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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLOFACULTAD DE CIENCIAS
BIOLGICASDEPARTAMENTO ACADMICO DE QUMICA BIOLGICA Y FISIOLOGA
ANIMAL
MTODOS INSTRUMENTALES DE ANLISIS
T.1. Agua de uso en el laboratorio. Tipos. Tcnicas de
purificacin. Control decalidad.T.2. Soluciones buffer
(Amortiguadoras): Definicin. Propiedades. Regulacindel pH por una
solucin amortiguadora. Buffers ms comunes.
Aplicaciones.Potenciometra: Fundamento. Tipo de electrodos. Medicin
del pH.Ms.C. Patricia Elizabeth Torres Plasencia
EL AGUA DE USO EN EL LABORATORIOUno de los reactivos ms comunes
usado en el laboratorio y considerado como disolvente universal es
el agua, por lo tanto es de vital importancia cuidar su pureza. Si
se mantiene un control sistemtico de la pureza o calidad del agua
para uso en el laboratorio se promueve la eliminacin de sesgo en
los resultados, se evitan interferencias o reacciones colaterales y
se aumenta as la confiabilidad en dichos resultados.En la
actualidad los laboratorios deben establecer requisitos de calidad
o pureza, as como mtodos de produccin y anlisis de agua donde deben
establecerse el los procesos para su purificacin.COMPOSICIN DEL
AGUAEl ciclo natural del agua tiene diferentes compuestos que se
consideran impurezas (Tabla 1). Estas impurezas presentes en el
agua se pueden clasificar en tres grandes grupos: Inicas Disueltas
(inorgnicos).No inicas Insolubles (orgnicos, microorganismos,
pirgenos, virus, partculas en suspensin, coloides). Gaseosas.
Pirgenos (lipopolisacridos)Partculas en suspensin.
En los laboratorios se requiere usar agua con mnimo de
impurezas. Los requisitos de calidad o pureza se encuentran
establecidos en base a diferentes normas o criterios, dependiendo
de las instituciones u organismos internacionales que establecen
las referencias, entre estas se encuentran la American Society for
Testing and Materials (ASTM), British Standards Institution (BSI) y
la International Organization for Standardization (ISO).Actualmente
estn definidos los diferentes niveles de pureza del agua en funcin
de los parmetros fsico-qumicos, tales como conductividad elctrica,
resistividad, pH, contenido de carbono orgnico total (TOC), sodio,
cloruros y slice, as como
microbiolgicos.http://www.astm.org/Standards/D1193.htmPARMETROS DE
CONTROL DE CALIDAD PARA INDICAR LA PUREZA DEL AGUAResistividad
Tendenciadel agua sin iones a resistirsea la conduccin de
electricidad.La unidad de medida es el megaohmio-centmetro
(M.cm),abreviado a menudo en M o meg. Se utiliza comnmente para el
agua de gran pureza.El valor mximo terico es de 18,2 M.cm a 25 C.
Cuanto ms alto es el contenido inico ms baja es la resistividad y
cuanto ms bajo es el contenido inico, ms alta es la resistividad
(un nivel alto de resistividad es bueno). En los sistemas de agua
ultrapura, este valor se determina mediante un contador en lnea.
Las medidas de conductividad y resistividad son proporcionalmente
inversas.Conductividad Tendenciadel agua con iones a conducir
electricidad.La unidad de medida esmicrosiemens/centmetro (S/cm) o
microhmio/cm. Se utiliza para medir el agua de suministro o aguas
tratadas de calidad inferior.Cuantos ms iones hay en el agua, mayor
es la conductividad.Se mide con un contadorde conductividad.Carbono
orgnicototal (COT) medida de los contaminantes orgnicos encontrados
en el agua.La unidad de medida es partes por milln (ppm) o partes
por mil millones (ppb). En el agua de suministro puede oscilar
entre 2 y 5 ppm, y la pureza ms alta del agua estara entre 1 y 5
ppb. La medicin del COT se realiza con un sistema en lnea.Parmetros
microbiolgicos
CONDUCTIVIDAD Y RESISTIVIDADLa conductancia o resistencia
elctrica se mide con dos electrodos en lnea. La corriente elctrica
se desplaza por el agua mediante molculas inicas a modo de
escalones en progresin. Cuantos menos escalones haya, ms difcil es
el paso de la electricidad. Habr, por tanto, menos conductancia
elctrica y ms resistencia. La temperatura del agua tambin afecta a
la conductividad/resistividad, por lo que la lectura estndar se
suele realizar a 25 C con compensacin de temperatura. Utilizamos la
resistividad para medir la concentracin de iones en el agua
pura.
