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UNIVERSIDAD DE JAN FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES
DEPARTAMENTO DE BIOLOGA ANIMAL, VEGETAL Y ECOLOGA
TESIS DOCTORAL
ESTUDIO ETNOBOTNICO EN EL PARQUE NATURAL DE LA SIERRA DE
CAZORLA,
SEGURA Y LAS VILLAS. INVESTIGACIN QUMICA DE UN GRUPO DE
ESPECIES
INTERESANTES
PRESENTADA POR: ANA M FERNNDEZ OCAA
DIRIGIDA POR:
DR. D. CARLOS FERNNDEZ LPEZ DR. D. JOAQUN ALTAREJOS
CABALLERO
JAN, 12 DE MAYO DE 2000
ISBN 84-8439-043-8
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CentroDepartamento
ESTUDIO ETNOBOTNICO EN EL PARQUE NATURAL DE LAS SIERRAS
DECAZORLA, SEGURA Y LAS VILLAS. INVESTIGACIN QUMICA DE UN
GRUPO DE ESPECIES INTERESANTES
Fernndez OcaaAna M
Facultad de Ciencias ExperimentalesBiologa Animal, Vegetal y
Ecologa
84-8439-043-8I.S.B.N
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FERNNDEZ OCAAApellidosANA MNombre
ESTUDIO ETNOBOTNICO EN EL PARQUE NATURAL DE LASSIERRAS DE
CAZORLA, SEGURA Y LAS VILLAS. INVESTIGACINQUMICA DE UN GRUPO DE
ESPECIES INTERESANTES
12 DE MAYO DE 2000
Facultad de Ciencias ExperimentalesCentroBiologa Animal, Vegetal
y EcologaDepartamento
Dr. D. Carlos Fernndez Lpez y Dr. D. Joaqun Altarejos
CaballeroDireccin de la Tesis
Dr. D. Adolfo Snchez RodrgoPresidente/a del Tribunal
Dr. D. Joan Valls i Xirau
Dr. D. Ramn Morales ValverdeDr. D. Flix Llamas Garca
Dra. D Karla Slowing BarillasSecretario/a
Vocales
Composicin del Tribunal / Direccin de la tesis
Nombre y apellidos del autor
Ttulo de la Tesis Doctoral
Fecha de lectura
Centro y Departamento en que fue realizada la lectura
Calificacin obtenida
SOBRESALIENTE CUM LAUDE POR UNANIMIDAD
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Resumen:
En el macizo Cazorla-Segura se han censado un total de 571
txones vegetales pertenecientes a 100 familas botnicas diferentes,
fruto de la recopilacin del saber popular de la zona. De entre
dichos txones 322 son usados en medicina popular, 24 se aplican
como remedios veterinarios, fundamentalmente con el ganado, 172 se
citan como alimento humano o bien como bebida aperitiva, 96 txones
son alimento de animales, 34 son ornamentales, 18 son especies
txicas o venenosas, 43 son utilizadas en explotacin maderera o para
fabricacin de aperos, 14 se utilizan con fines mgicos o
ceremoniales, 21 especies o subespecies estn referidas a juegos,
refranes o dichos populares y 91 de ellas presentan otros usos. La
edad media de los informantes de la muestra arroja un valor de 57
aos, lo que denota el envejecimiento de la cultura etnobotnica en
el rea de estudio donde los jvenes juegan un papel minoritario. Se
han calculado una serie de ndices etnobotnicos y adems se ha
realizado un "screening" fitoqumico de 65 especies vegetales con
usos populares.
Se han identificado por cromatografa de gases-espectrometra de
masas un total de 75
componentes distintos en el aceite esencial de parte area y de
63 componentes en el aceite esencial de agallas de una muestra de
Pistacia lentiscus. El anlisis realizado mediante la tcnica
combinada cromatografa de gases-espectrometra de masas sobre el
aceite esencial de Pistacia terebinthus supone la primera aportacin
al conocimiento de la composicin qumica de componentes voltiles de
dicha especie. De ambas especies se ha seguido un estudio fenofsico
de la variacin en los componentes mayoritarios, tanto de parte area
como de los distintos rganos que componen la misma, para diferentes
localidades de la provincia de Jan.
El estudio del aceite esencial de Bupleurum gibraltaricum indica
la presencia de 136
componentes diferentes de los cuales se han identificado 103,
representando el 95,9 % del total de la esencia. De dicha especie
se ha realizado un seguimiento estacional. El estudio de la
actividad antiinflamatoria del aceite esencial de hojas de
Bupleurum gibraltaricum, realizado sobre lotes de ratones,
utilizando el ensayo de Sugishita et al. (1981), modificado por
Slowing et al. (1994), ha demostrado una excelente actividad in
vivo de la inhibicin de la inflamacin en fase aguda, siendo todos
los datos significativos, segn el test estadstico de Neuman
Keul's.
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UNIVERSIDAD DE JAN
FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES
Dpto. de Biologa Animal, Vegetal y Ecologa
Estudio Etnobotnico en el Parque Natural de las Sierras de
Cazorla, Segura y Las Villas. Investigacin qumica de un grupo de
especies
interesantes
TESIS DOCTORAL
Ana M Fernndez Ocaa Jan, 2000
-
UNIVERSIDAD DE JAN
FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES
Dpto. de Biologa Animal, Vegetal y Ecologa
Estudio Etnobotnico en el Parque Natural de las Sierras de
Cazorla, Segura y Las Villas.
Investigacin qumica de un grupo de especies interesantes
TESIS DOCTORAL
Memoria que para optar al grado de Doctora en Ciencias
presenta:
Ana M Fernndez Ocaa
Trabajo realizado bajo la direccin de:
Dr. D. Carlos Fernndez Lpez Dr. D. Joaqun Altarejos
Caballero
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Agradecimientos Quiero expresar mi ms sincero agradecimiento a
todos los que han hecho posible la realizacin de esta Tesis
Doctoral, y muy especialmente: Al Dr. D. Carlos Fernndez Lpez y al
Dr. D. Joaqun Altarejos Caballero, directores de este trabajo, por
su apoyo y ayuda constantes en la resolucin de mis dudas, y por su
amistad y paciencia en los momentos de la redaccin. Al Dr. D. Jose
Luis Viejo Montesinos, mi tutor en la Universidad Autnoma de
Madrid, gracias al cual he podido realizar mis cursos de doctorado.
Al Dr. D. Angel Mara Villar del Fresno, Catedrtico de Farmacologa
en la Facultad de Farmacia de la Universidad Complutense, en donde
realic una estancia de investigacin, y a las Dras. M Emilia
Carretero Accame y Karla Slowing Barillas, que dirigieron mi
trabajo en esos meses de estancia y me brindaron su amistad y
cario. Al Dr. D. Arturo Velasco Negueruela, con el que hemos
mantenido siempre una cordial relacin y a la licenciada D Pilar
Prez. Ambos han sido ayuda constante en la clarificacin de nuestros
problemas "esenciales". A los alumnos de Biologa, que me
facilitaron el contacto con los informantes, muchos de ellos
familiares suyos y por supuesto, a mis queridos informantes,
verdaderos protagonistas de este trabajo, por su valiosa y
desinteresada ayuda, su alegria contagiosa y por ese carcter tan
maravilloso que tiene la gente de campo. A todos los compaeros del
Departamento de Biologa Animal, Vegetal y Ecologa, en especial a M
Victoria, Gracia y Reyes, por sus consejos y constante preocupacin.
Muy especialmente a mis amigos Ana Camacho, mi compaera inseparable
de fatigas en el laboratorio y en el campo, en la que tantas veces
me he apoyado, a Juan Luis, Carlos y Jos Manuel, por su ayuda en la
taxonoma, a Matilde Carazo que me proporcion numerosos datos sobre
tipos biolgicos y distribucin de las plantas, a Trini Parras por su
ayuda con los diagramas bioclimticos, a Enrique Triano, incansable
trabajador y estupendo fotgrafo, que nos brind su valiossima
coleccin de diapositivas, a Encarna Ruiz por sus consejos y a mi
familia y amigos de Madrid, por sus constantes nimos. Agradezco
asimismo a la Junta de Andaluca el haberme concedido un Beca de
Formacin de Personal Docente e Investigador, de la que disfrut y
que hizo posible la ejecucin de mi trabajo. A toda mi familia: a
Enrique, a mis padres y hermanas, a mi querida abuela, a Juan
Carlos y a Agustn y a Juan Carlitos, a los que tantos momentos he
robado, por su paciencia y comprensin al no dedicarles todo el
tiempo que hubiese querido.
GRACIAS A TODOS.
-
a Enrique a mis padres
-
NDICE I.- INTRODUCCIN Y
JUSTIFICACIN...............................................................1
II.-
OBJETIVOS............................................................................................................5
III.
ANTECEDENTES................................................................................................9
III.1.
Botnica.....................................................................................................11
III.2. Estudio fitoqumico
cualitativo................................................................13
III.3. Composicin qumica de Pistacia lentiscus
L.........................................15
III.3.1. Componentes
voltiles......................................................15
III.3.1.1. Componentes voltiles de la
resina....................15
III.3.1.2. Componentes voltiles de
hojas.........................18 III.3.1.3. Componentes voltiles de
hojas y tallos............21 III.3.1.4. Componentes voltiles de
frutos........................22
III.3.2. Componentes no
voltiles.................................................25 III.4.
Composicin qumica de Pistacia terebinthus
L.....................................29
III.4.1. Componentes
voltiles......................................................29
III.4.2. Componentes no
voltiles.................................................29
III.4.3. Componentes voltiles de otras especies de
Pistacia.......34
III.5. Composicin qumica de Bupleurum gibraltaricum
Lam.......................35
III.5.1. Componentes
voltiles........................................................35
III.5.2. Componentes no
voltiles...................................................37
III.5.3. Componentes voltiles de otras especies de Bupleurum
sp..................................................................................38
III.5.4. Actividades biolgicas ensayadas en especies del gnero
Bupleurum....................................................................
41
III.5.4.1. Bupleurum falcatum
L.......................................41 III.5.4.1.1. Actividad
antiinflamatoria..................43 III.5.4.1.2. Actividad
hormonal............................43 III.5.4.1.3. Actividad sobre
el sistema inmunolgico...........................................43
III.5.4.1.4. Actividad sobre la funcionalidad
renal...............................................44 III.5.4.1.5.
Actividad sobre el aparato
digestivo................................................................44
III.5.4.1.6. Actividad sobre el sistema nervioso
central.....................................................44
III.5.4.1.7. Efectos a nivel ultraestructural............45
III.5.4.2. Bupleurum gibraltaricum
Lam............................45 III.5.4.3. Otras especies de
Bupleurum sp...........................46
-
IV.- MEDIO
FSICO...................................................................................................49
IV.1. Situacin y
lmites....................................................................................51
IV.2.
Geologa....................................................................................................55
IV.2.1. Historia
geolgica.....................................................................55
IV.2.2. Orogenia y
Tectnica................................................................56
IV.2.2.1. Las Cordilleras
Bticas..............................................57 IV.2.2.1.1.
Prebtico Externo.......................................58
IV.2.2.1.2. Prebtico
Interno.........................................59 IV.2.3.
Geomorfologa..........................................................................60
IV.3.
Edafologa.................................................................................................61
IV.4.
Climatologa.............................................................................................68
IV.4.1. Precipitaciones y
temperaturas..................................................68
IV.4.2. Diagramas
bioclimticos...........................................................70
IV.5. Flora y
vegetacin.....................................................................................72
IV.5.1. Bosque
aciculifolio....................................................................72
IV.5.2. Bosque
caducifolio....................................................................73
IV.5.2.1. Serie de acerales y
quejigales............................73 IV.5.2.1.1. Faciacin
supramediterrnea..............73
IV.5.2.1.2. Faciacin mesomediterrnea..............73 IV.5.2.2.
Serie de
avellanares...........................................74
IV.5.2.3. Serie del roble
melojo.............................................74 IV.5.3.
