だから見える細胞内の微細な変化！ 発光アッセイ発光法だから見える細胞内の微細な変化！ Seminar 発光テクノロジーに 関するセミナーも

発光法だから見える細胞内の微細な変化！

Seminar発光テクノロジーに 関するセミナーも 承ります！

RentaMAX発光検出装置のレンタルも！

アッセイ試薬 （小包装）

50% OFF &

レポーターベクター

30% OFF

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Relevant Data

発光アッセイスタートアッププロモーション

2014年5月19日～7月末日期間

ATPアッセイカスパーゼ 3/7, 8, 9アッセイ

レポーターアッセイ & ベクター（NanoLuc® /ホタル /ウミシイタケ）

H2O2（ROSマーカー）アッセイグルタチオン（還元型 /酸化型）アッセイNAD & NADP（還元型 /酸化型）アッセイ

増殖 & 毒性

シグナル伝達

酸化ストレス &エネルギー代謝

まずは少量で試したい！

測定装置が無い！

発光法について 1から教えて！

アッセイシステム

プロメガ株式会社

発光法は感度の高さ、シンプルな操作性、アプリケーションの増加により生体分子のアッセイには不可欠な手法になりました。プロメガは生物発光（ルシフェラーゼ反応）を利用した様々なアッセイシステムを開発し、基礎研究から応用研究まで幅広く利用されています。

発光酵素の改良● Ultra-Glo™ ルシフェラーゼ （組換えホタルルシフェラーゼ）遺伝子変異（分子進化工学）により作成された組換え型ホタルルシフェラーゼで標準的なホタルルシフェラーゼに比べ熱安定性に優れ、アッセイ試薬に最適な特性を有します。

低分子による阻害感受性が約 90％抑えれるため、偽陰性が少なくスクリーニングに最適です。

また、温度、界面活性剤などに耐性を有し、様々な条件下でも安定した結果が得られます。

アッセイ反応の改良● ATPase 阻害剤ATP測定反応に用いられる試薬には ATPase阻害剤が含まれており、細胞溶解時に ATPの減少を防ぐことができるため、より正確な ATP測定が可能です。

長時間発光 & 迅速性● 長時間発光（“Glo“タイプの発光）プロメガのテクノロジーにより発光継続時間と発光強度が最適化されており、マルチウェルのバッチ処理も可能になりました。また、発光シグナルは反応開始後、迅速に定常状態になるため、蛍光法のように蛍光産物の蓄積を待つ必要がありません。そのため、測定開始までのインキュベーション時間も蛍光より短くなり、操作時間を短縮することができます。

ネイティブルシフェラーゼとUltra-Glo™ ルシフェラーゼの 0.002% SDS に対する感受性の違い

100500 150 200 250 300

Activ

ity (%

RLU

)

Time (minutes)

No InhibitorInhibitor

0

20

40

60

80

100

120

3422

MA

05_1

A54

39M

A

0 50 100 150 200Time (minutes)

Rela

tive

Lum

ines

cenc

e (%

)

0.1

1.0

10.0

100.0Native LuciferaseEngineered Luciferase

高感度と広い ダイナミックレンジ● 発光法最大の利点（発光 vs 蛍光）発光法は蛍光法よりもバックグラウンドが低いため、少ない標的分子でも感度よく定量することができ、複雑な生体環境を有する培養細胞を用いたアッセイ系には最適です。特に存在量の少ない分子を測定する場合、発光法は有効な測定方法です。

プロメガのアッセイシステムは各種ルシフェラーゼの発光反応を利用しており、様々なアッセイ系に利用されています。

光子（

明る

さ）

感度差

10 100 1,000 10,000

1,000

100

10

1

0.1

発光法

蛍光法

検出限界（S/N>3)

発光法蛍光法

Sign

al/N

oise

比

細胞数 発光法と蛍光法の感度の違い

マルチアッセイで情報量を増やし、コストも低減！マルチアッセイは発光法と蛍光法を組み合わせることで、同一の細胞サンプルより複数の項目を測定することができます。データ量が増えるだけでなく、項目ごとに培養細胞を準備する必要が無いのでコスト削減にもつながります。マルチアッセイが可能なアッセイシステムの組み合わせについては弊社テクニカルサービス部（[email protected]）までお問合せください。

