Ficha de Reumatología

8/18/2019 Ficha de Reumatología

http://slidepdf.com/reader/full/ficha-de-reumatologia 1/46

Presenta: Luis Valderrama.

Caracas, febrero de 2015.

Hospital Universitario de CaracasCentro de nfermedades !eum"ticas



#$%&' #L '%U#(&

U'$: Universidad de )lorida, *ainesville.

$po+ado por becas de investiaci-n del (nstit(nvestiaci-n de Lupus + el (nstituto acional de $nfermedades /usculoesuelticas + #ermatol-icas.

Presentado para publicaci-n en abril de 2013 acerevisado en septiembre de 201.



(%!&#UCC(4

l () tipo ( est" fuertemente implicado en la patonesis del L

mononucleares de sanre perifrica 6P7/Cs8 de apro9imadamepacientes adultos con L' + de casi todos los pacientes pedi"sobree9presan enes reulados por () tipo ( 6sello del ()8.

$dem"s, los individuos con < copias del cl=ster de enes pa

desarrollan lupus>li?e, + el ()@ e9acerba el lupus en ratones contraste, el %)@ es crDtico para la patonesis de la $!inflamatoria intestinal + psoriasis, las cuales son tratadas con (mismo.



(%!&#UCC(4

Hasta 0; de los pacientes tratados con inEibidores de %desarrollan $$s + 10 F 20 ; desarrollan autoanticuerpos anti>ds

1; de los pacientes desarrolla lupus clDnico.

La patonesis del lupus inducido por %)i siue siendo infactores de rieso son conocidos incompletamente. Los pasDndrome de 'Iren tratados con %)i Ean aumentado los nitipo (, lo ue suiere ue el %)@ reula neativamente su produ

l %)@ inEibe la eneraci-n de clulas dendrDticas plasmocitoila secreci-n de () tipo ( por ellas tras activaci-n viral.



(%!&#UCC(4

l cultivo in vitro de P7/Cs con un %)i aumenta la e9presi-n de

Los ratones 7 tratados con pristano son conocidos por desarrollde lupus impulsado por %L!>J asociado a la producci-n de ()acumulaci-n de clulas muertas en mdula -sea.

s probable ue las clulas muertas no depuradas sean la fuenend-enos de %L!>J ue impulsan la respuesta inflamatoria a pris



TLR7/9

IC: RNA/DNA-Ig

Fcγ RIIa

Célula dendrítica

IFN-α

P$!$#(*/$ #L !CP%&! #U$L6C#<2B%L!J>K8 L'


http://slidepdf.com/reader/full/ficha-de-reumatologia 7/46Rönnblo at al! Art"riti# R"eu $%

CD

plasmocitoide

IFN-

Apoptosis

ADN RNA

IgG LES

Necrosis

CD

MonocitoIFN-

P$!$#(*/$ #L !CP%&! #U$L6C#<2B%L!J>K8 L'



&7%(V&

Los TNFi son eficaces para el tratamiento y otras enfermedades inflamatorias, pero puede complicarse por el desarrollo de fende lupus-like. Este estudio se realizó para inel papel de TNF" en un modelo murino de lup

'e investia si ratones deficientes de %)@ 6%desarrollan lupus.



Lupus mediado por li!ando del TLR-# fue inducido tras la pristano en ratones $%#&L'( )&(* deficientes en TNF" )TNF"-'-*TNF" intacto de tipo sala+e como controles.

La producción de autoanticuerpos e FN tipo fue medida ede ratones, y los efectos de la presencia o ausencia de TNFdendrticas plasmocitoides )/0$s* productoras de FN tipo y dLy-($alto y neutrófilos productores de TNF" fueron determinada

P$C(%' M /N%&#&'





Ensayo por inmunoa1sorción li!ado a enzimas )EL2A*.

Los niveles de ( fueron medidos por L('$ para anti>'mB!P, an

U1>$ 6subconunto de anti>!P8.

nmunofluorescencia para ANAs.

'e detectaron anticuerpos antinucleares en suero.

Reacción en cadena de la polimerasa cuantitatia )3/$R*

Los an"lisis cuantitativos de PC! utiliOando $! de sanre periperitoneales.

P$C(%' M /N%&#&'



Reacción en cadena de la polimerasa cuantitatia )3/$R*

Los an"lisis cuantitativos de PC! utiliOando $! de sanre periperitoneales.

P$C(%' M /N%&#&'

Irf7 (factor 7 regulador de IFN). Mx1 (proteína 1 de resistencia a mixovirus).