Bosque
esclerfilo.....................................................................74
IV.5.3.1. Serie supramediterrnea de la
encina.....................75 IV.5.3.2. Serie mesomediterrnea de la
encina......................75 IV.5.3.2.1. Faciacin
tpica........................................76 IV.5.4.Series
edaffilas: Vegetacin
riparia.........................................74 IV.5.5. Series
edaffilas: Vegetacin
rupcola.....................................74
V.- MEDIO
HUMANO...............................................................................................79
V.1. Antecedentes
histricos.............................................................................81
V.2. La poblacin. Sociologa y evolucin
demogrfica..................................83 V.3. La vivienda
rural........................................................................................85
V.4. Usos del
territorio.....................................................................................
87 V.4.1.
Cultivos.......................................................................................87
V.4.2. Madera y
pastizal........................................................................89
V.4.3.
Ganadera....................................................................................91
V.4.4.
Artesana.....................................................................................92
V.4.5. El turismo
rural...........................................................................94
-
VI. MATERIAL Y
MTODOS................................................................................95
VI.1. Metodologa
Etnobotnica....................................................................................97
VI.1.1. Planificacin del rea de
estudio...........................................................97
VI.1.2. Recogida de
datos.................................................................................97
VI.1.3. Herborizacin del material
vegetal.....................................................104
VI.1.4. Identificacin
Taxonmica..................................................................104
VI.1.5. Elaboracin del
catlogo.....................................................................105
VI.1.6. Contraste
Bibliogrfico.......................................................................106
VI.1.7. Indices
Etnobotnicos..........................................................................107
VI.2. Estudio fitoqumico cualitativo y anlisis
cuantitativo..................................................................................................................109
VI.2.1. Tcnicas de deteccin de grupos
fitoqumicos...................................109 VI.2.1.1.
Preparacin de
muestras......................................................109
VI.2.1.2.
Alcaloides.............................................................................111
VI.2.1.3.
Antraquinonas......................................................................112
VI.2.1.4.
Flavonoides..........................................................................112
VI.2.1.5.
Saponinas.............................................................................112
VI.2.1.6.
Taninos.................................................................................113
VI.2.2. Obtencin y anlisis qumico de aceites
esenciales............................114 VI.2.2.1. Procesado de la
planta..........................................................114
VI.2.2.2. Destilacin por arrastre con vapor de agua y
almacenamiento.................................................................114
VI.2.2.3. Cromatografa de
gases........................................................115
VI.2.2.4. Cromatografa de gases-espectrometra de
masas..............................................................................................116
VI.3. Estudio de la actividad
antiinflamatoria............................................................118
VII.- RESULTADOS Y
DISCUSIN.....................................................................119
VII.1. Catlogo de plantas utilizadas
tradicionalmente..................................121 VII.1.1.
Consideraciones
previas........................................................121
VII.1.2. Catlogo
Etnobotnico...........................................................125
VII.2. Discusin de los resultados
etnobotnicos...........................................659 VII.2.1.
Resultados
generales..............................................................659
VII.2.2. Indices
Etnobotnicos............................................................663
VII.2.3. Las especies
citadas...............................................................667
VII.2.4. Familias ms
representadas...................................................669
VII.2.5. Plantas
medicinales................................................................672
VII.2.6. Plantas usadas en veterinaria
................................................702 VII.2.7.
Plantas usadas en alimentacin
humana................................704 VII.2.8. Plantas usadas
en alimentacin animal ................................710 VII.2.9.
Plantas
txicas........................................................................717
VII.2.10. Ornamentales y
aromticas..................................................719
VII.2.11. Plantas con uso maderero y utensilios
varios......................722
-
VII.2.12. Mgicas y ceremoniales
......................................................725 VII.2.13.
Refranes, juegos y dichos
populares....................................727 VII.2.14. Otros
usos de
plantas...........................................................728
VII.2.15. Vocabulario y expresiones
curiosas....................................735 VII.3. Deteccin de
grupos fitoqumicos en una seleccin de plantas...........737
VII.3.1.
Alcaloides...............................................................................737
VII.3.2.
Antraquinonas........................................................................742
VII.3.3.
Flavonoides............................................................................745
VII.3.4. Saponinas
..............................................................................749
VII.3.5.
Taninos...................................................................................753
VII.3.6.
Discusin................................................................................756
VII.4. Estudio de la composicin qumica de diversos aceites
esenciales.....765 VII.4.1. Composicin qumica del aceite esencial
de Pistacia
lentiscus................................................................................765
VII.4.1.1.
Introduccin...................................................765
VII.4.1.2. Estudio qumico del aceite esencial de Pistacia
lentiscus............................................................766
VII.4.1.3. Composicin qumica de otras muestras
de aceites esenciales de Pistacia
lentiscus.....................774
VII.4.2. Composicin qumica del aceite esencial de Pistacia
terebinthus.............................................................................785
VII.4.2.1.
Introduccin........................................................785
VII.4.2.2. Estudio qumico del aceite esencial de Pistacia
terebinthus.......................................................786
VII.4.2.3. Composicin qumica de otras muestras de aceites
esenciales de Pistacia terebinthus.......................792
VII.4.3. Composicin qumica del aceite esencial de Bupleurum
gibraltaricum...................................................................809
VII.4.3.1.
Introduccin...................................................809
VII.4.3.2. Estudio qumico de los aceites esenciales
de sumidad fructificada, hojas, tallos, umbelas y frutos de
Bupleurum gibraltaricum Lam..................................811
VII.4.3.3. Seguimiento estacional del aceite esencial de Bupleurum
gibraltaricum...........................................822
VII.5. Actividad antiinflamatoria del aceite esencial de
Bupleurum gibraltaricum
..........................................................................835
VIII. CONCLUSIONES
..........................................................................................837
IX.
BIBLIOGRAFA.................................................................................................843
-
I. INTRODUCCIN Y JUSTIFICACIN
-
Introduccin y Justificacin
3
I.- INTRODUCCIN Y JUSTIFICACIN
El Parque Natural de las Sierras de Cazorla, Segura y Las Villas
es el espacio natural protegido de mayor extensin de Espaa,
declarado con tal designacin segn el RD 10/1986 de 5 de febrero.
Previa a tal declaracin, en 1960 se constituy el Coto Nacional de
Caza de Cazorla-Segura, con casi 70.000 has, que han quedado
englobadas dentro de aqul, y en 1983 el rea que hoy constituye el
parque, fue designado Reserva de la Biosfera por el Comit M&B
(hombre y Biosfera) de la UNESCO. En 1988 la Comunidad Econmica
Europea le otorg la calificacin de Zona de Especial Proteccin para
las aves (ZEPA). La gestin territorial integral de todos los
recursos naturales incluidos en 214.300 has. es una labor que
requiere dedicacin plena de todos los trabajadores del parque y un
trabajo continuo y constante en el tiempo que afecta a una poblacin
de alrededor de 75.000 habitantes. Estos deben poder aprovechar de
modo racional los recursos naturales del medio adoptando aptitudes
respetuosas con el medio ambiente que les rodea. La declaracin del
Parque Natural ha supuesto la creacin de empleo estable adjudicado
a los habitantes de la zona. Todas las infraestructuras de uso
pblico son gestionadas por ellos mismos, y a su vez originan nuevos
puestos de trabajo, directos e indirectos. Igualmente todos los
proyectos que se ejecutan son realizados por contratacin de sus
propios habitantes. Por otro lado, la conservacin de la naturaleza
ha comenzado por la ordenacin turstica en gran parte del parque,
meta de especial importancia si se tiene en cuenta el caos que
exista anteriormente (acampadas clandestinas, hogueras
incontroladas, vertidos de basuras a ros...). Se han hecho muchos
esfuerzos por incrementar la afluencia turstica fuera de temporadas
altas evitando las afluencias masivas, lo que genera una mayor
estabilidad en cuanto a los ingresos de la comarca. As surge la
idea de la creacin de un Parque Temtico de la Naturaleza, para el
cual se estn manejando hoy da diferentes propuestas de numerosas
empresas. Han de apuntarse igualmente los proyectos, ejecutados o
en marcha, para la proteccin y conservacin de especies de flora y
fauna, para la restauracin y conservacin de hbitats degradados como
consecuencia de actividades humanas, reestructuracin de las
pirmides de poblacin de especies de caza en el Coto Nacional,
medidas especiales para proteccin de especies endmicas,
reintroducciones de especies animales desaparecidas (corzo,
quebrantahuesos), etc. En el Coto Nacional se caza, incluso ms que
antes y se seguir cazando para suplir la ausencia de predadores e
impedir una expansin de las especies cinegticas que pudieran poner
en peligro su propia salud y la riqueza botnica de la zona. Se
sigue extrayendo madera, pero mejorando el monte, al cortar
parcialmente repoblaciones intensivas realizadas con finalidad
productivista y se mantiene la ganadera
-
4
aprovechando los pastos de la manera ms razonable segn el Plan
de Aprovechamiento Ganadero del parque (BOJA de 21 de Septiembre de
1993). El conocimiento popular est a punto de desaparecer como
consecuencia del progreso y de la utilizacin generalizada de
frmacos por una poblacin cada vez ms urbana. Estos estudios suponen
la recopilacin de una informacin que se va perdiendo da a da,
informacin que pertenece a generaciones de personas que utilizaban
las plantas para curarse de sus dolencias, curar a sus animales,
para alimentarse y alimentar a su ganado, para realizar
herramientas y aperos de trabajo, etc. Originariamente la
Etnobotnica nace como una disciplina a partir de la Botnica y
durante mucho tiempo se ha considerado colindante con la Botnica y
la Antropologa. Actualmente, el conocimiento de la utilizacin
tradicional de los recursos de origen vegetal, se ha convertido en
el fruto de una andadura cientfica rigurosa que ha dado lugar a una
ciencia multidisciplinar en la que tienen cabida la Botnica, la
Etnologa y la Agronoma (Trease-Evans, 1991). Los estudios que
existen en Espaa hasta la fecha sobre esta disciplina son ya
considerables. A pesar de ello, esta Memoria Doctoral pretende
realizar una investigacin de carcter etnobotnico en una zona de
alto valor ecolgico: el Parque Natural de las Sierras de Cazorla,
Segura y Las Villas. Por el aislamiento que ha proporcionado su
terreno abrupto y montaoso del resto de la civilizacin a sus
habitantes, y a su vez, por el estrecho contacto que han tenido
estas personas con la Naturaleza en general, y con su vegetacin en
particular, nos ha parecido de especial inters la cultura
etnobotnica que encierra la zona. Hemos tratado de averiguar el uso
que los lugareos dan a cada una de las especies que nos muestran,
prestando especial atencin a las consideradas como medicinales,
tanto en medicina humana como en veterinaria. De muchas de estas
plantas no existen conocimientos qumicos que demuestren la eficacia
de sus principios activos. Las investigaciones etnobotnicas han de
estar verificadas por los correspondientes ensayos de tipo
fitoqumico, los cuales pueden contribuir al descubrimiento de
nuevas especies vegetales como fuente de principios activos, o al
hallazgo de otros compuestos qumicos que sirvan como base en la
experimentacin para la sntesis de nuevos medicamentos. Esta premisa
tambin est marcada en nuestro trabajo. Intentaremos determinar los
diferentes grupos fitoqumicos presentes en un grupo de especies
seleccionadas, as como analizar cuantitativamente una serie de
muestras de aceites esenciales pertenecientes a varias especies.
Creemos que el conocimiento cientfico de los recursos vegetales
posibilita su aprovechamiento racional, y puede contribuir a
potenciar usos del territorio que resulten compatibles con la
mejora econmica de la poblacin y la conservacin del medio rural en
trminos de desarrollo sostenible.
