Top Banner
Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation. Cecile Martel, Maya Allouche, Davide Degli Esposti, Elena Fanelli, C´ eline Boursier, C´ eline Henry, Joel Chopineau, Giuseppe Calamita, Guido Kroemer, Antoinette Lemoine, et al. To cite this version: Cecile Martel, Maya Allouche, Davide Degli Esposti, Elena Fanelli, C´ eline Boursier, et al.. Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation con- trols outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation.. Hepatology, Wiley-Blackwell, 2013, 57 (1), pp.93-102. <10.1002/hep.25967>. <hal-00734262> HAL Id: hal-00734262 https://hal.archives-ouvertes.fr/hal-00734262 Submitted on 21 Sep 2012 HAL is a multi-disciplinary open access archive for the deposit and dissemination of sci- entific research documents, whether they are pub- lished or not. The documents may come from teaching and research institutions in France or abroad, or from public or private research centers. L’archive ouverte pluridisciplinaire HAL, est destin´ ee au d´ epˆ ot et ` a la diffusion de documents scientifiques de niveau recherche, publi´ es ou non, ´ emanant des ´ etablissements d’enseignement et de recherche fran¸cais ou ´ etrangers, des laboratoires publics ou priv´ es.
49

Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

Apr 23, 2023

Download

Documents

Welcome message from author
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
Page 1: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent

anion channel phosphorylation controls outer

mitochondrial membrane permeability during lipid

accumulation.

Cecile Martel, Maya Allouche, Davide Degli Esposti, Elena Fanelli, Celine

Boursier, Celine Henry, Joel Chopineau, Giuseppe Calamita, Guido Kroemer,

Antoinette Lemoine, et al.

To cite this version:

Cecile Martel, Maya Allouche, Davide Degli Esposti, Elena Fanelli, Celine Boursier, et al..Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation con-trols outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation.. Hepatology,Wiley-Blackwell, 2013, 57 (1), pp.93-102. <10.1002/hep.25967>. <hal-00734262>

HAL Id: hal-00734262

https://hal.archives-ouvertes.fr/hal-00734262

Submitted on 21 Sep 2012

HAL is a multi-disciplinary open accessarchive for the deposit and dissemination of sci-entific research documents, whether they are pub-lished or not. The documents may come fromteaching and research institutions in France orabroad, or from public or private research centers.

L’archive ouverte pluridisciplinaire HAL, estdestinee au depot et a la diffusion de documentsscientifiques de niveau recherche, publies ou non,emanant des etablissements d’enseignement et derecherche francais ou etrangers, des laboratoirespublics ou prives.

Page 2: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation
Page 3: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� �

��������AB��CDEF�C����������AB��C���B����C��B��C�B�������A�C�����A��C

�����A��B�C�����C���CA������AB��C

�����C�F�� !"#C$#C�A�ACF!!%&�'

�#CEA(��CE �!)C �*%��)

$#C ���AC+F, !!)

-#C�.���C

/%&��) �0#C�.���C' ,�1

2#C3���C�'%*), F&

�#4#C�������C�F!F�)�F

-#C����C��% � �

5�"$#C

F�B���BB�C! �%), $6#C�AB�����C/� ,, �"6C

C

���� ������ ABCDE� F����� F����E� A���������� ���������E� �!�"��� ��� �#��$�!��E� %� ���� &��'�� ("�$���E�

(#)����*��"���*�(����E� ���!�E��

+�� ������A�,,-E�A���������� ��� ���������E� �����A��������� �����E�./0���"� ���"� '�1����E� �-E� ������� ���"�

2��""����(1�������E�2�""�3��4E� ���!�E�

5�� ��������� (#��"��� 6��#����E� A�� %+%5� (���E� �7��0�� 8(�E� A �� ���� �!���!��� �#��$�!����7���� ���

'�1"19�7������%E��������(#��"��� "�#��"����'���-�-D�E�1��0�""���E� ���!�E�

-��:�0����$���1���� ���1"19���6�����"�����8$������"�E�A��������;���9"�����������'���E�8"�1�1�1E�'���E����"*E�

%�� ������ � �� �-�E� A���������� ���������E� �!�"��� ��� �#��$�!��E� %� ���� &��'�� ("�$���E� (#)����*��"���*�

(����E� ���!�E��

C�����8E�A���5�D��!�"��E��8���<E�&1�*����&1���E� ���!�E��

B��A��������������=$��E��=$��E� ���!�E�

>�������E�A>->E�5D�����(�"$�����:��$1�"���E�2�""�3��4E� ���!�E�D������1"1$�!���"��41�$E����������6��������1���*E�����""1�������!#��!#���E�2�""�3��4E� ���!�E��,��(�����������!#��!#������(1���"����E��%��������"?�!1"��������!���E������E� ���!�E������/"�����'�1"19��E�./0���"����10����6�1�9����1$0��1�E�8��.�E�+,�����F��"��!E������E� ���!�E��+��A����������������:��!�����E� �!�"���������!���E��%��������"?�!1"��������!���E������E� ���!���@�A��#��������1��!1����#1��#�0�

C

C

C����BCBB��7C2:8(�0#1�0#1�*"���1�CC

C���8����A�$��1!#1�����E�2:8(E�6�B5E�"�01�1��!��*E������1���

C

F������C��������������7� � � �:��(��#������'������E�������ABCDE�F�����F����E�A�������������������E�%�

����&��'��("�$���E�D++D,�(#)����*��"���*�(����E� ���!�����"��55���-C�>5�%B�%B��� ����55���-C�>5�%-�B%�����

$��"��!��#��������������3��C��0����4�C

C

C

F����(AB���7�� �8� E��010�1��������!��9�4�!�1�D�8��E�����������!"�1����������"1!���D�(�

+EE�!�"!��$D�(�8E�!*!"1�01�����8D�(*��!E�

!*�1!#�1$�� �D� :�:�E� ���1���$� -E-F�����1�#�1!*����1���"�����+E+F�����"41����D� ��$E� $��1!#1�����"� ������

$�$������01������"D� 8E�4���*��!���D�6�B5E�9"*!19����*��#����G������5D�. :E�#�9#�4�������D�(E�$��1!#1�����"�

!1$0"��D��E�$��1!#1�����"�$�$������0��$����"�H���1�D��8 F:E��1���"!1#1"�!�4���*�"������������D��:E��1��

����D� <E� 1����� $�$�����D� ��5BE� �#1�0#1��1������� 5� G�����D� ��E� 0��$����"��*� ��������1�D� ���E� 0��$����"��*�

��������1�� 01��D� ���#�E� 0#1�0#1�*"����� �#��1����E� ��2:8(E� 0#1�0#1�*"����� �1"��9����0������� ���1�� !#����"D�

�<�E� ���!����� 1�*9��� �0�!���D� �:E� ��������� �������1�D� �#�E� �#��1����D� �� E� ��$1�� ��!�1���� 4�!�1�D� 2:8(E�

�1"��9����0����������1��!#����"D�I1��E�I1��$��������

C

C

C

C

8""����#1���#�����1�4����!��"�!1�4"�!��14�����������1���!"������

Page 1 of 47 Hepatology

This article has been accepted for publication and undergone full peer review but has not beenthrough the copyediting, typesetting, pagination and proofreading process which may lead todifferences between this version and the Version of Record. Please cite this article as an ‘Accepted Article’, doi: 10.1002/hep.25967

Page 4: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� +

F/���F��C�

�1���"!1#1"�!� �����1���� ��� �� "����� 0��#1"19*� !#���!����H��� �*� 4��� �!!�$�"���1�� ���� �������

$����1"�!��"������1������1"���9����"*�$��1!#1�����"��$0���$��������"����#�0��1!*���!�""�����#��

.1J����E�$��1!#1�����"��*�4��!��1��$�!#����$����$�����"�������A���9�41���$1��"��14��1��

�"!1#1"�!� �����1���E� ����� "������ 4�1$�0��������J��#� 4���*� "����� �������E�������$�!�E�$�!�� 4��� ��

#�9#�4�����������������A��$1��"��14�"�01�1��!��*E�J���#1J��#���1�����$��1!#1�����"�$�$������

0��$����"��*�����"����������������4������01��������"���1��"�$1��4�!���1��14�2:8(E���$�$������

!#����"� �����8:.� 1������E� ��� �� !����� 14� ���"*�$��1!#1�����"� �*�4��!��1��� �#��E� ��� �1��

�"!1#1"�!� �����1���E�2:8(���#������ ����!��� �#��1�����0#1�0#1�*"���1�E�J#�!#� ��!������� �#��

��4"��� 14�J����� ���� !�"!��$� ���1�$��1!#1�����E� �������H��� �#�� 1�9���""�� �1�$������ �J�""��9E�

��01"���H���1�� ���� !*�1!#�1$�� �� ��"����� J��#1��� ����!��9� !�""� ����#�� �#��� �"�1� �$0"�4����

2:8(���H*$���!� ���� !#����"� �!��������� ��9�"���1�� �*� !�"!��$� ����$1��4���� ���� ������!��1��

J��#� 0�1���!� 0��������� 1��1���E� "�0��� �!!�$�"���1�� ���99���� �� ��0��� "�!G� 14� 2:8(�

0#1�0#1�*"���1���*�6�B5���#��$�!1"19�!�"� ���� 9�����!�$���0�"���1���0�1����6�B5� �1� ���

���01����"�� 41�� 2:8(� 0#1�0#1�*"���1�� ��� �1�$�"� !�""��� �1���"*E� 2:8(� 0#1�0#1�*"���1��

"���"� !1���"����� J��#� �����1���� �������*� ��� 0��������� ��� !1�!"���1�E� 2:8(� �!��� ��� ��� ���"*�

����1�� 14� "�0��� �1��!��*� ���� ���� 6�B5�$�������� 0#1�0#1�*"���1�� ������� !1���1"�� 1�����

$��1!#1�����"�$�$������0��$����"�H���1�����#�0��1�����1������

Page 2 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 5: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� 5

),��%E&��)%,C

�1���"!1#1"�!� 4���*� "����� �������� K�8 F:L� ��� �!!1$0������ �*� #�0��1�����1���E� �� !"���!�"�

!1�����1��!#���!����H����*���!��������!!�$�"���1��14�"�0����J��#���#�0��1!*��������!1$0"���

$����1"�!� �"������1����E� +

�� 8"�#1�9#� ��������"�� ��� ���"*� ���9��E� �����1���� !��� "���� �1� $1���

�99�������� 41�$�� 14� "����� ��3��*� ��!#� ��� #�0������E� !���#1���� ���� #�0��1!��!��1$��5��

�������9���1�� 14� 0�������� J��#� #�0��1�����1���� �#1J��� �#��� $��1!#1������ #���1�� 0�1$������

$1�0#1"19�!�����4��!��1��"����1�$�"�����E���99�����9���!�����"��1"��14��#����1�9���""�������#��

0��#19�������-����1!#1������!�����4"���!��!�""�4��������#��"���"��14�����9*�0�1��!��1�E�"�0���

$����1"��$E�0�1��!��1���������1��4�!���1��14� ���!�����1�*9��� �0�!���� K�<�L� ���� ��"�����14�

0�1��010�1��!� 0�1������%�� 8""� �#���� �"������1��� 4��1�� ��� ��!������ ��� �010�1��!� ���� ��!�1��!�

#�0��1!*���!�""�����#���

�#�� �1"��9����0������� ���1�� !#����"� K2:8(L� 1�� 01���� ��� �#�� $1��� ��������� 0�1�����

��0������� ��� �#��$��1!#1�����"� 1�����$�$������ K<L�� ��� 0#*��1"19�!�"� !1�����1��E�2:8(�

�""1J�� �#�� 4"��� 14� �1��� ���� $����1"����� ��!�����*� �1� $��1!#1�����"� $����1"��$� ���� !�""�

9�1J�#�C�E�B

���#��E�2:8(�!#����"�!"1������*�����"���"�$����$��1!#1�����"�$����1"��$E��#����*�

��!������9��#��$��1!#1�����"�������$�$������01������"�K��$L�>��2:8(�����"�1��$0"�!��������

�8:.�1������1�������#��E�0"�*�����1"�����!�""�"������1��$����1"��$�D�����!1�����1���14�"��#�"�

������E�2:8(�!���!1��������� �1� �#��0�1��010�1��!�$��1!#1�����"�$�$������0��$����"�H���1��

K�L� K41�� �����J�%LE� ���#��� ���� #1$1�1"�91$���H���1�E� ����!�� 0#*��!�"� ������!��1��� J��#�

���19��1���$�$�����14� �#��'!"�+� 4�$�"*� K��9��'��LE� ����������!"�1����� �����"1!���� K8��L�

���� ��������!1����'!"�+�"�G�� 0�1������ 1�� ���� ���� �$0�!�� 1�� !�"!��$� K(�+EL� 4"����� ���� �<��

���1��4�!���1����1���#�"���E��#�����!���1"��14�2:8(����������0��$����"��*���������1��K��L�

����������������#��$1"�!�"���$�!#����$���#��������$����2:8(���������1��4�1$����1�$�"��1���

"��#�"�4��!��1�������"�������

Page 3 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 6: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� -

.���E�J��0�1�����������!���#��E���������1��!�#�0��1!*���E��#��"�!G�14�2:8(�0#1�0#1�*"���1��

�������H���#�0��1!*���� �1�(�+E�����!������A���9� !�""�"��� ����$1"�!�"��� �00�1�!#��E�J��

��$1�������� �#��� 2:8(� "�!G� 14� 0#1�0#1�*"���1�� ��� �!!1$0������ �*� �#�� ��!������ 14�

������!��1�� J��#� �#�� ������M�#��1����� 9"*!19��� �*��#���� G������ 5� K6�B5L� ���� '!"�NF� ���

$��1!#1������������#��!����#�����$�"���1��14�2:8(�4��!��1����*�(�+E��

C

�F� �)F!�CF,EC� �'%E�CC

F��A�C�������

�$�"�� C��+� J��G�� 1"�� "���� K(%B'FMC&L� ���� ������ K'C�2�F�01�M&L� $�!�� J���� 0��!#�����

4�1$�&�������KF��6��������������"�E� ���!�L���"��-�J��G�1"��(%B'FMC&�$�!��K.��"��E�A����E�

���"*L� J���� �!!"�$���H��� �1� "��1���1�*� !1�����1��� 41�� 1��� J��G� ��41��� ����9� ����1$"*�

����9�����1����#����#��#�9#�4���1�����������!#1J������K8"��1$������0��E�2���1���E����"*L���

������B��C�9C���A�C�(��C�������

��9#�� 4�1H�����10�����J����!#1�����$1�9�"�������10�����!1""�!���������9�9��4��#��������9� ���

1��� ���������1����#������*�0�1�1!1"�41""1J���#����!1$$������1���14��#����#�!�"�9����"�����14�

�#���DB%�:�!"�����1��14�.�"���G������J����00�1�����*�1�����#�!�"�!1$$�������

����C���B�����

..F�%E��$$1���"�H����1��!��!��1���0��$��*�#�0��1!*����K��9����1���9�4��4�1$�:��8������"E�

A��������*� 14� 6"��91JE� ABL��,� ���� !�"������ ���:�� �+� K:�"��!!1O��1��4���� ��9"�O��

����$L� ��00"�$������ J��#� �,P� 4���"� �1����� ����$E� �P� 9"���$��� ���� �P�

0���!�""��M����0�1$*!��E� ��� %P� (<+� ��� 5BQ(� ��00"�$������ J��#� +� P� '�8� ���� +� $�

1"����M0�"$������K+A������1LE�������!����������#��"������������������#��!�""��J������������J��#��#���

$����$�41��5��1�5,�#���

8""���$0"���!1""�!��1�������0�1�1!1"���������!�����������001����9���41�$���1�����

Page 4 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 7: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� %

� �&!��C

�B�AB���C�����B��CA�B��AB��C�9C�B�������A�C�����A��C�����A��B�C:��*;C

��1!#1�����"�$1��4�!���1���J���� �������9����� ���$�!�� �#��� ��!1$�� 1����� ���� �1� �� 9�����!�

"�0������4�!���!*�!�������*��#��������$�����1���5�������$����1���"�!��1��$�!�1�!10*������"���

�#��0�����!��14���$��1���$�9��$��1!#1������J��#�$�������J�""��9E� "1���14� �������"�$������"�

���� <� ��0������ ��� �� 010�"���1�� 14� ��1"����� $��1!#1������ 4�1$� ������ $�!�� :+����C "F;��

�#��������!����"��"������1���!1���"�����J��#������!���������������14�$��1!#1�����"��1"�$���

8��!1$0������1�$��1!#1������4�1$�"����$�!�E�������$��1!#1��������#��������!!�"�������(�+E�

����!���$�������J�""��9�:+����C"/;�������$������0���1��:+����C"�;�����$����"�H���4���*�

�!���K 8L���������#�$����$$1���"�H���#�0��1!*����K..F�%�!�""�L��,�K���������BA��C+����C

"L��"�1�0�1�����1����$1��������������1�(�+E����99�������$�"1����#�������������!�""��:+����C

"E;�C1��1���E�$��1!#1������4�1$�������$�!��J����$1���0��$���"���1�J����E��1�#�����1�$�"�

!1�����1�� ���� �01��(�+E� ���$�"���1�� 14� ��� :+����C $F;�� ��� �#�� 0�����!�� 14� !*!"1�01����8�

K(�8LE��#��0�1�1�*0�!���#����1��14���E��#��0��$����"��*�14�!1���1"�����������$��1!#1������J���

����!��� �1� ��$�"��"*� "1J� "���"�� :+����C $F;�� 8�� �� !1���7���!�E� �#�� 0�1��010�1��!�

�����$�$������ �0�!�� 0�1����E� !*�1!#�1$�� �� K(*�� �L� J��� 41���� ��� �#�� �,,�,,,� �� B�

��0����������14���1"�����������$��1!#1������4�1$�1�����$�!��:+����C$/;���#���J����1���#��

!���� 41�� �#�� �010�1��������!��9� 4�!�1�� K8� LE� ��1�#��� 0�1��010�1��!� 0�1����� :+����C $/;��

(��0����5MB��!���������J�����1����#��!����*� 8��!!�$�"���1�������A��1����������:+����C$��

E;E���99�����9��#����#���010�1��!���9��"��9�!��!����J����1���!����������#������������1��14�(*��

�� ��� ������ ���� "���� $1���� "������ J��� �"�1� ���"*H��� �*� �$$��1#���1!#�$����*C

:���������BA��C +����C $;�� (*�� �� J��� 0����!�"��"*� ��0������� ��� 01���"� ���!��� ���� ��� �1$��

!����1"1��"��� �����E� J#�"�� "1��"��� #�0��1!*���� 0��������� �� "������ �������9� K���������BA��C

+����C $F#/L�� ��� "������ 1�������� 4�1$� "���� $�!�E� �� 0��!����� !*�10"��$�!� �������9� J���

Page 5 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 8: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� C

1�����������#�0��1!*���E�J#�"����������1��!�1���"�1��1$���1�������1��!�#�0��1!*����4�1$�������

$�!��"��������$1�����44�����!*�10"��$�!��������9�J���1����������#��������"���!1�4��$��#������

�����1��!�"�����E�$1���#�0��1!*����0���������!*�10"��$�!�"�������1��14�(*����4�1$�$��1!#1������

0�1���"*������1������!�������$�$������0��$����"�H���1���

�A����C�����AB��CDEF�C9���B���C�C�B�AB���CC

�1�������� �#��!���������"��G����J����$��1!#1�����"�0�1������$1��4�!���1������$��1!#1�����"�

�*�4��!��1�E��#��0#��$�!1"19�!�"���9�"���1��14���J������$�������#��E�(�+E�����!����#��

$���$�"��J�""��9�������01"���H���1�����5,�$�������(�8���#�������(�+E�����!����J�""��9�����

��01"���H���1�� ����1�#�$��1!#1����1�� �*0�������"*�����44�!����"*���� �#��(�+E� !#�"��1���6�8�

:+����C �FC A��C /;�� �#�� 2:8(� �"1!G��� ���1���$� -E-F�����1�#�1!*����1���"�����+E+F�

����"41�����K:�:�L������#��0��$����"��*���������1��01���K���L���#����1����RK5E%������������*"�

-�#*��1�*����#�10#��*"LS�5�0�10*"��F�K+E5E-����$��#1�*���H*"L� 0�0���H���� ��4�$������

K��%�BCL��-E� �%

�J���� "�����44�!����� ���0��������9���� ����!��1�� ���������$��1!#1������ �#��� ���

!1���1"�$��1!#1������ :+����C �FC A��C/;�� �#��� 01����� �1� �� �1"�� 41�� ���� ����2:8(� ��� �#��

��44�������"����01�����1�(�+E���1���44�������"��44�!��14��1�9��G�!��!��E��������������!"�1�����

�����"1!���� K8��L� ��#����1�E� J��� 1�������� ��99�����9� �#��� 8��� ��� �1�� ���1"���� ��� �#��

��44����!��14����01����14��1�#��*0���14�$��1!#1�������1�(�+E�K�1���#1J�L��

��$�"��� "���"�� 14� 2:8(�J���� ����!���� ��� "�����$��1!#1������ �����!��� 4�1$� "���� ���� ������

$�!��:+����C��;<C�1���#�"���E���1"�����������$��1!#1�������!!�$�"�������9��4�!���"*�$1���

(�+E� �#��� !1���1"� $��1!#1������ :+����C �E;�� 1��1���E� !1���1"� 2:8(� 0�1��1"�01�1$���

�!!�$�"����� "���� (�+E� �#��� 0�1��1"�01�1$��E� J#�!#� !1�������� 2:8(� 0���4���� 4�1$� ������

$�!�� :+����C � #C ���������BA��C +����C �;<C ���#��$1��E� �#�� �8:.� 1������� �!�����*� 14�

2:8(�J���#�9#������2:8(�0���4����4�1$�������$�!������J�����#��!�������#��0�����!��14�

Page 6 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 9: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� B

(�+E� :���������BA��C�A���C";��'1�#�(�

+E� �!!�$�"���1�� �����8:.�1������� �!�����*�J����

��#��������*�:�:��:���������BA��C+����C-;���

���""*E� J�� �����$����� 2:8(� !#����"� !1���!���!�� 41""1J��9� ��!1��������1�� 14� �#�� 0����

������� 0�1����� ���1� 0"����� "�0��� ��"�*���� ��� �#�� �����!�� 14� (�+EE�2:8(� 4�1$� "���� $�!��

��#�������!"����!�"�#�""$��G�E�������"�������1��14�10���K1L�����!"1����K!L�����������"1J�01������"��

J��#��� �*$����!�"���#���1��� :+����C-F;<�8��T�+,$2E� �#��$������44����!��J��� �#���2:8(�

0���4���� 4�1$� ������ $�!�� "����� 10����� 0��$�����"*� :+����C -#C ���������BA��C �A���C $;<C

1��1���E� ��� �#�� 0�����!�� 14� ,�%�$�(�+EE�2:8(� 4�1$� "����$�!�� "����� ��#���1�� ��$�����

�*$����!�"E� �#�� �$0"������ "���"� 14� �#�� 10��� ������� ���� �#�� 10����9� ������1�� ��!�������

��9��4�!���"*�����!1������E�2:8(�4�1$�������$�!��"�������#�������*$$����!�""*�������01����

�1�01�������������9������01������"����#��E�����+,$2E��#��!#����"�0��$�����"*�!"1����:+����C

-#C���������BA��C�A���C$;<��#��� ��99������� ��$��G��"��!#��9�� ��� �#��9����9�0�10�������14�

�#��!#����"���

DEF�C����������AB��C�BAB��C�C�B�AB�B�C�AB��B�CA��C�=������BA�C�������

���$�$$�"�E�2:8(������0�����������#����#1$1"191�����141�$�E�2:8(���1�2:8(5�J#�!#�

01������$�"��0"���#��1�����K�#�L����������:���������BA��C+����C0;�C�� ����E�J�����"*H����#��

"���"� 14� �#�� 0#1�0#1�*"���1�� 14� 0���4���� 2:8(� 4�1$� "����� 14� "���� ���� ������ $�!�� �*�

�$$��1�"1����9�J��#���������1�*��0�!�4�!�41��0#1�0#1�*"������#��K���#�L�����41���������7���

5-� G:�� ����� !1�$�9�����9�J��#�2:8(� :+����C 0FLE� !1��������� J��#� �� 0#1�0#1�*"���1�� 14�

2:8(�1��1���1��������"��#�� ��������� ��� "����$�!�������� "�!G�14�0#1�0#1�*"���1�� ���������

$�!��� ��!1��E� J�� ���"*H��� �1��"� �����!��� 14� #�$��� "����� ��10����� J��#� ������"�� 9������ 14�

#�0��1�����1��������$��1!#1�����"������!���4�1$�$�!��4�����#�9#�4��������K. :L�!1�4��$��9��#��

��44����!�� 14� ���#�� 0#1�0#1�*"���1�� ���J���� �����1��!� ���� "���� ��$0"��� :+����C 0/��#C

���������BA��C �A���C �L�� 1��1���E� 2:8(� 0#1�0#1�*"���1�� ������� !1���"����� J��#� �#��

Page 7 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 10: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� >

�������*� 14� �#�� "����� 0��#1"19*� :+����C 0/;�� �#���E� J�� �������9����� �#�� "�!G� 14�

0#1�0#1�*"���1�� ����!��� �*� 8� �����$���� ���..F�%� !�""�� ���� 41���� �#��� �#�� "1��� 14� ���#��

0#1�0#1�*"���1�� ��� ��9��4�!���� 4�1$� C� #�� �1� 5,� #�� 14� 8� �����$���� :+����C 0EL�� �1�

��$1�������� �#���������*�14�2:8(�����#��5-�G:�������������4�����*����#���$$��1�"1����9E�

�J1���$����1��"� 01"*�!�*"�$���� 9�"� �"�!��10#1������ K+:��86�L� 41""1J��� �*�

�$$��1�"1����9� J��� 0��41�$���� �#��� "��� �1� �#�� ������4�!���1�� 14� ��9#�� �01��� ���!���9� J��#�

2:8(��0�!�4�!������1����������1$��14��#�$E�J��#��#�������1�*�41�����#��:+����C0 �+;���#��

�������*� 14� 2:8(� �� �1� 5� ��� �#���� �1��"��"���""��� �01��� J��� !1�4��$��� �*� ���1"�7����

!#�1$��19��0#*� ���� $���� �0�!��1$���*� :���������BA��C �A���C -;<� �#��E� ��� �1�$�"�

!1�����1��E�2:8(����0#1�0#1�*"�����1��1���1��������"��#�������������#���0#1�0#1�*"���1�����

��9��4�!���"*�����!�����������1��!���$0"���4�1$�0�������#� ���4����!!�$�"����9�..F�%�!�""�E����

J�""�������1�����$�!����#��������"��������"��#���������!��14���"�0�������!�����9��"��9�0��#J�*�

"�����9��1��#��"�!G�14�0#1�0#1�*"���1��14�2:8(���

DEF�C�B��A�B���C��A����C�C�B�AB����

����E� �"��� ������� 01"*�!�*"�$���� 9�"� �"�!��10#1������ K'���86�L� �����"��� �#�� �������!�� 14�

��$��1���$�"��0�1����� !1$0"����� K(L� !1�������9� 2:8(� :+����C 2F�/;�� ���0�����9"*E� ��

!1$0"���14��B%�G:��K(�B%G:�LE�0����������!1���1"�$��1!#1�����E�J����1��""*�����������������

$��1!#1������:+����C2/;��(�B%G:��!1���������2:8(E��#��������M�#��1�����G������6�B5E��#��

������010�10��!� 0�1�����'!"�NF� :+����C 2�;��6"�!1G�����E�8��E�8G�E� ��8G�E�'��E�'�G� ����

!*!"10#�"���:E� J#�!#� ���� 0�������� 0�������� 14� 2:8(��B� J���� �1�� 0������� ���(�B%G:�� K�1��

�#1J�L�� 1��1���E� J�� 1�������� �#��� 6�B5� J��� ��$�"��"*� ���1!������ J��#� �1�#� �*0�� 14�

$��1!#1������ ���� $���"*� ��� �#�� !*�10"��$E� J#������ �#�� �$1���� 14� ��6�B5U� ��!������� ���

������ $��1!#1������ ��� J�""� ��� ��� !*�10"��$�� '!"�NF� J��� 41���� ��� �#�� !1$0"��� ��� "����

$��1!#1������ J#�"�� ��� ������ $�!�E� J��� $1��� ��������� ���1� �#�� !*�1�1"E� ��99�����9� ��

Page 8 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 11: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� D

��9�"��1�*�4"���1���14��#��$��1!#1������:+����C2E;���#��E�(�B%G:��$�9#��!1��������� �1��#��

��"�����������"��*�14��1�������1��!�$��1!#1�����"�$�$�������:+����C2 ;��

����C����������AB��CDEF��

��1$0���� �*� �#�� 4�!�� �#��� 6�B5� !��� 0#1�0#1�*"����2:8(E�J�� ��������� �#�� 0�101���1�� 14�

���!����E� 0#1�0#1�*"����� 6�B5� �$1�9� �1��"� 6�B5� 0�1����� K��6�B5M6�B5� ����1L� ���

$��1!#1�����"�4��!��1���*��$$��1�"1����9�������1"�����4��!��1��"�$��1!#1������4�1$�"��������

������"�����E����#��0#1�0#1�*"���1��14�2:8(�J����������"*���"������1��#���14�6�B5�:+����C

4F;�� 1��1���E� �01�� ������1�� 14� 8� �1� ..F�%� !�""�E� ���#�� 14� 2:8(� ��!������� K,�-C�

41"�T,��L� ���� ��6�B5� ��!������� K��-%� 41"�T,�+L� :+����C 4/;� ��� �#�� ����������*� 14�

$��1!#1�������1�(�+E����$�"����!�������:+����C4�;���#�����44�!���1��2:8(�0#1�0#1�*"���1��

:+����C4/;�����������$�$��������01"���H���1��:+����C4�;�!1�"���������������*���01�����

�1� J1��$������ KI1��LE� �� 0#1�0#1��1������� 5�G������ K��5BL� ��#����1�� �#��� ���$�"����� 6�B5�

G�������!�����*�������!�������6�B5�0#1�0#1�*"���1���>��������E�I1������!����0�����""*�2:8(�

0#1�0#1�*"���1�� K,�B-� 41"�T,�,BL� 4�1$� 8� �����$���� :+����C 4/;�� ��� �#�� �����!�� 14� 8E�

�'+�CBC5E��� �0�!�4�!�6�B5� ��#����1���DE���!����������#��14�2:8(�K,�C%41"�T,��L� :+����C

4/;� ���� ��!������� �#�� ����������*� �1� (�+E� :+����C 4�;E� $�$�!G��9� 8� �!!�$�"���1�� ����

�����1��!�!1�����1����1���$1���������#���6�B5�����#��G������1�E����"����E�1���14��#��G��������#���

!1����������1�2:8(�0#1�0#1�*"���1�����"����!1�����1�E�J������!���������0�����1��14�>,P��*�

����8�����1����������-CP���!�������������#��2:8(����..F�%�!�""��:+����C4E;�� ���""*E�

����9���!1$�������K�����2:8(�E�6�B5E�'!"�NFL������������0���4����0�1������K�����2:8(LE�J��

1�������� �#��� ��� ��A�� 2:8(� ���� '!"�NF� !��� ��� ����!�� ����������� 41�� 0#1�0#1�*"���1�� �*�

6�B5��������99������#����1�1�#���G����������������K���������BA��C+����C0L��

E)��&��)%,CC

Page 9 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 12: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� �,

A�����"��9� �#�� ������"�$1"�!�"���$�!#����$�� "�����9� �1� 4���*� "����� �������� ��� #�$���� ��� 14�

$�31�� !"���!�"� �$01����!��� ���!�� �!������1�� 14� ��9��"��9� 0��#J�*��$�*� 0��!���� �#�� !"���!�"�

�*$0�1$���E� �� ������� 14� $1��"�� 14� "����� �����1���� J���� ����� �1� ����*� �#�� ���"*� ���9�� 14�

�8 F:���#��� "������ �1��#1JE� 41�� �#�� 4����� ��$�E� �#��� "����� �����1���� ���#�$���� ������1!������

J��#���"�!G�14�2:8(�0#1�0#1�*"���1����#���$1��4�!���1��J����"�1�1���������1�#������9�����!�

$1��"�14� 1�����*E� �#��������$�!�E�J#�!#� ��� ���1���14� ��4"�$$���1������ 4���1���E���� "����� ���

*1��9� ���$�"���5� ���� ��� �#�� �����1��!� "����� 14� . :�4��� $�!��� �1� !#��9�� ��� 1�#���

0#1�0#1�*"��"�� �$��1� �!���E� ��!#� ��� �*�1����� 1�� ������� J��� 1�������� K�1�� �#1J�L�� �#����

1��������1��� ��99���� �#��� 2:8(� "�!G� 14� 0#1�0#1�*"���1�� $�*� ��0������� �� #�""$��G� 14�

�����1�������$�$$�"���

���������1���1��#�����$0������$����1"�!�4��!��1��-E�J���#1J�41���#��4�������$���#���$��1!#1������

4�1$�������$�!������$1���0�1��� �1�(�+E�����!�����E�J����������$�""�$1"�!�"�������*E�����

(*���� ��"����E���99�����9����������H���1��14� �#��$��1!#1�����"�0��#J�*�14��010�1����� ������E�

��$1�� ��!�1���� 4�!�1�� K�� L�����!��� �010�1���� ����(�+E� ��"����� �*� ���10"��$�!� ����!�"�$�

#����������#1J���1�������01����"��14��#��$�������#�0��1!*���"1���1�����������"�������9���14�

�8 F:�+,E� +�

�� �#�� �����!�� 14� �010�1���� ���� !��0���� �!������1�� ��� ������ $�!�� $�9#�� ���

��0"�������*��#�����"������14��#��$1��"�++���#��!�""�"�����0���$����������"����#��������!�""�"���

8� �!!�$�"���1�� ��� ��0��"*� 41""1J��� �*� 2:8(� ��0#1�0#1�*"���1�� ���� ��$� "1���

�������H���1����#��E�1���!������������1�����������������$�!������ 8���������!�""��144����1��"�

����9#������1��#�����"*�0#�����14��8 F:�0��#19��������������"*�$��1!#1�����"��"������1����

�$01�����"*E�J��41������44����!������2:8(�4��!��1����#���J�������!���������*�(�+E���#��E�

�#�� "���"� 14� 2:8(� 0#1�0#1�*"���1�� 0�1���� �1�$1��"���� �#�� �1��!� !#����"� 0��$����"��*� 14�

2:8(� ��� ���01���� �1� (�+EE� J#�!#� $�*� ��4"���!�� $��1!#1�����"� <� 0��$����"��*�

+5E� +-��

1��1���E� �#�� 1������$�"���1�� 14� 1������� 4��!��1�� 14�2:8(� 0���4���� 4�1$� ������ $�!�� �*�

(�+E�$�*��44�!���#��!�""�"���$����1"��$��*���!������9��8:

E�"���"������"��"�����#���41�����1��

Page 10 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 13: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� ��

0�1!�����E� 8:�����1�*"���1�� ���!��1��� 1�� ��������$�������� ���!��*"���1���+%�� �#��E� 2:8(�

0#1�0#1�*"���1�����������1��14�"�01�1��!��*�!1���1""��9��#����"��!�����J�������0��������01����

�1�0�1��!��!�""��4�1$�"�01�1��!��*���������������01�����1�4��1��#�0��1!*���!�""�����#��

F�0�������!��� "�!G� 14� 2:8(� 0#1�0#1�*"���1�� ����"��� ��� ��� ��!������ 14� ���� #����1�

1"�91$���H���1�� ������ ������!#��9�� ��� ���� ������!�1$��� ����1�$�"�$��1!#1�����"�$�$������E�

2:8(�J���41���� ������#����1�1"�91$���14��B%G:��K(�B%G:�L� �#���J����1������!���� ��� �#��

$��1!#1������ 14� �����1��!� #�0��1!*���� ��99�����9� �#��� �#��� !1$0"��� ��� ���1"���� ��� �#��

�����"�H���1��14�$��1!#1�����"�<��������������!��1��J��#�'!"�NFE�J#�!#��������������010�1��!�

4��!��1�����$��1!#1�����"�$�$������+C��(�B%G:���"�1�!1���������4��!��1��14�6�B5���001����9�

�#�� #*01�#����� �#��� $��1!#1���������1!������ 6�B5� ��� �#�� G������ ���1"���� ��� �#��

0#1�0#1�*"���1��14�2:8(�����1�$�"�!1�����1��E�J#�"��J��!����1����!"�����#�����1!����1��14�

1�#���G������1��0#1�0#�������6�B5��!�����*������#��������*�0#1�0#1�*"���1��1������������������

����!����*��#���!������1��14��0�����$�G���������0�����9�1��������������0��#1"19�!�"�!1�������

+B�� ��� ������ $�!�E� �1��"� 6�B5� #��� ����� 41���� �1� ��� "���� 0#1�0#1�*"�����

+>E� ���� 1��� �����

����!���� �#��� �#��$��1!#1�����"� 4��!��1�� 14�6�B5� 4�1$�������$�!�� ���$1���0#1�0#1�*"������

A���0�!���"*E�'!"�NF�����6�B5�J�����"�1�����!#�������#��!*�10"��$�14�������$�!���'�����

1�� �#�� ������!�� �#��� '!"�NF� !1�"�� ��� �� ����!�� ���9��� 41�� 6�B5� ��� ��A�E� ��� ��� ��$0���9� �1�

�0�!�"����41�����1"��14�6�B5�0#1�0#1�*"���1��14�'!"�NF���������1�����8""��#��0#��$�!1"19�!�"�

1��9�����!�$���0�"���1�������9�����1����9�������!�"*�1��������!�"*�6�B5�!1����9����1�0�101���

�#���2:8(����0#1�0#1�*"�����1�����#�����������*E����"����E��#���G��������#��������$����!����14�

0����1����������������!#�$��M��0��4���1��14�!����1$*1!*����+D�1��!��!���!�""��

5,��#1J��9��#��

$1��4�!���1�� 14� 2:8(� 0#1�0#1�*"���1�� �*� 6�B5� 1�� �#�%�E� �#��� J1�"�� �"1!G� 2:8(�

������!��1��J��#�#��1G����������4��1������"���������!��1�������A��5����#���41��E�1���4��!��1��"�

����� ���� !"���"*� !1��������� J��#� �� ������� �0�!�4�!� �1"�� 41�� 6�B5� ��� 0�1��!���9� #�0��1!*����

�9������ "�01�1��!��*� ��� �����1����� 1��1���E� 6�B5� ��� �� 0"����10�!� G������ ���1"���� ���

Page 11 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 14: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� �+

$����1"��$���������9"*!19����*��#�����!�����*���9�"���1�E��������"�����9��"��9�0��#J�*�5+�����

��� ����"��� ��������!��$�!#����$��55�� �����0�!����� 14� �#�� $1"�!�"��� $�!#����$�� "��G��9� 8�

�!!�$�"���1�� ���� 6�B5� 0#1�0#1�*"���1�E� $��1!#1���������1!������ 6�B5� $�*� "��G�

$����1"��$���������������0#*��!�"�����4��!��1��"�������!��1��J��#�2:8(��

'����� 1�� �#�� #*01�#����� �#��� 2:8(� ��� �#�� 0#1�0#1�*"����� �*� 6�B5� ���� �#�� �1"���1��

����!����� 14� 2:8(��CE� J�� �0�!�"���� �#��� ��� "����� �1$�� 0#1�0#1�*"����� �#�� ��������� ����

��01���� �1� �#�� !*�1�1"��.1J����E� ���!��2:8(� ��� ��!1���� �*� �#���� ������!�� ��141�$�� J��#�

$�"��0"���#��1������K4�1$�+C��1�5���#��0�����141�$LE��#�����������!����!�"�41���#��"�0�����"�����

��9�"���1��14�2:8(���$�������""��"��������

���!1�!"���1�E�J��������4�������1��"�0#1�0#1��9�"�����$��1!#1�����"�!1$0"��E�(�B%G:�E��#���

��� 0������� ��� �1�$�"�$��1!#1�����E� *��� ������� 4�1$� �����1��!� $��1!#1������ ���� ���1"���� ���

$��1!#1�����"� (�+E� ���� J����� #1$�1������� 14� #��"�#*� #�0��1!*����� �#��E� �#�� �!������1�� 14�

6�B5� K1�� �#�� ��#�����1�� 14� �#�� !1����01����9� 0#1�0#�����K�LL� ���M1�� �#�� 0#��$�!1"19�!�"�

�����"�H���1�� 14� 2:8(� 0#1�0#1�*"���1�� $�9#�� !1��������� �� ������9*� �1� "�$��� $��1!#1�����"�

��$�9���������������3��*����1�����*�"��G���"�����0��#1"19�����

C

C

+)�&� C! � ,E�C

+����C "<C �B�AB���C A��C +FC A������AB��C A�B���C �B�������A�C ����������#C

�B�������A�C�����A��C��B��BA�CA��C�8�����C����B(B�CB�C�A����C

:FL���0������������$1�0#1"19*�14� ��1"�����"�����$��1!#1������4�1$�"��������������$�!���*�

�����$����1�� �"�!��1�� $�!�1�!10*�� �!�"�� ���� V� ��$�� K/L� B�����!� $������$���� 14� $������

�J�""��9�K10��!�"�������*����%-,��$L�K�V�,L�����K�L������$�$������01������"�K�#1��$�����+5�

4"�1���!��!�� ��������*� �����L� 14� ��1"����� $��1!#1������ 4�1$� "���� ���� ������ $�!�� "������ ���

���01�����1�+%�W�(�+E�������1������,�K�V�,L��KEL���44�!��14�+-�#�14������$����14��$$1���"�H���

Page 12 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 15: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� �5

#�0��1!*����K..F�%L�J��#�+�$�4���*��!����K 8L�1���#������������*�14�0��$����"�H���!�""���1�

+%� W� (�+E�����!��� ��01"���H���1�� K�#1��$���� �+5� 4"�1���!��!�E� ��������*� �����L� K�V5L��

2�"��������$����14����0"�!�������$0"���T��:���

+����C$<��B�AB���CA�B���C�B�������A�C8AB��C�����A��B�#C��B�������C�C ���AB��#C��BC

����C��BCA�B(AB�C�A��A���C�>4C

KFL� ��1!#1�����"� $�$������ J����� 0��$����"��*� ��0������� ��� �� ����� !1������� KB�E� ���L� 14�

��1"�����$��1!#1������4�1$�"����K�1"�������L�����������K�$0�*�����L�$�!��"������������01�����1�

(�+E�����(�8�K$����T�:E�

@C���,�,%�����

@@C���,�,�L� K�V-L�� K/L����!�""�"��� "1!�"�H���1��14�

(*�� �� ���� 8� � �����$����� �*� 4��!��1����1�� 14� �1��"� "����� 4�1$� "���� ���� ������ $�!�� ���

$��1!#1������ ���� !*�1�1"� ���� 41""1J��� �*� �$$��1�"1����9� ���"*����� <��� ��0������������

�$$��1�"1�� 14� 5� ����0������� ��0���$����� ��� �#1J�� K�E�EL� (��0����� 5MB� �!�����*� ����1� ���

..F�%�!�""����������K�$0�*�����L�1���1��K�1"�������L�J��#�+�$� 8���������1��"�"�����"*������

4�1$� "���� K�1"��� ����L� ���� ������ K�$0�*� ����L� $�!��� (��0����� �!�����*�J���$�������� �*� ��

4"�1��$����!�����*�K�V5L���

C

+����C�<C�B�AB���C��A�B�C�A$?��B���AB��C��A����C9���B��C�9CDEF�C�C�����C���C

KFL� �44�!�� 14� 0#��$�!1"19�!�"� ��#����1��� 1�� (�+E�����!��� $��1!#1�����"� $������ �J�""��9��

���0"�!�����14�$��1!#1�����"�0�1������������!�������J��#���#����1���K��$��6�8E�%�W�(�8E�

-,�W�:�:�E�C�W���%�BCLE��#���J��#�+%�W�(�+E�����10��!�"�������*�14��#�����0����1��J���

��!1�����41��5,�$����K/L��44�!��14���#����1���1���#�������$�$������01������"��*��#��$�������

14��#����7���!#��9�14��#1��+5�4"�1���!��!���@C���,�,%��DE� "����$�!��K�V%L��K�L���0�����1��

"���"�14�2:8(������"����*��:���86�������$$��1�"1����9��8������U����������������������

"1����9� !1���1"� K�V�+L�� KEL� (�+E� �!!�$�"���1�� ��� �#�� $������ 14� ��1"����� $��1!#1������

�����$����� �*� �#�� 4"�1���!���� 0�1��� �#1�+� K�V5L�� K L� (�+E� �!!�$�"���1�� ��� 2:8(�

Page 13 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 16: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� �-

��!1�������������0�1��1"�01�1$��������$������*��#��4"�1���!����0�1��� "�1-����������2:8(�

J���0���4�����1�#1$19�����*�4�1$�"��������������$�!��"�����������!1�������������1�"�01�1$���

!1�������9� "�1-���������� +,�W�(�+E� 0�"����J���� ������ 1��1� "�01�1$��� ���� 4"�1���!��!��

J��� ��!1���������"��7��"������1����#���1"��������$0�*������!1����01��� �1� �#��"����$�!������

������$�!�E����0�!����"*������"�������$����T�:E�@C���,�,%��DE�"����$�!�E��V5���

C

+����C-<CE99����BA�C�����AB��C�9CDEF�C�����C��A����C��C�A$?C�

���9"�� 2:8(� !#����"�� J���� ��!1���������� �01�����1��"*� ���1� 0"����� "�0��� ��"�*���� �01��

������1��14�0���4����2:8(�4�1$�"����KFL�����������K/L�$�!��"������ �1� �#��!���!1$0���$����

!1�������9� ���B("E� �,�$�.����� 0.� B�-�J��#� 1��J��#1��� ,�%�$�(�+E�� �#�� ����"�����

!#����"� �!�����*� J��� ��!1����� 41�� ��� "����� +� $��� ��� T� +,�$2�� 1�� ���"*���E� �#�� ����� J����

4�"�������1���G.HE���9���H������-�G.H�����!1""�!����1����������$�!1$0���������9�8�1�!10��,�

���� �� ��9������ �--,8�� ��0���$����� #���� ����� ��0������ 5� ��$��� 9����9� ��$�"��� ����"���� !A�

!"1����!#����"D�<�A�10���!#����"���

+����C0<C��������C����������AB��C�9CDEF�C�C�������C�C�B�AB���CC

�#1�0#1�*"���1��14�2:8(� K���#�L� ��� KFL� 0���4����2:8(�4�1$� "���� K5����$�"�L�����������

$�!��K5����$�"�LE�K/L��1��"�"�����14������1��!�0��������!"����4�������9�����,�K5�0�������LE�9�������

K+�0�������L�����9�����+�K5�0�������LE�K�L�"�����14��1�������$�!��K�:E�5����$�"�L�����$�!��4���

��#�9#�4��������K. :E�C����$�"�L�41��+-�J��G�E�����KEL�4���*��!����K 8L�����!��������1��!�!�""��

K����"��� ���� ��0������������ 14� �V5� ��0���$����L�� ��0�����1�� ���� 0#1�0#1�*"���1�� 14� 2:8(�

J���� �����$����� �*� �$$��1�"1����9� ���� ������1$����!� ���"*���� K5,� W9� 0�1�����M"���L��

����!���������"�������$�����T����������:������1��K�:L�J��#�@C���,�,%�����

@@C���,�,���DE�"����

1���1�������$�!��� K L� ������4�!���1��14�2:8(���������� �*�+:��:���86��14�$��1!#1�����"�

0�1������ ��1"����� 4�1$� "���� $�!�� "����� ���� K+L� �����$�����1�� 14� �#���� �#��1�����

Page 14 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 17: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� �%