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USOS DEL AGUA CLASIFICADA POR ASTM SEGN SUS CARACTERSTICAS
FISICO-QUMICASTIPO IUsada para procedimiento que requieren de mxima
exactitud y precisin; tales como espectrometra atmica, fotometra de
llama, enzimologa, gas en la sangre, soluciones buffer de
referencia y reconstitucin de materiales liofilizados usados como
estndares. El agua Tipo I, debe seleccionarse siempre que en la
prueba sea esencial un nivel mnimo de componentes ionizados o
cuando se preparan soluciones para anlisis de rastreo de
metales.TIPO IIRecomendada para la mayora de las pruebas analticas
y generales de laboratorio, tales como los anlisis hematolgicos,
serolgicos y microbiolgicos; as como para mtodos qumicos en los que
especficamente no se indique o se haya comprobado que requieren
agua de calidad Tipo I. La ASTM especifica que el agua Tipo II sea
preparada por destilacin y como factor importante recomienda que
est siempre libre de impurezas orgnicas.TIPO IIISatisfactoria para
algunas pruebas generales de laboratorio; para la mayora de los
anlisis cualitativos, tales como uroanlisis, procedimientos
histolgicos y parasitolgicos; para el enjuague de muestras
analticas; preparacin de soluciones de referencia; y para el lavado
o enjuague de cristalera (el enjuague final de la cristalera debe
hacerse con el tipo de agua especificado para el procedimiento
realizado).TIPO IVAgua con una conductividad final mxima de 5,0
S/cm. Sirve para la preparacin de soluciones y para el lavado o
enjuague de cristalera.USOS DEL AGUA CLASIFICADA POR ISO 3696: 1987
SEGN SUS CARACTERSTICAS FISICO-QUMICASGrado 1- Exenta bsicamente de
contaminantes constituidos por iones disueltos o coloidales y
materias orgnicas. Es apropiada para los requisitos de anlisis ms
exigentes, incluyendo la cromatografa liquida de alta definicin. Se
puede preparar por un tratamiento adicional del agua de grado 2
(por ejemplo osmosis inversa o desionizacin seguida de filtrado a
travs de una membrana con tamao de poro de 0,2 m para separar las
partculas, o por redestilacin en un aparato de slice fundido).Grado
2- Con muy pocos contaminantes inorgnicos, orgnicos o coloidales.
