EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL DAUN KUMIS KUCING (Orthosiphon stamineus Benth.) PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR SKRIPSI Oleh: SIGIT PRAYOGA K 100 04 0004 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2008
EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL DAUN KUMIS KUCING (Orthosiphon stamineus Benth.)
PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR
SKRIPSI
Oleh:
SIGIT PRAYOGA K 100 04 0004
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA 2008
EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL DAUN KUMIS KUCING (Orthosiphon stamineus Benth.)
PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta
Oleh :
SIGIT PRAYOGA K 100 04 0004
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA
2008
i
PENGESAHAN SKRIPSI
Berjudul :
EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL DAUN KUMIS KUCING (Orthosiphon stamineus Benth.)
PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR
Oleh :
SIGIT PRAYOGA K 100 04 0004
Dipertahankan dihadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta Pada tanggal : 5 Juli 2008
Mengetahui,
Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta
Dekan,
Dra. Nurul Mutmainah, M.Si., Apt.
Pembimbing Utama Pembimbing Pendamping Arief Rahman Hakim, M.Si., Apt Arifah Sri Wahyuni, S.Si., Apt
Penguji :
1. Nurcahyanti, M.Biomed., Apt. _________________________
2. Ratna Yuliani, M.Biotech.St. _________________________
3. Arief Rahman Hakim, M.Si., Apt. _________________________
4. Arifah Sri Wahyuni, S.Si., Apt. _________________________
ii
Hidup Haruslah Bermanfaat
Jalan Masih Panjang, Banyak Yang Bisa Dilakukan
Tetap Semangat dan Terus Tebarkan Senyum.
Allahu Akbar !
Untuk :
Ibu dan Bapakku, yang telah mendidik, memberi motivasi, serta memberi kebebasan
untuk belajar dan memilih
Adik dan orang-orang yang aku cintai, yang membuat hidup ini terasa indah
Almamaterku, UMS
Bangsaku, Indonesia
iii
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah
diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan sepanjang
pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau
diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis dalam naskah ini dan disebutkan
dalam daftar pustaka.
Surakarta, 27 Mei 2008
Peneliti
(Sigit Prayoga)
iv
KATA PENGANGANTAR
Bismillaahirrohmaanirrohiim
Penulis mengucapkan puji syukur kepada Allah SWT, yang senantiasa melimpahkan
rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis berhasil menyelesaikan penelitian skripsi ini
dengan judul “Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing (Orthosiphon
stamineus Benth.) pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar” yang merupakan salah satu
syarat untuk memperoleh derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta. Skripsi ini terdiri dari 4 bab yaitu : Pendahuluan,
Metode Penelitian, Hasil Penelitian, Pembahasan serta Kesimpulan.
Penyelesaian skripsi ini tidak lepas dari bantuan semua pihak yang tidak dapat
Penulis sebutkan satu persatu, untuk itu penulis menyampaikan rasa hormat dan
terimakasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Ibu Dra. Nurul Mutmainah, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2. Bapak Arief Rahman Hakim, M.Si., Apt.,selaku dosen pembimbing utama atas segala
bantuan bimbingan, arahan, waktu, dan kesabaran kepada penulis sejak persiapan
sampai dengan selesainya skripsi ini.
3. Ibu Arifah Sri Wahyuni, S.Si, Apt., selaku dosen pembimbing pendamping atas
segala bantuan bimbingan, arahan, waktu, dan kesabaran kepada penulis sejak
persiapan sampai dengan selesainya skripsi ini.
4. Ibu Nurcahyanti, M.Biomed., Apt., selaku dosen penguji I skripsi yang telah memberi
saran dan masukannya.
v
5. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St., selaku dosen penguji II skripsi telah memberi saran
dan masukannya.
6. Teman-temanku satu kelompok, Yusuf, Nurul, dan Wenny atas kerjasamanya dalam
menyelesaikan penelitian ini.
7. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu yang telah membantu
baik langsung maupun tidah lansung selama penelitian hingga penyelesaia skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan. Oleh
karena itu kritik dan saran yang membangun sangat penulis harapkan dari pembaca guna
perbaikan penulis dikemudian hari. Semoga skripsi ini bermanfaat bagi pembaca dan bagi
perkembangan dunia farmasi dan kesehatan.
Surakarta, 27 Mei 2008
Penulis
vi
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .....................................................................................
HALAMAN PENGESAHAN .......................................................................
HALAMAN MOTTO DAN PERSEMBAHAN............................................
HALAMAN DEKLARASI............................................................................
KATA PENGANTAR....................................................................................
DAFTAR ISI..................................................................................................
DAFTAR GAMBAR.....................................................................................
DAFTAR TABEL..........................................................................................
DAFTAR LAMPIRAN..................................................................................
INTISARI.......................................................................................................
BAB I. PENDAHULUAN.............................................................................
A. Latar Belakang Masalah.....................................................................
B. Perumusan Masalah............................................................................
C. Tujuan Penelitian ...............................................................................
D. Tinjauan Pustaka................................................................................
1. Tanaman Kumis Kucing...............................................................
2. Ekstrak..........................................................................................
3. Inflamasi.......................................................................................
4. Obat Antiinflamasi ......................................................................
5. Diklofenak....................................................................................
i
ii
iii
iv
v
vii
x
xi
xiii
xiv
1
1
3
3
3
3
6
7
9
11
vii
E. LANDASAN TEORI.........................................................................
F. HIPOTESIS........................................................................................
BAB II. METODE PENELITIAN.................................................................
A. Kategori Penelitian Dan Rancangan Penelitian.................................
1. Jenis Penelitian.............................................................................
2. Variabel Penelitian.......................................................................
B. Alat dan Bahan...................................................................................
C. Jalannya Penelitian.............................................................................
1. Determinasi tanaman ..................................................................
2. Pembuatan ekstrak etanol daun kumis kucing.............................
3. Pembutan suspensi karagenin......................................................
4. Pembuatan larutan Na Diklofenak...............................................
5. Pembuatan radang .......................................................................
6. Uji Pendahuluan...........................................................................
7. Uji efek antiinflamasi ekstrak etanol daun kumis kucing............
D. Analisis Data......................................................................................
BAB III. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN..............................
A. Hasil Determinasi Tanaman Kumis Kucing.......................................
B. Hasil Pembuatan Ekstrak...................................................................
C. Uji Pendahuluan.................................................................................
D. Uji Daya Antiinfamasi.......................................................................
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN......................................................
A. Kesimpulan.........................................................................................
12
13
14
14
14
14
15
15
15
16
16
16
16
17
18
19
21
21
21
22
28
32
32
viii
B. Saran...................................................................................................
DAFTAR PUSTAKA....................................................................................
LAMPIRAN.................................................................................................
32
33
36
ix
DAFTAR GAMBAR
Halaman Gambar 1. Gambar Perombakan Asam Arakidonat Dengan Titik Kerja
Obat ............................................................................................. Gambar 2. Struktur kimia Natrium Diklofenak.............................................
Gambar 3. Grafik Rata-Rata Volume Udem Orientasi Waktu PemberianNa Diklofenak 2,25mg/kgBB ....................................................
Gambar 4. Grafik Rata-Rata Volume Udem Orientasi Waktu Pemberian
Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing Dosis 245mg/kgBB……. Gambar 5. Grafik Rata-Rata Volume Udem Uji Daya Antiinflamasi
Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing………………………….. Gambar 6. Gambar Tanaman Kumis Kucing……………………………...
Gambar 7. Gambar Serbuk Simplisia Tanaman Kumis Kucing…………..
10
12
24
27
29
39
39
x
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Rata-Rata Volume Udem Orientasi Dosis Na Diklofenak2,25mg/kgBB Dan 6,75mg/kgBB...........................................
Tabel 2. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu
Dan % Daya Antiinflamasi Orientasi Dosis Na Diklofenak..... Tabel 3. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu
Dan % Daya Antiinflamasi Orientasi Waktu Pemberian NaDiklofenak…………………………………………………….
Tabel 4. Rata-Rata Volume Udem Orientasi Dosis Ekstrak Etanol
Daun Kumis Kucing Dengan Dosis 245mg/kgBB dan123mg/kgBB………………………………………………….
Tabel 5. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu
Dan % Daya Antiinflamasi Orientasi Dosis Ekstrak EtanolDaun Kumis Kucing………………………………………….
Tabel 6. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu
Dan % Daya Antiinflamasi Orientasi Waktu PemberianEkstrak Etanol Daun Kumis Kucing Dengan Dosis245mg/kgBB………………………………………………….
Tabel 7. Rata-Rata Volume Udem Kontrol Negatif Akuades, Kontrol
Positif Na Diklofenak 2,25mg/kgBB Serta Ekstrak EtanolDaun Kumis Kucing Dosis 123mg/kgBB, 245mg/kgBB, Dan490mg/kgBB………………………………………………….
Tabel 8. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu
Dan % Daya Antiinflamasi Uji Daya Antiinflamasi EkstrakEtanol Daun Kumis Kucing…………………………………..
Tabel 9. Data hasil uji statistik LSD AUC kontrol negatif akuades,
kontrol positif Na Diklofenak 2,25mg/kgBB, Ekstrak EtanolDaun Kumis Kucing Dengan Dosis 123mg/kgBB,245mg/kgBB, Dan 490mg/kgBB 1jam Sebelum DiinduksiKaragenin 1% ………………………………………………...
Tabel 10. Penimbangan dan Volume Pemberian Ekstrak………….……
23
23
24
25
26
27
28
29
30
45
xi
Tabel 11. Volume Udem dan AUC Uji Daya Antiinflamasi……………
Tabel 12. Persen Daya Antiinflamasi…………………………………...
46
48
xii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Keterangan Pengambilan Tanaman…………………
Lampiran 2. Surat Keterangan Hasil Determinasi………………………
Lampiran 3. Gambar Tanaman dan Serbuk Simplisia Kumis Kucing….
Lampiran 4. Certificate of Analysis Na Diklofenak…………………….
Lampiran 5. Surat Keterangan Pembelian Tikus Putih Jantan Galur Wistar……………………………………………………...
Lampiran 6. Perhitungan, Pembuatan Ekstrak, Larutan Stok Dan
Larutan Ekstrak…………………………………………… Lampiran 7. Volume Pemberian Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing
Pada Hewan Uji ………………………………………….. Lampiran 8, Volume Udem dan AUC Uji Daya Antiinflamasi ………..
Lampiran 9. Persen Daya Antiinflamasi ……………………………….
Lampiran 10. Uji Statistik Data AUC Orientasi Dosis Na Diklofenak…..
Lampiran 11. Uji Statistik Data AUC Orientasi Waktu Pemberian Na Diklofenak Na Diklofenak 2,25mg/kgBB………………..
Lampiran 12. Uji Statistik Data AUC Orientasi Dosis Ekstrak Etanol
Daun Kumis Kucing………………………………………. Lampiran 13. Uji Statistik Data AUC Orientasi Waktu Pemberian
Ekstrak Daun Kumis Kucing……………………………... Lampiran 14. Uji Statistik Data AUC Uji Utama Antiinflamasi Ekstrak
Etanol Daum Kumis Kucing ……………………………... Lampiran 15. Uji Statistik Data % DAI Uji Efek Antiinflamsi Ekstrak
Etanol Daun Kumis Kucing ………………………………
36
37
39
40
41
42
45
46
48
49
50
52
55
57
60
xiii
INTISARI
Tanaman kumis kucing secara empiris digunakan masyarakat untuk pengobatan penyakit gout dan rematik. Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk megetahui daya antiinflamasi ekstrak daun kumis kucing (Orthosiphon stamineus Benth.). Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental semu dengan rancangan acak lengkap pola satu arah.
Ekstrak daun kumis kucing disari menggunakan etanol 70%. Sejumlah 25 ekor tikus putih jantan galur wistar umur 2-3 bulan, berat 150-200g dibagi menjadi 5 kelompok. Masing-masing kelompok diberi perlakuan secara oral dengan akuades (kontrol negatif), Natrium diklofenak 2,25mg/kgBB (kontrol positif). Ekstrak etanol daun kumis yang diujikan dosis123, 245 dan 490mg/kgBB. Perlakuan 1 jam sebelum kaki tikus diradangkan dengan karagenin 1% subplantar. Pengukuran volume kaki tikus dilakukan tiap 0,5 jam selama 6,5 jam. Kurva volume udem rata-rata yang diperoleh digunakan untuk menghitung AUC (Area Under the Curve), dan AUC yang diperoleh digunakan untuk menghitung DAI (Daya Anti Inflamasi). Data AUC dan DAI diuji statistik dengan Anava satu jalan dan dilanjutkan dengan LSD dengan taraf kepercayaan 95%.
Hasil penelitian menunjukkan ekstrak etanol daun kumis kucing mempunyai efek antiinflamasi pada tikus putih jantan galur Wistar. Ekstrak etanol daun kumis kucing pada dosis 123, 245, dan 490mg/kgBB menghasilkan persen daya antiinflamasi berturut turut 33,11%; 52,64% dan 64,12%.
Kata kunci : antiinflamasi, Orthosiphon stamineus Benth., natrium diklofenak, ekstrak
etanol.
xiv
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Masalah
Penggunaan bahan alam, baik sebagai obat maupun tujuan lain cenderung
meningkat, terlebih dengan adanya isu back to nature. Obat tradisional dan
tanaman obat banyak digunakan masyarakat terutama dalam upaya preventif,
promotif dan rehabilitatif. Sementara ini banyak orang beranggapan bahwa
penggunaan tanaman obat atau obat tradisional relatif lebih aman dibandingkan
obat sintesis. Agar penggunaannya optimal, perlu diketahui informasi yang
memadai tentang tanaman obat. Informasi yang memadai akan membantu
masyarakat lebih cermat untuk memilih dan menggunakan suatu produk obat
tradisional atau tumbuhan obat dalam upaya kesehatan.
Tanaman kumis kucing (Orthosiphon stamineus Benth.) mudah sekali
ditemukan di seluruh nusantara. Tanaman ini sangat mudah tumbuh sehingga
mudah dikembangbiakan. Kumis kucing sudah digunakan masyarakat untuk
diuretik, pengobatan hipertensi, gout dan rematik (Barnes et al., 1996). Pada
penyakit gout dan rematik terjadi inflamasi, karena inflamasi merupakan
manifestasi dari kerusakan jaringan. Penelitian Anindhita (2007) menunjukkan
infusa herba kumis kucing mempunyai daya antiinflamasi pada tikus putih jantan
galur Wistar.
Tanaman kumis kucing mengandung berbagai senyawa kimia, salah satunya
adalah flavonoid. Penelitian terhadap flavonoid dari beberapa tanaman
1
2
mempunyai efek farmakologis sebagai antiinflamasi (Narayana et al., 2001).
Flavonoid yang terdapat dalam simplisia daun kumis kucing bisa disari
menggunakan air maupun etanol 70% (Harbone, 1987). Penyarian yang dilakukan
dengan mengunakan pelarut air akan diperoleh zat yang bersifat cenderung polar.
Pelarut air mempunyai kelemahan yaitu menyebabkan reaksi fermentatif sehigga
mengakibatkan perusakan bahan aktif lebih cepat. Kelemahan lainnya adalah
menyebabkan pembengkakan sel sehingga bahan aktif akan terikat kuat pada
simplisia, larutan dalam air juga mudah dikontaminasi. Pelarut alkoholik
merupakan pilihan utama untuk semua jenis flavonoid (Soemardi, 2004). Pelarut
etanol bisa digunakan untuk menyari zat yang kepolaran relatif tinggi sampai
relatif rendah, karena etanol merupakan pelarut universal. Etanol mempunyai
kelebihan dibanding air yaitu tidak menyebabkan pembengkaan sel, menghambat
kerja enzym dan memperbaiki stabilitas bahan obat telarut. Etanol 70% sangat
efektif menghasilkan bahan aktif yang optimal, bahan balas yang ikut tersari
dalam cairan penyari hanya sedikit, sehingga zat aktif yang tersari akan lebih
banyak (Voigt, 1995).
Tikus merupakan binatang yang bisa digunakan untuk pengujian antiinflamasi
dengan berbagai stimulan kimia. Pada pengujian antiinflamasi tikus distimulasi
agar terjadi udem. Salah satu zat yang dapat digunakan sebagai induktor udem
adalah karagenin. Karagenin adalah ekstrak Chondrus, yaitu suatu polisakarida
sulfat dengan molekul besar yang bisa menyebabkan inflamasi jika diinjeksikan
subplantar pada tikus, sehingga bisa digunakan sebagai induktor inflamasi
(Corsini et al., 2005, Domer, 1971). Untuk mendapatkan data ilmiah mengenai
3
efek antiinflamasi daun kumis kucing, perlu dilakukan dengan penelitian efek
antiinflamasi ekstrak daun kumis kucing ini pada tikus putih jantan galur Wistar.
B. Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang maka dapat dirumuskan permasalahan yaitu
apakah ekstrak etanol daun kumis kucing mempunyai daya antiinflamasi pada
tikus putih jantan galur wistar yang diinduksi larutan karagenin 1% ?
C. Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui daya antiinflamasi ekstrak etanol
daun kumis kucing (Orthosiphon stamineus Benth.) pada tikus putih jantan galur
wistar yang diiinduksi larutan karagenin 1%.
D. Tinjauan Pustaka
1. Tanaman Kumis Kucing
1). Sistematika tanaman kumis kucing (Orthosiphon stamineus Benth.).
Divisio : Spermatophyta
Sub divisio : Angiospermae
Classis : Dicotyledoneae
Sub Classis : Sympetalae
Ordo : Tubiflorae / Solanales
Famili : Labiatae
Genus : Orthosiphon
4
Species : Orthosiphon stamineus Benth (Van Steenis, 1947).