0#1�0#1�*"���1�� �������� <��� ��0������������ 9�"� ���� 1��� �$$��1�"1�� 14� 5� ����0�������

��0���$����������#1J���(��!"�������!�����#��01����1��14�2:8(���������"����*��$$��1�"1����9�

�����0�!��1$����!����"*������

C

+����C2<C�B�AB���C�����AB��CDEF�C�B��A�B���C

KFL���1!#1�����"� 0�1������ 4�1$� "����$�!��J���� ��0������� �*� +:� '���86�� ���� 0�1������

J���� �������� �*� ��"���� ��������� �#�� #1��H1���"� ������� ����!����� �#�� 01����1�� 14� 2:8(�

!1�������9� !1$0"����� ���� �#�������!�"� ������� ����!����� �#��01����1��14�(�B%G:��� K/L�2:8(�

01����1�� ���+:�'���86��9�"�� 14�0�1������ 4�1$� "���� ����������$�!�� "�����J��� �����"����*�

�$$��1�"1����9� J��#� ��� �����2:8(� $8��� 8� !��!"�� ����!����� �#�� 01����1�� 14� �� 2:8(�

!1�������9� !1$0"��E� ��$��� (�B%G:�� ���� �#1J�� ���� �����!�� ��� 1����� $�!�� "������ K�L�

(1$01����1��14�(�B%G:�E� ���"*H����*� �$$��1�"1����9�14�$��1!#1�����"�0�1������ 4�1$� "����

$�!�� �4���� +:� '���86��� KEL� (1$0����1�� 14� 6�B5��E� ��6�B5�� ���� '!"�NF� ���!�""�"���

"1!�"�����1�����J���� "��������������$�!���4����!�""�"��� 4��!��1����1��41""1J����*���0�����1��

�*��:���86��� K L� �!#�$��14� �#�� �B%�G:��!1$0"��� !�������� 1��2:8(�� ���0#*��1"19�!�"�

!1�����1��E���2:8(�������!���J��#�'!F�NF�����6�B5E�0�1��!���9��#��$��1!#1������4�1$�(*��

����"�������

+����C 4<C *�A��A������A�C A��C ����B�C �A����AB��C �9C ����C ����������AB��C

�����AB��CDEF�C����������AB��CA��C�B�������A�C����B(B�CB�C�A$?C

:F;C�#1�0#1�*"���1��14�2:8(�����6�B5������1"�����$��1!#1������4�1$�"��������������$�!��

"��������1������J�����$$��1�"1�����41��2:8(E�6�B5E���6�B5��������#���������"*H����*�

������1$���*�C@C���,�,%��DE�"����$�!���K�V-L�K/L��44�!��14�+-�#������$����14�..F�%�!�""��J��#�

+�$� 8�EM��+�#�0��������$����J��#�+,����'+�C5CB�1��+,,���I1��$������KI1��L�1��

0#1�0#1�*"���1��14�2:8(�����6�B5���1��"�0�1������J�������"*H����*��$$��1�"1����9�����

Page 15 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 18: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� �C

������1$���*�K$����T�:E�@C���,�,%�����

@@C���,�,�L�K�V-L��K�L��44�!��14�G��������#����1���1��

�#�� �����$�$������ 01������"� 14� ..F�%� K�#1��$���� �+5� 4"�1���!��!�� ��������*� �����L� !�""��

��������1���1��J��#�+�$� 8�������01�����1�+%�W�(�+E�������1������,�K�V�,L�K

@C���,�,%�����

@@C���,�,�L�K�V5L��:E;���"��!��9�14�6�B5��*���011"�14�-�����8��41��->�#���!�������2:8(�

0#1�0#1�*"���1�� ���..%�!�""�� ��� �#1J���*� �$$��1�"1����9���!��$�"�� ����8� ��� �� ��9������

!1���1"��:�����1$���*�K��������*������L����9�������������!#�����������"���������0������������14�

5�����0���������0���$�������

� + � ,� �C

��� (#��00���� E� '������� 8E� ��44�1*� �E� :1$���� E� :�9���� �E� 8H1�"�*� :E� ����9#� E�

���!�'E�(#���"�����E�:�������'E�:��1����E�F�$1����8����0"1����1��14�9"1��"�9����

��0�����1�� ���#�$��� "����� �����1�����*�#�9#�������*�1"�91��!"�1�����$�!�1����*��F���

�������+,,CD>CA�%-�C%��

+�� .������� FE� 6�1�9�� &�� 8��$�"� $1��"�� 14� �1��"!1#1"�!� 4���*� "����� ��������� ���� ����

6����1�����1"�.�0��1"�+,��D>A5%�--��

5�� !(�""1�9#�8�����#10#*��1"19*�14��1��"!1#1"�!������1#�0��������&�("���6����1�����1"�

+,,CD-,A��B�+D��

-�� �����*���:���1"��14�$��1!#1����������1���"!1#1"�!�4���*�"��������������&�6����1�����1"�

.�0��1"�+,,BD++A�+,�B��

%�� B�1�$���6E�6�""�HH��FE�'�������(����1!#1�����"�$�$������0��$����"�H���1�����!�""�

����#���#*��1"�����+,,BD>BADD��C5��

C�� �1��1������� �E� (1"1$������� 2:8(� !#����"��$������� ���� 9���� �#�� 4"1J� 14� 8��A�

�$0"�!���1���41���#����9�"���1��14�$��1!#1�����"�4��!��1���'�10#*��&��DDBDB+A�D%-�C+��

B�� B1���� �E������� XE� �#1�#���'��$��H�2��:1J���9�"���1�� 14� �1"��9����0������� ���1��

!#����"�����0�����1���*���8������4����!��0��������!��!���!�""�9�1J�#�������1��(��!���

'�1"��#���+,�,DDA�,-C�%+��

>�� �"�1���1� �E� ������G� &E� �""���� E� F�$������� &�� ���� ����"��� $1��"�����

$��1!#1�����"�$�$������01������"����!��!���!�""���(��!�������+,�,DB,A�,�D+�+,���

D�� '�G��� 8E� F���� :&E� F*� &:E� :�� ����1� 2E� F�J��� 8�� 2:8(�� ��� �� �����0"��$��

$�$�������8:.�4����!*����������!������&�'�1"�(#�$�+,,-D+BDA->���D��

�,�� ("�*�1�� �E� ����"��� 8E�B���*��� �E� ��J����E�I�""���9� (E� B"����$��� �E� ����"� 8��

F����� !�""� "����� 41�� �#�� ����*� 14� #�0��1!*��� 4��!��1��� ���� �$$��1"19�!�"� ���01�����

F���������+,,%D+%A5>D�-,+��

���� ��!!#��E�<�1�����E�(���""��FE�8�H����1�(E�'�""�������E���������8E� ���1���FE������

E�'���1"1����E�'������E�F1����1�8E�(���""���E�F1�������:�44�������"��44�!��14�1"��!�

���� 0�"$���!� �!��� 1�� "�0��� �!!�$�"���1�� ���� �010�1���� ��� !�"������ #�0��1!*����� &�

6����1�����1"�.�0��1"�+,,DD+-A>5,�-,��

�+�� &�!1�1���E�����9����FE�F1�44"���E� �����B E�2������.FE�X�$H�$���E�(1����������E�

:���""����!��E�.1���G��&E�'������&�E�����101�"1���E�:��9����E��������8E�(1�����:E�

N��� X.E� ����� &(E� �17���� '�E� B�1�$��� 6�� �#�� .�2��� ����"� 0�1����� �� ����!���

Page 16 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 19: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� �B

�010�1��������������!���44�!��1���#��$��1!#1�����"�0��$����"��*� ��������1��01����&���0�

���+,,,D�D�A55�-C��

�5�� .�"����&E�6�3�J�"��BE��44���E�(1#����E�(#����'E������1J��H�:E�F�""1����E�'��"�*�

�E� ����$��� &��I��9#������!��9� �44�!��� 14� �#�� 0"��$�� 0�1����� ��!1�����*� �#�� 1�����

9������!���!���DD%D+CDA%-5�C��

�-�� �"�$����8E�&�""����2E���""�$����&E�:�������%�BC���#������$��1!#1�����"�0��$����"��*�

��������1��������$�!#����$�����0�������14���������1�������0�10������������&��#��$�!1"�

+,,5D-C>AD5��,���

�%�� 1����:E�X�����E�'��������8E���""�$����&���44�!��14��#��$��1!#1�����"���������1��01���

��#����1�E� ���%�BCE� 1�� ���� "����� $��1!#1�����A� 8��� �*��#���� $1��"���1�� ����

$��1!#1�����"���!1�0"��9�����!��1���'�1!#�$��#��$�!1"�+,,CDB+AD���>��

�C�� .�""����E�6��!����E��"����E�<��G#1��2E�(1"1$�����E�I�9����6���1"���1������!�����

14� �#�� ����9��"� #�$��� $�$������ 0�1����� 2:8(��� ��� �����9���� $�!�""���� �!���!��

+,,>D5+�A�+,C��,��

�B�� �#1�#���'��$��H� 2E� B������ �E� X���� .�� A�!1�����9� �#�� �1"�� 14� 2:8(� ��� �#��

��9�"���1��14�!�""�"�4����������#��&�'�1����9�'�1$�$���+,,>D-,A�>5�D���

�>�� (�1��� :E� 8"����� :E� 2�����#����� ��� &E� !:1J�""� .E� .����"� .E� (1#��� ��� �#��

��#�����1��14�9"*!19����*��#����G������5��*�����"���1������"���"�G��9�1J�#�4�!�1�������

�#�������G�"���"�$��!"��!�""�"����FC�����"1!G����*�J1��$�����E������1���*���0�$*!��A�

������!�� �#��� J1��$������ �"1!G�� �!������1�� 14� �#��$��19����!�������� 0�1����� G������

0��#J�*����FC�!�""�����J��������������4��'�1!#�$�&��DD-D5,5A�+��C��

�D�� (�1��� :E� (�"����� 8E� (#�"$���� BE� �!!�� FE� �G�0��� �E� ����#� 8�� ��"�!����� �$�""�

$1"�!�"�� ��#����1��� 14� 9"*!19��� �*��#���� G������5� �!�����*� 0�1��!�� 0��$��*� ����1����

4�1$�����#��&�����1!#�$�+,,�DBBAD-��,+��

+,�� I�""����� 8E� ���� F11� 6E� .�*���!G� BE� '�*����� ��� .�0���!� ��$1�� ��!�1���� 4�!�1��

��9��"��9�������!"����4�!�1��G�00�'A��44�!���1��"�����#1$�1�������������*1�������1!��

����+,,BD+>A5C%�>C��

+��� �"#�� .E� B��4$��� ��� ���10"��$�!� ����!�"�$� ������� ��� "����� ��������� &� .�0��1"�

+,��D%-ABD%�>,D��

++�� ��#���8E��""�����E�����NE����"��E��"���8"�����.E�6������E�I#����9�1�����<�����

���� �������!� ��M��� $�!�� ����"10� $��G��� "����� 4���1���� ��� �� $1��"� 14� �1��"!1#1"�!�

�����1#�0������A� �1"�� 14� �#1���41�$� "�0���� ��!�0�1��� ���� 1���101������ 8$� &� �#*��1"�

6����1�������F������#*��1"�+,,-D+>BA6�,5%�-5��

+5�� ����IE�(1"1$�������2:8(�!"1����� ��!������� !�"!��$� �1�� 4"����'�1!#�$�'�10#*��

8!���+,,BD�BC>A+%�,�%��

+-�� 'Y�#1��� 6E� (�1��Y�� 6E� 6��!�������H� (E� :������ �E� .�3�Z!HG*� 6�� (�+E���0�������

!1���1"� 14� �#�� 0��$����"��*� 0�10������� 14� �#�� $��1!#1�����"� 1����� $�$������ ����

�1"��9����0����������1����"�!�����!#����"�K2:8(L��&�'�1"�(#�$�+,,CD+>�A�B5-B�%>��

+%�� B1!#��1"��� E� ��!#����E�.��9� E�X��9"�����(1$0���$������1��14��8:E���0�������

��9��""��9�� �'��F����+,��D%>%A�C%��C��

+C�� ������E�6�����:����1!#1����������!�""�����#A�1�����$�$������0��$����"�H���1������

��*1������������1"�(�""�'�1"�+,�,D��AC+��5+��

+B�� X#��� �E� ���1�#�$�� &�� <���!1$��9� ��� ����9*� !�����[A� ��� ���0����� �1"�� 14� 9"*!19���

�*��#����G������5���#�����1�������!#�$��M��0��4���1���(��!�����+,,>D�,5AD�,�5��

+>�� :�������E�'��#�$��� E�.�����"���E� �������2E� 1�4�""�� E�:*!G�&E�6������&E��1���!�(��

F������0�!�4�!���#�����1��14�(#��'���$0�1����#�0���!������1������������"�����������!��

���1�M1��$�!���:��������+,,CD%%A+�%D�B,��

+D�� :��� �E�I1�9��E� ��3�0�G����E� ���E� ��������9��� (�� 6"*!19��� �*��#���� B������ 5�

��#�����1���"1J����1!#1�����"�8���������!"�1����������01���������9�"�����21"��9��

:�0�������8��1��(#����"��#1�0#1�*"���1���(��!�����+,,>D�,5AD>5�DD���

Page 17 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 20: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� �>

5,�� ����1���1�&E�.1�G�&E��#�"9�����8!������1��14�9"*!19����*��#����G������5����������0���

�#�� ������9� 14� #��1G������ ��� �1�$��1!#1������ �*� 0#1�0#1�*"����9� �1"��9����0�������

���1�� !#����"� ���� 01���������� !#�$1�#���0*�����!��� !*�1�1��!��*�� (��!��� ����

+,,%DC%A�,%-%�%-��

5��� �#�"�1��BE��"�1���1��E�F�$�������&E��1��1��������E�'�H��G1������#1�0#1�*"���1��

14��1"��9����0����������1��!#����"��*�������M�#��1�����G�������91����������������!��1��

J��#�����"�����F1��<���+,��DCA�+%%5D��

5+�� ����9�!#�� (E� �$����""�� 'E� B�#��(��(����!�"� �1���� ��� ��9��""��9� 0��#J�*�A� ����9#���

���1�����"����!��1�����������1"�(�""�'�1"�+,,CDBA>%�DC��

55�� (�0����&������"�����������!�����������1�������#�$�����:�������������+,,>D5-AC-D�%B��

5-�� F�7�1��� 6E� (�"�$���� 6E� (��!�""�� :E� ����1�1���1� E� �1����!���� �E� ����� :�� 8��

���1�������$��#1�1"19*�41�� �#�����1$�����$1�0#1$����!�����7����������������$���1��

14�"����������1�����.���1"�.���10��#1"�+,,DD+-A-D�C,��

5%�� 6��44��#�� �&E� .�"�����0� 8��� ��1��!��1�� �*� (*!"1�01���� 8� 14� ��!#�$��M��0��4���1��

����!�����$�9�������1"���������#�������&�1"�(�""�(����1"��DD5D+%A�-C��D��

5C�� ���H��8E�:�������8E�F��'����E���""�����E�1""��:E�F��1!#������E�X�$H�$���E�&���

6E� B�1�$��� 6E� '������� (�� 68�:.E� �� �1��"� ��9�"��1�� 14� �#�� 0�1��010�1��!�

$��1!#1�����"�$�$������0��$����"�H���1���<�!19����+,,CD+CA+C,C�+,��

5B�� 6��!�"� :E� ��"������9� �E� �#1�#���'��$��H� 2�� 1��"���1�� 14� �#�� �1"��9����0�������

���1��!#����"�K2:8(L��*�9"���$�����&�'�1����9�'�1$�$���+,,,D5+A%B��>5��

5>�� :������� 8E� �1���� (E� '��7����� 8E� .1$���� &E� (�$0�9��� �E� B�1""�IE� '������� (E�

(#10������ &�� 21"��9����0������� ���1�� !#����"� �����01���� !�"!��$� �1��� �#�1�9#�

��1$�$���!�$�$��������F��9$����+,,BD+5A5>D>�D,%��

5D�� ���� .���J�3� E� ���� <�� (�� <�$1��!� J����� 0��$����"������ 14� ����#� �1����� ����

���1"�����"�$�$����������!"���4�1$���������"�!1����������$�""������������&��$���'�1"�

�D>CDD+A�>5�D5��

-,�� ��G�$�6E�B1J�"�1JG���8E�8����*���8E�B��#�������\E�����G1��8��8010�1������"�����

�!��������� $�������� J��#� ��1"����� $��1!#1������ ���� ��9��1����0��$����"�H��� !�""���

��#1�����H*$1"�+,,,D5++A+++�5-��

-��� I����9��E�'�����.E��!#]99���.��'"�����������86���������1�1!�+,,CD�A-�>�+>��

F��,%@! E�� ,���

(��F1�9���4�1$��#��$�!�1�!10*������$�9��*�0"��41�$�14����8�����!G�1J"��9����:��8������"E�

A��������*�14�6"��91JE�ABE�����!G�1J"��9���41��#���9����1���9�4��14�..F�%�#�0��1!*���!�""�

"�����I������9����4�"��1����(�$0�9����������������41���#���"�!��10#*��1"19�!�"�$������$������

I�� �#��G� (�� 6�""����� ���� ��� ��""���� 41�� ��!#��!�"� ��������!��� '("�NF� J��� �� 9�4�� 4�1$�

8"��������(#���"� K����������������E������L� ����(#��������8"$����� K(�8���!1�"�E�����!��1��

�����!���!������������L��

+&,E),��

Page 18 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 21: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� �D

('������001������*� �#��A��������*�14����������� K9����������!������LE� �������������1��"�01��� "��

(��!��� K��(�E� +,,>����F� '�<�,-�(���� <��L� ���� F����� F������ ('� ���� 8F� ����

��001������*��#�������A����������������(���!��������4�""1J�#�0�4�1$�8��1!����1��01���"��

��!#��!#������ "��(��!����('E�8�����&(�������001������*�8���K8���,>�(2��,,,>�,�L��

6(� 9����4�""*� �!G�1J"��9��� 4����!��"� ��001��� 4�1$� �A�� K����+,,>D���+N^,,5L� ����

1���H�1���(�����������0��$�1������9"���C

C

Page 19 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 22: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

��

��������AB�����B���CDEF��

Page 20 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 23: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

��

��������AB�����B���CDEF��

Page 21 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 24: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

��������AB�����B���CDEF��

Page 22 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 25: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

��

��������AB�����B���CDEF��

Page 23 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 26: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

��

��������AB�����B���CDEF��

Page 24 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 27: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

��������AB�����B���CDEF��

Page 25 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 28: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

��

��������AB�����B���CDEF��

Page 26 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 29: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� �

��������AB��CDEF�C����������AB��C���B����C��B��C�B�������A�C�����A��C

�����A��B�C�����C���CA������AB��C

�����C�F�� !"#C$#C�A�ACF!!%&�'

�#CEA(��CE �!)C �*%��)

$#C ���AC+F, !!)

-#C�.���C

/%&��) �0#C�.���C' ,�1

2#C3���C�'%*), F&

�#4#C�������C�F!F�)�F

-#C����C��% � �

5�"$#C

F�B���BB�C! �%), $6#C�AB�����C/� ,, �"6C

C

�&**! � ,�F�1C�F� �)F!�CF,EC� �'%E�CC

C

�AB��A���

�����������������AB�C�D�E���F���AD��������C����B�C���A�D����������AC������ �!��C�C���

�C���A�����������A�D�E���������B�A���� �"���D��#$� ��

C

F��A�C�������

%��A��� &'�(� E��)D� ���� ��AC� �*+,-".&/�� AC�� ������ �-& 0'"�F�1./�� ����� E��� F���AD���

����/AC�����"��2�C�D���A�C���D����%AC��� �#A���3'E��)'����*+,-".&/�������4A�AC�����C���

��A���� E��� A�����A��5��� ��� �A1�A���� ��C�����CD� ��� �C�� E��)� 1����� 1��CB� AC������

ADD�BC������������������B���A����D�AC�A�����E�������������C'6��F���0AC����D����A��� �7���

��B���A���4%89�3(:����DA��A�����A�9�,;:��A����D������A�9�)/��AC��D�AC�A���C�C�������<89�

3:���� DA��A���� �A�9� �;:� �A����D� ���� �A�9� )/�� ����D� E��� F������� �C� D�A��� F�����D� ��� (+�

E��)D ��

C

F��A�CB����C������B��C

#���� E��� �A�C�A�C��� �C� A� �('���� �A�.C�B��� ������ A�� ��C������� ���� ���F�A���� AC��

F�����������A���DD���������AC��EA�� �%�������������A���B��F�E���DA��������A��E��)�(+�

A����1��CB�F�A�����C������DF����������� �-�����EAD�����������=�D��1�����DA����������D����

1��������A�� ACA��D�D � "���D� E��� >���)��� �?��D���� ���AC��� ���F������� E���� ���'�����

F��DF�A��'1������� DA��C�� ��-���� AC�� F�D����� �C� ��>���� C���B�C� �C���� �D� � �����D� ��� ����

Page 27 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 30: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� (

��A�C�CB��������DD��D�E���F���DD���1����D�������D����������ADD�DD��C�����������B������

�����D��A��D�D�1����F����CB�AC�A����A�����������@3

�7���F�������EAD���C�������A�����CB�

�������2�������C��F��D���������A��AC���D������A1�A����AC��A�D �

������B��C�7C���A�C�(��C�������

A�B��� ��5�C�1��FD��D�E������D�C�A��CB������1��FD��D��������������CB�BA����A��D��CB� �C�

����CD�������C ����A��D�D�EAD�BA����1���E��FA�����B�D�D����F�C��CB��C�����F���C�AB���������D�

F�D�C��CB���F����A�����D��C����������F�AD����C�BA���;��B+�:���BA������+'@;�:��AC��BA���(�

�@;'&;�:� �7���D�����F������������ED�����������C�A���CD���� ���������A��B������C�D���� ����

�C,+�8���AA���C����4��D�C)��AC��EAD�AFF�����1����������A����������� �

C

����C���B�����

44"'+�������A��5���C�C'�AC����D�F��A����FA������D��A�B�C���D�B��������8�� ��A�����

�C���D���� ��� 2�ADB�E�� �����;

� A�� �������� �C� 8#A#'%�(� �8��1����DD� #�������� AAB��DD�

#������� D�FF����C���� E���� �;:� ���A�� 1���C�� D����� �:� B���A�A?� AC�� �:�

F�C������C.D��F������C�� �C� +:� *$(� A�� @,E* � 7�� �C����� ��F��� �A�����D� ���A���C�� ���� �D�A��

��������������EAD�D�FF����C����E����(�:�-���AC��(��#����A��.FA����A����(F��A������AD�

��D��1����C���������A������

�AC����������D�E�����A����E�������D�����������@����@;�� ��

C

)���AB��C�7C�����C�(��C�B�������A�

#������C��A�E����D��A����������������������AC���������������C�AC��D�'�D������1������; @�

#� D���D��� +��#� 7A���; (��#� A27����� :� -����+� �#� D������ ��������� �� �#�D������

F��F��DF�A���� �� �#� D������ �����ACA�A���� F4� , (�� 1�� ������C��A�� ��C����BA���C� AC��

F������� �C� ������� BA���C�� A�����CB� ��� A� F�����D� E�)��(

� 7��� ����D����� �A����C�

�D�F�CA�AC���EAD����C��1�A�C���1����C����BA���C�A���;; ;;;�?�B��������A��3E* ��

Page 28 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 31: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� @