-
II. OBJETIVOS
-
Objetivos
7
II.- OBJETIVOS
En el planteamiento inicial de este trabajo nos marcamos los
siguientes objetivos: 1 Ahondar en el conocimiento de los usos que
popularmente se da a las plantas silvestres, con especial
referencia a las consideradas como medicinales. 2 Desarrollar y en
su medida perfeccionar una metodologa de recogida de informacin
etnobotnica, a partir de las ya ensayadas en proyectos anteriores
publicados en la pennsula Ibrica. 3 Aportar informacin etnobotnica
nueva de las especies no recogidas en la bibliografa
fitoteraputica, toxicolgica, alimentaria o aromtica, que pueda
incidir en una investigacin fitoqumica posterior. 4 Valorar el
nivel de utilizacin de estos productos naturales en base al nmero
total de referencias y evaluar las posibilidades de cultivo y
explotacin, en su caso. 5 Elaborar un catlogo etnobotnico que
describa los simples y mezclas utilizados en fitoterapia popular,
realizando una recopilacin de las aplicaciones locales de dicha
flora en el rea estudiada, dosificacin y formas de administracin,
frecuencia de uso y utilizacin tradicional de las distintas
especies. 6 Respetar en todo lo posible el lenguaje particular de
los lugareos, sin interferencias con traducciones alternativas. En
el caso de dicciones complejas, se intentar aclarar el significado
que se ha entendido acerca de ese comentario. 7 Realizacin de una
bsqueda bibliogrfica general acerca de la composicin qumica de la
flora utilizada, con el fin de encontrar los principios presentes
en las plantas, implicados en los efectos teraputicos citados. 8 Se
prestar especial atencin al estudio qumico cualitativo de algunas
plantas de las que no se encuentren referencias en la bibliografa
consultada. Con ellas se realizarn una serie de ensayos para la
deteccin de diversos grupos fitoqumicos. 9 Intentar corroborar los
resultados fitoqumicos de las especies analizadas, con los usos
populares atribuidos por los lugareos, comprobando as la fiabilidad
de la informacin etnobotnica. 10 Estudiar la composicin qumica del
aceite esencial de la especie Pistacia lentiscus mediante la tcnica
de cromatografa de gases-espectrometra de masas comparando las
diferencias de composicin entre parte area y agallas y la variacin
en componentes mayoritarios de los aceites esenciales de varias
muestras a partir de ejemplares recolectados en diferentes
localidades de la provincia de Jan. Se pretende profundizar en el
conocimiento de la composicin qumica de la planta en s, de cuyas
agallas no existen datos.
-
8
11 Estudiar el aceite esencial de la especie Pistacia
terebinthus mediante la tcnica de cromatografa de
gases-espectrometra de masas comparando las diferencias de
composicin a partir de ejemplares recolectados en diferentes
localidades de la provincia de Jan, y en la misma localidad, en los
estados fenofsicos de fructificacin muy temprana, fructificacin
temprana y fructificacin tarda. La prctica ausencia de estudios
acerca de componentes voltiles de esta especie y su inters
etnobotnico, nos ha hecho centrarnos en ella para su anlisis
cuantitativo. 12 Estudiar la composicin qumica de los aceites
esenciales de parte area, hojas, tallos, frutos y umbelas de la
especie Bupleurum gibraltaricum mediante la tcnica de cromatografa
de gases-espectrometra de masas, viendo las variaciones existentes
entre los distintos componentes mayoritarios. Adems se analizar su
variabilidad en las diferentes partes de la planta en funcin de los
estados fenolgicos de prefloracin, floracin temprana, floracin
tarda y fructificacin de la planta y se ensayar la actividad
antiinflamatoria del aceite esencial de hojas, dado su inters
etnobotnico y el hecho de ser una planta de potencial inters en la
industria farmacutica.
-
III. ANTECEDENTES
-
Antecedentes
11
III.- ANTECEDENTES
III.1. BOTNICA
Son muchos los estudiosos botnicos que han recorrido los
rincones de estas sierras ricas en flora, tanto en cantidad como en
diversidad. Uno de los primeros visitantes fue Blanco en 1849,
cuyas herborizaciones, en la Sierra de Segura sobre todo, fueron
mencionadas por Webb & Heldrich (1880). Tambin Bourgeau, en
1850 se interes por determinados txones, que fueron proporcionados
a Cosson (1849-1852) para su descripcin.
Laguna (1883-1890) suministra informacin forestal de estas
sierras; Gandoger (1904-1905); Lacaita en 1929 escribi un artculo
basndose en las excursiones realizadas con Wilmott (1927) y Font
Quer (1932) tambien cita estas sierras en sus trabajos.
En el estudio de la flora hemos de destacar a Hervier
(1905-1907), que estudi el material que recolect Reverchon entre
1899 y 1905. Heywood, desde 1948, herboriz este rea, depositando
algunos ejemplares de especies en distintos herbarios y realizando
su Tesis Doctoral sobre el macizo. Aunque es indita en su mayor
parte, public una primera lista de la flora recolectada (Heywood,
1961). Con la subvencin del Instituto de Estudios Giennenses,
Galiano y Heywood (1960) publican un libro. Soriano Martn es con
diferencia el estudioso que ms tiempo ha dedicado al macizo
Cazorla-Segura publicando numerosos trabajos a lo largo de su vida
investigadora (1983a, 1983b, 1984a, 1984b, 1985a, 1985b, 1988a,
1988b, 1988c, 1988d), Soriano y Cebolla (1981), Soriano y Muoz
Garmenda (1976). Hernndez Cardona, (1978, 1980, 1981, 1982a, 1982b,
1984), Valle Tendero, (1982, 1985) y Valle et al., (1986, 1988),
1989), Pajarn Sotomayor (1980, 1988, 1989), y Pajarn y Escudero
(1993) tambin son destacables entre los estudiosos botnicos de la
flora.
En cuanto a vegetacin Galiano (1960) realiza el primer mapa de
vegetacin de
la zona, a partir del cual surgen numeroso trabajos y tesis
doctorales de gran calidad cientfica: Mota Poveda, (1987), Daz de
la Guardia, (1985) Gmez Mercado, (1988, 1997) y Ros Ruz (1996)
Podemos citar tambin a Rivas Martnez, (1970, 1986, 1987),
Fernndez Casas, (1972), Blanca Lpez, (1986, 1989), Gonzlez
Rebollar, (1976), Peinado, (1983), Cebolla, (1990) Muoz Garmenda,
(1983), Ruiz de la Torre, (1979, 1980), Nieschalk, (1971, 1973),
Fernndez Lpez, (1983) y un largo e interminable etctera en el que
no podemos olvidar a Luque y Nieto (1987) en todo lo relaccionado
con la vegetacin y flora serrana. Puesto que el presente es un
trabajo en gran parte etnobotnico hemos de destacar los trabajos
realizados en Etnobotnica desde la dcada de 1980 en la pennsula
Ibrica, basados en la obtencin de datos directamente desde el
campo. Son los referidos a las provincias o regiones de Huesca,
(Villar et al., 1987; Ferrndez y Sanz, 1993), Catalua,
-
12
(Bonet, 1991; Muntan, 1991, Bonet et al., 1992; Valls et al.,
1996; Raja et al., 1997; Bonet et al., 1999), Granada, (Gonzlez
Tejero, 1990, Gonzlez Tejero et al., 1996), Castelln, (Mulet,
1991), Murcia (Rivera et Obn, 1991; Obn et Rivera, 1991; Rivera,
Obn, Cano y Robledo, 1994), Crdoba (Galn, 1993; Casana, 1993,
Triano et al., 1998), Lugo (El Caurel) (Blanco, 1996) Albacete
(Verde, 1998), Almera (Martnez Lirola et al., 1997), y la provincia
de Jan (Alcal et al., 1996, Fernndez Ocaa et al., 1996,
Guzmn-Tirado, 1997, Carazo et al., 1998). Dado el estado en que se
encuentra esta disciplina en nuestro pas es de esperar que la
Etnobotnica Ibrica nos lleve al conocimiento de las plantas
utilizadas tradicionalmente como una parte importante de nuestro
patrimonio cultural y permita recuperar el saber popular para el
uso y conocimiento de las generaciones actuales y futuras. Por otro
lado la Etnobotnica, y ms concretamente la Etnofarmacologa, es una
fuente importante en la bsqueda y descubrimiento de nuevas drogas
de origen vegetal (Valls, 1997).
-
Antecedentes
13
III.2. ESTUDIO FITOQUMICO CUALITATIVO
En la bsqueda de plantas con principios activos de inters, la
prctica habitual en los estudios preliminares consiste en la
realizacin de chequeos o screenings analizando la presencia o
ausencia de ciertos componentes qumicos de diferente naturaleza y
propiedades farmacolgicas diversas.
Existen numerosas pruebas para la determinacin de los grupos
fitoqumicos ms importantes presentes en los vegetales. Para la
deteccin de alcaloides pueden usarse el mtodo rpido de Webb o el
mtodo lento del mismo autor, el de Kiang y Douglas, el modificado
de Wall et al., los mtodos A, B o C de Cabo Torres, extracciones en
medio acuoso acidificado o bien tratado con CaO, utilizando despus
los reactivos de precipitacin-coloracin de Wagner, Dragendorff,
Mayer, Hager, Bouchardat, Valser, Sonneschein o cido
silico-tungstico (Dominguez, 1973, Cabo y Pardo, 1974,
Trease-Evans, 1991). Para el caso de antraquinonas existe el mtodo
de Brntrager (Domnguez, 1973), la extraccin con solucin alcohlica
de hidrxido potsico si slo existen hetersidos, o la extraccin en
disolventes orgnicos y posterior precipitacin con NaHCO3, en el
caso de presencia de antraquinonas con grupos carboxilo
(Trease-Evans, 1991). El primero es el ms usado para localizar en
los vegetales este grupo de componentes, en general poco estudiado
como grupo fitoqumico.
Los flavonoides pueden extraerse con metanol y posterior estudio
cromatogrfico, con etanol y posterior separacin con brax,
utilizando sales de plomo, o bien mediante reacciones coloreadas,
como la de la cianidina, tambin conocida como reaccin de Shinoda o
de Willstatter (Domnguez, 1973, Cabo y Pardo, 1974)
En la determinacin de saponinas aparecen mtodos de diferentes
autores como
la prueba de Liebbermann-Burchard, el ensayo ms generalizado, la
de Rosenheim, Salkowski, Tortelli-Jaffe, Tschugaeff, Fieser,
tetranitrometano, distinguiendo algunos de tales ensayos entre
saponinas esterodicas y saponinas triterpnicas (Domnguez,
1973).
Los taninos suelen detectarse por extraccin en agua o etanol y
revelado
posterior con sales frricas (Domnguez, 1973). Aparecen otros
ensayos tiles como el de la piel de venza, el ensayo de la
gelatina, el mtodo de la fenazona, el de catequina o el ensayo del
cido clorognico (Trease-Evans, 1991). Asimismo puede llevarse a
cabo una cromatografa en capa fina del extracto metanlico y
posterior revelado con disolucin de sal frrica (Wagner, 1996).
Se ha llevado a cabo una revisin bibliogrfica que incluye varios
compendios
generales de Qumica, relacionados con el tema cuyos ttulos y
autores se especifican en el apartado IX de bibliografa. Las
revistas que estaban a nuestro alcance en el momento de la revisin,
tambin se examinaron en la bsqueda de citas fitoqumicas as como
varias bases de datos. A partir de la informacin obtenida, se
elabor un listado de 65 txones vegetales cuya composicin qumica no
presentaba muchas referencias en la
-
14
bibliografa consultada. La mayor parte de estas especies poseen
inters etnobotnico y ninguna o casi ninguna cita sobre
investigaciones fitoqumicas al respecto.
-
Antecedentes
15
III.3. COMPOSICIN QUMICA DE Pistacia lentiscus L.
III.3.1. Componentes voltiles III.3.1.1. Componentes voltiles de
la resina Investigadores, fundamentalmente del rea mediterrnea, han
demostrado inters por el estudio de la composicin qumica de la
especie Pistacia lentiscus L. La resina obtenida como un exudado a
partir de la corteza del arbusto, ha sido la parte de la planta ms
analizada, posiblemente por su inters comercial. En 1974 Calabro et
al., mediante cromatografa de gases combinada con tcnicas modernas
de espectroscopa cuantificaron ya la presencia de una serie de
componentes en el aceite esencial de la resina (Tabla III.3.1.1.1).