2). Nama Botani tanaman kumis kucing
Tanaman kumis kucing mempuyai nama botani Orthosiphon stamineus
Benth., dan mempunyai sinonim Orthosiphon aristatus Mig., Orthosiphon
spicatus B.Bs, Orthosiphon grandiflorus Bld. (Van Steenis, 1947).
3). Nama lain kumis kucing
Nama daerah tanaman kumis kucing di daerah antara lain, kumis kucing (Sunda),
remujung (Jawa), se saleyan (Madura) songot koceng (Madura) (Heyne, 1987).
4). Uraian tentang tanaman
Tanaman kumis kucing dapat dideskripsikan sebagai berikut. Herba berkayu
naik perlahan lahan, pada pangkal sering bercabang, berakar kuat, tinggi 0,4-1,5m
batang berambut, pendek bertangkai daun berbentuk baji diatas pangkal yang
bertepi rata, bergerigi kasar dapat berbunga 6 dan terkumpul menjadi tandan
ujung. Daun pelindung kecil. Tangkai bunga pendek, Kelopak berambut pendek
panjang 5,5-7,5mm, taju atau hampir sampai pangkal tabung berakhir dengan 2
rusuk, bulat telur terbalik dan lebih lebar dari taju lainya, taju samping dengan
ujung runcing ungu, kedua mahkota berbibir 2, bawah lurus menjulang kedepan,
kepala sari berwarna ungu. Bakal buah gundul, kelopak buah kurang lebih
panjangnya 1cm, buahnya keras memanjang, berkerut halus (Van Steenis, 1947).
5). Daerah distribiusi, habitat dan budidayanya
Tanaman kumis kucing dapat ditemukan pada daerah yang teduh tidak telalu
kering; 1-700m (Van Steenis, 1947) di Jawa dan pulau pulau lainya dari
5
nusantara, tumbuh menjulang sepanjang anak air dan selokan, karena daunya
berkhasiat untuk pengobatan, sering dibiarkan tumbuh di halaman (Heyne, 1987).
6). Kegunaan di masyarakat
Tanaman kumis kucing mempunyai banyak manfaatnya untuk pengobatan.
Bagian tanaman yang biasa digunakan adalah herba baik segar maupun yang telah
dikeringkan. Teh yang dibuat dari daun yang dikeringkan mempunyai reputasi
yang baik sebagai obat-obatan terhadap penyakit ginjal (Van Steenis, 1947).
Kumis kucing berkhasiat diuretik, di Jawa digunakan untuk pengobatan hipertensi
dan diabetes, tanaman ini juga sudah digunakan masyarakat untuk pengobatan
pendarahan, ginjal, batu empedu, gout dan rematik (Barnes, 1996).
7). Kandungan kimia
Daun kumis kucing mengandung beberapa senyawa kimia antara lain minyak
atsiri 0,02-0,06%, terdiri dari 60 macam seskuiterpen dan senyawa fenolik
(Sudarsono dkk., 1996). Tanaman ini juga mengandung Benzokhromon,
Orthokhromen A, methyl riparikhromen A dan asetovanillochromen. Diterpen,
isopimaran–type diterpen (orthosiphones dan orthosiphol), primaran–type
diterpen (neoorthosiphol dan staminol A). Flavonoid, sinensetin, tetrametil
sculaterin dan tetramethoksiflavon, eupatorin, salvigenin, circimaritrin, piloin,
rhamnazin, trimethilapigenin, dan tetrametilluteonin, kadar flavonoid lipofilik
pada daun kumis kucing ini antara 0,2-0,3%, kadar flavonoid glikosida juga
sekitar itu. Kandungan lain pada tanaman ini antara lain asam kafeat dan
turunannya (contoh asam rosmarat) inositol, fitosterol (contoh β-sitosterol) dan
garam kalium (Barnes et al., 1996).
6
8.) Penelitian yang pernah dilakukan
Beberapa penelelitian yang telah dilakukan antara lain: kemampuan infusa
daun kumis kucing secara in-vitro untuk melarutkan kalsium batu ginjal pada
konsentrasi 5%; 7,5% dan 10% (Cahyono, 1990). Uji toksisitas terhadap
Arthemisia salina dengan ekstrak kloroform daun kumis kucing menunjukkan
gabungan fraksi 4-5 fraksi kloroform larut metanol merupakan fraksi yang paling
toksik terhadap Arthemisia salina. Senyawa yang terdapat dalam fraksi tersebut
adalah senyawa fenol, flavonoid, dan terpenoid (Utami, 2005). Isolasi dari
gabungan fraksi 7 dan 8 ekstrak kloroform larut metanol daun kumis kucing
diperoleh 1 isolat yang aktif pada uji sitotoksisitas pada sel HeLa dan sel Raji.
Senyawa yang terdapat dalam fraksi tersebut adalah senyawa fenol, flavonoid, dan
terpenoid (Thoyibah, 2006). Penelitian Anindhita (2007) menunjukkan adanya
daya antiinflamasi infusa herba kumis kucing dengan konsentrasi 5%, 10%, 20%
pada tikus putih jantan galur Wistar.
2. Ekstrak
Simplisia adalah bahan alami yang dipergunakan sebagai obat yang belum
mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dinyatakan lain merupakan bahan
yang dikeringkan. Simplisia dapat berupa simplisia nabati simplisia hewani dan
simplisia pelikan atau mineral (Anonim, 1985). Ekstrak adalah sediaan kering
kental atau cair dibuat dengan menyari simplisia menurut cara yang cocok, di luar
pengaruh cahaya matahari langsung, ekstrak kering harus mudah dibuat serbuk
(Anonim, 1979).
7
Penyarian simplisia dengan cara maserasi perkolasi, atau penyeduhan dengan
air mendidih. Penyarian dengan campuran etanol air dilakukan dengan cara
maserasi atau perkolasi. Penyarian dengan eter dilakukan dengan cara perkolasi
(Anonim, 1979).
Maserasi adalah cara ekstraksi yang paling sederhana. Bahan simplisia
dihaluskan sesuai dengan syarat farmakope kemudian dimaserasi. Maserasi,
kecuali dinyatakan lain lakukan sebagai berikut : 10 bagian simplisia atau
campuran simplisia dengan derajad halus yang cocok dimasukkan ke dalam
sebuah bejana, dituangi dengan 75 bagian cairan penyari , ditutup, dibiarkan
selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering diaduk, diserkai, diperas,
dicuci ampas dengan cairan penyari secukupnya hingga diperoleh 100 bagian.
Maserat dipindahkan ke dalam bejana tertutup, biarkan di tempat sejuk, terlindung
cahaya, selama 2 hari, dienap tuangkan atau saring (Anonim, 1979).
3. Inflamasi
Inflamasi merupakan suatu respon protektif normal terhadap luka jaringan
yang disebabkan oleh trauma fisik, zat kimia yang merusak, atau zat mikrobiologi.
Inflamasi adalah usaha tubuh untuk menginaktivasi organisme yang menyerang,
menghilangkan zat iritan, dan mengatur perbaikan jaringan (Mycek dkk, 2001).
Tubuh mendapat manfaat dari inflamasi ini yaitu dengan memperbarui jaringan,
melakukan pembersihan dan perbaikan, sehingga menyebabkan peningkatan
aliran darah dan pembangunan jaringan baru (Aslid and Schuld, 2001).
Inflamasi biasanya terbagi dalam 3 fase yaitu: inflamasi akut, respon imun dan
inflamasi kronis. Inflamasi akut merupakan respon awal terhadap cedera jaringan
8
hal tersebut terjadi melalui media rilisnya autacoid yang terlibat antara lain
histamin, serotonin, bradikinin, prostaglandin dan leukotrien. Respon imun terjadi
bila sejumlah sel yang mampu menimbulkan kekebalan diaktifkan untuk
merespon organisme asing atau substansi antigenik yang terlepas selama respon
terhadap inflamasi akut serta kronis. Akibat respon imun bagi tuan rumah
mungkin menguntungkan, misalnya menyebabkan organisme penyerang
difagositosis atau dinetralisir. Sebaliknya akibat tersebut juga dapat bersifat
merusak bila menjurus pada inflamasi kronis tanpa penguraian dari proses cedera
yang mendasarinya. Inflamasi kronis menyebabkan keluarnya sejumlah mediator
yang tidak menonjol dalam respon akut. Salah satu kondisi yang paling penting
yang melibatkan mediator ini adalah artritis rheumatoid, dimana inflamasi kronis
menyebabkan sakit dan kerusakan pada tulang dan tulang rawan yang bisa
menjurus pada ketidakmampuan untuk bergerak (Katzung, 2002).
Bila membran sel mengalami kerusakan oleh suatu rangsang kimiawi, fisik,
atau mekanis, maka enzim fosfolipase diaktifkan untuk mengubah fosfolipida
yang terdapat di situ menjadi asam arachidonat, kemudian untuk sebagian diubah
oleh enzim cyclo-oxygenase menjadi asam endoperoksida dan seterusnya menjadi
zat zat prostaglandin. Bagian lain dari asam arachidonat diubah oleh enzym
lipooksigenase menjadi zat leukotrien. Baik prostaglandin maupun leukotrien
bertanggungjawab bagi sebagian besar dari gejala peradangan. Cyclo-oxygenase
terdiri dari 2 isoenzym yakni COX-1 dan COX-2. COX-1 terdapat di kebanyakan
jaringan, antara lain di pelat-pelat darah, ginjal, dan saluran cerna. Zat ini
berperan pada pemeliharaan perfusi ginjal, homeostase vaskuler, dan melindungi
9
lambung dengan jalan membentuk bikarbonat dan lendir serta menghambat
produksi asam. COX-2 dalam keadaan normal tidak terdapat di jaringan, tetapi
dibentuk selama proses peradangan oleh sel-sel radang dan kadarnya dalam sel
meningkat sampai 80 kali (Tjay dan Raharja, 2002). Lima ciri khas inflamasi,
dikenal sebagai tanda-tanda utama inflamasi yaitu.:
a. Eritema (kemerahan), terjadi pada tahap pertama dari inflamasi. Darah
berkumpul pada daerah cedera jaringan akibat pelepasan mediator kimia tubuh
(kinin, prostaglandin, dan histamin) histamin mendilatasi arteriol.
b. Edema (pembengkakan), merupakan tahap kedua dari inflamasi. Plasma
merembes ke dalam jarngan intestinal pada tempat cedera. Kinin mendilatasi
asteriol, meningkatkan permeabilitas kapiler.
c. Panas, dapat disebabkan oleh bertambahnya pengumpulan darah. Mungkin
juga karena pirogen (substansi yang menimbulkan demam) yang mengganggu
pusat pengaturan panas pada hipotalamus.
d. Nyeri, disebabkan oleh pembengkakan pada pelepasan mediator-mediator
kimia.
e. Hilangnya fungsi, disebabkan oleh penumpukan cairan pada tempat cedera
jaringan dan karena rasa nyeri. Keduanya mengurangi mobilitas pada daerah
yang terkena (Kee dan Hayes, 1996).
4. Obat Antiinflamasi
Pengobatan antiinflamasi mempunyai 2 tujuan utama yaitu, meringankan rasa
nyeri, yang seringkali merupakan gejala awal yang terlihat dan keluahn utama
10
yang terus menerus dari pasien dan kedua memperlambat atau membatasi
perusakan jaringan (Katzung, 2001).
Obat antiinflamasi adalah obat yang memiliki aktivitas menekan atau
mengurangi peradangan, aktivitas ini dapat dicapai melalui berbagi cara, yaitu
menghambat pembentukan mediator radang prostaglandin, menghambat migrasi
sel-sel leukosit ke daerah radang dan menghambat pelepasan prostaglandin dari
sel-sel tempat kedudukannya. Berdasarkan mekanisme kerjanya, obat-obat
antiinflamasi terbagi ke dalam golongan steroid yang terutama bekerja dengan
cara menghambat pelepasan prostaglandin dari sel-sel sumbernya, dan golongan
non-steroid yang bekerja melalui mekanisme lain seperti inhibisi siklooksigenase
yang berperan pada biosintesis prostaglandin (Anonim, 1993). Kerja obat
antiinflamasi dapat diterangkan melalui skema gambar sebagai berikut
Fosfolipida (membran sel)
fosfolipasekortikosteroid
Asam arachidonat
AINS lipooksigenase siklooksigenase
O-2endoperoksida Asam hidroperoksida
Gambar 1. Gambar Perombakan Asam Arakidonat dengan Titik Kerja Obat (Tjay dan Raharja, 2002).
Leukotrien
radikal bebas COX-1 COX-2
tromboksan LTB LTCprostaglandin prostasiklin 4
-peradangan -Proteksi lambung -Vasodilatasi -antiagregasi
-peradangan
4-LTD4-LTE4
Vasokonstriksi Bronchoconstriksi agregasi
-Vasokonstriksi -Permeabilitas meningkat
11
Obat golongan kortikosteroid mempunyai kemampuan menghambat
fosfolipase sehingga pembentukan prostaglandin maupun leukotrien dihalangi.
Cara kerja Obat antiinflamasi non steroid (AINS) dengan cara menghambat
sintesa prostaglandin dengan memblokir siklooksigenase dan menghambat
leukotrien dengan memblokir lipooksigenase. Obat antiinflamasi non steroid
(AINS) merupakan suatu grup obat yang secara kimiawi tidak sama, yang berbeda
aktifitas antipiretik, analgetik, dan antiinflamasinya (Mycek dkk., 2001).
Walaupun demikian obat-obat ini memiliki banyak persamaan dalam efek terapi
maupun efek samping (Wilmana, 1995). Obat antiinflamasi ini efektif untuk
peradangan akibat trauma (pukulan, benturan, kecelakan) juga setelah
pembedahan atau memar yang diakibatkan olahraga (Tjay dan Raharja, 2002).
Ada tujuh kelompok AINS yaitu derivat salisilat, derivat asam para klorobenzoat
atau indol, derivat pirazolon, derivat asam propionat, derivat fenamat, derifat
oksikam, derivat asam fenilasetat (Kee dan Hayes, 1996).
6. Diklofenak
Diklofenak adalah derivat sederhana dari asam fenilasetat yang menyerupai
flurbiprofen dan melofenamat, obat ini adalah penghambat cyclooxygenase yang
relatif nonselektif dan kuat serta mengurangi aktifitas asam arakidonat obat ini
mempunyai waktu paruh 1-2 jam. Obat ini dilaporkan dapat mengurangi sistesis
prostaglandin dan leukotrien (Katzung, 2002). Walaupun waktu paruhnya singkat,
diklofenak diakumulasikan di cairan sinovia yang menjelaskan efek terapi di sendi
jauh lebih panjang dari waktu paruh obat tersebut (Wilmana, 1995). Natrium
12
diklofenak adalah golongan antiinflamasi non streroid yang mempunyai stuktur
kimia seperti Gambar 2.
Gambar 2. Struktur Kimia Natrium Diklofenak (Takahashi et al., 2001)
E. LANDASAN TEORI
Obat antiinflamasi adalah obat yang memiliki aktivitas menekan atau
mengurangi peradangan. Tanaman kumis kucing secara empiris telah
dimanfaatkan masyarakat untuk mengobati gout dan rematik (Barnes et al., 1996).
Pada penyakit gout dan rematik terjadi inflamasi, karena inflamasi merupakan
manifestasi dari kerusakan jaringan.
Penelitian yang dilakukan Anindhita (2007) menunjukkan infusa herba kumis
kucing mempunyai efek antiinflamasi pada tikus putih jantan galur Wistar.
Berbagai zat kimia ada pada tanaman kumis kucing ini, salah satu zat yang
terdapat dalam tanaman ini adalah flavonoid, baik flavonoid hidrofilik maupun
flavonoid lipofilik. Flavonoid yang terdapat pada tanaman kumis kucing antara
lain sinensetin, tetrametil sculaterin dan tetrametoksiflavon, eupatorin, salvigenin,
circimaritrin, piloin, rhamnazin, trimetilapigenin, dan tetrametilluteonin. Kadar
flavonoid lipofilik ini berkisar antara 0,2-0,3%, sedangkan kadar flavonoid
glikosida yang bersifat hidrofilik juga sekitar itu. Flavonoid diketahui mempunyai
aktivitas antiinflamasi (Barnes et al., 1996). Hasil penelitian pada beberapa
13
tanaman, diketahui flavonoid mempunyai aktivitas antiinflamasi. Aktivitas
antiinflamasi ini bisa terjadi karena cincin bensopiron yang ada pada sruktur
flavonoid bisa berikatan dengan enzim siklooksigenase dan lipooksigenase, selain
itu jika flavonoid mempunyai gugus hidroksil pada C5 dan C7 maka gugus ini juga
bisa berikatan dengan enzim lipooksigenase (Narayana et al., 2001). Kandungan
flavonoid lipofilik yang bersifat non polar, dan flavonoid glikosida yang bersifat
polar pada tanaman kumis kucing ini. Etanol bisa menyari zat tersebut karena
etanol merupakan pelarut universal yang bisa menarik zat dari yang mepunyai
kepolaran relatif rendah sampai relatif tinggi. Ekstrak etanol daun kumis kucing
memungkinkan mempunyai efek antiinflamasi karena sebagian zat yang terdapat
pada ekstrak etanol daun kumis kucing sama dengan yang tersari dalam infusa
herba kumis kucing, dan telah diketahui penelitian infusa herba kumis kucing
menunjukkan efek antiinflamasi pada tikus putih jantan galur Wistar.
H. HIPOTESIS
Ekstrak etanol daun kumis kucing (Orthosiphon stamineus Benth.) diduga
mempunyai aktivitas sebagai antiinflamasi terhadap tikus putih jantan galur wistar
yang diinduksi karagenin 1%.
