Fundamentos de Engenharia Genética. Revisões rDNA Materiais Vectores DNA a clonar Enzimas de Restrição Ligases do DNA Células hospedeiras Procedimento.

Fundamentos de Fundamentos de Engenharia GenéticaEngenharia Genética

RevisõesrDNA

Materiais Procedimento

Vectores

DNA a clonar

Enzimas de Restrição

Ligases do DNA

Células hospedeiras

1º Isolamento dos DNAs(Vector + DNA a clonar)

2º Endonucleases + Vector + DNA

3º Fragmento + Vector+ Ligase

4º Vector + célula hospedeira

cDNA

DNA polimerase

1

(Poli T)

CTAG GATC

Iniciador 2

5’

CTAG GATC

Imagem do manual – pág. 219

Bibliotecas de DNA

Bibliotecas Bibliotecas genómicasgenómicas

Bibliotecas de Bibliotecas de cDNAcDNA

Material Material genético genético

manipuladomanipulado Condição do DNACondição do DNA

Material a clonarMaterial a clonar

Função da Função da bibliotecabiblioteca

DNA mRNA

Natural

Artificial

Fragmentos de DNA (Intrões e Exões)

Genes isolados (Exões)

•Replicação•Armazenamento

•Replicação•Armazenamento•Síntese proteica

Impressões Digitais Genéticas

Exemplo:Paternidade

Actividade prática:

• Como construir uma biblioteca genómica/ cDNA de um ser de outro planeta?

• CSI - Episódio 35 – A sonâmbula