検出試薬 生細胞 固定細胞 タイムラプス 多重染色 S/N 比 LipiDye (本製品) ○ ○ ○ ○ 高 Nile Red ○ ○ ○ × 低 蛍光色素 B ○ ○ × ○ 中 脂肪染色試薬 T × ○ × ○ 高 Oil Red O × ○ × × 低 高感度な脂肪滴ライブセルイメージング色素 LipiDye 〈Lipid Droplet Green〉 65701 Web ページ番号 詳しくは Web で 脂肪滴を高い感度で染色する新規蛍光色素です。Nile Red に比べ高い S/N 比を示します。生細胞と固定細胞の両方 に使用可能です。 ※本製品は名古屋大学トランスフォーマティブ生命分子研究所(ITbM)の研究成果を元に製品化されました。 Yamaguchi E., et al., Angew. Chem. Int. Ed., 54: 4539~4543 (2015) . 特 長 使用例 ● LipiDye は溶媒の分子極性に依存して発光する蛍光色素で, 脂肪滴に選択的に取り込まれ,中性脂質中で緑色の蛍光を発 します。 ● 水溶液中では蛍光を発しないため,細胞質での非特異的な発光 が著しく抑えられ,従来の色素に比べ高い S/N 比を有します。 ● 高い光安定性を有し,ライブセルイメージングに最適です。 ● 低濃度の使用量(1 μM)で十分な感度が得られ,細胞毒性 をほとんど示しません。 ■Nile Red との比較 脂肪細胞の脂肪滴を LipiDye または Nile Red で染色し,矢印(左図)で示した範囲の 蛍光強度を測定した(右図)。 Nile Red よ り LipiDye の 方 が 感 度 も S/N 比 も 高 か っ た。 脂 肪 滴 で の 蛍 光 強 度 は LipiDye の方が強く(distance 0~10 μm),細胞質での非特異的な蛍光シグナルは Nile Red の方が強かった(distance 10~20 μm)。 LipiDye 60000 Intenisity LipiDye Nile Red distance(μm) 50000 40000 30000 20000 10000 0 0 10 20 30 λex=405 nm, λem=411-693 nm λex=561 nm, λem=561-693 nm Nile red ■脂肪前駆細胞 3T3-L1 細胞の分化 脂肪前駆細胞 3T3-L1 の分化の過程を LipiDye で観察した。 分化に伴って,脂肪滴が大きくなっていく様子が分かる。 LipiDye 0 day 3 days Differentiation 8 days Bright-field 品 名 メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥) LipiDye 〈Lipid Droplet Green〉 FNA FDV-0010 0.1 mg / 20,000 Memo 脂肪滴(Lipid droplet)とは 脂肪滴とは脂肪細胞で見られ る巨大な中性脂質の塊で,ト リグリセリドやステロールエ ステルを主成分とする一重膜 の構造体です。脂肪滴は細胞 内の中性脂質を貯蔵する器官 として働くと考えられてお り,肥満や疾患との関連が多く報告されています。 脂肪滴は,どの細胞にもある普遍的な細胞小器官として認知されつつあ ります。近年,脂肪細胞に関わらず,肝細胞や平滑筋細胞,グリア細胞 など様々な細胞で発見されており,従来考えられていた中性脂質の貯蔵 器官としての役割だけでなく,代謝制御や遺伝子発現調節など様々な機 能が明らかになってきました。非脂肪細胞の脂肪滴は 1 μm 以下で脂肪 細胞の 10~100 μm に比べて小さいことが知られています。 トリグリセリド ステロールエステル リン脂質膜 測定波長 励起 405 nm/蛍光 520~530 nm ※一般的な緑色蛍光色素用フィルター(FITC や GFP など)では観察で きません。別途,適切なフィルターをご用意下さい。詳細は当社テク ニカルサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。 フナコシニュース 2017 年 8 月 1 日号(No.639) funakoshi news ライブセルイメージング特集本誌に掲載されている製品はすべて研究用です3 お問い合わせ先: 〈試薬〉TEL:03-5684-1620 / FAX:03-5684-1775 / e-mail:[email protected]