BAB II
METODE PENELITIAN
A. Kategori Penelitian dan Rancangan Penelitian
1. Jenis Penelitian
Kategori penelitian yang digunakan termasuk kategori penelitian
eksperimental semu, yaitu mengamati kemungkinan pengaruh diantara variabel
dengan melakukan pengamatan terhadap kelompok eksperimental semu pada
berbagai kondisi perlakuan dan membandingkan dengan kelompok kontrol.
Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap pola searah.
2.. Variabel Penelitian
a. Variabel bebas
Variabel bebas dalam penelitian ini adalah hewan uji diberi perlakuan dengan
ekstrak etanol daun kumis kucing dosis 123mg/kgBB, 245mg/kgBB, dan
490mg/kgBB, natrium diklofenak dosis 2,25 mg/kgBB serta akuades.
b. Variabel tergantung
Variabel tergantung dalam penelitian ini adalah volume udem kaki tikus.
c. Variabel kendali
Variabel kendali dalam penelitian ini adalah :
1) Pemilihan tikus : galur, kondisi, jenis kelamin, umur, berat badan tikus
yang digunakan.
2) Pemilihan herba : tempat tumbuh, waktu pemanenan, dan bagian tanaman
yang digunakan.
14
15
B. Alat dan Bahan
1. Alat
Pletismometer, ayakan No. 8, rotary evaporator, spuit injeksi (terumo), jarum
oral, alat alat gelas, timbangan (kepekaan 0,0001g).
2. Bahan
1). Tanaman uji : tanaman kumis kucing (Orthosiphon stamineus Benth.)
diperoleh dari Balai Besar Penelitian Dan Pengembangan Tanaman Obat Dan
Obat Tradisional (B2P2TO2T) Tawangmangu dan waktu pengambilan pada
bulan Agustus 2007. Bagian yang digunakan adalah pucuk serta kumpulan
tangkai muda tanaman kumis kucing yang sudah berbunga. Pengeringan
dilakukan dalam oven dengan suhu tidak lebih dari 400C. Serbuk simplisia
diserbuk dan diayak dengan ayakan nomor 8.
2). Reagensia : karagenin tipe lambda (λ) (Sigma Chemical Co), larutan NaCl
0,9% b/v (Otsuka), Na diklofenak (Pharos) dan etanol 70% (Ikapharmindo
Putramas).
3). Hewan uji : hewan uji yang digunakan adalah tikus putih jantan sehat, galur
Wistar, umur 2-3 bulan, bobot 150-200gram, diperoleh dari Laboratorium
Farmakologi Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.
C. Jalannya Penelitian
1. Determinasi tanaman
Determinasi tanaman dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui kebenaran
dari tanaman yang kumis kucing yang akan digunakan sebagai bahan uji dalam
16
penelitian sebagai bahan uji. Determinasi dilakukan di Laboratorium Jurusan
Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
2. Pembuatan ekstrak etanol daun kumis kucing
Daun tanaman kumis kucing yang sudah dikeringkan, dihaluskan dan diayak
dengan ayakan nomor 8 dibuat ekstrak. Pembuatan ekstrak dengan menggunakan
125g (10 bagian) simplisia daun kumis kucing dengan cara maserasi
menggunakan etanol 70% sebanyak 937,5ml (75 bagian). Maserasi dilakukan
selama 5 hari dengan pengadukan dua kali sehari. Maserat yang diperoleh dari
penyaringan dikumpulkan. Ampas yang tersisa dimaserasi lagi 2 hari, disaring dan
dikumpulkan sampai diperoleh 1250ml (100 bagian). Maserat yang diperoleh
diuapkan dengan rotary evaporator pada suhu tak lebih dari 500C, hingga
konsistensi terbentuk masa yang kental.
3. Pembuatan suspensi karagenin 1%
Sejumlah 0,05 gram karagenin ditimbang seksama disuspensikan dalam 5,0 ml
larutan garam fisiologis (NaCl 0,9%).
4. Pembuatan larutan Na diklofenak
Pada uji utama larutan Na Diklofenak dibuat dalam konsentrasi 18mg%. Dosis
Na diklofenak yang diberikan adalah 2,25mg/kgBB. Pemberian secara per oral
pada tikus dengan volume 2,5ml/200gramBB.
5. Pembuatan radang
Radang dibuat dengan menginjeksi 0,1ml larutan karagenin 1% secara
subplantar pada telapak kaki tikus yang telah ditandai.
17
6. Uji Pendahuluan
a.) Penetapan dosis Na Diklofenak
Penetapan dosis Na diklofenak dilakukan dengan membagi hewan uji menjadi
3 kelompok masing-masing kelompok 3 ekor tikus. Kaki tikus ditandai sebatas
mata kaki dan diukur volumenya pada pletismometer sebagai volume kaki
awal. Dosis Na diklofenak yang digunakan 6,75mg/kgBB dan 2,25mg/kgBB
serta kontrol negatif diberikan aquadest secara per oral. Volume pemberian
2,5ml/200gramBB. Pemberian dilakukan 1jam sebelum kaki tikus diinduksi
larutan secara subplantar dengan 0,1ml larutan karagenin 1%. Volume kaki
tikus diukur pada pletismometer sesaat setelah injeksi sebagai volume waktu
ke-0 dan tiap 0,5jam selama 6,5jam.
b.) Penetapan waktu pemberian Na diklofenak
Penetapan waktu pemberian Na diklofenak ini hewan uji dibagi menjadi 3
kelompok masing- masing kelompok 3 ekor tikus. Kaki tikus ditandai sebatas
mata kaki dan diukur volumenya pada pestimometer sebagi volume kaki awal.
Na Diklofenak dosis 2,25mg/KgBB diberikan peroral 1jam; 0,5jam; dan sesaat
sebelum induksi larutan karagenin 1%. Volume kaki tikus diukur pada
plestimometer sesaat setelah injeksi sebagai volume waktu ke-0 dan tiap
0,5jam selama 6,5jam.
c.) Orientasi dosis ekstrak etanol daun kumis kucing
Orientasi dosis dilakukan dengan menggunakan ekstrak etanol daun kumis
dilakukan dengan 2 dosis yaitu 123mg/kgBB dan 245mg/kgBB. Dari hasil
orientasi ini ditetapkan 3 dosis yaitu ekstrak etanol daun kumis 123mg/kgBB,
18
245mg/kgBB dan 490mg/kgBB untuk uji antiinflamasi dengan volume
pemberian 2,5ml/200gram BB tikus.
d.) Penetapan waktu pemberian ekstrak etanol daun kumis kucing.
Penetapan waktu pemberian ekstrak etanol daun kumis kucing (Orthosiphon
stamineus Benth.) dilakukan dengan cara membagi hewan uji menjadi 3
kelompok, masing-masing kelompok 3 ekor tikus. Perlakuan terhadap hewan
uji dengan memberikan ekstrak etanol daun kumis kucing (Orthosiphon
stamineus Benth.) dosis 245mg/kgBB dengan volume 2,5ml/200gram,
diberikan 1jam; 0,5jam; dan sesaat sebelum diinduksi larutan karagenin 1%.
7. Uji efek antiinflamasi ekstrak etanol daun kumis kucing
Hewan uji yang digunakan adalah tikus putih jantan galur Wistar sebanyak
25 ekor, semua hewan uji dipelihara dalam kondisi yang sama. Hewan uji dibagi
menjadi 5 kelompok. Sebelum diberi perlakuan, kaki tikus ditandai, kemudian
diukur volumenya. Volume kaki tikus diukur dengan menggunakan
pletismometer dengan cara mencelupkan kaki tikus yang sudah ditandai ke
dalam raksa yang ada dalam pletismometer. Perlakuan dengan sediaan uji yang
diberikan secara per oral pada masing masing kelompok adalah :
Kelompok I : akuades 2,5ml/200gramBB (kontrol negatif)
Kelompok II : Natrium diklofenak dosis 2,25 mg/kgBB (kontrol positif)
Kelompok III : ekstrak etanol daun kumis kucing dosis 490mg/KgBB
Kelompok IV : ekstrak etanol daun kumis kucing dosis 245mg/KgBB
Kelompok V : ekstrak etanol daun kumis kucing dosis 123mg/KgBB
19
Perlakuan ini dilakuan 1jam sebelum induksi karagenin 1%. Induksi dilakukan
pada kaki tikus secara subplantar. Setelah semua tikus diinduksi, kemudian diukur
volume kaki tikus setiap 0,5jam. Pengukuran dilakukan selama 6,5jam.
D. Analisis Data
Data yang diperoleh berupa volume kaki tikus, kemudian digunakan untuk
menghitung volume udem. Volume udem merupakan selisih kaki tikus sebelum
dan sesudah diradangkan dengan rumus:
Vu =Vt-Vo
Keterangan :
Vu :volume udem kaki tikus tiap waktu
Vt : volume kaki tikus setelah diradangkan karaqgenin 1% pada waktu t
Vo : volume kaki tikus sebelum diradangkan karagenin 1%
Setelah diperoleh diperoleh kurva volume udem kaki tikus vs waktu,
selanjutnya digunakan untuk menghitung AUC (Area Under the Curve), kurva
antara rata-rata volume udem terhadap waktu. Rumus yang digunakan untuk
menghitung AUCtntn-1 adalah :
Vtn-1 + Vtn
AUC tn- =2
tn1 ( tn-tn-1 )
(1)
(2)
Keterangan :
Vtn-1 = rata- rata volume udem pada tn-1
Vtn = rata-rata volume udem pada tn
20
Prosentase daya antiinflamasi (penghambatan volume udem) dihitung
berdasarkan harga AUC kontrol negatif dan harga AUC perlakuan pada tiap
individu menggunakan rumus berikut :
AUCk - AUCp% DAI = X 100%
AUCk
(3)
Keterangan :
% DAI = persen daya antiinflamasi
AUCk = AUC rata-rata kurva volume udem terhadap waktu untuk kontrol negatif
AUCp = AUC rata-rata kurva volume udem terhadap waktu untuk kelompok
perlakuan pada tiap individu.
Data AUC (Area Under the Curve) antara volume udema terhadap waktu
dilakukan uji Kolmogorof-Smirnov guna mengetahui distribusi data dan Levene
Statistic test untuk mengetahui homogenitas variannya. Apabila terdistribusi
normal dan homogen dilanjutkan dengan analisis varian satu jalan (Oneway
Anova) dengan taraf kepercayaan 95% dan dilanjutkan uji LSD (Least Significant
Difference) untuk mengetahui ada atau tidaknya perbedaan bermakna. Analisis
data dikerjakan dengan Program SPSS versi 14.
BAB III
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Determinasi Tanaman Kumis Kucing
Tanaman kumis kucing yang akan digunakan dalam penelitian ini terlebih
dahulu dideterminasi. Determinasi tersebut dilakukan agar diperoleh kepastian
bahwa herba yang digunakan dalam penelitian ini berasal dari tanaman yang
dimaksud.
Determinasi tanaman kumis kucing ini dilakukan dengan melihat morfologi
tanaman yang kemudian dicocokkan dengan kunci determinasi yang terdapat
dalam buku Flora (Van Steenis, 1947). Hasil determinasi tanaman kumis kucing
adalah sebagai berikut :
1b, 2b, 3b, 4b, 6b,7b, 9b, 10b, 11b, 12b, 13b, 14b, 16a, 239b, 243b, 244b, 248b,
250b, 266b, 267b, 268b, 271b. Familia : Labiatae
1a, 2b, 4a, 6a, Genus : Orthosiphon
1 Spesies : Orthosiphon spicatus B.B.S
Orthosiphon spicatus B.B.S mempunyai sinonim Orthosiphon stamineus Benth.
Hasil determinasi dapat dilihat pada lampiran 2.
B. Hasil Pembuatan Ekstrak
Daun kumis kucing dengan bobot 1,3429kg dikeringkan di dalam oven dengan
suhu tidak lebih dari 400C. Pada pengeringan ini simplisia, diperoleh daun kumis
kucing kering 228,85g. Simplisia yang diperoleh ini ada yang terkontaminasi
21
22
jamur, hal ini terjadi karena kondisi lingkungan yang mendukung untuk
pertumbuhan jamur saat proses pengeringan yang dilakukan, misalnya kondisi
lembab dan suhu kurang dari 400C adalah suhu optimum untuk pertumbuhan
jamur. Pengeringan mengunakan oven tidak ada aliran udara sehingga keadaan
pada ruangan pengering lembab, keadaan ini sangat cocok untuk pertumbuhan
jamur. Pengeringan yang baik adalah dengan suhu yang rendah dan penguapanya
cepat sehingga limgkungan sekitar simplisia tidak lembab. Aturan umum
pengeringan daun dan herba adalah dengan suhu pengeringan antara 200C sampai
dengan 400C. Pengeringan yang mungkin cocok untuk simplisia daun kumis
kucing ini adalah dengan diangin-anginkan saja pada suhu ruangan. Setelah
sortasi kering dan pengayakan, simplisia yang diperoleh mempunyai bobot 125g.
Ekstrak yang diperoleh adalah 12,270g atau mempunyai rendemen 9,816% b/b.
C. Uji Pendahuluan
Sebelum dilakukan uji daya antiinflamasi, terlebih dahulu dilakukan uji
pendahuluan (orientasi). Orientasi yang dilakukan antara lain penentuan dosis Na
diklofenak, penentuan waktu pemberian Na diklofenak, penentuan dosis ekstrak
daun kumis kucing, dan penentuan waktu pemberian ekstrak daun kumis kucing.
Uji pendahuluan yang pertama adalah orientasi dosis kontrol positif Na
diklofenak. Na diklofenak yang diorientasi adalah dosis 2,25mg/kgBB dan
6,75mg/kgBB. Orientasi dosis pemberian Na diklofenak ini dilakukan
dimaksudkan untuk menentukan dosis yang dapat memberikan efek antiinflamasi
yang optimal terhadap hewan uji.
23
Tabel 1. Rata-Rata Volume Udem Orientasi Dosis Na Diklofenak 2,25mg/kgBB Dan 6,75mg/kg BB
Volume udem rata-rata (ml) jam ke
Perlakuan 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5 5,5 6 6,5
( ± SEM)
Kontrol (-) akuades
0,08 ±
0,01
0,10 ±
0,01
0,14 ±
0,02
0,20 ±
0,03
0,24 ±
0,04
0,30 ±
0,04
0,35 ±
0,03
0,34 ±
0,04
0,34 ±
0,03
0,34 ±
0,04
0,24 ±
0,01
0,22 ±
0,01
0,21 ±
0,02
0,19 ±
0,02Na
diklofenak 2,25mg/kg
BB
0,07 ±
0,03
0,07 ±
0,02
0,08 ±
0,02
0,08 ±
0,01
0,08 ±
0,01
0,08 ±
0,01
0,07 ±
0,00
0,06 ±
0,01
0,03 ±
0,01
0,02 ±
0,01
0,02 ±
0,01
0,01 ±
0,01
0,00 ±
0,00
0,00 ±
0,00Na
diklofenak 6,75mg/kg
BB
0,06 ±
0,01
0,07 ±
0,01
0,06 ±
0,01
0,08 ±
0,02
0,07 ±
0,02
0,06 ±
0,02
0,05 ±
0,02
0,04 ±
0,02
0,02 ±
0,02
0,01 ±
0,01
0,01 ±
0,01
0,01 ±
0,01
0,00 ±
0,01
0,00 ±
0,01
Tabel 2. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu Dan %
Daya Antiinflamasi Orientasi Dosis Na Diklofenak
Kelompok Perlakuan
Harga AUC (ml.jam)
% Daya Antiinflamasi
Kontrol negatif akuades 1,58 ± 0,12 ─ Na diklofenak 2,25mg/kgBB 0,32 ± 0,03 79,70 ± 1,92
Na diklofenak 6,75mg/kgBB 0,25 ± 0,08 84,27 ± 4,88
( ± SEM) ( ± SEM)
Dilihat dari Tabel 1 dan Tabel 2 diketahui bahwa Na diklofenak pada dosis
6,75mg/kgBB menunjukkan penghambatan yang lebih baik daripada dosis
2,25mg/kgBB. Hal ini dapat dilihat dari data AUC kurva hubungan rata-rata
volume udem terhadap waktu dan persen daya antiinflamasi pada Tabel 2 di atas.
Semakin kecil AUC menunjukkan efek antiinflamasi yang semakin baik. Hasil
orientasi dosis Na diklofenak 6,75mg/kgBB dan 2,25mg/kgBB dianalisis secara
statistik. Pada T-Test diperoleh p>0,05 yang menunjukkan tidak ada perbedaan
bermakna antara dosis Na diklofenak 6,75mg/kgBB dan 2,25mg/kgBB. Sehingga
24
untuk uji selanjutnya dipilih dosis yang lebih kecil, yaitu dosis Na diklofenak
2,25mg/kgBB sebagai kontrol positif.
Orientasi waktu pemberian menggunakan Na diklofenak dosis 2,25mg/kgBB.
Waktu pemberian yang diorientasi adalah waktu 1jam, 0,5jam dan sesaat sebelum
induksi karagenin 1%. Data yang diperoleh dibuat grafik .
Orientasi Waktu Pemberian Na Dikofenak
0.000.050.100.150.200.250.300.350.40
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 6 6.5 7
Waktu (jam)
Vol
ume
udem
(ml)
Kontrol negatif akuades
1 jam sebelum induksi karagenin1%0,5 jam sebelum karagenin 1%
Sesaat sebelum karagenin
Gambar 3. Grafik Rata-Rata Volume Udem Orientasi Waktu Pemberian Na
Diklofenak 2,25mg/kgBB Tabel 3. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu Dan %Daya
Antiinflamasi Orientasi Waktu Pemberian Na Diklofenak
Kelompok Perlakuan Harga AUC
(ml.jam)
% Daya Antiinflamasi
Kontrol negatif akuades
( ± SEM)( ± SEM)
1,58 ± 0,12 ─
Na diklofenak 1jam sebelum
diinduksi karagenin 1% 0,89 ± 0,12 43,81 ± 7,80
Na diklofenak 0,5jam sebelum
diinduksi karagenin 1% 0,82 ± 0,18 48,05 ± 11,40
Na diklofenak sesaat sebelum
diinduksi karagenin 1% 0,76 ± 0,18 51,85 ± 11,23
25
AUC kurva hubungan rata-rata volume udem terhadap waktu diuji dengan
statistik. Pada uji anava diperoleh nilai p>0,05. Dengan p>0,05 kita dapat
menyimpulkan bahwa tidak ada perbedaan antar perlakuan (1jam, 0,5jam dan
sesaat sebelum induksi karagenin 1%).
