Factores de Desarrollo Microbiano.

DILUCIONES DIRECTASCultivo: Enterobacter aergenes. en caldo nutritivo.Objetivo: Determinar la concentracin del cultivo.Desarrollo: Siembra por diluciones en medio de cultivo Agar para Recuento en Placa (PCA), incubacin: 48 h/37C.

Dilucin: 10-3 Dilucin: 10-4 Dilucin: 10-5

Dilucin: 10-6

Concentracin: 2 x 108 ufc/ml

Dilucin: 10-3

Recuento: > 300 ufc

Dilucin: 10-4

Recuento: > 300 ufc

Dilucin: 10-5

Recuento: > 300 ufc

Dilucin: 10-6

Recuento: 195 ufc

Dilucin: 10-7

Recuento: 21 ufc

Dilucin: 10-8

Recuento:

TEMPERATURAInculo: Cultivo puro de Enterobacter aergenes; Concentracin: 2,7 x 104 ufc/ml. Siembra: 1 ml del inculo en 9 ml de caldo nutritivo.Tratamientos: Incubacin a distintas temperaturas: I) T = -18C (freezer); II) T = 5C (Refrigeracin) ; III) T = 25C (ambiente); IV) T = 30C; V) T = 37 C; VI) T = 42C; VII) T = 45C; VIII) T = 50C; IX) T = 55C; X) T = 65C; X) T = 75C.Tiempo de incubacin: Todos los tratamientos se incubaron 24 h.Recuento: Siembra por diluciones en Agar para Recuento en Placa, incubacin 48h/37C.

Inculo: Dilucin 10-1

Concentracin inicial: 2,7x103 ufc/ml

I) T= -18C. Dilucin 10 -1Concentracin final:

1,54x103 ufc/ml

II) T= 5C. Dilucin 10 -1Concentracin final:

2,01x103 ufc/ml

III) T= 25C. Dilucin 10 -4Concentracin final:

2,8x108 ufc/ml

IV) T= 30C. Dilucin 10 -5Concentracin final:

3,0x108 ufc/ml

V) T= 37C. Dilucin 10 - 6

Concentracin final: 3,2x109 ufc/ml

VII) T= 45C. Dilucin 10 -3VI) T= 42C. Dilucin 10 -4



VIII) T= 50C. Siembra directa (1 ml).

Concentracin final: < 3 ufc/ml

IX) T= 55C. Siembra directa (1 ml).


XI) T= 75C. Siembra directa (1 ml).Concentracin final:

< 3 ufc/ml

X) T= 65C. Siembra directa (1 ml).


pHInculo: Cultivo puro de Enterobacter aergenes; Concentracin: 2,7 x 104 ufc/ml.Siembra: 1 ml del inculo en 9 ml de caldo nutritivo de diferentes pH: I) pH = 2; II) pH = 4; III) pH = 5; IV) pH = 6; V) pH = 7; VI) pH = 8; VII) pH =9; VIII) pH = 10; IX) pH = 12; X) pH = 14.Incubacin: 24 h/37C. Recuento: Siembra por diluciones en Agar para Recuento en Placa, incubacin 48h/37C.


I) pH = 2. Siembra directa (1 ml).

II) pH = 4. Siembra directa (1 ml).Concentracin final:

< 3 ufc/ml

III) pH = 5. Dilucin 10-2


IV) pH = 6. Dilucin 10-5


V) pH = 7. Dilucin 10-6


VI) pH = 8. Dilucin 10-5


VII) pH = 9. Dilucin 10-2


VIII) pH = 10. Siembra directa (1 ml).Concentracin final:

3,50x103 ufc/ml

IX) pH = 12. Siembra directa (1 ml).


X) pH = 14. Siembra directa (1 ml).Concentracin final:

< 3 ufc/ml

PRESENCIA DE INHIBIDORES

Inculo: Cultivo puro de Enterobacter aergenes; Concentracin: 2,7 x 104 ufc/ml.Siembra: 1 ml del inculo en 9 ml de caldo nutritivo con: I) 600 ppm de Sorbato de potasio; II) 320 ppm de Cloro; III) 0,03 UI de Penicilina.Incubacin: 24 h/37C. Recuento: Siembra por diluciones en Agar para Recuento en Placa, incubacin 48h/37C.

Inculo: Dilucin 10-1 Tratamiento I: Sorbato de potasio 600 ppm. Dilucin 10-5

Tratamiento II: Cloro 320 ppm. Siembra directa (1ml del cultivo). Tratamiento III: Penicilina 0,03 UI. Siembra directa (1ml del cultivo).


Tratamiento I: Sorbato de potasio 600 ppm.

Concentracin final : 1,3x108 ufc/ml

Tratamiento II: Cloro 320 ppm. Concentracin final : < 1 ufc/ml

Tratamiento III: Penicilina 0,03 UI.Concentracin final : < 1 ufc/ml

RELACIN CON OXIGENOInculo: Cultivo puro de Enterobacter aergenes; Concentracin: 2,7 x 104 ufc/ml.Siembra: 1 ml del inculo en 9 ml de caldo nutritivo (tubo A y tubo B).Incubacin: 24 h/37C. Tubo A: sin restriccin de O xgeno; Tubo B: con restriccin de Oxgeno.Recuento: Siembra por diluciones en Agar para Recuento en Placa, incubacin 48h/37C.

Inculo [2,7x104 ufc/ml] Tubo A: O2 disponible Tubo B: O2 restringido


Concentracin Final (O2 disponible): 3,2x109 ufc/ml

Concentracin Final (O2 restringido): 2,8x107 ufc/ml

Inculo: Dilucin 10-1 Tubo A: Dilucin 10-6 Tubo B: Dilucin 10-2

Factores de Desarrollo Microbiano.

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