No hay datos cuantitativos acerca de los terpenoides oxigenados
encontrados en la muestra, sin embargo los autores aportan
informacin sobre los porcentajes de componentes voltiles de una
muestra recolectada en Sicilia, clasificados segn el tipo de
estructura qumica que poseen. Esta muestra contena hidrocarburos
monoterpnicos (41 %), steres (17 %), alcoholes (16 %), compuestos
carbonados (15 %) e hidrocarburos sesquiterpnicos (9 %). Buil et
al., en 1975 demuestran que el aceite esencial de la resina de unos
ejemplares de P. lentiscus recolectados en la regin de Provenza
(Francia), variaba qumicamente, segn la estacin en la que fuese
recolectada la planta. La Tabla III.3.1.1.1. indica los intervalos
de variacin de los distintos componentes. Esta aportacin supuso la
ms completa informacin publicada hasta la fecha sobre la composicin
qumica de la resina de P. lentiscus. Simultneamente, Skrubis et
al., analizaron igualmente el aceite esencial de resina procedente
de unos ejemplares de P. lentiscus recolectados en la isla de Quo
(Grecia). La esencia fue obtenida por destilacin, encontrando un
93,8 % de hidrocarburos (78,9 % era -pineno), y un 3 % de
compuestos oxigenados, entre los que se encontraban isotuyona,
linalol, acetato de linalilo y timol. En 1984, Katsiotis et al.
estudian las diferencias en la composicin de diversas muestras de
esencia de resina de P. lentiscus recolectadas en distintos
distritos de la isla de Quo (Grecia). La composicin, bastante
distinta de la dada por Buil et al., variaba segn las indicaciones
de la Tabla III.3.1.1.1. En 1991, Boelens et al. examinaron varios
aceites esenciales de diferentes partes de P. lentiscus, entre
ellos de resina. Los ejemplares se recolectaron en la provincia de
Sevilla (Espaa). Ese mismo ao, Papageorgiou et al. compararon dos
muestras de aceite esencial de resina de la misma especie (Tabla
III.3.1.1.1). Se identificaron 61 de los 62 componentes qumicos
encontrados, apareciendo algunas diferencias entre las dos esencias
destiladas.
-
16
Tabla III.3.1.1.1 Componente Italia(1)
Sicilia Francia(2) Provenza
Grecia(3) Quo
Espaa (4) Sevilla
Grecia (5) Quo
Muestra1
Muestra2
Tricicleno - - - 0,2 - - -Tuyeno - - - 0,06 t 0,17 -Pineno 10,7
6,5 - 15,8 64,4 - 86,4 78,6 77,1 58,9 Fenchona* - - - - - t Canfeno
1,0 0,5 - 1,06 0,3 - 1,0 0,7 1,04 0,8 Hexanal - - - - t t
Pinadieno* - - - 0,3 - - -Pineno 4,2 1,1 - 2,5 1,4 - 6,7 3,3 2,5
1,3 Sabineno - 1,4 - 2,1 - 0,8 t t Verbeneno - - - - t 0,1 Mirceno
25,2 4,0 - 6,3 5,0 - 25,3 3,2 12,3 0,2 3-Careno - 0,2 - 0,8 - 0,01
t t -Felandreno 7,6(a) - - 0,1 t t 1,4-Cineol - - - - - t
-Terpineno - 0,1(c) - 0,05 - t Limoneno 7,6(a) 5,3 - 6,4 0,6 - 1,6
1,6 1,0 0,4 -Terpineno 2,1(h) 0,1 - 1,2 0 - 0,2 0,01 t(i) t(j)
-Felandreno - 0,1(c) - 0,06 t(m) t(n) 2-Pentil- furano - - - - t t
1,8-Cineol - 0,6 - 1,5(d) - 0,34 t(m) t(n) (Z)--Ocimeno - 0,6 -
1,5(d) - - t t (E)--Ocimeno 2,1(h) 0,1 - 0,12 t(i) t(j) Ocimeno
epxido* - - - - t 2-Undecanona - - - 0,1 - - 2-Vinil-3,5-dimetil
furano - - - - t t p-Cimeno 6,6(b) 0,9 - 7,0 - 0,2 0,1 0,5
-p-Dimetilestireno - - - 0,05 - - Terpinoleno 6,6(b) 0,1 - 0,5 0,4
- 2,2 0,12 t(k) t(l) 2-Octanona - - - - t(k) t(l) Octanal - - - - t
t o-Cimeno - - - - t 0,1 6-Metil-5-hepten-2-ona - - - - t t
2-Nonanona - - - - t t Nonanal - - - - t t Metil o-cresol - - - -
0,4 0,6 Aldehdo de alcanfor I* - - - - t t Perilleno - - - - 0,3
0,5 Dehidro-p-cimeno - - - - t 0,4 -Copaeno - 0,5 - 0,6(e) - - t t
Aldehdo de alcanfor II* - - - - t 1,1 Alcanfor - - - - t 0,2
Pinoalcanfor I* - - - - t 0,3 Pinoalcanfor II* - - - - t t Linalol
- 0,5 - 0,6(e) 0,12 - 0,86 0,03 0,5 3,7 Acetato de linalilo - - - t
0,2 Acetato de bornilo - - - 0,10 0,2 0,2 -Cariofileno - 5,2 - 6,5
0,32 - 1,45 0,19 1,5 - Isopulegol - - 0,67 - 1,44 - - -
Terpinen-4-ol - 9,1 - 13,8 - 0,10 - t Metil carvacrol - - - - - t
2-Undecanona - - - - t 0,2 Mirtenal - - - - 0,1 0,7
-
Antecedentes
17
Componente Italia(1) Sicilia
Francia(2) Provenza
Grecia(3) Quo
Espaa (4) Sevilla
Grecia (5) Quo
Muestra1
Muestra2
trans-Sabinol + Acetato de crisantemilo*
-
-
-
-
-
0,3
Pinocarveol* - - - - 0,3 2,1 trans-2-Menta-2,8-dien-1-ol - - - -
- 0,2 -Humuleno - 2,5 - 6,9(f) - 0,05 t t Santenol* - - - - - t
Neral + Verbenol - - - - 0,6 3,6 Verbenona - - - 0,12 - 2,9
-Muuroleno - 2,3 - 3,9 - - - t -Terpineol - 2,5 - 6,9(f) 0,10 -
0,86 0,15 0,4 0,3 Borneol - - - 0,12 t t Carvona - - - - - t
Piperitona - - - - - t Naftaleno - - - - - t Desconocido - 3,3 -
9,1(g) - - - - -Muuroleno - 3,3 - 9,1(g) - - - t Geranial - - - - t
t Dihidro-p-cimen-8-ol* - - - - t t cis-Anetol - - - - - 0,2
Mirtenol - - - - t 0,5 trans-Anetol - - - - 0,2 0,4 trans-Carveol -
- - - t 0,7 p-Cimen-8-ol - - - - - 0,6
6,10-dimetil-undeca-5,9-dien-2-ona
-
-
-
-
-
0,1
Alcohol cuminlico - - - - - 0,3 Oxido de cariofileno - - - 0,30
t 1,1 Anisaldehdo - - - - - 0,1 Metil eugenol - - - - t 0,1
(E)-Nerolidol - - - - - t (Z)-Metil isoeugenol - - - - t t
(E)-Metil isoeugenol - - - - 0,2 t Mirceno dmero* - - - - t 0,4
Dimirceno ismero a* - - - 0,26 - - Dimirceno ismero b* - - - 0,32 -
- Dimirceno ismero c* - - - 2,37 - - Dimirceno ismero d* - - - 1,43
- - Veratraldehdo - - - - - 0,2 -Cadineno - 3,7 - 10,2(h) - 0,16 t
t -Cadineno - 3,7 - 10,2(h) - - - - 10- Cadinol - 5,8 - 7,0 - - -
-
Tabla III.3.1.1.1. Composicin qumica de las diferentes muestras
de aceites esenciales de resina de Pistacia lentiscus segn diversos
autores: (1) Calabro et al., 1974; (2) Buil et al., 1975; (3)
Katsiotis et al., 1984; (4) Boelens et al., 1991; (5) Papageorgiou
et al., 1991. (a) - (n) Porcentajes de las mezclas de componentes
que han eludo en un slo pico en el cromatograma de gases. *
Componentes identificados tentativamente. t = trazas.
-
18
III.3.1.2. Componentes voltiles de hojas Peyron et al., en 1966
examinaron el aceite esencial de las hojas de P. lentiscus mediante
cromatografa de gases en columna empaquetada, en combinacin con
espectrometra de infrarrojos. Identificaron varios componentes
voltiles: -pineno, -pineno, canfeno, -terpineno, -terpineno,
-felandreno, -felandreno, p-cimeno, mirceno, limoneno, sabineno,
terpinen-4-ol y acetato de terpinen-4-ilo. Tambin Aboutabl et al.,
publican en 1991 la composicin qumica del aceite esencial de hojas
de tres especies de Pistacia, entre ellas P. lentiscus,
recolectadas en Egipto. Los rendimientos oscilaron entre el 0,4 y
el 0,5 % y los componentes se recogen en la Tabla III.3.1.2.1. En
el mismo ao, Boelens et al. examinaron varios aceites esenciales de
P. lentiscus recogidos en Sevilla (Espaa). El aceite esencial de
hojas (0,2 %), tena una composicin qumica ms compleja que el resto
de las partes analizadas. La Tabla III.3.1.2.1. indica el listado
de los componentes dado para las hojas por estos autores. Fleisher
et al., en 1992 realizan un estudio comparativo de la composicin
qumica de los aceites esenciales de hojas y frutos de P. lentiscus.
La Tabla III.3.1.2.1. resume los resultados obtenidos en hojas.
Tabla III.3.1.2.1.