Es apropiada para anlisis delicados, incluyendo la espectrometra de
absorcin atmica (EAA) y la determinacin de componentes en
cantidades mnimas. Se puede preparar por destilacin mltiple o por
desionizacin u osmosis inversa seguida de destilacin.Grado 3-
Apropiada para la mayora de los trabajos de qumica en laboratorios
por va hmeda y la preparacin de soluciones de reactivos. Se puede
preparar mediante una sola destilacin, por desionizacin o por
osmosis inversa. Salvo indicacin en contrario, se puede utilizar
para el trabajo normal de anlisis.PROCESOS DE PURIFICACIN DEL
AGUA
Existen diferentes calidades de agua y diversas necesidades en
funcin de su uso. En la purificacin existen distintos procesos para
eliminar las impurezas; entre los ms importantes se encuentran:
Filtracin. Ultrafiltracin. Destilacin. Osmosis Inversa. Adsorcin
con carbn activado. Desionizacin.Obtener agua de buena calidad para
los laboratorios, depende de la seleccin de la tecnologa de
purificacin correcta y de un diseo del sistema que mida y controle
de forma precisa las impurezas. Producir agua pura es slo una parte
de la ecuacin; lavalidacin de la calidad, el almacenamiento del
agua y el mantenimiento del sistema tambin son claves para asegurar
que tenga la calidad del agua que se necesita. FILTRACINExisten
filtros de profundidad (nominal) y de membrana (absoluto).Los
filtros de profundidad se suelen utilizar en el pretratamiento y
estn hechos de fibras reforzadas que envuelven tubos huecos y
ranurados. Conforme pasa el agua por la matriz de fibra reforzada
hacia el tubo central, las partculas se quedan en las fibras. Este
tipo de filtro es el utilizado tradicionalmente para eliminar la
mayor parte de las impurezas de tamao superior al del poro del
filtro. Por lo general, estos filtros se disean para eliminar las
partculas ms grandes (> 1 m) para proteger las tecnologas
posteriores.A los filtros de membrana se les llama con frecuencia
absolutos, ya que estn diseados para eliminar todas las partculas
superiores al tamao de poro nominal del filtro. Utilizan una
membrana (en forma de lmina plana o fibra hueca) y se suelen
utilizar en el extremo del sistema para eliminar bacterias y otras
partculas no eliminadas por los filtros anteriores. Los filtros de
membrana que tradicionalmente se utilizan en los sistemas de agua
de laboratorios tienen un tamao nominal de poro inferior a 0,45 m;
con frecuencia, de 0,2 m.
ADSORCIN CON CARBN ACTIVADO
La adsorcin utiliza el carbono activo con un rea superficial muy
alta para eliminar sustancias orgnicas y cloro del agua de
suministro.La mayora de los sistemas de purificacin de agua lo
utilizan, combinado con resinas de intercambio inico, como primer o
segundo paso, o incluso como ltimo paso, para alcanzar la mxima
resistividad y un carbono orgnico total (COT) ultrabajo. Las
sustancias orgnicas y el cloro se adhieren a la superficie del
carbono activo y se quedan acoplados al carbono.
DESTILACINLa destilacin es el sistema de purificacin de agua que
por s solo cuenta con ms capacidad de eliminacin.La destilacin del
agua consiste en separar los componentes basndose en las
diferencias en los puntos de ebullicin. Los compuestos con una
presin de vapor baja tendrn puntos de ebullicin altos y los que
tengan una presin de vapor alta tendrn puntos de ebullicin bajos.
Los tipos de destilacin ms comunes son: La Destilacin Simple,
Destilacin Fraccionada y la Destilacin por Arrastre con
Vapor.Durante el proceso de destilacin, el agua hierve y pasa por
distintas fases, cambiando de lquido a vapor y de nuevo a lquido.
En su paso de lquido a vapor es cuando el agua se separa (en
distintos grados) de las impurezas disueltas en ella, como iones,
contaminantes orgnicos, bacterias, pirgenos y partculas.La
destilacin no basta por s sola para eliminar iones inorgnicos,
gases ionizados, sustancias orgnicas con punto de ebullicin
superior a 100 C o gases no ionizados disueltos.
SMOSIS INVERSALa smosis inversa es el mtodo ms econmico para
eliminar hasta el 99% de los contaminantes del agua de
suministro.Se ejerce presin externa en el lado de la membrana con
mayor concentracin (agua de suministro) para revertir el flujo
osmtico natural. As se fuerza el paso del agua de suministro por la
membrana semipermeable, las impurezas se depositan en la superficie
de la membrana y se envan a drenar. El agua que pasa por la
membrana como agua producida, apenas tiene impurezas.Las membranas
para smosis inversa tienen una superficie fina de microporos que
rechaza las impurezas pero permite el paso del agua. La membrana
impide el paso de bacterias, pirgenos y entre el 90 y el 95% de
slidos inorgnicos. Los iones polivalentes se rechazan ms fcilmente
que los monovalentes.La membrana rechaza los slidos orgnicos con un
peso molecular superior a 200 Daltons, pero no puede eliminar
eficazmente los gases disueltos. La pureza del agua producida
depende de la pureza del agua de suministro. El producto suele
tener entre un 95 y un 99% ms de pureza que el agua de
suministro.