Pada penelitian ini dipilih waktu untuk pemberian Na diklofenak sesaat
sebelum induksi karagenin 1% dengan pertimbangan dengan pemberian Na
diklofenak sesaat sebelum induksi karagenin 1% mempunyai daya antiinflamasi
yang paling baik dibanding 0,5; dan 1 jam sebelum induksi karagenin 1%.
Uji Pendahuluan ketiga adalah orientasi dosis pemberian ekstrak etanol daun
kumis kucing. Orientasi dilakukan dengan menggunakan ekstrak etanol daun
kumis kucing dengan dosis 245mg/kgBB dan 123mg/kgBB. Hasil orientasi dosis
ini akan digunakan untuk menentukan tiga dosis yang akan digunakan pada uji
utama.
Tabel 4. Rata-Rata Volume Udem Orientasi Dosis Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing Dengan Dosis 245mg/kg BB dan 123mg/kgBB
Volume udem rata-rata (ml) jam ke
Perlakuan 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5 5,5 6 6,5
( ± SEM)
Kontrol negatif akuades
0,08 ±
0,01
0,10 ±
0,01
0,14 ±
0,02
0,20 ±
0,03
0,24 ±
0,04
0,30 ±
0,04
0,35 ±
0,03
0,34±
0,04
0,34±
0,03
0,34±
0,04
0,24±
0,01
0,22±
0,01
0,21 ±
0,02
0,19 ±
0,02
Ekstrak daun kumis kucing dosis
245mg/kgBB
0,07 ±
0,01
0,10 ±
0,01
0,16 ±
0,01
0,19 ±
0,01
0,17±
0,02
0,16±
0,03
0,16±
0,02
0,14±
0,02
0,12±
0,02
0,11±
0,01
0,10±
0,01
0,10±
0,03
0,07±
0,03
0,04±
0,02
Ekstrak daun kumis kucing dosis
123mg/kgBB
0,08 ±
0,01
0,10 ±
0,02
0,12 ±
0,04
0,12 ±
0,03
0,10±
0,04
0,10±
0,03
0,10±
0,04
0,11±
0,03
0,13±
0,03
0,13±
0,02
0,14±
0,02
0,14±
0,03
0,13±
0,03
0,14±
0,03
Na diklofenak dosis 2,25mg/kgBB
0,07 ±
0,03
0,07 ±
0,02
0,08 ±
0,02
0,08 ±
0,01
0,08 ±
0,01
0,08 ±
0,01
0,07 ±
0,00
0,06±
0,01
0,03±
0,01
0,02±
0,01
0,02±
0,01
0,01±
0,01
0,00 ±
0,00
0,00 ±
0,00
26
Volume udem yang diperoleh digunakan untuk menghitung Area Under the
Curve (AUC) dan % Daya Antiinflamasi (% DAI). Hasil perhitungan ini dapat
dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu Dan % Daya Antiinflamasi Orientasi Dosis Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing
Kelompok Perlakuan Harga AUC (ml.jam)
% Daya Antiinflamasi
Kontrol negatif akuades 1,58 ± 0,12 ─
( ± SEM)( ± SEM)
Ekstrak daun kumis kucing dosis
245mg/kg BB 0,82 ± 0,12 48,50 ± 7,68
Ekstrak daun kumis kucing dosis
123 mg/kg BB 1,13 ± 0,16 28,79 ± 10,31
Na diklofenak dosis 0,32 ± 0,03 79,70 ± 1,92 2,25mg/kg BB Pada uji anava signifikansi p= 0,000 yang berarti paling tidak terdapat
perbedaan bermakna antara dua kelompok. Dari Post Hoc test diketahui ekstrak
etanol daun kumis kucing dengan dosis 245mg/kgBB dan ektrak etanol daun
kumis kucing dengan dosis 123mg/kgBB mempunyai p>0,05 yang berarti tidak
ada perbedaaan bermakna antara ekstrak etanol daun kumis kucing dengan dosis
245mg/kgBB dan ektrak etanol daun kumis kucing dengan dosis 123mg/kgBB,
tetapi dari Tabel 5 diketahui ektrak etanol daun kumis kucing dengan dosis
245mg/kgBB mempunyai daya antiinflamasi yang lebih baik dibandingkan
ekstrak etanol daun kumis kucing dengan dosis 123mg/kgBB, yaitu sebesar
48,50%. Maka orientasi waktu pemberian ekstrak dilakukan dengan menggunakan
ekstrak etanol daun kumis kucing dengan dosis 245mg/kgBB.
27
Uji pendahuluan keempat adalah orientasi waktu pemberian ekstrak etanol
daun kumis kucing. Orientasi dilakukan dengan menggunakan ekstrak etanol daun
kumis kucing dengan dosis 245mg/kgBB. Pemberian ekstrak etanol daun kumis
kucing dengan dosis 245mg/kgBB ini dilakukan pada 1jam; 0,5jam dan sesaat
sebelum induksi karagenin 1%. Hasil orientasi waktu pemberian ekstrak etanol
daun kumis kucing ini dapat dilihat pada grafik dibawah ini.
Orientasi Waktu Pemberian Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing
0.000.050.100.150.200.250.300.350.40
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 6 6.5 7
Waktu (jam)
Vol
ume
udem
(ml)
Kontrol negatif akuades
0,5 jam sebelum induksikaragenin 1%1 jam sebelum induksikaragenin 1%Sesaat sebelum induksikaragenin 1%
Gambar 4. Grafik Rata-Rata Volume Udem Orientasi Waktu Pemberian Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing Dosis 245mg/kgBB
Tabel 6. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu Dan %
Daya Antiinflamasi Orientasi Waktu Pemberian Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing Dengan Dosis 245mg/kg BB
Kelompok Perlakuan Harga AUC
(ml.jam)
% Daya Antiinflamasi
Kontrol negatif akuades 1,58 ± 0,12 ─
Ekstrak daun kumis kucing
1jam sebelum diinduksi karagenin 0,53 ± 0,02 66,40 ± 1,73
Ekstrak daun kumis kucing
0,5jam sebelum diinduksi karagenin 0,77 ± 0,10 51,11 ± 10,61
Ekstrak daun kumis kucing 0,96 ± 0,19 39,52 ± 11,80
Sesaat sebelum diinduksi karagenin
( ± SEM)( ± SEM)
28
Data yang diperoleh dilakukan uji anava, karena diperoleh karena p>0,05
dapat disimpulkan tidak ada perbedaan antar perlakuan (1jam, 0,5jam dan sesaat
sebelum induksi karagenin 1. Pada penelitian ini dipilih waktu untuk pemberian
ekstrak daun kumis kucing 1jam sebelum induksi karagenin 1% karena daya
antiinflamasi paling baik pada pemberian ekstrak daun kumis kucing 1jam
sebelum induksi karagenin 1%.
D. Uji Daya Antiinfamasi
Penelitian daya antiinflamasi dilakukan dengan perlakuan pada tikus putih
jantan galur Wistar yang diinjeksi secara per oral ekstrak etanol daun kumis
kucing 1jam sebelum injeksi karagenin 1%. Dosis ekstrak yang digunakan adalah
123mg/kgBB, 245mg/kgBB, dan 490mg/kgBB. Kontrol negatif digunakan
akuades dan kontrol positif Na diklofenak 2,25mg/kgBB.
Tabel 7. Rata-Rata Volume Udem Kontrol Negatif Akuades, Kontrol Positif Na Diklofenak 2,25mg/kgBB Serta Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing Dosis 123mg/kg BB, 245mg/kgBB, dan 490mg/kgBB
Volume udem rata-rata (ml) jam ke
Perlakuan 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5 5,5 6 6,5
Kontrol Negatif Akuades
0,08 ±
0,02
0,08±
0,01
0,12±
0,02
0,18±
0,02
0,21±
0,02
0,27±
0,03
0,34±
0,02
0,32±
0,03
0,32±
0,03
0,33±
0,04
0,25 ±
0,02
0,24 ±
0,03
0,24 ±
0,03
0,22±
0,03
Na diklofenak 2,25mg/kg BB tikus
0,08 ±
0,01
0,07±
0,01
0,06±
0,01
0,08±
0,01
0,06±
0,01
0,08±
0,00
0,07±
0,00
0,06±
0,00
0,04±
0,01
0,03±
0,01
0,02 ±
0,01
0,02 ±
0,01
0,01 ±
0,00
0,00±
0,00Ekstrak daun kumis
kucing dosis 490mg/kg BB tikus
0,08 ±
0,01
0,07±
0,00
0,09±
0,01
0,14±
0,01
0,17±
0,02
0,17±
0,02
0,15±
0,02
0,13±
0,02
0,11±
0,02
0,10±
0,01
0,10 ±
0,01
0,08 ±
0,01
0,06 ±
0,01
0,05±
0,01Ekstrak daun kumis
kucing dosis 245mg/kg BB tikus
0,07 ±
0,01
0,08±
0,01
0,11±
0,02
0,13±
0,02
0,12±
0,02
0,12±
0,01
0,11±
0,02
0,09±
0,01
0,08±
0,01
0,08±
0,01
0,08 ±
0,01
0,07 ±
0,01
0,05 ±
0,01
0,04±
0,01Ekstrak daun kumis
kucing dosis 123mg/kg BB tikus
0,08 ±
0,01
0,09±
0,01
0,12±
0,03
0,16±
0,03
0,21±
0,03
0,22±
0,02
0,21±
0,02
0,19±
0,02
0,20±
0,03
0,21±
0,02
0,19 ±
0,01
0,17 ±
0,03
0,14 ±
0,03
0,12±
0,03
( ± SEM)
29
Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing
0.00
0.05
0.10
0.15
0.20
0.25
0.30
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 6 6.5 7
Waktu (jam)
Vol
ume
udem
(ml)
Kontrol Negatif Akuades
Na Dklofenak Dosis2,25mg/kgBB tikus
Ekstrak Etanol Daun KumisKucing Dosis 490mg/kgBBtikusEkstrak Etanol Daun KumisKucing Dosis 245mg/kgBBtikusEkstrak Etanol Daun KumisKucing Dosis 123mg/kgBBtikus
Gambar 5. Grafik Rata-Rata Volume Udem Uji Daya Antiinflamasi Ekstrak Etanol
Daun Kumis Kucing Tabel 8. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu Dan %
Daya Antiinflamasi Uji Daya Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing
Kelompok Perlakuan
Harga AUC (ml.jam)
% Daya Antiinflamasi
Kontrol negatif akuades
( ± SEM)( ± SEM)
1,29 ± 0,18 ─ Na diklofenak 2,25mg/kgBB 0,31 ± 0,02 75,96 ± 1,50
Ekstrak kumis kucing 490mg/kgBB 0,46 ± 0,07 64,12 ± 5,80
Ekstrak kumis kucing 245mg/kgBB 0,61 ± 0,07 52,64 ± 5,60
Ekstrak kumis kucing 123mg/kgBB 0,86 ± 0,15 33,11 ± 11,80
Hasil Uji daya antiinflamasi dapat dilihat pada Tabel 8, dari hasil ini diketahui
bahwa ekstrak daun kumis kucing 490mg/kgBB memberikan efek antiinflamasi
lebih baik dibandingkan dosis 245mg/kgBB tikus dan 123mg/kgBB. Dilihat dari
data AUC kontrol negatif mempunyai AUC paling besar karena tidak ada
penghambat inflamasinya. Sedangkan Na diklofenak memberikan AUC paling
kecil, karena kemampuannya untuk menghambat inflamasi. Semakin kecil AUC
30
daya hambat terhadap inflamasi semakin besar. Hal ini dapat dilihat pada Tabel 8
dalam kolom % Daya Antiinflamasi. Pada uji statistik dilakukan uji normalitas
dengan Kolmogorov-Smirnov diketahui data terdistribusi normal dengan p>0,05,
sedangkan uji homogenitas diketahui data tidak homogen karena p<0,05. Untuk
menghomogenkan dilakukan transformasi dengan menggunakan 1/akar kuadrat
dan didapatkan data homogen dengan p>0,05. Uji dilanjutkan Anova satu jalan.
Hasil uji diperoleh p= 0,000 menunjukkan paling tidak terdapat perbedaan AUC
secara bermakna pada 2 kelompok. Hasil uji LSD dapat dilihat pada Tabel 9.
Tabel 9. Data Hasil Uji Statistik LSD AUC Kontrol Negatif Akuades, Kontrol Positif Na Diklofenak 2,25mg/kgBB, Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing Dengan Dosis 123mg/kgBB, 245mg/kgBB, Dan 490mg/kgBB 1jam Sebelum Diinduksi Karagenin 1%
Kelompok perlakuan Signifikansi
Kontrol negatif terhadap kontrol positif 0,000 Kontrol negatif terhadap ekstrak 123mg/kgBB 0,113 Kontrol negatif terhadap ekstrak 245mg/kgBB 0,007 Kontrol negatif terhadap ekstrak 490mg/kgBB 0,000 Kontrol positif terhadap ekstrak 123mg/kgBB 0,000 Kontrol positif terhadap ekstrak 245mg/kgBB 0,001 Kontrol positif terhadap ekstrak 490mg/kgBB 0,057 Ekstrak 123mg/kgBB terhadap ekstrak 245mg/kgBB 0,193 Ekstrak 123mg/kgBB terhadap ekstrak 490mg/kgBB 0,006 Ekstrak 245mg/kgBB terhadap ekstrak 490mg/kgBB 0,104
Keterangan : p< 0,05 = berbeda signifikan p> 0,05 = berbeda tidak siknifikan
Dengan melihat Tabel 9, diketahui bahwa kontrol negatif akuades berbeda
secara signifikan dengan kontrol positif, ekstrak etanol daun kumis kucing dengan
dosis 245mg/kgBB, dan 490mg/kgBB dan berbeda tidak signifikan terhadap
ekstrak etanol daun kumis kucing dengan dosis 123mg/kgBB. Ekstrak etanol daun
kumis kucing yang diuji mempunyai daya antiinflamasi pada tikus putih jantan
31
galur Wistar dengan dosis 123, 245, dan 490mg/kgBB berturut turut 33,11%;
52,64% dan 64,12%.
Daya antiinflamasi tanaman ini pada dosis 245mg/kgBB, dan 490mg/kgBB
cukup baik karena dapat menghambat inflamasi lebih dari 50%. Dengan hasil ini
dapat diketahui bahwa daun kumis kucing mempunyai potensi sebagai
antiinflamasi. Kemampuan antiinflamasi ekstrak daun kumis kucing ini
kemungkinan karena kemampuan penghambatan enzim siklooksigenase dan
lipooksigenase sehingga asam arakidonat tidak dirubah menjadi prostaglandin dan
leukotrin. Penghambatan ini kemungkinan disebabkan oleh flavonoid yang tersari
dalam ekstrak ini, karena flavonoid secara umum mempunyai kemampuan
penghambatan enzim siklooksigenase dan lipooksigenase. Pada penelitian
sebelumnya infusa daun kumis kucing pada konsentrasi 10% yang setara dengan
ekstrak etanol daun kumis kucing dosis123mg/kgBB mempunyai % daya
antiinflamasi 45,64%, dan infusa daun kumis kucing 20% yang setara dengan
ekstrak etanol daun kumis kucing dosis 245mg/kgBB mempunyai % daya
antiinflamasi 50,71%. Daya antiinflamasi pada ekstak etanol ini hampir sama
dibandingkan dengan pemberian infusa yang mungkin disebabkan karena zat yang
terlarut dalam etanol 70% ini hampir sama dengan yang tersari pada penyarian
dengan menggunakan air.
BAB IV
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Ekstrak etanol daun kumis kucing yang diuji mempunyai daya antiinflamasi
pada tikus putih jantan galur Wistar lebih rendah dibandingkan kontrol positif,
yaitu pada dosis 123, 245, dan 490mg/kgBB berturut turut 33,11%; 52,64% dan
64,12%.
B. Saran
Perlu dilakukan penelitian mengenai efek antiinflamasi daun kumis kucing
dalam bentuk ekstrak dengan pelarut yang berbeda, untuk mengetahui zat aktif
pada tanaman kumis kucing ini yang berkhasiat antiinflamasi.
32
33
DAFTAR PUSTAKA
Anindhita, M. A., 2007, Efek Antiinflamasi Infusa Herba Kumis Kucing (Orthosiphon spicatus B.B.S) Pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta.
Anonim, 1979, Farmakope Indonesia, edisi III, Deparemen Kesehatan Republik
Indonesia, Jakarta. Anonim, 1985, Cara Pembuatan Simplisia, Departemen Kesehatan Republik
Indonesia, Jakarta. Anonim, 1993, Penapisan Farmakologi, Pengujian Fitokimia Dan Pengujian
Klinik, Phitomedica, Jakarta. Aaslid, E., and Schuld, K. A. P. T, 2001, Healing Muscle Paint: Tool, techniques
and tips to bring your muscle back to health, John Wiley & Son Inc, Canada.