Componente Egipto (1) Espaa (2) Israel (3)
Hexanol - 0,01 - (Z)-3-Hexenol - 0,02 3,05 (Z)-3-Hexanoato de
etilo - - 0,07 2-Heptanol - - 0,05 Butirato de 3-metilbutilo - 0,12
- 3-Metilbutirato de 3-metilbutilo - 0,05 - Tricicleno t 0,13 -
-Tuyeno - 0,03 - -Pineno 1,0 11,20 0,47 -Fencheno - 0,04 - Canfeno
0,6 0,70 0,07 Pinadieno* - 0,02 - Sabineno - 1,15 - -Pineno 0,5
2,87 0,24 Mirceno 1,3 19,25 0,06 -Felandreno - 3,53 t 3-Careno 65,3
0,01 - Hexanoato de etilo - - 0,06 -Terpineno - 2,00 0,02 Butirato
de isoamilo - - 1,12 p-Cimeno 0,6 0,60 0,11 Limoneno 4,6 1,60 2,74
-Felandreno - 0,19 - -Terpineno - 3,14 0,07 Terpinoleno 0,7 2,36
0,06 2-Nonanona - 0,02 1,71 -p-Dimetilestireno - 0,01 -
allo-Ocimeno - 0,06 - 2,2,6-trimetil-6-viniltetrahidropirano - 0,02
- 1,4-Cineol - 0,01 -
-
Antecedentes
19
Componente Egipto (1) Espaa (2) Israel (3)
1,8-Cineol - 0,60 0,04 Perilleno - 0,18 - Dehidro-1,8-Cineol -
0,03 - Oxido de cis-linalol (furanoide) - 0,02 - Oxido de
trans-linalol (furanoide) - 0,01 - Hidrato de cis-pineno - - 0,03
-Fenchol - 0,36 0,14 Terpinen-1-ol - 0,25 0,10 Alcanfor - 0,04 -
trans-Verbenol - 0,02 - cis--Terpineol - 0,04 - trans--Terpineol -
0,34 - Isoborneol - 0,05 - Borneol - 0,20 0,10 Terpinen-4-ol - 8,41
5,31 Aromadendreno - - 0.06 Octanoato de isoamilo - - 0.17
Decanoato de etilo - - 0,06 p-Cimen-8-ol - 0,04 - -Terpineol - 6,68
13,02 -Terpineol - 0,42 - Citronelol - 0,07 - (Z)--Ocimeno - 0,04 t
(E)--Ocimeno 0,2 1,38 - Carvona - 0,09 - Linalol - 0,62 0,09
Mirtenol - 0,07 - trans-Carveol - 0,02 - Nerol - 0,07 - Geraniol -
0,18 - Timol - 0,02 - 2-Undecanona - 0,55 4,75 Acetato de bornilo -
0,05 - Carvacrol - 0,11 - Eugenol - 0,01 - Limonen-10-ol - 0,06 -
Acetato de -fenchilo - 0,04 - Acetato de linalilo - 0,01 - Acetato
de terpinen-4-ilo - 0,03 - Acetato de -terpinilo - 0,08 - Acetato
de citronelilo - 0,02 - Acetato de nerilo - 0,03 - Acetato de
geranilo - 0,10 - Verbenona - 0,08 - Neral - 0,05 - Geranial - 0,02
- Perilladehdo - 0,01 - -Cubebeno - 0,09 - -Copaeno 0,2 0,45 0,28
Octanoato de etilo - - 0,18 Hexanoato de isoamilo - - 0,87
Bourboneno 2,6 - - Benzoato de 3-metilbutilo 0,4 - - -Gurjunenot
0,4 - - -Elemeno - 0,60 - Metil eugenol - 0,03 1,97 -Cariofileno -
8,60 2,30
-
20
Componente Egipto (1) Espaa (2) Israel (3)
trans--Bergamoteno - 0,20 - -Guaieno - 0,32 - -Humuleno 0,3 1,32
2,89 -Farneseno* 0,1 - - -Bisaboleno 3,4 - - allo-Aromadendreno -
0,20 - Germacreno D - 6,35 - -Muuroleno - 1,28 0,18 -Amorfeno - -
2,74 Piperitona - - 0,06 -Guaieno - 0,60 - -Cadineno t 0,27 -
-Cadineno 0,5 3,22 4,34 Alcohol cuminlico - - t (E)-Anetol - - t
Benzoato de (Z)-3-hexenilo 0,5 - - Espatulenol 0,6 - - Cadinol
ismero* - 1,12 - Cadinol ismero* - 1,40 - Oxido de -cariofileno 4,1
0,13 3,01 Tetradecanoato de etilo - - 1,97 T-Cadinola 1,6 - -
-Cadinol 1,8 - - Dimirceno ismero a* - 0,03 - Dimirceno ismero b* -
0,02 - Dimirceno ismero c* - 0,32 - Dimirceno ismero d* - 0,10 -
Acetofenona - 0,05 - Oxido de -humuleno - - t -Cadinol - - 3,56
Metil isoeugenol - - t Elemicina - - 0,23 Hexadecanoato de etilo -
- 10,36 Linoleato de etilo - - 2,50 Linolenato de etilo - - 11,30
2-Metil acetofenona - 0,06 - 4-Metil acetofenona - 0,01 -
Tabla III.3.1.2.1. Porcentaje comparativo de los aceites
esenciales de hojas de Pistacia lentiscus segn diversos autores:
(1) Aboutabl et al., 1991; (2) Boelens et al., 1991; (3) Fleisher
et al., 1992.
* Ismero correcto no caracterizado. t = trazas.
t Componente identificado tentativamente. a Tambin conocido como
10-epi--Cadinol.
-
Antecedentes
21
III.3.1.3. Componentes voltiles de hojas y tallos Picci et al.,
en 1987 destilaron hojas y tallos de P. lentiscus procedentes de
Sardinia (Italia). La composicin qumica del aceite esencial fue
analizada por cromatografa de gases-espectrometra de masas, y se
encuentra detallada en la Tabla III.3.1.3.1, donde slo se recogen
los porcentajes de los picos mayoritarios. Guenet, en 1991,
identifica una serie de componentes a partir de la destilacin de un
absoluto comercial constituido por la esencia de hojas y tallos de
P. lentiscus. Los componentes identificados llevan a confirmar, en
parte, la composicin ya aportada por Picci et al., sin embargo el
autor no presenta datos cuantitativos sino un cromatograma de gases
en columna capilar donde los picos aparecen enumerados y slo es
posible identificar los componentes mayoritarios, como se indica en
la Tabla III.3.1.3.1.
Tabla III.3.1.3.1. Componente Italia (1) Marruecos (2)
-Pineno 9 b Canfeno a a Sabineno a a -Pineno 4,3 a Mirceno a b
-Terpineno a - -Terpineno a a -Felandreno - a p-Cimeno a a
-Felandreno a a Limoneno 3,5 b trans-Ocimeno a - Butirato de
isoamilo a - -Terpineno a b Terpinoleno - a 2-Careno a - 2-Nonanona
a - -Fenchol a - Piperitol* a - Borneol - a Terpinen-4-ol 22 b
Salicilato de metilo - b -Terpineol 4,2 a Verbenona - a Hexanoato
de amilo a a Acetato de bornilo a a 2-Undecanona a a Eugenol - a
2-Undecanol a - -Copaeno a - -Elemeno a - -Cariofileno 3,6 b
Benzoato de isoamilo - b -Humuleno + -Selineno - a Germacreno D - b
-Cariofileno a - -Muuroleno - a
-
22
Componente Italia (1) Marruecos (2)
-Cadineno - a -Muuroleno a - -Cadineno a b Cedrol a - Benzoato
de (Z)-3-hexenilo - a Benzoato de bencilo - a Palmitato de etilo -
a -Cadinol a - -Cadinol a -
Tabla III.3.1.3.1. Composicin qumica del aceite esencial de
hojas y tallos de Pistacia lentiscus. (1) Picci et al., 1987; (2)
Guenet, 1991. a: Componentes presentes en el aceite esencial de los
que no se indica porcentaje de presencia. b: Componentes
mayoritarios. * Ismero correcto no caracterizado.
III.3.1.4. Componentes voltiles de frutos En 1990, Wyllie et al.
analizaron un extracto concentrado de componentes voltiles de los
frutos de P. lentiscus. Utilizaron la tcnica de Likens-Nickerson
para extraer tales componentes, con pentano como disolvente,
determinando por cromatografa de gases-espectrometra de masas los
ms de 70 constituyentes listados en la Tabla III.3.1.4.1. En 1991,
Boelens et al. encontraron que los aceites esenciales de frutos
maduros y de frutos inmaduros, (con rendimientos del 0,4 % y 0,5 %,
respectivamente), presentaban variaciones en cuanto al contenido en
compuestos alifticos, hidrocarburos monoterpnicos, monoterpenos
oxigenados, sesquiterpenos e hidrocarburos diterpnicos (Tabla
III.3.1.4.1).
Fleisher et al., en 1992 tambin se interes por el estudio de los
frutos de un ejemplar recolectado en Israel. La Tabla III.3.1.4.1.
recoge igualmente los resultados de su anlisis.
Tabla III.3.1.4.1. Componente
Grecia (1)
Espaa (2)
Israel (3)
Frutos inmaduros
Frutos maduros
Furfural - - - 0,04 (Z)-3-Hexenol - - - 0,31 (E)-2-Hexenol - - -
0,03 2-Heptanol - - - t Hexanoato de etilo - - - t Butirato de
3-metilbutilo - 0,21 0,30 - 3-Metilbutirato de 3-metilbutilo - 0,04
0,02 - Tricicleno - 0,09 - - -Tuyeno - 0,16 0,14 - -Pineno 28,0
21,65 10,50 0,21 Canfeno 0,8 0,30 0,08 0,03 Hidrocarburo C11 t - -
-
-
Antecedentes
23
Componente
Grecia (1)
Espaa (2)
Israel (3)
Frutos inmaduros
Frutos maduros
Sabineno t 0,79 0,28 - -Pineno 5,4 2,02 0,71 0,09 N-Metil pirrol
0,5 - - - Mirceno 39,0 54,46 72,25 0,24 Butanol t - - - -Felandreno
t 3,64 3,34 0,06 3-Careno 0,6 0,20 0,31 - -Terpineno 0,1 0,43 0,20
0,04 1,8-Cineol 0,9 0,45 0,24 0,25 -Terpineno 0,4 0,61 0,33 0,02
Terpinoleno 0,3 0,70 0,38 0,07 2-Nonanona 0,2 0,01 - 0,14 p-Cimeno
0,4 0,25 0,08 0,33 Limoneno 11,0 0,85 6,70 2,33 -Felandreno 0,2
0,65 0,09 - Nonanal 0,1 - - - cis-p-Ment-2-en-1-ol t - - -
trans-p-Ment-2-en-1-ol t - - - Terpinen-1-ol - - - 0,85 Alcanfor t
- - - trans-Verbenol - - 0,01 - trans--Terpineol - - 0,01 - Borneol
t - - 1,44 Terpinen-4-ol - 0,63 0,08 13,07 Naftaleno t - - -
p-Cimen-8-ol - - - - -Terpineol - 0,48 0,01 13,62 Octanoato de
etilo - - - t Metilchavicol t - - - Perilleno t 0,04 0,02 -
Citronelol - - 0,18 - cis-Carveol - - - 0,33 (Z)--Ocimeno 0,2 - -
0,05 (E)--Ocimeno 0,5 3,20 0,91 - Cuminaldehdo 0,1 - - - Carvona -
- - 1,32 trans-Anetol 0,6 - - t Butirato de isoamilo 0,2 - - -
Butirato de isoamilo - - - 0,58 Linalol - 0,12 0,04 0,06 -Fenchol -
0,03 - 0,58 Hexanoato de isoamilo - - - 0,41 Hidrato de cis-pineno
- - - 0,02 Octanoato de isoamilo - - - 0,06 Hexanoato de isoamilo t
- - - Cubebeno t - - - -Ylangeno t - - - -Amorfeno - - - 0,17
Alcohol cuminlico - - - t C15H24 t - - - Piperitona t - - 3,75
Geraniol - 0,08 0,08 - Acetato de bornilo t - - - Timol 0,1 - -
-
-
24
Componente
Grecia (1)
Espaa (2)
Israel (3)
Frutos inmaduros
Frutos maduros
2-Undecanona 6,9 0,29 0,21 2,16 2,4-Decadienal t - - - Carvacrol
0,6 - - - -Elemeno t - - - Acetato de -terpinilo - - 0,10 -
-Cubebeno 13,0 0,02 0,01 - Isopiperitona - - - 2,21 -Copaeno 0,2
0,20 0,04 0,07 Acetato de geranilo - 0,10 - - Decanoato de etilo -
- - 0,05 Metil eugenol t - - 0,79 -Cariofileno 2,1 0,50 0,25 5,10
-Elemeno t - 0,02 - Aromadendreno - - - t -Himanchaleno - - - -
-Humuleno t 0,19 0,04 0,93 allo-Aromadendreno t 0,17 0,02 -
Germacreno D - 0,86 0,14 - Biciclogermacreno t - - - -Guaieno - -
0,04 - -Muuroleno 0,2 0,35 0,05 0,16 -Himanchaleno t - - -
-Cadineno t - 0,10 - Calameneno t - - - -Cadineno 0,6 0,04 0,24
0,62 Cadina-1,4-dieno t - - - -Cadineno t - - - Calacoreno t - - -
Espatulenol t - - - Oxido de -cariofileno 0,1 - - 5,16 Cadinol
ismero* - 0,02 0,01 - Cubenol t - - - Cadinol ismero* - 0,05 0,02 -
Piperitenona - - - 2,30 Oxido de -humuleno - - - 0,41 -Cadinol - -
- 3,89 Oxido de humuleno II t - - - Hexadecanoato de etilo - - -
8,35 Linoleato de etilo - - - 0,51 Linolenato de etilo - - - 0,32
Dimirceno ismero a* - 0,05 0,05 - Dimirceno ismero b* - 0,03 0,06 -
Dimirceno ismero c* - 0,30 0,45 - Dimirceno ismero d* - 0,15 0,25 -
Octanoato de isoamilo t - - -
Tabla III.3.1.4.1. Composicin qumica de los aceites esenciales
de frutos de Pistacia lentiscus segn diversos autores: (1) Willie
et al., 1990; (2) Boelens et al., 1991; (3) Fleisher et al., 1992.
* Ismero correcto no caracterizado. t = trazas.
