EE – EP 2 079 472 B1

EE – EP 2 079 472 B1

KIRJELDUS

RISTVIIDE SEOTUD PATENDITAOTLUSTELE

Käesoleva taotlusega taotletakse prioriteetsust Ameerika Ühendriikide eeltaotluse nr

60/849,641, esitatud 4. oktoobril 2006, ja Ameerika Ühendriikide eeltaotluse nr

60/904,601, esitatud 28. veebruaril 2007, suhtes. 5

TEHNIKAVALDKOND

Käesolev leiutis on seotud ülipuhta stannsoporfiini (tina(IV) mesoporfüriin IX dikloriid)

suuremahulise sünteesi meetoditega.

TEHNIKA TASE

Stannsporfiin ehk tina (IV) mesoporfüriin IX dikloriid on ensüümi nimega heemi oksüge-10

naas inhibiitor. Stannsoporfiini on soovitatud kasutada mitmete haiguste nagu vastsündinu-

te hüperbilirubineemia (U.S. 4,657,902; U.S. 4,668,670; WO 94/28906) ja psoriaasi

(U.S. 4,782,049) ravis. Selle farmatseutilise kasutusala tõttu on stannsoporfiini valmistus-

meetodid väga huvipakkuvad.

Vastsündinute hüperbilirubineemia (ehk vastsündinute kollasus ehk neonataalne hüper-15

bilirubineemia) tekib siis, kui vastsündinu maks ei suuda konjugeerida bilirubiini, nii et

bilirubiin väljuks organismist bilirubiini moodustumisega samal kiirusel. Bilirubiin pärineb

heemist, mis vabaneb loote hemoglobiini füsioloogilisel muundumisel täiskasvanu hemo-

globiiniks, mis toimub lapse sünnihetkel. Ensüümi nimega heemi oksügenaas toimel ok-

südeerub heem biliverdiiniks, mille ensüüm nimega biliverdiini reduktaas redutseerib see-20

järel bilirubiiniks. Bilirubiin on kõrge seerumitaseme korral neurotoksilise toimega. Täis-

kasvanud inimese organismis muundab maks bilirubiini kiiresti konjugeeritud bilirubiiniks,

mis väljub organismist. Vastsündinu maks on aga veel arengujärgus ja ei suuda bilirubiini

sama efektiivselt siduda ja konjugeerida nagu täiskasvanu maks. Lisaks võib vastsündinu

maksas toimuda hemolüüs suurema suhtelise kiirusega kui täiskasvanu maksas. Kõigi 25

nende faktorite tõttu võib bilirubiini tase muutuda vastsündinu organismis liiga kõrgeks.

Mõne vastsündinu organismis võib bilirubiini kõrge tase tuua kaasa kahjulikud füsioloo-

gilised tagajärjed. Kuna bilirubiin on kollane, tekib lastel, kelle organismis on liigselt bili-

rubiini, kollasus ehk nende nahk ja silmavalged muutuvad kollakaks.

2 EE – EP 2 079 472 B1

Lastel, kelle organismis on bilirubiini seerumitase ülikõrge, võib tekkida kernikterus (ehk

tuumakollatõbi). Kernikterus on harvaesinev, kuid üldjuhul väga raske neuroloogiline

haigus, mille tagajärjel võivad inimesel tekkida jäävad puuded ja tüsistused nagu atetoos,

kuulmisvõime kadu, nägemishäired ja probleemid hammastega (vt Centers for Disease

Control and Prevention World-Wide-Web.cdc.gov/ncbddd/dd/kernicterus.htm.). Seega 5

tuleb lapsi pärast sündi hoolikalt jälgida ja kui bilirubiini tase tõuseb vastsündinu

organismis liiga kõrgele, tuleb kliiniliselt sekkuda. Ameerika Pediaatrite Akadeemia on

avaldanud kliinilise juhendi hüperbilirubineemia hindamiseks vastsündinutel ja riskirühma

kuuluvate vastsündinute ravimiseks, vt Pediatrics 114:297-316 (2004). Kuna arstiabi

hinnad on Ameerika Ühendriikides tõusnud, kirjutatakse pealtnäha terved vastsündinud 10

koos emaga kiiresti ehk vahel juba 24 kuni 48 tundi pärast lapse sündi haiglast välja.

Arvatakse, et just selle tõttu võib olla suurenenud kernikteruse ehk arenenud riikides juba

peaaegu likvideeritud haiguse juhtude arv, vt Hansen TWR, Acta Paediatr. 89:1155-1157

(2000)). Kuna varase haiglast väljakirjutamise tõttu võib lastel tekkinud kollasuse ja

hüperbilirubineemia tuvastamine viibida, on vaja leida efektiivne vahend hüperbilirubi-15

neemia kiireks ravimiseks. Kuna vastsündinu organism on meditsiinilises mõttes unikaal-

ses seisundis, peavad kõik ravivahendid olema võimalikult ohutud, sest täiskasvanu orga-

nismile talutavad kõrvalnähud võivad olla vastsündinu organismile täiesti vastuvõetama-

tud.

Hüperbilirubineemia praeguse seisuga heakskiidetud ja levinud ravimeetodite seas on 20

fototeraapia ja verevahetus. Fototeraapia korral kiiritatakse vastsündinut valgusega, mille

lainepikkus on 430 kuni 490 (sinine valgus). Valguse toimel muundub bilirubiin lumirubii-

niks ja fotobilirubiiniks, mis väljuvad vastsündinu organismist kergemini ja mille väljumi-

se tulemusena võib bilirubiini tase organismis langeda.

On näidatud, et stannsoporfiin (tina(IV) mesoporfüriin IX dikloriid) aitab ravida hüperbili-25

rubineemiat, vt Valaes et al., Pediatrics 93:1-11 (1994) and Kappas et al., Pediatrics,

95:468-474 (1995). Teised näidustused, mille korral saab stannsiporfiini kasutada, on aval-

datud dokumendis U.S. 4,692,440 (heemi väljutuskiiruse tõstmine), WO 89/02269 (vähi-

ravi toksilisuse neutraliseerimine), U.S. 4,782, 049 (psoriaasi ravi) ja teistes publikatsioo-

nides. 30

USA patendis nr 6,818,763, USA patenditaotluse publikatsioonis 2004/0210048 ja USA

patenditaotluses nr 11/096,359 avaldatakse stannsoporfiini sünteesimeetodid. Dokumendis

3 EE – EP 2 079 472 B1

WO 03/101999A2 avaldatakse mesoporfüriini metallhalogeniidühendid ja nende valmis-

tusmeetodid. Kuna ravi tõhustamiseks ja reguleerivate asutuste kehtestatud rangete nõuete

järgimiseks tuleb kasutada võimalikult puhast stannsoporfiini, on siiski soovitav töötada

välja puhtama stannsoporfiini valmistusmeetodid.

Käesolevas patenditaotluses avaldatakse senisest suurema puhtusastmega stannsoporfiini 5

valmistus- ja puhta stannsoporfiini suuremahulise valmistamise meetod. Käesolevas

patenditaotluses avaldatakse ka uus meetod tina ja teiste metallide sisestamiseks porfüriini

tsüklitesse. See uus meetod võimaldab oluliselt vähendada stannsoporfiini sünteesimiseks

kuluvat aega.

LEIUTISE OLEMUS 10

Käesoleva leiutisega pakutakse nõudluspunktile 1 vastav stannsoporfiini valmistusmeetod.

Leiutisekohasel meetodil saab valmistada suurtes kogustes (ehk suures mahus) komposit-

siooni, mis sisaldab ülipuhast stannsoporfiini. Leiutisekohasel meetodil saab valmistada

suurtes kogustes (ehk suures mahus) kompositsiooni, mis sisaldab ülipuhast stannsopor-

fiini, ühe partiina ehk ühe partiina suure koguse (ehk suures mahus) ülipuhast stannsopor-15

fiini. Ülipuhta stannsoporfiini puhtusaste on vähemalt umbes 97%, vähemalt umbes 98%,

vähemalt umbes 98,5%, vähemalt umbes 99%, vähemalt umbes 99,5% või vähemalt um-

bes 99,8%. Ülipuhtas stannsoporfiinis võib mis tahes lisandi sisaldus olla väiksem kui um-

bes 0,1%, väiksem kui umbes 0,09%, väiksem kui umbes 0,08% või väiksem kui umbes

0,07% või veel väiksem. Ühes teises teostuses on mis tahes lisand tootega seotud mis tahes 20

lisand. Stannsoporfiini suur kogus (ehk suures mahus) võib olla vähemalt umbes 10 g, vä-

hemalt umbes 25 g, vähemalt umbes 50 g, vähemalt umbes 100 g, vähemalt umbes 200 g,

vähemalt umbes 500 g, vähemalt umbes 1,0 kg, vähemalt umbes 2,0 kg või vähemalt um-

bes 5,0 kg. Ühes teostuses valmistatakse eespool eri aspektidest kirjeldatav stannsoporfiin

ühe partiina. 25

Leiutisekohasel meetodil saab valmistada suure koguse stannsoporfiini, mille puhtusaste

on vähemalt umbes 97%, vähemalt umbes 98%, vähemalt umbes 98,5%, vähemalt umbes

99%, vähemalt umbes 99,5% või vähemalt umbes 99,8% ja mille mis tahes lisandi sisaldus

on maksimaalselt umbes 0,2%, eelistatavamalt maksimaalselt 0,15% ja veelgi eelistatava-

malt maksimaalselt 0,12%. Ühes teostuses valmistatakse ülipuhas stannsoporfiin ühe par-30

tiina.

4 EE – EP 2 079 472 B1

Teistes teostustes sisaldab suur kogus ülipuhast stannsoporfiini vähem kui umbes 20 ppm,

vähem kui umbes 15 ppm, vähem kui umbes 10 ppm või vähem kui umbes 5 ppm pallaa-

diumlisandit. Ühes teostuses valmistatakse ülipuhas stannsoporfiin ühe partiina.

Käesoleva leiutisega pakutakse nõudluspunktile 1 vastav suurtes kogustes ülipuhta stann-

soporfiini valmistusmeetod, mis koosneb järgmistest etappidest: a) valmistatakse metalse 5

hüdrogeenimise katalüsaatori vesiniku atmosfääri viimise teel eelhüdrogeenitud katalüsaa-

tor ja b) viiakse hemiin kokkupuutesse eelhüdrogeenitud katalüsaatoriga ja hoitakse hemii-

ni ja katalüsaatorit ühe või mitme võimaliku ajavahemiku jooksul ühel või mitmel võimali-

kul temperatuuril ja vesiniku rõhul, millest piisab hemiinist raua eemaldamiseks ja hemiini

vinüülrühmade redutseerimiseks etüülrühmadeks, mille tulemusena moodustub mesoporfü-10

riin IX.Käesoleva leiutisega pakutakse nõudluspunktile 1 vastav suurtes kogustes ülipuhta

stannsoporfiini valmistusmeetod, mis koosneb järgmistest etappidest: a) valmistatakse

metalse hüdrogeenimise katalüsaatori vesiniku atmosfääri viimise teel eelhüdrogeenitud

katalüsaator ja b) viiakse hemiin kokkupuutesse eelhüdrogeenitud katalüsaatoriga ja hoi-

takse hemiini ja katalüsaatorit ühe või mitme võimaliku ajavahemiku jooksul ühel või 15

mitmel võimalikul temperatuuril ja vesiniku rõhul, millest piisab hemiinist raua eemal-

damiseks ja hemiini vinüülrühmade redutseerimiseks etüülrühmadeks, mille tulemusena

moodustub mesoporfüriin IX ja c) pannakse mesoporfüriin IX oksüdatsioonikiirust kont-

rollides reageerima tina (II) oksiidiga, saades tulemusena stannsoporfiini.Ühes teostuses on

metalne hüdrogeenimise katalüsaator pallaadium-, pallaadium-süsinikul, plaatina-, plaatina 20

süsinikul, nikkel- või nikkel-alumiinium katalüsaator. Ühes teises teostuses on metalne

hüdrogeenimise katalüsaator pallaadium. Ühes teises teostuses on metalne hüdrogeenimise

katalüsaator pallaadium süsinikul. Sellel meetodil saab valmistada ühe partiina suure

koguse ülipuhast stannsoporfiini.

Käesoleva leiutise teise teostusena pakutakse ülipuhta stannsoporfiini suurtes kogustes 25

valmistamise meetod, mis koosneb järgmistest etappidest: a) valmistatakse metalse hüdro-

geenimise katalüsaatori vesiniku atmosfääri viimise teel eelhüdrogeenitud katalüsaator ja

b) viiakse hemiin kokkupuutesse eelhüdrogeenitud katalüsaatoriga ja hoitakse hemiini ja

katalüsaatorit ühe või mitme võimaliku ajavahemiku jooksul ühel või mitmel võimalikul

temperatuuril ja vesinikurõhul, millest piisab hemiinist raua eemaldamiseks ja hemiini vi-30

nüülrühmade redutseerimiseks etüülrühmadeks, mille tulemusena moodustub mesopor-

füriin IX ja c) pannakse mesoporfüriin IX oksüdatsiooni kiirust kontrollides reageerima

5 EE – EP 2 079 472 B1

tina (II) oksiidiga, saades tulemusena stannsoporfiini. Ühes teostuses on metalne hüdrogee-

nimise katalüsaator pallaadium-, pallaadium-süsinikul, plaatina-, plaatina süsinikul, nikkel-

või nikkel-alumiinium katalüsaator. Ühes teises teostuses on metalne hüdrogeenimise kata-

lüsaator pallaadium. Ühes teises teostuses on metalne hüdrogeenimise katalüsaator pallaa-

dium süsinikul. Sellel meetodil saab valmistada ühe partiina suure koguse ülipuhast stann-5

soporfiini.