Barnes, J., Anderson L. A., and Philipson J. D., 1996, Herbal Medicine, 2nd
edition, 126, 313, Pharmacetical Press,London. Cahyono, A. T., 1990, Pengaruh Infusa Daun Tempuyung Dan Infusa Daun
Kumis Kucing Terhadap Kelarutan Kalsium Batu Ginjal Secara In-Vitro, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Corsini, E., Paola R. D.,Viviani, B., Genovese, T., Mazzon, E., Lucchi, L., Galli,
C.L., and Cuzzorcrea S., 2005, Increased Carragenan-Induced Acute Lung Inflamation in Old Rats, Immunology, 115(2):253-261. http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlender.fcw?artid=1782140 diakses tanggal 5 Januari 2008 ).
Domer, F. L., 1971, Animal Experiments in Pharmacological Analysis,
Departemen of Pharmacology School of Medicine Tulane University New Oreleans, Lousiana.
Harbone, J. B., 1987, Metode Fitokimia; Penuntun Cara Modern Menganalisis
Tumbuhan, diterjemahkan oleh Padmawinata, K., Penerbit ITB, Bandung. Heyne, K., 1987, Tumbuhan Berguna Indonesia, jilid III, diterjemahkan oleh
Badan Litbang Kehutanan Jakarta, Yayasan Sarana Wana Jaya, Jakarta.
34
Katzung B. G., 2002, Farmakologi Dasar dan Klinik, diterjemahkan oleh Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga, Buku 2, Salemba Merdeka, Jakarta.
Kee, J. L., dan Hayes, E. R., 1996, Farmakologi Pendekatan Proses
Keperawatan, diterjemahkan oleh Anugrah, P., EGC, Jakarta. Mycek, M. J, Harvey, R. A., Champe, P. C., 2001, Farmakologi Ulasan
Bergambar, diterjemahkan oleh Agoes, A., Edisi 2, Widya Medika, Jakarta.
Narayana, K. R., Reddy, M. R, and Chaluvadi, M. R., 2001, Bioflavonoids
Classification, Pharmacological, Biochemical Effects and Therapeutic Potential, Indian Journal Pharmacology, (online), 2-16, (http://medind.nic.in/ibi/t01/i1/ibit01i1p2.pdf, diakses tanggal 15 April 2007).
Soemardi, E., 2004, Isolasi Identifikasi dan Standarisasi Sinensetin Sebagai
Parameter Pada Ekstrak Daun Kumis Kucing (Orthosiphon stamineus Benth.), Tesis, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Sudarsono, Pudjoarinto, A., Gunawan, D., Wahyuono, S., Donatus, I. A.,
Purnomo, Dradjad, M.,Wibowo, S., Ngatijan, 1996, Tumbuhan Obat, PPTO UGM, Yogyakarta.
Takahashi, M., Umehara, N., Suzuki, S., Tezuka, M., 2001, Analgesic Action of a
Sustained Release Preparation of Diclofenac Sodium in a Canine Urate-Induced Gonarthritis, Journal of Health Science, 464–467, (online), (http://jhs.pharm.or.jp/47(5)/47(5)p464.pdf, diakses tanggal 14 April 2007).
Tjay, T. H., dan Raharja, K., 2002, Obat-Obat Penting, Edisi 5, Gramedia,
Jakarta. Thoyibah, I., 2006, Isolasi Dan Uji Toksisitas Seyawa Dari Gabungan Fraksi 7
Dan 8 Ekstrak Kloroform Larut Metanol Daun Kumis Kucing (Orthosiphon aristatus (Bl.)Mig.) Terhadap Sel HeLa dan Sel Raji, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Utami, S. D., 2005, Fraksinasi Dan Uji Toksisitas Ekstrak Kloroform Daun Kumis
Kucing (Orthosiphon aristatus (Bl.)Mig.) Terhadap Larva Arthemia salina Leach, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
van Steenis, C. G. G. J, 1947, Flora Untuk Sekolah di Indonesia, diterjemahkan
oleh Surjowinoto, M., dkk., Pradnya Paramita, Jakarta.
35
Voigt, 1995, Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, diterjemahkan oleh Soendari, N. S., Gadjah Mada University Press, Yogyakarta.
Wilmana, P. F., 1995, Analgetik Antipiretik, Analgetik Antiinflamasi Non Steroid
dan Obat Pirai, dalam Ganiswara, S. G., Setiabudy, R., Suyatna F. D., Purwantyastuti, dan Nafrialdi, Farmakologi dan Terapi, Edisi 4, Bagian Farmakologi FKUI, Jakarta.
36
Lampiran 1. Surat Keterangan Pengambilan Tanaman
37
Lampiran 2. Surat Keterangan Hasil Determinasi
38
Lanjutan Lampiran 2
39
Lampiran 3. Gambar Tanaman dan Serbuk Simplisia Kumis Kucing
Gambar 6. Gambar Tanaman Kumis Kucing
Gambar 7. Gambar Serbuk Simplisia Tanaman Kumis Kucing
40
Lampiran 4. Certificate Of Analysis Na Diklofenak
41
Lampiran 5. Surat Keterangan Pembelian Tikus Putih Jantan Galur Wistar
42
Lampiran 6. Perhitungan, Pembuatan Ekstrak, Larutan Stok Dan Larutan Ekstrak
1. Pembuatan Ekstrak
Bobot Daun Kumis Kucing Basah : 1,3429 kg
Bobot Daun Kumis Kucing kering : 228,85 gram
Setelah dilakukan pengeringan dan sortasi dan pengayakan diadapatkan simplisia
dengan bobot 125 gram
Pembuatan
125gram dimaserasi dengan 937,5ml etanol 70% selama 5 hari
Dilakukan remaserasi hingga diperoleh volume maserat 1250ml,
Maserat yang diperoleh dievaporasi:
Bobot ekstrak yang diperoleh = 12,270 gram
Rendemen 12,270 gram X 100% = 9,816% 125 gram
2. Pembuatan Larutan Karagenin 1% (5ml)
50 mg karagenin + Larutan NaCl 0,9% ad 5,0ml
3. Pembuatan Larutan Stok
a.) Na Diklofenak 75mg (manusia 70 kg) konfersi ke tikus 200gram
75mg X 0,018 = 1,35 mg/200gram ~1,35 mg/2,5 ml
(dosis 6,75mg/kgBB)
43
Lanjutan Lampiran 6
b.) Na Diklofenak 25mg (manusia 70 kg) konfersi ke tikus 200gram
25mg X 0,018 = 0,45 mg/200gram ~0,45 mg/2,5 ml
(dosis 2,25mg/kgBB)
Pembuatan larutan Stok 1,35mg/2,5ml
Pembuatan Untuk 100 ml = 100ml X 1,35mg = 54mg 2,5ml Pembuatan larutan stok 0,45mg/2,5ml
Pembuatan Untuk 100 ml= 100ml X 1,35mg = 18mg 2,5ml
Pembuatan
72 mg Na diklofenak dilarutkan dalam akuades ad 100 ml
Larutan diambil 25ml
larutan I = 75ml ditambah akuades ad 100ml
Larutan II= 25 ml ditambah akuades ad 100ml
Sehingga
Larutan I = Larutan stok 1,35mg/2,5ml ~ larutan stok 54mg/100ml~
dosis 6,75mg/kgBB.
Larutan II = Larutan stok 0,45mg/2,5ml ~ larutan stok 18mg/100ml~
dosis 2,25mg/kgBB.
44
Lanjutan Lampiran 6 3. Pembuatan Larutan Ekstak Daun Kumis Kucing
Dosis yang digunakan 123mg/kg BB, 245mg/kgBB, dan 490mg/kgBB
Ekstrak daun kumis kucing dosis 490mg/kgBB tikus diperoleh dari
= 12,27g X 40g/100ml = 3,92g/100ml 125g = 1,96g/50ml = 0,98g/25ml = 98mg/2,5ml ~ 98mg/200gramBB = 490mg/kgBB
Ekstrak daun kumis kucing dosis 245mg/kgBB tikus diperoleh dari
= 12,27g X 20g/100ml = 1,96g /100ml 125g = 0,98g /50ml = 0,490g/25ml = 49mg/2,5ml ~ 49mg/200gramBB
= 245mg/kgBB Ekstrak daun kumis kucing dosis 123mg/kgBB tikus diperoleh dari
= 12,27gX 10g/100ml = 0,98g /100ml 125g = 0,490g /50ml = 0,245g/25ml = 24,5mg/2,5ml ~ 24,5mg/200gramBB
= 122,5mg/kgBB tikus (123mg/kgBB) Pembuatan larutan ekstrak 50ml I. 1,96g ekstrak dilarutkan dalam 50ml akuades (dosis 490mg/kgBB)
II. Diambil 25ml (larutan I), ditambah akuades ad 50ml (dosis 245mg/kgBB) III.Diambil 25ml (larutan II), ditambah akuades ad 50ml (dosis 123mg/kgBB)
45
Lampiran 7. Volume Pemberian Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing Pada Hewan Uji
Volume pemberian = BB (gram)
x 2,5 ml 200 (gram)
Tabel 10. Penimbangan Dan Volume Pemberian Ekstrak
Kelompok Tikus BB tikus (gram)
Volume Pemberian
(ml) 1 198,0 2,47 2 190,5 2,38 3 175,0 2,18 4 168,0 2,10
Kontrol Negatif
Akuades
5 196,5 2,46 ± SEM 185,6 ± 5,99 2,32 ± 0,08
1 160,5 2,00 2 173,5 2,17 3 160,5 2,00 4 160,5 2,00
Na Diklofenak
Dosis 2,25mg/kgBB
5 182,5 2,28 ± SEM 167,5 ± 4,51 2,09 ± 0,06
1 187,0 2,34 2 153,3 1,92 3 153,0 1,91 4 168,5 2,11
Ekstrak Etanol Daun
Kumis Kucing 490mg/kgBB
5 200,0 2,50 ± SEM 172,36 ± 9,30 2,16 ± 0,11
1 156,0 1,95 2 171,0 2,14 3 162,0 2,03 4 200,0 2,50
Ekstrak Etanol Daun
Kumis Kucing 245mg/kgBB
5 174,5 2,18
X
X
X
± SEM 161,3 ± 3,37 2,02 ± 0,10
1 192,5 2,41 2 198,5 2,48 3 187,5 2,34 4 168,5 2,11
Ekstrak Etanol Daun
Kumis Kucing 123mg/kgBB
5 183,0 2,28
X
± SEM 185,6 ± 5,99 2,22 ± 0,09
X
46
Lampiran 8 Volume Udem Dan AUC Uji Daya Antiinflamasi
Tabel 11. Volume Udem Dan AUC Uji Daya Antiinflamasi
Volume udem (ml) dan AUC jam ke
∑AUC
PERLAKUAN
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5 5,5 6 6,5 Tikus I Vu 0,10 0,11 0,10 0,07 0,12 0,15 0,15 0,15 0,12 0,12 0,15 0,16 0,20 0,09
(198,0g) AUC 0,05 0,04 0,05 0,07 0,08 0,08 0,07 0,06 0,07 0,08 0,09 0,07 0,02 0,817 Tikus II Vu 0,06 0,05 0,07 0,16 0,23 0,31 0,36 0,35 0,33 0,40 0,33 0,34 0,36 0,33 (190,5g) AUC 0,03 0,06 0,10 0,14 0,17 0,18 0,17 0,18 0,18 0,17 0,18 0,17 0,08 1,808 Tikus III Vu 0,09 0,06 0,09 0,16 0,19 0,26 0,28 0,24 0,23 0,22 0,19 0,20 0,20 0,19 (175,0g) AUC 0,04 0,06 0,09 0,11 0,13 0,13 0,12 0,11 0,10 0,10 0,10 0,10 0,05 1,237 Tikus IV Vu 0,09 0,10 0,10 0,14 0,19 0,21 0,22 0,21 0,20 0,14 0,13 0,13 0,12 0,09 (168,0g) AUC 0,05 0,05 0,06 0,08 0,10 0,11 0,11 0,10 0,09 0,07 0,06 0,06 0,05 0,996 Tikus v Vu 0,07 0,12 0,13 0,15 0,23 0,30 0,34 0,37 0,36 0,39 0,23 0,23 0,19 0,19
I
(196,5g) AUC 0,05 0,06 0,07 0,09 0,13 0,16 0,18 0,18 0,19 0,15 0,11 0,11 0,10 1,582 1,288
SEM 0,183 II Tikus I Vu 0,07 0,07 0,03 0,07 0,02 0,07 0,07 0,08 0,07 0,04 0,04 0,03 0,02 0,01 (160,5g) AUC 0,04 0,03 0,02 0,02 0,02 0,04 0,04 0,04 0,03 0,02 0,02 0,01 0,01 0,322 Tikus II Vu 0,08 0,07 0,03 0,06 0,05 0,08 0,07 0,06 0,06 0,03 0,02 0,01 0,01 0,01 (173,5g) AUC 0,04 0,03 0,02 0,03 0,03 0,04 0,03 0,03 0,02 0,01 0,01 0,01 0,00 0,303 Tikus III Vu 0,08 0,08 0,03 0,06 0,06 0,08 0,09 0,08 0,07 0,05 0,04 0,02 0,02 0,02 (160,5g) AUC 0,04 0,03 0,02 0,03 0,04 0,04 0,04 0,04 0,03 0,02 0,02 0,01 0,01 0,369 Tikus IV Vu 0,08 0,05 0,04 0,05 0,04 0,07 0,09 0,06 0,04 0,01 0,01 0,00 0,00 0,00 (160,5g) AUC 0,03 0,02 0,02 0,02 0,03 0,04 0,04 0,03 0,01 0,00 0,00 0,00 0,00 0,249 Tikus v Vu 0,08 0,06 0,05 0,03 0,04 0,08 0,06 0,09 0,07 0,04 0,01 0,01 0,01 0,01 (182,5g) AUC 0,04 0,03 0,02 0,02 0,03 0,04 0,04 0,04 0,03 0,01 0,00 0,00 0,00 0,306 0,310
SEM 0,019
III Tikus I Vu 0,10 0,09 0,08 0,11 0,17 0,15 0,15 0,14 0,12 0,09 0,09 0,08 0,07 0,04 (187,0g) AUC 0,05 0,04 0,05 0,07 0,08 0,08 0,07 0,07 0,05 0,05 0,04 0,04 0,03 0,701 Tikus II Vu 0,07 0,07 0,08 0,11 0,13 0,14 0,12 0,09 0,07 0,07 0,06 0,04 0,01 0,01 (153,3g) AUC 0,04 0,04 0,05 0,06 0,07 0,06 0,05 0,04 0,04 0,03 0,02 0,01 0,01 0,513 Tikus III Vu 0,08 0,07 0,09 0,11 0,14 0,12 0,07 0,06 0,03 0,03 0,03 0,02 0,02 0,00 (153,0g) AUC 0,04 0,04 0,05 0,06 0,06 0,05 0,03 0,02 0,02 0,02 0,01 0,01 0,01 0,414 Tikus IV Vu 0,07 0,07 0,08 0,12 0,12 0,12 0,07 0,06 0,05 0,05 0,04 0,03 0,03 0,03 (168,5g) AUC 0,04 0,04 0,05 0,06 0,06 0,05 0,03 0,03 0,02 0,02 0,02 0,02 0,01 0,443 Tikus V Vu 0,05 0,06 0,05 0,05 0,06 0,04 0,04 0,05 0,03 0,01 0,03 0,01 0,03 0,02 (200,0g) AUC 0,03 0,03 0,02 0,03 0,03 0,02 0,02 0,02 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,240 0,462
SEM 0,075
47
Lanjutan lampiran 8
Volume udem (ml) dan AUC jam ke ∑AUC PERLAKUAN
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5 5,5 6 6,5
IV Tikus I Vu 0,08 0,08 0,09 0,12 0,15 0,16 0,16 0,10 0,08 0,09 0,07 0,08 0,08 0,07
(156,0g) AUC 0,04 0,04 0,05 0,07 0,08 0,08 0,06 0,05 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,664 Tikus II Vu 0,08 0,09 0,07 0,07 0,08 0,10 0,06 0,06 0,06 0,07 0,07 0,06 0,06 0,02 (171,0g) AUC 0,04 0,04 0,03 0,04 0,04 0,04 0,03 0,03 0,03 0,04 0,03 0,03 0,02 0,447 Tikus III Vu 0,09 0,05 0,07 0,09 0,09 0,09 0,07 0,06 0,06 0,06 0,05 0,05 0,05 0,03 (162,0g) AUC 0,03 0,03 0,04 0,04 0,04 0,04 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,02 0,02 0,430 Tikus IV Vu 0,09 0,09 0,10 0,13 0,16 0,16 0,15 0,13 0,12 0,11 0,09 0,09 0,09 0,07 (200,0g) AUC 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,08 0,07 0,06 0,06 0,05 0,05 0,05 0,04 0,742 Tikus V Vu 0,08 0,08 0,06 0,13 0,16 0,18 0,13 0,13 0,11 0,12 0,12 0,12 0,11 0,11 (174,5g) AUC 0,04 0,03 0,05 0,07 0,09 0,08 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,05 0,767 0,610 SEM 0,072 V Tikus I Vu 0,09 0,08 0,07 0,09 0,17 0,21 0,23 0,22 0,26 0,27 0,25 0,25 0,23 0,21 (192,5g) AUC 0,04 0,04 0,07 0,09 0,11 0,11 0,12 0,13 0,13 0,13 0,12 0,11 0,05 1,256 Tikus II Vu 0,09 0,09 0,05 0,15 0,25 0,28 0,25 0,21 0,23 0,23 0,19 0,19 0,17 0,13 (198,5g) AUC 0,03 0,05 0,10 0,13 0,13 0,12 0,11 0,12 0,11 0,09 0,09 0,07 0,03 1,187 Tikus III Vu 0,07 0,08 0,06 0,08 0,11 0,12 0,12 0,10 0,09 0,08 0,05 0,06 0,04 0,03 (187,5g) AUC 0,04 0,04 0,05 0,06 0,06 0,06 0,05 0,04 0,03 0,03 0,02 0,02 0,01 0,487 Tikus IV Vu 0,08 0,08 0,07 0,06 0,12 0,14 0,14 0,11 0,13 0,12 0,09 0,12 0,11 0,10 (168,5g) AUC 0,04 0,03 0,04 0,07 0,07 0,06 0,06 0,06 0,05 0,05 0,06 0,05 0,03 0,681 Tikus V Vu 0,08 0,11 0,09 0,11 0,21 0,22 0,16 0,13 0,11 0,09 0,07 0,06 0,05 0,04 (183,0g) AUC 0,05 0,05 0,08 0,11 0,09 0,07 0,06 0,05 0,04 0,03 0,03 0,02 0,01 0,697 0,862 SEM 0,152
Keterangan
Perlakuan I : Kontrol Negatif Akuades
Perlakuan II : Kontrol Positif Na Diklofenak 2,25mg/kgBB
Perlakuan III : Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing 490mg/kgBB
Perlakuan IV : Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing 245mg/kgBB
Perlakuan V : Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing 123mg/kgBB
48
Lampiran 9. Persen Daya Antiinflamasi
Tabel 12. Persen Daya Antiinflamasi
Kontrol positif Na Diklofenak
2,25 mg/kg BB
Ekstrak Daun Kumis Kucing
490 mg/kg BB
Ekstrak Daun Kumis Kucing
245 mg/kg BB
Ekstrak Daun Kumis Kucing
123 mg/kg BB
Tikus 1 75,026 45,571 48,434 2,449 Tikus 2 76,449 60,193 65,273 7,867 Tikus 3 71,386 67,827 66,632 62,215 Tikus 4 80,703 65,628 42,369 47,092 Tikus 5 76,255 81,366 40,476 45,911 % DAI
± SEM
75,96 ± 1,49
64,12 ± 5,60
52,64 ± 4,00
33,11 ± 11,80
X
49
Lampiran 10. Uji Statistik Data AUC Orientasi Dosis Na Diklofenak
NPar Tests One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test AUC N 6
Mean .28542Normal Parameters(a,b) Std. Deviation .099252
Absolute .185Positive .140
Most Extreme Differences
Negative -.185Kolmogorov-Smirnov Z .453Asymp. Sig. (2-tailed) .986
a Test distribution is Normal. b Calculated from data.