-
Antecedentes
25
III.3.2. Componentes no voltiles La mayora de los investigadores
que han estudiado algn componente no voltil de Pistacia lentiscus,
no lo han hecho exclusivamente en esta especie sino para el
conjunto de P. lentiscus, P. terebinthus y P. vera. En 1965,
Marcopoulos obtiene el contenido en agua, protenas, nitrgeno libre,
fibra cruda y cenizas en semillas de P. lentiscus.
Aos ms tarde, Diamantoglou et al., en 1979 llevan a cabo un
seguimiento estacional del contenido en lpidos y cidos grasos para
P. terebinthus, P. vera y P. lentiscus. Se controlaron las
concentraciones de tales componentes en hojas y corteza. En
semillas, tambin siguieron fenolgicamente los contenidos de cidos
grasos. Las oscilaciones de tales componentes segn el periodo
estacional pueden resumirse en la Tabla III.3.2.1. P. lentiscus P.
terebinthus P. vera
Hojas Aumentan en fase de crecimiento temprano. Mnima
concentracin en verano
Aumentan los lpidos al comienzo del desarrollo de las hojas en
verano; Decrece en Otoo durante el periodo de senescencia de las
hojas
Lpidos
Corteza Alta concentracin en invierno temprano. Decrece durante
el periodo de crecimiento y adems en verano
Decrece el contenido lipdico antes del periodo de frondosidad de
la planta y en el periodo de fructificacin
Semillas Mnimo contenido de cido oleico en verano y mximo de
linoleico
Concentraciones intermedias de cidos oleico y linoleico durante
el verano
Mximo contenido de cido oleico y mnimo de linoleico durante el
verano
Hojas Aumenta cido oleico en verano. Aumenta linoleico y
linolnico en invierno
Acido linoleico aumenta en la senescencia de las hojas
Acidos grasos
Corteza Aumenta cido oleico en verano. Aumenta linoleico y
linolnico en invierno
No hay datos
Tabla III.3.2.1. Evolucin del contenido en lpidos y cidos grasos
durante un periodo de un ao en las tres especies de Pistacia
exitentes en Grecia (Diamantoglou et al., 1979).
Murko et al., en 1983 cuantifican el contenido total de taninos
en hojas y corteza
para P. lentiscus y P. terebinthus: 14-16 % y 21-23 %,
respectivamente. Resultaron ser taninos altamente activos, del tipo
galocatecol, con sustancias derivadas del galotanino y del cido
glico libre.
-
26
En 1984, Boar et al. aslan un triterpenoide bicclico (1) a
partir de las resinas de P. lentiscus y P. terebinthus, el cual
parece ser un intermedio en la ciclizacin biolgica del
2,3-epoxi-escualeno.
1
Marner et al., en 1991, aislaron dos triterpenos tricclicos con
esqueleto de malabaricano (2, 3) y dos tetracclicos del grupo
damarano (4, 5), a partir de la fraccin neutra de la resina de P.
lentiscus.
2 R1 = -OH, H 3 R1 = O
HO
OHH
H
R1
-
Antecedentes
27
4, 5
Meletiou-Christou et al., en 1994 estudian cambios estacionales
en el nivel de
carbohidratos, lpidos y contenido en nitrgeno para hojas de
cuatro arbustos tpicos de zonas esclerfilas mediterrneas, entre
ellos P. lentiscus. Los ejemplares fueron recolectados tanto de
zonas expuestas a altas radiaciones solares como de zonas umbras,
encontrndose variaciones en la composicin.
R2
R1
R1 = OAc, H
R1 = O
R2 =HO
R2 =
-
Antecedentes
29
III.4. COMPOSICIN QUMICA DE Pistacia terebinthus L.
III.4.1. Componentes voltiles
Son escasos y antiguos los estudios realizados hasta la fecha
sobre componentes voltiles de P. terebinthus. En 1935, Emmanuel
determina los ndices fsicos de un aceite esencial, obtenido en un
16 %, a partir de un extracto etreo de resina recolectada en la
Isla de Quo. En 1937, Tsatsa estudi el aceite de esta misma
trementina, que defini como ligeramente fluorescente, identificando
tres componentes: pineno, dipenteno y borneol. Finalmente, Salgues,
en 1958 encuentra en agallas maduras de P. terebinthus la presencia
de -borneol.
III.4.2. Componentes no voltiles
Comparativamente ms numerosos son los anlisis de componentes no
voltiles, contenidos en frutos, agallas, hojas y corteza de P.
terebinthus. La primera cita bibliogrfica con la que contamos data
de 1928, cuando Anon realiza un listado de especies vegetales
presentes en el British Empire, ricas en sustancias tnicas, entre
ellas, P. terebinthus. Ese mismo ao, De la Brure idea un mtodo para
detectar colorimtricamente la concentracin de taninos de una
muestra vegetal. Mell escribe sobre la posibilidad de obtener
taninos a nivel industrial a partir de agallas de P. terebinthus
(60-75 % de sustancias tnicas), y Hanley propone el uso de taninos
a nivel comercial para el curtido y manufacturacin de pieles. En
1950 Yazicioglu, en Turqua, determin la composicin del fruto de P.
terebinthus en lo que a contenido graso (42,0 %), protenico (9,7 %)
y acuoso (5,9 %) se refiere. El aceite de semillas, a su vez,
estaba constituido por cidos grasos saturados (20,6 %), cido oleico
(58,4 %) y cido linoleico (21,1 %), entre otros. Salgues, en 1958
analiz las agallas producidas por Pemphigella cornicularia y P.
utricularia, tanto en primavera como en otoo, comparndolas con
hojas normales de los mismos rboles. Obtuvo el contenido en agua,
nitrgeno, lpidos, azcares, minerales y resinas y lleg a concluir
que los tejidos enfermos tienden a ser como tejidos jvenes
sanos.
En 1964, en Estambul, Bileran et al. realizan un estudio
mediante cromatografas en papel y columna de estos aceites de
semilla procedentes de las cubiertas externas y del endocarpo de
las mismas. La composicin qumica de ambas partes vienen dadas
en
-
30
la Tabla III.4.2.1. Las semillas tambin fueron objeto de estudio
para Marcopoulos en 1965, quien describi los siguientes contenidos:
8 % de agua, 38 % de protenas, 15 % de nitrgeno libre, 27 % de
fibra cruda y 2 % de cenizas. Semilla Acido graso Endocarpo
Cubiertas externas Acido esterico 5,4 4,2 Acido oleico 41,5 45,7
Acido linoleico 24,5 8,6 Acido palmtico 14,2 21,5 Acido
palmitoleico 14,3 18,0 Tabla III.4.2.1. Contenido en cidos grasos
del aceite de semillas de
Pistacia terebinthus (Bileran et al., 1964).
Tabazik-Wlotzka et al., en 1967 aslan del extracto neutro de las
hojas de P. terebinthus una mezcla de hidrocarburos alifticos y
alcoholes triterpnicos, as como tres alcoholes de naturaleza
poliisoprenoide, cuya frmula qumica (1) se expone a
continuacin:
1
Unos meses ms tarde, los mismos autores utilizan muestras
procedentes de renuevos de ramas jvenes, con hojas y tallos
exclusivamente. Extraen con ter de petrleo y determinan la
composicin de la fraccin neutra, encontrando alcoholes triterpnicos
(lupeol y cicloartenol), esteroles (-sitosterol, tanto en estado
libre como esterificado con cidos polihidroxlicos), steres
alifticos y una mezcla de alcoholes poliisoprnicos C50, C55 y
C60.
Persand, en 1968 utiliza la espectrometra de masas de alta
resolucin para elucidar las estructuras de algunos triterpenos
pentacclicos de origen natural presentes en mezclas de extractos.
Monaco et al., en 1973 encuentran en la fraccin neutra de la resina
de agallas de la planta, varios componentes (2, 3, 4, 5, 6, 7, 8,
9) de los que tambin determinan sus respectivas polaridades
eluyendo con diferentes disolventes orgnicos.
HCH2
C CH2
OH
n
n = 11, 12, 13
-
Antecedentes
31
2 Tirucalol (R1 = -OH, -H, R2 = Me)
7 26-Hidroxitirucalona (R1 = O, R2 = CH2OH) 9
Isomasticadienodiol (R1 = -OH, -H, R2 = CH2OH)
3 Aldehdo oleannico (C30H46O2) (R1 = O, R2 = CHO) 4 Aldehdo
oleanlico (R1 = -OH, -H, R2 = CHO) 8 Eritrodiol (R1 = -OH, -H, R2 =
CH2OH)
5 Dipterocarpol (R1 = O) 6Danmarenodiol (R1 = -OH, -H)
R1
R2
R1
HO
R1
H
R2
-
32
Los mismos autores (Monaco et al., 1974; Caputo et al., 1975)
realizaron una extraccin continua con ter en fro de las agallas
producidas por Pemphigus semilunarius y P. utricularius,
encontrando los mismos compuestos ya descritos anteriormente, junto
a tres triterpenos nuevos (detectados nicamente con el segundo de
los fidos) cuyos nombres y estructuras qumicas (10, 11, 12) se
expresan a continuacin.
10 Dihidroisomasticadienonato de metilo (R1 = R2 = O, R3 =
CO2Me) 11 Dihidromasticadienodiol (R1 = OH, R2 = H, R3 = CH2OH)
12 Dihidro-3-epidihidroisomasticadienolato de metilo
En 1995, Agar et al. caracterizan los lpidos contenidos en
semillas (endocarpio y epicarpio) de las especies de Pistacia
existentes de forma natural en Turqua, entre ellas P. terebinthus
(Tabla III.4.2.2). Endocarpio Epicarpio Acido oleico 48,49 - 50,83
48,49 - 50,83 Acido linoleico 33,48 - 37,50 12,90 - 22,03 Acido
palmtico 9,55 - 11,95 23,49 - 27,98 Acido palmitoleico < 1 1,32
- 5,05 Acido esterico 1,15 - 2,18 1,46 - 4,24
Tabla III.4.2.2. Oscilaciones en el contenido en cidos grasos de
diferentes especies de Pistacia (Agar et al., 1995)
R3
R1R2
CO 2Me
HO
-
Antecedentes
33
P. terebinthus tambin ha sido objeto de estudio para otros
autores, segn se recoge en el apartado III.1.2, quienes
investigaron aspectos de la composicin qumica de la planta, junto
con otras especies del mismo gnero (Diamantoglou et al., 1979;
Murko et al., 1983; Boar et al., 1984).
-
34
III.4.3. Componentes voltiles de otras especies de Pistacia
Acerca de los componentes voltiles de otras especies de
Pistacia, la ms estudiada hasta la fecha ha sido Pistacia lentiscus
L. Tambin los componentes voltiles de la resina de Pistacia khinjuk
han sido estudiados (Mahmud et al., 1994), los de la corteza de P.
vera (Baser et al., 1995), as como los de agallas y corteza de P.
integerrima (Ansari et al., 1991, 1993, 1998). En agallas de esta
ltima especie se encontraron 38 componentes de los cuales el 91 %
eran monoterpenos; en corteza se identificaron 22 constituyentes,
de los que el 82,3 % tienen naturaleza monoterpnica (Tabla
III.4.3.1).
Pistacia integerrima Pistacia khinjuk Pistacia vera
Pistacia integerrima Agallas
Componentes Resina Corteza Corteza 1993 1998 -Pineno 61,13 54,4
14,0 21,8 34,5 Mirceno 8,3 1,6 0,8 - 0,8 -Pineno 2,5 0,8 5,4 16,2
12,6 p-Cimeno 2,5 0,4 2,0 0.5 3,1 3-Careno 1,4 4,0 4,8 11,1 2,1
Nonanal + Linalol 2,8 0,1(a) - - - -Cariofileno 1,95 - 2,3 - t
-Tuyeno t - - - - Canfeno t - - - - -Fencheno t - - - - Sabineno t
- - - 14,0 -Felandreno t - - 15,5 - -Felandreno t 0,2 - 5,7 -
Limoneno t 6,6 5,0 6,4 9,1 Cineol t - - - - -Ocimeno - 0,2 - 4,1 -
-Ocimeno - 0,4 - 4,3 - Fenchona t t - - - Borneol t 1,2 (b) 2,1 -
0,6 -Terpineno - 0,5 1,3 t 0,1 -Terpineol - - - 5.4 - Terpinen-4-ol
- 0,1 30,3 - 1,6 -Terpineol t 1,2 (b) 13,7 8,8 0,2
Tabla III.4.3.1. Componentes voltiles de la resina de Pistacia
khinjuk (Mahmud et al., 1994), de la corteza de Pistacia vera
(Baser et al., 1995) y de la corteza y agallas de Pistacia
integerrima (Ansari et al., 1991, 1993, 1998). t = trazas; (a)
Nonanal; (b) (-terpineol + borneol).