CXC!. "#$# o %cf& (factor & de transcripci'n de %). Factor pi. CXC#. CXC*. +oc,# (gen # dedicado a cito-uinesis).

Il1. Il1 .



$itometra de flu+o.

Las clulas se incubaron con anti>C#1BC#<2 de rat-n antes de se

el anticuerpo primario o con el anticuerpo de isotipo control.'e utiliOaron los siuientes anticuerpos:

P$C(%' M /N%&#&'

anti-2ca-4.

anti-TNF". anti-Ly-(5. anti-&667. anti-$044c. anti-Ly-($. anti-$$R#.

anti-$0441.



0epleción de monocitos.

Liposomas ue contienen clodronato fueron utiliOados para l

monocitos peritoneales en los ratones %)@>B>, in+ectando 150 l despus de ue estos EabDan sido tratados con pristano las 2 semanas

Las clulas peritoneales fueron recoidas 2 dDas m"s tarde, + losmonocitos + P#Cs L+>C alto + L+>C bao fueron determinados.

e9presi-n de marcadores reulados por (), 'ca>1 6medida comintensidad de fluorescencia en citometrDa de fluo8 + Irf7 6determinacuantificaron.

P$C(%' M /N%&#&'



Transferencia de neutrófilos

Para los e9perimentos de transferencia de clulas, los ratones

donantes de neutr-filos fueron tratados con 1,5 ml (P tiolicolato3 5las clulas peritoneales fueron obtenidas de los ratones.

l clodronato ue contiene liposomas fue in+ectado <0 minutosin+ecci-n de tiolicolato. Las clulas peritoneales donantes fuedespus de su obtenci-n. Los esplenocitos de los mismos ratones docomo control + fueron tratados de manera similar.

Los l-bulos roos fueron lisados. < ratones %)@>B> pretratadossemanas antes recibieron 5910 clulas peritoneales depletadas6principalmente neutr-filos8 o 5910 esplenocitos 6principalmein+ectados (P.

P$C(%' M /N%&#&'



Transferencia de neutrófilos (continuación)

La composici-n de las poblaciones de clulas donantes fue

citometrDa de fluo.Como control positivo, los ratones %)@>B> fueron tratados con pr

semanas pero no recibieron clulas donantes3 los ratones %)@sirvieron como controles neativos.

EL2A de cito3uinas

'e realiO- L('$ para CCL1K + CQCL5. Ealuación de la !lomerulonefritis.

La celularidad lomerular se evalu- contando los n=cleos presentransversal de teido lomerular.

P$C(%' M /N%&#&'



El an9lisis estadstico

Los an"lisis estadDsticos fueron realiOaron utiliOando el softRare Pr

Las diferencias entre rupos se analiOaron mediante t de 'tudenindependientes o la prueba de /ann>Eitne+.

Los datos se e9presan como desviaci-n est"ndar para condistribuidos normalmente.

La normalidad fue determinada por el test de #Saostino + Person o

Los valores P inferiores a 0,05 fueron considerados sinificativos.

P$C(%' M /N%&#&'



!'UL%$#&'



















































!'UL%$#&'



Los ratones %)>B> no desarrollaron espontautoanticuerpos o manifestaciones clDnicas de lup

suiere ue la deficiencia de solamente %)@ es insuficausar lupus.

$unue los niveles de () tipo ( fueron comparableratones %)>B> no tratados + los ratones tipo salvae auellos %)>B> tenDan niveles elevados de P#Cs + cP#C circulantes, lo ue aumenta el potencial de pro() tipo (.

!'UL%$#&'

!'UL%$#&'



Los ratones %)@ al ser tratados con pristano desarrom"s rave en comparaci-n con los controles

caracteriOado por aumento en los niveles de autoantic'mB!P, () tipo (, P#Cs + monocitos inflamatorios.

n los ratones %)>B> tratados con pristano, el neutr-filos, promovedores de resoluci-n de inflamacdisminuido considerablemente, mientras ue la remonocitos inflamatorios + P#Cs + la producci-n de ()increment- + prolon-.

!'UL%$#&'

C&CLU'(4



iveles baos de %)@ aumentan el n=mero de P#C ciratones, meorando asD el potencial de producir ()embaro, esto solo conduce a la producci-n de ()autoinmunidad si e9iste e9posici-n concomitante end-enos de %L!>J, los cuales son liberados de clulasdespus del tratamiento con pristano.

n los seres Eumanos, la tasa del aclaramiento demuertas, unto con los niveles de %)@, puede influidesarrolle lupus posterior al tratamiento con %)i.

C&CLU'(4

Ficha de Reumatología

Documents