ATP

ATP

Caspase

細胞ベース発光アッセイシステム

ATP阻害剤添加による ATPの保護

増殖 & 毒性

● 冷蔵 / 室温保存 が可能な 1液タイプとして新登場！ （小分け &冷凍保存不要）

● 高感度なので 10個の細胞でも検出 可能 （384プレートの場合）

● 試薬を入れて 10分後 に測定開始

CellTiter-Glo® 2.0と従来品との安定性の比較

活性 /保存温度 CellTiter-Glo® 2.0 CellTiter-Glo®

＞ 85％活性 （22 ℃） 7日 12時間

＞ 95％活性 （4 ℃） 4週間 3.5日

CellTiter-Glo® 2.0 の感度と広いダイナミックレンジ

1181

5MA

r2 = 0.9999

r2 = 0.9993

00 5,000 15,00010,000 20,000

1,000,000

2,000,000

3,000,000

4,000,000

5,000,000

6,000,000

7,000,000

Lum

ines

cenc

e (R

LU)

Cells/Well

Lum

ines

cenc

e (R

LU)

Cells/Well

00 100 200 300 400 500

5,00010,00015,00020,00025,00030,00035,00040,00045,000

● 1種類の試薬を加えて 30分 待つだけ

● 20個のアポトーシス細胞を検出 可能 （384プレートの場合）

● 蛍光法とのマルチアッセイにも対応

Caspase-Glo® 3/7, 8, 9

CellTiter-Glo® 2.0

最も高感度で簡単なアポトーシス検出試薬

さらに使いやすくなった高感度細胞生存試験

細胞の生死

感度差

Caspase

究極の操作性プロメガの発光アッセイ試薬は培養細胞（培地を含む）に試薬を添加するだけなので、面倒な培地の除去や細胞の洗浄、アッセイプレートへの移し換えといった手間が一切なく、操作が非常に簡便です。そのため、自動分注装置を利用したハイスループットスクリーニングにも容易に対応します。

上記製品 お試しキャンペーン中！ 裏面へ

細胞ベース発光アッセイシステム

● 分子量が小さく （19 kDa） 、発光強度の高い （150 倍） 深海エビ由来ルシフェラーゼ

● 高感度レポーターアッセイ に加え、発光タグ、 融合タンパク質 として 利用可能

● レポーターベクター （ 分泌タイプも含む ）& 融合タンパク質 発現ベクターおよび アッセイ試薬 （Nano-Glo®）

● 発現レベルが強化された 最新のレポーター遺伝子 （ホタル : luc2、ウミシイタケ : hRluc）

● 余分な配列を除去し、 変則的な発現を大幅に低減

● 分解配列付加による 応答性の向上

● 各種 シグナル応答性ベクター をラインナップ

ROS-Glo™

GSH/GSSG-Glo™

NAD/NADH-Glo™ and NADP/NADPH-Glo™pGL4（Firefly and Renilla）Vectors

NanoLuc® Luciferase System比較的安定な活性酸素である H2O2と直接反応する

ルシフェリン基質を採用したアッセイ

グルタチオンの還元型をしっかり測定できるので 細胞内の酸化 / 還元状態を正確に評価できます

細胞内の NADおよび NADPの酸化型、 還元型を高感度に測定

スタンダード レポーターシステム： ホタル /ウミシイタケ ルシフェラーゼ

アドバンス レポーターシステム： Nano-Luc® ルシフェラーゼ

● 2種類の試薬を加えるだけ の簡便操作

● 2時間 で測定完了

● HRP酵素未使用 なので偽陽性もほとんどありません

● 細胞内の GSSGと総グルタチオンを測定するので 精度の高い GSH/GSSG比率 を取得可能

● 試薬を追加するだけの簡単なプロトコル （ 除タンパク質 / 遠心不要 ）

● 高感度 なので従来法より少ない細胞数で測定可能

● 細胞内の還元型と総 NAD（P）量を測定するので 精度の高い酸化型 / 還元型比率 を取得可能

● 1種類の試薬を 添加するだけ の簡単なプロトコル

● 広いダイナミックレンジ （10 nM ～ 400 nM）

1173

1MA

0

1 × 106

2 × 106

3 × 106

4 × 106

5 × 106

6 × 106

Lum

ines

cenc

e (R

LU)