Käesoleva leiutise ühe teise teostusega pakutakse mesoporfüriin IX valmistusmeetod, mis

koosneb järgmistest etappidest: a) valmistatakse metalse hüdrogeenimise katalüsaatori

vesiniku atmosfääri viimise teel eelhüdrogeenitud katalüsaator ja b) viiakse hemiin kokku-

puutesse eelhüdrogeenitud katalüsaatoriga ja hoitakse hemiini ja katalüsaatorit ühe või 10

mitme võimaliku ajavahemiku jooksul ühel või mitmel võimalikul temperatuuril ja vesi-

nikurõhul, millest piisab hemiinist raua eemaldamiseks ja hemiini vinüülrühmade redut-

seerimiseks etüülrühmadeks, mille tulemusena moodustub mesoporfüriin IX. Lisateostuste

korral viiakse etapp b) läbi temperatuuril ligikaudu 80 kuni 100 ºC, eelistatavalt tempera-

tuuril ligikaudu 85 kuni 90 ºC ja vesinikurõhul ligikaudu 50 kuni 70 psi, eelistatavalt 15

ligikaudu 55 kuni 60 psi ja ajavahemikus umbes 1 kuni 3 tundi, eelistatavalt 1 kuni 1,5

tundi; seejärel temperatuuril ligikaudu 40 kuni 60 ºC, eelistatavalt ligikaudu 45 kuni 50 ºC

ja vesiniku rõhul ligikaudu 50 kuni 70 psi, eelistatavalt ligikaudu 55 kuni 60 psi ja aja-

vahemikus umbes 18 kuni 48 tundi, eelistatavalt umbes 24 tundi.

Käesoleva leiutise teise teostusega pakutakse kergesti filtreeritava mesoporfüriini IX di-20

hüdrokloriidi preparaat, mille korral saab lahusest, milles sisalduva lahusti ja mesoporfü-

riini IX dihüdrokloriidi massisuhe on vähemalt 50:1, filtreerida vähemalt umbes 10 g ni-

metatud ühendit vähem kui umbes 90 minuti, vähem kui umbes 60 minuti, vähem kui um-

bes 45 minuti, vähem kui umbes 35 minuti, vähem kui umbes 25 minuti või vähem kui um-

bes 10 minuti jooksul. Käesoleva leiutise ühe teise teostusena pakutakse kergesti filtreerita-25

va mesoporfüriini IX dihüdrokloriidi preparaat, mille korral saab lahusest, milles sisalduva

lahusti ja mesoporfüriini IX dihüdrokloriidi massisuhe on vähemalt 50:1, filtreerida vähe-

malt umbes 1000 g nimetatud ühendit vähem kui umbes 1 päeva, vähem kui umbes 12 tun-

ni, vähem kui umbes 6 tunni, vähem kui umbes 4 tunni, vähem kui umbes 3 tunni või vä-

hem kui umbes 2 tunni jooksul. Ühes teostuses on lahustiks vee, vesinikkloriidhappe ja si-30

pelghappe segu, kusjuures vesinikkloriidhape võib olla enne segamist umbes 31%iline ve-

sinikkloriidhape.

6 EE – EP 2 079 472 B1

Käesoleva leiutise ühe teostusega pakutakse kergesti filtreeritava mesoporfüriini IX dihüd-

rokloriidi preparaadi valmistusmeetod, mis sisaldab etappi, milles lisatakse vesinikkloriid-

happe vesilahus mesoporfüriini IX formaadi lahusele sipelghappes. Ühes teostuses on vesi-

nikkloriidhappe kontsentratsioon vesilahuses umbes 0,5 kuni 2,0 N. Järgmises teostuses on

vesinikkloriidhappe kontsentratsioon vesilahuses umbes 0,75 kuni 1,25 N. Teises teostuses 5

on vesinikkloriidhappe kontsentratsioon vesilahuses umbes 1,0 N.

Käesoleva leiutise ühe teostusega pakutakse tina mesoporfüriini sisestamise meetod, mille

korral pannakse mesoporfüriin IX ilma prootonite püüdurita reageerima tinasoolaga.

Käesoleva leiutise ühe teostusega pakutakse tina mesoporfüriini sisestamise meetod, mille

korral pannakse mesoporfüriin IX kontrollitud oksüdatsioonikiirusel reageerima tina soo-10

laga. Ühes teostuses viiakse mesoporfüriini IX ja tina soola vaheline reaktsioon läbi reakt-

siooninõus, millel on headspace, ja oksüdatsioonikiirust kontrollitakse reaktsiooninõu

headspace’i sisestatava hapnikku sisaldava gaasiga. Teises teostuses koosneb reaktsiooni-

nõu headspace'i sisestatav gaas umbes 3 kuni 22% hapnikust inertses gaasis nagu lämmas-

tik. Ühes teostuses on reaktsiooninõu headspace’i sisestatav hapnikku sisaldav gaas õhk. 15

Ühes teostuses koosneb reaktsiooninõu headspace’i sisestatav hapnikku sisaldav gaas um-

bes 4 kuni 15% hapnikust inertses gaasis nagu lämmastik. Ühes teostuses koosneb reakt-

siooninõu headspace’i sisestatav hapnikku sisaldav gaas umbes 5 kuni 10% hapnikust

inertses gaasis nagu lämmastik. Ühes teostuses koosneb reaktsiooninõu headspace’i sises-

tatav hapnikku sisaldav gaas umbes 6% hapnikust inertses gaasis nagu lämmastik. Ühes 20

teostuses koosneb reaktsiooninõu headspace’i sisestatav hapnikku sisaldav gaas umbes 6%

hapnikust lämmastikus.

Kõigi eespool toodud teostuste korral saab valmistada ühe partiina suure koguse ülipuhast

stannsoporfiini.

Kõigi eespool toodud teostuste korral võib reaktiive, vahesaadusi ja/või reaktsioonisaadusi 25

veel lisaetappide abil puhastada. Mõnes teostuses seisneb täiendav puhastamine reaktiivi,

vahesaaduse või reaktsioonisaaduse töötlemises kobediatomiidi ja/või aktiivsöega. Ühes

teostuses kasutataval reaktiivi, vahesaaduse või reaktsioonisaaduse töötlemisel kobediato-

miidi ja/või aktiivsöega lahustatakse või suspendeeritakse reaktiiv, vahesaadus või reakt-

sioonisaadus lahustis, lisatakse kobediatomiit ja/või aktiivsüsi, eemaldatakse kobediatomiit 30

ja/või aktiivsüsi filtreerimise teel ja kogutakse reaktiiv, vahesaadus või reaktsioonisaadus

7 EE – EP 2 079 472 B1

filtraadist kokku. Mõnes teostuses läbiviidava täiendava puhastamise korral tritureeritakse

reaktiiv, vahesaadus või reaktsioonisaadus kuuma happega nagu umbes 0,1 kuni 6N HCl-

ga vees, eelistatavalt umbes 3N HCl-ga vees. Mõnes teostuses viiakse nimetatud üks, kaks

või kolm etappi ehk kobediatomiidiga töötlemise etapp, aktiivsöega töölemise etapp ja

kuuma happega tritureerimise etapp läbi järjest, mis tahes järjekorras või vajadusel mitu 5

korda.

Käesoleva leiutisega pakutakse meetod tina sisestamiseks porfüriiniühendisse või selle

soola tina(II) oksiidi abil. Ühes teostuses on porfüriiniühend mesoporfüriin või selle sool

või protoporfüriin või selle sool või hematoporfüriin või selle sool. Ühes teostuses on

porfüriiniühend mesoporfüriin IX või selle sool. Ühes teostuses on porfüriiniühend meso-10

porfüriini IX divesinikkloriid. Ühes teostuses on lõppsaaduseks tina (IV) porfüriin või selle

sool. Ühes teostuses on lõppsaaduseks tina (IV) mesoporfüriin või selle sool või tina (IV)

protoporfüriin või selle sool või tina (IV) hematoporfüriin või selle sool. Ühes teostuses on

lõppsaaduseks tina (IV) mesoporfüriin IX või selle sool.

Käesoleva leiutise ühe teostusega pakutakse meetod tina sisestamiseks porfüriiniühendisse 15

või selle soola, mille korral võetakse porfüriiniühend või selle sool ning tina (II) oksiid ja

viiakse tina (II) oksiid happelistes tingimustes kokkupuutesse porfüriiniühendi või selle

soolaga, mille tulemusena sisestatakse tina (II) oksiid porfüriiniringi (ring) ja saadakse tina

(IV) porfüriini ühend. Ühes teostuses lahustatakse või suspendeeritakse tina (II) oksiid

äädik- või sipelghappes, eelistatavalt sipelghappes. Ühes teostuses on kasutatava tina (II) 20

oksiidi üldkoguse ja kasutatava porfüriiniühendi või selle soola üldkoguse ekvivalentide

(equivalent) suhe umbes 2 kuni 6, eelistatavalt umbes 4. Ühes teostuses lisatakse porfürii-

niühendi või selle soola lahus või suspensioon tilkhaaval tina(II) oksiidi lahusele. Tilkhaa-

val lisamine võib kesta umbes 3 kuni 9 tundi, eelistatavalt umbes 6 tundi. Tina (II) oksiidi

lahust või suspensiooni hoitakse temperatuuril umbes 25 kuni 115 ºC, eelistatavalt umbes 25

50 kuni 75 ºC, veelgi eelistavamalt umbes 60 kuni 65 ºC.

Käesoleva leiutise ühe teostusega pakutakse meetod tina sisestamiseks porfüriiniühendisse

või selle soola (nagu mesoporfüriini IX või selle soola nagu mesoporfüriin IX divesinik-

kloriidi), mille korral võetakse mesoporfüriiniühend või selle selle sool (nagu mesopor-

füriin IX või selle sool nagu mesoporfüriin IX divesinikkloriid) ja tina (II) oksiid ja viiakse 30

tina (II) oksiid happelistes tingimustes kokkupuutesse mesoporfüriiniühendiga või selle

soolaga (nagu mesoporfüriiniga IX või selle soolaga nagu mesoporfüriin IX divesinik-

8 EE – EP 2 079 472 B1

kloriidiga, mille tulemusena sisestatakse tina (II) oksiid porfüriini tsüklisse ja saadakse tina

(IV) porfüriini ühend. Ühes teostuses lahustatakse või supendeeritakse tina (II) oksiid

äädik- või sipelghappes, eelistatavalt äädikhappes. Ühes teostuses lahustatakse või suspen-

deeritakse mesoporfüriiniühend või selle sool (nagu mesoporfüriin IX või selle sool nagu

mesoporfüriin IX divesinikkloriid) sipelg- või äädikhappes, eelistatavalt äädikhappes. Ühes 5

teostuses on kasutatava tina (II) üldkoguse ja kasutatava mesoporfüriiniühendi või selle

olla (nagu mesoporfüriin IX või selle soola nagu mesoporfüriin IX divesinikkloriidi)

ekvivalentide suhe umbes 2 kuni 6, eelistatavalt umbes 4. Ühes teostuses lisatakse porfürii-

niühendi või selle soola (nagu mesoporfüriini IX või selle soola nagu mesoporfüriin IX

divesinikkloriidi) lahus või suspensioon tilkhaaval tina(II) oksiidi lahusele. Tilkhaaval 10

lisamine võib kesta umbes 3 kuni 9 tundi, eelistatavalt umbes 6 tundi. Tina (II) oksiidi

lahust või suspensiooni hoitakse temperatuuril umbes 25 kuni 115 ºC, eelistatavalt umbes

50 kuni 75 ºC, veelgi eelistavamalt umbes 60 kuni 65 ºC. Pärast tilkhaaval lisamist võib

reaktsioonisegu hoida veel umbes 18 kuni 24 tundi temperatuuril umbes 60 kuni 65 ºC.

