aerobios aerobios o anaerobios facultativos o anaerobios facultativos esporulados esporulados Bacillus Paenibacillus Brevibacillus Aneurinibacillus Alicyclobacillus Virgibacillus Amphibacillus Sporolactobacillus Halobacillus Gracilibacillus Salibacillus Género > 60 20 10 2 3 1 1 1 3 2 1 N° de especies Especies principales B. antrhacis B. cereus P. alvei P. larvae P. macerans P. polimyxa P. pulvifaciens B. brevis B. laterosporus A. aneurinolyticus A. migulanus A. acidocaldarius A. acidoterrestris A. cycloheptanicus A. pantothenticus A. xylanus S. imilinus S. salexigens
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Géneros de Bacilos gram positivos aerobios o anaerobios facultativos esporulados Bacillus Paenibacillus Brevibacillus Aneurinibacillus Alicyclobacillus.
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Géneros de Bacilos gram positivos Géneros de Bacilos gram positivos aerobios aerobios
o anaerobios facultativos esporuladoso anaerobios facultativos esporulados
Esporos: Pueden permanecer por muchos años en el ambiente inanimado (esporas de Pasteur > 70 años)
Son resistentes al calor (10 5 más veces que su forma vegetativa), a la irradiación (7 a 50 veces más que la forma vegetativa) y a algunos agentes químicos
Pueden pasar del medio ambiente a otros habitats alimentos secos (leche en polvo, especias, farináceos)
Cell of Cell of B. thurigiensisB. thurigiensis containing a containing a -endotoxin -endotoxin crystalline inclusion (arrow) and a forespore (S)crystalline inclusion (arrow) and a forespore (S)
Caracteres mínimos para Caracteres mínimos para diferenciardiferenciar
B. anthracis de B. cereusB. anthracis de B. cereus
Morfología
Motilidad
Cápsula
ß hemólisis
Sensibilidad a penicilina
Fermentación de
salicina
B. anthracis B. cereus
Bacilar, extremos
rectangulares,
cadenas largas
-
+
-
S
-
Bacilar, extremos
redondeados,
cadenas cortas
+ / -
-
+++
R
+
Antrhax: EtiologyAntrhax: Etiology
AnthraxAnthrax
Etiología: Bacillus anthracis
Infección primaria en herbívoros (ganado, ovejas, cabras, caballos) por ingestión de esporas del suelo.
Anthrax humano:
por contacto directo o indirecto (pelo, piel, lana) con el animal
Epidemiología del anthrax en el siglo Epidemiología del anthrax en el siglo XXIXXI
Industrial por el procesamiento de productos animales
contaminados:
pelo, hueso, piel, lana (anthrax cutáneo e inhalatorio)
No industrial
Intencional / bioterrorismo por exposición inhalatoria y cutánea a
esporas
de B. anthracis (correspondencia)
Por contacto directo con el animal infectado o
su
cadáver (anthrax cutáneo o gastrointestinal)
Personal de laboratorio en contacto con
esporas de
B. anthracis (raro)
Personal civil expuesto a productos animales
importados contaminados (raro)
Anthrax cutáneoAnthrax cutáneo
Período de incubación: 1 – 12 días
Pápula vescículas úlcera necrótica negra (escara)
Pueden estar presentes edema y enrojecimiento
95 a 99 % de los casos de anthrax humano en el mundo
Mortalidad sin tratamiento ATB: 20 %
con tratamiento ATB: 1 %
Anthrax cutáneoAnthrax cutáneo
Anthrax cutáneoAnthrax cutáneo
Lecitinasa
Anthrax respiratorioAnthrax respiratorio
Por exposición a piel, lana u otros productos animales contaminados con esporas
(durante su procesamiento) o por exposición intencional (bioterrorismo)
Período de incubación: 1 - 7 días (hasta 42 días en algunos casos)
1- Cuadro inespecífico (“simil viral”): fiebre, mialgias, fatiga, tos, malestar y dolor de pecho