T-Test Group Statistics
PERLAKUAN N Mean Std. Deviation Std. Error
Mean Na Diklofenak 2,25 mg/kg BB tikus 3 .32167 .052698 .030425
AUC
Na Diklofenak 6,75 mg/kg BB tikus 3 .24917 .133822 .077262
Independent Samples Test
Levene's Test for
Equality of Variances t-test for Equality of Means
95% Confidence Interval of the
Difference
F Sig. t df
Sig. (2-
tailed)Mean
DifferenceStd. Error Difference Lower Upper
Equal variances assumed
2.007 .230 .873 4 .432 .072500 .083037 -.158048 .303048
AUC
Equal variances not assumed
.873 2.606 .456 .072500 .083037 -.215887 .360887
50
Lampiran 11. Uji Statistik Data AUC Orientasi Waktu Pemberian Na Diklofenak Na Diklofenak 2,25mg/kgBB
NPar Tests One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test AUC N 12
Mean 1.04525Normal Parameters(a,b) Std. Deviation .427041
Absolute .160Positive .160
Most Extreme Differences
Negative -.119Kolmogorov-Smirnov Z .555Asymp. Sig. (2-tailed) .918
a Test distribution is Normal. b Calculated from data.
Oneway Descriptives AUC
95% Confidence Interval for Mean
N Mean Std.
DeviationStd. Error
Lower Bound
Upper Bound Minimum Maximum
Kontrol negatif aquadest 3 1.58467 .202505 .116916 1.08162 2.08772 1.383 1.788
1 Jam Sebelum Induksi Karagenin
3 1.01067 .370022 .213632 .09148 1.92985 .643 1.383
0.5 Jam Sebelum Induksi Karagenin
3 .82300 .312947 .180680 .04560 1.60040 .483 1.099
Sesaat Sebelum induksi Karagenin
3 .76267 .308254 .177970 -.00308 1.52841 .567 1.118
Total 12 1.04525 .427041 .123276 .77392 1.31658 .483 1.788
51
Lanjutan Lampiran 11 Test of Homogeneity of Variances AUC
Levene Statistic df1 df2 Sig.
.094 3 8 .961 ANOVA AUC
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 1.109 3 .370 3.832 .057 Within Groups .772 8 .097 Total 1.882 11
Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: AUC LSD
95% Confidence Interval
(I) PERLAKUAN (J) PERLAKUAN
Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig.
Lower Bound
Upper Bound
1 Jam Sebelum Induksi Karagenin .619250 .269044 .050 -.00117 1.23967
0.5 Jam Sebelum Induksi Karagenin .620750(*) .237275 .031 .07359 1.16791
Kontrol negatif aquadest
Sesaat Sebelum induksi Karagenin .681083(*) .237275 .021 .13393 1.22824
1 Jam Sebelum Induksi Karagenin
Kontrol negatif aquadest -.619250 .269044 .050 -1.23967 .00117
0.5 Jam Sebelum Induksi Karagenin .001500 .283597 .996 -.65248 .65548
Sesaat Sebelum induksi Karagenin .061833 .283597 .833 -.59214 .71581
Kontrol negatif aquadest
-.620750(*) .237275 .031 -1.16791 -.07359
1 Jam Sebelum Induksi Karagenin -.001500 .283597 .996 -.65548 .65248
0.5 Jam Sebelum Induksi Karagenin
Sesaat Sebelum induksi Karagenin .060333 .253657 .818 -.52460 .64527
Sesaat Sebelum induksi Karagenin
Kontrol negatif aquadest
-.681083(*) .237275 .021 -1.22824 -.13393
1 Jam Sebelum Induksi Karagenin -.061833 .283597 .833 -.71581 .59214
0.5 Jam Sebelum Induksi Karagenin -.060333 .253657 .818 -.64527 .52460
* The mean difference is significant at the .05 level.
52
Lampiran 12. Uji Statistik Data AUC Orientasi Dosis Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing
NPar Tests One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test AUC N 12
Mean .962431Normal Parameters(a,b) Std. Deviation .5111896
Absolute .128Positive .122
Most Extreme Differences
Negative -.128Kolmogorov-Smirnov Z .442Asymp. Sig. (2-tailed) .990
a Test distribution is Normal. b Calculated from data.
Oneway
Descriptives AUC
95% Confidence Interval for Mean
N Mean Std.
DeviationStd. Error
Lower Bound
Upper Bound Minimum Maximum
kontrol negatif aquadest
3 1.584167 .2025051 .1169164 1.081116 2.087217 1.3825 1.7875
Ekstrak Daun Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus
3 1.128333 .2828115 .1632813 .425791 1.830876 .8270 1.3880
Ekstrak Daun Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus
3 .815667 .2107328 .1216667 .292177 1.339156 .6540 1.0540
Kontrol Positif Na Diklofenak 2,25mg/Kg BB Tikus
3 .321667 .0526980 .0304252 .190757 .452576 .2900 .3825
Total 12 .962458 .5112324 .1475801 .637637 1.287280 .2900 1.7875
53
Lanjutan Lampiran12 Test of Homogeneity of Variances AUC
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1.392 3 8 .314 ANOVA AUC
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 2.539 3 .846 20.126 .000 Within Groups .336 8 .042 Total 2.875 11
54
Lanjutan Lampiran12 Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: AUC LSD
95% Confidence Interval
(I) PERLAKUAN (J) PERLAKUAN
Mean Difference (I-
J) Std. Error Sig.
Lower Bound
Upper Bound
Ekstrak Daun Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus
.4558333(*) .1674197 .026 .069763 .841904
Ekstrak Daun Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus
.7685000(*) .1674197 .002 .382430 1.154570
kontrol negatif aquadest
Kontrol Positif Na Diklofenak 2,25mg/Kg BB Tikus
1.2625000(*) .1674197 .000 .876430 1.648570
Ekstrak Daun Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus
kontrol negatif aquadest -.4558333(*) .1674197 .026 -.841904 -.069763
Ekstrak Daun Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus
.3126667 .1674197 .099 -.073404 .698737
Kontrol Positif Na Diklofenak 2,25mg/Kg BB Tikus
.8066667(*) .1674197 .001 .420596 1.192737
kontrol negatif aquadest -.7685000(*) .1674197 .002 -
1.154570 -.382430
Ekstrak Daun Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus
-.3126667 .1674197 .099 -.698737 .073404
Ekstrak Daun Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus
Kontrol Positif Na Diklofenak 2,25mg/Kg BB Tikus
.4940000(*) .1674197 .018 .107930 .880070
Kontrol Positif Na Diklofenak 2,25mg/Kg BB Tikus
kontrol negatif aquadest -1.2625000(*) .1674197 .000 -
1.648570 -.876430
Ekstrak Daun Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus
-.8066667(*) .1674197 .001 -1.192737 -.420596
Ekstrak Daun Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus
-.4940000(*) .1674197 .018 -.880070 -.107930
* The mean difference is significant at the .05 level.
55
Lampiran 13. Uji Statistik Data AUC Orientasi Waktu Pemberian Ekstrak Daun Kumis Kucing
NPar Tests One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test AUC N 12
Mean .96235Normal Parameters(a,b) Std. Deviation .444408
Absolute .226Positive .226
Most Extreme Differences
Negative -.154Kolmogorov-Smirnov Z .784Asymp. Sig. (2-tailed) .571
a Test distribution is Normal. b Calculated from data.
Oneway Descriptives AUC
95% Confidence Interval for Mean
N Mean Std.
Deviation Std. Error
Lower Bound
Upper Bound Minimum Maximum
Kontrol negatif aquadest
3 1.58467 .202505 .116916 1.08162 2.08772 1.383 1.788
1 Jam Sebelum Induksi Karagenin
3 .53222 .027390 .015814 .46418 .60026 .509 .563
0.5 Jam Sebelum Induksi Karagenin
3 .77444 .168062 .097030 .35696 1.19193 .661 .968
Sesaat Sebelum induksi Karagenin
3 .95806 .323751 .186918 .15381 1.76230 .603 1.236
Total 12 .96235 .444408 .128289 .67998 1.24471 .509 1.788 Test of Homogeneity of Variances AUC
Levene Statistic df1 df2 Sig.
2.511 3 8 .132
56
Lanjutan Lampiran 13 ANOVA AUC
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 1.823 3 .608 13.903 .002 Within Groups .350 8 .044 Total 2.172 11
Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: AUC LSD
95% Confidence Interval
(I) PERLAKUAN (J) PERLAKUAN
Mean Difference (I-
J) Std. Error Sig.
Lower Bound
Upper Bound
1 Jam Sebelum Induksi Karagenin 1.052444(*) .170694 .000 .65882 1.44606
0.5 Jam Sebelum Induksi Karagenin .810222(*) .170694 .001 .41660 1.20384
Kontrol negatif aquadest
Sesaat Sebelum induksi Karagenin .626611(*) .170694 .006 .23299 1.02023
1 Jam Sebelum Induksi Karagenin
Kontrol negatif aquadest -1.052444(*) .170694 .000 -1.44606 -.65882
0.5 Jam Sebelum Induksi Karagenin -.242222 .170694 .194 -.63584 .15140
Sesaat Sebelum induksi Karagenin -.425833(*) .170694 .037 -.81945 -.03221
Kontrol negatif aquadest -.810222(*) .170694 .001 -1.20384 -.41660
1 Jam Sebelum Induksi Karagenin .242222 .170694 .194 -.15140 .63584
0.5 Jam Sebelum Induksi Karagenin
Sesaat Sebelum induksi Karagenin -.183611 .170694 .313 -.57723 .21001
Sesaat Sebelum induksi Karagenin
Kontrol negatif aquadest -.626611(*) .170694 .006 -1.02023 -.23299
1 Jam Sebelum Induksi Karagenin .425833(*) .170694 .037 .03221 .81945
0.5 Jam Sebelum Induksi Karagenin .183611 .170694 .313 -.21001 .57723
* The mean difference is significant at the .05 level.
57
Lampiran 14. Uji Statistik Data AUC Uji Utama Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing
NPar Tests One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test AUC N 25
Mean .70632Normal Parameters(a,b) Std. Deviation .422979
Absolute .163Positive .163
Most Extreme Differences
Negative -.135Kolmogorov-Smirnov Z .815Asymp. Sig. (2-tailed) .520
a Test distribution is Normal. b Calculated from data.
Oneway
Descriptives AUC
N Mean Std.
Deviation Std.
Error 95% Confidence Interval for Mean Minimum Maximum
Lower Bound
Upper Bound
Kontrol negatif ( akuades) 5 1.28800 .408210 .182557 .78114 1.79486 .817 1.808
Na Diklofenak 2.25 mg/kg BB Tikus
5 .30980 .043043 .019249 .25636 .36324 .249 .369
Ekstrak Kumis Kucing 490 mg/kg BB Tikus
5 .46220 .167086 .074723 .25474 .66966 .240 .701
Ekstrak Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus
5 .61000 .161213 .072096 .40983 .81017 .430 .767
Ekstrak Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus
5 .86160 .339658 .151900 .43986 1.28334 .487 1.256
Total 25 .70632 .422979 .084596 .53172 .88092 .240 1.808
Test of Homogeneity of Variances
AUC
Levene Statistic df1 df2 Sig.
6.398 4 20 .002
58
Lanjutan Lampiran 14
Uji Statistik Hasil Transformasi AUC (1/√AUC)
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
TRAN_AUC N 25
Mean 1.3390 Normal Parameters(a,b) Std. Deviation .37247
Absolute .138 Positive .138
Most Extreme Differences
Negative -.072 Kolmogorov-Smirnov Z .690 Asymp. Sig. (2-tailed) .728
a Test distribution is Normal. b Calculated from data.
Test of Homogeneity of Variances
TRAN_AUC
Levene Statistic df1 df2 Sig.
.896 4 20 .484
ANOVA TRAN_AUC
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 2.439 4 .610 13.698 .000 Within Groups .890 20 .045 Total 3.330 24
59
Lanjutan Lampiran 14 Post Hoc Tests
Multiple Comparisons Dependent Variable: TRAN_AUC LSD
(I) PERLAKUAN (J) PERLAKUAN
Mean Difference (I-
J) Std. Error Sig. 95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound kontrol negatif ( akuades)
Na Diklofenak 2.25 mg/kg BB Tikus -.89814(*) .13344 .000 -1.1765 -.6198
Ekstrak Kumis Kucing 490 mg/kg BB Tikus -.62844(*) .13344 .000 -.9068 -.3501
Ekstrak Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus -.40088(*) .13344 .007 -.6792 -.1225
Ekstrak Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus -.22129 .13344 .113 -.4997 .0571
Na Diklofenak 2.25 mg/kg BB Tikus
kontrol negatif ( akuades) .89814(*) .13344 .000 .6198 1.1765
Ekstrak Kumis Kucing 490 mg/kg BB Tikus .26970 .13344 .057 -.0087 .5481
Ekstrak Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus .49726(*) .13344 .001 .2189 .7756
Ekstrak Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus .67685(*) .13344 .000 .3985 .9552
Ekstrak Kumis Kucing 490 mg/kg BB Tikus
kontrol negatif ( akuades) .62844(*) .13344 .000 .3501 .9068
Na Diklofenak 2.25 mg/kg BB Tikus -.26970 .13344 .057 -.5481 .0087
Ekstrak Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus .22756 .13344 .104 -.0508 .5059
Ekstrak Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus .40714(*) .13344 .006 .1288 .6855
Ekstrak Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus
kontrol negatif ( akuades) .40088(*) .13344 .007 .1225 .6792
Na Diklofenak 2.25 mg/kg BB Tikus -.49726(*) .13344 .001 -.7756 -.2189
Ekstrak Kumis Kucing 490 mg/kg BB Tikus -.22756 .13344 .104 -.5059 .0508
Ekstrak Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus .17959 .13344 .193 -.0988 .4579
Ekstrak Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus
kontrol negatif ( akuades) .22129 .13344 .113 -.0571 .4997
Na Diklofenak 2.25 mg/kg BB Tikus -.67685(*) .13344 .000 -.9552 -.3985
Ekstrak Kumis Kucing 490 mg/kg BB Tikus -.40714(*) .13344 .006 -.6855 -.1288
Ekstrak Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus -.17959 .13344 .193 -.4579 .0988
* The mean difference is significant at the .05 level.
60
Lampiran 15. Uji Statistik Data % DAI Uji Efek Antiinfalamsi Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing
NPar Tests One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
DAI N 20
Mean 56.45610 Normal Parameters(a,b) Std. Deviation 21.912398
Absolute .168 Positive .128
Most Extreme Differences
Negative -.168 Kolmogorov-Smirnov Z .750 Asymp. Sig. (2-tailed) .627
a Test distribution is Normal. b Calculated from data.
Descriptives DAI
95% Confidence Interval for Mean
N Mean Std.
Deviation Std. Error Lower Bound
Upper Bound Minimum Maximum
Na Diklofenak 2.25 mg/kg BB Tikus
5 75.96380 3.339759 1.493586 71.81694 80.11066 71.386 80.703
Ekstrak Kumis Kucing 490 mg/kg BB Tikus
5 64.11700 12.970419 5.800548 48.01210 80.22190 45.571 81.366
Ekstrak Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus
5 52.63680 12.515146 5.596943 37.09719 68.17641 40.476 66.632
Ekstrak Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus
5 33.10680 26.380717 11.797815 .35081 65.86279 2.449 62.215
Total 20 56.45610 21.912398 4.899761 46.20078 66.71142 2.449 81.366
Test of Homogeneity of Variances
DAI
Levene Statistic df1 df2 Sig.