C

��A�������C����B���C�����������

�D��A�����������C��A�E�����?����C�3:�B���AA���������; ��#�D�������A�����A����������A��

�������F�A�����67��AC�����C��EAD�����C�; ��D�������A�����A����; 3�#�D���D���������A��

67 � �A�F��D� E��� ���C�FAA���C'��1������� D������� ���C���� �C� D����D�AC�� ���� ��AB�D� E���

�1�A�C���A������������C�����D��F���A���������<6���/���'�C'/�DAD��%AC��� ��

C

�8��AB�CA��A��C��C�����C�(��C�B�������A��

����ADDA�D�E���F��������C�C&'E����F�A��D��(;;�G���A��@,E*��C�A�DF���������������7A*�<�

B�C��D�� 7A*�<�� ��D��A� � %�� A1D�1AC��� AC�� �F���A�� ��CD���� ��AD����C�D�� �ACDFA�C��

����F�A��D� E��� �D��� AC�� ��� �����D��C�� ��AD����C��� 1�A�)� ����F�A��D� E��� �D�� �

#������C��A��(+�GB����F����CD.(;;G���E������������C�A���F�'�D������1�������;��#�7�D'

#$����F4�, 3��+��#�D����CA����(;;��#�D���D������#������;�G#�A27���(�G#���D���'

A����� ���C�C�� � 0A���D� ��D�D� ��� *A(H

�� ��CD������ AD� A� �7� �C������ E��� A���� � ����A��

F�A�A����B��A�� �C��1���D�� D���� AD� A27��� A� *A(H

� ����A���� *D��� �7�� �C��1����@+

�� 8�8���

E����� �AB��D� 08�*�(+

� AC�� �'�+�,&�� A� �7�� �C��1�����3�� �+

� E��� A����� ��� �������C��A��

D�DF�CD��C���C�����AC����E����*A(H

���C�� �������AC���D���� �����������C��A��DE����CB�EAD�

������A�������AD����1����������AD���C��F���A����CD����A��+3;�C��AC��������F��A�5A���C����

�����������C��A�EAD���AD����1���������A��C���(@����G#�������D��C�����>��C���CB��I�?F�

3J+C��� I��F� +@+C��� #������A� ��1�D��@&

� *A(H

� �C��� �C� ���� �������C��A�� �A��?� EAD�

��AD����1�������D��C����D�CB����A��C��(��I�?�K�+3;�C��AC��I���K�+C+�C�� �%��<�84�

�?��AD�� A�������� ��� 08�*�� �������C��A� ��;� LB�� E��� �C��1A���� �;� ��C� A�� @,E*� E���� ��

E������� D���A�� ��D�D� ��� 8�8�� ��;� ��� J;� L#� � 7��C�� (+;� L#� <�84� EAD� A����� �+� ��C�

1���������A������C����@;;�L#������AC�������D�A�������A����C �<�84��?��AD��A��������EAD�

Page 29 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 32: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� 3

��AD����1�������E�CB���������AD����������D��C������<�84��I�?�K�@&;�C���I���K�3&+�C���

A�AF��������C ��

,AB(�CDEF�C���7�AB����

08�*�EAD�F������������������C��A�������AC�AC�������� ����D�@,

�-��������������C��A�

�+��B.����E�����D���1���D����������)��C��;��#�7�D��F4�, ;����@;���C�AC����C����B�������

A���;; ;;;�?�B �7���F��������C�A�C�CB������������C��A�����1AC�D�EAD�D���1���5����+��B.���

���F����C���C��;��#�7�D�@:�7���C�M'�;;��F4�,����@;���C�AC����C����B�������A���;; ;;;�?�

B �����D��FD�E���F�������A��3E* �7���D�F�CA�AC����C�A�C�CB������������C��A�����1AC��

F����CD� EAD� ��A���� �C��� A� ��� ����?�AFA����.������� �(F��� �����C�� AC�� ���C� 08�*� EAD�

���������� �C� ���� ���E� ����B� � ������ ��� 08�*� F�����A���C� EAD� �������� 1�� �8�'��2A��

�����E���1��D����D�A�C�������C���������C ��

C

�������A�BCDEF�C

C4�D'�ABB��� �08�*�� EAD� F������� ��� ��� �A�� M"'�� -���� D�A�C� ��B���C��� � � �� �D�CB� A�

FNA@;'�08�*����CD���� ������C�F�������C�EAD��C������1��A������C������#���72����3�

��A��@,E* �7���1A����A�E�������������AC������1���ADD�EAD�D�DF�C�����C�1���������F+;��.���

(;� �#� 7�D�� F4� , C�� (;;� �#� <A*�� AC�� ��#� �#�%� � ����� ����B�C�5A���C� 1�� F��D��

D�C��A���C�������C���D��C�1����D�E���EAD�����?��CD�������C�1�������1�����1��CB�D���1���5���

�C� 1����� -� ��F(;� �.��� &#� ��AO4*��� (;� �#� 7�DO4*��� F4� , C�� +;;� �#� <A*��� AC�� �;:�

B�������� A�� 3E* �8�CA������08�*��EAD�����������1�� ��C����BA���C�A���J�;;;�P�B� ��� (;�

��C �7���F����C�EAD�F��������D�CB�A�<��<7���D�C��N�AB�C��2��AC���F�'�>����1A����E����

1�����- �������?��CD����EAD��CB������08�*�'1��C���D�C��������C�EAD�F�������E����A�

��C�A�BA���C���������A5������;����@;;��#� �2�������AC������A5����E����������AC������

��C��C�A���C����<A*��EAD���E�������+;��#�1����A��D�D ��08�*���C���CA���CB�1�����EAD�

Page 30 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 33: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� +

�������� 1�� ��F� E�D�� �������C� A�� 3E*� E���� D���CB� �C��� ������CB� 1����� �(+� �#� D������

F��DF�A���F4�, ;���;;��#�<A*������#�A87���+��#�877��(:��A������������A��C���?����

�"8�$������������A���CA��F����CF�����B�C����������A�������Q�F(; ���������C�B���D���CB�A��

3E*�������������08�*�DA�F���EAD���A��5���ABA�CD��F��DF�A���1����������������A �

7���F����C�F�����EAD���������1���;:��8�O��2A�1��D�A�C�CB�E����*���ADD���1����AC��1����

2'(+; � 7��� F����C� ��C��C�A���CD� E��� ������C��� �D�CB� �D�CB� -*�� ADDA�� E���� 1���C��

D����A�1���C�AD�����D�AC�A� �7���F����08�*����C��C�A���C�EAD�A1����; +��B.�� ��

7��ADD�DD��08�*�������������CB�AC��A���������E��F�������*8���AD����C�D�AC��-"#�

D�CB��� ��ACC��D� ��AD����C�D � �C� ���� F�D�C��� ��� ; +� �#� *A(H

� ���� ��ADD��A�� �A���A)D� ���

08�*�E����1D����9�A����E����1AC��F���C��A�D��1���E�@;��0���A�F��AC�C�����F�C�D�A���

E����A�D�CB��'�������C����AC������A1����(&;;����@;;;�F���C���#��*��EAD��1D���� ������B���

����AB�D����D�CB����C�D�AC��C�����D�D�1��C����AC���D�A��D�E����1D���� ��

*�A�A�C���C��A���C�9������B���

��ACA���F���1��A��D�E���������1��FA�C��CB�F��DF�A����������C������D���1�ACD��A5������C�

���� ��B�A� ��F�� �0� ��� ��DD������ �C� ���AC�� �@;�B.���� A��DD� A� (;;'G�� AF����� �C� A�

F���D����CA��� ��F� �!AC�� �CD����C�D�� D�FAA��CB� (� ��A�1�D� � (� �"� �A�� � 7��� �ACD�

��A�1�� ���FA���C�� EAD� ��CC������ ��� ���� ��A�D�AB�� �CF��� ��� A� 1��A��� ����AB�� ��A�F�

A�F������ �-"#��(;��-����B��� �7�����D���A�1��EAD������A������A��B��C� �0���AB�D�E���

AFF������������F�ACA���F���1��A��D�����B���B'�B*����������D���CC���������������A�1�D���A�

ABA.�*��1��B�D �-������D�AC���ACD���A�1��D������CD�E������F�D��������#��*����;�#�

4A�A�� �<'('����?������F�F�A5�C�'<R'('���AC�D����C��� A������ F4� , 3� E���� �� E�������

; +�#� *A*�( � @'3G�� ��� F������� 08�*� ���� ��AC� AC������������� ��C���A�� ��C��C�A���C� ���

; ('; @�B.���� E��� �������� +;'����� �C� �:� �����'F����?�������C�� AC�� A����� ��� ���� ��D'

���FA���C� ���CB���08�*���ACC��D�E������CD��������DF�C�AC���D����F�C�A������C��������

Page 31 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 34: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� &

F����C���� ����D������C �%��ACA��D�D�� �����A�A�E����������� �����)45����B���5���A��3�)45�AC��

���������� �C� A� ��C����� ���F���� �D�CB� �?�?��F��;� �#������A� 8�����D�� AC�� A� ��B��A�A�

�33;���#������A�8�����D� �8A�A�E���ACA��5���E����*�A�F����C ; ��

�A$:CB�A�����BC�C���B������������

*A(H

� �C��� ����B�� 08�*� F��D� �C��� F������F�D���D� EAD� ��AD���� 1�� �����E�CB� ����

�C��AD��������������D��C����������'3'��?�AC�A��I�?�K�3J+�C���I���K�+@+�C�����@;���C�@J

��

�B�����C7��;C���BC��ABB������

#������C��A� ���� ��AC� �� �1�D�� ����� E��� D�1=������ AF����� ��� A� ��F���C��� �D������

BA���C������3;��$D����A����1���ACC������AC��������������D�����������A����D��C)AB�D�EAD�

�����E���A��(;E*����������C��AD���C�D�A��������B����I�K�3+;�C����D�CB�A�-��"�B���#��'(;;�

�-��"�B������A����D��FF��'���E��A����C�ACA��5�����A����������� &��D9�CC:���?�CB��������C���

�C�B����D� �7����A�A�E�������������A�D�CB����?F�C�C��A����C����C�AC��������A����A�����CD�AC��

�����D'����������EA��������?�������������������C��A��A�1��F��D��A��FAA���������A�����������

�BAC����� ���1AC�� EA��� F���A1������@C

� EAD� ��AD��� � 7��� ������� �D���A���� EAD�

�������� 1�� ���5�CB� F��C�� ��F�DD��C�� �D�CB� A� 4A�1��)�'$D������� ��CA���� -���C��

2��AC�� ��C�D�����?F����C�D���������C��A�E����C��1A��������;���C��C�����F�D�C�����

����A1D�C������(+�L#�*A(H

�F��������D�������FD���) ��C�AC�����D���D����L#�*D��EAD�A�����

��C�����������������C��A��D�DF�CD��CD�+���C�1���������*A(H

���A���C� �

,FE'�7�����A���C�����BA��CA�B(B���

7���<�84'�����AC���������AD��A�����������08�*�������AC�AC�������������EAD���AD����

A�����CB����@J

��

Page 32 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 35: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� ,

!��C�A�������

"�F����A�����D�E���D�A�C���E�������������D��C��F�1��<����6�� �-�������A������A���C�������D�

E��� EAD���� �C� �-��� �C��1A���� E���� �;;� L#� <���� 6��� �C� 4-��� �4AC)RD� -������� �A���

�������C�����(;���C�A��@,E*�AC��EAD�����C��-� �%����D��C������<����6���EAD���AD�����C�

E���������F�A��D����C&�E���D��C�A�DF���������������2�C��D�7A*�<��A��I�?�K�++(�C���I���

K� &@&� C�� �� ����BAF�D� E��� �A)�C� �C� A� "���A� �����D��C��� ����D��F�� �����D� E���

F�����D���D�������C�D����D� ��

C

�B�������A�C�����A��C�����A�8AB��C�C�����A��8��C�������

#������C��A�� ���1AC�� ��F��A�5A���C�� �C� F���A1���5��� ����D�� EAD� ������C��� �D�CB�

���A��C���(@��C�F���A1���5�������D��A�AF��������3;

