HbA1c och Hb-varianter - Start | Equalis Landin_HbA1… · · 2013-04-301,40 AA (234) SA (132) EA (70) CA (22) DA (24) ot ... Hb-varianter förekommer i ungefär 1 prov av 200 ...

HbA1c och Hb-varianter - erfarenheter och praktiska råd

Britta Landin

Överläkare, docent

Undantag 1:

HbF – ingen Hb-variant

HbF är per definition inte någon Hb-variant, men väl en Hb-fraktion.

HbF saknar beta-globinets N-terminala valinrest, dvs HbA1c kan inte bildas.

Jonbyteskromatografiska metoder signalerar förekomst av HbF och ger oftast

adekvata HbA1c-resultat om HbF är måttligt förhöjt. Se specifikation för resp metod!

Immunkemiska metoder och affinitetsmetoder mäter HbA1c respektive glykerat

Hb i förhållande till total-Hb. Mätningen av total-Hb inkluderar HbF. Nämnaren blir

då för stor, resultatet falskt lågt. Felet blir större för en immunkemisk än en

affinitetsmetod.

Endast Tosoh uppges kunna mäta HbA1c vid de HbF-nivåer som gäller för de

första 3-4 levnadsmånaderna.

RBC-omsättningen är ändå ökad neonatalt.

HbA1c är inte relevant för nyfödda !

Equalis 2013-04-10 Britta Landin

Erfarenhet från KUL

Av 1000 prover visar 3-4 st tecken till heterozygot förekomst av HbS, HbE, HbC

eller HbD, dvs har en topp i Variant Window med BioRad Variant Turbo 2.0.

SA

EA

CA

DA

Övriga

SA

EA

CA

DA

Minst 5 % av proverna innehöll annan Hb-variant än HbS, HbE, HbC eller HbD.


Heterozygot förekomst = bärarskap

De tillstånd både tillverkare, NGSP och vi (idag) diskuterar är okomplicerad

heterozygoti för resp Hb-variant.

Hb-variant alltid < 45 % om heterozygoti !


Undantag 2:

Tillstånd med mer än heterozygoti

Homozygoti:

Enbart Hb-variant, eventuellt förhöjt HbF, avsaknad av HbA0.

Htz Hb-variant + htz beta-thalassemi:

Högre andel Hb-variant än vid heterozygoti, oftast förhöjt HbF.

Alternativen ovan kan inte särskiljas genom HbA1c-kromatografi. Patienten kan ha

en allvarlig hematologisk sjukdom eller vara helt frisk. RBC-omsättningen kan vara

normal eller kraftigt ökad.

Föreslå utredning med Hb-fraktioner (ev. följt

av genotypning) i dessa fall ! Equalis 2013-04-10 Britta Landin

Kan leverantörernas bild bekräftas ?

-

0,20

0,40

0,60

0,80

1,00

1,20

1,40

AA (234) SA (132) EA (70) CA (22) DA (24)

Kvo

t

Kvot BioRad Variant Turbo 2.0 / DCA 2000 medelvärde + SD


Utdrag från www.ngsp.org

Method

Interference

Hb C trait Hb S trait Hb E trait Hb D trait

Axis-Shield Afinion No No No No

Bio-Rad Variant II Turbo 2.0 No No No /Yes No

Roche Cobas Integra Gen2 No No No No

Sebia Capillarys 2 Flex Piercing No No No No

Siemens DCA 2000/DCA Vantage No /Yes No No No

Tosoh G7 Yes /No No Yes No

Tosoh G8 No No Yes No

Skuggning indikerar testning för >7 % avvikelse vid 6 och 9 % NGSP, dvs ”strikt” kriterium Equalis 2013-04-10 Britta Landin

HbS, HbE, HbC, HbD eller….?

Samma kromatografimönster på BioRad Turbo 2.0 men ändå annan Hb-variant, t ex:

Hb G Copenhagen

Hb Karlskoga

Hb Q Iran Hb Vila Real

Hb Russ

Hb Savaria

Hb D Iran

Hb Ube-4

m fl

Ratio

BioRad Turbo 2.0 / DCA Vantage

för dessa varierar mellan

ca 0,7 – 1,4


Ser man på ett prov om det innehåller HbS, HbE, HbC eller HbD ?

NEJ ! I ca 5 % av fallen blir det fel.

Finns det andra Hb-varianter att hålla utkik efter?

JA !!!

BioRad Variant Turbo 2.0 kan, utöver i Variant Window, presentera Hb-varianter som

HbA1c, P3, P4 eller Unknown. BioRads HbA1c-resultat blir då i princip alltid fel. Detta

gäller ca 1-2 prover av 1000.


Dessutom kan det finnas Hb-varianter

som knappast syns – men spelar roll !