DESIONIZACINLa desionizacin tambin se puede denominar
desmineralizacin o intercambio inico.El proceso elimina iones del
agua de suministro (entre ellos cationes: Na, Ca, Mg y aniones Cl,
SO4 y bicarbonatos (HCO) mediante resinas sintticas. Son resinas
que se alteran qumicamente para que tengan afinidad con iones
inorgnicos disueltos y se clasifican en dos tipos: resinas de
eliminacin (o intercambio) de cationes y resinas de eliminacin de
aniones.Los iones desaparecen del agua mediante una serie de
reacciones qumicas. Estas reacciones tienen lugar cuando el agua
atraviesa los lechos de resina de intercambio inico. La resina
catinica contiene iones de hidrgeno (H+) en la superficie, que se
intercambian por iones con carga positiva. La resina aninica
contiene iones de hidrxido (OH-) en los puntos de intercambio, que
se intercambian por iones con carga negativa. El resultado final de
estos dos intercambios es H+ y OH-, que se combinan para formar
agua (H2O).La desionizacin es la nica tecnologa que alcanza el
requisito de resistividad del agua de tipo 1 con grado de reactivo.
En los sistemas de agua de laboratorio, las resinas catinicas y
aninicas se utilizan casi siempre combinadas para poder alcanzar la
mxima pureza inica.
ULTRAFILTRACIN (UF)En la purificacin de agua, la ultrafiltracin
se utiliza para eliminar pirgenos (endotoxinas bacterianas) y
nucleasas, lo que resulta fundamental para el cultivo tisular, el
cultivo celular y la preparacin de medios.Para eliminar partculas y
macromolculas, los ultrafiltros utilizan la exclusin por tamao. Por
su diseo, funcionan de forma similar a las membranas de smosis
inversa: las partculas quedan atrapadas en la superficie de las
membranas y se eliminan mediante una corriente de rechazo. Los
ultrafiltros se utilizan en el extremo de los sistemas para
garantizar la eliminacin de casi la totalidad de impurezas
macromoleculares como pirgenos, nucleasas y partculas.COMBINACIN DE
OXIDACIN UV Y ULTRAFILTRACIN (UV/UF)El uso conjunto de las tcnicas
de oxidacin ultravioleta y ultrafiltracin con adsorcin y
desionizacin en el mismo sistema permite obtener agua prcticamente
sin impurezas. Estas tecnologas han demostrado su capacidad para
eliminar nucleasas, como las ARNasas y ADNasas, as como pirgenos
cuando se han enfrentado a concentraciones de material conocidas.
Los sistemas de tipo 1 con opciones de UV/UF producen agua con
grado de reactivo con una resistividad de hasta 18,2 M.cm, un COT
de entre 1 y 5 ppb, pirgenos < 0,001 EU/mL y ARNasas, ADNasas o
ADN no detectables.TRATAMIENTO DEL AGUA PARA OBTENER AGUA DE ALTA
PUREZA SEGN ASTM 1193: 2001El agua ultrapura (tipo I), no se puede
obtener con un solo proceso de purificacin, es necesario la
combinacin de ms de uno de ellos, para lograr la calidad deseada de
acuerdo a sus caractersticas fisicoqumicas.Filtracin (del agua de
la red de suministro) filtros de sedimentos y de carbn activado,
(eliminar partculas y el cloro residual)smosis inversa (eliminacin
de sales disueltas con una eficiencia de 95 a 98%).Lecho mixto de
resinas catinicas/aninicasConveniente reciclar y pasar
continuamente el agua a travs de la resina mixta (incrementar su
calidad).CONSERVACIN
La contaminacin del agua durante su conservacin puede aparecer,
principalmente, por disolucin de componentes solubles del vidrio o
plstico de los recipientes o por absorcin de CO o de cualquier otra
impureza existente en la atmsfera del laboratorio.Por esta razn no
se recomienda la conservacin de agua de grado 1 y 2, sino que se
debe preparar para su uso inmediato, a medida que se vaya
precisando. Sin embargo, el agua de grado 2 se puede preparar en
una cantidad razonable y conservar en recipientes apropiados,
inertes, limpios, hermticos, llenos del todo y que se hayan
enjuagado previamente con agua de calidad similar.La conservacin
del agua de grado 3 presenta pocos problemas, pero los recipientes
y condiciones de conservacin deben ser iguales para los de grado
2.Se recomienda que los recipientes se reserven para envasar
exclusivamente agua de un misma grado.