Reaktsioonisegu saab pärast täiendavat reaktsiooniaega jahutada ja filtreerida. 15

Käesoleva leiutise teise leiutisega pakutakse tina (IV) porfüriiniühendi või selle soola

valmistusmeetod, mille korral a) valmistatakse metalliseerimata porfüriiniühendi või selle

soola lahus või suspensioon, b) valmistatakse tina (II) oksiidi lahus või suspensioon, kus-

juures etapid (a) ja (b) võib läbi viia mis tahes järjekorras või üheaegselt, ja c) viiakse tina

(II) oksiidi lahus või suspensioon sobivates tingimustes kokkupuutesse metalliseerimata 20

porfüriiniühendi või selle soolaga, saades tulemusena tina (IV) porfüriiniühendi või selle

soola. Tina (II) oksiidi lahuse või suspensiooni ja metalliseerimata porfüriiniühendi või

selle soola lahuse või suspensiooni võib valmistada eraldi sipelg- või äädikhappega,

näiteks tina (II) oksiidi lahuse või suspensiooni võib valmistada äädikhappega ja metalli-

seerimata porfüriiniühendi või selle soola lahuse või suspensiooni võib valmistada sipelg-25

happega. Metalliseerimata porfüriiniühend valitakse rühmast, kuhu kuuluvad mesoporfü-

riinid, protoporfüriinid, hematoporfüriinid ja nende soolad nagu mesoporfüriin IX ja selle

sool nagu mesoporfüriin IX divesinikkloriid. Kokkupuutesse viimise etapis võib c) lisada

metalliseerimata porfüriiniühendi või selle soola lahuse või suspensiooni sobivates

tingimustes tilkhaaval tina (II) oksiidi lahusesse või suspensiooni, saades tulemusena tina 30

(IV) porfüriinühendi või selle soola. Tilkhaaval lisamine võib kesta umbes 3 kuni 9 tundi

nagu umbes 6 tundi. Tina (II) oksiidi lahust või suspensiooni võib hoida tilkhaaval lisamise

ajal temperatuuril umbes 60 kuni 65 ºC. Pärast metalliseerimata porfüriiniühendi või selle

9 EE – EP 2 079 472 B1

soola tilkhaaval lisamist tina (II) oksiidi lahusele või suspensioonile võib reaktsioonisegu

hoida veel umbes 18 kuni 24 tundi temperatuuril ligikaudu 60 kuni 65 ºC. Pärast täiendavat

reaktsiooniaega saab/võib reaktsioonisegu jahutada ja filtreerida. Teises teostuses

kasutatakse tina (IV) porfüriiniühendi või selle soola meetodit ilma prootonite püüduri või

prootonite käsnata (proton sponge). 5

Mis tahes eespool kirjeldatud meetodil valmistatud tina (IV) mesoporfüriini saab lisaetap-

pide abil veelgi puhtamaks muuta. Mõnes teostuses võib täiendav puhastamine seisneda

tina (IV) mesoporfüriini töötlemises kobediatomiidi ja/või aktiivsöega. Ühes teostuses ka-

sutataval tina (IV) mesoporfüriini täiendaval puhastamisel kobediatomiidi ja/või aktiiv-

söega lahustatakse või suspendeeritakse tina (IV) mesoporfüriin lahustis, lisatakse kobe-10

diatomiit ja/või aktiivsüsi, eemaldatakse filtreerimise teel kobediatomiit ja/või aktiivsüsi ja

kogutakse tina (IV) mesoporfüriin filtraadist kokku. Mõnes teostuses hõlmab täiendav

puhastamine tina (IV) mesoporfüriini tritureerimist kuuma happe nagu umbes 0,1 kuni 6N

HCl-ga vees, eelistatavalt umbes 3N HCl-ga vees temperatuuril umbes 60 kuni 95 ºC,

eelistatavalt temperatuuril umbes 80 kuni 95 ºC, veelgi eelistatavamalt temperatuuril 85 15

kuni 90 ºC. Mõnes teostuses viiakse nimetatud üks, kaks või kolm etappi ehk kobediato-

miidiga töötlemise etapp, aktiivsöega töölemise etapp ja kuuma happega tritureerimise

etapp läbi järjest, mis tahes järjekorras või vajadusel mitu korda.

Leiutisekohasel meetodil on võimalik valmistada suures koguses (ehk suures mahus)

ülipuhast stannsoporfiini, kusjuures nimetatud ülipuhas stannsoporfiin püsib hoidmisel 20

stabiilsena vähemalt umbes kolm kuud või vähemalt umbes kuus kuud. Ühes teostuses

valmistatakse suur kogus stannsoporfiini ühe partiina. Käesoleva leiutise meetodi ühe

teostuse kohaselt saab valmistada suure koguse ülipuhast stannsoporfiini, kusjuures nime-

tatud ülipuhas stannsoporfiin püsib hoidmisel ülipuhtana vähemalt umbes kolm kuud kuni

vähemalt umbes kuus kuud. Ühes teostuses on hoiutingimused umbes 25 ºC ja suhteline 25

niiskus umbes 60%. Ühes teostuses on hoiutingimused umbes 40 ºC ja suhteline niiskus

umbes 75%. Ühes teostuses hoitakse stannsoporfiini polüetüleenkotis. Ühes teostuses hoi-

takse stannsoporfiini polüetüleenkotis, mis on omakorda polüetüleenkotis. Ühes teostuses

hoitakse kahes polüetüleenkotis olevat stannsoporfiini kõrgtihedas polüetüleensilindris.

Ühes teostuses on iga polüetüleenkott umbes 4 milli paksune (umbes 4/1000 tolli ehk 30

umbes 0,1 mm).

Leiutisekohasel meetodil saab valmistada suurtes kogustes ülipuhast stannsoporfiini, mida

10 EE – EP 2 079 472 B1

kasutatakse vastsündinutel hüperbilirubineemia ravis, mille korral manustatakse sellist ravi

vajavale patsiendile stannsoporfiini, kusjuures stannsoporfiini on ülipuhas ja valmistatud

suures koguses. Ühes teises teostuses valmistatakse stannsoporfiin ühe partiina..

Vastsündinutel kasutatava hüperbilirubineemia ennetamise meetodil manustatakse selle

haiguse ennetamist vajavale patsiendile stannsoporfiini, mis on ülipuhas ja valmistatud 5

suures koguses. Ühes teises teostuses valmistatakse stannsoporfiin ühe partiina.

LEIUTISE ÜKSIKASJALIK KIRJELDUS

Käesoleva leiutise ühe teostuse korral valmistatakse suur kogus ülipuhast stannsoporfiini.

Käesoleva leiutise ühe teise teostuse korral valmistatakse suur kogus ülipuhast stannsopor-

fiini, kusjuures nimetatud suur kogus valmistatakse ühe partiina. Stannsoporfiin (tina (IV) 10

mesoporfüriin IX dikloriid; Chemical Abstracts Registry Number 106344-20-1) ehk

kaubanimega Stanate ®, mis on ettevõtte InfaCare Pharmaceutical Corp., Plymouth

Meeting, Pennsylvania, registreeritud kaubamärk. Stannsoporfiini struktuurivalem on järg-

mine:

15

molekulaarvalem C34H36Cl2N4O4Sn ja molekulmass 754,29.

„Suur kogus ehk suur maht“ on vähemalt umbes 10 g. Suures koguses stannsoporfiini valmis-

tamisel on teised võimalikud kogused vähemalt umbes 25 g, vähemalt umbes 50 g, vähemalt

umbes 100 g, vähemalt umbes 200 g, vähemalt umbes 500 g, vähemalt umbes 1,0 g, vähemalt

umbes 2,0 g või vähemalt umbes 5,0. 20

11 EE – EP 2 079 472 B1

„Ühe partii“ all peetakse silmas konkreetse toote korraga valmistatavat kogust. Üks partii

valmistatakse tavaliselt pärast reaktsiooni (või reaktsioonide jada) ühekordset läbiviimist (siin

tuleb tähele panna, et üheks partiiks peetakse üht ühendikogust, millega viiakse korduvalt läbi

üks või mitu reaktsiooni, näiteks korduvat puhastamisetappi). Üheks partiiks ei peeta seega eri

aegadel või eraldi kogustena valmistatud ühendikoguseid, mis hiljem omavahel liidetakse. 5

Ülipuhtaks peetakse preparaati, mis vastab mõlemale järgmisele kriteeriumile: 1) üldine

puhtusaste on vähemalt umbes 97%, st soovitud toode (stannsoporfiin) moodustab vähemalt

umbes 97% preparaadist, ja 2) tootega seotud mis tahes lisandi kogus moodustab preparaadi

üldkogusest vähem kui umbes 0,1%. Puhtust mõõdetakse eelistatavalt HPLC analüüsiga.

„Tootega seotud lisand“ on lisand, mida tuleb iseloomustada vastavalt USA Toidu- ja 10

Ravimiameti juhistele. Ravimi komponente nagu vesi ei peeta seega lisandiks.

Metalliseerimata porfüfiin on porfüriin, milles puudub ühe või mitme pürroollämmastiku

poolt koordineeritav metalliioon. Metalliseeritud porfüriin on porfüriin, milles on vähemalt

ühe pürroollämmastiku poolt koordineeritav metalliioon.

„Keskmise oksüdatsiooniastmega element“ on element nagu metall, mille oksüdatsiooniaste 15

on keskmine/vahepealne ehk neutraalse (laenguta või puuduv oksüdatsioon) ja kõrgeima

oksüdatsiooniastme vahel. Mittepiirava näitena märgime, et raua oksüdatsiooniaste on

üldjuhul (0), (II) või (III); keskmiseks/vahepealseks oksüdatsiooniastmeks peetakse

oksüdatsiooniastet (II) (raud II olek).

Ühendi raviotstarbelisel kasutamisel on puhtus väga oluline. Ühendi üldine puhtusaste võib 20

olla vähemalt umbes 97%, vähemalt umbes 98%, vähemalt umbes 98,5%, vähemalt umbes

99% või vähemalt umbes 99,5%. Ülipuhta preparaadi puhul kehtib lisaks eespool määratletule

ka nõue, et iga selles sisalduva lisandi kogus peab moodustama vähem kui umbes 0,1%

preparaadi üldkogusest (samas tuleb silmas pidada, et lisandite üldkogus võib olla suurem kui

0,1% - näiteks ühe lisandi sisaldus võib olla 0,08% ja teise lisandi sisaldus 0,07% ehk kokku 25

0,15%, kuid eraldi mõõdetuna on iga preparaadis sisalduva lisandi kogus väiksem kui umbes

0,1%). Ühes teostuses on iga lisandi sisaldus väiksem kui umbes 0,09%. Ühes teostuses on

iga lisandi sisaldus umbes 0,08% või väiksem. Ühes teostuses on iga lisandi sisaldus umbes

0,07% või väiksem. Preparaat võib sisaldada, sealjuures isegi olulises koguses (vähemalt

umbes 1% kuni 5%) vett, kuid seda ei peeta lisandiks. Teisi tootesse jäänud lahusteid nagu 30

atsetooni, sipelghapet ja äädikhapet ei peeta samuti lisanditeks, eriti kui nende sisaldus on

12 EE – EP 2 079 472 B1

International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of

Pharmaceuticals for Human Use, ICH Harmonised Tripartite Guideline—Impurities:

Guideline for Residual Solvents, Q3C(R3), Step 4 version, November 2005 (Worlds-Wide

Web.ich.org/LOB/media/MEDIA423.pdf) juhistes toodud tasemel või on sellest madalam.

Teises teostuses ei ole stannsoporfiinis sisalduva ühegi lisandi kogus suurem kui umbes 0,2% 5

ja veelgi eelistatavamalt ei ole selles sisalduva ühegi lisandi kogus suurem kui 0,15% ja kõige

eelistatavamalt ei ole selles sisalduva ühegi lisandi kogus suurem kui 0,12%.

Käesoleva sünteesi teel valmistatakse stannsoporfiin, mis vastab kahele eespool määratletud

puhtusega seotud kriteeriumile (üldine puhtusaste vähemalt umbes 97%, kusjuures lisandite

hulka ei loeta vett ja lahustijääke, ja iga tootes sisalduva lisandi kogus võib olla umbes 0,1% 10

või väiksem. Teine ehk eri lisandite sisaldusega seotud kriteerium on oluline õigusnõuete

tõttu. USA Toidu- ja Ravimiamet nõuab üldjuhul lisandite, mille sisaldus on 0,1%,

üksikasjalikku iseloomustust, lisandeid, mille sisaldus on väiksem kui 0,1%, peab

üksikasjalikult iseloomustama aga ainult siis, kui neil on väiksema kui 0,1%ilise sisalduse

korral ebatavaliselt tugev farmakoloogiline või toksiline toime (vt publikatsioone Guidance 15

for Industry: ANDAs:Impurities in Drug Substances, U.S. Depaermtent of health and Human

Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER),

November 1999; Word-Wide-Web-site-.fda.gov/cder/guidance/2452fnl.htm ja Guidance for

Inductry, Q2# Impurities in New Drug Substances, United States Department of Health and

Human Services, Food Administration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER) 20

and Center for Biologics Evaluation and Reasearch (CBER), February 2003 ICH, Revision 1,

World-Wide-Web-site-.fda.gov/cder/guidance/4164fnl.pdf). Nendele USA Toidu- ja

Ravimiameti nõuetele vastamise varal on ülipuhtal materjalil õigusnõuete seisukohalt

võrreldes väiksema puhtusega materjaliga olulised eelised.

Käesoleva leiutise teiseks eeliseks on sünteesi ootuspärane korratavus, mis võimaldab 25

valmistada mitu suurt partiid ülipuhast stannsoporfiini. Käesoleva leiutise veel üheks eeliseks

on leiutisekohase protsessi ja toote vastavus eri riikides seaduse, määruste või regulatiivsete

asutuste poolt kehtestatud nõuete kohastele headele tootmistavadele (nt United States Code of

Federal Regulations, Title 21, Sections 210 and 211 sätestatud Good Manufacturing Practice

ehk hea tootmistava). 30

Käesoleva leiutise veel üheks eeliseks on võimalus valmistada ühe partiina suur kogus

13 EE – EP 2 079 472 B1

ülipuhast stannsoporfiini, millel on samas senisest suurem homogeensus ja mida on odavam

sünteesida ja lihtsam iseloomustada.

Ülipuhta stannsoporfiini süntees

Kuna porfüriinid on valguse suhtes tundlikud ühendid, tuleb lähtematerjale, vahesaadusi,

reaktsioonisaadusi ning nende lahuseid ja suspensioone kaitsta valguse eest ja hoida pimedas 5

kohas valguskindlates pakendites.

Stannsoporfiini sünteesimisel kasutatakse lähtematerjalina hemiini (raud (III) protoporfüriin

IX kloriidi). Suuremahuliseks sünteesimiseks vajalikud kogused saadakse sea punastest

verelibledest. DMF puhtusastmega hemiini on võimalik osta ettevõttelt Harmiex (Loenen,

Holland) ja seda materjali kasutatakse ilma eelneva puhastamiseta (toote puhtusaste on HPLC 10

meetodil määratuna kõrgem kui 98%). Hemiini soojendatakse orgaanilises lahustis

hüdrogeenimise katalüsaatoriga vesiniku atmosfääris. Selle taandava etapi eesmärk on

eemaldada porfüriinitsüklist Fe ioon ja redutseerida/taandada protoporfüriini IX

vinüülrühmad etüülrühmadeks (muundades protoporfüriini IX sel viisil mesoporfüriiniks IX),

nagu on näidatud alljärgneval skeemil: 15

14 EE – EP 2 079 472 B1

Eelistatud hüdrogeenimise katalüsaator on pallaadium süsinikul, mida kasutatakse koguses

ligikaudu 0,0135 kuni 0,0165 ekvivalenti, eelistatavalt umbes 0,015 ekvivalenti. Antud juhul

võib kasutada ka teisi sobivaid katalüsaatoreid, tingimusel et tootesse jäävad katalüsaatorite

kogused vastavad farmaatsiaalastele nõuetele. Nikkel-alumiiniumi katalüsaatorina võib 5

kasutada RANEY niklit (RANEY on ettevõtte W.R.Grace & Co., New York, New York

registreeritud kaubamärk). Üks eelistatud orgaaniline lahusti on sipelghape.