Normalt – BioRad Variant Turbo 2.0 Hb Tacoma

”Tacomalarm” om

LA1c/A1c > 0,075

DCA 48 mmol/mol


Hb Tacoma ger falskt låga värden med BioRad Turbo 2.0

-

0,20

0,40

0,60

0,80

1,00

1,20

1,40

AA (234) SA (132) EA (70) CA (22) DA (24) Tacoma (123)


Sammanfattningsvis

Hb-varianter förekommer i ungefär 1 prov av 200

(mellan en promille och en procent).

Vissa vanliga Hb-varianter påverkar inte HbA1c

(vid heterozygot förekomst).

Det går inte att i det enskilda fallet se vilken Hb-

variant som finns i ett enskilt prov.

Hb-varianter kan orsaka falskt höga (sällan) eller

falskt låga (oftare) resultat.

Arten och graden av interferens varierar kraftigt

- mellan olika metoder

- mellan olika versioner av samma metod


OM MAN ANVÄNDER

JONBYTESKROMATOGRAFI

Hur bör man göra?


Htz förekomst av ”Hb S, E, C, D”

Krav:

Följ tillverkarens rekommendationer.

Lägg kommentar på svaret, men sätt ingen diagnos och skapa inte oro.

(Ex: Patienten är heterozygot för en Hb-variant.)

Optimalt:

Kontrollera med annan mätprincip första gången patienten förekommer.

Avgör vilken mätmetod som kan användas.

Om annat än rutinmetoden väljs anges detta i kommentaren.

(Ex: Patienten är heterozygot för en Hb-variant som ger ett falskt för lågt HbA1c med rutinmetod

HPLC varför svaret avser mätning med immunkemisk metod.)

Se till att mätprincipen hålls så konstant som möjligt i framtiden.


Indikation på annan htz Hb-variant

Kontrollera med annan mätprincip och avgör vilken metod som bör användas.

Lägg kommentar på svaret, men sätt ingen diagnos och skapa inte oro.

Om annat än rutinmetoden väljs anges detta i kommentaren.

Se till att mätprincipen hålls så konstant som möjligt i framtiden.


Förhöjd andel av ”HbS, C, D, E” (ej htz)

I första hand: Svara inte med värde utan med kommentar.

(Ex: Total avsaknad av normalt HbA omöjliggör bestämning av HbA1c med sedvanlig kromatografisk

teknik. Med immunologisk teknik uppmäts ett värde motsvarande HbA1c på xx mmol/mol, men det är

osäkert om det är användbart som markör för glykemisk kontroll i detta fall. Undersökning av B-

Hemoglobinfraktioner rekommenderas för att kartlägga Hb-varianten. )

Om man vet att patienten är homozygot för HbE, HbC eller HbD:

RBC-omsättningen kan vara normal och ”HbA1c” mätt med immunokemisk

eller affinitetsmetod kan vara användbart. Svara med värde och kommentar.

(Ex: Total avsaknad av normalt HbA omöjliggör bestämning av HbA1c med sedvanlig kromatografisk

teknik. Med immunologisk teknik uppmäts ett värde motsvarande HbA1c på xx mmol/mol.)


Förhöjd andel av HbF

Följ tillverkarens rekommendationer.

Förhöjning av HbF av måttlig grad (1-10 %) ses ibland vid beta-thalassemia

minor, ibland vid graviditet samt vid en mängd olika sjukdomstillstånd av

varierande orsak. Bör inte rapporteras.

HbF > 10 % kan vara av klinisk betydelse även om HbA1c kan kvantiteras.

Förse därför svaret med kommentar. (Ex: Som ett bifynd ses förhöjt HbF (ca

xx% av total-Hb).)


FÖR ALLA HBA1C-METODER

Hur bör man göra ?


Lågt HbA1c - under referensintervallet

Krav:

Kan det vara HbF, dvs prov från barn <3-4 mån?

Finns kromatogram? Granska noga! Finns Hb-variant?

Kan det vara hemolys ? Kommentera (Ex: Låg halt av HbA1c kan vara tecken på ökad

erytrocytomsättning. Finns andra tecken till hemolys?)

Optimalt:

Kontrollera med annan mätprincip.


Konstigt? Misstänkt? Ifrågasatt ?

Om två olika mätprinciper, varav en jonbyteskromatografisk, ger samma resultat

är detta troligen ”rätt”.

Ett korrekt HbA1c-värde avspeglar inte alltid glukosnivån (kompenserad

hemolys? transfusion? substitution av tidigare anemi? ökad HbF-halt?) Allt detta

ger lägre HbA1c än väntat.

Det finns vissa rapporter som talar för att enstaka patienter får högre HbA1c

(”snabba glykolyserare”). Mer kunskap behövs!


Välkommen att ställa frågor!

[email protected]


HbA1c och Hb-varianter - Start | Equalis Landin_HbA1… · · 2013-04-301,40 AA (234) SA (132) EA (70) CA (22) DA (24) ot ... Hb-varianter förekommer i ungefär 1 prov av 200 ...

Documents