Hepatitis Hepatitis Virales Virales La importancia del La importancia del Laboratorio de Biología Laboratorio de Biología Molecular Molecular Bioquímico Alejandro Kuc Servicio de Inmunología Hospital “Dr. Julio C. Perrando”
Jan 01, 2016
Hepatitis ViralesHepatitis ViralesLa importancia del La importancia del
Laboratorio de Biología Laboratorio de Biología MolecularMolecular
Bioquímico Alejandro Kuc
Servicio de Inmunología
Hospital “Dr. Julio C. Perrando”
Virus de la Virus de la Hepatitis CHepatitis C
Bioq. Alejandro Kuc
*Servicio de Inmunología
Hospital “Dr. Julio C. Perrando”
*Cátedra Virología Clínica
FaCENa - UNNE
HCVHCV
Agente etiológico de las HNANB Agente etiológico de las HNANB transmitidas por transfusionestransmitidas por transfusiones
Flia: FlaviviridaeFlia: Flaviviridae Género: hepacivirusGénero: hepacivirus EsféricoEsférico EnvueltoEnvuelto ARN (+) sc ARN (+) sc
región hipervariable
capside
Proteina de
cubierta
proteasa/helicasa
RNA polimerasa
5’ URT
core E1 E2 NS2
NS3
NS4
NS5
3’ URT
Genoma
evasión de la respuesta
inmune
Variabilidad GenéticaVariabilidad Genética Genotipo: >70% identidadGenotipo: >70% identidad
6 hasta ahora6 hasta ahora Subtipo: > 90% Subtipo: > 90% Cuasiespecie: IntraindividuoCuasiespecie: Intraindividuo
En Argentina:En Argentina:– 1a: 39%1a: 39%– 1b: 33%1b: 33%– 2a: 19%2a: 19%– 3a: 7%3a: 7%
Hepatitis por virus CHepatitis por virus C
Vías de transmisión
Vertical 5 %
Percutánea90-50%
Intrafamiliar 0-2%
¿Desconocido? 5%
Vías de transmisiónVías de transmisión
– Exposición a sangre o fluidos contaminados Exposición a sangre o fluidos contaminados
– Transmisión vertical: madre-recién nacidoTransmisión vertical: madre-recién nacido Depende de la carga viral (> 2 x 10 Depende de la carga viral (> 2 x 10 66
copias/ml)copias/ml) Aumenta en coinfección HIV-HCVAumenta en coinfección HIV-HCV Lactancia materna: no contraindicadaLactancia materna: no contraindicada
– Transmisión horizontal: exposición percutánea oTransmisión horizontal: exposición percutánea o
de las membranas mucosas al material infectadode las membranas mucosas al material infectado
Periodo de Incubación: Media 6-7 sem
Clínica (ictericia): 20-30%
Hepatitis crónica (HCV RNA>6 meses): 70-85%
Manif. Extrahepáticas: 40%
Inmunidad: No Anticuerpos protectores
Hepatitis C – Datos Clínicos
Historia naturalHistoria natural
INFECCIÓNINFECCIÓN 10 años10 años
Hepatitis crónicaHepatitis crónica 15 años15 años
CirrosisCirrosis 20 años20 años
HepatocarcinomaHepatocarcinoma
Diagnóstico de Diagnóstico de LaboratorioLaboratorio
Anticuerpos Anti-VHC:Anticuerpos Anti-VHC: – F(-) en la fase aguda y en inmunosuprimidos. VENTANA: 7-F(-) en la fase aguda y en inmunosuprimidos. VENTANA: 7-
8 semanas.8 semanas. EIA o RIA: Screening. S: 98,8-100%EIA o RIA: Screening. S: 98,8-100% RIBA o LIA: Ensayo suplementario para confirmar. E: 100%RIBA o LIA: Ensayo suplementario para confirmar. E: 100%
Antígeno VHCAntígeno VHC - mediante EIA: Acorta el período de - mediante EIA: Acorta el período de ventana en el screeningventana en el screening
RNA-VHC:RNA-VHC: Cualitativo: Puede utilizarse para diagnosticar la infección por Cualitativo: Puede utilizarse para diagnosticar la infección por
VHC en la fase aguda.VHC en la fase aguda. Cuantitativo (Carga Viral): Para monitorizar la respuesta a la Cuantitativo (Carga Viral): Para monitorizar la respuesta a la
terapia antiviralterapia antiviral
GenotipificaciónGenotipificación
Marcadores durante la Marcadores durante la infección tempranainfección temprana
HCV RNA
Anti-HCV
12
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
Infection Day 0
HCV RNA Day 12
HCV Antibody Day 70
NAT CualitativaNAT Cualitativa
Acorta el período de Ventana: baja de Acorta el período de Ventana: baja de 2 meses a 1-2 semanas2 meses a 1-2 semanas
– Importante en Bancos de SangreImportante en Bancos de Sangre– Accidentes transfusionales: 1/276.000 a Accidentes transfusionales: 1/276.000 a
1/2.000.0001/2.000.000
Control posterapéuticoControl posterapéutico Dx de Hepatitis AgudaDx de Hepatitis Aguda
NAT Cuantitativa (Carga Viral)NAT Cuantitativa (Carga Viral)
Pronóstico de evolución y respuesta al Pronóstico de evolución y respuesta al TtoTto– La carga viral basal La carga viral basal – Curva viral (4 y 12 sem)Curva viral (4 y 12 sem)
Indica el cese del tratamientoIndica el cese del tratamiento
No esta relacionada directamenete con No esta relacionada directamenete con riesgo de transmisión sexual ni nivel de riesgo de transmisión sexual ni nivel de daño hepáticodaño hepático
GenotipificaciónGenotipificación
Predice la respuesta al Tto y la duración del Predice la respuesta al Tto y la duración del mismomismo
Determina la dosis de RibavirinaDetermina la dosis de Ribavirina
Genotipos 2 y 3 responden mejor y mas Genotipos 2 y 3 responden mejor y mas rápido que 1rápido que 1
GenotipificaciónGenotipificación
Secuenciación es el Gold Standard Secuenciación es el Gold Standard Amplificación de secuencias genotípicas Amplificación de secuencias genotípicas
especificas + RFLPespecificas + RFLP– CoreCore– 5´URT5´URT– NS5NS5
Hibridación Reversa Hibridación Reversa (INNO-LiPA HCV, Innogenetics)(INNO-LiPA HCV, Innogenetics)
Serotipifiación de genotipos Serotipifiación de genotipos (MurexTM HCV (MurexTM HCV Serotyping 1 Assay)Serotyping 1 Assay)
5’
core E1 E2 NS2 NS3 NS4 NS5
3’
Hepatitis C OcultaHepatitis C Oculta
HCV erradicada: HCV RNA (-) >24 sem HCV erradicada: HCV RNA (-) >24 sem de terminado el Ttode terminado el Tto
Pero se observo que 40-45% de estos Pero se observo que 40-45% de estos pacientes pueden tener HCV RNA pacientes pueden tener HCV RNA detectable en biopsias Hep o Celulas detectable en biopsias Hep o Celulas mononucleares de Sangre circulantemononucleares de Sangre circulante
Hepatitis por virusHepatitis por virus cc
– Profilaxis. Profilaxis.
No se dispone de No se dispone de vacuna vacuna
(gran variabilidad (gran variabilidad genómica del virus)genómica del virus)
No se dispone de No se dispone de gamma globulinagamma globulina