2- Mejoría de 2 ó 3 días
3- Hipoxia, disnea, shock séptico y muerte dentro de las 36 horas (fase final)
Hallazgos físicos no específicos
Rx de tórax: - ensanchamiento mediastinal
- derrame pleural
- mediastinitis hemorrágica necrotizante
- ausencia de infiltrados pulmonares
Meningitis en el 50 % de los casos
Mortalidad sin tratamiento: 97 %
con tratamiento: 75 %
Anthrax gastrointestinalAnthrax gastrointestinal
Por ingestión de carne contaminada insuficientemente cocida
Período de incubación: 1 - 7 días
Dolor abdominal + vómitos de sangre o diarrea, fiebre, ascitis
masiva y signos de septicemia (fase final)
Ulceraciones orofaríngeas con adenopatía cervical y fiebre
(algunos casos)
Mortalidad: 25 - 60 % (rol del tratamiento antibiótico
precoz no establecido
AnthraxAnthraxToma de muestraToma de muestra
Anthrax cutáneo
- Hisopado del exudado de las vescículas destechadas (lesiones tempranas)
- Hisopado del borde de la escara sin remoción de la misma (lesiones tardías)
- Hemocultivo: si hay presentes síntomas de infección sistémica
Anthrax gastrointestinal
- Coprocultivo fase temprana
- Hemocultivos fase tardía
- Cultivo de líquido peritoneal y / o de aspiración de nódulos linfáticos,
esplénicos
o mesentéricos
- Hisopado de fauces (lesiones orofaríngeas)
Anthrax respiratorio
- Esputo si el paciente tiene tos productiva
- Hemocultivos 2 a 8 días después de la exposición
Anthrax y BioseguridadAnthrax y Bioseguridad
Procesamiento de muestras clínicas
Manipulación del cultivo
Actividades que generan aerosoles
Procesamiento de muestras ambientales
(esporos)
Actividades con la toxina
Dosis letal 50: 8000 - 40000 esporas
BSL - 2
BSL - 3
AnthraxAnthraxProcesamiento de muestrasProcesamiento de muestras
Muestras clínicas no esporas (CO2 corporal inhibe la esporulación) no shock térmico
Muestras ambientales (polvo, pelo, hueso y suelo) presente en forma de esporas
shock térmico (baño de agua a 65° C 10´) ó shock alcohólico (etanol 95 - 100%) Siembra: agar sangre ovina (o agar chocolate) - agar feniletilalcohol (coprocultivo) - caldo tripticasa soya Incubación: 35 - 37° C, atmósfera ambiente, 18 - 24 hs (crecimiento visible a partir de
las 6 a 8 hs) Esporulación Agar nutritivo con 5 mg de sulfato de manganeso
Incubación: atmósfera ambienteColoración de Gram ó Coloración de Verde de malaquita (Wirtz -
Conklin) Cápsula Agar nutritivo con 0.8 % de bicarbonato de sodio
Incubación: 5 % CO2
Tinta china ó M´FadyeanColonia sospechosa en 2.5 ml de sangre de caballoIncubación: 6 - 18 hs a 37° CTinción de M´Fadyean
Criterios de laboratorio para la Criterios de laboratorio para la identificación de identificación de Bacillus anthracisBacillus anthracis
Identificación presuntiva
1) A partir de la muestra clínica
- Coloración de Gram: Bacilos gram positivos en cadenas cortas
- Tinta china: cápsula +
- Esporas: generalmente ausentes (a menos que la muestra sea expuesta al O2
atmosférico)
2) A partir del cultivo (AS ovina)
- Gram: BGP no capsulados en cadenas largas
- Verde de malaquita: esporas ovales, centrales o subterminales que no ensanchan la célula
- Morfología colonial: colonia gris o blanca, adherente, lisa o ligeramente convexa con proyecciones en forma de coma desde el borde de la colonia (“cabeza de Medusa”)
Cuando la colonia se levanta con el ansa tiene la apariencia de una yema de huevo batida
- Inmóvil
- No hemolítico
- Lecitinasa +
- Sensible a penicilina 10 U: 15 - 20 mm
Bacillus anthracis on agarBacillus anthracis on agar