CH3COOH (aq) + H2O (l) H3O+ (aq) + CH3COO-
(aq)cidobasebasecidoTransferenciaprotnicaPar cido-base
conjugadoACIDOS Y BASESUn CIDO es una sustancia capaz de liberar
protones (H+) y una BASE es una sustancia capaz de aceptar protones
(H+). Dentro de esta sencilla definicin, se puede clasificar a los
cidos y bases por su afinidad por el H+:cidos fuertes: Su afinidad
por el H es baja, por lo que, en solucin, liberan fcilmente H+. El
ejemplo tpico es el CIDO CLORHIDRICO, que se disocia totalmente, de
HCl a Cl + H.cidos dbiles: Su afinidad por el H es alta ya que
liberan con dificultad al H. El CIDO CARBNICO, FOSFRICO, ACTICO,
etc. son cidos dbiles porque no se disocian totalmente y, por lo
tanto, producen MENOS HIDROGENIONES LIBRES que los cidos
fuertes.
Bases fuertes: Aceptan con facilidad (tienen alta afinidad) a
los iones hidrgeno.Bases dbiles: Aceptan con dificultad (tienen
baja afinidad) a los iones hidrgeno.FUNCIN E IMPORTANCIA BIOLGICA
DE LAS SOLUCIONES BUFFER:
En los organismos vivos, las clulas deben mantener un pH casi
constante para la accin enzimtica y metablica.Los fluidos
intracelulares y extracelulares contienen pares conjugados
cido-base que actan como buffer.OTROS SISTEMAS QUE AYUDAN A
MANTENER EL pH SANGUNEO:
Protenas.cidos Nucleicos.Coenzimas.Metabolitos
intermediarios.Algunos poseen grupos funcionales que son cidos o
bases dbiles, por consiguiente, ejercen influencia en el pH
intracelular y ste afecta la estructura y el comportamiento de
tales molculas.BUFFER INTRACELULAR MS IMPORTANTE: HPO / HPO
BUFFER SANGUNEO MS IMPORTANTE:HCO/ HCO-MECANISMO DE ACCIN DE UNA
SOLUCIN BUFFERECUACIN DE HENDERSON-HASSELBACH (nos permite
determinar el pH de una solucin buffer, conociendo el pKa del cido
y la relacin [A]/[HA]).Para comprender la forma en que un sistema
buffer es capaz de mantener constante el valor de pH, es necesario
tener en cuenta: [H] ( [HO]), pH, Ka y pKaAnalizaremos el caso del
sistema cido actico/acetato de sodio. La constante de disociacin
del cido actico (Ka) se puede expresar como:
MECANISMO DE ACCIN DE UNA SOLUCIN BUFFER
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Capacidad amortiguadora: Cantidad de cido o base que se puede
agregar a un tampn antes de que el pH comience a cambiar de modo
apreciable. La capacidad reguladora de una solucin es una medida de
la resistencia al cambio de pH que se producira por el agregado de
pequeas cantidades de cidos y /o bases fuertes.
De qu depende?