0 50 100 150 200 250 300 350 400[Dinucleotide], nM

NADP+

NADPHNAD+

NADH

0 10 20 30 400 10 20 30 400

1 × 105

2 × 105

3 × 105

4 × 105

5 × 105

酸化ストレス & エネルギー代謝シグナル伝達

1058

7MA

103

104

105

106

NanoL

uc

Firefl

y

Renilla

Lum

ines

cenc

e (R

LU)

150-fold increasein specific activity

NanoLuc®、ホタル、ウミシイタケルシフェラーゼの発光強度の比較

NADP/NADPHの特異的な検出

H2O2

GSH

GSSG

NAD

NADH

NADP

測定試薬の添加培養細胞▶ ▶

細胞の転写応答

細胞の状態

アッセイ試薬 50%OFF

製品名 カタログ番号 サイズ 定価

（¥）特別価格 （¥）

増殖 & 毒性CellTiter-Glo® 2.0 Assay G9241 10 ml 14,000 7,000Caspase-Glo® 3/7 Assay G8090 2.5 ml 19,000 9,500Caspase-Glo® 8 Assay G8200 2.5 ml 19,000 9,500Caspase-Glo® 9 Assay G8210 2.5 ml 19,000 9,500酸化ストレス & エネルギー代謝ROS-Glo™ H2O2 Assay G8820 10 ml 64,000 32,000GSH/GSSG-Glo™ Assay V6611 10 ml 84,000 42,000NAD/NADH-Glo™ Assay G9071 10 ml 84,000 42,000NADP/NADPH-Glo™ Assay G9081 10 ml 84,000 42,000シグナル伝達Nano-Glo™ Luciferase Assay（NanoLuc™） N1110 10 ml 21,000 10,500※ 10 mlは 96ウェルプレートで 100ウェル分

レポーターベクター（pGL4 and pNL全て） 30%OFF※ 下記以外の pGL4ベクター、pNLベクターならびに選択ガイドについては

www.promega.co.jp/lumicamp.html をご覧ください （上記サイトに掲載される全てのベクターがキャンペーン対象品です）。

製品名 カタログ 番号 サイズ 定価

（¥）特別価格 （¥）

ホタルルシフェラーゼレポーターベクターシグナル伝達解析用pGL4.33 ［luc2P］ / SRE/Hygro Vector E1340 20 µg 68,000 47,600pGL4.34 ［luc2P］ / SRF-RE/Hygro Vector E1350 20 µg 68,000 47,600pGL4.36 ［luc2P］ / MMTV/Hygro Vector E1360 20 µg 68,000 47,600pGL4.35 ［luc2P］ / 9XGAL4UAS / Hygro Vector E1370 20 µg 68,000 47,600pGL4.37 ［luc2P / ARE / Hygro］ Vector E3641 20 µg 68,000 47,600pGL4.38 ［luc2P / p53 RE / Hygro］ Vector E3651 20 µg 68,000 47,600pGL4.39 ［luc2P / ATF6 RE / Hygro］ Vector E3661 20 µg 68,000 47,600pGL4.48 ［luc2P / SBE / Hygro］ Vector E3671 20 µg 68,000 47,600pGL4.41 ［luc2P / HSE / Hygro］ Vector E3751 20 µg 68,000 47,600