-
Antecedentes
35
III.5. COMPOSICIN QUMICA DE Bupleurum gibraltaricum Lam.
III.5.1. Componentes voltiles En 1986, Cabo et al. realizan un
estudio preliminar del aceite esencial de distintos rganos de una
muestra de Bupleurum gibraltaricum Lam. recolectada en la provincia
de Granada, en el que determinan ndices fsicos y qumicos,
identifican algunos componentes voltiles por cromatografa en capa
fina, ensayan su actividad antimicrobiana y estudian la esencia de
umbelas por cromatografa de gases-espectrometra de masas. Los
componentes identificados se detallan en la Tabla III.5.1.1,
indicndose adems el porcentaje en que estn presentes:
En 1989, Ocete et al. investigan diversas actividades biolgicas
del aceite esencial de umbelas (ver apartado III.5.4), aportando
porcentajes de presencia independientes para -pineno, 3-careno,
mirceno y -felandreno (Tabla III.5.1.2).
Componentes % B. gibraltaricum Hidrocarburos monoterpnicos
-Pineno/3-Careno 37,2 -Pineno 10,4 Limoneno 8,2 Mirceno/-Felandreno
7,3 p-Cimeno 2,7 Alcoholes Linalol/Acetato de linalilo t*
Terpinen-4-ol 8,9 Terpineol/Borneol/Estragol/Ac. terpenilo 2,5
Cetonas Carvona t Esteres Acetato de linalilo/Linalol t Acetato de
bornilo 2,2 Ac. terpenilo/Terpineol/Borneol/Estragol 2,5 Fenoles
Anetol t Timol t Carvacrol 1,2 Eugenol 1,0 pxidos 1,8-Cineol 7,6
Tabla III.5.1.1. Proporciones relativas de los componentes
identificados en el aceite esencial de umbelas de Bupleurum
gibraltaricum (Cabo et al., 1986). * trazas
-
36
Tambin en 1989, Gil et al. realizaron un estudio comparativo de
aceites esenciales de umbelas de muestras de B. gibraltaricum
recolectadas en tres reas diferentes de la Provincia de Granada: La
Sierra de Czulas, la Reserva de Quntar y el Balcn de Canales. Los
componentes encontrados en los aceites y los porcentajes en cada
rea de recoleccin son los que se exponen en la Tabla III.5.1.3.
Componentes %
B. gibraltaricum Canales Quntar Czulas
Hidrocarburos -Pineno 22,4 18,6 9,0 3-Careno/-Pineno 21,1 21,8
37,3 Mirceno/-Felandreno 3,4 13,6 6,3 Limoneno 12,5 10,8 8,6
1,8-Cineol 3,9 4,4 8,4 p-Cimeno 2,9 3,3 4,4 Alcoholes
Linalol/Acetato de linalilo 2,1 t* t
Terpineol/Borneol/Estragol/Acetato de terpenilo
2,9 1,7 3,5
Terpinen-4-ol 6,0 5,6 9,2 Esteres Acetato de linalilo/Linalol
2,1 t t Acetato de bornilo 2,2 t 1,9 Acetato de
terpenilo/Terpineol/Borneol /Estragol
2,9
1,7
3,5
Cetonas Carvona - t - Fenoles Metil eugenol 2,5 1,8 1,5
Carvacrol 1,5 1,3 t
Tabla III.5.1.3. Analisis cuantitativo del aceite esencial de
umbelas de muestras de Bupleurum gibraltaricum recolectadas en tres
zonas de la provincia de Granada (Gil et al., 1989). *t: trazas
Componentes % B. gibraltaricum Hidrocarburos -Pineno 10,5
-Pineno 4,0 3-Careno 33,0 Limoneno 8,2 Mirceno 3,5 -Felandreno 4,0
Epxidos 1,8-Cineol 7,5 Alcoholes Terpinen-4-ol 9,0 Tabla III.5.1.2.
Componentes mayoritarios del aceite esencial de umbelas de
Bupleurum gibraltaricum responsables de las actividades biolgicas
ensayadas (Ocete et al., 1989) (ver apartado III.5.4).
-
Antecedentes
37
Recientemente, Barrero et al., 1998, han aislado del extracto
hexnico de una muestra de B. gibraltaricum recolectada en la Sierra
de Quntar (Granada) diversos terpenoides bien conocidos: -limoneno,
sabineno, p-cimeno, longicicleno, -copaeno, -bourboneno, germacreno
D, -muuroleno, cis-calameneno, nerolidol, etc.
III.5.2. Componentes no voltiles Comparativamente, son pocos los
trabajos existentes sobre componentes no voltiles de B.
gibraltaricum. En un estudio histolgico de la planta, concretamente
del fruto de la misma, se ha determinado la presencia de grasas.
Asimismo, se detecta la existencia de flavonoides, empleando el
mtodo de Shinoda (Cabo et al., 1986d). Utrilla et al., en 1991
aslan dos saikosaponinas (1, 2) a las que atribuyen la actividad
antiinflamatoria del extracto alcohlico de raz de B.
gibraltaricum.
1 Saikosaponina a (R1 = Glucosa-3-Fucosa-, R2 = OH, R3 = -OH) 2
Saikosaponina d (R1 = Glucosa-3-Fucosa-, R2 = H, R3 = -OH)
Por ltimo, Barrero et al., 1998, aslan cuatro aldehdos
monoterpnicos, de volatilidad media, del extracto hexnico de las
hojas de la planta, cuyas estructuras (3, 4, 5, 6) fueron
elucidadas por anlisis espectroscpico siendo precursores inmediatos
de los derivados aromticos 2,3,4- y 2,3,6-trimetilbenzaldehdo.
3 4
R1O
R3
CH2R2
O
CHOCH3H3C
H3C
OH
OCHO
O
CH3
H
H3C
H3C
O
-
38
5 6
III.5.3. Componentes voltiles de otras especies de Bupleurum sp.
Con respecto a la composicin qumica de aceites esenciales
pertenecientes a otras especies de Bupleurum, hay algunos trabajos
publicados. Peyron et al., ya en 1970 publican un artculo sobre la
esencia de la especie Bupleurum fruticosum L.
Aos ms tarde, Manunta et al., 1987, 1992, realizaron un estudio
sobre los tejidos secretores de la planta y la composicin qumica
del aceite esencial, cuya composicin se detalla en la Tabla
III.5.3.1. Destacar el comentario de los autores referente al
"hipottico" bupleurol, no encontrado en la fraccin alcohlica y del
que se sospechaba poda ser un artefacto, as como el alto porcentaje
de presencia en la muestra de -felandreno, en un 64,5 %.
Componentes % B. fruticosum
Desconocido* 1,0 Sabineno 20,7 Mirceno 2,9
-Felandreno - Ocimeno 0,3 -Terpineno 0,8
-Felandreno 64,5
-Terpineno 2,0 Terpinoleno 0,4 Terpinen-4-ol 3,3
-Terpineol 0,4 Estragol 0,4
Tabla III.5.3.1. Composicin de la esencia procedente de parte
area de Bupleurum fruticosum (Manunta et al., 1987). * Componente
no identificado pero con tiempo de retencin semejante al del
-pineno.
CHOCH3H3C
H
CH3
O
O
CHOCH3H3C
OH
CH3O
-
Antecedentes
39
En la siguiente Tabla se recoge la composicin del aceite
esencial de una muestra de umbelas fructificadas de B. fruticosum
de origen espaol (Lorente et al., 1989), bastante diferente de la
dada por Manunta et al., 1987.
Componentes % B. fruticosum Hidrocarburos -Pineno 41,2 -Pineno
35,9 Mirceno a 3,1 -Felandreno a 3,1 Limoneno b 4,1 -Terpineno 2,5
p-Cimeno 2,9 Epxidos 1,8-Cineol b 4,1 Alcoholes Linalol t*
Terpinen-4-ol t Borneol t Esteres Acetato de linalilo t Fenoles
Estragol t Timol t Carvacrol 1,5
Tabla III.5.3.2. Composicin del aceite esencial de una muestra
de umbelas fructificadas de Bupleurum fruti- cosum (Lorente et al.,
1989).
a, b Componentes en los que no se ha resuelto el porcentaje de
presencia individualmente.
* trazas Ms recientemente, Giamperi et al., 1998, estudian una
muestra de B. fruticosum procedente de Libia, confirmando
finalmente el carcter de artefacto del bupleurol. Bupleurum
fruticescens L. tambin ha sido objeto de estudio a nivel de
composicin qumica de su esencia (Martn et al., 1993). Los
principales componentes identificados de una muestra de umbelas, en
periodo de floracin, recolectadas en la Sierra de Baza (Granada) se
exponen en la siguiente Tabla.
Componentes % B. fruticescens Hidrocarburos -Pineno 16,9 -Pineno
a 0,9 3-Careno a 0,9 Mirceno b 1,0 Sabineno b 1,0 Limoneno 2,5
-
40
Componentes % B. fruticescens -Terpineno 5,0 p-Cimeno 4,4
-Cariofileno 30,6 -Humuleno 4,8 -Cadineno 6,0 Alcoholes
Terpinen-4-ol 0,8 Geraniol 3,4 Aldehdos Citral 1,8 Fenoles Timol
0,9 Carvacrol 1,8
Tabla III.5.3.3. Composicin del aceite esencial de una muestra
de apndices florales de la especie Bupleurum fruticescens (Martn et
al., 1993).
a, b Componentes en los que no se ha resuelto el porcentaje de
presencia individualmente.
En 1980, Ashraf et al. investigaron en Pakistn las
propiedades
fisicoqumicas y composicin de Bupleurum linearifolium
encontrando los principios voltiles relacionados a continuacin, en
los porcentajes que se indican (Tabla III.5.3.4). Posteriormente, y
tambin en Pakistn, en 1987, Ahmad et al. estudiaron la composicin
qumica de la esencia de Bupleurum tenue as como la de Bupleurum
stewartianum, dos especies ausentes en la Pennsula Ibrica. Los
componentes mayoritarios de cada una de ellas, se resumen en la
Tabla III.5.3.4. Componentes %
B. linearifolium B. tenue B. stewartianum
-Pineno 2,3 1,7 2,0
-Tuyeno 1,1 2,0 1,7 Xanteno 6,1 8,7 9,3 Canfeno 3,0 4,0 3,5
Mirceno 2,4 - 3,6
-Felandreno 2,8 2,1 2,5 Limoneno 2,5 3,0 2,3
-Terpineno 1,5 - 1,2 p-Cimeno 0,9 1,8 1,0 Acetato de geranilo
7,5 9,8 9,1 Acetato de citronelilo 7,1 8,4 8,4 Borneol 3,0 3,0
2,9
-Terpineol 19,5 - 20,5 Cumarinas 18,3 22,8 21,3 Compuestos
hidroxilados 2,0 - 3,5 Bupleurol 9,0 - -
Tabla III.5.3.4. Componentes qumicos de los aceites esenciales
de Bupleurum linearifolium (Asrhaf et al., 1980), Bupleurum tenue
(Ahmad et al., 1987) y Bupleurum stewartianum (Ahmad et al.,
1987).
-
Antecedentes
41
III.5.4. Actividades biolgicas ensayadas en especies del gnero
Bupleurum
Son numerosas las actividades biolgicas ensayadas con diferentes
especies del gnero Bupleurum. En las investigaciones realizadas al
respecto, se emplean tanto extractos acuosos, hexnicos, butanlicos
o etanlicos, principalmente de races, como aceites esenciales,
preferentemente de partes areas. Para facilitar la consulta de este
bloque, primero trataremos las investigaciones realizadas con
Bupleurum falcatum, por ser sta la especie del gnero que mayor
inters ha despertado. Seguiremos exponiendo los estudios realizados
con Bupleurum gibraltaricum, la planta objeto de nuestro estudio,
para terminar con otras especies del gnero Bupleurum.
