リムルスカラーKYシリーズエンドトキシン リポ多糖 LPS C因子 内の各因子は活性型を示す C因子 B因子 B因子 凝固酵素 前駆体 凝固酵素 発色

高感度エンドトキシン測定用試薬

リムルスカラーKYシリーズ

Limulus Color KY Test Wako&

Limulus Color KY Single Test Wako

エンドトキシンリポ多糖LPS

C因子

内の各因子は活性型を示す

C因子

B因子

B因子

凝固酵素前駆体

凝固酵素

発色合成基質

Boc-Thr-Gly-Arg-pNA

発色基

pNA

2

Limulus Color KY Series

リムルスカラーKY試薬の原理

エンドトキシンによる本試薬の発色機構は、ライセート中に含まれるセリンプロテアーゼ前駆体が順次活性化され、最後に凝

固酵素が黄色発色合成基質を水解し、発色基（pNA）が遊離して、黄色の発色を呈する原理に基づいています。

リムルスカラーKY試薬とは、日本薬局法のエンドトキシン試験法（比色法）に対応したライセート試薬です。

リムルスカラー試薬の発色カスケード機構

Endotoxin（LPS）

（1→3）-β-D-GlucanFactor C Factor C

Factor B

検体中の（1→3）-β-D- グルカンの影響を受けません

Peptidyl-pNA合成基質

Peptide + pNA（黄色発色）

Proclotting enzyme Clotting enzyme

内の各因子は活性型を示す

比色法

Factor B Factor G Factor G

3

1．高感度測定が可能（広範囲）高感度のため、反応干渉が強い試料を高倍率で希釈することにより、阻害・促進の影響を低減することが可能です。

2．エンドトキシンを特異的に検出（1→ 3）-β-D- グルカンの影響による偽陽性がなく再試験の必要がありません。

3．緩衝液や発色剤の分注が不要ライセート試薬と発色合成基質が一体で凍結乾燥されており、試薬溶解後に試料と混合するだけで測定が可能です。

リムスルカラーKYテストワコーでは 0.0005 EU/mL まで測定可能‼※リムルスカラー KYシングルテストワコーでは 0.0002 EU/mL まで測定可能（トキシノメーター ®使用時）

※最大有効希釈倍数（MVD）とは、試料溶液中に存在する反応干渉因子の影響を希釈により回避できるとき、許容される試料溶液の最大の希釈倍数である。

最大有効希釈倍数（MVD）※を大きくすることで希釈できる幅が広がります。測定が困難な医薬品も希釈だけで測定が可能になる事例があります。例）ナファモスタットメシル酸塩（プロテアーゼ阻害剤）

エンドトキシン特異的試薬とは……大過剰の（1→ 3）- β -D- グルカン（カルボキシメチル化カードラン）を共存させることにより、β - グルカンによるライセート試薬の活性化を阻害し、エンドトキシンを特異的に検出します。

エンドトキシン規格値 ：0.50 EU/mL検量線最小濃度 ：0.01 EU/mL試料溶液濃度 ：1

エンドトキシン規格値 ：0.50 EU/mL検量線最小濃度 ：0.0005 EU/mL試料溶液濃度 ：1

MVD=50倍希釈 MVD=1000倍希釈

特長

共存薬剤

0.9％ NaCl3％ NaCl

2.5％ブドウ糖リンゲル液（原液）硫酸Mg（50 mM）

イオタラム酸メグルミン（1.0％）炭酸水素Na（0.25％）クエン酸Na（0.1％）

ヘパリンNa（10 U/mL）キシリトール（2.5％）

エンドトキシン抽出液（0.1％）

0

831009010479859611090100123

50 100 150（％）

4

Limulus Color KY Test Wako

● リムルスカラーKYテストワコーの特長

● リムルスカラーKYテストワコーを用いた測定方法（プレートリーダー法）

● 各種薬剤におけるエンドトキシンの添加回収率

1．標準品（JP-RSE, USP-RSE, CSE）を所定の濃度となるように溶解し、エンドトキシンの希釈溶液（検量線用）を調製　　※段階希釈は 10倍を超えない範囲で行う