* Del nmero de moles (concentracin) de cido y sal base y
sal.(deben ser altos para que la capacidad tambin lo sea).* Del
cociente [sal]/[cido].(para que la capacidad sea alta, ha de ser
prximo a 1.Mayor eficiencia: cuando pH = pKa)Caractersticas
importantes de una disolucin amortiguadora
Su pH: , depende del Ka (naturaleza del cido) y de las
concentraciones de los componentes en la solucin: [A]/[HA].
POTENCIOMETRALos mtodos potenciomtricos se basan en la medida de
la diferencia de potencial elctrico (fuerza electrn motriz FEM)
entre dos electrodos: uno de referencia y otro que interacciona con
la disolucin problema (indicador), a partir de la cual es posible
establecer la concentracin de la misma directa o indirectamente. La
potenciometra puede usarse desde dos puntos de vista: Potenciometra
directa, consistente en la determinacin de la actividad de una
especie de forma directa, a travs de la medida de un potencial
elctrico. Ejm: determinacin de HO (pH) u otros.Valoracin
potenciomtrica, para localizar el punto de equivalencia de una
valoracin analtica (volumtrica o culombimtrica) en funcin del
volumen del titulante.
La potenciometra es un proceso electroqumico que se puede
explicar mediante una celda galvnica (o voltaica), en donde se
produce una reaccin redox espontnea, generndose energa elctrica
(flujo de electrones, FEM). El electrodo donde se produce la
oxidacin es el nodo y la reduccin se produce en el ctodo. Una
caracterstica importante de la celda galvnica es la FEM, que
corresponde a la diferencia de los potenciales elctricos de los dos
electrodos E ctodo E nodo = ? ELas celdas galvnicas,son un
dispositivo en el que la transferencia de electrones, (de la
semireaccin de oxidacin a la semireaccin de reduccin), se produce a
travs de un circuito externo en vez de ocurrir directamente entre
los reactivos; de esta manera el flujo de electrones (corriente
elctrica) puede ser medido.
+El instrumental necesario en la potenciometra, incluye un
electrodo de referencia, un electrodo indicador y un dispositivo
para medir esa diferencia de potencial.Electrodos de
ReferenciaAquel cuyo potencial elctrico es conocido, constante en
el tiempo e insensible a la composicin de la solucin que se
estudia. Un electrodo de referencia debe ser fcil de montar,
proporcionar potenciales reproducibles y tener un potencial sin
cambios. Los electrodos comnmente utilizados que satisfacen estos
requisitos son: el Electrodo de Hidrgeno, el Electrodo de Calomel y
el Electrodo de Plata-Cloruro de Plata.
Electrodos Indicadores.Un electrodo indicador ideal responde de
forma rpida y reproducible a los cambios de actividad del ion
analito (presente en la muestra), es decir su respuesta depende de
la concentracin del analito. Aunque ningn electrodo indicador es
absolutamente especfico en su respuesta, actualmente se dispone de
unos pocos que son marcadamente selectivos. Hay dos tipos de
electrodos indicadores: de membrana y metlicos.Electrodos
Indicadores de MembranaExiste una gran variedad de electrodos de
membrana que permiten la determinacin rpida y selectiva de
numerosos cationes y aniones por medidas potenciomtricas directas.
Debido a su gran selectividad a menudo se les llama electrodos
selectivos de iones. Tambin se les conoce como electrodos de pIon
debido a que su respuesta se registra generalmente como una funcin
p, por ejemplo pH, pCa, pN0, etc.
Para medir el pH de una disolucin podemos emplear dos mtodos, en
funcin de la precisin con que queramos hacer la medida:Para
realizar medidas del pH que no necesiten ser muy precisas se
utilizan unas sustancias llamadas indicadores, que varan
reversiblemente de color en funcin del pH del medio en que estn
disueltas. Se pueden aadir directamente a la disolucin o
utilizarlas en forma de tiras de papel indicador. Para realizar
medidas exactas se utiliza un pH-metro, que mide el pH por un mtodo
potenciomtrico.