8.875 3 16 .001
61
Lanjutan Lampiran 15
Uji Statistik Hasil Transformasi DAI (DAI2)
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
TRAN_DAI N 20
Mean 3643.4368 Normal Parameters(a,b) Std. Deviation 2015.15300
Absolute .140 Positive .140
Most Extreme Differences
Negative -.120 Kolmogorov-Smirnov Z .627 Asymp. Sig. (2-tailed) .827
a Test distribution is Normal. b Calculated from data.
Test of Homogeneity of Variances TRAN_DAI
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1.902 3 16 .170
ANOVA
TRAN_DAI
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 47231703.4
85 3 15743901.162 8.418 .001
Within Groups 29924287.122 16 1870267.945
Total 77155990.608 19
62
Lanjutan Lampiran 15 Post Hoc Tests
Multiple Comparisons Dependent Variable: TRAN_DAI LSD
95% Confidence Interval
(I) PERLAKUAN (J) PERLAKUAN
Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound Ekstrak Kumis Kucing 490 mg/kg BB Tikus 1533.84699 864.93189 .095 -299.7267 3367.4207
Ekstrak Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus 2883.48629(*) 864.93189 .004 1049.9126 4717.0600
Na Diklofenak 2.25 mg/kg BB Tikus
Ekstrak Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus 4126.60812(*) 864.93189 .000 2293.0344 5960.1818
Ekstrak Kumis Kucing 490 mg/kg BB Tikus
Na Diklofenak 2.25 mg/kg BB Tikus -1533.84699 864.93189 .095 -3367.4207 299.7267
Ekstrak Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus 1349.63930 864.93189 .138 -483.9344 3183.2130
Ekstrak Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus 2592.76113(*) 864.93189 .009 759.1874 4426.3348
Na Diklofenak 2.25 mg/kg BB Tikus -
2883.48629(*) 864.93189 .004 -4717.0600 -1049.9126
Ekstrak Kumis Kucing 490 mg/kg BB Tikus -1349.63930 864.93189 .138 -3183.2130 483.9344
Ekstrak Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus
Ekstrak Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus 1243.12183 864.93189 .170 -590.4519 3076.6955
Ekstrak Kumis Kucing 123 mg/kg BB Tikus
Na Diklofenak 2.25 mg/kg BB Tikus -
4126.60812(*) 864.93189 .000 -5960.1818 -2293.0344
Ekstrak Kumis Kucing 490 mg/kg BB Tikus
-2592.76113(*) 864.93189 .009 -4426.3348 -759.1874
Ekstrak Kumis Kucing 245 mg/kg BB Tikus -1243.12183 864.93189 .170 -3076.6955 590.4519
* The mean difference is significant at the .05 level.
EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL DAUN KUMIS KUCING (Orthosiphon stamineus Benth.)
PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR
MAKALAH
Oleh:
SIGIT PRAYOGA K 100 04 0004
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA 2008
PENGESAHAN MAKALAH
EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL DAUN KUMIS KUCING (Orthosiphon stamineus Benth.)
PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR
Oleh :
SIGIT PRAYOGA K 100 04 0004
Telah disetujui dan disahkan pada : Hari : Selasa Tanggal : 15 Juli 2008
Pembimbing Pendamping
(Arifah Sri Wahyuni, S.Si., Apt.)
ii
EFEK ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL DAUN KUMIS KUCING (Orthosiphon stamineus Benth.)
PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR
ANTI-INFLAMMATORY EFFECT ETHANOLIC EXTRACT OF KUMIS KUCING LEAF (Orthosiphon stamineus Benth.)
IN WISTAR MALE RATS
ABSTRAK
Tanaman kumis kucing secara empiris digunakan masyarakat untuk pengobatan penyakit gout dan rematik. Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk megetahui daya antiinflamasi ekstrak daun kumis kucing (Orthosiphon stamineus Benth.). Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental semu dengan rancangan acak lengkap pola satu arah.
Ekstrak daun kumis kucing disari menggunakan etanol 70%. Sejumlah 25 ekor tikus putih jantan galur Wistar umur 2-3 bulan, berat 150-200g dibagi menjadi 5 kelompok. Masing-masing kelompok diberi perlakuan secara oral dengan akuades (kontrol negatif), Natrium diklofenak 2,25mg/kgBB (kontrol positif). Ekstrak etanol daun kumis yang diujikan dosis123, 245 dan 490mg/kgBB. Perlakuan 1 jam sebelum kaki tikus diradangkan dengan karagenin 1% subplantar. Pengukuran volume kaki tikus dilakukan tiap 0,5jam selama 6,5jam. Kurva volume udem rata-rata yang diperoleh digunakan untuk menghitung AUC (Area Under the Curve), dan AUC yang diperoleh digunakan untuk menghitung DAI (Daya Anti Inflamasi). Data AUC dan DAI diuji statistik dengan anava satu jalan dan dilanjutkan dengan LSD dengan taraf kepercayaan 95%.
Hasil penelitian menunjukkan ekstrak etanol daun kumis kucing mempunyai efek antiinflamasi pada tikus putih jantan galur Wistar. Ekstrak etanol daun kumis kucing pada dosis 123, 245, dan 490mg/kgBB menghasilkan persen daya antiinflamasi berturut turut 33,11%; 52,64% dan 64,12%.
Kata kunci : antiinflamasi, Orthosiphon stamineus Benth., natrium diklofenak,
ekstrak etanol.
ABSTRACT
Orthosiphon stamineus have been used many people to cure gout and rheumatic. This research was to investigated anti-inflammatory ability of Orthosiphon stamineus leaf extract. This research was conducted by complete random design.
Orthosiphon stamineus leaf extracted by 70% ethanol. This extracts ware investigated for anti-inflammatory activity use Wistar male rat (150-200g, 2-3 month old). Numbers of 25 rats divided to become 5 groups. Groups of 5 rats were administered orally distilled water (negative control), Na diclofenac
1
2
2,25mg/kg b.w. (positive control). Plant extracts were gave different dose levels (doses 123mg/kg b.w. rat, 245mg/kg b.w. rat and 490mg/kg b.w. rat). After 1h, 0,1 ml 1% carrageenan suspension in 0,9% NaCl solution was injected into the sub-plantar tissue hind paw. Edema measured at 0,5 hourly interval for 6,5 hours. Edema data used to calculate AUC (Area Under the Curve), and AUC used to calculate anti-inflammatory ability. One-way ANOVA with confidence interval 95% and LSD (Least Significant Difference) was applied to determine the significance of the difference between the control groups and rat treated with the test compounds.
Result of this experiment were signed that ethanolic extract of Orthosiphon stamineus Benth. leaf had anti-inflammatory effect in Wistar male rat. Anti-inflammatory ability of Orthosiphon stamineus Benth. extract on doses 123, 245 and 490mg/kg b.w. rat were 33,11%; 52,64% and 64,12%.
Key words : anti-inflammation, Orthosiphon stamineus, natrium diclofenac,
ethanolic extract
PENDAHULUAN
Penggunaan bahan alam, baik sebagai obat maupun tujuan lain cenderung
meningkat, terlebih dengan adanya isu back to nature. Obat tradisional dan
tanaman obat banyak digunakan masyarakat terutama dalam upaya preventif,
promotif dan rehabilitatif. Sementara ini banyak orang beranggapan bahwa
penggunaan tanaman obat atau obat tradisional relatif lebih aman dibandingkan
obat sintesis. Agar penggunaannya optimal, perlu diketahui informasi yang
memadai tentang tanaman obat. Informasi yang memadai akan membantu
masyarakat lebih cermat untuk memilih dan menggunakan suatu produk obat
tradisional atau tumbuhan obat dalam upaya kesehatan.
Tanaman kumis kucing (Orthosiphon stamineus Benth.) mudah sekali
ditemukan di seluruh nusantara. Tanaman ini sangat mudah tumbuh sehingga
mudah dikembangbiakan. Kumis kucing sudah digunakan masyarakat untuk
diuretik, pengobatan hipertensi, gout dan rematik (Barnes et al., 1996). Pada
penyakit gout dan rematik terjadi inflamasi, karena inflamasi merupakan
manifestasi dari kerusakan jaringan. Penelitian Anindhita (2007) menunjukkan
infusa herba kumis kucing mempunyai daya antiinflamasi pada tikus putih jantan
galur Wistar.
3
Tanaman kumis kucing mengandung berbagai senyawa kimia, salah satunya
adalah flavonoid. Penelitian terhadap flavonoid dari beberapa tanaman
mempunyai efek farmakologis sebagai antiinflamasi (Narayana et al., 2001).
Flavonoid yang terdapat dalam simplisia daun kumis kucing bisa disari
menggunakan air maupun etanol 70% (Harbone, 1987). Penyarian yang dilakukan
dengan mengunakan pelarut air akan diperoleh zat yang bersifat cenderung polar.
Pelarut air mempunyai kelemahan yaitu menyebabkan reaksi fermentatif sehigga
mengakibatkan perusakan bahan aktif lebih cepat. Kelemahan lainnya adalah
menyebabkan pembengkakan sel sehingga bahan aktif akan terikat kuat pada
simplisia, larutan dalam air juga mudah dikontaminasi. Pelarut alkoholik
merupakan pilihan utama untuk semua jenis flavonoid (Soemardi, 2004). Pelarut
etanol bisa digunakan untuk menyari zat yang kepolaran relatif tinggi sampai
relatif rendah, karena etanol merupakan pelarut universal. Etanol mempunyai
kelebihan dibanding air yaitu tidak menyebabkan pembengkaan sel, menghambat
kerja enzym dan memperbaiki stabilitas bahan obat telarut. Etanol 70% sangat
efektif menghasilkan bahan aktif yang optimal, bahan balas yang ikut tersari
dalam cairan penyari hanya sedikit, sehingga zat aktif yang tersari akan lebih
banyak (Voigt, 1995).
Tikus merupakan binatang yang bisa digunakan untuk pengujian antiinflamasi
dengan berbagai stimulan kimia. Pada pengujian antiinflamasi tikus distimulasi
agar terjadi udem. Salah satu zat yang dapat digunakan sebagai induktor udem
adalah karagenin. Karagenin adalah ekstrak Chondrus, yaitu suatu polisakarida
sulfat dengan molekul besar yang bisa menyebabkan inflamasi jika diinjeksikan
subplantar pada tikus, sehingga bisa digunakan sebagai induktor inflamasi
(Corsini et al., 2005, Domer, 1971). Untuk mendapatkan data ilmiah mengenai
efek antiinflamasi daun kumis kucing, perlu dilakukan dengan penelitian efek
antiinflamasi ekstrak daun kumis kucing ini pada tikus putih jantan galur Wistar.
METODE PENELITIAN
Bahan : tanaman kumis kucing (Orthosiphon stamineus Benth.) (B2P2TO2T
Tawangmangu bulan Agustus 2008). Reagensia, karagenin tipe lambda (λ) (Sigma
4
Chemical Co), Larutan NaCl (Otsuka), Na diklofenak (Pharos) dan Etanol 70%
(Ikapharmindo Putramas). Hewan uji, tikus putih jantan, sehat, galur Wistar, umur
2-3 bulan, bobot 150-200gram (Lab. Farmakologi Fakultas Farmasi Universitas
Gadjah Mada Yogyakarta).
Alat : pletismometer, ayakan No. 8, rotary evaporator, spuit injeksi (terumo),
jarum oral, alat-alat gelas, timbangan (kepekaan 0,0001g).
Cara Penelitian
Hewan uji yang digunakan adalah tikus putih jantan galur Wistar sebanyak 25
ekor, semua hewan uji dipelihara dalam kondisi yang sama. Hewan uji dibagi
menjadi 5 kelompok. Sebelum diberi perlakuan, kaki tikus ditandai, kemudian
diukur volumenya. Volume kaki tikus diukur dengan menggunakan pletismometer
dengan cara mencelupkan kaki tikus yang sudah ditandai ke dalam raksa yang ada
dalam pletismometer. Perlakuan dengan sediaan uji yang diberikan secara per
oral pada masing masing kelompok adalah:
Kelompok I : akuades 2,5ml/200gramBB (kontrol negatif)
Kelompok II : Natrium diklofenak dosis 2,25 mg/kgBB (kontrol positif)
Kelompok III : ekstrak etanol daun kumis kucing dosis 490mg/KgBB
Kelompok IV : ekstrak etanol daun kumis kucing dosis 245mg/KgBB
Kelompok V : ekstrak etanol daun kumis kucing dosis 123mg/KgBB
Perlakuan ini dilakuan 1jam sebelum induksi karagenin 1%. Induksi dilakukan
pada kaki tikus secara subplantar. Setelah semua tikus diinduksi, kemudian diukur
volume kaki tikus setiap 0,5jam. Pengukuran dilakukan selama 6,5jam.
Analisis Data
Data yang diperoleh berupa volume kaki tikus, kemudian digunakan untuk
menghitung volume udem. Volume udem merupakan selisih kaki tikus sebelum
dan sesudah diradangkan dengan rumus:
(1) Vu =Vt-Vo
Keterangan :
Vu :volume udem kaki tikus tiap waktu
Vt : volume kaki tikus setelah diradangkan karagenin 1% pada waktu t
Vo : volume kaki tikus sebelum diradangkan karagenin 1%
5
Setelah diperoleh diperoleh kurva volume udem kaki tikus vs waktu,
selanjutnya digunakan untuk menghitung AUC (Area Under the Curve), kurva
antara rata-rata volume udem terhadap waktu. Rumus yang digunakan untuk
menghitung AUCtntn-1 adalah :
Vtn-1 + Vtn AUCtn (2)
tn-1 = ( tn-tn-1 ) 2
Keterangan :
Vtn-1 = rata- rata volume udem pada tn-1
Vtn = rata-rata volume udem pada tn
Prosentase daya antiinflamasi (penghambatan volume udem) dihitung
berdasarkan harga AUC kontrol negatif dan harga AUC perlakuan pada tiap
individu menggunakan rumus berikut :
AUCk - AUCp% DAI = X 100%
AUCk
(3)
Keterangan :
% DAI = persen daya antiinflamasi
AUCk = AUC rata-rata kurva volume udem terhadap waktu untuk kontrol negatif
AUCp = AUC rata-rata kurva volume udem terhadap waktu untuk kelompok
perlakuan pada tiap individu.
Data AUC (Area Under the Curve) antara volume udema terhadap waktu
dilakukan uji Kolmogorof-Smirnov guna mengetahui distribusi data dan Levene
Statistic test untuk mengetahui homogenitas variannya. Apabila terdistribusi
normal dan homogen dilanjutkan dengan analisis varian satu jalan (Oneway
Anova) dengan taraf kepercayaan 95% dan dilanjutkan uji LSD (Least Significant
Difference) untuk mengetahui ada atau tidaknya perbedaan bermakna. Analisis
data dikerjakan dengan Program SPSS versi 14.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada pengeringan ini simplisia, diperoleh daun kumis kucing kering 228,85g.
Setelah sortasi kering dan pengayakan, simplisia yang diperoleh mempunyai
6
bobot 125g. Ekstrak yang diperoleh adalah 12,270g atau mempunyai rendemen
9,816% b/b.
Sebelum dilakukan uji daya antiinflamasi, terlebih dahulu dilakukan uji
pendahuluan (orientasi). Orientasi yang dilakukan antara lain penentuan dosis Na
diklofenak, penentuan waktu pemberian Na diklofenak, penentuan dosis ekstrak
daun kumis kucing, dan penentuan waktu pemberian ekstrak daun kumis kucing.
Uji pendahuluan yang pertama adalah orientasi dosis kontrol positif Na
diklofenak. Na diklofenak yang diorientasi adalah dosis 2,25mg/kgBB dan
6,75mg/kgBB. Orientasi dosis pemberian Na diklofenak ini dilakukan
dimaksudkan untuk menentukan dosis yang dapat memberikan efek antiinflamasi
yang optimal terhadap hewan uji.
Tabel 1. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu Dan % Daya Antiinflamasi Orientasi Dosis Na Diklofenak
Kelompok Perlakuan
Harga AUC (ml.jam)
% Daya Antiinflamasi
Kontrol negatif
akuades 1,58 ± 0,12 ─
Na diklofenak 2,25mg/kgBB 0,32 ± 0,03 79,70 ± 1,92
Na diklofenak 6,75mg/kgBB 0,25 ± 0,08 84,27 ± 4,88
( ± SEM) ( ± SEM)
Dilihat dari Tabel 1 diketahui bahwa Na diklofenak pada dosis 6,75mg/kgBB
menunjukkan penghambatan yang lebih baik daripada dosis 2,25mg/kgBB. Hal
ini dapat dilihat dari data AUC kurva hubungan rata-rata volume udem terhadap
waktu dan persen daya antiinflamasi pada Tabel 1 di atas. Semakin kecil AUC
menunjukkan efek antiinflamasi yang semakin baik. Hasil orientasi dosis Na
diklofenak 6,75mg/kgBB dan 2,25mg/kgBB dianalisis secara statistik. Pada T-
Test diperoleh p>0,05 yang menunjukkan tidak ada perbedaan bermakna antara
dosis Na diklofenak 6,75mg/kgBB dan 2,25mg/kgBB. Sehingga untuk uji
selanjutnya dipilih dosis yang lebih kecil, yaitu dosis Na diklofenak 2,25mg/kgBB
sebagai kontrol positif.
7
Orientasi waktu pemberian menggunakan Na diklofenak dosis 2,25mg/kgBB.
Waktu pemberian yang diorientasi adalah waktu 1jam, 0,5jam dan sesaat sebelum
induksi karagenin 1%. Data yang diperoleh dibuat grafik .