Avastati, et Pd/C katalüsaatori eeltöötlemine vesinikuga enne hemiini lisamist vähendab

pallaadiumiga seotud lisandite kogust ja aitab seega muuta stannsoporfiini lõppsaaduse

puhtamaks. Kui enne hemiini lisamist ei viidud läbi katalüsaatori eelhüdrogeenimist, sisaldas 10

saadus umbes 50 ppm pallaadiumijääke, mis ületab oluliselt selle saaduse puhul lubatud

määra, milleks on vähem kui umbes 20 ppm pallaadiumijääke. Eelhüdrogeenimise etapi abil

õnnestus viia pallaadiumijääkide kogus tasemele, mida polnud enam võimalik tuvastada

(väiksem kui umbes 5 ppm). Täiustatud sünteesi korral sisaldas valmistatud tina (IV)

mesoporfüriini IX dikloriid vähem kui umbes 20 ppm, eelistatavalt vähem kui umbes 15 ppm, 15

veelgi eelistatavamalt umbes 10 ppm ja sellest veelgi eelistatavamalt umbes 5 ppm

pallaadiumijääke. Katalüsaatori eelhüdrogeenimise võib läbi viia vesiniku rõhul umbes 15

kuni 75 psi (umbes 1 kuni 5 baari ehk umbes 100 000 kuni 500 000 paskalit), eelistatavalt

umbes 30 kuni 50 psi (umbes 2 kuni 3,5 baari ehk 200 000 kuni 350 000 paskalit), veelgi

eelistatavamalt umbes 40 psi (umbes 2,75 baari ehk 275 000 paskalit). Katalüsaatori 20

eelhüdrogeenimise temperatuur võib olla 25 kuni 60 ºC, eelistatavalt 35 kuni 50 ºC, veelgi

15 EE – EP 2 079 472 B1

eelistatavamalt umbes 40 kuni 45 ºC. Eelhüdrogeenimise aeg võib olla umbes 2 kuni 48 tundi,

eelistatavalt umbes 6 kuni 24 tundi, veelgi eelistatavamalt umbes 8 kuni 16 tundi ja sellest

veelgi eelistatavamalt umbes 12 tundi.

Seega sisestatakse reaktsiooninõusse tavaliselt kõigepealt katalüsaator ja seejärel lahustina

kasutatav sipelghape (nt umbes 17,5 kuni 22,5 osa lahustit, eelistatavalt umbes 20 osa 5

lahustit). Enne lahusti lisamist saab ohutuse tagamiseks vesiniku vaakumi abil eemaldada ja

reaktsiooninõu täita lämmastikuga. Pärast sipelghappe lisamist asendatakse lämmastik

vesinikuga näiteks kontsentratsioonis 40 naela ruuttolli kohta (umbes 2,75 baari ehk 275 000

paskalit). Temperatuur reguleeritakse seejärel 8 kuni 24 tunniks, eelistatavalt umbes 12

tunniks enne lähtematerjalina kasutatava hemiini sisestamist reaktsiooninõusse tasemele 35 10

kuni 50 ºC, eelistatavalt umbes 40 kuni 45 ºC. Seejärel jahutatakse eelhüdrogeenitud

katalüsaator ja siis lisatakse reaktsiooninõusse hemiin (lahustis). Ohutuse tagamiseks

eemaldatakse hemiini lisamise ajal vaakumi abil vesinik, nii et reaktsioonikeskkonda jääb

ainult Pd/C katalüsaatoriga seotud vesinik. Reaktsiooninõus tekitatakse uuesti vesiniku rõhk

umbes 30 kuni 35 psi ja reaktsioonisegu segatakse umbes 30 minutit temperatuuril ligikaudu 15

20 kuni 25 ºC. Seejärel soojendatakse reaktsioonisegu intensiivselt segades temperatuurini

umbes 80 kuni 100 ºC, eelistatavalt umbes 85 kuni 90 ºC, ja vesiniku rõhk tõstetakse tasemele

umbes 50 kuni 70 psi (umbes 3,4 kuni 4,8 baari ehk 340 000 kuni 480 000 paskalit),

eelistatavalt umbes 55 kuni 60 psi (umbes 3,8 kuni 4,2 baari ehk umbes 380 000 kuni 420 000

paskalit). Reaktsioonisegu temperatuuri säilitatakse umbes 1 kuni 3 tundi, eelistatavalt umbes 20

1 kuni 1,5 tundi. Seejärel jahutatakse reaktsioonisegu temperatuurile umbes 40 kuni 60 ºC,

eelistatavalt umbes 45 kuni 50 ºC ja vesiniku rõhk säilitatakse ja hüdrogeenimist jätkatakse

veel umbes 18 kuni 48 tunni, eelistatavalt 20 kuni 30 tunni ja veelgi eelistatavamalt umbes 24

tunni vältel.

Seejärel reaktsioonisegu jahutatakse ja vabastatakse rõhu alt, eemaldades selleks reakt-25

siooninõust vaakumi abil vesiniku. Reaktsiooninõusse lisatakse kobediatomiit (nagu

HYFLO SUPERGEL, mis on ettevõtte Celite Corp., Santa Barbara, California, registree-

ritud kaubamärk), aktiivsüsi (nagu DARCO KB, mis on ette võtte NORIT Americas, Inc.,

Marshall, Texas, registreeritud kaubamärk). Suspensioon filtreeritakse ja filterkooki pes-

takse lahustiga. Sellise töötluse eesmärgiks on eemaldada materjalist raua- ja pallaadiumi-30

jäägid.

Üleliigse lahusti eemaldamiseks kontsentreeritakse filtraati vaakumis destilleerimise teel

16 EE – EP 2 079 472 B1

(mida võib teha toatemperatuuril või sellest madalamal temperatuuril nagu temperatuuril

ligikaudu 10 kuni 15 ºC. Seejärel lisatakse kontsentreeritud lahusele vähemalt umbes 30

sekundi kuni vähemalt umbes 3 tunni, eelistatavalt umbes vähemalt 1 tunni jooksul sadesti,

näiteks eeter nagu metüül-t-butüüleeter (MTBE). Lisatava MTBE kogus võib olla umbes

17,5 kuni 22,5 osa, eelistatavalt umbes 20 osa. 5

Suspensiooni võib jahutada temperatuurile umbes -15 kuni -30 ºC, eelistatavalt umbes -20

kuni -25 ºC.

Suspensioon filtreeritakse ja filterkooki loputatakse orgaanilise lahustiga nagu eetrid,

sealhulgas metüül-t-butüüleeter (MTBE), dietüüleeter või diisopropüüleeter. Pärast

filtreerimist ja filterkoogi loputamist kuivatatakse materjal vaakumahjus maksimaalsel 10

temperatuuril umbes 60 ºC, näiteks umbes 45 kuni 60 ºC.

Kui reaktsioonisaaduse ehk mesoporfüriini IX valmistamisel kasutatakse lahustina

sipelghapet, sadestatakse reaktsioonisaadus formaatsoolana; see on mesoporfüriini IX

eelistatuim isoleerimise viis pärast hüdrogeenimist. Pärast edasisi puhastusetappe

muundatakse mesoporfüriin IX formaat vesinikkloriidsoolaks. Lisaks on näidatud, et kui 15

järgnevas tina sisestamise etapis kasutatakse prootonitepüüdureid nagu formaati (või teisi

orgaanilisi anioone nagu atsetaati), on saaduses sisalduvate lisandite kogus suurem kui selliste

püüdurite kasutamata jätmise korral. Seetõttu on soovitatav kasutada mesoporfüriini IX

formaadi formaataniooni asemel aniooni, millel on tina sisestamise etapis väiksem võime

püüda prootoneid või puhverdada lahust; selliste anioonide hulka kuuluvad kloriidi anioon ja 20

teised halogeniidide anioonid nagu bromiid ja jodiid.

Kui hüdrogeenimisetapis isoleeritav vahesaadus on mesoporfüriin IX formaat, pannakse see

koos kobediatomiidi, aktiivsöe ja sipelghappega (näiteks umbes 10 massiprotsendi kobe-

diatomiidi, umbes 20 massiprotsendi aktiivsöe ja 10 osa sipelghappega) edasiseks puhas-

tamiseks reaktsiooninõusse. Suspensiooni segatakse umbes 1,5 kuni 2,5 tundi näiteks tempe-25

ratuuril umbes 20 kuni 30 ºC, eelistatavalt umbes 20 kuni 25 ºC. Seejärel suspensioon filt-

reeritakse ja filterkooki pestakse sipelghappega ehk näiteks umbes 5 osa sipelghappega. Filt-

raadilahus kontsentreeritakse seejärel umbes 5 kuni 6 mahuosani. Teise reaktsiooninõusse

asetatakse puhastatud vesi ja 31%iline vesinikkloriidhape, millest valmistatakse umbes 15 osa

umbes 1N vesinikkloriidhapet. Umbes 6 osa seda HCL lahust viiakse eelistatavalt tempera-30

tuuril umbes 20 kuni 25 ºC vähemalt umbes 60 minuti jooksul üle reaktsiooninõusse, milles

17 EE – EP 2 079 472 B1

on umbes 6 osa filtraati. Seejärel külvatakse lahusesse mesoporfüriin IX divesinikkloriid (mis

sünteesiti varem) ja segatakse seda vähemalt umbes 2 tundi. Ülejäänud 9 osa 1N vesinik-

kloriidhapet viiakse intensiivselt segades eelistatavalt vähemalt 60 minuti jooksul realt-

siooninõusse. Seejärel segatakse suspensiooni veel umbes 2 kuni 3 tundi temperatuuril umbes

20 kuni 30 ºC, eelistatavalt temperatuuril 20 kuni 25 ºC. Seejärel suspensioon filtreeritakse ja 5

loputatakse puhastatud veega. Reaktsioonisaadus kuivatakse filtril lämmastikuvooga.

Varasemates protsessides viidi eespool kirjeldatud etapp läbi tahke mesoporfüriin IX

formaadi uuesti lahustamise teel sipelghappes, mille järgselt lisati sipelghappe lahus vesinik-

kloriidhappesse, et muundada mesoporfüriin IX formaat mesoporfüriin IX divesinikkloriidiks.

Sellisel viisil valmistatud mesoporfüriin IX divesinikkloriidi filtreerimine aga kulges 10

tööstuslikus katsemahus üsna aeglaselt ehk selleks kulus kuni viis päeva ja edasiseks filtril

kuivatamiseks umbes kaks kuni kolm nädalat. Seda protsessi parendati; nagu kirjeldatakse

eespool, lisatakse mesoporfüriin IX formaadi lahusesse sipelghappes 1N vesinikkloriidhappe

lahus. Avastusekohaselt saadakse selle tulemusena mesoporfüriin IX divesinikkloriid, mida

saab kiiremini filtreerida. Materjali saab külvata ka protseduuri ajal, näiteks siis, kui hakatakse 15

lisama mesoporfüriin IX formaadi lahusesse sipelghappes 1N HCl või 1N HCl mesoporfüriin

IX formaadi lahusesse sipelghappes lisamise ajal, näiteks siis, kui mesoporfüriin IX formaadi

lahusesse sipelghappes on lisatud 10%, umbes 20%, umbes 30%, umbes 40%, umbes 50%,

umbes 60%, umbes 70%, umbes 80% või umbes 90% 1N HCl-i.

Ülalkirjeldatud protsessis lisatakse külvatav materjal eelistatavalt siis, kui mesoporfüriin IX 20

formaadi lahusesse sipelghappes on lisatud 40% 1N HCl. Sellise külvamismaterjali lisamise

teel on võimalik soodustada ka kiiremini filtreeritava materjali moodustumist. Kuna selliselt

täiustatud protsessi tulemusena tekib kiiremini filtreeritav ehk päevade asemel tundide või

isegi minutite jooksul filtreeritav mesoporfüriin IX divesinikkloriid, on võimalik oluliselt

säästa aega ja vähendada kulusid. Ühes teises teostuses on umbes 10 g mesoporfüriin IX 25

divesinikkloriidi filtreerimisaeg nüüd lühem ehk lühem kui umbes 90 minutit, lühem kui

umbes 60 minutit, lühem kui umbes 45 minutit, lühem kui umbes 35 minutit, lühem kui

umbes 25 minutit või lühem kui umbes 10 minutit. Ühes lisateostuses on umbes 1000 g

mesoporfüriin IX divesinikkloriidi filtreerimisaeg nüüd lühem ehk lühem kui umbes 1 päev,

lühem kui umbes 12 tundi, lühem kui umbes 6 tundi, lühem kui umbes 4 tundi, lühem kui 30

umbes 3 tundi või lühem kui umbes 2 tundi.

18 EE – EP 2 079 472 B1

Mesoporfüriin IX vesinikkloriidi muundamine stannsoporfiiniks (tina (IV) mesoporfüriin IX)

tina (II) soolaga töötlemise teel, mis ei ole käesoleva leiutise kohase meetodi teostus.

