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DILUCIONES DIRECTASCultivo: Enterobacter aergenes. en caldo nutritivo.Objetivo: Determinar la concentracin del cultivo.Desarrollo: Siembra por diluciones en medio de cultivo Agar para Recuento en Placa (PCA), incubacin: 48 h/37C.
Dilucin: 10-3 Dilucin: 10-4 Dilucin: 10-5
Dilucin: 10-6
Concentracin: 2 x 108 ufc/ml
Dilucin: 10-3
Recuento: > 300 ufc
Dilucin: 10-4
Recuento: > 300 ufc
Dilucin: 10-5
Recuento: > 300 ufc
Dilucin: 10-6
Recuento: 195 ufc
Dilucin: 10-7
Recuento: 21 ufc
Dilucin: 10-8
Recuento:
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TEMPERATURAInculo: Cultivo puro de Enterobacter aergenes; Concentracin: 2,7 x 104 ufc/ml. Siembra: 1 ml del inculo en 9 ml de caldo nutritivo.Tratamientos: Incubacin a distintas temperaturas: I) T = -18C (freezer); II) T = 5C (Refrigeracin) ; III) T = 25C (ambiente); IV) T = 30C; V) T = 37 C; VI) T = 42C; VII) T = 45C; VIII) T = 50C; IX) T = 55C; X) T = 65C; X) T = 75C.Tiempo de incubacin: Todos los tratamientos se incubaron 24 h.Recuento: Siembra por diluciones en Agar para Recuento en Placa, incubacin 48h/37C.
Inculo: Dilucin 10-1
Concentracin inicial: 2,7x103 ufc/ml
I) T= -18C. Dilucin 10 -1Concentracin final:
1,54x103 ufc/ml
II) T= 5C. Dilucin 10 -1Concentracin final:
2,01x103 ufc/ml
III) T= 25C. Dilucin 10 -4Concentracin final:
2,8x108 ufc/ml
IV) T= 30C. Dilucin 10 -5Concentracin final:
3,0x108 ufc/ml
V) T= 37C. Dilucin 10 - 6
Concentracin final: 3,2x109 ufc/ml
VII) T= 45C. Dilucin 10 -3VI) T= 42C. Dilucin 10 -4
Concentracin final: 3,38x107 ufc/ml
Concentracin final: 3,10x107 ufc/ml
VIII) T= 50C. Siembra directa (1 ml).
Concentracin final: < 3 ufc/ml
IX) T= 55C. Siembra directa (1 ml).
Concentracin final: < 3 ufc/ml
XI) T= 75C. Siembra directa (1 ml).Concentracin final:
< 3 ufc/ml
X) T= 65C. Siembra directa (1 ml).
Concentracin final: < 3 ufc/ml
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pHInculo: Cultivo puro de Enterobacter aergenes; Concentracin: 2,7 x 104 ufc/ml.Siembra: 1 ml del inculo en 9 ml de caldo nutritivo de diferentes pH: I) pH = 2; II) pH = 4; III) pH = 5; IV) pH = 6; V) pH = 7; VI) pH = 8; VII) pH =9; VIII) pH = 10; IX) pH = 12; X) pH = 14.Incubacin: 24 h/37C. Recuento: Siembra por diluciones en Agar para Recuento en Placa, incubacin 48h/37C.
Concentracin final: < 3 ufc/ml
I) pH = 2. Siembra directa (1 ml).
II) pH = 4. Siembra directa (1 ml).Concentracin final:
< 3 ufc/ml
III) pH = 5. Dilucin 10-2
Concentracin final: 2,00x108 ufc/ml
IV) pH = 6. Dilucin 10-5
Concentracin final: 2,10x109 ufc/ml
V) pH = 7. Dilucin 10-6
Concentracin final: 3,20x109 ufc/ml
VI) pH = 8. Dilucin 10-5
Concentracin final: 4,00x108 ufc/ml
VII) pH = 9. Dilucin 10-2
Concentracin final: 4,00x107 ufc/ml
VIII) pH = 10. Siembra directa (1 ml).Concentracin final:
3,50x103 ufc/ml
IX) pH = 12. Siembra directa (1 ml).
Concentracin final: < 3 ufc/ml
X) pH = 14. Siembra directa (1 ml).Concentracin final:
< 3 ufc/ml
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PRESENCIA DE INHIBIDORES
Inculo: Cultivo puro de Enterobacter aergenes; Concentracin: 2,7 x 104 ufc/ml.Siembra: 1 ml del inculo en 9 ml de caldo nutritivo con: I) 600 ppm de Sorbato de potasio; II) 320 ppm de Cloro; III) 0,03 UI de Penicilina.Incubacin: 24 h/37C. Recuento: Siembra por diluciones en Agar para Recuento en Placa, incubacin 48h/37C.
Inculo: Dilucin 10-1 Tratamiento I: Sorbato de potasio 600 ppm. Dilucin 10-5
Tratamiento II: Cloro 320 ppm. Siembra directa (1ml del cultivo). Tratamiento III: Penicilina 0,03 UI. Siembra directa (1ml del cultivo).
Concentracin inicial: 2,7x103 ufc/ml
Tratamiento I: Sorbato de potasio 600 ppm.
Concentracin final : 1,3x108 ufc/ml
Tratamiento II: Cloro 320 ppm. Concentracin final : < 1 ufc/ml
Tratamiento III: Penicilina 0,03 UI.Concentracin final : < 1 ufc/ml
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RELACIN CON OXIGENOInculo: Cultivo puro de Enterobacter aergenes; Concentracin: 2,7 x 104 ufc/ml.Siembra: 1 ml del inculo en 9 ml de caldo nutritivo (tubo A y tubo B).Incubacin: 24 h/37C. Tubo A: sin restriccin de O xgeno; Tubo B: con restriccin de Oxgeno.Recuento: Siembra por diluciones en Agar para Recuento en Placa, incubacin 48h/37C.
Inculo [2,7x104 ufc/ml] Tubo A: O2 disponible Tubo B: O2 restringido
Concentracin inicial: 2,7x103 ufc/ml
Concentracin Final (O2 disponible): 3,2x109 ufc/ml
Concentracin Final (O2 restringido): 2,8x107 ufc/ml
Inculo: Dilucin 10-1 Tubo A: Dilucin 10-6 Tubo B: Dilucin 10-2