Orientasi Waktu Pemberian Na Dikofenak
0.000.050.100.150.200.250.300.350.40
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 6 6.5 7
Waktu (jam)
Vol
ume
udem
(ml)
Kontrol negatif akuades
1 jam sebelum induksi karagenin1%0,5 jam sebelum karagenin 1%
Sesaat sebelum karagenin
Gambar 1. Grafik Rata-Rata Volume Udem Orientasi Waktu Pemberian Na Diklofenak 2,25mg/kgBB
Tabel 2. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu Dan
%Daya Antiinflamasi Orientasi Waktu Pemberian Na Diklofenak
Kelompok Perlakuan Harga AUC (ml.jam)
% Daya Antiinflamasi
Kontrol negatif akuades 1,58 ± 0,12 ─
Na diklofenak 1jam sebelum diinduksi karagenin 1% 0,89 ± 0,12 43,81 ± 7,80
Na diklofenak 0,5jam sebelum diinduksi karagenin 1% 0,82 ± 0,18 48,05 ± 11,40
Na diklofenak sesaat sebelum diinduksi karagenin 1% 0,76 ± 0,18 51,85 ± 11,23
( ± SEM) ( ± SEM)
AUC kurva hubungan rata-rata volume udem terhadap waktu diuji dengan
statistik. Pada uji anava diperoleh nilai p>0,05. Dengan p>0,05, dapat
disimpulkan bahwa tidak ada perbedaan antar perlakuan (1jam, 0,5jam dan sesaat
sebelum induksi karagenin 1%).
Pada penelitian ini dipilih waktu untuk pemberian Na diklofenak sesaat
sebelum induksi karagenin 1% dengan pertimbangan dengan pemberian Na
8
diklofenak sesaat sebelum induksi karagenin 1% mempunyai daya antiinflamasi
yang paling baik dibanding 0,5; dan 1 jam sebelum induksi karagenin 1%.
Uji Pendahuluan ketiga adalah orientasi dosis pemberian ekstrak etanol daun
kumis kucing. Orientasi dilakukan dengan menggunakan ekstrak etanol daun
kumis kucing dengan dosis 245mg/kgBB dan 123mg/kgBB. Hasil orientasi dapat
dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu Dan % Daya Antiinflamasi Orientasi Dosis Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing
Kelompok Perlakuan Harga AUC (ml.jam)
% Daya Antiinflamasi
( ± SEM) ( ± SEM)
Kontrol negatif akuades 1,58 ± 0,12 ─ Ekstrak daun kumis kucing
245mg/kg BB 0,82 ± 0,12 48,50 ± 7,68
Ekstrak daun kumis kucing 123 mg/kg BB 1,13 ± 0,16 28,79 ± 10,31
Na diklofenak dosis 2,25mg/kg BB 0,32 ± 0,03 79,70 ± 1,92
Pada uji anava signifikansi p= 0,000 yang berarti paling tidak terdapat
perbedaan bermakna antara dua kelompok. Dari Post Hoc test diketahui ekstrak
etanol daun kumis kucing dengan dosis 245mg/kgBB dan ektrak etanol daun
kumis kucing dengan dosis 123mg/kgBB mempunyai p>0,05 yang berarti tidak
ada perbedaaan bermakna antara ekstrak etanol daun kumis kucing dengan dosis
245mg/kgBB dan ektrak etanol daun kumis kucing dengan dosis 123mg/kgBB,
tetapi dari tabel 5 diketahui ektrak etanol daun kumis kucing dengan dosis
245mg/kgBB mempunyai daya antiinflamasi yang lebih baik dibandingkan
ekstrak etanol daun kumis kucing dengan dosis 123mg/kgBB, yaitu sebesar
48,50%. Maka orientasi waktu pemberian ekstrak dilakukan dengan menggunakan
ekstrak etanol daun kumis kucing dengan dosis 245mg/kgBB.
Uji pendahuluan keempat adalah orientasi waktu pemberian ekstrak etanol
daun kumis kucing. Orientasi dilakukan dengan menggunakan ekstrak etanol daun
kumis kucing dengan dosis 245mg/kgBB. Pemberian ekstrak etanol daun kumis
kucing dengan dosis 245mg/kgBB ini dilakukan pada 1jam; 0,5jam dan sesaat
9
sebelum induksi karagenin 1%. Hasil orientasi waktu pemberian ekstrak etanol
daun kumis kucing ini dapat dilihat pada grafik dibawah ini.
Orientasi Waktu Pemberian Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing
0.000.050.100.150.200.250.300.350.40
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 6 6.5 7
Waktu (jam)
Vol
ume
udem
(ml)
Kontrol negatif akuades
0,5 jam sebelum induksikaragenin 1%1 jam sebelum induksikaragenin 1%Sesaat sebelum induksikaragenin 1%
Gambar 3. Grafik Rata-Rata Volume Udem Orientasi Waktu Pemberian Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing Dosis 245mg/kgBB
Data yang diperoleh dilakukan uji anava, karena diperoleh karena p>0,05
dapat disimpulkan tidak ada perbedaan antar perlakuan (1jam, 0,5jam dan sesaat
sebelum induksi karagenin 1. Pada penelitian ini dipilih waktu untuk pemberian
ekstrak daun kumis kucing 1jam sebelum induksi karagenin 1% karena daya
antiinflamasi paling baik pada pemberian ekstrak daun kumis kucing 1jam
sebelum induksi karagenin 1%.
Tabel 4. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu Dan % Daya Antiinflamasi Orientasi Waktu Pemberian Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing Dengan Dosis 245mg/kgBB
Kelompok Perlakuan Harga AUC
(ml.jam) % Daya Antiinflamasi
Kontrol negatif akuades 1,58 ± 0,12 ─
( ± SEM)( ± SEM)
Ekstrak daun kumis kucing 1jam sebelum diinduksi karagenin 0,53 ± 0,02 66,40 ± 1,73
Ekstrak daun kumis kucing 0,5jam sebelum diinduksi
karagenin 0,77 ± 0,10 51,11 ± 10,61
Ekstrak daun kumis kucing Sesaat sebelum diinduksi
karagenin 0,96 ± 0,19 39,52 ± 11,80
10
Penelitian daya antiinflamasi dilakukan dengan perlakuan pada tikus putih
jantan galur Wistar yang diinjeksi secara per oral ekstrak etanol daun kumis
kucing 1jam sebelum injeksi karagenin 1%. Dosis ekstrak yang digunakan adalah
123mg/kgBB, 245mg/kgBB, dan 490mg/kgBB. Kontrol negatif digunakan
akuades dan kontrol positif Na diklofenak 2,25mg/kgBB.
Tabel 5. Rata-Rata Volume Udem Kontrol Negatif Akuades, Kontrol Positif Na Diklofenak 2,25mg/kgBB Serta Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing Dosis 123mg/kg BB, 245mg/kgBB, dan 490mg/kgBB
Volume udem rata-rata (ml) jam ke
Perlakuan 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5 5,5 6 6,5
( ± SEM)
Kontrol Negatif Akuades
0,08 ±
0,02
0,08 ±
0,01
0,12 ±
0,02
0,18 ±
0,02
0,21 ±
0,02
0,27 ±
0,03
0,34 ±
0,02
0,32 ±
0,03
0,32 ±
0,03
0,33 ±
0,04
0,25 ±
0,02
0,24 ±
0,03
0,24 ±
0,03
0,22 ±
0,03
Na diklofenak 2,25mg/kg BB tikus
0,08 ±
0,01
0,07 ±
0,01
0,06 ±
0,01
0,08 ±
0,01
0,06 ±
0,01
0,08 ±
0,00
0,07 ±
0,00
0,06 ±
0,00
0,04 ±
0,01
0,03 ±
0,01
0,02 ±
0,01
0,02 ±
0,01
0,01 ±
0,00
0,00 ±
0,00Ekstrak daun kumis
kucing dosis 490mg/kg BB tikus
0,08 ±
0,01
0,07 ±
0,00
0,09 ±
0,01
0,14 ±
0,01
0,17 ±
0,02
0,17 ±
0,02
0,15 ±
0,02
0,13 ±
0,02
0,11 ±
0,02
0,10 ±
0,01
0,10 ±
0,01
0,08 ±
0,01
0,06 ±
0,01
0,05 ±
0,01Ekstrak daun kumis
kucing dosis 245mg/kg BB tikus
0,07 ±
0,01
0,08 ±
0,01
0,11 ±
0,02
0,13 ±
0,02
0,12 ±
0,02
0,12 ±
0,01
0,11 ±
0,02
0,09 ±
0,01
0,08 ±
0,01
0,08 ±
0,01
0,08 ±
0,01
0,07 ±
0,01
0,05 ±
0,01
0,04 ±
0,01Ekstrak daun kumis
kucing dosis 123mg/kg BB tikus
0,08 ±
0,01
0,09 ±
0,01
0,12 ±
0,03
0,16 ±
0,03
0,21 ±
0,03
0,22 ±
0,02
0,21 ±
0,02
0,19 ±
0,02
0,20 ±
0,03
0,21 ±
0,02
0,19 ±
0,01
0,17 ±
0,03
0,14 ±
0,03
0,12 ±
0,03
Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing
0.00
0.05
0.10
0.15
0.20
0.25
0.30
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 6 6.5 7
Waktu (jam)
Vol
ume
udem
(ml)
Kontrol Negatif Akuades
Na Dklofenak Dosis2,25mg/kgBB tikus
Ekstrak Etanol Daun KumisKucing Dosis 490mg/kgBBtikusEkstrak Etanol Daun KumisKucing Dosis 245mg/kgBBtikusEkstrak Etanol Daun KumisKucing Dosis 123mg/kgBBtikus
Gambar 4. Grafik Rata-Rata Volume Udem Uji Daya Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing
11
Tabel 6. Data AUC Kurva Rata-Rata Volume Udem Terhadap Waktu Dan % Daya Antiinflamasi Uji Daya Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing
Kelompok Perlakuan
Harga AUC (ml.jam)
% Daya Antiinflamasi
( ± SEM)( ± SEM)
Kontrol negatif akuades 1,29 ± 0,18 ─
Na diklofenak 2,25mg/kgBB 0,31 ± 0,02 75,96 ± 1,50
Ekstrak kumis kucing 490mg/kgBB 0,46 ± 0,07 64,12 ± 5,80
Ekstrak kumis kucing 245mg/kgBB 0,61 ± 0,07 52,64 ± 5,60
Ekstrak kumis kucing 0,86 ± 0,15 33,11 ± 11,80 123mg/kgBB
Hasil Uji daya antiinflamasi dapat dilihat pada Tabel 6, dari hasil ini diketahui
bahwa ekstrak daun kumis kucing 490mg/kgBB memberikan efek antiinflamasi
lebih baik dibandingkan dosis 245mg/kgBB tikus dan 123mg/kgBB. Dilihat dari
data AUC kontrol negatif mempunyai AUC paling besar karena tidak ada
penghambat inflamasinya. Sedangkan Na diklofenak memberikan AUC paling
kecil, karena kemampuannya untuk menghambat inflamasi. Semakin kecil AUC
daya hambat terhadap inflamasi semakin besar. Hal ini dapat dilihat pada Tabel 6
dalam kolom % Daya Antiinflamasi.
Pada uji statistik dilakukan uji normalitas dengan Kolmogorov-Smirnov
diketahui data terdistribusi normal dengan p>0,05, sedangkan uji homogenitas
diketahui data tidak homogen karena p<0,05. Untuk menghomogenkan dilakukan
transformasi dengan menggunakan 1/akar kuadrat dan didapatkan data homogen
dengan p>0,05. Uji dilanjutkan Anova satu jalan. Hasil uji diperoleh p= 0,000
menunjukkan paling tidak terdapat perbedaan AUC secara bermakna pada 2
kelompok. Hasil uji LSD dapat dilihat pada Tabel 7. Dengan melihat Tabel 7,
diketahui bahwa kontrol negatif akuades berbeda secara signifikan dengan kontrol
positif, ekstrak etanol daun kumis kucing dengan dosis 245mg/kgBB, dan
490mg/kgBB dan berbeda tidak signifikan terhadap ekstrak etanol daun kumis
12
kucing dengan dosis 123mg/kgBB. Ekstrak etanol daun kumis kucing yang diuji
mempunyai daya antiinflamasi pada tikus putih jantan galur Wistar dengan dosis
123, 245, dan 490mg/kgBB berturut turut 33,11%; 52,64% dan 64,12%.
Tabel 7. Data Hasil Uji Statistik LSD AUC Kontrol Negatif Akuades, Kontrol Positif Na Diklofenak 2,25mg/kgBB, Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing Dengan Dosis 123mg/kgBB, 245mg/kgBB, Dan 490mg/kgBB 1jam Sebelum Diinduksi Karagenin 1%
Kelompok perlakuan Signifikansi
Kontrol negatif terhadap kontrol positif 0,000 Kontrol negatif terhadap ekstrak 123mg/kgBB 0,113 Kontrol negatif terhadap ekstrak 245mg/kgBB 0,007 Kontrol negatif terhadap ekstrak 490mg/kgBB 0,000 Kontrol positif terhadap ekstrak 123mg/kgBB 0,000 Kontrol positif terhadap ekstrak 245mg/kgBB 0,001 Kontrol positif terhadap ekstrak 490mg/kgBB 0,057 Ekstrak 123mg/kgBB terhadap ekstrak 245mg/kgBB 0,193 Ekstrak 123mg/kgBB terhadap ekstrak 490mg/kgBB 0,006 Ekstrak 245mg/kgBB terhadap ekstrak 490mg/kgBB 0,104 Keterangan : p< 0,05 = berbeda signifikan, p> 0,05 = berbeda tidak siknifikan
Daya antiinflamasi tanaman ini pada dosis 245mg/kgBB, dan 490mg/kgBB
cukup baik karena dapat menghambat inflamasi lebih dari 50%. Dengan hasil ini
dapat diketahui bahwa daun kumis kucing mempunyai potensi sebagai
antiinflamasi. Kemampuan antiinflamasi ekstrak daun kumis kucing ini
kemungkinan karena kemampuan penghambatan enzim siklooksigenase dan
lipooksigenase sehingga asam arakidonat tidak dirubah menjadi prostaglandin dan
leukotrin. Penghambatan ini kemungkinan disebabkan oleh flavonoid yang tersari
dalam ekstrak ini, karena flavonoid secara umum mempunyai kemampuan
penghambatan enzim siklooksigenase dan lipooksigenase. Pada penelitian
sebelumnya infusa daun kumis kucing pada konsentrasi 10% yang setara dengan
ekstrak etanol daun kumis kucing dosis123mg/kgBB mempunyai % daya
antiinflamasi 45,64%, dan infusa daun kumis kucing 20% yang setara dengan
ekstrak etanol daun kumis kucing dosis 245mg/kgBB mempunyai % daya
antiinflamasi 50,71%. Daya antiinflamasi pada ekstak etanol ini hampir sama
13
dibandingkan dengan pemberian infusa yang mungkin disebabkan karena zat yang
terlarut dalam etanol 70% ini hampir sama dengan yang tersari pada penyarian
dengan menggunakan air.
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
Ekstrak etanol daun kumis kucing yang diuji mempunyai daya antiinflamasi
pada tikus putih jantan galur Wistar lebih rendah dibandingkan kontrol positif,
yaitu pada dosis 123, 245, dan 490mg/kgBB berturut turut 33,11%; 52,64% dan
64,12%.
Saran
Perlu dilakukan penelitian mengenai efek antiinflamasi daun kumis kucing
dalam bentuk ekstrak dengan pelarut yang berbeda, untuk mengetahui zat aktif
pada tanaman kumis kucing ini yang berkhasiat antiinflamasi.
UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih ditujukan kepada Bapak Arief Rahman Hakim, M.Si.,
Apt., selaku dosen pembimbing utama dan Ibu Arifah Sri Wahyuni, S.Si,
Apt.,selaku dosen pembimbing pendamping atas segala bantuan bimbingan dan
arahan kepada penulis sejak persiapan sampai dengan selesainya penelitian skripsi
ini.
DAFTAR PUSTAKA
Anindhita, M. A., 2007, Efek Antiinflamasi Infusa Herba Kumis Kucing (Orthosiphon spicatus B.B.S) Pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta.
Barnes, J., Anderson L. A., and Philipson J. D., 1996, Herbal Medicine, 2nd
edition, 126, 313, Pharmacetical Press,London. Corsini, E., Paola R. D.,Viviani, B., Genovese, T., Mazzon, E., Lucchi, L., Galli,
C.L., and Cuzzorcrea S., 2005, Increased Carragenan-Induced Acute Lung Inflamation in Old Rats, Immunology, 115(2):253-261.
14
http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlender.fcw?artid=1782140 diakses tanggal 5 Januari 2008 ).
Harbone, J. B., 1987, Metode Fitokimia; Penuntun Cara Modern Menganalisis
Tumbuhan, diterjemahkan oleh Padmawinata, K., Penerbit ITB, Bandung. Narayana, K. R., Reddy, M. R, and Chaluvadi, M. R., 2001, Bioflavonoids
Classification, Pharmacological, Biochemical Effects and Therapeutic Potential, Indian Journal Pharmacology, (online), 2-16, (http://medind.nic.in/ibi/t01/i1/ibit01i1p2.pdf, diakses tanggal 15 April 2007).
Soemardi, E., 2004, Isolasi Identifikasi dan Standarisasi Sinensetin Sebagai
Parameter Pada Ekstrak Daun Kumis Kucing (Orthosiphon stamineus Benth.), Tesis, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Sudarsono, Pudjoarinto,A., Gunawan, D., Wahyuono, S., Donatus, A.L.,
Purnomo, Dradjad, M.,Wibowo, S., Ngatijan, 1996, Tumbuhan Obat, PPTO UGM, Yogyakarta.
Voigt, 1995, Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, diterjemahkan oleh Soendari, N.
S., Gadjah Mada University Press, Yogyakarta.