2．ライセート試薬をエンドトキシン試験用水で溶解し、氷冷（溶解時に緩衝液の使用は不要）

リムルスカラー KYテストワコーの実績データ（添加回収率％：参考データ）

3．96穴マイクロプレートに 50μLの試料（検量線用希釈用液及び検体）を分注

4．溶解したライセート試薬 50μLをすばやく添加

5．マイクロプレートの蓋を外してプレートリーダーにセットし測定開始

①アルミキャップを外す ② ゴム栓をゆっくりと持ち上げ、エンドトキシン試験用水を加え再び蓋をする

③ 蓋に液がつかないようにゆっくりと振り混ぜる

凍結保存

使用前 使用後（残り）

試薬の無駄がありません

溶解後の安定性に優れており、凍結保存※が可能　※凍結融解は 1回のみ

（溶解後、氷冷下で 6時間安定。－ 80℃以下で凍結保存可能）

回帰式：log (Ta)=0.313644 log (C)+0.932002 r=－0.9994

0.0010 0.0100 0.1000 1.0000

100.0

10.0

濃度値（EU/mL）

Ta（min）

5

● 参考データ

■ 測定条件装置 MPRエンドトキシン測定システム試薬 リムスルカラー KYテストワコー測定法 カイネティック法（Onset time 法）測定温度 37℃測定波長 405 nm（主波長）－ 650 nm（副波長）Onset OD 0.015測光間隔 40 秒測定時間 200 分撹拌条件 測定開始前に 5秒間自動撹拌

■ 検量線標準品 USP-RSE検量線濃度 0.0005-0.005-0.05-0.5-5.0 EU/mL

エンドトキシン濃度（EU/mL）

活性化時間（分）

NC ＞ 200 ＞ 200 ＞ 2000.0005 100.7 86.7 94.00.005 44.7 44.7 44.30.05 21.0 22.0 22.30.5 10.3 10.7 11.15.0 5.0 5.2 5.3

相関係数 － 0.9994専用ソフトウェア「トキシマスター ®」での検量線表示

※ 弊社推奨プレートリーダー以外をご使用の場合は、右記に記載の測定条件に対応可能かをご確認ください。プレートリーダーの種類によっては測定が困難な場合がございます。

コードNo． 品名 内容量 希望納入価格（円）

299-35441

MPRエンドトキシン測定システム ER/ES セット for BT［セット内容］ ・吸光リーダー ELx808IU ・トキシマスター ® QC8 ER/ES MPR（5ライセンス） ・パソコン（サーバー兼クライアント） ・検証資料 ・IQ/OQサービス

1式 3,100,000

292-35431

MPRエンドトキシン測定システム標準セット for BT［セット内容］ ・吸光リーダー ELx808IU ・トキシマスター ® QC7 MPR ・パソコン

1式 1,900,000

※ パソコンは、メーカーや機種等が写真と異なる場合がございます。

推奨プレートリーダーMPRエンドトキシン測定システム

6

Limulus Color KY Single Test Wako

● リムルスカラーKYシングルテストワコーの特長

● リムルスカラーKYシングルテストワコーを用いた測定方法

● トキシノメーター ®の測定原理

1．標準品（JP-RSE, USP-RSE, CSE）を所定の濃度となるように溶解し、エンドトキシンの希釈溶液（検量線用）を調製　　※段階希釈は 10倍を超えない範囲で行う

2．必要本数分のシングル試薬を常温に戻しアルミキャップを外す

3．0.2 mL の試料をシングル試薬に分注する（分注前に 30秒以上撹拌）

4．分注後、5秒間撹拌しトキシノメーター ®（測定する 20分前にスイッチを入れておく）にセットし測定開始する

発光ダイオードから出た光は、光源側の絞り①を通って反応試験管の反応液中に入ります。反応液を透過し、フォトセル側の絞り②を通ってきた透過光量をシリコンフォトセルによって検出します。