Seejärel töödeldakse mesoporfüriini IX vesinikkloriidi tina (II) soolaga nagu SnCl2

orgaanilises lahustis nagu äädikhappes oksüdeerivates tingimustes, mille tulemusena tekib 5

soovitud saadus ehk tina (IV) mesoporfüriin IX dikloriid (stannsoporfiin). Näiteks

reaktsiooninõusse asetatakse mesoporfüriin IX divesinikkloriid ja tina (II) kloriid, seejärel

lisatakse temperatuuril umbes 20 kuni 30 ºC, eelistatavalt umbes 20 kuni 25 ºC äädikhape.

Reaktsioonisegu soojendatakse intensiivselt segades inertses atmosfääris (nagu lämmastikus

või argoonis) tagasivooluga. 10

19 EE – EP 2 079 472 B1

Kui tagasivool on aktiveeritud, tekitatakse reaktsiooninõu ülaosas (headspace) atmosfäär, mis

koosneb umbes 6% hapnikust lämmastikus. Gaas võib sisaldada umbes 3% kuni 22%

hapnikku, kuid plahvatusohu vältimiseks on eelistatav hapnikusisaldus umbes 6%. Segu

töödeldakse umbes 100 kuni 130 tundi tagasivooluga. Kui gaasisegu läbi vedeliku 5

mullitamise asemel kasutada ülaosas 6% hapnikku sisaldavat lämmastiku atmosfääri, on

tina(IV) mesoporfüriin IX dikloriidi saagis suurem. Tina (II) suudab siseneda porfüriini

tsüklisse ja moodustada lämmastikuga kompleksi, kuid suudab ka porfüriini tsüklist väljuda.

20 EE – EP 2 079 472 B1

Tina (IV), mis ei ole porfüriinitsüklis olevate lämmastiku aatomitega juba seotud, aga ei

suuda siseneda tsüklisse ja moodustada lämmastiku aatomitega komplekse. Selleks et tekiks

tina (IV) mesoporfüriin IX, peab tina (II) ioon sisenema porfüriini tsüklisse ja siis

oksüdeeruma in situ tinaks (IV). Kui tina (II) ioon oksüdeerub liiga kiiresti, peatub

sisenemisreaktsioon ja selle tulemusel võib saagis oluliselt väheneda. Seega on vaja 5

oksüdatsiooni kiirust korralikult kontrollida. Sellise kontrolli tagamiseks võib lahuse ja

hapniku/lämmastiku ülaosa atmosfääri vahelise liidese kaudu sisestada reaktsioonisegusse

hapniku: selle tulemusena kulgeb reaktsioon mõistlikul kiirusel ja lõppsaaduse saagis on hea.

Reaktsioonisegust võib soovi korral võtta tina sisestamise etapis proovi, langetades

temperatuuri selleks tasemele umbes 50 kuni 70 ºC, eelistatavalt umbes 55 kuni 60 ºC ja 10

reaktsiooni töödelda pärast proovi eemaldamist püstjahuti all edasi.

Pärast tina sisestamise etappi jahutatakse reaktsioonisegu ja lisatakse WFI (water for

injection) ehk süstimiseks sobiva puhtusastmega vesi. Seejärel suspensioon filtreeritakse ja

filterkooki pestakse WFI veega. Filterkook asetatakse veejääkide eemaldamiseks vähemalt 4

tunniks vaakumisse. 15

Mesoporfüriin IX vesinikkloriidi muundamine stannsoporfiiniks (tina (IV) mesoporfüriin IX)

tina (II) oksiidiga töötlemise teel vastavalt käesolevale leiutisele.

21 EE – EP 2 079 472 B1

Tina saab sisestada mesoporfüriin IX tsüklisse ka mesoporfüriin IX divesinikkloriidi

töötlemise teel tina (II) oksiidiga. See reaktsioon võib kulgeda lõpuni juba kahe tunni jooksul

võrreldes nelja päeva kuni kolme nädalaga, mis kulub tina sisestamiseks eespool kirjeldatud

tina (II) soola meetodil. Mesoporfüriin IX divesinikkloriidi lahus/suspensioon sobivas 5

lahustis, näiteks sipelg- või äädikhappes lisatakse tina(II) oksiidi lahusele/suspensioonile

sobivas lahustis, näiteks äädik- või sipelghappes. Näidisprotseduuri kirjeldatakse allpool ja ka

näidetes.

Mesoporfüriin IX divesinikkloriid lahustatakse/suspendeeritakse sipelghappes ümbritseva

keskkonna temperatuuril. Kuna lahus või suspensioon värvub sügavlillaks, on soovitatav 10

mesoporüriin IX divesinikkloriid pulveriseerida võimalikult peeneks pulbriks, et soodustada

lahustumist.

Tina (II) oksiid suspendeeritakse ümbritseva keskkonna temperatuuril äädikhappes ja

segatakse. Pärast pikemaajalist segamist võib tinaoksiidi suspensioon muutuda geeliks, kuid

tähelepanekute kohaselt ei avaldanud see reaktsioonile negatiivset mõju. Mesoporfüriini IX 15

divesinikkloriidi lisamisel hakkab geel kohe lagunema. Tina (II) oksiidi kogus on umbes

kaksekvivalenti kuni umbes kuus ekvivalenti mesoporfüriin IX divesinikkloriidi ühe

ekvivalendi kohta, eelistatavalt kasutatakse mesoporfüriin IX divesinikkloriidi ühe

ekvivalendi kohta umbes neli ekvivalenti tina (II) oksiidi (selle reaktsiooni korral on

ekvivalentsuhe sama mis molaarsuhe). 20

Tina (II) oksiidi lahust hoitakse temperatuuril umbes 25 kuni 115 ºC, eelistatavalt umbes 50

kuni 75 ºC, veelgi eelistatavamalt umbes 60 kuni 65 ºC. Seejärel lisatakse umbes 3 kuni 9

22 EE – EP 2 079 472 B1

tunni, eelistatavalt umbes 6 tunni jooksul mesoporfüriin IX divesinikkloriidi lahus.

Mesoporfüriin IX divesinikkloriidi lahus võib olla lisamise ajal ümbritseva keskkonna

temperatuuril või seda võib hoida lisamise ajal temperatuuril umbes 50 kuni 75 ºC nagu 60

kuni 65 ºC. Reaktsioonisegu hoitakse veel umbes 2 kuni 48 tundi, eelistatavalt veel umbes 16

kuni 30 tundi, veel eelistavamalt veel umbes 18 kuni 24 tundi nagu veel umbes 18 tundi või 5

veel umbes 24 tundi temperatuuril umbes 25 kuni 115 ºC, eelistatavalt umbes 50-75 ºC, veelgi

eelistatavamalt umbes 60-65 ºC. Pärast täiendavat reageerimisaega jahutatakse suspensioon

toatemperatuurile (umbes 20-25 ºC), segatakse või raputatakse vähemalt umbes viis minutit,

eelistatavalt umbes 1 tund, ja seejärel filtreeritakse.

Metallide sisestamine porfüriinidesse metalloksiididega 10

Tina sisestamise meetodit porfüriini tüsklitesse metalloksiide abil saab kasutada ka teiste me-

tallide sisestamiseks metalloksiidide abil. Eriti kasulikud metalloksiidid on need metallok-

siidid, milles metalloksiidi metalli katioon on keskmise/vahepealse oksüdatsiooniastmega.

Seda protseduuri saab kasutada metalliseeritud porfüriiniühendi või selle soola valmis-

tamiseks porfüriiniühendite või nende sooladega, sealhulgas, kuid mitte ainult, mesoporfüriini 15

või selle soolaga, mesoporfüriin IX divesinikkloriidi, protoporfüriini või selle soolaga, hema-

toporfüriini või selle soolaga või deuteroporfüriini või selle soolaga.

Metalloksiidid, mida võib selleks kasutada, on näiteks, kuid mitte ainult tina-, tsink-, vask-,

kaadmium-, koobalt-, kroom-, raud-, alumiinium-, titaan-, nikkel-, mangaan-, hõbe-, kuld-,

vanaadium-, plaatina-, antimon-, arseen-, tina (II), tsink (II), vask (I), vask (II), kaadmium (II), 20

koobalt (II), koobalt (III), koobalt (IV), CO3O4, kroom (II), kroom (III), kroom (IV), kroom

(V), kroom (VI), raud (II), raud (III), Fe3O4, alumiinium (III), titaan (II), titaan (III), titaan

(IV), nikkel (II), mangaan (II), mangaan (III), mangaan (IV), mangaan (VII), hõbe (I), hõbe

(II), kuld (I), kuld (III), vanaadium (II), vanaadium (III), vanaadium (IV), vanaadium (V),

plaatina (II), plaatina (IV), antimon (III), antimon (IV), antimon (V), arseen (III) või arseen 25

(V) oksiid.

Käesolevas taotluses kirjeldatavate protseduuride abil saab metalliseerida ka teisi porfüriini-

ühendeid ja tetrapürroole, sealhulgas, kuid mitte ainult porfüriine nagu deuteroporfüriine ja

deuteroporfüriin IX 2,4-bis (etüleenglükool) (8,13-bis (1,2-dihüdroksüetüül)-3,7,12,17-

tetrametüül-21H,23H-porfiin-2,18-dipropioonhapet). Teised porfüriiniühendid, mida saab 30

käesolevas taotluses kirjeldavate protseduuride teel metalliseerida, on näiteks, kuid mitte

23 EE – EP 2 079 472 B1

ainult, koproporfüriinid, tsütoporfüriinid, etioporfüriinid, hematoporfüriinid, mesoporfüriinid,

fülloporfüriinid, protoporfüriinid, pürroporfüriinid, rodoporfüriinid, uroporfüriinid ja

fütoporfüriinid. Porfüriiniühendite põhjalik loend on toodud aadressil World-Wide-

Web.chem-qmul.ac.uk/iupac/tetrapyrrole; sellel aadressil kirjeldatavad porfüriinid kaasatakse

viitena käesolevasse taotlusesse kui porfüriinid, mida saab käesolevas taotluses kirjeldatavate 5

protseduuride teel metalliseerida.

Tina (IV)mesoporfüriin IX dikloriidi puhastamine: kuuma happega tritureerimine

Nüüd tritureeritakse tina (IV) mesoporfüriin IX dikloriidi toormaterjali lisandite eemalda-

miseks kuuma happega. Materjal suspendeeritakse uuesti vesinikkloriidhappes (umbes 0,5

N kuni 2,0 N, eelistatavalt 1 N) ja temperatuur tõstetakse umbes 1 või 2 tunniks tasemele 10

ligikaudu 75 kuni 100 ºC või umbes 80 kuni 100 ºC, eelistatavalt umbes 85 kuni 95 ºC, veel

eelistatavamalt umbes 85 kui 90 ºC, segades samal ajal reaktsioonisegu mõõdukalt. Sus-

pensioon jahutatakse seejärel temperatuurile umbes 20 kuni 30 ºC, eelistatavalt umbes 20

kuni 25 ºC ja filtreeritakse; filterkook loputatakse puhastatud veega ja pestakse filtril läm-

mastikuvooga. 15

Tina (IV) mesoporfüriin IX dikloriidi puhastamine: töötlemine kõrgel pH väärtusel

Kuuma happega tritureerimise etapi läbinud materjalile lisatakse kobediatomiit, aktiivsüsi,

vesi ja ammooniumhüdroksiid. Temperatuur reguleeritakse tasemele ligikaudu 20 kuni

30 ºC, eelistatavalt umbes 20 kuni 25 ºC ja reaktsioonisegu segatakse eelistatavalt umbes 1

kuni 2 tundi. Reaktsioonisegust võetakse proov, et teha kindlaks, kas pH on 9 või umbes 9. 20

Seejärel segu segatakse eelistatavalt veel umbes 1 kuni 2 tundi. Seejärel segu filtreeritakse.

Kogu filtrile jäänud materjali loputatakse veega ja filterkook asetatakse kõrvale.

Tina (IV) mesoporfüriin IX kloriidi uuesti hapestamine

Filtraat lisatakse seejärel äädikhappe ja 31%ilise vesinikkloriidhappe segusse ja segu tem-

peratuur reguleeritakse tasemele umbes 20 kuni 30 ºC, eelistatavalt umbes 20 kuni 25 ºC. 25

Tekkinud suspensiooni segatakse eelistatavalt umbes 15 minutit ja võetakse proov, et teha

kindlaks, kas pH on väiksem või võrdne kui umbes 1, seejärel segatakse eelistatavalt veel 1

kuni 2 tundi. Seejärel suspensioon filtreeritakse, filterkooki loputatakse veega ja seejärel

eemaldatakse vaakumi abil veejäägid.

Selles staadiumis võetakse filterkoogist proov, et teha kindlaks, kas see sisaldab lähtema-30

24 EE – EP 2 079 472 B1

terjali ehk mesoporfüriin IX divesinikkloriidi jääke. Kui selliste jääkide sisaldus on suurem

kui umbes 0,1%, korratakse kõrgel pH väärtusel töötlemist ja sellele järgnevat uuesti ha-

pestamist töötlemist vastavalt vajadusele (näiteks veel 1, 2 või 3 korda)

Tina (IV) mesoporfüriin IX dikloriidi edasine kuuma happega tritureerimine

Eelmises etapis valmistatud filterkook suspendeeritakse uuesti umbes kahe massiosa WFI 5

puhtusastmega vee ja umbes ühe massiosa 31%ilise HCl segus temperatuuril umbes 20

kuni 30 ºC, eelistatavalt 20 kuni 25 ºC. Segu temperatuur reguleeritakse mõõdukal segami-

sel umbes 6 kuni 48 tunniks, eelistatavalt umbes 12 kuni 24 tunniks, veelgi eelistatavamalt

umbes 16 kuni 18 tunniks tasemele umbes 80 kuni 100 ºC, eelistatavalt umbes 85 kuni

90 ºC, ja seejärel jahutatakse vähemalt umbes 1 tunniks temperatuurile 20 kuni 30 ºC, eelis-10

tatavalt temperatuurile umbes 20 kuni 25 ºC. Suspensioon filtreeritakse, filterkooki pestakse

vesinikkloriidhappe vesilahusega (näiteks umbes 1 massiosa 31%ilist HCl 25 massiosas

WFI puhtusastmega vees) ja kuivatatakse lämmastikuvoos (temperatuuril alla 50 ºC).