III.5.4.1. Bupleurum falcatum L. De Bupleurum falcatum L. se han
ensayado, fundamentalmente en Japn y China, un importante nmero de
actividades biolgicas, especialmente de extractos de raz. Esta
especie, citada en la Farmacopea japonesa bajo el nombre de saiko
(Otsuka et al., 1978), fue inicialmente estudiada desde el punto de
vista qumico, por Takeda y Kubota, en 1958. En la raz se
encontraron principalmente saponinas y sapogeninas, que recibieron
el nombre genrico de saikosaponinas y saikogeninas,
respectivamente. Si bien el nmero de saikosaponinas y saikogeninas
aisladas de B. falcatum es realmente elevado, a continuacin se
renen aquellas ms frecuentes y sobre las que se han realizado
ensayos biolgicos.
1 Saikosaponina a ( R1 = Glucosa-3-Fucosa-, R2 = OH, R3 = -OH) 2
Saikosaponina d ( R1 = Glucosa-3-Fucosa-, R2 = H, R3 = -OH) 7
Saikosaponina c ( R1 = Ramnosa-4-Glucosa-6-Glucosa-, R2 = H, R3 =
-OH) 8 Saikogenina G ( R1 = H, R2 = OH, R3 = -OH) 9 Saikogenina E (
R1 = H, R2 = H, R3 = -OH)
R1O
R3
CH2R2
O
-
42
10 Saikosaponina f (R1 = Ramnosa-Glucosa-Glucosa-, R2 = -OH)
11 Saikogenina A (R1 = OH, R2 = -OH) 12 Saikogenina D (R1 = OH,
R2 = -OH) 13 Saikogenina C (R1 = H, R2 = -OH)
Dado el inters que se ha generado en torno a estas molculas,
sobre las que ya existen ensayos biolgicos en fase de
experimentacin clnica (donde se determinan dosis mnimas
inhibitorias y dosis txicas para ser utilizadas en humanos) se han
comenzado a investigar mtodos de produccin de estos principios
activos, basados en el cultivo en campo de la planta y tambin in
vitro. As por ejemplo, hay resultados satisfactorios sobre el
cultivo in vitro de B. falcatum y la acumulacin en raz de una mayor
concentracin de saikosaponinas (Hosada et al., 1990) y sobre
aislamiento de poliacetilenos, tambin procedentes de la raz (Morita
et al., 1991).
Lee et al., 1996 ponen a punto un protocolo de trabajo para
acelerar la germinacin a partir de semillas de la planta con unas
determinadas caractersticas y Shon et al., 1997, investigan acerca
de algunos factores que afectan a la formacin del callo en cultivo
de anteras.
HO CH2R1
R2
OH
R1O
R2
OH
-
Antecedentes
43
Minami et al., en 1997, desarrollan un sistema de cultivo para
aumentar el contenido en saikosaponinas a, c y d de B. falcatum.
Shon et al., en dos trabajos publicados en 1998 estudian la
produccin de materia seca en cultivos de plantas de B. falcatum de
diferentes edades y su eficiencia sobre la utilizacin de la energa
solar por parte de las mismas.
III.5.4.1.1. Actividad antiinflamatoria
Takagi et al. y Shibata, en 1969a y 1970 respectivamente,
estudian la actividad antiinflamatoria del extracto de raz,
correlacionando a posteriori los resultados farmacodinmicos
experimentales con sus correspondientes aplicaciones clnicas. La
presencia de las saikogeninas E y G parece ser la responsable de
las actividades ensayadas.
Yamamoto et al.,1975a, ensayan la actividad antiinflamatoria de
las
saikosaponinas a, c y d mediante administracin oral e
intramuscular de las mismas, en ratas albinas hembra de la raza
Wistar. No encontraron diferencias notorias con respecto a la va de
administracin, con iguales resultados en uno y otro caso, pero
solamente las saikosaponinas a y d presentaron actividad frente a
la inflamacin, siendo la c inactiva. Juei-Tang Cheng et al., en
1986 determinan tambin el efecto antiinflamatorio de la saikogenina
A.
III.5.4.1.2. Actividad hormonal
Yokoyama et al., en 1981, observan la secrecin de corticosterona
inducida
por varias saikosaponinas, en glndulas adrenales de ratas. Hiai
et al., en 1986, estudian, basndose en una tcnica colorimtrica de
determinacin de saikosaponinas biolgicamente activas, desarrollada
previamente (Yokoyama et al., 1976), el efecto de la saikosaponina
d en el crecimiento de las glndulas adrenal y timo, tanto de ratas
normales como tratadas con dexametasona. Nose et al., 1989,
determinan la influencia sobre la secrecin de corticosteronas de
distintas saikosaponinas as como de sus metabolitos activos, siendo
administradas por va oral y metabolizadas en el tracto digestivo de
ratas.
III.5.4.1.3. Actividad sobre el sistema inmunolgico
Tambin se ha ensayado la accin de B. falcatum sobre el sistema
inmune, concretamente el efecto de induccin ejercido por varias
saikosaponinas sobre la sntesis de prostaglandinas (Ohuchi et al.,
1985), y la accin de las mismas en la respuesta inmune mediada por
antgenos T-dependientes y T-independientes (Yamaguchi et al.,
1985). Kumazawa et al., 1988, trabajan en la activacin de los
macrfagos del intestino delgado, como respuesta inmune ante la
inyeccin intraperitoneal del extracto de esta planta. Estudiando
otro tipo de metabolitos, Yamada et al.,1988, 1989, investigan
sobre un polisacrido pctico contenido en la raz de la planta, con
accin inmungena. Su mecanismo de accin radicaba en la activacin del
complemento.
-
44
Ushio et al., en diversas publicaciones (1991a, 1991b, 1991c,
1992) sobre las saikosaponinas, determinan la influencia de la
saikosaponina d sobre la morfologa y funcin de los macrfagos y sus
efectos antivirales frente a Herpes simplex y al virus del
sarampin, por inactivacin de los mismos. De esta saikosaponina
determinan tambin su interaccin y sinergismo sobre la proliferacin
de linfocitos, funciones de macrfagos y la respuesta inmune en
general, experimentada farmacodinmicamente en ratones y ratas.
Sakurai et al., en 1996, detectan en raz de B. falcatum un
polisacrido
pctico al que llamaron "bupleuran 2IIc" con capacidad de
reaccionar con las prostaglandinas y prevenir la lcera pctica.
III.5.4.1.4. Actividad sobre la funcionalidad renal Sobre el
aclaramiento renal y diversas insuficiencias renales parece ser que
B. falcatum es capaz de actuar, favoreciendo la funcionalidad
normal del rin. En 1986 Abe et al. demuestran que la saikosaponina
d prevena la proteinuria inducida por los aminoglicsidos,
antibiticos altamente nefrotxicos. Otros autores, estudian el
efecto antinefrtico de las saikosaponinas a y d, a dosis de 5 mg
por Kg de peso y da, va intraperitoneal, llegando a mejorar la
glomerulonefritis inducida por anticuerpos (Hattori y Suzuki,
1991).
Matshumoto et al.,1995, caracterizan la regin especfica de
reaccin de un polisacrido pctico procedente de B. falcatum con una
endopoligalacturonidasa, enzima capaz de catalizar el aclaramiento
renal de inmuno-complejos. El "bupleuran IIc", aislado por Sakurai
et al. en 1996, tena poder para favorecer el aclaramiento renal de
inmunocomplejos en ratones, como tambin demostraron Matsumoto et
al. en 1996.
III.5.4.1.5. Actividad sobre el aparato digestivo
Yamamoto et al., 1975b, determinan en ratas la accin metablica
de las
saikosaponinas a y d sobre el hgado como hipocolesteremiantes,
calculando los niveles plasmticos de dichas lipoprotenas antes y
despus de la ingesta de las saponinas aisladas. Lin et al., en
1990, demuestran los efectos beneficiosos de la ingestin del
extracto acuoso de raz como protector heptico.
A nivel del tracto digestivo en general, Sun et al., 1991,
estudian la accin
de una fraccin polisacrida obtenida de la raz de la planta sobre
la lcera gstrica.
III.5.4.1.6. Actividad sobre el sistema nervioso central En
relacin con la bioactividad de la especie sobre el cerebro, Shibata
et al.,
1969b, estudian la toxicidad aguda de las saikogeninas E y G y
su accin depresora sobre el sistema nervioso central. Sugaya et al.
descubren, en 1991, el efecto protector de B. falcatum en cerebro
de rata ante el dao producido en el crtex cerebral por un foco de
cobalto aplicado en el hipocampo. Nizhizawa et al., 1991,
-
Antecedentes
45
observan, mediante experimentos realizados con ratones, la
influencia de la ingesta de la planta sobre el aprendizaje y la
memoria.
III.5.4.1.7. Efectos a nivel ultraestructural
De gran parte de las saponinas mostradas al principio de este
apartado se han ensayado a nivel microscpico los efectos producidos
sobre diversos tipos de tejidos o clulas especializadas: a) la
actividad que poseen al ser inyectadas y el papel jugado por las
mismas sobre las membranas de los glbulos rojos, b) el efecto en la
funcin heptica (concretamente a nivel de la NADPH citocromo
reductasa) y las modificaciones ultraestructurales producidas sobre
la superficie de la membrana de los hepatocitos, las cuales se
detectaron por resonancia de spin electrnico (Abe et al., 1978a,
1978b, 1980, 1981).
Otros componentes de distinta naturaleza, obtenidos de la raz de
B.
falcatum han experimentado tambin cierto protagonismo en el
ensayo de diversas actividades biolgicas. As, Iwama et al., en
1987, estudian la accin mitognica de un lipopolisacrido procedente
de la raz.
III.5.4.2. Bupleurum gibraltaricum Lam. De Bupleurum
gibraltaricum Lam. hay ensayos sobre diferentes aspectos de su
bioactividad, aunque, desde luego nada comparables con los
existentes para la especie citada anteriormente. Con respecto a la
actividad antimicrobiana, ensayada frente a seis bacterias y un
hongo por Cabo et al.,1986b, el aceite esencial obtenido durante la
floracin pareca ser el ms activo, tanto frente a Gram + como frente
a Gram -, bacterias cido-alcohol resistentes y frente a Candida
albicans. Se calcul adems la concentracin mnima inhibitoria para
cada microorganismo. En 1989, Ocete et al., conociendo el uso
popular atribuido a esta planta, como antimicrobiana y
antiinflamatoria, decidieron investigar en detalle sobre el aceite
esencial de umbelas, y sus efectos en la inflamacin inducida por
inyeccin subcutnea de carragenina, as como la actividad en tero
aislado de rata, para determinar despus el o los componentes
responsables de la accin. La excelente actividad antiinflamatoria
obtenida, tanto en fase aguda como en fase crnica, era debida, segn
estos autores, al 3-careno (14), seguido del -pineno (15) y -pineno
(16), efectivos a partir de las tres horas post-inyeccin y
mayoritarios en la esencia, como se puede observar en la Tabla
III.5.1.2, anteriormente expuesta.
14 15 16
-
46
Tambin Gil et al. ensayaron la actividad antiinflamatoria tanto
en fase aguda como crnica de las esencias de las tres localidades
granadinas ya mencionadas en el apartado III.5.1, (Tabla
III.5.1.3). El experimento se llev a cabo sobre ratas hembra de la
raza Wistar. Se indujo un edema plantar por inyeccin subcutnea de
carragenina en los animales. La esencia obtenida del arbusto
recolectado en la Sierra de Czulas era la ms efectiva en fase
aguda. La originaria de la Reserva de Quntar tena los mejores
resultados en fase crnica de la inflamacin. Segn los autores, los
responsables de la actividad antiinflamatoria, corroborando los
resultados del trabajo de Ocete et al.,1989, eran
3-careno y -pineno. Utrilla et al., en 1991 aslan en B.
gibraltaricum dos saikosaponinas a las que atribuyen la actividad
antiinflamatoria del