① 試料溶液又はエンドトキシン溶液を 0.2 mL 加える

② 5秒間撹拌する　（泡がないことを確認）

③トキシノメーター ®にセットする　※ 2 本目以降は既にセットされている試験管に

触れないように注意する

超高輝度青色 LED（中心波長 430nm） シリコンフォトセル

絞り①試薬＋検体

絞り②

透過光量を検出

最高感度が 0.0002 EU/mL　※測定にはトキシノメーター ®が必要

試料で溶解するだけの簡単操作で試薬の無駄がない

0 0.0001 0.001 0.01 0.1 1

110256

16

4

100

90

80

70

60

50

4020 40 60

時間（min.） エンドトキシン濃度（EU/mL）

NC（ネガティブコントロール）0.0002 EU/mL0.0005 EU/mL0.005 EU/mL0.05 EU/mL0.5 EU/mL

0.0002 EU/mL0.0005 EU/mL0.005 EU/mL0.05 EU/mL0.5 EU/mL

透過光量比（％）

反応時間（min.）

80 100 120 140 160 180 200

7

● タイムコースグラフと検量関係

● トキシノメーター測定条件

測定法 カイネティック法（Onset time 法）

しきい値 94.9％

カウント 3

ウエイト 5 分

測定時間 200 分

コードNo． 品名 内容量 希望納入価格（円）

295-35781

トキシノメーター ® ET-7000/J ER/ES セット［セット内容］ ・トキシノメーター ® ET-7000/J（1台） ・トキシマスター ® QC8 ER/ES（5ライセンス） ・パソコン（サーバー兼クライアント） ・検証資料 ・IQ/OQサービス

1式 3,000,000

298-35771

トキシノメーター ® ET-7000/J 標準セット［セット内容］ ・トキシノメーター ® ET-7000/J（1台） ・トキシマスター ® QC7 ・パソコン

1式 1,900,000

291-35761トキシノメーター ® ET-7000/J※拡張モジュール

1台 1,400,000

※ パソコンは、メーカーや機種等が実際と異なる場合がございます。

19208 開 01K

比色法試薬リムルスカラーKYテストワコー

コードNo． 品名 測定範囲 内容量 希望納入価格（円）

291-53101 リムルスカラーKYテストワコー 0.0005-5 EU/mL120 回用※

2 mL × 3バイアルCSE× 1バイアル

54,000

※トキシノメーター法の場合、内容量は 60回用となります。

リムルスカラーKYシングルテストワコーコードNo． 品名 測定範囲 内容量 希望納入価格（円）

291-53601 リムルスカラーKYシングルテストワコー 0.0002-5 EU/mL25 回用

0.2 mL × 25バイアルCSE× 1バイアル

50,000

関連製品コードNo． 品名 内容量 希望納入価格（円）

■ エンドトキシン試験用チップ

294-35011 バイオクリーンチップワコー ® エクステンド SⅡ 100 本 6,000

291-35021 バイオクリーンチップワコー ® 200 Ⅱ 100 本 3,600

298-35031 バイオクリーンチップワコー ® 1000 Ⅱ 100 本 3,600

■ エンドトキシン試験用プレート

293-35221 バイオクリーンプレートワコー™ 50 枚 30,000

■ エンドトキシン試験用チューブ

292-32751 リムルステストチューブ -S アルミキャップ付 10 本× 8 16,000

その他の推奨品（弊社では販売しておりません）推奨品 必要性能

連続分注器 50μL 分注可能

連続分注器専用チップ エンドトキシンフリー

※プレートリーダー法のみ必要となります。

●本文に収載しております試薬は、試験・研究の目的のみに使用されるもので、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとして使用できません。●希望納入価格には消費税が含まれておりません。●本カタログの内容は予告なしに仕様、デザイン、希望納入価格を変更することがあります。最新情報につきましてはお問合せください。●本カタログの記載内容は、2019年 2月現在のものです。

エンドトキシン特異的

エンドトキシン特異的

CSE付

CSE付

プレートリーダー法 トキシノメーター法

トキシノメーター法

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