製品名 カタログ 番号 サイズ 定価

（¥）特別価格 （¥）

pGL4.42 ［luc2P / HRE / Hygro］ Vector E4001 20 µg 68,000 47,600pGL4.47 ［luc2P / SIE / Hygro］ Vector E4041 20 µg 68,000 47,600pGL4.44 ［luc2P / AP1 RE / Hygro］ Vector E4111 20 µg 68,000 47,600pGL4.43 ［luc2P / XRE / Hygro］ Vector E4121 20 µg 68,000 47,600pGL4.40 ［luc2P / MRE / Hygro］ Vector E4131 20 µg 68,000 47,600pGL4.45 ［luc2P / ISRE / Hygro］ Vector E4141 20 µg 68,000 47,600pGL4.49 ［luc2P / TCF-LEF RE / Hygro］ Vector E4611 20 µg 68,000 47,600pGL4.52 ［luc2P / STAT5RE / Hygro］ Vector E4651 20 µg 68,000 47,600pGL4.29 ［luc2P］ / CRE / Hygro Vector E8471 20 µg 68,000 47,600pGL4.30 ［luc2P］ / NFAT-RE / Hygro Vector E8481 20 µg 68,000 47,600pGL4.32 ［luc2P］ / NF-κ B-RE / Hygro Vector E8491 20 µg 68,000 47,600ウミシイタケルシフェラーゼレポーターベクター内部標準用pGL4.74 ［hRluc］ / TK Vector E6921 20 µg 68,000 47,600NanoLuc ™ ルシフェラーゼレポーターベクターシグナル伝達解析用pNL3.2.NF-κ B-RE ［NlucP / NF-κ B-RE / Hygro］ Vector N1111 20 µg 68,000 47,600

クローニング用pNL2.1 ［Nluc / Hygro］ Vector N1061 20 µg 68,000 47,600pNL2.2 ［NlucP / Hygro］ Vector N1071 20 µg 68,000 47,600pNL2.3 ［secNluc / Hygro］ Vector N1081 20 µg 68,000 47,600NanoLuc ™ ルシフェラーゼ融合タンパク質発現ベクター融合タンパク質作製用ベクターpFN31A Nluc CMV-Hygro Flexi® Vector N1311 20 µg 68,000 47,600pFN31K Nluc CMV-neo Flexi® Vector N1321 20 µg 68,000 47,600pFC32A Nluc CMV-Hygro Flexi® Vector N1331 20 µg 68,000 47,600pFC32K Nluc CMV-neo Flexi Vector N1341 20 µg 68,000 47,600pNLF1-N [CMV / Hygro] Vector N1351 20 µg 68,000 47,600pNLF1-C [CMV / Hygro] Vector N1361 20 µg 68,000 47,600pNLF1-secN [CMV / Hygro] Vector N1371 20 µg 68,000 47,600シグナル伝達解析用 融合タンパク質発現ベクター（タンパク質安定センサー）pNLF1-HIF1A [CMV / neo] Vector N1381 20 µg 68,000 47,600pNLF1-NRF2 [CMV / neo] Vector N1391 20 µg 68,000 47,600

RentaMAXコンサルティング & 貸出プログラム

発光測定したいけどルミノメーターが無い？マルチアッセイにも対応

• 簡便で高感度な発光アッセイを試してみたい方に• 発色法の細胞生存・毒性試験を行っている方に• 蛍光の酸化ストレスアッセイを行っている方に

www.promega.co.jp/rentamax/

生物発光を使ったアッセイ系の立ち上げをサポート

Seminar発光テクノロジーセミナー

ご要望により、発光法の基礎から アプリケーション、最新技術に関連する セミナーをオンサイトで行うことも可能です。

お問合せ先： テクニカルサービス部 [email protected]

アッセイ試薬 50%OFF レポーターベクター 30%OFF

※ 各製品 1研究室 1個のみとさせていただきます。

発光アッセイスタートアップ特別価格

テクニカルサービス ● Tel. 03-3669-7980／Fax. 03-3669-7982　● E-Mail : [email protected]

PK1405-02

販売店

日本語 Web site：www.promega.co.jp

プロメガ株式会社本　　　社　〒103-0011東京都中央区日本橋大伝馬町14-15 マツモトビルTel. 03-3669-7981／Fax. 03-3669-7982

大阪事務所　〒532-0011大阪市淀川区西中島6-8-8 花原第8ビル704号室Tel. 06-6390-7051／Fax. 06-6390-7052※製品の仕様、価格については2014年5月現在のものであり予告なしに変更することがあります。