DETERMINACIN DEL pH DE UNA SOLUCINMtodo potenciomtrico: Como
electrodo indicador se utiliza el:Electrodo de vidrioEl electrodo
de vidrio es un electrodo indicador de membrana selectivo a iones
hidronio (HO) y constituye la pieza fundamental en la medicin
potenciomtrica del pH. Su uso se encuentra ampliamente difundido ya
que hasta el momento no se conoce otra tcnica tan precisa como
esta.El cuerpo de los electrodos de vidrio est formado por un tubo
de vidrio (o plstico) no conductor y un bulbo sensible a iones
HO(membrana). En su interior hay un electrodo de referencia interno
que no es sensible a los cambios de pH, por ejemplo Ag/AgCl, y una
solucin de concentracin conocida de iones hidronio.
Actualmente se utiliza un solo electrodo que condensa los dos
electrodos anteriores y que se denomina electrodo combinado de
vidrio, aqu, se unen fsicamente el electrodo de vidrio y uno de
referencia externo para mayor comodidad en un mismo cuerpo
fsico.Los electrodos de vidrio pueden clasificarse de acuerdo a:La
composicin de su membrana: Diferentes tipos de membrana pueden
hacer que el electrodo sea ms resistente, expandir su rango de
temperaturas o prevenir errores a pH extremos. Existen diferentes
tipos de vidrios utilizados en electrodos comerciales, algunos
ejemplos son: vidrio para propsito general (varios rangos de pH y
temperaturas hasta 100C), vidrio azul (pH de 0 a 13 y temperaturas
hasta 110C), vidrio mbar (pH de 0 a 14, temperaturas hasta 110C y
bajo error de sodio).Cuerpo: Electrodos con cuerpo de vidrio
(resisten altas temperaturas y materiales y solventes altamente
corrosivos, pero son mecnicamente frgiles) y Electrodos con cuerpo
de Epoxi (son resistentes a los golpes pero no deben ser utilizados
a altas temperaturas ni para compuestos inorgnicos).Sustancia de
relleno: Recargables (tienen puertos que permiten rellenar la
cavidad con la solucin de referencia y por tanto son econmicos y
duraderos) y Sellados (prcticamente no necesitan mantenimiento,
pero deben ser reemplazados cuando el nivel de la solucin de
referencia est bajo).
La base del funcionamiento del electrodo de vidrio es el
intercambio de los H+ de la disolucin con los iones monovalentes
del vidrio, especialmente Na+ Li+ para los vidrios Jena (Optica
Karl Zeiss Alemania, los mejores en su calidad). Este proceso de
intercambio involucra casi exclusivamente a los cationes
monovalentes del vidrio, puesto que los cationes divalentes y
trivalentes (por ej. Ca+2 y Al+3) estn fuertemente enlazados a la
estructura del silicato del vidrio. USO DEL ELECTRODO DE VIDRIO
PARA LA DETERMINACIN DE pHEl mtodo potenciomtrico ofrece numerosas
ventajas respecto al mtodo colorimtrico:Es ms preciso, ya que
permite apreciar diferencias de 0,005 unidades de pH mientras que
el mtodo colorimtrico slo aprecia diferencias de 0,1 unidades de
pH. No se ve afectado por la coloracin que pueda presentar la
muestra, como ocurre con el mtodo colorimtrico.
El electrodo de vidrio no se puede conservar seco. El bulbo debe
estar hmedo en todo momento; de lo contrario, la capa activa se
degrada siendo necesarias algunas horas para restablecer el
equilibrio. El electrodo se puede conservar sumergido en una
solucin de almacenamiento sino en una solucin tampn pH 4 o pH 7. Es
mejor evitar la conservacin del electrodo en soluciones tampn
alcalinas con valores superiores a pH 9.18. Los electrodos de
referencia se conservan en ambientes acuosos, por ningn motivo en
ambientes secos.Acondicionamiento y conservacin de los electrodos
de pH