Lõpliku kuuma happega töötlemise eesmärk on muuta stannsoporfiin taas monomeeriks.

Neutraalses lahuses on stannsoporfiin monomeerne ja dimeerne vorm tasakaalus, tugeva 15

happega töötlemisel aga nihkub tasakaal oluliselt monomeerse vormi suunas.

Stannsofporfiini sünteesi täiustamise käigus selgus, et optimaalsete tulemuste saavutami-

seks tuleks hüdrogeenimise katalüsaatorit enne lähtematerjalina kasutavasse hemiini sises-

tamist eelhüdrogeenida; mesoporfüriin IX divesinikkloriid tuleb isoleerida mesoporfüriin

IX formaadist sipelghappes sipelghappe lahusele HCl lahuse lisamise teel; tina sisestamise 20

etapis tuleks vältida prootonite püüdurite manulust; ja tina sisestamise etapis lisatav hapnik

tuleks lisada hapniku/lämmastiku seguna reaktsiooninõu ülaossa, mitte gaasi läbi lahuse

mullitamise või piserdamise teel. Neid optimaalseid parameetreid silmas pidades saab

mingil määral reguleerida ka teisi muudetavaid tegureid nagu temperatuuri, reaktsiooni-

aega, reaktiivide kontsentratsiooni ja reaktiivide lisamise järjekorda, näiteks kontsentraat-25

siooni ja reaktsiooniaega võib muuta 50 kuni 200% ulatuses toodud väärtustest või 75 kuni

150% ulatuses toodud väärtustest ja temperatuuri võib muuta umbes 5 kuni 10 ºC ulatuses

võrreldes toodud väärtustega, nii et stannsoporfiini suuremahulise sünteesi tulemusena

tekkiva stannsorfiini puhtus ei oleks väiksem kui käesolevas taotluses määratletud puhtus.

Puhastus- ja sadestusetappe võib vastavalt vajadusele korrata, et tagada suurtes kogustes 30

valmistatava stannsoporfiini kõrge puhtusaste.

25 EE – EP 2 079 472 B1

Stannsoporfiini raviotstarbeline kasutamine vastsündinute hüperbilirubineemia ja teiste

haiguste ravis ja ennetamisel

Käesoleva leiutise kohasel meetodil valmistatud stannsoporfiini saab kasutada vastsündi-

nute hüperbilirubineemia (vastsündinute kollasuse) ravis ja ennetamisel (vt U.S. 4,657,902;

U.S. 4,668,670 ja WO 94/28906). Teised stannsoporfiini kasutusmeetodid on avaldatud 5

allikates U.S .4,692,440 (heemi väljutuskiiruse suurendamiseks), WO 89/02269 (vähiravi

toksilisuse tasakaalustamiseks), U.S. 4,782,049 (psoriaasi raviks) ja teistes väljaannetes.

Vastsündinute hüperbilirubineemia ravis või ennetamisel kasutatav stannsoporfiin lahus-

tatakse farmatseutiliselt sobivas vehiiklis. Stannsoporfiin on eelistatavalt lahuses, mille

pH-d saab hoida puhvrite abil sobival tasemel. Asjakohaste puhvrite hulka kuuluvad 10

fosfaat, tsitraat, glükonaat, laktaat, tartraat, glütsinaat, glütsüülglütsinaat, bikarbonaat,

karbonaat, maleaat või atsetaat, mis sisaldavad katioonina naatriumit, kaaliumit, magnee-

siumit, kaltsiumit või alumiiniumit. Puhvritena võib kasutada ka histidiini ja imidasooli.

Eelistatud on fosfaatpuhvrid, eeskätt naatriumfosfaatpuhver. Puhvrid peavad farmatseu-

tiliselt sobima vastsündinutele süstimiseks. Manustatava lahuse pH on eelistatavalt umbes 15

7,0 kuni 8,0, eelistatavalt umbes 7,2 kuni 7,9, veel eelistatavamalt umbes 7,4. Lahuse

osmolaarsus vastab eelistatavalt täpselt või ligikaudu füsioloogilisele osmolaarsusele,

eelistatud vahemik on umbes 280 mOsm/l kuni 310 mOsm/l. Stannsoporfiin manustatakse

eelistatavalt süstimise, veelgi eelistatavamalt lihasesisese süstimise teel. Stannsoporfiini

manustatakse koguses, millest piisab vastsündinute hüperbilirubineemia raviks või enneta-20

miseks, üldjuhul umbes 4,5 mg sünnikaalu ühe kg kohta, kuid kasutatakse ka stannsopor-

fiini väiksemaid annuseid nagu 1,5 mg/sünnikaalu 1 kg kohta või 3,0 mg/sünnikaalu 1 kg

kohta.

Järgmised näited on toodud käesoleva leiutise illustreerimiseks ja need ei piira mitte mingil

viisil käesoleva leiutise ulatust. 25

NÄITED

Referentsnäide 1

Ülipuhta stannsoporfiini sünteesimise näide

Hemiini esialgne muundamine mesoporfüriiniks IX

200 l klaasiga vooderdatud reaktsiooninõusse, mis on 150 psi rõhu all, sisestatakse 0,6 kg 30

26 EE – EP 2 079 472 B1

5%ilist pallaadiumit süsinikul ja 73 kg sipelghapet. Reaktsiooninõus tekitatakse intensiiv-

sel segamisel vesiniku rõhk 60-65 psi ja see soojendatakse minimaalselt 12 tunni jooksul

temperatuurini 40-45 ºC. Reaktsioonisegu jahutatakse mõõdukalt segades temperatuurile

20-25 ºC, vesinik eemaldatakse vaakumiga ja reaktsiooninõusse sisestatakse 6,0 kg hemiini

(DMF puhtusastmega) ja 73 kg sipelghapet. Reaktsiooninõus tekitatakse vesiniku rõhk 30-5

35 psi ja reaktsioonisegu segatakse 30 minutit temperatuuril 20-25 ºC.

Reaktsioonisegu soojendatakse intensiivselt segades temperatuurini 85 kuni 90 ºC. Vesini-

ku rõhk tõstetakse väärtuseni 55 kuni 60 psi. Rõhku ja temperatuuri säilitatakse 1 kuni 1,5

tundi.

Reaktsioonisegu jahutatakse temperatuurile 45 kuni 50 ºC ja hüdrogeenimist jätkatakse 24 10

tundi rõhul 55 kuni 60 psi. Seejärel jahutatakse reaktsioonisegu temperatuurile 20-25 ºC,

rõhk eemaldatakse ja reaktsioonisegust võetakse proov.

Reaktsioonisegu soojendatakse temperatuurile 45 kuni 50 ºC, tekitatakse vesiniku rõhk 55

kuni 60 psi ja segatakse veel 6 tundi. Seejärel jahutatakse reaktsioonisegu temperatuurile

20-25 ºC, rõhk eemaldatakse ja reaktsioonisegust võetakse veel üks proov. 15

Reaktsiooninõust eemaldatakse vaakumi abil vesinik ja nõusse sisestatakse 3,0 kg HYFLO

SUPERGEL, 2,3 kg DARCO KB ja 42 kg sipelghapet. Suspensioon filtreeritakse ja

filterkooki pestakse 122 kg sipelghappega.

Osa filtraadist viiakse üle 200 ml klaasvooderdusega reaktsiooninõusse, jahutatakse tempe-

ratuurile 10 kuni 15 ºC ja destilleeritakse sipelghappe eemaldamiseks vaakumis. Kui jääk-20

maht on langenud 25-25 liitrini, lisatakse ülejäänud filtraat ja destilleeritakse kuni jääk-

mahuni 25-30 l.

Reaktsiooni temperatuur reguleeritakse tasemele 20-25 ºC ja minimaalselt 1 tunni jooksul

lisatakse 89 kg metüül-tert-butüüleetrit. Tekkinud suspensiooni segatakse 2 tundi tempera-

tuuril 20 kuni 25 ºC ja jahutatakse siis 4 tunniks temperatuurile -25 kuni -20 ºC. 25

Suspensioon filtreeritakse ja seda loputatakse 12 kg metüül-tert-butüüleetriga. Vahesaadust

kuivatatakse vaakumahjus temperatuuril 60 ºC või madalamal temperatuuril.

27 EE – EP 2 079 472 B1

Mesoporfüriin IX formaadi puhastamine kobediatomiidi ja aktiivsöega: mesoporfüriin IX

formaadi muundamine mesoporfüriin IX divesinikkloriidiks

Vahesaadus pannakse koos 10 massiprotsendi DARCO KB, 20 massiprotsendi HYFLO

SUPERCEL ja 10 osa sipelghappega 50-liitrisesse klaasvooderdusega reaktsiooninõusse.

Suspensiooni segatakse temperatuuril 25 ºC 1,5 kuni 2,5 tundi. 5

Suspensioon filtreeritakse teise 50-liitrisesse klaasvooderdusega reaktsiooninõusse. Filter-

kooki loputatakse 5 osa sipelghappega ja asetatakse kõrvale. Filtraadi lahust destilleeri-

takse vaakumis jääkmahuni 5 kuni 6 osa.

Kolmandasse reaktsiooninõusse pannakse puhastatud vesi ja 31%iline vesinikkloriidhape

ning valmistatakse 15 osa 1N vesinikkloriidhapet. Kuus osa filtraadi lahust viiakse mini-10

maalselt 60 minuti jooksul temperatuuril 20-25 ºC reaktsiooninõusse.

Lahusesse külvatakse mesoporfüriin IX divesinikkloriidi ja seda segatakse vähemalt 2

tundi. Ülejäänud 9 osa 1N vesinikkloriidhapet viiakse intensiivselt segades minimaalselt 1

tunni jooksul reaktsiooninõusse.

Tekkinud suspensiooni segatakse 2-3 tundi temperatuuril 20 kuni 25 ºC ja seejärel 15

isoleeritakse filtreerimiseks. Filterkooki pestakse 4 osa puhastatud veega. Vahesaadust ehk

mesoporfüriin IX divesinikkloriidi kuivatatakse filtril lämmastikuvooga.

Mesoporfüriin IX divesinikkloriidi muundamine tina (IV) mesoporfüriin IX dikloriidiks

(stannsoporfiiniks)

50-liitrilisse klaasvooderdusega reaktsiooninõusse pannakse 1,57 kg mesoporfüriin IX 20

divesinikkloriidi, 1,862 tina (II) kloriidi ja 40,9 kg äädikhapet temperatuuril 20 kuni 25 ºC.

Suspensiooni hoitakse mõõdukalt segades vähemalt 30 minutit temperatuuril 20-25 ºC.

Reaktsioonisegu soojendatakse lämmastikus mõõdukalt segades tagasivooluga (tempera-

tuuril umbes 115 ºC). Tagasivoolu tekkides sisestatakse reaktsiooninõu headspace’i 6%

hapnikku lämmastiku atmosfääris. Reaktsioonisegu töödeldakse veel 100 kuni 130 tundi 25

tagasivooluga.

0092 Reaktsioonisegu jahutatakse temperatuurile 55-60 ºC ja sellest võetakse mesoporfü-

riinijääkide määramiseks proov. Tulemuste ootamise ajal soojendatakse reaktsioonisegu

tagasivooluga. Soojendamise lõppedes jahutatakse reaktsioonisegu temperatuurile 60-70 ºC

28 EE – EP 2 079 472 B1

ja lisatakse 15,7 kg WFI (water for injection) puhtusastmega vett. Suspensiooni tempera-

tuur reguleeritakse 30 minuti jooksul tasemele 20-25 ºC ja suspensiooni segatakse 1 tund.

Suspensioon filtreeritakse ja reaktsiooninõud ja filterkooki loputatakse 6,3 kg WFI puhtus-

astmega veega. Pärast loputamist asetatakse filterkook veejääkide eemaldamiseks vähemalt

4 tunniks vaakumisse. 5

50-liitrisesse klaasvooderdusega reaktsiooninõusse pannakse märg filterkook, 22,4 kg pu-

hastatud vett ja 3,7 kg 31%ilist vesinikkloriidhapet temperatuuril 20-25 ºC. Reaktsiooni-

segu mõõdukalt segades reguleeritakse selle temperatuur 1-2 tunniks tasemele 85 kuni 90C

ja seejärel jahutatakse tasemele 20-25 ºC. Suspensioon filtreeritakse ja filterkooki pestakse

6,3 kg puhastatud veega. Reaktsioonisaadus kuivatatakse filtril lämmastikuvooga ja paken-10

datakse.

Tina (IV) mesoporfüriin IX dikloriidi (stannsoporfiini) puhastamine kõrgel pH-väärtusel

kobediatomiidi ja aktiivsöega

50-liitrisesse klaasvooderdusega reaktsiooninõusse pannakse 1,448 kg tina (IV) meso-

porfüriin IX dikloriidi, 0,194 kg HYFLO SUPERGELi, 0,066 kg DARCO KB, 14,5 kg 15

WFI vett ja 1,0 kg ammooniumhüdroksiidi 26 Be. Reaktsioonisegu temperatuur reguleeri-

takse tasemele 20-25 ºC ja segu segatakse 1-2 tundi. Reaktsioonisegust võetakse proov, et

teha kindlaks, kas selle pH on ≥9. Reaktsioonisegu segatakse veel 1-2 tundi. Segu filtree-

ritakse klaasressiiverisse. Filterkooki pestakse 2,9 kg veega ja asetatakse kõrvale.

