vd. I. No. 2:9&%