� ��

�,FC�B��7��������

*���D� E��� �������� �C� &'E���� F�A��D� AC�� �ACD������� A�� ,;:� ��C����C��� 1�� �D�CB�

8�A�A%A*7� 3� �AB�C�� �8�A�A��C��� E���� D�A��� �C�����CB� 6<�D� �D�6<�D�� DF������A����

�AB���CB� ���AC� 2��@S� �$<'7�62A7F��D� �#�67F���� 2��@-�� 8�A�A��C�� �� ����

��C�����$<'7�62A7F��D�<�C'�AB���CB�F�����8�A�A��C�����3J� ��

�A��A��C�<4CA��A����

������� �ADFAD�'@.,� EAD� ������C��� E���� �F�'$<A� ����B�C��D� *ADFAD�'@.,� �DDA��

�����BA��#A��D�C��!��������������E�CB������AC��A����DD��CD������CD ��

�E��*F� CA��C��������B�

�����CD��@;�GB���C�"A������1�����E���D�FAA����1��D�������������'D��A���F���A���A�����

B��� ������F���D�D� ��8�'��2A�� AC�� �ACD����� ��� �08%� ���1AC�D� �#����F��� �

Page 33 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 36: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� J

#��1AC�D�E����C��1A�������C�B���A��3E*�E�������������E�CB�AC��1����DF�AC��'08�*�AC��

AC��'�<7��F������CA��D�����2�C�DF������A�D��%AC�����AC��'F��DF������C�C���AC��'2��@��

AC��'F��DF��2��@� AC�� -��'M"� +34&� �*���� ��BCA��CB��� AC��'��%� �*������C��� AC��'

����������� �-8�-��D���C��D���AC��'�7�AD��S'D�1�C��� �#���D���C��D���S'A���C�46�� ��AC�A�

*�5� � �����CD� E��� ��������� �C� A� *�������� M6�� �-��A��� 1�� �D�CB� ���� A*"� �������

A�����CB� ��� �����AC��A����DD� �CD������CD� �#����F���� AC��>�AC�����A���C���� F����C�1AC�D�

��CD����EAD��A��5���E����N�AC�����$C���-��6A�� ��

�;���������A�C���C����B����������

#������C��A��F����CD�E���D���1���5����C��;;L"�����D�������������D�CB���A%��D������C��,�#�

��A��(�#�������A�AC���:�E.��7���C'M�;;� ������CD�E�����C����B���A���; ;;;�?�B�����;�

��C � 7��� D�F�CA�AC�� EAD� >�AC������� E���� ('8� N�AC�� )��� �2A� 4�A����A��� 0T��5�'

0���A���1�A���%AC��� �7�����D������CD��C��A%�EAD�F��������C��J�������D��FD�F4�&'���

�2A'4�A����A�� � �A%� EAD� F������� �C� ����AC� �A%� *���� �-��6A��� #AC�D� �A� *�>�������

%AC��� ���������8�'��2A���(:�F���A���A�����B��D����?��,;�?�(+;�����E���F�FA����C�

A��AC8�"7D�?� 2��� *AD��� �2A� 4�A����A��� AC�� D��FD�E��� F�D����C���A�� ���� D��A������ ����

�8�'��2A�B�� ��8�'��2A�EAD��A���������C�A��AC8�"7D�?��2A�4�A����A���AD������E�CBF�

J;0���;��.B�����!.B������@;���C�AC��&;;0��3;��.B�����@!.B�� �2��D�E������C�EAD�����C�

��4($����+���C�AC����?����C�3;:����AC��.,:�A������A����D������C��������1�������F�6�1��

�-��6A��� D�A�C�CB� ���� C�B��� �C� ���� �A) � 2��D� E��� D�ACC��� E���� 7�F���C� C3;;� �2A�

4�A����A��� �D�CB� ��AB�N�AC�� D���EA�� �2A� 4�A����A�� � 2��D� E��� D�A�C��� E���� �����U�A��

*���ADD��� -���� �2A� 4�A����A��� AC�� D�ACC��� E���� ��AB���ACC�� �2A� 4�A����A��� �D�CB�

"A1��AC�D���EA���2A�4�A����A�� ��

Page 34 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 37: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� C

$EC/,�*F� �

(8� -���� <A����� �-<�� ��2A� EAD� �A���� ����� AD� F�����D��� ��D��1��� �C�3�

� -�������

�������C��A��(��B��������AC�AC������������������E�����C����B�������;���C�A��& J;;�?�B�

A��3E*�AC���D�DF�C�����C�A���D�D�1������,+;��#�A��C��AF����A�����+;��#�1�D'7�D��(��#�

A87��� �:� 7���C� M'�;;�� +� �#� D������ ��������� �� �#� D������ F��F��DF�A���� �� �#�

D�����������ACA�A�������@;���C�A��3E* �#������C��A��F����CD�E�����C����B�������+���C�

A�� ,( ;;;� ?� B� �A���B��� -��)�AC�� AC�� ���� F����C� ��C��C�A���C� ��� ���� D�F�CA�AC�� EAD�

������C����D�CB� ��������'-*��ADDA�� �������� ����C��D� �#������C��A��F����CD� �+;�LB�� �C�

��A��CB�1����� �+:�B�������AC��; @:�*���ADD���1�����E��� ��A���� �C�A�3'�+:�-<'��2A�

BA���C��B����-��6A���AC�� ������BA���C�EAD��A�������('@���A��+;��� �7���-<�B���D��FD�

E�������E����A�D�A�F���AC����CA������C��(;��#�7�D�F4�& J��(;:�B��������3:��8����;;�

�#� �������������� �877��� ; ;(:� 1���F��C��� 1���� ��� �;� ��C� A�� C+E* � 7��� D��FD� E���

��A���� �C� A� �(:� �8�'��2A� B��� AC�� A� ��ADD��� �8�'��2A� ��BA���C� EAD� �A���� �����

�����E���1��!�D��C'1������D����D�A�C ��

C

�A��C����B����B��CA�A�����

�C'B��� ��B�D���C� EAD� F������� A�����CB� ��� A� D�AC�A�� ��FD�C� F������ � 2��� F����D� E���

EAD�����E����1��D����DD����D�FAA���1A��D����+;.+;�A���C�����A1�CA����<43*$@��+;��#�

AC��A����C��������*<� �2��D�E��������AC���������C�E�����;��#�877��C�(+��#�<43*$@�

AC��A�)��A���C�E����++��#�����A���A������C�(+��#�<43*$@�E���F������ �8�B�D���C�EAD�

D�1D�>��C����F����������&���A��@,E*�E�����;;�CB��������V�����FD�C������BA����DD������

�C�+;��#�<43*$@ �7���F�F����D�E����?�A�����D����DD������E����; +�:���W���A������A����

�7%���AC��+;:��*< ���F������?�A��D�E���������C�A��A�������C����B��AC��D�DF�C�����C�

(;�L"����; ;+:�7%���; ;+:�������A�����AC��(:��*< �4�"*�EAD�F��������C�AC������A���

@;;;�"*�D�D�����8��C�?� ���3�L��DA�F���EAD���A����A��(;�L�.��C'���C�A�F������C��A���B��

Page 35 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 38: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� �;

�D�A���CA��F�AD�F�*�J���F#AF��;;��+�L�9������CF�@;;�L��� � ��+���9�8��C�?��AC����DA�����

E����; ;J:�7%��AC��(:��*< ������3���C�� ����F������C��A���B��EAD���CC������ ��� ����

D�FAA��CB���F#AF�*�J������C��D�A���CA��F�AD�F�*�J���F#AF��;;��@�L�9������CF�,+�L��

� � �� �+;���9�8��C�?� �-����D�E���; �:�4*$$4��(:��*<����� AC��; �:�4*$$4�AC��

J;:��*<��-� �7���F�F�����D�FAA���C�EAD�A��������E����A���C�A�BA���C������;����@&:�-�

����J���C�A��@;;�C��.���C'� ��C�����CB������B�C�A���C�D��F�A���;;:�-�AC�������>����1A���C�

D��F� A�� �;;:� ��� �C�� �C� ���)� +;���C � A������ F�F����D� E��� ACA��D��� �C'��C��E���� A� "7N'

$1��AF��ADD�DF����������7�����A�����C���D�CB�A�CAC�������DFA���C���A�� ���C�5A���C�

�� @�)0���C�5A���C�F���C��A���EAD�F�������E������>����=�C����C�AC��A��AF���A��F�1����;�L��

� � 9�<�E�$1=������� ���F�������CD�E���ACA��D����D�CB�M�A��1��( ;,�E�������������E�CB��A�A'

��F�C��C��A�>��D����C�D��FD� ���F� �����#��D�AC� �C��1��AF� ��ADD'��'��AB��A���� ��.5��@;;� ���

�&;;�� F����������� AC�� �(�� #�.#�� �C� ��C�A� �AF� �>5� K�; (+�� A����A���C� �����K� @;��D�� AC��

�����D��C��C�B��K�3+:9���C���������� ����F�(�EAD��F�A����������������A=����CD����������

�C� D��F� � � 8�CA���� �?���D��C� �����EAD� D��� ��� C;� D � �� �A�A1AD�� D�A���EAD� F������� E����

M7AC����(;�; ;� ;� 3�����FF..EEE ���BF� �B.7�<8A#.� ��

C

��������C����������AB��C

$C�� F����� ��� ����1�CAC�� �2��@�� XYYYYYYYYYYZ[YYYYYYYYYZ[YYYYYY\� EAD�

A��������; ��F���������08�*���08�*�AC���-��'M"��C�����F�D�C������&(+�F�����7���C�A�

1�������C�A�C�CB�(+�#�#$����F4�, (���( +�#�B�������(+��#�#B*�(��+��#�A27���(�

�#� A87�� AC�� ; (+� �#� 877 � 7��� ��?� EAD� �C��1A���� ��� @;� ��C� A�� @;E*� �C��� �����

D���CB�� ��A�'�CA������� AC�� �7�� EAD� >�AC������� 1�� 1������C�D��C��� �C� ��������� F�A��D� AD�

�C���A����������7��4������6���������� �*�C���D��*� ��E���������C���1�����DD��C��������

)�CAD�� �C� 08�*� AC�� -��'M"'��C�A�C�CB� DA�F��D� �C� �A��� �?F����C�D�� 1�AC)D� �;�� E���

Page 36 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 39: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

� ��

������C���1�����DD��C�����7��AC���A?��A��F��DF����A���C�EAD��1�A�C���E����A�D�C�������

D�1D�A���������BCA�*������C��������%AC��� �

C

)�������B�����C

%�������D�DA�F��D�� �E��������C�������A��������AC���E�������1.�1������E����1�A�C���

��� ����C�D�A�C�CB� �?F����C�D � ����C���D����B�� EAD� F������� �C� 3L�� FAA���C�

��1������ ���A��C� ��?��� ����� D�����CD� �D�CB� A� ���D�� AC��'���AC� ���������� �� �-8�

-��D���C��D��%AC)��C�"A)���</������ ��C��B�C������A��EAD��1�A�C���1����A��A��C,E*� �C�A�

���A��� 1����� A�� F4� & � 7��� ����A���C� D�D���� EAD� 1AD��� �C� A� �C�'D��F� 1����C� ����

����C�F��?��AD�� D�A�C� �AC��D��C�� 8��$�� 2��D��F�� 8�C�A)�� �D�CB� @�@'��A��C�'

1�C5���C�� �8�-�������B�C���8��$��2��D��F��8�C�A)��D�1D�A��������E���1��4��A��C�

���C��D�A�C�CB � <�BA����� ��C���D� ��� �A��� D����� E��� F���DD��� ��C���C���� E���� F�1���

DA�F��D�1��������CB�F��A��AC��1��� �

�BAB�B�A�CA�A�����

8A�A�E���ACA��5����D�CB������C�DD� �'��D�����A���FA�'E�D�����FA�D�CD����B�E���A��D�AC��

��AC� �DF�CD�D� ��� ���� ������C�� ��A���C�D� ��D��� � 6�D���D� A�� F�D�C���� AD� ���� ��AC� ]�

D�AC�A������A���C���8������F���A��D��?F����C�D ���BC����AC��F�^F�FB; ;+��^^F�FB; ;� ��

C

Page 37 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 40: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

Page 38 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 41: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

Page 39 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 42: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

Page 40 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 43: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

��

Page 41 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 44: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation
Page 45: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation

�������������������ABCD��

Page 43 of 47

Hepatology

Hepatology

Page 46: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation
Page 47: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation
Page 48: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation
Page 49: Glycogen synthase kinase 3-mediated voltage-dependent anion channel phosphorylation controls outer mitochondrial membrane permeability during lipid accumulation