Teise 50-liitrisesse klaasvooderdusega reaktsiooninõusse pannakse 38,2 kg äädikhapet ja 20

2,6 kg 31%ilist HCl-i. Temperatuur reguleeritakse tasemele 20-25 ºC. Klaasressiiverist

pärit filterkook viiakse temperatuuril 20-25 ºC minimaalselt 45 minuti jooksul teise 50-

liitrilisse reaktsiooninõusse. Klaasressiiverit ja üleviimisseadet loputatakse 2,1 kg WFI

veega ja lastakse see reaktsiooninõusse. Tekkinud suspensiooni segatakse 15 minutit tem-

peratuuril 20-25 ºC ja seejärel võetakse proov, et kontrollida, kas pH on ≤1. Seejärel sega-25

takse suspensiooni veel 1-2 tundi.

Suspensioon filtreeritakse ning reaktsiooninõud ja filterkooki loputatakse 1,3 kg WFI

veega. Pärast loputamist hoitakse filterkooki veejääkide eemaldamiseks vähemalt 4 tundi

vaakumis.

Filterkoogist võetakse testimiseks proov. Kui lähtematerjali (mesoporfüriin IX divesinik-30

29 EE – EP 2 079 472 B1

kloriidi) jäägi sisaldus on vastuvõetaval tasemel, viiakse läbi reaktsiooni järgmine etapp.

Vastasel juhul korratakse kogu töötlust (st filterkook lahustatakse uuesti ammoonium-

hüdroksiidiga, nagu on kirjeldatud eespool).

Tina (IV) mesoporfüriin IX dikloriidi (stannsoporfiini) töötlemine madalal pH väärtusel, et

taastada selle monomeerne vorm 5

Märg filterkook pannakse tagasi 50-liitrisesse klaasvooderdusega reaktsiooninõusse, mil-

lesse lisatakse 20,4 kg WFI vett ja 10,2 kg 31%ilist vesinikkloriidhapet temperatuuril 20-

25 ºC. Reaktsioonisegu mõõdukalt segades reguleeritakse selle temperatuur 16-18 tunniks

tasemele 85 kuni 90 ºC ja seejärel jahutatakse segu vähemalt 1 tunniks temperatuurile 20-

25 tundi. Suspensioon filtreeritakse ja filterkooki loputatakse eelnevalt segatud seguga, mis 10

koosneb 0,5 kg 31%ilise vesinikkloriidhappest 12,8 kg WFI vees. Reaktsioonisaadus kui-

vatatakse filtril temperatuuril alla 5 ºC lämmastikuvooga ja pakendatakse.

Leiutise näide 2

Alternatiivne tina sisestamise etapp, milles kasutatakse tinaallikana tina (II) oksiidi

Selleks et valmistada stannporfiini, võib tina sisestada mesoporfüriini IX alternatiivsel sün-15

teesimeetodil, mille korral kasutatakse tina sisestamisel tinaallikana tina (II) oksiidi.

Tumedasse 1000-milliliitrisesse kolmekaelalisse ja ümarapõhjalisse pudelisse, mis oli

varustatud magnetsegaja, lisalehtri, termomeetri, kondensaatori ja lämmastikuseadmega

(bubbler), pandi temperatuuril 20-25 ºC 8,4 g tina (II) oksiidi ja 200 ml äädikhapet, mille

tulemusena tekkis hall suspensioon. Suspensioon soojendati lämmastikus temperatuurile 20

60-65 ºC.

Eraldi 25 milliliitrisesse ühe kaelaga ümarapõhjalisse kolbi, mis oli varustatud segajaga,

pandi 10 g mesoporfüriin IX divesinikkloriidi ja 50 ml sipelghapet. Segu segati lahuse tek-

kimiseks 30 minutit temperatuuril 20-25 ºC ja saadi tulemusena umbes 60 ml sügavlillat

suspensiooni temperatuuril 20-25 ºC (lahuse värvuse tõttu on täielikku lahustumist raske 25

silmaga tuvastada; mesoporfüriin IX divesinikkloriid tuleks enne sipelghappe lisamist

korralikult peeneks jahvatada).

Mesoporfüriin IX divesinikkloriidi lahus pandi lisalehtrisse ja lisati 6 tunni jooksul tilkhaa-

val tina (II) oksiidi/äädikhappe suspensioonile/lahusele, hoides tina (II) oksiidi/äädikhappe

suspensiooni/lahuse temperatuuri samal ajal temperatuuril 60-65 ºC. Kolvis oleva materjali 30

30 EE – EP 2 079 472 B1

maht suurenes 200 ml-lt 260 ml-ni; reaktsioonisegu muutus hallist suspensioonist (või val-

gest geelist) lillaks suspensiooniks ja seejärel punaseks suspensiooniks.

Pärast lisamist segatakse reaktsioonisegu veel umbes 18-24 tundi lämmastiku atmosfääris

temperatuuril 60-65 ºC. Seejärel lisatakse 20-40 minuti jooksul tilkhaaval 100 ml vett, hoi-

des samal ajal temperatuuri tasemel 60-65 ºC. Tekkinud punane suspensioon (umbes 5

360 ml) jahutatakse 30 minuti jooksul temperatuurile 20-25 ºC ja filtreeritakse seejärel

alandatud rõhul (filtreerimisaeg tervikuna oli umbes 10-20 minutit). Filterkooki loputati

kahe osa 20 ml veega. Umbes 400 ml mahuga filtraat oli veinipunane lahus; filterkook

massiga umbes 40-50 g oli samuti veinipunane.

Märg filterkook tehti hoolikalt tükkideks ja pandi koos 100 ml 1N HCl-iga tagasi reakt-10

sioonikolbi. Tekkinud veinipunane suspensioon soojendati 1 tunniks temperatuurile 85-

95C. Seejärel jahutati suspensioon temperatuurile 20-25 ºC ja filtreeriti alandatud rõhul

(filtreerimisaeg tervikuna oli umbes 20-30 minutit); filtraat oli tumedat veinipunast kuni

pruuni värvi. Veinipunast filterkooki loputati kahe osa 20 ml veega, kuivatati lämmastiku-

vooga ja kuivatati veel 24 tundi tugevas vaakumis temperatuuril 80-90 ºC. Kordussünteesi-15

del oli saaduse saagis 16,5 kuni 21,1 g (70-90%).

Näide 3

Tinaallikana tina (II) kloriidi kasutades läbiviidud näidissünteesi teel valmistatud ülipuhta

stannsoporfiini analüüs

Stannsoporfiini partiid valmistati näidissünteesi teel, mida käsitletakse eespool näites 1 ja 20

ka varasematel meetoditel (vt US 6,818,763 ja US 2004/0210048).

HPLC põhianalüüs viiakse läbi C-18 kolonniga (Zorbax Extend C-18, 4,6 x 150mm,

3,5 um osakese suurus või selle ekvivalent. Detektor seadistatakse väärtusele 400 nm. Ka-

sutatavad lahustid (atsetonitriil, metanool ja vesi) on HPLC puhtusastmega. Mobiilse faasi

koostis on 16% atsetonitriili : 40% metanooli: 44% 0,5M ammooniumatsetaati, pH 5,15 25

(Ammooniumatsetaadi lahuse valmistamiseks lahustatakse 38,5 g ammooniumatsetaati

440 ml vees ja reguleeritakse pH äädikhappega väärtusele 5,15. Nii ammooniumatsetaat

kui ka äädikhape on reaktiivi puhtusastmega. Seejärel lisatakse 160 ml atsetonitriili ja

400 ml metanooli; mobiilse faasi lahus segatakse, filtreeritakse ja degaseeritakse enne ka-

sutamist). Voolukiirus on 1,0 ml/min. Süstitavad stannsoporfiini proovid ja standardid val-30

mistatakse kontsentratsiooniga 0,04 mg/ml 1N NaOHs. Kuna stannsoporfiin ja selle sarna-

31 EE – EP 2 079 472 B1

sed ühendid on valguse suhtes tundlikud, tuleb stannsoporfiini sisaldavaid lahuseid, lähte-

materjale või lisandite standardeid hoida läbipaistmatutes pakendites ja neid käsitseda ja

analüüsida tavapärasest pimedamates tingimustes. Proove ja standardlahuseid tuleks kasu-

tada 12 tunni jooksul pärast valmistamist. Süstitakse 5 µl analüüdilahust ja kasutatakse 10-

minutilist katseaega. Stannsoporfiini retentsiooniaeg on üldjuhul 4,8 minutit. Kolonni tem-5

peratuuri hoitakse tasemel 60C. Pärast analüüsi pestakse kolonni vähemalt 1 tund kiirusel

1,0 ml/min 80% metanooli ja 20% veega.

HPLC analüüs lisandite kvantiteerimiseks viiakse läbi ACE 5 C-18 kolonniga, 4,6 x

250 mm, osakese suurus 5 um, detekteerides lainepikkusel 400 nm. Valguse suhtes tund-

likke proove ja standardeid käsitseti vastavalt eespool kirjeldatule. Mobiilsete faasidena 10

kasutati: 30% metanooli, 70% vett 0,02M ammooniumatsetaadiga, pH9,1 ja B: 80% meta-

nooli, 20% vett koos 0,02 M ammooniumatsetaadiga, pH 9,1 (mobiilse faasi A valmistami-

seks lahustatakse 3,0g ammooniumatsetaati 1400 ml vees, reguleeritakse pH NH4OH abil

väärtusele 9,1 ja lisatakse 600 ml metanooli; mobiilse faasi B valmistamiseks lahustatakse

3,0g ammooniumatsetaati 400 ml vees, reguleeritakse pH NH4OH abil väärtusele 9,1 ja li-15

satakse 1600 ml metanooli; enne kasutamist mobiilsed faasid segatakse, filtreeritakse ja de-

gaseeritakse). Proovid lahustatakse 0,5 mahuprotsendis TEAs vees kontsentratsioonil ligi-

kaudu 0,2 mg/ml. Proove ja standardlahuseid tuleks kasutada 12 tunni jooksul pärast val-

mistamist.

Analüüs viiakse läbi järgmiste gradientidega (gradient conditions): 20

Aeg %A %B

0 100 0

50 70 30

65 70 30

90 0 100

110 0 100

111 100 0

120 100 0

mille korral muudetakse kontsentratsioone näidatud punktide lineaarselt.

Tabelis 1 on võrreldud käesoleva sünteesi saaduse (tulp C) HPLC analüüsi eelnevates sün-

teesides (tulbad A ja B) valmistatud saaduse analüüsidega. Tuvastatud piigid on reastatud 25

32 EE – EP 2 079 472 B1

retentsiooniaja järgi stannsoporfiini suhtes, kusjuures stannsoporfiini retentsiooniaeg on 1.

Tulbas A analüüsitud partii suurus on 1,1 kg, tulbas C analüüsitud partii suurus samuti

1,1 kg.

Tabel 1 Stannsoporfiini eri preparaatide analüüs 5

Suhteline retentsiooniaeg

A B C

0,33 0,06%

0,51 0,05% 0,05% 0,07%

0,55 0,06%

0,73 0,14% 0,05% 0,06%

0,76 0,07% 0,05%

0,83 0,05%

0,84 0,05%

0,92 0,26% 0,06%

0,95 0,30% 0,05%

0,96 0,22%

1 98% 99% 100%

1,05 0,09%

1,26 0,06%

Nagu on näidatud tabelis 1, saadi käesoleva meetodi kohase sünteesi korral ehk tulbas C

ülipuhas materjal üldise puhtusastmega >99%, mille iga lisandi sisaldus on väiksem või

võrdne kui 0,1%.

Näide 4 10

Tinaallikana tina (II) oksiidi kasutades läbiviidud näidissünteesi teel valmistatud ülipuhta

stannsoporfiini analüüs

Stannsoporfiini kolme partiiga viidi läbi näites 2 kirjeldatud tina sisestamise etapp. Nime-

tatud kolme partii analüüsimisel selgus, et valmistatud stannsoporfiini puhtusaste oli vasta-

valt 99,7%, 99,7% ja 99,6% (stannsoporfiini üldsisaldus oli vastavalt 96,4%, 99,1% ka 15

97,2).

HPLC analüüs viidi läbi Zorbax Extend C-18 kolonnis, 4,6 x 150 mm, paksus 5 µm. Eluen-

tidena kasutati: A: 80% 0,05 M ammooniumatsetaati, pH 5,15 koos äädikhappega: 20%

33 EE – EP 2 079 472 B1

atsetonitriili; B: 90% metanooli: 10% atsetonitriili. Temperatuur oli 40 °C. Voolukiirus oli

1,2 ml/min ja detekteerimine toimus lainepikkusel 400 nm. Stannsoporfiini retentsiooniaeg

oli 8,8 min, mesoporfüriin IX retentsiooniaeg aga 23,1 min ja kasutati gradiente, mis on

toodud tabelis 2.

Tabel 2 5

Aeg A B

0,0 60 40

10,0 25 75

30,0 25 75

31,0 60 40

40,0 60 40

Seejärel viidi läbi tinaoksiidi sisestamise meetodil valmistatud kahe stannsoporfiini partii

laialdasemad analüüsid. Nende analüüsidega seotud üksikasjad on toodud tabelis 3 (partii

kaal 0,840 kg) ja tabelis 4 (partii kaal 1,364 kg) (kus a/a näita JPLC piikide pindalade 10

suhet).

Tabel 3

Katse Meetod Tulemused

Üldine puhtus HPLC Lisandite üldsisaldus <1% a/a; lisand RRt 0,72 =0,06% a/a; mitte ükski teine lisand >0,05% a/a

Veesisaldus Karl Fischer, kulomeetria Trace <1 massiprotsent

Lahustijäägid – atsetoon Kromatograafia (GC – ülaosa (headspace))

Ei tuvastatud <0,1% massiprotsenti

Orgaaniline lahusti- sipelghape + äädikhape

HPLC 0,1 massiprotsenti

Anorgaaniliste ainete sisaldus- pallaadium ja raud

Induktiivselt sidestatud plasma- optiline emissioonspektromeetria

Pd = 5 ppm Fe = 5 ppm

Anorgaaniliste ainete sisaldus - vaba tina

Diferentsiaalimpulss- polarograafia

< 0,1% vaba tina

Anorgaaniliste ainete sisaldus - tina

Induktiivselt sidestatud plasma- optiline emissioonspektromeetria

144500 ppm

Anorgaaniliste ainete sisaldus- kloriid

Elementaaranalüüs 104100 ppm

34 EE – EP 2 079 472 B1

Tabel 4

Katse Meetod Tulemused

Üldine puhtus HPLC Lisandite üldsisaldus <1% a/a; lisand RRt 0,72 =0,06% a/a; mitte ükski teine lisand >0,05% a/a

Veesisaldus Karl Fischer, kulomeetria Trace <1 massiprotsent

Lahustijäägid – atsetoon Kromatograafia (GC – ülaosa (headspace))

Ei tuvastatud <0,1% massiprotsenti

Orgaaniline lahusti- sipelghape + äädikhape

HPLC Ei tuvastatud <0,1 massiprotsenti

Anorgaaniliste ainete sisaldus- pallaadium ja raud

Induktiivselt sidestatud plasma-optiline emissioonspektromeetria

Pd = 5 ppm Fe = 67 ppm

Anorgaaniliste ainete sisaldus - vaba tina

Diferentsiaalimpulss- polarograafia

< 0,1% vaba tina

Anorgaaniliste ainete sisaldus - tina

Induktiivselt sidestatud plasma- optiline emissioonspektromeetria

165000 ppm

Anorgaaniliste ainete sisaldus- kloriid

Elementaaranalüüs 103300 ppm

Näide 5

Ülipuhta stannsoporfiini stabiilsus

Ühendi pikaajalist stabiilsust uuriti kahtedel erinevatel hoiutingimustel: 25 °C (+/-22 °C) ja 5

suhteline niiskus 60% (+/-5%); ja 40 °C (+/-2 °C) ja suhteline niiskus 75% (+/-5%).

Ühendi primaarse pakendina kasutati 4 mil-list polüetüleenkotti ja sekundaarse pakendina

4 mil-list polüetüleenkotti. Kahte kotti pakendatud stannsoporfiini hoiti kõrgtihedas

polüetüleensilindris (CurTec®).

Tabelis 5 ja tabelis 6 on toodud tabelis 3 kirjeldatud partii stabiilsusega seotud andmed, 10

mis on registreeritud vastavalt tingimustel 25 °C/60% RH ja 40 °C/75% RH. Tabelis 7 ja 8

on toodud tabelis 4 kirjeldatud partii stabiilsusega seotud andmed, mis on registreeritud

vastavalt tingimustel 25 °C/60% RH ja 40 °C/75% RH. Nullkuu ajahetke andmed

pärinevad partii väljalaske analüüsist (null-ajahetk on kuupäev, millal proovid asetati

stabiilsuse testimiseks kasutatud katsekambrisse). Proove analüüsiti umbes 3 kuud ja 15

umbes 6 kuud pärast proovide asetamist hoiutingimustesse.

35 EE – EP 2 079 472 B1

Tabel 5

Katse 0 kuud 3 kuud 6 kuud

Välimus Punane pulber, milles puudusid silmaga nähtavad saasteained

Punane pulber, milles puudusid silmaga nähtavad saasteained

Punane pulber, milles puudusid silmaga nähtavad saasteained

HPLC puhtus (lisandite üldsisaldus)

0,3 0,22 0,24

HPLC puhtus (lisandite piik RRt retentsiooniaja 0,72-0,73 korral)

0.06% <0,05% 0,07%

HPLC analüüs (massiprotsentides, lahustivaba anhüdriidne basis

100,7% 99,6% 98,4%

HPLC analüüs (w/w ) 100,4% 99,6% 98,2%

Veesisaldus (Karl Fischer, kulomeetria)

< 1% <1% (0,1%) <1% (0,1%)

Tabel 6 5

Katse 0 kuud 3 kuud 6 kuud

Välimus Punane pulber, milles puudusid silmaga nähtavad saasteained

Punane pulber, milles puudusid silmaga nähtavad saasteained

Punane pulber, milles puudusid silmaga nähtavad saasteained

HPLC puhtus (lisandite üldsisaldus)

0,3 0,28 0,26

HPLC puhtus (lisandite piik RRt retentsiooniaja 0,72-0,73 korral)

0,06% <0,05% 0,06%

HPLC analüüs (massiprotsentides, lahustivaba anhüdriidne alus

100,7% 99,6% 98,4%

HPLC analüüs (w/w) 100,4% 101,2% 99,8%

Veesisaldus (Karl Fischer, kulomeetria)

Jäljed < 1% <1% (0,2%) <1% (0,1%)

36 EE – EP 2 079 472 B1

Tabel 7

Katse 0 kuud 3 kuud 6 kuud

Välimus Punane pulber, milles puudusid silmaga nähtavad saasteained

Punane pulber, milles puudusid silmaga nähtavad saasteained

Punane pulber, milles puudusid silmaga nähtavad saasteained

HPLC puhtus (lisandite üldsisaldus)

0,22 0,29 0,19

HPLC puhtus (lisandite piik RRt retentsiooniaja 0,72-0,73 korral)

0,06% <0,05% 0,05%

HPLC analüüs (massiprotsentides, lahustivaba anhüdriidne basis

102,3% 102,1% 98,5%

HPLC analüüs (w/w) 102,3% 102,0% 98,4%

Veesisaldus (Karl Fischer, kulomeetria)

Jäljed < 1% <1% (0,1%) <1% (0,1%)

Tabel 8

Katse 0 kuud 3 kuud 6 kuud

Välimus Punane pulber, milles puudusid silmaga nähtavad saasteained

Punane pulber, milles puudusid silmaga nähtavad saasteained

Punane pulber, milles puudusid silmaga nähtavad saasteained

HPLC puhtus (lisandite üldsisaldus)

0,22 0,29 0,24

HPLC puhtus (lisandite piik RRt retentsiooniaja 0,72-0,73 korral)

0,06% <0,05% 0,06%

HPLC analüüs (massiprotsentides, lahustivaba anhüdriidne basis

102,3% 101,1% 97,8%

HPLC analüüs (w/w) 102,3% 101,0% 97,7%

Veesisaldus (Karl Fischer, kulomeetria)

Jäljed < 1% <1% (0,1%) <1% (0,1%)

Kõigi publikatsioonide, patentide, patenditaotluste ja avaldatud patenditaotluste avalikusta-5

mised, millele viidatakse käesolevas patenditaotluses tsitaadina, kuuluvad viidetena tervik-

likult käesolevasse taotlusesse.

37 EE – EP 2 079 472 B1

Nõudluspunktile 1 vastava kompositsiooni ühe eelisteostuse korral sisaldab nimetatud

kompositsioon vähemalt umbes 100 g stannsoporfiini.

Nõudluspunktile 1 vastava kompositsiooni teise eelisteostuse korral on nimetatud kom-

positsiooni puhtusaste vähemalt umbes 99%;

kusjuures selles kompositsioonis oleva mis tahes eri lisandi sisaldus on eelistatavalt väik-5

sem kui umbes 0,09%;

kusjuures see kompositsioon sisaldab vähemalt umbes 100 g stannsoporfiini.

Nõudluspunktile 1 vastava kompositsiooni ühe eelisteostuse korral on nimetatud stannso-

porfiin ühe partiina valmistatud stannsoporfiin.

Nõudluspunktile 4 vastava meetodi ühe eelisteostuse korral viiakse etapis a) pallaadium 10

süsinikul umbes 8 kuni 16 tunniks kokkupuutesse vesiniku atmosfääriga rõhul umbes 30

kuni 50 psi ja temperatuuril umbes 45-50 °C.

Nõudluspunktile 3 vastava meetodi ühe eelisteostuse korral viiakse mesoporfüriin IX ja

tina (II) soola vaheline reaktsioon läbi ilma prootonite püüduriteta.

Nõudluspunktile 5 vastava meetodi ühe eelisteostuse korral koosneb hapnikku sisaldav 15

gaas umbes 6% hapnikust lämmastikus.

Nõudluspunktile 9 vastava meetodi ühe eelisteostuse korral on mesoporfüriin IX divesinik-

kloriid kergesti filtreeritav.

Nõudluspunktile 12 vastava meetodi ühe eelisteostuse korral valmistatakse tina (II) oksiidi

lahus või suspensioon äädikhappega. 20

Nõudluspunktile 12 vastava meetodi ühe eelisteostuse korral valmistatakse metalliseeri-

mata porfüriiniühendi või selle soola lahus või suspensioon sipelghappega.

Nõudluspunktile 12 vastava meetodi ühe eelisteostuse korral on metalliseerimata porfürii-

niühend mesoporfüriin IX divesinikkloriid või selle sool.

Nõudluspunktile 12 vastava meetodi ühe eelisteostuse korral on metalliseerimata porfürii-25

niühend mesoporfüriin IX divesinikkloriid.

Nõudluspunktile 15 vastava meetodi ühe eelisteostuse korral toimub tilkhaaval lisamine

38 EE – EP 2 079 472 B1

umbes 3 kuni 9 jooksul,

kusjuures tina (II) oksiidi lahust või suspensiooni hoitakse tilkhaaval lisamise ajal tempera-

tuuril umbes 60 kuni 65 ºC,

kusjuures eelistatavalt pärast metalliseerimata porfüriiniühendi või selle soola tilkhaaval

lisamist tina (II) oksiidi lahusele või suspensioonile hoitakse reaktsioonisegu veel umbes 5

18 kuni 24 tundi temperatuuril umbes 60 kuni 65 ºC.

Nõudluspunktile 12 vastava meetodi ühe eelisteostuse korral ei kasutata etapis, milles tina

(II) oksiidi lahus või suspensioon viiakse tingimustes, milles saab moodustuda tina (IV)

porfüriini ühend või selle sool, kokkupuutesse metalliseerimata porfüriiniühendi või selle

soolaga, prootonite püüdurit ega prootonite käsna. 10

39 EE – EP 2 079 472 B1

PATENDINÕUDLUS

1. Tina (IV) mesoporfüriini ühendi või selle soola valmistusmeetod, mis sisaldab järgmi-

si etappe:

a) valmistatakse mesoporfüriin IX divesinikkloriidi või selle soola lahus või suspen-

sioon, milleks 5

1) valmistatakse metalse hüdrogeenimise katalüsaatori vesiniku atmosfääri viimise

teel eelhüdrogeenitud katalüsaator, ja

2) viiakse hemiin kokkupuutesse eelhüdrogeenitud katalüsaatoriga ja hoitakse

hemiini ja katalüsaatorit ühe või mitme võimaliku ajavahemiku jooksul ühel või

mitmel võimalikul temperatuuril ja vesiniku rõhul, millest piisab hemiinist raua 10

eemaldamiseks ja hemiini vinüülrühmade redutseerimiseks etüülrühmadeks, mille

tulemusena moodustub mesoporfüriin IX;

3) isoleeritakse mesoporfüriin IX, mis on mesoporfüriin IX formaadi kujul;

4) puhastatakse isoleeritud mesoporfüriin IX formaat;

5) muundatakse puhastatud mesoporfüriin IX formaat mesoporfüriin IX divesinik-15

kloriidiks;

6) töödeldakse mesoporfüriin IX devesinikkloriidi kobediatomiidi ja aktiivsöega

ning lisatakse mesoporfüriin IX dikloriidile seejärel 0,1 kuni 6N HCl-i;

b) valmistatakse tina (II) oksiidi lahus või suspensioon, mille korral võib etapid (a) ja

(b) läbi viia mis tahes järjekorras või samaaegselt; 20

c) viiakse tina (II) oksiidi lahus või suspensioon kokkupuutesse mesoporfüriin IX

divesinikkloriidi või selle soolaga, lisades selleks tilkhaaval mesoporfüriin IX divesinik-

kloriidi või selle soola ja saades tulemusena tina (IV) mesoporfüriini ühendi või selle

soola; ja

d) puhastatakse tina (IV) mesoporfüriin IX dikloriid kuuma happega tritureerimise, 25

sellele järgneva kõrgel pH-väärtusel (pH väärtusel, mis on suurem või võrdne kui 9)

töötlemise ja sellele järgneva uuesti hapestamise ja sellele järgneva kuuma happega

tritureerimise teel.

40 EE – EP 2 079 472 B1

2. Nõudluspunktile 1 vastav meetod, mille korral valmistatakse tina (II) oksiidi lahus või

suspensioon ja metalliseerimata porfüriiniühendi või selle soola lahus või suspensioon

eraldi sipelghappe või äädikhappega.

3. Nõudluspunktile 1 vastav meetod, mille korral metalliseerimata porfüriiniühend

valitakse mesoporfüriinide, protoporfüriinide, hematoporfüriinide ja nende soolade seast. 5

4. Nõudluspunktile 1 vastav meetod, mille korral kasutatakse metalse hüdrogeenimise

katalüsaatorina pallaadiumit süsinikul.